Madu 3

Artikel Ilmiah

EFEKTIVITAS MADU DAN SARI BUAH MENGKUDU (Morinda citrifolia) SEBAGAI ANTIBAKTERI

TERHADAP Escherichia coli PADA KARKAS AYAM

Oleh :

Vega Decline NIM 060710116

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

SURABAYA 2011

Effectiveness of Honey and Noni juice (Morinda citrifolia) as an antibacterial against Escherichia coli

on Chicken Carcasses

Soetji Prawesthirini1, Vega Decline2, Suwarno3 1Departemen Kesehatan Masyarakat Veteriner,2Mahasiswi, 3Departemen

Mikrobiologi Veteriner

Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga

ABSTRACT

This study was aimed to determine effectiveness of honey and noni juice (Morinda citrifolia) as an antibacterial against Escherichia coli on chicken carcasses. There were two methods used in this research, such as Most Probable Number (MPN) to calculate the number of Escherichia coli and sensitivity test Difusy Agar Kirby Bauer that produces clear inhibition zone of the area around the paper disc. This research consists of 6 treatments (P0, P1, P2, P3, P4 and P5) with 5 replications. P0 as the control, P1 contains of honey, P2 contains of noni juice, P3 contains both honey and noni juice in the ratio 1:1, P4 contains both honey and noni juice in the ratio 1:2 and P5 contains both honey and noni juice in the ratio 2:1. The data were analyzed using Analisis of Variant (Anova). The results showed that P1 gave the greatest defference among all treatments. It could be concluded that the addition of honey as an antibacterial potency against was more effective to Escherichia coli than noni juice on chicken carcasses.

Keywords : honey, noni juice, antibacterial potency, chicken carcasses.

Menyetujui untuk dipublikasikan, Surabaya, 6 Juli 2011.

Mahasiswa: (Vega Decline) NIM. 060710116

Menyetujui Dosen Pembimbing I: (Soetji Prawesthirini, S.U.,drh.) NIP.195107031978032001

Menyetujui Dosen Pembimbing II: (Dr.Suwarno, M.Si.,drh.) NIP. 196105151989031002

Menyetujui Dosen Terkait I: (Budiarto,M.P.,drh) NIP.196107281991031

Menyetujui Dosen Terkait II: (Hasutji Endah Naruni, M.P.,drh) NIP.195202071978032001

Menyetujui Dosen Terkait III: (Dr.Anwar Maruf,M.Kes., drh.) 196509051995031004

Pendahuluan

Indonesia kaya akan sumber bahan obat tradisional yang telah digunakan oleh

sebagian besar masyarakat secara turun-temurun. Keuntungan obat tradisional adalah

kemudahan untuk memperolehnya, bahan bakunya dapat ditanam di perkarangan sendiri,

murah, dan dapat diramu sendiri di rumah (Zein, 2005).

Sejak lama madu dikenal dan digunakan sebagai obat tradisional yang berkhasiat

untuk kesehatan. Madu yang diminum setiap hari bermanfaat sebagai antibiotik

konvensional penangkal infeksi yang umum terjadi seperti infeksi saluran kencing dan

antidiare (Epoch Times, 2009). Madu mengandung zat antibakteri yang aktif melawan

serangan berbagai bakteri patogen penyebab penyakit. Empat faktor yang bertanggung

jawab terhadap aktivitas antibakteri pada madu antara lain adalah kadar gula madu yang

tinggi, tingkat keasaman madu yang tinggi (pH 3.65), adanya senyawa radikal hidrogen

peroksida yang bersifat dapat membunuh mikroorganisme patogen, dan karena adanya

senyawa organik yang bersifat antibakteri (Kamaruddin, 1997).

Salah satu tanaman obat yang banyak digunakan saat ini sebagai obat tradisional

adalah mengkudu (Morinda citrifolia) yang bermanfaat untuk menjaga dan mengobati

gangguan kesehatan. Tanaman mengkudu terbukti mampu meningkatkan daya tahan

tubuh, meningkatkan nafsu makan, mengurangi sifat tosik obat dan dapat membunuh

berbagai macam jenis bakteri (Mursito, 2002).

