Lecco 15-16 dicembre 2005 Valutazione performances delloperatore Elisa Codega Laboratorio di Sanità...

Lecco 15-16 dicembre 2005Lecco 15-16 dicembre 2005

Valutazione performances dell’operatore

Elisa CodegaLaboratorio di Sanità PubblicaASL della Provincia di Lecco

Lecco 15-16 dicembre 2005

VALUTAZIONE DELLA PERFORMANCES DELL’OPERATORE NELL’ANALISI MICROBIOLOGICA QUANTATIVA

Un laboratorio che opera in Qualità, secondo quanto previsto dalla ISO 17025, deve assicurarsi che tutto il suo personale sia adeguatamente addestrato a svolgere le analisi seguendo i metodi di prova accreditati o che si vogliono accreditare, in modo da fornire dati oggettivi inerenti al suo modo di operare .

Ora andremo a descrivere le modalità e i criteri di valutazione delle performance degli operatori del Laboratorio di Sanità Pubblica dell’ASL di Lecco nelle analisi microbiologiche quantitative.


VALUTAZIONE DELLA PERFORMANCES DELL’OPERATORE

Gli operatori presenti in laboratorio possono essere:

-IN FORMAZIONE: stanno seguendo un periodo di addestramento e non sono ancora coinvolti nell’attività routinaria di laboratorio;

-IDONEI ALLA MANSIONE: hanno già dimostrato di possedere le adeguate capacità per svolgere l’attività di laboratorio

a) coinvolti nell’attività routinaria di laboratorio

b) coinvolti solo saltuariamente nell’attività routinaria di laboratorio


IDONEITA’ ALLA MANSIONE

-IDONEITA’ ALL’ESECUZIONE DELL’INOCULO:

l’operatore dimostra di essere affidabile nell’esecuzione dell’inoculo quando esegue inoculi ripetibili e proporzionali con le tecniche analitiche utilizzate in laboratorio;

-IDONEITA’ ALL’ESECUZIONE DELL’INOCULO:

l’operatore dimostra di essere affidabile nell’esecuzione del conteggio quando esegue conteggi ripetibili e confrontabili con quelli di altri operatori (riproducibili) sui terreni di coltura utilizzati in laboratorio.


Valutazione performances operatore

Operatore in formazione o operatori idonei ma non

coinvolti nell’attività routinaria

Esecuzione prove specifiche per ripetibilità e proporzionalità

Accettabilità risultati ottenuti

NO SI

Idoneità all’esecuzione

dell’inoculo

inoculo Operatore già idoneo alla mansione

coinvolti nell’attività routinaria

Esecuzione prove routinarie per ripetibilità e proporzionalità

Accettabilità risultati ottenuti

NO SI

Mantenimento Idoneità

Esecuzione prove

specifiche


RIPETIBILITA’ E PROPORZIONALITA’ INOCULO

Operatori in formazione o operatori idonei ma non coinvolti nell’attività routinaria

Un operatore non coinvolto nella prova ma già idoneo alla mansione prepara un campione contaminato artificialmente con ceppi batterici. Gli operatori che devono eseguire questa prova devono effettuare, nell’arco di una giornata sul campione preparato in laboratorio: -tre diluizioni diverse del campione - per ogni diluizione prove in parallelo. Occorre eseguire la seguente prova per ogni tecnica diversa di inoculo da testareL’operatore esegue l’inoculo con le rispettive diluizioni e

repliche seguendo le procedure di analisi riportate nelle metodiche di prova.Il conteggio viene eseguito dal RS che raccoglierà i dati


RIPETIBILITA’ E PROPORZIONALITA’ INOCULO

Operatori idonei coinvolti nell’attività routinaria

Prove di ripetibilità e di proporzionalità randomizzate effettuate in doppio durante l’attività routinaria di laboratorio vengono utilizzate per valutare il limite di ripetibilità e di proporzionalità.

Sulla base dei valori reali riscontrati è possibile valutare il limite di dispersione sperimentaleI valori delle dispersioni sperimentali effettuate durante l’attività routinaria vengono ogni due mesi elaborati e conservati.

L’affidabilità degli operatori già idonei alla mansione dell’inoculo può essere valutata durante la normale attività di laboratorio.

