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Manual de Manejo de la Posta de Sementales ©2013 PIC Todos los Derechos Reservados.

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Manual de Manejo de la Postade Sementales

©2013 PIC Todos los Derechos Reservados.

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Manual PIC de Manejo de la Posta de Sementales

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Nunca Paramos de Mejorar

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Tabla de Contenido

Tabla de Contenido

Lista de Figuras, Fotos, y Cuadros......................................................................................................2Introducción…………………………………………………………………………....................................3Parte 1. Anatomía y Fisiología General………………………………………….....................................5Parte 2. Cuarentena y Aclimatación…………………………………………………................................8Parte 3. Manejo General de los Sementales…………………………………......................................11Parte 4. Manejo del Área de Sementales.………………………………………...................................12Parte 5. Ventilación y Flujo de Aire……………………………………………………............................14Parte 6. Condición Corporal……………………………………………………………...........................18Parte 7. Alimentación y Nutrición…………………………………………………..................................19Parte 8. Entrenamiento………………………………………………………………………....................21 Entrenamiento para Colección Manual............................................................……………..21 Entrenamiento usando un Sistema de Colección Automatizado..........................................22Parte 9. Colección del Semental………………………………………………………............................23Parte 10. Bienestar Animal y Salud…………………………………………………...............................25 Temperatura Corporal y Apetito…………............................................................................25 Pruebas de Diagnóstico.....................................................................................................25 Criterio para el cierre de la Posta……................................................................................26 Manejo y Eutanasia............................................................................................................26 Transporte de Sementales.................................................................................................27Parte 11. Gestión del Laboratorio…………………………………………………..................................28 Calidad del Agua..................................................................................................................29 Llegada del Semen...............................................................................................................30 Evaluación de Semen...........................................................................................................30 Determinación de la Concentración.....................................................................................31 Dilución del Semen...............................................................................................................32 Envasado de las Dosis de Semen……………………...........................................................32 Enfriamiento del Semen y Empaque de Dosis Enfriadas.....................................................33 Envío y Transporte del Semen.............................................................................................33Parte 12. Control de Calidad……………………………………………………………..........................34Parte 13. Manejo y Entrenamiento del Personal...............................................................................39Parte 14. Indicadores Clave de Desempeño………………………………………………....................40Parte 15. Benchmarking de Producción ………………………………………....................................41Parte 16. Vida Útil del Semental y Tasa de Reemplazo………………………………….....................44Referencias……………………………………………………………….................................................45Colaboradores…………………………………………………………………………..............................46Apéndice A. Requerimientos de Nutrientes para Cerdos …...………………………………………….47Apéndice B. Especificaciones Mínimas en la Dieta PIC y Ejemplo de Dieta para Sementales….....48Apéndice C. Sistemas automatizados de colección, Instrucciones paso a paso para su uso..........49Apéndice D. Empaque de Dosis de Semen para Envío Usando Doble Hielera…............................52Apéndice E. Guía de Preparación del Diluyente ………………………………………........................55Apéndice F. Preparación de la Muestra de Agua para Análisis por Terceras Partes…………...........56

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List

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Fig

uras

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Cua

dros

Lista de Figuras, Fotos y Cuadros

Figura 1. Esquema de la Producción de Hormonas y Regulación de la Producción de Semen............................5Cuadro 1. Proceso de Maduración del Semental………………………..…….................……………………............6Foto 1. Flujo de Producción Espermática……….……………….........................................................………..........6Foto 2. Órganos Reproductivos del Verraco….……………………………………....................……………….......…7Cuadro 2. Factores de Manejo que Impactan la Calidad del Semen……………………………….......................13Cuadro 3. Variables Ambientales del Edificio y Recomendaciones de Condiciones Optimas…………..............14Figura 2. Velocidad Variable del Ventilador y su Relación con CFM………..…………………….....………...........16Cuadro 4. Estimación de CFM Dependiendo del Tamaño del Ventilador……………………................................16Foto 3. Condición Corporal Delgada.....................................................................................................................18Foto 4. Condición Corporal Normal...........................................................................................…..........…….......18Foto 5. Condición Corporal Obesa.......................................................................................................................18Cuadro 5. Impacto de Micotoxinas en Alimento sobre el Desempeño del Semental…...................………..........20Cuadro 6. Intervalo de Colección por Edad del Semental en Líneas Genéticas Terminales……………..............24Cuadro 7. Recomendaciones de Densidades Basadas en Peso, Temperatura y Distancia a Viajar…................27Figura 3. Flujo del Laboratorio…………………………………………………...................……………………..........28Cuadro 8. Parámetros para Calidad del Agua y sus Especificaciones…..………………............…………...........29Cuadro 9. Tipos de Contaminación Microbiológica………………………………..................…………………........29Cuadro 10. Especificaciones de la Calidad del Agua para Laboratorio………………………...........………..........30Cuadro 11. Criterio de Aceptación de la Calidad del Semen………………………....................……………..........31Cuadro 12. Directrices del Fabricante para la Preparación de Muestras para Revisiones de la Motilidad..........34Cuadro 13. Ejemplo de Sistema de Registro del Diluyente ………………………….....................………….........34Foto 6. Ejemplo de Suavizador de Agua…...........................................................................................................36Foto 7. Medidor de Agua de Osmosis Inversa......................................................................................................36Foto 8. Tanques de Desionizacion para Sistemas de Agua..................................................................................37Foto 9. Sistema Micron...................................................................................................................…...................37Foto 10. Ejemplo de Lámpara UV.........................................................................................................................37Cuadro 14. Medida de Control de Calidad y Frecuencia de Medición……………….......………………….......….38Cuadro 15. Indicadores Clave de Desempeño para Centros de Sementales………………………………...........40Figura 4. Células Viables por Eyaculado por Línea Genética por Semana de Producción..................................41Cuadro 16. Células Viables por Eyaculado por Línea Genética Promediado por 5 Semanas de Producción…..42Figura 5. Promedio de dosis por Colección, por Edad y Línea Genética, asumiendo Dosis de 2500 millones de Células Espermáticas Viables y un Promedio de 1.2 Colecciones por Semana por la Vida del Útil del Semental....................................................................................................................................42Cuadro 17. Resumen del Promedio de Dosis por Colección, por Edad y Línea Genética.................……….......43Figura 6. Realización del Semental Terminal.......................................................................................................43

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Bienvenido a la última versión del Manual de Manejo de Centro de Sementales. Esperamos que lo encuentre útil para su operación. Ahora más que antes, los studs de sementales deben estar a la vanguardia en la incorporación de nuevas tecnologías que ayuden a producir dosis de semen de la más alta calidad, mediante evaluaciones consistentes y precisas, mientras aseguramos la salud y bienestar de los sementales. Lo que hacemos en la posta de sementales es vital para alcanzar las metas de producción y mantener nuestra ventaja competitiva global en el futuro.

Creemos que la información incluida en el manual será muy útil para enseñar a los nuevos empleados, así como desafiante para el personal experimentado, reevaluando el área de sementales y los procesos del laboratorio. La producción de semen es revisada así como los manejos área de machos y el laboratorio, en el orden de mejorar la calidad del semen y producción del centro.

PIC se compromete a hacer mejoramientos en los procesos de los centros de sementales ya funcionando. Además, somos impacientes en la búsqueda de nuevos conocimientos que garanticen que los productores sigan siendo competitivos a nivel mundial.

Introducción

Introducción

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Parte 1: Anatom

ía y Fisiología General

El cerebro produce las hormonas GnRH (hormona liberadora de gonadotropina), LH (hormona luteinizante) y FSH (hormona folículo estimulante), las cuales trabajan en conjunto para promover y regular la producción de testosterona (T) y, por último, el desarrollo de las células espermáticas y la conducta del macho (Figura 1). Estos procesos tienen que ocurrir para que la reproducción sea posible.

Parte 1: Anatomía y Fisiología General

El proceso de desarrollo testicular y el desarrollo de células espermáticas del semental comienza tempranamente durante la etapa fetal con una conducta reproductiva que parte desde el primer mes y tiene un incremento en la producción de semen a los 6 meses (Cuadro 1).

Figura 1ESqUEMA DE LA PRODUCCIÓN DE HORMONAS y

REGULACIÓN DE LA PRODUCCIÓN DE SEMEN

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Proceso de Maduración del SementalEdad

Feto (día 20 – 40 gestación)

Feto (día 60 gestación)

1 – 2 meses

3 meses

4 meses

5 ½ meses

6 – 18 meses

Proceso de MaduraciónDivisión de células germinales y diferenciación

Descenso testicular desde el abdomen hasta el escroto

Muestra comportamiento de monta

2da división de las células germinales y aumento de los testículos

en relación al peso corporal

Espermatozoides aparecen en túbulos seminíferos y pueden ocurrir erecciones

Inicio de la pubertad con presencia de espermatozoides en el eyaculado

Aumenta tamaño de testículos, concentración de semen y volumen de eyaculado

Los testículos son responsables de la producción de espermatozoides y testosterona. Los espermatozoides son producidos y llevados hacia el centro de cada testículo o mediastino (área blanca) y luego continúan hacia la cabeza del epidídimo (Foto 1). Un semental sexualmente maduro es capaz de producir 16 x 109 espermatozoides por día desde ambos testículos (Senger, 2005). • La producción espermática, o espermatogénesis, es un proceso altamente complejo que ocurre en compartimentos especializados en los testículos llamados túbulos seminíferos. En cualquier momento, habrá células espermáticas en diferentes etapas de desarrollo para permitir una continua producción espermática. El proceso de espermatogénesis toma en promedio 39 días en un semental (Senger, 2005).