Escherichia coli merupakan golongan bakteri koliform yang digunakan sebagai

indikator adanya polusi dan kondisi sanitasi yang tidak baik terhadap air dan

makanan (Prawesthirini dkk., 2011). Escherichia coli merupakan flora normal dalam

saluran pencernaan hewan dan manusia sehingga sering menyebar melalui air

minum atau makanan yang terkontaminasi kotoran manusia dan hewan serta

pemasakan daging yang kurang matang (Todar, 2005).

Daging ayam yang aman, sehat, utuh, dan halal atau sering disingkat dengan

ASUH adalah daging yang diharapkan oleh semua konsumen, karena daging ayam

yang ASUH terjamin jika dikonsumsi oleh masyarakat (Setiowati dan Evi, 2009).

Menurut SNI (2009), batas maksimum cemaran mikroba Escherichia coli dalam

daging ayam segar adalah 1x101 MPN/gram atau ml.

Penggunaan indeks mikroorganisme dapat digunakan sebagai penentu derajat

sanitasi berdasarkan jumlah mikroorganisme dalam makanan. Penelitian ini

mencoba membandingkan sensitivitas daya antibakteri antara madu dan sari buah

mengkudu terhadap bakteri Escherichia coli dan menghitung jumlah bakteri

Escherichia coli pada karkas ayam, selanjutnya memungkinkan pemakaiannya untuk

mengurangi jumlah bakteri kontaminan khususnya Escherichia coli pada karkas

ayam.

Metode Penelitian

Penelitian ini berlangsung di Departemen Kesehatan Masyarakat Veteriner Fakultas

Kedokteran Hewan Universitas Airlangga Surabaya pada bulan Juli sampai dengan bulan

September 2010. Penelitian ini dilakukan secara invitro menggunakan metode MPN untuk

menghitung jumlah bakteri Escherichia coli dan uji sensitifitas metode Difusi Agar Kirby

Bauer yang menghasilkan zona hambatan berupa daerah jernih disekitar paper disc.

Semua alat dan bahan yang akan digunakan disterilisasi terlebih dahulu dengan oven

dan autoclave. Buah mengkudu yang sudah matang dicuci bersih lalu dipotong kecil-kecil

dan dihancurkan dengan blender/juicer kemudian disaring dengan kertas saring untuk

diambil sarinya.

Karkas ayam broiler dari pasar tradisional dipotong acak menjadi enam bagian

kemudian dimasukkan kedalam beker glass yang sudah berisi larutan perlakuan dari

madu, sari buah mengkudu dan campuranya yaitu untuk P0= kontrol atau tanpa

pemberian larutan perlakuan, P1= Madu , P2= Sari buah mengkudu, P3= Campuran

madu dan sari buah mengkudu dengan perbandingan 1:1, P4= Campuran madu dan sari

buah mengkudu dengan perbandingan 1:2, dan P5= Campuran madu dan sari buah

mengkudu dengan perbandingan 2:1. Sampel karkas ayam direndam dalam larutan

perlakuan selama dua jam, kemudian sampel karkas ayam dipotong kecil-kecil dan

masing-masing diambil 25 gram. Sampel karkas ayam sebanyak 25 gram kemudian

dimasukkan kedalam tabung erlenmeyer yang berisi 225 ml larutan BPW 0,1% yang sudah

diberi label (PO, P1, P2, P3, P4,dan P5).

Penelitian ini menggunakan metode MPN lima belas tabung dengan ulangan

sebanyak lima kali. Setiap sampel diencerkan menjadi 10-1, 10-2, dan 10-3. Setiap

pengenceran diinokulasikan sebanyak 1 ml ke dalam 5 tabung reaksi yang telah berisi 10

ml BGBB (semuanya 15 tabung) dan tabung durham yang berfungsi untuk menangkap

gas yang diproduksi oleh bakteri. Ke-15 tabung tersebut diinkubasi pada suhu 44,50C

450C selama 24-48 jam. Setiap tabung yang menunjukkan produksi gas dan keruh diduga

positif Escherichia coli.