Il RS si occuperà poi di effettuare le letture, raccogliere i dati


21;

21 lnln*2

np

iiiin n

ccccG

Criteri per l’accettabilità della ripetibilità

INOCULO

21;

21 npnG

accettabile

21;

21

21; npnnp G

critico

21;

21 npnG

insufficiente

dove:

ci è il valore del conteggio riscontrato nella capsula i.

n è il numero delle osservazioni


21;

21 npnG

accettabile


INOCULOI conteggi sono ACCETTABILI ed è possibile esprimere il risultato come media delle n prove in parallelo

21;

21

21; npnnp G

criticoLa compatibilità tra i conteggi deve essere considerata CRITICA e meritevole di approfondimento prima di esprimere il risultato delle n prove in parallelo

21;

21 npnG

insufficiente

La compatibilità tra i conteggi deve essere considerata INSUFFICIENTE e le prove in parallelo non possono essere considerate valide


Criteri per l’accettabilità della proporzionalità

INOCULO

21;

1

1

11

2 lnln2

npm

i

m

iim

ii

m

i i

iisper

R

CC

R

CCG

dove:

Ci sono la somma dei conteggi sullo stesso campione ai rispettivi rapporti di diluizione Ri.

21; npPer calcolare il utilizzare un livello di probabilità p = 0,95 e i gradi

di libertà si calcolano facendo il numero delle diluizioni –1.


Valutazione idoneità complessiva dell’inoculoPer l’operatore in formazione e per quello già idoneo alla

mansione ma non coinvolto nell’attività routinaria

Il sistema permette inoltre di valutare il contributo alla dispersione dei risultati dovuto a:

a- dispersione legata agli inoculi delle diverse repliche (ripetibilità)

b-dispersione legata alla preparazione delle diluizioni utilizzate negli inoculi (proporzionalità)

Il Gtot2 viene calcolato utilizzando la seguente equazione:

j

jj

j

jJTOT R

cc

R

ccG lnln*22

dove Cj sono le singole letture ai rispettivi rapporti di diluizioni Rj

Il valore di Gtot2 è confrontato con il valore teorico della distribuzione del con

g.l.= numero di piastre esaminate-1 alla p=0.95.

Quindi l’analisi della dispersione totale risulterà accettabile e quindi l’operatore idoneo alla mansione dell’inoculo quando il Gtot

2 risulta < di .

2sp


Valutazione idoneità complessiva dell’inoculoPer l’operatore già idoneo alla mansione ma coinvolto

nell’attività routinaria

Valutare trimestralmente la dispersione dei dati osservata tra le singole repliche e tra le singole diluizioni effettuate durante le analisi routinarie attraverso la sommatoria dei singoli G2 secondo la seguente equazione:

n

iitàripetibili GG

1

22

n

iialitàproporzion GG

1

22

dove Gi2 sono le dispersioni ottenute sulle singole repliche o sulle singole diluizioni e n

è il numero di prove effettuate.

La dispersione dei dati tra prove indipendenti comprendenti lo stesso numero di repliche o di diluizioni è accettabile quando:

2..

2lgtàripetibiliG

g.l. del 2 =n.di piastre considerate-1

2..

2lgalitàproporzionG

g.l. del 2 =n.di diluizioni considerate-1

L’operatore già idoneo alla mansione, mantiene quindi la sua idoneità se ogni tre mesi rispetta i criteri sopraesposti.


RIPETIBILITA’ E RIPRODUCIBILITA’ CONTEGGIO

Operatori in formazione e tutti gli operatori già idonei alla mansione

Il RS sceglie delle piastre, con e senza identificazione morfologica in fase di lettura, tra quelle con una contaminazione compresa tra 15 e 300 colonie, ottenute dalle analisi di laboratorio routinarie.Il RS sceglierà, volta per volta, a rotazione tra i terreni in uso nel laboratorio, su quale di essi effettuare la prova con identificazione morfologica.

Questo tipo di prova va eseguita inoltre da tutti gli operatori idonei alla mansione del conteggio quando nelle analisi routinarie di laboratorio vengono introdotti nuovi terreni con identificazione morfologica.


Gli operatori coinvolti in questa prova sono almeno tre operatori, due tra quelli in formazione o già idonei alla mansione e il Responsabile della Sezione (RS).