TP= Parénquima testicular, EH= Cabeza del epidídimo ET= Cola del epidídimo, M= Mediastino

(Senger, 2005)

Foto 1. Flujo de Producción Espermática

Part

e 1:

Ana

tom

ía y

Fis

iolo

gía

Gen

eral

Cuadro 1

(Knox, 2003)

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El epidídimo se compone de tres secciones incluyendo la cabeza, cuerpo y cola. Cada sección juega un papel en el almacenamiento de los espermatozoides, en su sustento y en la finalización del proceso de maduración (9-14 días). Las células espermáticas deben transitar a través del epidídimo para adquirir el potencial para la fertilización. Sin el epidídimo, la reproducción del semental no sería posible.

Las glándulas sexuales accesorias incluyen la glándula prostática, glándulas vesiculares, y glándulas bulbos uretrales y son importantes para la adición de plasma seminal a las células espermáticas. La función de la glándula prostática es remover la orina y las bacterias del tracto reproductivo antes de que el espermatozoide entre en la uretra. Las glándulas vesiculares producen secreciones viscosas y lechosas en apariencia y componen la mayor parte del volumen del eyaculado. Por último, las glándulas bulbos uretrales producen la fracción de gel del eyaculado y son grandes y densas en el semental (Knox, 2003; Senger, 2005).

El pene está dividido en tres secciones; incluyendo la base, pene y glande del pene. El glande contiene nervios sensoriales y es responsable del inicio de la eyaculación. La forma del glande es similar a un sacacorchos, lo que es único en el semental (Senger, 2005).

Foto 2. Órganos Reproductivos del Verraco

(Senger, 2005)

Parte 1: Anatom

ía y Fisiología General

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Part

e 2:

Cua

rent

ena

y A

clim

atac

ión

Parte 2: Cuarentena y Aclimatación

Típicamente, los sementales entran en cuarentena a los 6 meses de edad y permanecen ahí entre 4 a 8 semanas. Este periodo de tiempo debe ser usado para evaluar posibles enfermedades importantes y para establecer protocolos de vacunación. Dependiendo del número de vacunaciones, éstas deben ser espaciadas durante el periodo de cuarentena para distribuir el estrés asociado con las vacunas.

Las instalaciones de la cuarentena y su ubicación dependen de la densidad de cerdos que hay en la región. Normalmente, una distancia de 2.4 - 3.2 km (1.5 – 2.0 millas) al stud es preferida, pero en un área más densa de cerdos es mejor tener la cuarentena más cerca del stud, pudiendo estar conectados ambos sectores por un pasillo cerrado. La entrada al centro debe ser cerrada durante el periodo de cuarentena hasta que se tengan los resultados del diagnóstico de los sementales que están cuarentenados. Con el desarrollo e implementación de filtros de aire en la granja, se deben tomar medidas para reducir la posibilidad de diseminar una enfermedad hacia el centro de sementales. Si el centro tiene filtros para prevenir la entrada de alguna enfermedad, la cuarentena deberá tener filtros también. Si el centro no tiene filtros debido a que se ubica en un área de baja densidad de cerdos, el aire de salida de la cuarentena puede ser filtrado para prevenir la aparición de alguna enfermedad. Los filtros pueden ser abiertos después de la evaluación, cuando se indique que el grupo es negativo a las enfermedades en cuestión.

que Hacer: • Tener un baño con ducha separado del edificio. • Los trabajadores del centro pueden hacerse cargo de la unidad de cuarentena al final del día, con un tiempo de vacío de una noche antes de volver al stud. • Realizar un muestreo estadístico inicial y evaluar a los sementales dentro de los primeros siete días desde la llegada. Sin embargo, al final del periodo de cuarentena se deberá evaluar al 100% de la población. • En el caso de que la cuarentena esté lejos del centro de machos, asegúrese de que el camión de transporte sea lavado, desinfectado y secado antes de mover los machos desde la cuarentena hacia el stud. • Mueva los sementales al centro tan pronto como sea posible después de recibir los resultados negativos.

que No hacer: • Ubicar el edificio de cuarentena muy cerca del centro de machos (menos de 400 metros) si no tiene filtros de salida aire y el centro principal no tiene filtros de aire.

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Los gerentes pueden elegir entrenar a los sementales en cuarentena o en el centro. Cualquiera de las opciones funcionará mientras se cuente con un protocolo adecuado de entrenamiento en el lugar (ver Parte 8: Entrenamiento).

Los sementales deben ser alojados individualmente y no deben ser mezclados durante la transferencia al centro de machos.

Se debe registrar diariamente la temperatura máxima y mínima de la posta.

Los sementales deben ser aislados tras la entrega desde la granja fuente, según acuerdo comercial de PIC (Condiciones de Venta).

El edificio debe ser lavado, desinfectado y secado entre cada grupo de sementales que ingrese ala cuarentena. Se recomienda un periodo de reposo de 1 día después de una apropiada limpieza, desinfección y secado.

El periodo mínimo de aislamiento es de 30 días después de la última entrada de sementales a la unidad de cuarentena.

Todos los sementales en cuarentena deben ser clínicamente monitoreados diario. Se debe registrar la información de cada individuo que presente signos clínicos o requiera tratamientos. Cualquiera de los sementales que no esté comiendo o esté clínicamente enfermo, se le debe registrar su temperatura, ser monitoreado y manejado individualmente. El aumento de la incidencia de animales que no comen o que se encuentran en estado febril día tras día, es un indicador de la introducción de una enfermedad. Es recomendado que el Gerente del centro de sementales notifique a su Veterinario si ocurre alguna enfermedad clínica o muerte de machos.

La evaluación para la liberación de los sementales hacia la posta incluye lo siguiente:

• Evaluar una muestra estadística de los sementales a los 7 días de llegada. • Evaluar serológicamente para PRRS al 100% de los sementales al término de la cuarentena, antes de la liberación de los sementales a la posta, usando ELISA (individual) y PCR (pool de cinco). • Asegurar que el laboratorio de diagnóstico corra el PCR antes que la prueba de ELISA para evitar contaminación. Un Médico Veterinario debe determinar que la población es negativa antes de ingresar los animales al centro principal. • Los requerimientos de evaluación de enfermedades variarán de país en país y región/estado. Consulte a su Veterinario. • Vea Parte 10: Bienestar y Salud, para detalles adicionales en evaluaciones en cuarentena.

Parte 2: Cuarentena y A

climatación

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No mueva a los sementales de la cuarentena al centro de machos si PIC le notifica algún problema de salud en la granja fuente o si la cuarentena está pasando por un brote de alguna enfermedad.

Antes de liberar a los animales de la cuarentena hacia el centro, comuníquese con su Veterinario de granja o con el Departamento de Aseguramiento Sanitario de PIC para verificar el estatus actual de salud de la granja fuente.

La bioseguridad del edificio de cuarentena debe ser mantenida de forma estricta y se debe requerir que todo el personal tome un baño al entrar y al salir del edificio de cuarentena.

• El personal de servicio que entra al edificio de cuarentena debe seguir las mismas restricciones usadas en el centro y debe adherirse a las mismas reglas sobre tiempo de vacío sanitario.

• El equipo de producción puede visitar y trabajar en la unidad de cuarentena después de trabajar en el centro, pero debe cumplir con una noche de vacío sanitario antes de volver a ingresar al stud.

PIC informará al personal del centro sobre cualquier cambio significativo en el estatus sanitario de la granja fuente de PIC. El stud o sus Veterinarios serán proveídos con los resultados de las evaluaciones serologicas realizadas en la granja fuente para los sementales que son destinados a ser colocados en el edificio de cuarentena.

Part

e 2:

Cua

rent

ena

y A

clim

atac

ión

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Parte 3: Manejo G

eneral de los Sementales

Parte 3: Manejo General de los Sementales

El administrador o el técnico asignado debe supervisar los corrales diariamente, identificando a los animales que no han comido lo suficiente, levantando a los sementales al momento de la alimentación para buscar signos de cojeras y también para identificar problemas de tos u otros problemas respiratorios. Consulte a su Veterinario por protocolos de tratamiento.

Se debe llevar un registro de todos los sementales que estén en tratamiento o que no estén comiendo lo suficiente.

Cuando se coloque a los sementales en el centro, éstos deben ser ubicados por línea genética y luego por edad. Agrupe juntos a los machos jóvenes y evite mezclarlos con machos adultos.

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Part

e 4:

Man

ejo

del Á

rea

de S

emen

tale

s

Parte 4: Manejo del Área de Sementales

Las recomendaciones de manejo aplican tanto para la zona de cuarentena como para el centro principal.

Los sementales son animales tranquilos, pero el equipo del área necesita prevenir cualquier riesgo innecesario cuando los entrena, muestrea, trata, pasea y los colecta. Cuando lleve animales a la zona de colección o los saque de ella, camine detrás de los machos y utilice una tabla de manejo (Para mayor información vea la Parte 10: Bienestar Animal y Salud).

La temperatura óptima para la producción de espermatozoides es entre 18 – 20°C (64 - 68°F). Rociadores, atomizadores, refrigeración por evaporación y aire acondicionado son usados para controlar la temperatura de la posta pero se debe evitar crear un medio ambiente húmedo.

Los corrales deben tener una adecuada ventilación y un movimiento de aire suficiente para reducir los niveles de amoniaco y los niveles de olor, manteniendo una temperatura ambiental aceptable tanto para los sementales como para el personal del stud (Ver Parte 5. Ventilación y Flujo de Aire). La parte trasera de las jaulas no debe ser sólida, debe ser de barras abiertas para crear un flujo adecuado de aire y una temperatura óptima alrededor de los testículos de los sementales.

