Meli+Papaer+Histo

7/22/2019 Meli+Papaer+Histo

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Nombre : Melissa Coello

Los colorantes, tintes, y sondas especiales en la histologa

Resumen

La tincin de secciones de tejido fue muy influenciado por la qumica del colorante de anilina.PEHRLICH fue uno de los primeros en estudiar sistemticamente los colorantes sintticos y la

introduccin de mtodos cientficos en el campo de la tincin histolgica .La anilina es una

amina aromtica que consiste en un anillo de benceno y un grupo amino. Fue qumicamente

preparada por primera vez por destilacin de ndigo por O Unverdorben que lo nombr

"Crystallin". En 1834, tambin se obtiene a partir de alquitrn de hulla por , una sustancia que

da un color azul en el tratamiento con calcio hipoclorito. El trmino "anilina" fue dado ms

tarde por J FRITSCHE por experimentacin con ndigo. La anilina es un compuesto obtenido de

exprimir la planta indigo llamada indigoferanil a la cual debe su nombre. Este compuesto haba

sido aislado de la misma manera y lo llamaron cristalina. La diversas preparaciones "anilina"

de alquitrn de hulla y los colorantes derivados fueron posteriormente investigados , y todos

ellos demostraron finalmente ser idnticos: fenilamina, aminobenceno.

La anilina es todava una importante sustancia qumica precursora del colorante .Un punto

crucial en el desarrollo de la qumica colorante fue la preparacin de indol apartir de indigo y

de ndigo sinttico por cloracin y la consiguiente reduccin de isatina .

Desarrollo

La primera sntesis de indigo no llego hasta que isatin1 fuera producido por el cido

fenilacetico . Con la introduccin de cido cinmico, una nueva forma sinttica result an ms

til en la produccin de ndigo, cido cinmico era igualmente adecuado para la sntesis de

isatina e indol . Por ltimo, la decodificacin de la frmula ndigo se logr cuando el ndigo se

sintetiz por 2 - nitrobenzaldehdo y, por lo tanto, la estructura de ndigo era obtenido sin

duda . Ms tarde, otras rutas sintticas fueron estudiados . (Tan OT, 1986)


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Analina Indigofera tinctoria

El uso del tinte industrial anilina creci rpidamente , empezaron a fabricar mauveine , un

colorante del grupo fenazina pantentado en 1856 por WH PERKIN

La primera produccin artificial de un colorante natural era alizarina, producido por CGRAEBE y

C LIEBERMANN . Se dieron cuenta de que la alizarina era un derivado de antraceno que se

obtiene del alquitrn de hulla. Industrialmente, colorantes de antraquinona se derivan de

antraceno que es un compuesto de aceite de antraceno, una fraccin de alquitrn de hulla. La

sntesis de colorantes de indantreno es basado en la fusin de las molculas de 2-amino

antraquinona en lcali.

De las muchas clases diferentes de colorantes, tintes azoicos forman el grupo ms grande y

ms importante de los colorantes orgnicos sintticos. La estructura de los colorantes azoicos

se basa en azobenceno e incluye el grupo funcional diazo (RN = N-R '), donde el grupo N = N es

el grupo azo entre dos anillos aromticos. Lyon, H. O et col.

La Sntesis de colorantes sigue las reacciones diazotacin y acoplamiento. El mecanismo de

reaccin consiste en dos pasos. En el primer paso, diazotacin de las aminas aromaticas

primarias esto se realiza para formar sales de diazonio , llamado componente diazo.

Debido a que las sales de diazonio alifticos son muy inestables, se prefieren los compuestos

de diazonio aromticos. En un segundo paso, el acoplamiento azo se realiza con el

componente de acoplamiento: el acoplador lleva un tomo de carbono rico en electrones al

que el diazo componente se unir para cerrar la brecha entre las dos molculas con un nuevo

grupo azo (-N = N-). (watson, 1995)

La naturaleza de los sustituyentes aromticos en ambos lados del grupo azo, as como la

solubilidad en agua de los colorantes determinan los colores de los compuestos azo . La

mayora de los colorantes azoicos son de color rojo, naranja o amarillo. El desarrollo de azo y

antraquinona colorantes completan la gama de colorantes sintticos .