RIPETIBILITA’ E RIPRODUCIBILITA’ CONTEGGIO

Operatori in formazione e tutti gli operatori già idonei alla mansione

La valutazione della differenza statistica dei conteggi effettuati dall’operatore e dal RS permette di attestare l’idoneità al conteggio.

I conteggi devono essere eseguiti più volte ed in tempi brevi dagli operatori in modo da non poter essere influenzati dalla conoscenza dei risultati ottenuti in precedenza da essi stessi o da altro operatore, quindi occorre somministrare le piastre in maniera cieca.



CONTEGGIO

n

uu

n

i

A

1

2

2

Scarto tipo:

1

2

n

CCs i

Scarto tipo relativo: C

sui

La ripetibilità di conteggio dell’operatore A è calcolata mediante la valutazione della media quadratica degli scarti tipo relativi alle singole serie di conte e si determina attraverso il calcolo della media quadratica degli STR ottenuti nelle singole prove, grazie alla formula

Ci il conteggio ottenuto sulla piastra

il conteggio medioC


•per le conte effettuate con interpretazione della tipicità delle colonie, le prestazioni dell’operatore sono considerate accettabili se:

u(operatore) ≤ 0,1

I criteri di accettabilità della ripetibilità del conteggio dell’operatore sono i seguenti:

•per le conte effettuate su piastre in cui il conteggio non prevede l’interpretazione della tipicità della colonia, le prestazioni dell’operatore sono considerate accettabili se:

u(operatore) ≤ 0,02


CONTEGGIO


Criteri per l’accettabilità della riproducibilità

Per verificare se i tre operatori coinvolti nella prova contano in maniera equivalente si applica l’analisi della dispersione sperimentale tra i conteggi effettuati in parallelo dagli operatori.

Si procede come segue:

• Operatore valutato vs. RS: vengono confrontati i quattro conteggi effettuati su ogni piastra dai due operatori presi in considerazione, calcolando l’indice di dispersione sperimentale in base all’equazione sottoriportata;

i

i

isp C

C

Cn 22

dove Ci è il valore di conteggio riscontrato nella capsula

•Operatore valutato vs. altro operatore coinvolto nella prova: vengono confrontati i quattro conteggi effettuati su ogni piastra dai due operatori presi in considerazione, calcolando l’indice di dispersione sperimentale


1 21;

2 npsp

I conteggi sono accettabili e quindi i due operatori contano in maniera equivalente

2 2

1;22

1; npspnp La compatibilità tra i conteggi deve essere considerata critica e l’equivalenza di lettura tra i due operatori è meritevole di approfondimento

3 21;

2 npsp

La compatibilità tra i conteggi deve essere considerata insufficiente e quindi i due operatori non contano in maniera equivalente

Criteri per l’accettabilità della riproducibilità

Nel caso in cui i ottenuti dall’operatore valutato, sia rispetto al RS che all’altro operatore, risultino accettabili nel 95% dei casi, si ritiene che l’operatore conti in maniera riproducibile.

2sp

Confrontando l’indice di dispersione sperimentale , con quello limite tabulato si possono verificare i tre casi riportati in tabella

2sp


VALUTAZIONE COMPLESSIVA DEL LABORATORIO

Viene calcolata la dispersione dei dati ottenuti su diverse repliche o su diverse diluizioni sommando le dispersioni ottenute dai singoli operatori

n

iilabrip GG

1

22..

21;95.0

2.. nplabripG

n

iilabpropor GG

1

22..

2.1;95.0

2.. nplabproporG

Il laboratorio per fornire una dimostrazione oggettiva del suo modo di operare controlla e registra trimestralmente la capacità operativa dei suoi operatori mentre ogni sei mesi valuta complessivamente tutti gli operatori.

Di tale convalida viene tenuta la registrazione delle prove eseguite e dei risultati ottenuti.

dove Gi sono le singole dispersioni ottenute dagli n operatori presenti in laboratorio nelle prove di valutazione della ripetibilità e della proporzionalità.