La tasa mínima de flujo de agua es 1cuarto de lt/min (250 ml /min), ya que los sementales consumen en promedio 5.6 – 7.8 L (1.5 – 2 galones) de agua por día. El flujo de agua se debe medir trimestralmente (una vez a la semana durante los meses de verano) para asegurarnos de que los sementales tienen suficiente acceso al agua y así prevenir la falta de agua en los tejidos o la deshidratación. Las evaluaciones físico químicas del agua deben ser realizadas dos veces al año para detectar niveles de impurezas, minerales y bacterias. Los Municipios locales pueden requerir evaluaciones más frecuentes.

El pediluvio con una solución de sulfato de cobre debe ser usado a la entrada y salida del edificio de cuarentena. En la posta, los sementales deben caminar a través del pediluvio con sulfato de cobre durante el camino de regreso a sus jaulas después de la colección. Esto ayudará a endurecer las pezuñas y prevenir problemas de cojera.

Se debe colocar tapetes bajo los sementales con problemas en los pies o pezuñas para asegurar su confort y promover su recuperación. Debe haber suficientes tapetes para cubrir al 10% de los machos de la posta.

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Factores de Manejo que Impactan la Calidad del SemenSituación

Alta temperatura

ambiente

Temperaturas

ambientales

moderadas y alta

humedad

Fiebre (causada por

vacunación o

enfermedad)

Regímenes de

colección

aumentados y

erráticos

Reducción de

nutrientes en la

ingesta

Fotoperiodos

Subóptimos

Sementales

inmaduros

Descripción>29°C (85°F) por 3

días o más

26 - 29°C (79 - 85°F)

+ 75% o más de

humedad por 4

semanas o más

Temperatura

Corporal >39°C

(103°F) por 2+ días

>3 veces por

semana

>15% reducción en

energía o proteína

en ingesta por más

de 8 semanas

>16 horas de luz o

<8 horas de

oscuridad

<6 a 7 meses

dependiendo del

genotipo

Efecto en SementalesFuerte aumento en

espermatozoides

anormales por eyaculado

Incremento gradual en

espermatozoides

anormales por eyaculado

Fuerte aumento en

espermatozoides

anormales por eyaculado

Decremento gradual en

número de

espermatozoides

normales por eyaculado

Libido reducido y

decremento gradual en

espermatozoides

normales por eyaculado

Decremento gradual del

libido y la producción de

espermas no es

consistente

Bajo volumen de semen,

bajo número de

espermatozoides

normales y presencia de

gota citoplasmática

ReferenciaMcNitt y First, 1970

Wetteman et al., 1976

Suriyasomboon, 2005

McNitt y First, 1970

Kennedy y Wilkins, 1984

Louis et al., 1994 a, b

Sancho, 2004

Kennedy y Wilkins, 1984

Recuperación

2 meses

6-8 semanas

8 semanas

Descanso 2 semanas

Variable. Depende en la

severidad de la

restricción

NA

Tiempo necesario para

alcanzar madurez

Revise y asegúrese de que NO existe flujo de corriente eléctrica por las líneas de agua y equipos.

Diferentes factores de manejo en la granja pueden impactar la calidad del semen (Cuadro 2). Cuadro 2

Después de que las colecciones son terminadas, el área de colección debe ser lavada diariamente con agua caliente a alta presión. Las áreas de limpieza incluyen el área de pre-calentamiento, corrales o jaulas de colección, potro de monta y tapetes. Después del lavado, el área debe estar limpia de material orgánico (ej. excremento, semen). Una vez por semana se debe desinfectar el área de colección después del lavado con un producto hecho específicamente para instalaciones de animales.Asegúrese de incluir todas las superficies (ej. Paredes, barras de las jaulas).

Parte 4: Manejo del Á

rea de Sementales

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Variables Ambientales del Edificio y Recomendaciones de Condiciones Optimas

Tipo de Piso

Tipo de Construcción

Temperatura Deseada del Cuarto

Punto Partida en Invierno

Punto de Partida en Verano

Ejemplo 1Slats

Sólida a los lados

66°F, 19°C

69°F, 21°C

65°F, 18°C

Ejemplo 2Slats

Cortina

68°F, 20°C

71°F, 22°C

67°F, 19°C

Ejemplo 3Solid

Sólida a los lados

63°F, 17°C

66°F, 19°C

62°F, 16°C

Ejemplo 4Solid

Cortina

65°F, 18°C

68°F, 20°C

64°F, 18°C

Part

e 5:

Ven

tilac

ión

y Fl

ujo

de A

ire

Parte 5: Ventilación y Flujo de AireOptimizar las condiciones ambientales para los sementales es algo crítico por varias razones: • Se optimiza la producción de células espermáticas y se mejora la calidad del semen. • Se regulan los requerimientos de alimento para mantenimiento diario. • Controla el crecimiento bacteriano en el ambiente. • Promueve la salud y reducción de cojeras.

El objetivo de un programa de ventilación es alcanzar la temperatura deseada del cuarto (TDC o DRT por sus siglas en inglés) y humedad, a través de la remoción del calor húmedo para crear confort.

TDC se refiere a la temperatura óptima para el confort del semental en un ambiente dado. Se deben realizar los ajustes necesarios para alcanzar la TDC en diferentes tipos de ambientes, ya sea con distintos tipos de pisos o diferentes tipos de construcciones. • Diferentes TDC han sido asociados a distintos “puntos de partida” (punto en el cual el ventilador aumenta su velocidad) considerando ambientes variables para alcanzar el máximo confort del semental (Cuadro 3; extracto de la Herramienta Modelo de Ventilación PIC, disponible a petición).

Cuadro 3

La Humedad Relativa en la posta de sementales debe ser entre 40 y 65%.

La Humedad y TDC son controladas mediante el manejo y manipulación del flujo de intercambio de aire entre el interior y exterior, lo que es medido en pies cúbicos por minuto (CFM). • Durante la respiración normal del semental se produce calor y vapor de agua, causando un incremento de la temperatura y humedad del ambiente, a menos que exista un buen intercambio de aire. • Se recomienda un flujo de aire mínimo de 14 CFM para mantener los requerimientos de temperatura y humedad.

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• Cuando la humedad y temperatura están afuera del rango óptimo, se requerirá cambiar el flujo de aire para dejar salir apropiadamente el exceso de calor y reemplazarlo con aire más fresco y más seco. • El aire más fresco retiene menos vapor de agua, permitiendo una caída efectiva de la humedad relativa en la sala. • Incrementar el flujo de ventilación para mejorar la humedad relativa cuando la temperatura exterior es superior a la deseada, no mejorará la humedad relativa.

La velocidad del aire que ingresa es importante para lograr una mezcla efectiva de aire fresco y poder eliminar las corrientes y áreas de condensación. La velocidad es medida en pies por minuto (FPM por sus siglas en Ingles). • Una velocidad de aire de 800 es óptima para ventiladores que funcionan a alta velocidad, mientras que 400 FPM es mucho más práctico en ventiladores que funcionan a baja velocidad. • Rutinariamente evalúe la velocidad del aire para asegurar una mezcla apropiada de aire en la sala.

Se requerirán calefactores adicionales para controlar las temperaturas mínimas críticas y son esenciales en situaciones de emergencia. • Cada edificio requiere la adición de calefactores adicionales para asegurar el control de temperaturas bajas críticas y calefactores para ser usados en situaciones de emergencia. • Si los calefactores están programados demasiado cerca al punto óptimo de temperatura, el consumo de gas o propano será excesivo. Programe el calefactor con un mínimo de 2 grados menos que el óptimo e incremente la velocidad del ventilador al punto óptimo. Ej. Si la temperatura óptima es de 21ºC, los calefactores se encenderán a los 18ºC.

La secuencia de los ventiladores es establecida para mantener la temperatura de la sala tan cerca como sea posible a la temperatura deseada del cuarto, sin causar mayores variaciones de la temperatura mediante la remoción progresiva de calor y humedad. • La velocidad de los ventiladores no es igual a los CFM (ej. el 50% de la velocidad de los ventiladores no equivale al 50% de los CFM). Por esto, es importante entender la relación entre las velocidades de los ventiladores y tasa de salida de aire (Figura 2).

Parte 5: Ventilación y Flujo de Aire

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16

Estimaciones de CFM Dependiendo del Tamaño del VentiladorTamaño, cm

20

25

31

46

61

91

122

127

140

CFM, salida450

1100

1500

3500

5700

9700

17000

22000

23000

CFM, ventiladores con cono500

1200

1600

3600

6000

10000

18000

23000

24000

• Tamaños diferentes de ventiladores, juanto con la presencia de un cono, influencian los CFM que sale (Cuadro 4)

Cuadro 4

Part

e 5:

Ven

tilac

ión

y Fl

ujo

de A

ire

Figura 2

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Nunca Paramos de Mejorar

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• Las curvas de los motores dependen de los diferentes tamaños de los ventiladores y se obtienen de la relación entre los voltajes entregados al motor y las revoluciones por minuto resultantes (RPM). • La adaptación incorrecta de la curva del motor y el tamaño del motor puede quemar los ventiladores o causar velocidades de ventilación no precisas, ej. Un ajuste del 60% en la velocidad de ventilación puede resultar en 90% de velocidad de ventilación. • La tasa de intercambio de aire puede aumentar debido a que aumentan las temperaturas del exterior, hay cambios de estación o incrementa la temperatura interior porque aumenta la actividad de los machos. • Se deben hacer cambios moderados en la ventilación y se deben evitar incrementos del doble de CFM.

