Membranas/ Transporte e Sinalização Celular
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AULA 2: MEMBRANAS BIOLÓGICAS E SINALIZAÇÃO ATRAVÉS DE MEMBRANAS
Membranas/ Transporte e Sinalização Celular
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Alta solubilidade em solventes orgânicospraticamente insolúveis em água
Anfipáticos (anfifílicos)
Porção polar hidrofílica e porção apolar hidrofóbica
Características dos lipídeos
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Componentes de membranas
Isolante térmico
Reserva de energia
Vitaminas Hormônios
Constituintes dacadeia respiratória
Funções biológicas
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Triacilgliceróis (estoque)
GlicerofosfolípídiosEsfingolipídios
EsteróidesColesterol
Tipos de lipídeos: para estoque e de membranas
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Ácidos Graxos
Apolar
Saturado Insaturado
Polar
Dupla ligação em cis
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Fosfolipídeo
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Esfingolipídeo (esfingomielina)
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Propriedades físicas
Dependem das insaturações e do comprimento da cadeia de hidrocarboneto
Saturado Insaturado
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Temperatura de fusão
O ponto de fusão designa a temperatura nqa qual uma substância passa do estado sólido ao estado líquido.
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Agregados menos compactosmais instáveis
Cadeias flexíveis e distendidas (interações hidrofóbicas)
Temperatura de fusão: diminui com o número de insaturações e aumenta com o comprimento da cadeia.
Temperatura ambiente ácidos graxos saturados com mais de 14 carbonos são sólidos, possuíndo pelo menos uma dupla ligação são líquidos.
Grau de fluidez de membranas biológicas dependemda composição lipídica
Propriedades físicasSaturado Insaturado
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Nome Nº de Carbonos Ponto de Fusão
(°C)
Láurico 12 43,9
Mirístico 14 54,1
Palmítico 16 62,7
Esteárico 18 69,9
Araquídico 20 75,4
Pontos de Fusão de Ácidos Graxos Saturados
Pontos de Fusão de Ácidos Graxos Insaturados
Nome Nº de
Carbonos
Nº de Ligas
Duplas
Ponto de
Fusão (°C)
Palmitoléico 16 1 0,5
Oléico 18 1 13,4
Linoléico 18 2 -5,0
Linolênico 18 3 -10,0
Araquidônico 20 4 -49,5
( Blanco,A. Química Biológica,1991)
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Esteróides (colesterol)
Pouco polar Estrutura rígida influencia a fluidez das membranas
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Lipídeos anfipáticos se organizam em solução2
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Colesterol afeta a fluidez da membrana
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Membranas e paredes celulares
Célula animal Célula de planta
Diversos componentes celulares são separados pelasmembranas. Parede celular encontra-se somente nas células de planta, fungo e microorganismos como bactérias, algas etc.
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Os limites das células e de organelas são estabelecidos por membranas biológicas
Sistemas de transporte específicos mantém a permeabilidade seletiva
Estruturas dinâmicas formadas por lipídeos e proteínas
Membranas Biológicas
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-Limites fechados-contém carboidratos-proteínas específicas medeiam diferentes funções das membranas(bombas, canais, receptores, transdutores de energia, enzimas).-Montagens não covalentes-Assimétricas-Estruturas fluidas-Eletricamente polarizadas (lado interno negativo)
Membranas Biológicas
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https://www.youtube.com/watch?v=y59P4P5d9VA
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Membranas Biológicas
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Composição de lipídeos varia entremembranas de organismos diferentes
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Composição de lipídeos varia entre membranas da célula
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Modelo do mosaico fluido
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Modelo do mosaico fluido revisitado
Composição de lipídeos varia entre as faces de uma membrana
Membrane asymmetry
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Modelo do mosaico fluido revisitado
Membrane asymmetry
Proteínas e lipídeos específicos permitem a segregação de processos biológicos.
Lipid Rafts concentração de colesterol e de proteínas que interagem com colesterol.
Translocação de fosfolipídeos de uma face da membrana para a outra feita por flipases e scrambalases
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Mosaico fluido: movimento lateral das moléculas
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Movimento de “flip-flop” não é espontâneo
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ApoptoseApoptosis Greek"falling off“
Programmed cell death
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Non-bilayer membranes
Gap junctions
Modelo do mosaico fluido revisitado
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Modelo do mosaico fluido revisitado
Membrane curvature
Bar domain containing proteins
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Cytoskeletal fences
Modelo do mosaico fluido revisitado
Septins are involved in the formation of structures such as, cilia and flagella, dendritic spines, and yeast buds
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Adaptação ao meio
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Proteínas de membranas
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Proteínas de membranas
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Proteínas periféricas – ancoradas na membrana
• No lado externo damembrana plasmática sãoencontradas as proteínasancoradas com grupo glicosil-fosfatidilinositol
No lado interno da membrana plasmática são encontradasas proteínas ancoradas com ácidos palmítico e mirístico ecom grupos farnesyl ou geranygeranyl
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• Alfa-hélices hidrofóbicas ou anfipáticas
Proteínas integrais de membrana
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• Barris
Proteínas integrais de membrana
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• Citoesqueleto limita movimento dos lipídeos e proteínas
Membrana podem ter regiões mais ou menos definidas
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• “Rafts” (jangadas)concentram lipídeosde cadeias mais longas
• Maior concentração de lipoproteínas
• Facilita interação entre proteínas de vias de sinalização
Membranas podem ter regiões mais ou menos definidas
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Fusão de membranas (endocitose e exocitose)
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Fusão de membranas
• Mediada por proteínas• SNARES (soluble NSF
attachment receptor)
– neurotransmissão– funcionam como
“zíperes”– inibidas por toxina
botulínica
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Receptor de transferrina
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Transporte
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TRANSPORTE DE GLICOSE
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Tipos de transportadores
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Movimento através de uma membrana permeável
Concentração Carga
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Transportadores e Canais
Transportadores
-Saturáveis-Baixa velocidade de transporte-Maioria proteínas monoméricas
Canais
-Mais rápidos-Insaturáveis -Maioria proteínas oligoméricas
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Transporte Uniporte
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O bicarbonato é mais solúvel no plasma do que o CO2
Trocador de cloreto-bicarbonato(trocador aniônico)
Co-transportador antiporte
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Transporte ativo resulta no acúmulo do soluto acima doponto de equilíbrio termodinamicamente não
é favorável e deve ser acoplado a um processo exergônico
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• Na+/K+-ATPaseexporta 3 íons de Na+ e importa 2 K+ por ciclo
• O transporte ativo é acoplado com a hidrolise de 1 ATP
• A atividade resulta em uma carga negativa por um ciclo de trabalho.