VALUTAZIONE COMPLESSIVA DEL LABORATORIO

conteggio

La ripetibilità di conteggio totale del laboratorio è data invece dalla media quadratica della ripetibilità dei singoli operatori

n

RR

n

I

L

1

2

I criteri di accettabilità del dato Rlaboratorio sono gli stessi utilizzati per la ripetibilità di conteggio dell’operatore


Il Laboratorio risulta quindi complessivamente idoneo all’esecuzione delle analisi microbiologiche quantitative poiché tutti gli operatori mostrano abilità e competenza nell’esecuzione dell’inoculo e del conteggio.


Azioni correttive in caso di non conformità dell’operatore

Per l’operatore in formazione e per gli operatori non coinvolti nell’attività routinaria, le non conformità riscontrate durante l’esecuzione delle prove specifiche riguardanti l’inoculo e/o il conteggio,

deve esercitare le sue capacità di inoculo e/o di conteggio affiancando gli operatori già idonei alla mansione durante l’attività di laboratorio routinaria e dopo un congruo periodo di tempo, a giudizio del RS, ripetere le prove specifiche in cui si sono verificate le non conformità.

PROVVISORIA NON IDONEITA’ ALLA MANSIONE



Se dall’elaborazione delle prove di ripetibilità e proporzionalità eseguite durante l’attività di laboratorio routinaria dall’operatore già idoneo all’esecuzione dell’inoculo si evince una non accettabilità dei risultati ottenuti

+

In caso di accettabilità dei risultati ottenuti da questa prova specifica l’operatore continua a mantenere l’idoneità all’esecuzione del conteggio.

occorre verificare l’effettiva idoneità dell’operatore sottoponendolo alla prova specifica.

+



Nel caso invece di non conformità riscontrate durante l’esecuzione delle prove per la ripetibilità e riproducibilità del conteggio

occorre eseguire nuovamente la prova, dopo aver esercitato la capacità di conteggio affiancando il RS nelle letture dei terreni.

+


FREQUENZE DELLA VALUTAZIONETIPO DI ATTIVITA’ FREQUENZA

Operatore in formazione

Prova per la valutazione ripetibilità dell’inoculoEntro 1 mese

Prova per la valutazione proporzionalità dell’inoculo

Prova per la valutazione ripetibilità del conteggioEntro 3 mesi

Prova per la valutazione riproducibilità del conteggio

Operatore già idoneo alla mansione (impiegato nell’attività routinaria di laboratorio)

Valutazione ripetibilità dell’inoculo durante attività routinaria 20 prove ogni 2 mesi

Valutazione proporzionalità dell’inoculo durante attività routinaria

15 prove ogni 6 mesi

Prova per la valutazione ripetibilità del conteggio Ogni 6 mesi

Prova per la valutazione riproducibilità del conteggio Ogni 6 mesi

Operatore già idoneo alla mansione (non impiegato nell’attività routinaria di laboratorio)

Prova per la valutazione ripetibilità dell’inoculo annuale

Prova per la valutazione proporzionalità dell’inoculo annuale

Prova per la valutazione ripetibilità del conteggio Ogni 6 mesi

Prova per la valutazione riproducibilità del conteggio Ogni 6 mesi


Prove idoneità all’esecuzione dell’inoculoOperatore in formazione o non coinvolto nell’attività

routinaria

Un operatore non coinvolto nella prova ma già idoneo alla mansione prepara un campione contaminato con ceppi batterici secondo la procedura

Gli operatori devono eseguire questa prova devono effettuare, nell’arco della stessa giornata sul campione preparato in laboratorio:- TRE DILUZIONI del campione ( TQ, 1:2,1:10)-Per ogni diluzione 5 PROVE IN PARALLELO