Para proveer un ambiente óptimo a los machos se requiere de muchos factores que deben operar en conjunto. En la medida que los CFM aumentan se deben considerar lo siguiente: • Cada pulgada2 de inlet del techo provee 4.5 ft3 de aire por minuto. • Cada pulgada2 del inlet provee 2.5 ft3 de aire por minuto. • Si el sistema no tiene el apropiado número de inlets abiertos y la cantidad apropiada de inlet en el ático, no importa cuántos ventiladores estén trabajando, el aire no entrará a la nave efectivamente.

Se puede utilizar agua para refrescar el ambiente por medio de goteros o enfriamiento por evaporación. El propósito de los sistemas de gotero es refrescar los testículos para optimizar la temperatura para la producción de espermatozoides. • Tener más agua en el aire y en el piso incrementa el riesgo de elevar la humedad del ambiente, aumenta la probabilidad de desarrollar cojeras y crea un ambiente ideal para el crecimiento bacteriano. • Para secar el piso se debe aumentar la tasa de ventilación.

Parte 5: Ventilación y Flujo de Aire

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18

Part

e 6:

Con

dici

ón C

orpo

ral

Parte 6: Condición Corporal

La condición corporal es importante para mantener óptimos niveles de libido, producción de semen y una adecuada habilidad de montar en el potro de colección. El objetivo es que el 90% de los sementales del stud tengan una condición corporal normal (Vea las Figuras 3, 4 y 5).

Fotografía 3: Condición Corporal Delgada

Fotografía 4: Condición Corporal Normal

Fotografía 5: Condición Corporal Obesa

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Parte 7: Alim

entación y Nutrición

Parte 7: Alimentación y Nutrición

Los sementales deben ser alimentados a libre acceso cuando llegan a la cuarentena, esto permite mejorar la transición hacia el edificio. Este nivel de alimentación debe ser mantenido por 2 semanas y después se debe reducir a 2.3 kg/día. (5 lb.) por lo que resta del periodo de cuarentena.

Los sementales en condiciones corporales normales deberán ser alimentados con 2.3-2.7 kg. (5-6 lb.) de alimento una vez al día. Ajuste la alimentación para lograr el objetivo corporal deseado (Ver Parte 6: Condición Corporal). Un semental obeso debe ser limitado a 1.6-1.8 kg. (3.5-4 lb) de alimento al día, mientras que un semental delgado deberá recibir 3.2-3.6 kg (7-8 lb) al día.

Si se utilizan comederos automáticos de caída, pese muestras una vez por trimestre para verificar la precisión del comedero. Las mediciones deberán efectuarse con cualquier ajuste de ingredientes para considerar los cambios de densidad.

Los comederos deben ser ajustados cada 2 semanas para mantener una condición corporal apropiada y una buena producción de semen. El mantenimiento adecuado de la condición corporal ayudará a mantener un buen nivel de libido y una correcta habilidad de trabajo de los sementales.

Un adecuado nivel de consumo y la fortificación de nutrientes deben ser provistos para optimizar la producción de semen (véase los Apéndices A y B).

Las micotoxinas pueden tener varias consecuencias detrimentales sobre el desempeño del semental, incluyendo impactos negativos en la calidad del semen (Cuadro 5). Evite el uso de los subproductos o co-productos donde se puedan encontrar micotoxinas. Seleccione ingredientes de alta calidad y monitoree regularmente los niveles de micotoxinas en ellos.

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Manual PIC de Manejo de la Posta de Sementales

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Micotoxina

Zearalenona

Aflatoxinas

Ocratoxina

Tricotecenos

(T2, DON, DAS)

EfectoRetraso de la pubertad

Reduce el tamaño testicular

Disminución del libido

Pobre calidad espermática

Edema del prepucio – pérdida de vello

Pobre calidad espermática

Disminución de la concentración espermática

Incremento de anormalidades morfológicas

Reducción de la capacidad de fertilización

No come

Úlceras gástricas

Pobre calidad espermática

No come

Vómito

Impacto de las Micotoxinas en el Alimento sobre elDesempeño del Semental.

Cuadro 5

(P. Matzat, resumen de varias fuentes)

Part

e 7:

Alim

enta

ción

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utric

ión

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Parte 8: Entrenamiento

Parte 8: Entrenamiento

Entrenamiento para Colección Manual

Antes de iniciar el entrenamiento, ajuste la altura del potro para que esté a la altura de los sementales jóvenes. El área de recolección deberá estar libre de corrientes y tener un buen piso.

Nunca comience a entrenar a un semental antes de los 150 días de edad.

Identifique a las personas que estén dispuestas a dedicar tiempo y sean pacientes para entrenar a los sementales jóvenes. Comience el entrenamiento entre los 3 a 5 días de la llegada del semental. Asegúrese que un sistema de registro se encuentre en su lugar para registrar el progreso de cada semental. Todos los machos deben estar entrenados después de 4 semanas de iniciado el entrenamiento.

Se debe seguir el siguiente protocolo:

• Remover cualquier fuente distractora en el área de colección. • Asegurarse que el semental esté cómodo con el contacto humano y asegurarse de la seguridad del personal. • Apriete el divertículo del prepucio para estimular al semental y haga todo el esfuerzo para que el semental ponga atención al potro. • Una vez que el semental monte el potro, asegure el pene y proceda con la colección. • Observe posibles problemas anatómicos en los sementales. (por ejemplo, pene flácido, frenillo persistente) en este momento. • El siguiente semental deberá ser colocado en la zona de calentamiento para ser preparado para el entrenamiento mientras que el primer semental está siendo recolectado. • Si el semental no muestra interés para montar el potro en 10 minutos, llévelo al área de calentamiento y administre una prostaglandina natural. Espere 5 a 10 minutos y trate nuevamente de colectarlo. • Una vez que el semental ha sido entrenado, repita el proceso 3 días seguidos para reforzar su experiencia de aprendizaje. • Una vez que los sementales ya estén entrenados, deberán ser recolectados 1 vez por semana.

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22

Part

e 8:

Ent

rena

mie

nto

Entrenamiento usando un Sistema de Colección Automátizado

El sistema de colección automática incluye un cérvix artificial (CA), un brazo deslizante, un cérvix artificial sujetador y un potro. El CA imita el cérvix de la cerda y brinda presión para estimular al semental. El brazo deslizante permite movimientos hacia delante y atrás durante la colección. • Sigua los pasos anteriormente mencionados para el primer día de recolección. • Al segundo día, colecte la primera porción del eyaculado manualmente por aproximadamente 1 minuto con la mano izquierda. • Después de 1 minuto asegure el pene al sistema de colección automática y permita al semental terminar la colección. • Repita el proceso en el día 3 de entrenamiento. • El tiempo de aclimatación de cada semental al sistema dependerá en cada individuo.

Vea el Apéndice C para ver las instrucciones con fotos.

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Parte 9: Colección del sem

ental

Parte 9: Colección del semental

Los sementales siempre deberán ser llevados al área de calentamiento antes de la colección. Esto le permite al semental prepararse para ser colectado. El prepucio debe limpiarse en el área de calentamiento y asegúrese de que el divertículo del prepucio esté libre de contenidos. El vello alrededor del prepucio deberá ser recortado periódicamente.

La higiene deberá ser mantenida durante la colección para limitar la contaminación bacteriana. El método del guante doble es preferido.

Los termos recolectores deberán ser preparados un día antes de la colección y deben ser almacenados en un área limpia, cerrada, higiénica y tibia (37°C o 98°F) hasta su uso.

El eyaculado del semental tiene 4 fracciones: • Pre-espermática • Rica en espermatozoides • Post-espermatica • Gelatinosa (tapón)

El semen deberá ser colectado en un contenedor limpio desechable, incluyendo bolsas de polietileno, contenedores de plástico, etc. Todos los métodos deberán utilizar un filtro para remover el material gelatinoso.

Una vez montado en el potro, el semental hará intentos de desenvainar el pene y con la mano con un guante limpio atrape y retenga el glande del pene (sacacorchos) y sigua el movimiento del semental hasta que se sujete.

Evite colectar la fracción pre-espermática dentro del contenedor. Esta es típicamente una emisión clara que contiene orina y bacterias.

La fracción rica en espermatozoides es seguida de la fase pre-espermática. Recolecte el semental hasta que termine con la eyaculación. Típicamente este proceso toma de 8 a 10 minutos, algunos sementales pudieran tardar más.

Después de la recolección, el filtro deberá ser removido de la bolsa en la zona de colección y no debe entrar al laboratorio.

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Intervalos de Colección por Edad del Sementalen Líneas Genéticas TerminalesEdad

<12 meses

≥12 meses

Intervalo1 x semana

2 x semana

La identificación clara y precisa del semental, la genética y el técnico o el colector deben ser registrados y pegados a la bolsa o al contenedor que contiene el semen.

Todos los sementales, independientemente de la demanda de semen, deben ser colectados regularmente. Una guía para los intervalos de colección de machos terminales se presenta en la Cuadro 6. Se debe entender que cada semental y/o líneas se pueden desempeñar mejor a diferentes intervalos que los sugeridos; asumiendo que las recolecciones sean realizadas regularmente. Generalmente, las líneas maternas deberán ser recolectadas 1 vez por semana sin importar la edad.

Cuadro 6

Part

e 9:

Col

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Parte 10: Bienestar A

nimal y Salud

Parte 10: Bienestar Animal y Salud

Temperatura Corporal y Apetito

Se debe medir la temperatura rectal de los sementales que no comen o que presenten signos clínicos de alguna enfermedad. Si la temperatura del semental se mantiene >40°C (104°F), el semental no deberá ser colectado ese día y se deberá notificar al Veterinario. Se debe considerar un diagnóstico de trabajo, incluyendo pruebas de PRRSv PCR en suero o hisopos de sangre. Si el número de sementales que no comen/o en estado febril aumenta de un día a otro, la posta debe ser cerrada y se debe iniciar un diagnóstico completo.

