Metodologia no Imunodiagnóstico Coleta, conservação e remessa do material. Interpretação dos...
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Metodologia no Imunodiagnóstico Coleta, conservação e remessa do material. Interpretação dos resultados.
Acurácia Concordância entre o resultado obtido e o “resultado real” Método de referência
Precisão Concordância entre várias repetições do teste. Reprodutibilidade/ Repetibilidade
Acurácia
Sem acurácia
Com precisão mas sem acurácia
Precisão e Acurácia
Pode um animal saudável ter um resultado anormal? Intervalo de
referência
SENSIBILIDADE A sensibilidade de um teste é definida pela
proporção de animais com a doença de interesse que têm o resultado do teste positivo. Indica quão bom é o teste para identificar os indivíduos doentes.Porcentagem de resultados positivos em pacientes com a doença
Uma sensbilidade de 95% significa que 95% dos pacientes com a doença serão identificados e que 5% dos pacientes terão um resultado “falso negativo”.
ESPECIFICIDADE A especificidade de um teste é a proporção
de animais sem a doença que tem o teste negativo. Indica quão bom é o teste para identificar os indivíduos não doentes
Porcentagem de resultados negativos em pacientes sem a doença.
Uma especificidade de 95% significa que…. falso positivo.
Sensibilidade e Especificidade
DoençaPresente Ausente Total
Teste
Pos AVerdadeiro positivo
BFalso positivo
a+b
Neg CFalso negativo
DVerdadeiro negativo
c+d
Total a+c b+d
Sensibilidade= A/ (A+C)
Especificidade= D/ (B+D)
Sensível Específico
Necessário para o diagnóstico de doença potencialmente grave
Particularmente necessário quando um resultado falso positivo pode ser muito lesivo
Afastar doenças em fase inicial do diagnóstico
Confirmar um diagnóstico sugerido por outros dados
Obs: os testes sensíveis também são úteis no rastreamento (screening)
Ponto de Corte (Cut-off) Normalmente, existe uma sobreposição parcial entre os
resultados obtidos em pacientes positivos e negativos em testes quantitativos.
A escolha do ponto de corte é essencial para definição da sensibilidade e especificidade
a) Se a principal preocupação é evitar resultado falso-positivo (o resultado do teste pode indicar um tratamento arriscado para o paciente), então o ponto de corte deve objetivar o máximo de especificidade.
b) Se a preocupação maior é evitar resultado falso-negativo (um doente fica sem tratamento), então o ponto de corte deve objetivar o máximo de sensibilidade.
Teste sem sobreposição
Teste com sobreposição
ELISA
Western blot
Bandas no Western blot indicam contra que proteínas existem anticorpos no soro testado
Partícula latexPartícula latex
Aglutinação Latex
Antígenos Antígenos
Anticorpos ligam ao antígeno adsorvido no látex
positive: agglutination
Imunocromatografiaou
teste de migração lateral
HIV Antigen
Control
AmostraAmostraDo soroDo soro Conjugado
Linha doLinha doCControle
Linha doLinha doTesteTeste
IgG anticorpos Antígeno conjugado a ouro coloidal
Anticorpo anti-IgGAntígeno
Princípio: migração lateral
•Amostra migra através da membrana e anticorpos (se presentes) ligam-se ao antígeno-conjugado formando uma banda visível
Leitura
Negativo (linha controle)
Positivo