FASI SVOLTE DA UN OPERATORE GIA’ IDONEO ALLA MANSIONE CHE NON PARTECIPA ALLA PROVA

FASE SVOLTE DALL’OPERATORE VALUTATO

SCHEMA PER L’ALLESTIMENTO DILUIZIONI ESCHERICHIA COLI

Tecnica per filtrazione

1 McF = 3x108 cellule/ml

DILUIZIONE 10-1: 100 l (3x108 cellule/ml) + 900 l fisiologica = 1 ml (3x107 cellule/ml) DILUIZIONE 10-2: 100 l (3x107 cellule/ml) + 900 l fisiologica = 1ml (3x106 cellule/ml)DILUIZIONE 10-3: 100 l (3x106 cellule/ml) + 900 l fisiologica = 1 ml (3x105 cellule/ml)DILUIZIONE 10-4: 100 l (3x105 cellule/ml) + 900 l fisiologica = 1 ml (3x104 cellule/ml)DILUIZIONE 10-5: 1 ml (3x104 cellule/ml) + 9 ml fisiologica = 10 ml (3x103 cellule/ml)DILUIZIONE 10-6: 3 ml (3x103 cellule/ml) + 6 ml fisiologica = 9 ml (1x103 cellule/ml)DILUIZIONE 10-7: 2 ml (1x103 cellule/ml) + 18 ml fisiologica = 20 ml (1x102 cellule/ml)Terreno utilizzato: m-ENDO

CAMPIONE DI PARTENZA: 20 ml di diluzione 10-7 con 100 cellule/ml

Preparare 5 provette di a)DIL 1: 1 ml (100 cellule/ml) + 9 ml fisiologica = 10 ml (10 cellule/ml)Filtrare ogni provetta Risultato atteso:100 celluleDILUIZIONE 10-8: 5 ml (100 cellule/ml) + 5 ml fisiologica = 10 ml (50 cellule/ml)

Preparare 5 provette di a)DIL 2: 1 ml (50 cellule/ml) + 9 ml fisiologica = 10 ml (5 cellule/ml)Filtrare ogni provetta Risultato atteso: 50 celluleDILUIZIONE 10-9: 1 ml (100 cellule/ml) + 9 ml fisiologica = 10 ml (10 cellule/ml)Preparare 5 provette di:•DIL 3 : 1 ml (10 cellule/ml) + 9 ml fisiologica = 10 ml (1 cellula/ml)Filtrare ogni provetta Risultato atteso:10 cellule


Occorre seguire la seguente prova per ogni tecnica diversa di inoculo secondo le informazioni:

Tecnica da testare

Terreno da utilizzare

Ceppo batterico

MdP di riferimento

Inclusione Water Plate Agar

E.coli n.2: Carica batterica totale

Spatolamento Baird Parker S.aureo n.16:Stafilococco aureo negli alimenti

Filtrazione m-Endo E. coli n.51: Coliformi totali nelle acque

Prove idoneità all’esecuzione dell’inoculoOperatore in formazione o non coinvolto nell’attività

routinaria

L’operatore esegue l’inoculo con le rispettive diluzioni e repliche

Per il personale in formazione il conteggio viene eseguito dal RS che raccoglierà i dati


TAL QUALE 1:2 1:10

REPLICA 1 218 107 21

REPLICA 2 214 104 25

REPLICA 3 175 118 23

REPLICA 4 203 102 28

REPLICA 5 197 126 30

MEDIA 201,4 111,4 25,4 TOTALE 1,73 TOTALE ACCETTABILE

G 2n-1 REPLICHE 5,837 3,7139 2,095

Accettabilità ripetibilità dei risultatiACCETTABILE ACCETTABILE ACCETTABILE

DATA: 10/07/04OPERATORE VALUTATO: Elisa CodegaTECNICA ANALITICA TESTATA:spatolamentoTERRENO UTILIZZATO:T7+TCC

DILUIZIONI VALUTAZIONE PROPORZIONALITA' DELL'INOCULO

G 2 sper PROPORZIONALITA'0,006 ACCETTABILE

0,656 ACCETTABILE

VALUTAZIONE RIPETIBILITA' DELL'INOCULO

0,013 ACCETTABILE

2,071 ACCETTABILE

0,710 ACCETTABILE


TAL QUALE 1:2 1:10REPLICA 1 218 107 21REPLICA 2 214 104 25REPLICA 3 175 118 23REPLICA 4 203 102 28REPLICA 5 197 126 30MEDIA 201,4 111,4 25,4 TOTALE 1,73 TOTALE ACCETTABILE