Pruebas de Diagnóstico

Se deben realizar pruebas semanales de PRRSv PCR de sangre o suero con la frecuencia y número adecuado para alcanzar una muestra estadística mínima de 95% de nivel de confianza con 5% de prevalencia basados en un tipo de muestra y la sensibilidad/especificidad de la prueba PCR. Un muestreo más riguroso es dejado a criterio del stud. Muestras en pool hasta 5 son permitidas.

Las pruebas para PCR deben ser colectadas y enviadas de acuerdo al protocolo del laboratorio de diagnóstico.

Se recomiendan revisiones mensuales de PRRSv ELISA (30 muestras individuales) o pruebas semanales de un número similar.

Considere hacer pruebas inmediatas de PRRSv PCR de muestras de sangre de cualquier semental con fiebre, que no coma o presente otros signos clínicos. Estas muestras deben ser examinadas por PCR de manera individual, en lugar de ser parte de un pool.

La técnica del hisopo de sangre ha sido utilizada durante los últimos años y es una manera efectiva de recolectar sangre para pruebas semanales de PRRS PCR. Otro método utilizado es la vena tarsal en la parte posterior de la pierna del semental, es una buena técnica para recolectar sangre para PRRS PCR y ELISA. Contacte a su veterinario de granja o instrucciones de PIC acerca de la recolección de sangre.

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Criterios para el cierre de la Posta

La decisión de suspender el envío de semen desde el stud recae fuertemente en el juicio del Gerente y Veterinario de la granja. El semen no debe ser colectado para el envío si se tiene alguna duda del estatus de salud de cierto semental. Las temperaturas deben ser registradas si el semental es sospechoso de tener algún problema de salud. La suspensión de la venta de semen debe ser considerada cuando una enfermedad clínica (ejemplo: tos, diarreas, falta de apetito) sea evidente o existan temperaturas elevadas (>40°C o 104°F) en más del 5% de los sementales. Si el número de sementales con fiebre y con falta de apetito es menor al 5% pero está aumentando diariamente, la posta deberá cerrarse para elaborar un trabajo de diagnóstico. Otro motivo para detener el envío de semen es si el Veterinario o el Gerente de la granja tuviesen otras preocupaciones de riego para la granja, como problemas de bioseguridad. Las sospechas de enfermedad clínica o sub-clínica deben ser reportadas al Veterinario de la granja para determinar si se puede seguir distribuyendo el semen.

Se debe confirmar los resultados positivos para enfermedades transmitidas vía semen, como PRRS.

Manejo y Eutanasia

Los sementales maduros son grandes y fuertes y pudieran causar lesiones a los cuidadores durante el manejo de los animales. Se debe tener especial cuidado cuando se mueven, tratan o toman muestras de los sementales. Si es necesaria una examinación detallada o se requiere de un tratamiento, el semental debe ser manejado de manera segura, efectiva y humanamente moderada.

Las técnicas apropiadas para realizar eutanasia se encuentran en el documento “Eutanasia para Cerdos en la Granja: Recomendaciones para el Productor” (AASV y NPB,2009).

Part

e 10

: Bie

nest

ar A

nim

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Sal

ud

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Nunca Paramos de Mejorar

27

Requerimientos de ft² por SementalRecomendaciones de Densidades Basadas en Peso, Temperatura y Distancia a viajar

lb

241-258

259-305

306-364

365-399

400-449

450-499

500

Kg

109-117

118-138

139-165

166-181

181-203

204-226

227

<80°F (27°C)

3.6

4.3

4.9

5.6

6.4

6.9

7.6

80-90°F (27-32°C)

3.9

4.7

5.4

6.1

7

7.6

8.4

>90°F (32°C)

4.3

5.1

5.9

6.7

7.7

8.3

9.1

>90°F (32°C) y>250 miles

5.1

6.1

7.1

8

9.2

10

10.9

Peso

Cuadro 7

Parte 10: Bienestar A

nimal y Salud

Transporte de los Sementales

Los conductores que transporten sementales deben estar certificados para TqA®. La densidad durante el transporte deberá estar basada en peso, temperatura y distancia a viajar (Cuadro 7).

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Manual PIC de Manejo de la Posta de Sementales

28

Part

e 11

: Ges

tión

del L

abor

ator

io

Parte 11: Gestión del Laboratorio

Al personal de la granja NO SE LE DEBE permitir entrar al laboratorio en ningún momento, a menos que se hayan bañado y cambiado de ropa. El personal del laboratorio deberá usar una ropa diferente al que usan los trabajadores del área de sementales. Estos artículos deben lavarse por separado de la ropa de la granja. • Batas de laboratorio y redes para el cabello deberán estar disponibles para el personal del laboratorio. • No se permite comer o fumar en el laboratorio. • Las mesas deberán ser limpiadas diariamente con una solución clorada después de que la producción ha sido finalizada. • Las mangueras deben ser enjuagadas con agua desionizada (DEI) mojadas con alcohol, enjuagadas nuevamente y colgadas para su secado antes de la producción del día siguiente.

El laboratorio deberá estar listo para que el procesamiento de semen sea realizado con eficiencia (Figura 3).

Figura 3. Flujo del Laboratorio

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Nunca Paramos de Mejorar

29

Calidad del Agua

El agua purificada es el componente mayor en una dosis de semen y por lo tanto la calidad y control del agua es de suma importancia.

Las opciones son comprar agua purificada (mejor opción para inventarios con menos de 100 sementales) o instalar un sistema adecuado de purificación dentro de la posta. El costo puede ser variable, dependiendo de la calidad del agua y del origen de ella.

Se debe llevar un monitoreo diario para asegurar que la calidad sea consistente. Muchos studs en Estados Unidos usan un equipo Myron ‘L’ 250 II para monitorear los Megaohms (MΩ) y tiene que estar colocado en el laboratorio, ya que arroja un resultado visual de inmediato.

Los grados y especificaciones del agua, los niveles de contaminación microbiológica y las especificaciones de calidad del agua deben estar a la mano para su uso en el laboratorio (Tablas 8-10, ASTM, 1991). El objetivo de los sistemas de agua pura instalados en los studs de sementales es producir agua entre los grados Tipo I y Tipo III.

Cuadro 8

Cuadro 9

A: La medida de pH en Tipo de agua I, II, y III ha sido eliminada de esta especificación porque estos grados de agua no contienen componentes en suficiente cantidad para alterar significativamente el pH.

aCfu = Unidades formadoras de colonias; bEU = unidades de endotoxinas

Parte 11: Gestión del Laboratorio

Parámetros para Calidad del Agua y sus EspecificacionesParámetro

Conductividad Eléctrica, max, µS/cm a 298 K (25°C)

Resistividad Eléctrica, min, Ω-cm a 298 K (25°C)

pH a 298 K (25°C)

Carbón Orgánico Total (TOC), Max, µg/L

Sodio, max, µg/L

Cloruros, max, µg/L

Sílice total, Max, µg/L

Tipo I0.056

18.0

A

50

1

1

3

Tipo II1.0

1.0

A

50

5

5

3

Tipo III0.25

4.0

A

200

10

10

500

Tipo IV5.0

0.2

5.0 to 8.0

No Límite

50

50

No Límite

Tipos de Contaminación MicrobiológicaTipo A

10/1000 mL

0.01

0.03

Tipo B10/100 mL

0.1

0.25

Tipo C100/10 mL

10

NA

ParámetroContenido Máximo de bacterias

heterótroficas

Cfu /mL

Endotoxina, EU /ml

a

b

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Manual PIC de Manejo de la Posta de Sementales

30

Especificaciones de la Calidad del Agua para LaboratorioParámetro

Bacteriología

Pureza inorgánicos

Orgánicos

Carbono Orgánico total

pH

Target<1 cfu /mL

=18 MΩ @77°F (25°C)

>0.001 AU@254 nm

>50 ppb

6.8 a 7.2

a

b

Cuadro 10

aacfu = unidades formadoras de colonias; bppb = partes por billón; MΩ = megaohm – cm (resistencia eléctrica)

Si las muestras de agua no cumplen con éstas especificaciones, se deberá realizar un análisis extenso para poder corregir el problema.

Llegada del Semen

Una posta que pasa el semen al laboratorio a través de una ventana, debe tener una cámara de calentamiento para pre-calentar los termos de colección antes de la colecta. Debe estar programada a 37°C (98°F).

Una posta que utiliza un sistema de entrega de tubo neumático debe también tener una cámara de calentamiento cerca al área de colección.

El eyaculado de los sementales necesita ser claramente identificado con el arete del semental y con la línea genética. Los técnicos de granja necesitan evitar pasar contenedores sucios a través de la ventana.

Los técnicos del laboratorio deben estar atentos cuando el eyaculado llegue a la ventana, ya que éste debe ser diluido dentro de los 10 minutos de su llegada. Evaluación del Semen

Una vez que el semen llega al laboratorio se debe evaluar el color y el olor para determinar si existe presencia de sangre u orina en el eyaculado.

El peso total del eyaculado debe ser medido en gramos mediante el uso de una balanza calibrada.

Prepare una muestra para evaluarla, diluyendo el semen fresco con el diluyente o una solución de citrato de sodio en una dilución 1:20. Si el eyaculado es muy líquido, una dilución 1:10 deberá ser utilizada o si es muy cremoso o concentrado utilice una dilución 1:40. Esto es importante debido a que puede tener un impacto en la precisión al determinar la concentración del semen.