Semua tabung yang positif diinokulasi dengan cara streak pada media EMBA (dibagi

menjadi 5 area pada setiap petri dish) kemudian diikubasi pada suhu 370C selama 18-24

jam. Koloni khas berwarna hijau metalik yang terbentuk pada media EMBA diidentifikasi

pada BPW 1% (setiap area pada 1 tabung) kemudian diinkubasi pada suhu 44,50C-450C

selama 24 jam untuk meyakinkan bahwa koloni tersebut benar-benar Escherichia coli. Pada

setiap tabung dilakukan tes indol dengan meneteskan reagen Kovach, bila positif akan

terlihat cincin merah muda. Cara perhitungan yaitu dengan menghitung tabung BPW 1%

yang positif perpengenceran. Hasil kemudian dicocokkan dengan tabel Mc Crady.

Uji sensitivitas metode Difusi Agar Kirby Bauer menggunakan isolat bakteri Escherichia

coli strain ATCC 25922 yang kemudian dibiakkan dalam Mueller Hinton Broth (MHB) dan

diinkubasi pada suhu 370C selama 24 jam. Hasil biakan disesuaikan dengan standart

MacFarland sehingga dapat diketahui jumlah bakteri yang akan digunakan sebagai media

biakan. Pada penelitian ini menggunakan standart MacFarland dengan jumlah bakteri 9 x

108 /ml. Paper disc dijenuhkan dengan 6 perlakuan (P0, P1, P2, P3, P4, dan P5) dan tunggu

sampai meresap kemudian dikeringkan dengan cara diinkubasi pada suhu 370C selama

kurang lebih 2-3 jam.

Bakteri Escherichia coli yang telah ditumbuhkan pada Mueller Hinton Broth (MHB)

diambil sebanyak 0,2 ml kemudian ditanam pada Mueller Hinton Agar (MHA) dan

diratakan dengan menggunakan hockey stick steril, setelah itu dibiarkan selama 10-15

menit agar bakteri menempel dan meresap pada media. Paper disc yang sudah dikeringkan

diletakkan pada media dengan menggunakan pinset steril dan diinkubasi pada suhu 370C

selama 24 jam. Hasil dibaca dengan mengukur diameter zona hambatan berupa daerah

jernih atau bening disekitar paper disc.

Rancangan penelitian yang digunakan dalam penelitian ini adalah Rancangan Acak

Lengkap dengan ulangan sebanyak lima kali. Data yang diperoleh dianalisis

menggunakan Sidik Ragam. Jika terdapat perbedaan nyata, maka dilakukan Uji Beda

Nyata Jujur (BNJ) untuk menentukan perlakuan terbaik.

Hasil dan Pembahasan

Data hasil penghitungan jumlah Escherichia coli ditampilkan pada Tabel berikut :

Tabel 1. Rata-rata dan simpangan baku jumlah Escherichia coli setelah ditransformasi dengan log y

Perlakuan Rata-rata jumlah Escherichia coli (X SD)

P0 (Kontrol atau sampel tanpa pemberian larutan)

3,20a 0,00

P1(Madu) 2,76b 0,12

P2 (Sari buah mengkudu) 3,06ab 0,21

P3 (Campuran madu dan sari buah mengkudu= 1 : 1)

2,93ab 0,29


3,01ab 0,19


2,82ab 0,32

Superskrip pada kolom yang sama menunjukkan berbeda nyata (P < 0,01).