G 2n-1 REPLICHE 5,837 3,7139 2,095

Accettabilità ripetibilità dei risultati ACCETTABILE ACCETTABILE ACCETTABILE

11,646

NON CONFORMITA' RISCONTRATE____________________________________________

IDONEITA' ALL'INOCULO SI NO

PROVA DI IDONEITA' ALL'ESECUZIONE DELL'INOCULO PER L'OPERATORE IN FORMAZIONE

DATA: 10/07/04OPERATORE VALUTATO: Elisa CodegaTECNICA ANALITICA TESTATA:spatolamentoTERRENO UTILIZZATO:T7+TCC


G 2 sper PROPORZIONALITA'0,006 ACCETTABILE0,656 ACCETTABILE0,013 ACCETTABILE2,071 ACCETTABILE0,710 ACCETTABILE

VALUTAZIONE RIPETIBILITA' DELL'INOCULO ANALISI DELLA DISPERSIONE TOTALE

G2 totale 7,54 ACCETTABILE

3,457

Il calcolo dell’accettabilità dei risultati viene eseguito automaticamente secondo il seguente criterio:

G2n-1 <9,488: RIPETIBILITA’ ACCETTABILE

9,488< G2n-1 >13,277: RIPETIBILITA’ CRITICA

G2n-1 >13,277: RIPETIBILITA’ NON ACCETTABILE


TAL QUALE 1:2 1:10REPLICA 1 300 120 32REPLICA 2 251 80 18REPLICA 3 200 83 21REPLICA 4 255 90 26REPLICA 5 300 119 23MEDIA 261,2 98,4 24 TOTALE 3,65 TOTALE ACCETTABILE

G 2n-1 REPLICHE 27,160 15,4308 4,651

Accettabilità ripetibilità dei risultati NON ACCETTABILE NON ACCETTABILE ACCETTABILE


IDONEITA' ALL'INOCULO SI NO

G2 totale 23,73 NON ACCETTABILE

5,587 CRITICA

VALUTAZIONE RIPETIBILITA' DELL'INOCULO ANALISI DELLA DISPERSIONE TOTALE

2,305 ACCETTABILE8,853 NON ACCETTABILE

4,910 CRITICA13,974 NON ACCETTABILE

TERRENO UTILIZZATO:T7+TCC


G 2 sper PROPORZIONALITA'

PROVA DI IDONEITA' ALL'ESECUZIONE DELL'INOCULO PER L'OPERATORE IN FORMAZIONE

DATA: 10/07/04OPERATORE VALUTATO: -----------TECNICA ANALITICA TESTATA:spatolamento


Gsper<3.841: PROPORZIONALITA’ ACCETTABILE3.841< Gsper >6.635: PROPORZIONALITA’ CRITICAGsper >6.635 PROPORZIONALITA’ NON ACCETTABILE


Gli operatori, durante l’attività routinaria di laboratorio, devono eseguire in maniera randomizzata delle prove in parallelo e delle diluizioni su campioni reali al fine di valutare la ripetibilità e la proporzionalità nell’inoculo.

Il RS si occuperà poi di effettuare le letture, raccogliere i dati compilando il Modulo 2 e la proporzionalità degli operatori compilando il Modulo 3.

Prove idoneità all’esecuzione dell’inoculoOperatore coinvolto nell’attività routinarai


NOME OPERATORE: XXXXXXXXXXX

MESE DI febbraio-marzo

ANNO:

DATA TERRENO NRGAREPLICA

1REPLICA

2MEDIA G n-1

2 RIPETIBILITA'

febbraio PCA 37AM 23 20 21,5 0,21 ACCETTABILEfebbraio BP 84AL 24 15 19,5 2,10 ACCETTABILEfebbraio Bcereus 91CQ 154 137 145,5 0,99 ACCETTABILEfebbraio Bcereus 91CQ 141 148 144,5 0,17 ACCETTABILEfebbraio CID 92CQ 59 73 66 1,49 ACCETTABILEfebbraio CID 92CQ 59 58 58,5 0,01 ACCETTABILEfebbraio MCK 288TA 254 266 260 0,28 ACCETTABILEfebbraio CID 355AL 200 180 190 1,05 ACCETTABILEfebbraio PCA 393TA 114 107 110,5 0,22 ACCETTABILEfebbraio PCA 455TA 114 107 110,5 0,22 ACCETTABILEmarzo MCK 498TA 390 387 388,5 0,01 ACCETTABILEmarzo TSC 552CQ 27 24 25,5 0,18 ACCETTABILEmarzo TSC 552CQ 37 31 34 0,53 ACCETTABILEmarzo BP 466AL 90 100 95 0,53 ACCETTABILEmarzo MCK 575TA 24 23 23,5 0,02 ACCETTABILEmarzo PCA 634AL 180 166 173 0,57 ACCETTABILEmarzo PCA 743TA 98 81 89,5 1,62 ACCETTABILEmarzo PCA 744TA 101 89 95 0,76 ACCETTABILEmarzo WPCA 803AP 23 20 21,5 0,21 ACCETTABILEmarzo WPCA 804AP 49 57 53 0,60 ACCETTABILE