Especmenes histolgicos se preparan como es usual en la histopatologa de rutina que incluye

la preservacin y la inclusin. Antes de la tincin, las secciones se cortaron con un microtomo.

En ciertos casos, las secciones de criostato o preparaciones de celodoina son necesarias.Adems, se pueden utilizar los frotis de clulas a partir de suspensiones.


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Las tinciones se aplican para hacer que la estructura celular sea ms fcil de visualizar que en

los especmenes no teidos y, bajo ciertas condiciones, pueden revelar compuestos

moleculares y las diferencias asociadas con la evolucin o condiciones patolgicas. Por lo

tanto, las manchas en general estn dirigidos como sondas especiales que poseen

especificidad variable en funcin de la selectividad con la que se reacciona. Comparable a la

biologa molecular, la sonda trmino puede ser usado para definir un reactivo que sea

adecuado para detectar o medir la presencia de una molcula particular. El trmino la sonda

se puede aplicar a todas las coloraciones, an ms especialmente en los casos en que

reacciones con reactivos altamente especficos se llevan a cabo tales como anticuerpos,

secuencias de nucletidos u otras de molculas de unin de alta afinidad.

Antiguas y clsicas tinciones histolgicas todava mantienen su importancia en la histologa,

algunas de ellos son incluso indispensables, incluso si la mayora de ellos carecen de

especificidad estrictamente definida. (David B. Apfelberg, 1979)

Junto con las sondas moleculares de alta especificidad molecular descrita a continuacin , queconstituyen una valiosa repertorio de histlogo por sus estudios microscpicos. Hay cientos de

tinciones histolgicas de las cuales se describen algunos de los mtodos comunes en la

siguiente tabla.

Diferentes tipos de tinciones

Fig. 1. Alcian Blue

Fig. 2. Van Gieson

Fig. 3. Hematoxilina-eosina


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Fig. 4. Hale

Fig. 5. PAS


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Tabla 1 (wolf d. kuhlmann, 2010)


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La interaccin de los tintes con los tejidos

Los colorantes se obtienen ya sea a partir de fuentes naturales o de produccin sinttica con

la introduccin de los colorantes de anilina, a partir de medidados del siglo 19, colorantesnaturales tienen casi perdido su papel en la histologa con la excepcin de hematoxilina de los

rboles Logwood que todava sigue siendo de gran importancia en la histopatologa de rutina.

PEHRLICH fue uno de los primeros en estudiar sistemticamente los tintes de anilina y para

introducir mtodos cientficos en el campo de la tincin histolgico. Entonces, DE Grbler

Verzeichnis der Farbstoffe (1880) y el Farbstofftabellen dio las primeras descripciones de los

colorantes naturales y sintticos existentes.

Colour index fue publicado como gua de referencia para la manufacturas y consumidores de la

sociedad amerciana de qumicos y coloristas textiles . Los Colorantes se enumeran de acuerdo

al ndice de color para Nombres Genricos y Nmeros de acuerdo a la constitucin ColourIndex. Para cada nombre del producto, ndice de Color Internacional enumera el fabricante, la

forma fsica, y el uso principal .

Tincin histolgica se basan en principios qumicos y fsicos relacionados con las siguientes

reacciones:

- Reacciones electrostticas: sustancias de tinte estn compuestas de cromforos azo y los

grupos auxochrome , y las ltimas propiedades definen el colorante como un colorante cido o

un colorante bsico;

- Impregnacin del metal: la capacidad intrnseca de ciertas estructuras celulares paraprecipitar cantidades de iones metlicos submicroscpicas (iones de plata) que son

desarrollada por un proceso de reduccin, o la impregnacin de componentes metal en la

clulas en una denominada reaccin de argentaffine despus de pretratamientos oxidantes;

- Coloraciones selectivos debido a la solubilidad de los colorantes: tincin con Sudn grasa,

aceite de color rojo y otros colorantes de grasa que se basan en las diferencias de solubilidad

del colorante dentro de los dos medios de comunicacin, es decir, la difusin de la solucin de

tinte alcohlico en la grasa de las muestras;

- Reacciones citoqumicas: la aplicacin de las reacciones qumicas definidas, las reacciones de

enzima-substrato para peroxidasas, fosfatasas, etc, o tincin selectiva de molculas del tejido

despus de su modificacin qumica;

- Sondas de ligando especificas: la selectividad de la tincin celular se define por sonda

molecular aplicada y su especificidad hacia molculas celulares con las cuales reaccionan,

anticuerpos, lectinas, nucletidos.

