Les moyens d’étude de la croissance microbienne
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Université Mohamed khider Biskrafaculté des science exactes et snv
département de science de la nature de la vie1ére année master BBM
2011/2012
Les moyens d’étude de la croissance microbienne
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PLANT DE TRAVAILINTRODUCTION
I-LA CROISSANCE MICROBIENNE
II- LES MOYENS D’ETUDE DE LA CROISSANCEII-1 LES METHODES DIRECTES
II-1 MESURE DE NOMBRE DE CELLULES
1-Comptage total
2-Comptage des cellules viables cultivables
II-2/LES METHODES INDIRECTS
a-Mesure de la biomasse
1/ mesure de poids sec
2/ mesure de trouble
b-Mesure de l’activité cellulaire
III/ LA CINITIQUE DE LA CROISSANCE MICROBIENNE 1/Expression graphique
2/Expression mathématique
3/Rendement
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INTRODUCTION
La croissance est un phénomène de grande intérêt
biologique , dont l’importance écologique et pratique
est considérable .
C'est Jacques MONOD, lauréat en 1965 du Prix Nobel de
médecine (avec André LWOFF et François JACOB) qui le
premier a étudié la croissance .
Dont notre exposé, on propose un problématique ; est
ce que les techniques d’étude de la croissance sont
nombreuses et montre qu'aucune n'est parfaite ?
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I- LA CROISSANCE MICROBIENNE
DEFINITION :Accroissement ordonné de tous les composants d’un organismeAu niveau cellulaire, la conséquence est la division de la celluleOn observe donc chez les organismes Pluricellulaires : une augmentation de la taille de l’individu Unicellulaire : une augmentation de la populationChez les micro-organismes, croissance est synonyme de multiplication
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FACTEURS ESSENTIELS À LA CROISSANCE
Se divisent en deux catégories:Physiques - eau - température - pH - pression osmotique -lumière Chimiques: - carbone, azote, soufre et phosphore - oligo-éléments - oxygène
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FACTEURS ORGANIQUES DE CROISSANCE
Composés organiques dont un microorganisme a besoin mais qu’il ne peut synthétiser lui-même. Ex : vitamines (coenzymes) acides aminésLes purines et les pyrimidines à cèle des acides nucléique
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II- LES MOYENS D’ETUDE DE LA CROISSANCE MICROBIENNE
II-1 Les méthodes directes II-1-1Mesure de nombre des cellules
1-Comptage total A- Lecture au microscope Cellule de numération hématimétrie (Cellule de Thoma, Cellule de Malassez Cellule de Pétroff- Hauser)
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B-Compteur de particules
*Fluidique
- Cellules en suspension
-Flux sur une file à travers
*Optique
- Un volume illuminé où elles
- Diffusent la lumière et fluorescent
*Electronique
-Signaux collectés, filtrés et Convertis en valeurs numériques
-Stockées dans un ordinateur
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COULTER
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C- EPIFLUORESSENCE
Les cellules microbiennes sont
colorées par un fluorochrome de type
Acridine orangé.
-Cellules vivantes qui sont
fluorescentes dans le vert(ADN
double brin).
-Cellules mortes dont la fluorescence rouge résulte de la combinaison du fluorochrome avec l'ADN dénaturé.
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2-COMPTAGE DES CELLULES VIABLES CULTIVABLES
Dénombrement après culture
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II-2/LES METHODES INDIRECTS A-MESURE DE LA BIOMASSE 1/ MESURE DE POIDS SEC
Microorganisme récolté par centrifugation ou par filtration sur membrane
Lavage soigneux à l’aide d’un tampon approprié
Culot desséché à 10°C-110°C
Poids sec (gr de matière sèche par litre )
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2/ MESURE DE TROUBLE
l’absorption de la lumière traversant une suspension microbienne obéit à la loi de Beer Lambert :
A= log (I°) I
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B-MESURE DE L’ACTIVITÉ CELLULAIRE
On peut mesure soit :
1- La consommation de substrat
2- Mesure des produits d’excrétion
3-Mesure des variations physico-
chimiques du milieu
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III/ LA CINITIQUE DE LA CROISSANCE MICROBIENNE
III-1 Expression mathématique
peut être définie par deux constantes :
Temps de génération :
C’est l’intervalle de temps entre deux
divisions successives ou celui nécessaire au et
doublement de la population.: 1---2 ---- 4----8,
etc G = t/n
Taux de croissance : le nombre de divisions par unité de temps:
µ = 1/G = n/t.
.
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Une population avec la formule
suivante :
N = N0 x 2 t /G
N nombre de bactéries
N0 nombre de bactéries au départ
t temps de culture
G temps de génération
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2/Expression graphique :
Courbe de croissance
Différentes phases
1-Latence µ = 0
2-Accélération µ augmente, N augmente, et G
diminue
3-Phase exponentielle µ = µmax = cste ,G constant et
minimal, N augmente
4-Ralentissement µ diminue ,N augmente, et G
augmente.
5-Stationnement µ = 0, N est constante et maximale
6-Déclin mortalité μ est négatif , N diminue,.
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Figure : Courbe de croissance .
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3/RENDEMENT
R= la masse cellulaire formée
la masse d’aliments
consommés
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CONCLUSION
On fin de notre petite recherche , on concluent qu’il existe
différentes méthodes de mesure de la croissance microbienne.
On utilise des méthodes directes et indirectes de
quantification des bactéries ou des levures : en fonction du
temps, on suit l’évolution du nombre de micro-organisme par
unité de volume du milieu.
Les conditions expérimentales de mesure de la croissance
nécessitent:
Une population homogène.
Des paramètres physico-chimiques optimum..
Une certaines quantité de nutriments.
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MERCI POUR VOTRE
ATTENTION