n° %

20 1000 00 0

11,76


TOTALE PROVE ACCETTABILITOTALE PROVE NON ACCETTABILI

TOTALE PROVE CRITICHE

VALUTAZIONE RIPETIBILITA' DELL'OPERATORE GIA' IDONEO ALLA MANSIONE

VALUTAZIONE RIPETIBILITA' OPERATORE

VALUTAZIONE RIPETIBILITA' TOTALE

G2 totale dell'operatore ACCETTABILE

NOME OPERATORE: XXXXXXXXXXXX

MESE DI febbraio-maggio

ANNO: 2004

DATA TERRENO NRGA Dil Valori SommaRapporto diluizione

G2 sper Proporzionalità

454

46

287

31

146

65

240

27

228

30

333

25

257

17

177

18

200

15

171

16

n° %

10 200

0 0


G 2 totale operatore 2,9726 ACCETTABILE

TOTALE PROVE ACCETTABILI

TOTALE PROVE NON ACCETTABILI

VALUTAZIONE PROPORZIONALITA' TOTALE

171 100,0659 ACCETTABILE

16 1maggio PCA 2008AL

1

2


15 1maggio PCA 2048AL

1

2


18 1aprile PCA 1348AL

1

2


17 1aprile PCA 1087AL

1

2


25 1marzo CID 1016MV

1

2


30 1marzo MCK 1008AL

1

2


27 1marzo PCA 937TA

1

2


65 1febbraio PCA 888AL

1

2

0,1629 ACCETTABILE2 31 1

2 46 1

febbraio TSC 91CQ

1 287 10

Valutazione proporzionalità

febbraio TSC 91CQ

1 454 100,0072 ACCETTABILE


G2n-1 <3,841: RIPETIBILITA’ ACCETTABILE

3,841<G2n-1 >6,635: RIPETIBILITA’ CRITICA

G2n-1 >6,635: RIPETIBILITA’ NON ACCETTABILE


Prove idoneità all’esecuzione del conteggio

Tutti gli operatori

Gli operatori coinvolti in queste prove sono almeno tre, due tra quelli già idonei alla mansione o in formazione e il Responsabile Subunità (RS).Per questa prova è opportuno utilizzare le stesse capsule Petri per tutti gli operatori usandone una serie che comprenda terreni per i quali sia prevista o meno identificazione morfologica in fase di lettura scelte tra quelle ottenute dalle diverse determinazioni di routine con una contaminazione compresa tra 15 e 300 UFC seguendo i criteri riportati in tabella 3

Terreno Parametro Matrice N° di piastre Senza identificazione morfologica

Plate Count agar Carica Batterica totale Alimenti e Acque

5

Con identificazione morfologica

Variabile Variabile Alimenti e Acque

5


Il RS sceglierà, volta per volta, il terreno dove viene prevista l’identificazione morfologica con cui eseguire la prova, utilizzando dei criteri di rotazione rispetto ai terreni utilizzati all’interno del laboratorio.

L’operatore dovrà seguire i criteri di conteggio riportati nel MdP di riferimento e per i terreni con identificazione morfologica dovrà eseguire il conteggio delle colonie che in fase di lettura vengono presuntivamente attribuite al germe ricercato (solo colonie reputate TIPICHE).