Part

e 11

: Ges

tión

del L

abor

ator

io

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Nunca Paramos de Mejorar

31

Criterios de Aceptación de la Calidad del SemenCaracterísticaMotilidad Total

Espermatozoides normales

Gotas Citoplasmáticas, proximales y distales

Aglutinación

Umbral≥80%

≥70%

<15%

<30%

Una vez que el semen llega al laboratorio, utilizando un microscopio, se debe evaluar la motilidad y morfología de los espermatozoides y los resultados deben cumplir con los estándares de calidad propuestos (Cuadro 11).

Un microscopio puede usarse para evaluar la motilidad total usando una placa cubierta calentada a 37°C y/o un Sistema de Análisis de Semen Asistido por Computadora (CASA).

Los sistemas CASA pueden evaluar la morfología en la misma muestra usada para evaluar la motilidad. Si este sistema no es usado, se debe preparar una muestra y se debe contar 100 células para tener el porcentaje de células normales en un eyaculado.

Se debe registrar la presencia de desechos celulares y aglutinación de células espermáticas.

Menos de un 10% de los eyaculados deben se descartados porque no cumplen con los criterios de calidad. Si este número es más alto, hay que realizar un análisis detallado de las razones de desecho para entender dónde existe el problema.

Determinación de la Concentración

Las opciones para medir la concentración del eyaculado incluyen hematocitómetro, fotómetro, espectrofotómetro o los sistemas CASA.

Las técnicas apropiadas de mezclado de semen fresco y de pipeteo son importantes para asegurar tener una muestra representativa del eyaculado diluido y así determinar la concentración total de espermatozoides. Dependiendo del equipo disponible, esto proporcionará una medición expresada como total de células espermáticas en millones por ml. de semen fresco.

Cuadro 11

Parte 11: Gestión del Laboratorio

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32

Dilución del semen

El personal del laboratorio necesita saber con antelación cuántas dosis se necesita hacer para que puedan preparar suficiente diluyente para un día normal de colecta. Una regla general es multiplicar el número objetivo de dosis por el volumen total por dosis y sumar 5 a 10% más para tener suficiente diluyente para la producción de semen y usos consecuentes como dilución de semen fresco, derrames, pre-diluciones, u órdenes de último minuto.

Siga exactamente las instrucciones del fabricante del diluyente o conservador. El peso preciso del agua purificada y del diluyente es vital para una producción correcta de dosis. Las desviaciones de esto pueden alterar la osmolaridad de la mezcla. El diluyente necesita ser continuamente mezclado por 1 hora para permitir que los componentes de éste se estabilicen antes de agregar el semen.

La temperatura del diluyente debe ser mantenida a 35°C (95°F). Una colección de semen tiene una temperatura de 37-38°C (98-100°F) y hay una caída de 2-3 grados de temperatura del eyaculado durante el proceso de evaluación. Consecuentemente el diluyente necesita guardarse a 35°C (95°F).

Después que el eyaculado y el diluyente hayan sido mezclados, observe una muestra al microscopio antes de llenar las dosis.

Los diluyentes pueden contener uno o múltiples antibióticos. Los antibióticos en el diluyente pueden ser modificados y adaptados a su situación. Una comunicación abierta con su proveedor es necesaria.

Envasado de las Dosis de Semen

Después de la dilución, el semen debe ser puesto en un baño de agua a 35°C (95°F) o se deben envasar las dosis inmediatamente.

Antes del envasado, el semen debe ser mezclado suavemente ya que los espermatozoides se pueden asentar en el fondo.

Todo el proceso, desde el tiempo en que llega el semen a la ventana hasta el envasado de dosis, debe tomar máximo 20 minutos.

Part

e 11

: Ges

tión

del L

abor

ator

io

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Nunca Paramos de Mejorar

33

Enfriamiento del Semen y Empaque de las Dosis Enfriadas

Se utilizan cuartos frescos para enfriar y almacenar el semen antes de que éste sea distribuido. La temperatura debe mantenerse entre 15- 17°C (59 - 63°F). Un ventilador debe ser usado para asegurar la circulación del aire. Registre diariamente las altas y bajas temperaturas del cuarto.

Para mover, almacenar y enfriar el semen, se pueden utilizar estantes de alambre o carros de transporte. Esto permite el flujo de aire fresco y un enfriamiento más uniforme de las dosis de semen. Las dosis necesitan bajar la temperatura de dilución (35°C o 95°F) a la temperatura de conservación (15 - 17°C o 59 – 63°F). Con el uso de diluyentes modernos, las dosis pueden ser movidas inmediatamente al cuarto frío.

El semen debe ser enfriado por 4 horas antes de su distribución. Esto es especialmente importante para el semen que es transportado en una caja doble de espuma de poliestireno™ que es una combinación más fresca, ya que estas hieleras conservan una temperatura constante durante el transporte. Se puede utilizar registradores de temperatura (loggers) para monitorear las temperaturas en tránsito. La clave es que el semen se enfríe hasta la temperatura de conservación antes de ser empacado.

Envío y Transporte del Semen

El semen enviado a través de un servicio de mensajería externa, tal como UPS o FedEx, debe ser empacado en cajas dobles de espuma de poliestireno™, ya que será entregado al día siguiente. El semen que se envíe al exterior debe ser empacado y sellado dentro de un ambiente controlado (17°C o 63°F).

Para pedidos grandes, no se deben empacar más de 200 dosis en una hielera Styrofoam™ (poliestireno). Por ejemplo, un cliente que ordena 1200 dosis recibiría 6 hieleras de 200 dosis cada una.

Cuando las temperaturas son mayores a 26°C (80°F) o menores a 4°C (40°F), las dosis deben ser empacadas utilizando una doble hielera Styrofoam™ con paquetes de gel en los espacios de aire en el interior, de otra manera una simple hielera puede ser usada. En el invierno (<4°C o 40°F) utilice 2 paquetes de gel entibiado y en el verano (>26°Co 80°F) utilice 1 paquete de gel congelado (o 2 refrigerados) entre las hieleras. Vea el Apéndice D para más instrucciones de empaque.

Para el semen que es enviado vía servicio de mensajería interna, la temperatura debe ser revisada en el lugar de entrega.

Parte 11: Gestión del Laboratorio

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Manual PIC de Manejo de la Posta de Sementales

34

Directrices del Fabricante para la Preparación de Muestras para Revisiones de la MotilidadConservador

Gedil

Vitasem

Androhep

Enduraguard

Muestra1-5 ml enfriado, conservado

3 ml enfriado, conservado

5 ml enfriado, conservado

Temp99°F, 37°C

99°F, 37°C

100°F, 38°C

Time10 minutos

5 minutos

20 minutos

EvaluaciónMotilidad

Motilidad

Motilidad

FabricanteIMV

Magapor

Minitube

a

Ejemplo de Sistema de Registro del Diluyente

Agua, kg1 kg

Conservador, g50 g

Lote #1234

InicialesXX

NotasFecha11/01/2012

Diluyente: xxx Tasa de Dilución: xx g/kg

Part

e 12

: Con

trol

de

Cal

idad

Parte 12: Control de Calidad

Evaluación de la Motilidad Post-producción

• Garantizar la calidad de las dosis de semen es de vital importancia. El mejor indicador que el laboratorio tiene que evaluar es la viabilidad de las dosis conservadas, aplicando una revisión de motilidad post-producción de todos los lotes y colecciones de un solo macho. • Una muestra de cada lote o de una colección de un solo semental debe ser guardada en un tubo de vidrio de 5 ml. o en una bolsa usada para empaque. Las muestras deben ser preparadas para su evaluación de acuerdo a las direcciones provistas por el fabricante del conservador (ver la Cuadro 12).

Cuadro 12

aSólo para propósito de ejemplo. PIC no avala a los fabricantes de diluyentes específicados.

• Las postas deben realizar revisiones de motilidad post- producción al día 1, 3 y 5 como mínimo, donde el día de colección es día 0. • Si las dosis tienen una motilidad menor a 70%, realice una revisión de motilidad post-producción una segunda vez para confirmar los resultados. Si se confirman los resultados, una llamada debe de hacerse a los clientes quienes recibieron el semen instruyéndoles que deben desechar el semen.

Preparación del Diluyente y Trazabilidad

• Imprima y pegue en el área de dilución, una guía de referencia en la que se indique cómo preparar el diluyente, indicando la cantidad de agua y diluyente que recomienda el fabricante. Una guía puede ser preparada para cada tipo de diluyente disponible en una posta particular (vea Apéndice E). • Genere un sistema de registro para seguir rastreando el diluyente usado. Este registro debe incluir el tipo de conservador, nombre y número de lote del fabricante (Cuadro 13).Cuadro 13

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Nunca Paramos de Mejorar

35

Registro de Materiales Desechables

• Registre cuando cambie de distribuidor y cuando cambien los productos que tengan contacto directo con el semen. Todas estas entradas necesitan ser incluidas con fechas y número de lote. • Desarrolle un ensayo en laboratorio para monitorear los efectos perjudiciales potenciales (ej., reducción de motilidad). • Por ejemplo, cuando un nuevo lote de tubos de dosis sea recibido, prepare una muestra utilizando un tubo del lote nuevo y otra muestra utilizando un tubo del lote antiguo, ambas muestras deben contener semen del mismo macho. • Evalúe la motilidad y morfología de ambas muestras durante los días 1, 3 y 5. • Para otros consumibles nuevos como guantes, corte un pedazo de un guante nuevo y un pedazo de un guante del lote antiguo y sumérjalos en muestras de semen del mismo pool y evalúe el semen como se describió arriba.