Tabel 2. Rata-rata dan simpangan baku zona hambatan terhadap Escherichia coli dalam satuan mm

Perlakuan Rata-rata zona hambatan (X SD)

P0 (Kontrol atau sampel tanpa pemberian larutan)

6,00b 0,00

P1(Madu) 7,48a 0,47

P2 (Sari buah mengkudu) 6,14ab 0,13


7,04ab 0,65


6,92ab 0,65


7,26ab 1,19

Superskrip pada kolom yang sama menunjukkan menunjukkan perbedaan sangat nyata (P > 0,01)

Berdasarkan hasil penelitian penghitungan jumlah bakteri Escherichia coli didapatkan

hasil analisis data secara statistik menggunakan Sidik Ragam yaitu atau pemberian madu

dan sari buah mengkudu serta campurannya memberikan perbedaan yang nyata terhadap

jumlah Escherichia coli karena F hitung < F Tabel 0,01.

Jumlah Escherichia coli pada karkas ayam berkurang karena madu memiliki tekanan

osmosis yang tinggi mengakibatkan bakteri yang terdapat dalam larutan tersebut

mengalami dehidrasi sehingga bakteri menjadi kering (Kustantiny, 1992). Kadar gula pada

madu sebesar 81% dan pH yang alkalis menimbulkan sifat osmosis tinggi (Hansson, 2001).

Sifat inhibine pada madu sebagai bakterisidal yang bekerja dengan cara menghidrolisis

hipopolisakarida pada dinding sel bakteri menyebabkan pertumbuhan bakteri terhambat

dan mati. Sifat inhibine pada madu diperoleh dari penambahan enzim glukosa oksidase ke

dalam madu yang dilakukan oleh lebah pekerja (Schlegel, 1994). Madu juga memiliki enzim

lysozim yang menunjukkan bahwa madu memiliki kemampuan yang tinggi untuk

menghambat bakteri (Waha, 2002).

Jumlah Escherichia coli pada karkas ayam berkurang karena di dalam sari buah

mengkudu terdapat acubin, levo asperuloside, alizarin, dan beberapa zat antraquinon yang

merupakan zat antibakteri terhadap Pseudomonas aeruginosa, Proteus morgaii, Staphylococcus

aureus, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Salmonella, dan Shigela. Senyawa saponin memiliki

molekul yang dapat menarik air (hidrofilik) menyebabkan hancurnya bakteri sehingga dapat

bersifat sebagai zat antibakteri (Winarti, 2005).

Berdasarkan hasil penelitian terdapat perbedaan dalam jumlah pertumbuhan bakteri,

perbedaan ini disebabkan karena adanya perbedaan jumlah larutan yang diberikan pada tiap

perlakuan. Pada jumlah yang tinggi, kandungan bahan kimiawi semakin banyak, maka

semakin banyak pula bakteri yang terbunuh. Kerja antibakteri dari suatu antiseptik

dipengaruhi konsentrasi/jumlah, suhu, dan waktu. Bila konsentrasi tinggi dapat bersifat

bakterisidal terhadap organisme tertentu (Pelezer and Chan, 1993).

Berdasarkan hasil penelitian pengukuran zona hambatan terhadap pertumbuhan bakteri

Escherichia coli didapatkan hasil analisis data secara statistik menggunakan Sidik Ragam

dimana pemberian madu dan sari buah mengkudu serta campurannya memberikan

perbedaan yang sangat nyata terhadap zona hambatan yang dihasilkan karena F hitung > F

Tabel 0,01.

Zona hambatan terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli dapat terbentuk karena

adanya zat antibakterial yang dikandung oleh madu dan sari buah mengkudu, banyaknya

jumlah madu dan sari buah mengkudu yang diberikan dan waktu pemberian madu dan sari

buah mengkudu. Menurut Pelezar and Chan (1993), hal-hal yang menentukan aktifitas

antibakterial adalah konsentrasi zat antibakterial tersebut karena konsentrasi dapat

berpengaruh pada kemampuan suatu zat antibakterial dalam menghambat pertumbuhan

bakteri (bakteriostatik) atau membunuh bakteri (bakteriosidal).