Las protenas se comportan como molculas anfteros, es decir, que poseen grupos tanto

cidos como bsicos que contribuyen a acidofilia o basofilia. La interaccin protena-colorante

se debe principalmente a la carga neta. En el punto isoelctrico (pI) la carga neta esdespreciable y la unin de cargado de los colorantes ser mnima. Entonces, a continuacin en


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el pI, las protenas se unen a colorantes cidos (colorantes aninicos) y por encima de pl, las

protenas se unen a los colorantes bsicos (colorantes catinicos). A pH fisiolgico, las

protenas pueden presentar carga neta positiva o negativa . Por lo tanto, su comportamiento

es acidfilo con afinidad por los colorantes cidos o basfilo con afinidad por los colorantes

bsicos.

Muchas tinciones qumicas de tinte son producidas debido a la formacin de uniones salinas

entre tinte y sustancia celular. Todo el mecanismo es sin duda ms complejo y a menudo no es

totalmente entendido. La formacin de vinculacin sal significa que un colorante cido

(colorante aninico), tales como eosina se unir un grupo bsico (de carga positiva) de la

protena (= sustancia acidfilo). Por otra parte, un colorante bsico (colorante catinico), tales

como azul de metileno se unir un grupo cido (cargado negativamente) de la protena (=

sustancia basfila).

Tinciones histolgicas especiales

Sobre la base de colorantes bsicos y cidos, un nmero de tintes con ortocromtica,

policromtica y colores metacromtica se han experimentado con el propsito de distinguir

ciertos elementos de preparaciones histolgicas. Por ejemplo, una de los primeros colorantes

aplicados con xito de combinacin era una mezcla de colorantes cidos y bsicos para que se

coloree parsitos en frotis de sangre. l utiliz el azul de metileno y eosina simultneamente.

El aspecto mas interesante de esta mezcla fue la observacin de que el combinado tena

propiedades que eran diferentes de los tintes usados solos. Tales mezclas de colorantes se

han refinado an ms y ahora se conoce como WRIGHT, Giemsa o tintes de May-Grnwald.

Ellos pueden estar caracterizados como eosina de metileno derivados azules o de azul de

metileno. Hoy en da, la aplicacin simultnea de tales cidos y mezclas de colorantes bsicosse conocen como Tinciones modificadas de Romanowsky . (H. O. Lyon, 1994)

El mecanismo de tincin verdadera de los tintes de Romanowsky es an desconocido. Al

menos tres procesos fundamentales se han dilucidado, brevemente.

- Orthochromasia: tincin con rosa de eosina (componente colorante cido) y tincin con azul

de metileno (componente bsico tinte),

- Policromasia: tincin en capas con ambos colorantes,

- Metacromasia: cambio de color del colorante bsico de azul a violeta / prpura debido a la

alta concentracin de polianiones (sustancias muy cidas) en la muestra de color.

Bibliografa1.David B. Apfelberg, M. F. (1979). Histology of port wine stains following argon laser

treatment.jprs, 232-237.

2.H. O. Lyon, A. P. (1994). Standardization of reagents and methods used in cytological and

histological practice with emphasis on dyes, stains and chromogenic reagents. Kluwer

Academic Publishers.


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3.Tan OT, C. J. (1986). Histologic responses of port-wine stains treated by argon, carbon

dioxide, and tunable dye lasers. A preliminary report. europa pub med central.

4.watson, w. (1995). Fluorescent and Luminescent Probes for Biological Activity. san diego .

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