Especificaciones de Control de Calidad del Distribuidor

• Pida que su distribuidor le provea todas las regulaciones que ellos llevan a cabo para la producción de los insumos. Por ejemplo, el distribuidor del diluyente debe indicar cuál es el protocolo que llevan a cabo para la prueba biológica de materiales plásticos. También pregunte a los distribuidores sobre la certificación ISO 9000.

Calibración del Equipo

• Se debe calibrar semanalmente las balanzas, las técnicas de pipeteo se deben evaluar mensualmente y los termómetros de láser infrarrojo cada año. En el laboratorio debe haber disponible una tabla de pesos maestros, una balanza sensible (lectura a 0.001 g) para volúmenes de pipeta (para canales simples de desplazamiento de aire de las pipetas) y un kit de calibración para el termómetro láser infrarrojo.

Análisis de Agua Pura

• Las postas que tienen un sistema de purificación de agua (Fotografía 6-10) deben establecer un proceso de verificación para asegurar que todos los componentes están operando apropiadamente. La frecuencia del análisis de agua depende en la calidad original del agua y de la fuente. Filtros de carbón y arena deben ser usados para capturar las partículas de mayor tamaño. Estos equipos son funcionales para >500 mil galones de agua. Los filtros deben ser revisados cada trimestre. • Monitoree los niveles de sales en el suavizador de agua (Fotografía 6) para asegurar una relación adecuada de ablandador consumido versus agua producida.

Parte 12: Control de C

alidad

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36

- Monitoree los niveles de sales en el suavizador de agua (Fotografía 6) para asegurar una relación adecuada de ablandador consumido versus agua producida.

Fotografía 6. Ejemplo de Suavizador de Agua

Fotografía 7. Medidor de Agua Osmosis Inversa

- Los tanques de Desionización DEI deben trabajar en pares y necesitan ser reemplazados dos veces por año. (Fotografía 8). Si el sistema tiene un indicador de luces que cambian de verde a rojo, existirá un periodo de una semana de tiempo para reemplazar el tanque agotado. El par de tanques opera en las posiciones de “trabajo y pulido”. El tanque agotado es aquel que está en la posición de trabajo y cuando el tanque de reemplazo llegue, el tanque bueno existente se debe mover desde la posición de pulido a la posición de trabajo y el tanque nuevo va a la posición de pulido.

Part

e 12

: Con

trol

de

Cal

idad

- La máquina de Osmosis Inversa RO, necesita un mantenimiento dos veces por año, reemplazando los cartuchos y filtros. El uso de medidores RO y pruebas de cinta pueden ser usadas para monitorear localmente el agua producida por el sistema purificador de agua (ejemplo, fabricado por Myron L Company, Fotografía 7).

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Fotografía 8: Tanques de Desionización para Sistemas de Agua

- El sistema 0.25 micron y lámpara UV deben ser cambiados cada año (Fotografías 9-10).

Fotografía 10. Ejemplo de lámpara UV

- Las tuberías de agua desde la lámpara UV hasta las salidas de agua en el laboratorio deben ser desinfectadas cada mes para controlar bacterias. Desinfecte las líneas de agua y las salidas de los grifos en el laboratorio, usando una solución de blanqueador de lavandería. Déjelos en remojo por la noche y luego enjuague bien. - Semanalmente revise el sistema completo para identificar posibles fugas de agua.

Parte 12: Control de C

alidad

Fotografía 9. Sistema Micron

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Medidas de Control de Calidad y Frecuencia de MediciónFrecuenciaDía 1, 3 y 5

Número de lote Nuevo o productos

Semanalmente

Mensualmente

Anualmente

Reemplazar filtro 2 veces por año

Reemplazar 2 veces por año

Desinfectar mensualmente

Reemplazar 1vez por año

Reemplazar 1vez por año

Medida de control de calidadRevisiones de Motilidad

Materiales desechables

Calibración de balanzas

Calibración de Pipetas

Calibración de Termómetro Infrarrojo

Máquina Osmosis Inversa

Tanques DEI

Líneas de Agua y grifos

Sistema .25 micron

Lámpara UV

Hay muchas medidas de control de calidad en el laboratorio. Una lista de mediciones (Cuadro 14) debe estar disponible para el técnico de laboratorio con el nombre de la persona responsable para cada tarea.

Cuadro 14

Análisis de Evaluación de Terceras Partes • Para asegurar que las dosis de semen diluidas cumplan con los estándares mínimos de calidad, mensualmente se debe implementar una evaluación del agua, diluyente y semen diluido. • Establezca un programa de monitoreo periódico de la calidad de las dosis de semen producidas en la posta. Esto consiste en mandar a un tercero una cantidad de dosis elegidas al azar para revisar cómo está funcionando el control de calidad que se hace en el laboratorio del stud, concentración de células espermáticas, motilidad total, morfología y volumen de dosis de semen. Al mismo tiempo, envíe muestras de agua purificada, muestras de diluyentes y muestras de semen diluido para realizarles análisis bacteriológicos. Siga el protocolo para preparación de muestras de agua y diluyente que se presenta en el Apéndice F. Después que la tercera parte entregue los resultados de las evaluaciones, compárelos con sus metas objetivas. • El número de muestras de semen a enviar debe ser igual a un 1% de las dosis que se producen en un día normal de producción o un mínimo de 10 dosis seleccionadas al azar entre lotes. • La frecuencia de los envíos para evaluación debe ser calendarizada mensualmente y las muestras deben ser tomadas aleatoriamente de todos los lotes de dosis. • Los objetivos deben ser establecidos para cada parámetro que se mida y la variación de estar entre los rangos aceptables. • Cuando una fuente de consumibles o número de lote cambia, se deben enviar muestras del mismo lote, usando ambas fuentes/lotes y la tercera parte debe estar consciente del cambio. • La tercera parte que hace el servicio de evaluación de semen necesita ser una entidad confiable e independiente. Vea a un representante PIC para solicitar recomendaciones.

Part

e 12

: Con

trol

de

Cal

idad

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39

Parte 13: Manejo y Entrenam

iento del Personal

Parte 13: Manejo y Entrenamiento del Personal

Las postas de sementales deben mantener una relación empleado: semental igual a 1:60, con 60% de los empleados trabajando en la posta y un 40% en el laboratorio.

Los empleados deben tener el certificado PqA Plus®.

El personal que trabaja directamente con los animales debe ser entrenado sobre el movimiento animal y cómo se deben manejar los sementales para garantizar la seguridad de los trabajadores.

El personal del laboratorio debe ser entrenado por otro empleado con varios años de experiencia o mediante un programa de entrenamiento a través de un tercero.

Se debe estandarizar los conocimientos de los empleados una vez por trimestre, a través de una referencia cruzada entre el personal del laboratorio sobre cómo preparar dosis, etc.

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Manual PIC de Manejo de la Posta de Sementales

40

Indicadores Clave de Desempeño para Centros de SementalesObjetivo

>30 mil millones

1.2

<3.0%

<1.5%

<6%

<5%

<5%

KPIEspermatozoides totales por eyaculado

Colecciones por semental por semana

Sementales no entrenables

Uso de Prostaglandina

Colecciones desechadas

Dosis no usadas

Mortalidad sementalesPart

e 14

: Ind

icad

ores

Cla

ve d

e D

esem

peño

Parte 14: Indicadores Clave de Desempeño

Tal como en las granjas de hembras, los studs de sementales deben también dar seguimiento a los parámetros que son indicativos sobre el desempeño del semental y calidad del semen (Cuadro 15).

Cuadro 15

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Nunca Paramos de Mejorar

41

Parte 15: Benchm

arking de Producción

Parte 15: Benchmarking de Producción

Pocos estudios han investigado el tiempo límite de cuándo la calidad del semen para inseminación artificial comienza a deteriorarse. La investigación (Wolf y Smital, 2009) sugiere que el volumen de semen, número total de espermatozoides y los espermatozoides funcionales alcanzan su máximo cuando el semental tiene 2 años de edad. La concentración espermática aumenta hasta el mes 11 seguido de una disminución de la concentración hasta que los sementales cumplen 3 años. El porcentaje de espermatozoides anormales aumenta a la edad de 8 a 48 meses. La motilidad se reduce a un ritmo constante en el tiempo pero solamente por 1% de reducción.

Se pueden hacer estimaciones de células espermáticas y producción de dosis de líneas PIC basadas en la información propia, de un afiliado, de un grupo de usuarios o tomando datos de clientes de las postas de sementales (Figuras 4-6; Cuadros 16, 17).

Figura 4. Células Viables (vivos, normales) por Eyaculado por Línea Genética por Semana de Producción

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42

Células Viables por Eyaculado por Línea Genética Promediado por 5 Semanas de ProducciónLineaL02

L03

PIC280/L15

L19

PIC327/L27

PIC337/L65

PIC359

PIC380

W6-1046.1

47.5

43.5

47.4

42.3

44.2

47.1

52.0

W11-1553.8

53.3

50.4

55.4

51.3

52.3

57.9

60.2

W16-2058.2

57.4

56.0

60.3

56.7

57.5

66.6

65.4

W21-2560.0

59.8

58.8

62.5

60.0

61.4

70.8

69.1

W26-3062.0

59.9

60.3

64.0

61.6

63.5

74.3

71.3

W31-3563.2

61.0

62.1

65.7

62.6

65.5

76.0

72.5

W36-4064.6

61.2

63.6

64.6

63.7

66.6

77.3

73.7

W41-4564.8

61.0

64.3

66.5

65.1

67.2

79.5

75.1

W1-535.0

39.3

34.7

36.5

28.6

26.8

30.2

41.6

Cuadro 16

Promedio de dosis por Colección, por Edad y Línea Genética, asumiendo Dosis de 2500 millonesde Células Espermáticas Viables y un Promedio de 1.2 Colecciones por Semana por la Vida del

Útil del Semental.