Zat-zat yang terdapat di dalam buah mengkudu seperti xeronine, plant sterois, alizarin,

lycine, sosium, caprylic acid, arginine, proxeronine, antra quinines, trace elemens, phenylalanine,

magnesium dan lain-lain telah terbukti menunjukkan kekuatan melawan golongan bakteri

infeksi seperti Pseudomonas, Proteus morganii, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis dan

Escherichia coli (Winarti, 2005). Xeronine mengatur bentuk dan rigiditas (kekerasan) protein-

protein spesifik yang terdapat di dalam sel, hal ini penting mengingat bila protein-protein

tersebut berfungsi abnormal maka tubuh akan mengalami gangguan kesehatan (Pelezar and

Chan, 1993).

Menurut Bangun dan Sarwono (2002) perasan buah mengkudu yang sudah berwarna

hitam, maka kandunga anthraquinon pada perasan buah mengkudu tersebut sudah hilang

atau perasan tersebut sudah tidak berkhasiat.

Faktor yang bertanggung jawab terhadap aktivitas antibakteri pada madu antara lain adalah

kadar gula madu yang tinggi akan menghambat pertumbuhan bakteri, tingkat keasaman

madu yang tinggi (pH 3.65), adanya senyawa radikal hidrogen peroksida yang dapat

membunuh mikroorganisme patogen, dan adanya senyawa organik yang bersifat antibakteri

(Kamaruddin, 1997).

Kesimpulan

1. Madu dan sari buah mengkudu serta campurannya dapat menurunkan jumlah bakteri

Escherichia coli pada karkas ayam.

2. Madu lebih dapat menurunkan jumlah bakteri Escherichia coli pada karkas ayam.

3. Madu dan sari buah mengkudu serta campurannya sebagai antibakteri dapat

menghasilkan zona hambatan terhadap pertumbuhan Escherichia coli.

4. Madu sebagai antibakteri menghasilkan zona hambatan paling luas terhadap

pertumbuhan bakteri Escherichia coli.

Daftar Pustaka

Bangun, A.P, dan Sarwono B., 2002. Khasiat dan Manfaat Mengkudu. Agromedia Pustaka. Jakarta.

Dewan Standarisasi Nasional. 2009. SNI Batas Maksimum Cemaran Mikroba Dalam Pangan

(SNI 73288:2009). Dewan Standarisasi Nasional. Jakarta. Epoch Times. 2009. Khasiat Madu : Studi Ungkap Manfaat Penyembuhannya. The Epoch

Times Edisi 116. 02-08 Oktober 2009. Kamaruddin. 1997. Khasiat Madu. Departement of Biochemistry, Faculty of Medicine

Universityof Malaya, Kuala Lumpur. http://www.edumuslim.org. Kustantiny, A., S. I Putu., K.P. Djoko., S. Hanggari., M. Rusana dan H. Oemar. 1992. Desain

Penurunan Kadar Air Dalam Madu. Deputi Bidang Pengembangan Kekayaan Alam, BPPT. Jakarta.

Mursito, B. 20002. Ramuan Tradisional untuk Penyakit Malaria. Penebar Swadaya. Jakarta. Pelezar, M.J. dan E.C.S. Chan. 1993. Dasar-Dasar Mikrobiologi II. Universitas Indonesia

Press. Jakarta. 452-456. Schlegel, H. G., and K. Schmid. 1994. Mikrobiologi Umum. Edisi Ke-6. Gajah Mada

University Press. Yogyakarta. 54. 328-329.

Todar, K. 2005. E.coli Infections. Todar Online Textbook of Bacteriology. University of Wisconsin-Madison Department of Bacteriology.

Waha, M. G. 2002. Sehat Dengan Mengkudu. Edisi ke-2. MSF Group, Jakarta, hal : 13-8. Kusriningrum, R. 2008. Buku Ajar Perancangan Percobaan. Universitas. Airlangga. Surabaya. Winarti, C. 2005. Peluang Pengembang Minuman Fungsional Dari Buah Mengkudu (Morinda

citrofilia L.). Jurnal Litbang Pertanian. Zein, U. 2005. Pemanfaatan tumbuhan Obat Dalam Upaya Pemilihan Kesehatan. Divisi

pnyakit Tropik dan Infeksi FK USU. Sumatera Utara.

Madu 3

Documents

Transcript of Madu 3