Na+/K+-ATPase
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ATPase de cálcio
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Digitalis
Digitalina (insuficiência cardíaca)
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Transportadores ABCATP-binding cassette transporters(MDR) Conferem resistência a drogas
ABC transporters utilize the energy of ATP binding and hydrolysis to transport various substrates across cellular membranes.
In prokaryotes, importers mediate the uptake of nutrients into the cell.
Eukaryotes do not possess any importers. Exporters or effluxers, which are present both in prokaryotes and eukaryotes, function as pumps that extrude toxins and drugs out of the cell.
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Transportadores ABC
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Transportador de lactose movido por um gradiente de H+
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Aquaporina Transportador de água
•Mutations in the aquaporin-2 gene cause hereditarynephrogenic diabetes insipidus in humans.
•Mice homozygous for inactivating mutations in the aquaporin-0 gene develop congenital cataracts.
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Canais iônicos-Movimentam íons inorgânicos.-Junto com os trocadores regulam a concentraçãocitoplasmática de íons e o potencial de membrana.
-Em neurónios mudanças rápidas nos canais iônicos causam mudanças em potenciais de membrana (potencial de ação), que transmitem sinais no neurônio.
-Em miócitos a abertura de canais de cálcio no retículo sarcoplasmático libera o cálcio que ativa acontração muscular.
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Canais iônicosCanais iônicos diferem de transportadores de íons:- Velocidade do fluxo de íons é maior nos canais.- Canais não são saturáveis.-”gated” controlados por algum estímulo.
Controlados por ligantes (geralmente oligoméricos).- Mudança conformacional do canal que abre ou fecha com umligante.
Controlados por voltagem- Mudança no potencial transmembranar causa o movimento de uma proteína com carga relativo à membrana causando aabertura ou fechamento do canal
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”Gated Ion Channels”
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Superfamilies of Ligand-Gated Ion Channels
Kandel, Schwartz & Jessel, Principles of Neural Science 4th Ed. (2000)
Cys-Loop Receptors
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Estímulos por Canais Iônicos
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Fases da transmissão sinápticaI. Síntese do neurotransmissor na terminação nervosa pré-sináptica.
II. Armazenamento dos neurotransmissores em vesículas secretoras.
III. Liberação regulada do neurotransmissor (exocitose)na fenda sináptica.
IV. Receptores específicos para os neurotransmissores estãopresentes na membrana pós-sináptica.
V. Controle da ação do neurotransmissor na fenda e noreceptor pós-sináptico.
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Sinapse neuromuscular (placa motora)
I. Despolarização e abertura de canais de cálcio com a liberação de cálcio para a membrana pré=sináptica.
II. Alta concentração de cálcio desencadeia a exocitose deVesículas sinápticas que liberam acetilcolina.]
III. A acetilcolina liberada por exocitose atua sobre os receptores da membrana pós-sináptica, promovendo a contração da fibra muscular.
IV. A acetilcolina é inativada pela acetilcolinesterase.
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Método de medir os potenciais da membrana – patch clamp
Erwin Neher
Bert Sakmann
for their discoveries concerning the
function of single ion channels in cells"
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Método para Medir o Potencial de Repouso
+++++++++++++++++++++++++
--------------------------------------------
--------------------------------------------
+++++++++++++++++++++++++
Neurônio
Axônio
Amplificador
Oscilóscopio
-70mV
Dois eletrodos, inseridos no axônio de um neurônio em repouso, detectam a pequena diferença de potencial, entre os meios extra e intracelular, esse sinal é amplificado e mostrado num osciloscópio.
Meio extracelular
Meio intracelular
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Em repouso
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Um potencial de ação é uma inversão do potencial de membrana que percorre a membrana de uma célula. Potenciais de ação transportam rapidamente informações entre e dentro dos tecidos.
Utilizados mais intensamente pelo sistema nervoso, para comunicação entre neurônios e para transmitir informação dos neurônios para outro tecido do organismo, como os músculos ou as glândulas.
Potencial de ação
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https://m.youtube.com/watch?v=fHRC8SlLcH0
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Receptores de fatores de crescimento
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Receptores acoplados a proteína G
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http://www.latimes.com/92360583-132.html