Figura 5.

Part

e 15

: Ben

chm

arki

ng d

e Pr

oduc

ción

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Nunca Paramos de Mejorar

43

Promedio de Dosis por Colección porEdad y Línea Genética

LíneaL02

L03

PIC280/L15

L19

PIC327/L27

PIC337/L65

PIC359

PIC380

<12 meses19.1

19.6

18.2

19.7

17.6

17.8

19.8

21.7

≥12 meses25.1

24.2

24.7

25.8

25.0

25.8

30.1

28.8

Dosis PIC

Cuadro 17

Parte 15: Benchm

arking de ProducciónFigura 6: Realización del Semental Terminal

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44

En los años anteriores, PIC en asociación con economistas de las universidades, han desarrollado un modelo económico para determinar el momento óptimo para desechar un semental de la posta. La Vida Optima del Semental OBL (por sus siglas en ingles) usa costos personalizados de las postas (alojamiento, comida, precio de compra, costos de cuarentena, regalías, etc.) e ingresos proyectados (el valor de las dosis de semen producidas por el semental y el valor genético del semental comparado con su potencial de reemplazo) para determinar objetivamente el momento óptimo en que un semental debe permanecer en la posta. Hay dos modelos de OBL que se acomodan a clientes integrados que son dueños de una posta de sementales y de una unidad de hembras y también existe un modelo desarrollado para centros de transferencia genética y venta de semen.

Estos modelos entregan tasas objetivas de reemplazo y proveen métricas basadas en información precisa y tiempo real. Por favor contacte a Servicios Genéticos de PIC para más información sobre OBL y su uso en su sistema.

Part

e 16

: Vid

a Ú

til d

el S

emen

tal y

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R

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plaz

o

Parte 16: Vida Útil del Semental y Tasa de Reemplazo

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Referencias

Referencias

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46

Col

abor

ador

es

Colaboradores

Equipo del Proyecto del Manual PIC

Juárez, Arturo Minton, Amanda Morales, Jaime

Pinilla, Juan Carlos Thompson, Bob Turley, Malcolm

Contribuyentes

Culbertson, Matt Engle, Mark

Geiger, Jerome Lewis, Craig Matzat, Paul

McCulley, Nick Melody, Brian Neill, Casey

Torgersen, Ole

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Requerimientos Nutricionales para CerdosUnidades

IU/lbIU/lbIU/lbmg/lbmg/lbmg/lbmg/lbmg/lbmcg/lbmcg/lbmcg/lbmg/lbmg/lbppmppmppmppmppmppm

PIC 20115,000800502

300204.515177502501

1.51251005015

0.650.3

NutrienteVitamina AVitamina DVitamina EVitamina K

ColinaNiacina

Riboflavinad-PantothenateVitamina B-12Ácido Fólico

d-BiotinaTiamina

PiridoxinaZinc

HierroManganeso

CobreIodo

Selenio

NRC 2012181891200.55684.51.75.515591910.50.5100100205

0.50.3

1 NSNG 20104,000300302022412200000

16516530160.30.3

2 Apéndice A

Apéndice A

1NRC = Requerimiento de Nutrientes del Cerdo 2NSNG = Guía Nacional de Nutrición del Cerdo

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48

1400

16

4.5 to 6.0

0.62

0.80

0.40

0.45

1.90

Especificaciones Mínima de la Dietaa

NutrienteNRC ME, Kcal/lb

Proteína, %

Fibra, %

SID lisinab, %

Calcio, %

aFósforoc, %

Sal adherida, %

Acido Linoleico, %

Porcentaje69.32

13.75

1.00

1.10

1.20

0.45

0.11

0.02

0.05

12.50

0.50

100.00

IngredienteMaíz

Pasta de Soya (2.62% SID Lisina)

Aceite de Soya

Fosfato monocálcico, 21% P

Limestone

Sal

Lisina HCl

DL-Metionina

L-Treonina

Cáscara de Soya

PIC Boar Stud VTM + Fitasa

Ejemplo Dieta para Sementales

Apé

ndic

e B

Apéndice B

aCantidad / lb de dieta completa. bSID = Estandarizado ileal digestible.ca = disponible

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49

Apéndice C

Apéndice C

Sistemas Auitomatizados para Colección. Instrucciones paso a paso para el uso.

Prepare el cérvix artificial (CA) colocándolo a través del anillo y envolviendo el revestimiento exterior alrededor de este.

Apriete el divertículo del prepucio para vaciar su contenido

Una vez extendido el pene, límpielo con una toalla desechable usándola una sola vez.

1.

2.

3.

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50

Pegue el CA a la palma del guante con su mano exponiendo el tape. Cuando el semental comience a empujar, agarre el pene.

Coloque el final del CA en el sujetador y presione el gatillo hacia abajo. La punta del pene debe llevarse ligeramente al final del CA. Después de colectar la fracción pre-espermática del eyaculado remueva y deseche la bolsa interior del CA.

4.

5.

6.

Coloque el exterior de la bolsa dentro del termo de colección y utilice un anillo y boca del termo para crear un sellado.

Apé

ndic

e C

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51

7.

8.

Una el termo de colección al potro de monta pero no le aplique fuerza excesiva de modo de evitar que se doble. Libere el seguro del brazo deslizable para permitir el libre movimiento durante el proceso de colección. Durante la colección, el semen va desde la bolsa externa del CA hasta el filtro de la bolsa de colección localizada en el termo de colección. Una vez que se complete la eyaculación, el semental retirará su pene del CA y se desmontará. Libera la tensión en el gatillo para quitar el CA y el termo de colección.

Retire el CA del anillo y deséchalo. quite la parte de arriba de la bolsa de colección que contiene el filtro y deséchelo. El eyaculado se encuentra ahora en la bolsa de colección y puede ser entregado al laboratorio para ser procesado.

Apéndice C

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Empaque de Dosis de Semen para Envío Usando Doble Hielera.

Apé

ndic

e D

Apéndice D

Prepara los revestimientos y hieleras.

1.

Coloque las dosis adentro de la bolsa Thermalast adentro de la hielera interna.

2.

Ponga un paquete de gel con la temperatura del cuarto.

3.

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Nunca Paramos de Mejorar

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4.

Ponga la tapa y séllela con cinta.

5.

Envuelve la hielera interna con una bolsa Thermalast.

6.

Ponga la hielera interna dentro de la hielera externa y agregue paquetes de gel (caliente o frío dependiendo de la temporada).

Apéndice D

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54

7.

Tape y selle la caja con cinta.

8.

Ponga la caja dentro de la caja para envío.

Apé

ndic

e D

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Nunca Paramos de Mejorar

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Diluyente: XXX Recomendación Proveedor: 50 g/kg de agua Tub: 5kg

Volumendiluyente(L o kg)

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

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14

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

Diluyentea agregar

(g)50

100

150

200

250

300

350

400

450

500

550

600

650

700

750

800

850

900

950

1000

1050

1100

1150

1200

1250

Guía de Preparación del Diluyente

Agua aagregar

(kg)1

2

3

4

5

6

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10

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15

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Volumendiluyente(L o kg)

26

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48

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50

Diluyentea agregar

(g)1300

1350

1400

1450

1500

1550

1600

1650

1700

1750

1800

1850

1900

1950

2000

2050

2100

2150

2200

2250

2300

2350

2400

2450

2500

Agua aagregar

(kg)26

27

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30

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50

Volumendiluyente(L o kg)

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Diluyentea agregar

(g)2550

2600

2650

2700

2750

2800

2850

2900

2950

3000

3050

3100

3150

3200

3250

3300

3350

3400

3450

3500

3550

3600

3650

3700

3750

Agua aagregar

(kg)51

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Volumendiluyente(L o kg)

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100

Diluyentea agregar

(g)3800

3850

3900

3950

4000

4050

4100

4150

4200

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4350

4400

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4500

4550

4600

4650

4700

4750

4800

4850

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4950

5000

Agua aagregar

(kg)76

77

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100

Apéndice E

Apéndice E

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Apé

ndic

e F

Apéndice F

Preparación de la Muestra de Agua para Análisis por Terceras Partes (Desarrollado por G. Althouse, J. Morales y B. Thompson)

• Se deben recolectar muestras de agua en una bolsa estéril Whirl-Pak® y sellar inmediatamente después de la recolección. - Use guantes desechables antes de tomar la muestra. - Limpie la superficie externa del grifo con un trapo sin pelusa con un ligero spray con 70% de alcohol; asegúrese que no sea saturado. Limpie físicamente el grifo e inserte ligeramente el trapo en el extremo del grifo. Espere 30 segundos para que se evapore el alcohol - Permita que el agua que sale del proceso de ósmosis inversa corra por 3 minutos para evacuar completamente las líneas. - Abra la Whirl-Pak® y recolecte la muestra a la mitad del flujo de la corriente. - Muestree todos los grifos con la misma técnica.

• Muestree el conservador diluido: - El empleado que pesa y adhiere el conservador al agua debe usar una máscara N95 y usar guantes desechables cuando trabaje con conservadores en polvo. - Use una técnica similar con alcohol para limpiar el tubo de la bomba peristáltica. Limpie la superficie externa del tubo de conexión al Auto-diluyente y limpie por dentro dándole tiempo a que se seque el alcohol. - Recolecte aproximadamente 1 litro de conservador diluido en el contenedor. Reduzca la velocidad de la bomba y tome una muestra en una Whirl-Pak® y selle inmediatamente.

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