Tutti gli operatori


Ogni operatore dovrà eseguire conteggi in doppio in modo da non essere influenzato da quelli ottenuti in precedenza da esso stesso o da altri operatori.Per ottenere questo risultato occorre che vengano assegnate in maniera cieca le piastre agli operatori coinvolti


Tutti gli operatori

Una volta che il foglio di lavoro personale risulterà compilato in tutte le sue parti l’operatore consegnerà i risultati al RS


1. il RS esegue il primo conteggio delle piastre, riportandolo nell’allegato 2, durante l’attività routinaria di lettura in laboratorio e se reputa le piastre adatte all’esecuzione della prova le ripone in cella a 4°C e comunica la disponibilità di piastre per l’esecuzione delle prove agli altri operatori;

2. Un operatore che non partecipa alla prova, distribuisce le piastre agli operatori che devono eseguire la prova cancellando il codice identificativo, la diluizione e la data dalla piastra ed attribuendo un codice numerico seguendo la tabella riportata nell’allegato 3;

3. Gli operatori coinvolti nella prova, tranne il RS, eseguono nell’arco della mattinata, la prima replica di conteggio e segnano il risultato su un foglio di lavoro personale riportato nell’allegato 2;

4. L’operatore che non partecipa alla prova cancella nuovamente i codici dalle piastre ed attribuisce un nuovo codice seguendo lo schema riportato nella tabella dell’allegato 2 e ripone le piastre in cella a 4°C;

5. Gli operatori e il RS eseguono, entro 24 ore dal primo conteggio, la seconda replica di conteggio e riportano il risultato ottenuto sul foglio di lavoro personale riportato nell’allegato 3.

Lecco 15-16 dicembre 2005Il Responsabile della sezione di Microbiologia

Tabella attribuzione piastre e letture del RSProva per la ripetibilità/riproducibilità del conteggio dell’operatoreSCAMBIO DI PIASTRE EFFETTUATO DA:_________________OPERATORI CONVOLTI NELLA PROVA:___________________________________

DATA IDENTIFICATIVO

CAMPIONE

TERRENO UTILIZZATO N° attribuito alle piastre nel primo

conteggio

N° attribuito alle piastre nel secondo

conteggio

1 14

2 20

3 16

4 19

5 11

6 15

7 13

8 17

9 12

10 18

Il Responsabile della sezione di Microbiologia


OPERATORE VALUTATO:Elisa Codega

PROVA TERRENO Replica 1 Replica 2 Media Varianza s u i u i2 TIPO DI CONTEGGIO

1 PCA 221 226 223,5 12,5 3,54 0,0158 0,000252 PCA 210 212 211 2 1,41 0,0067 4,49E-053 PCA 122 121 121,5 0,5 0,71 0,0058 3,39E-054 PCA 97 97 97 0 0,00 0,0000 05 PCA 103 108 105,5 12,5 3,54 0,0335 0,0011236 CID 53 52 52,5 0,5 0,71 0,0135 0,0001817 CID 49 51 50 2 1,41 0,0283 0,00088 BP 91 89 90 2 1,41 0,0157 0,0002479 BP 77 77 77 0 0,00 0,0000 0

10 MYP 35 38 36,5 4,5 2,12 0,0581 0,003378


PROVE DI IDONEITA' ALL'ESECUZIONE DEL CONTEGGIO: valutazione ripetibilità

DATA:03/07/04

VALUTAZIONE RIPETIBILITA' DEL CONTEGGIORIPETIBILITA'

TOTALE MEDIA RIPETIBILITA'

Senza interpretazione della colonia

0,02 ACCETTABILE

Con interpretazione della colonia

0,0304 ACCETTABILE

Viene poi automaticamente calcolata , la ripetibilità dell’operatore sulla replica (u2i) e

quella totale ottenuta dall’operatore sul terreno senza identificazione morfologica (ua) e su quello con identificazione morfologica (ub)

Il calcolo dell’accettabilità dei risultati viene eseguito automaticamente secondo il seguente criterio:ua<0,02: RIPETIBILITA’ senza identificazione morfologica ACCETTABILEua >0,02: RIPETIBILITA’ senza identificazione morfologica NON ACCETTABILEub<0,1: RIPETIBILITA’ con identificazione morfologica ACCETTABILEub>0,1: RIPETIBILITA’ con identificazione morfologica NON ACCETTABILE


OPERATORE VALUTATO:Daniela Pilato

PROVA TERRENO Replica 1 Replica 2 Media Varianza s u i u i2 TIPO DI CONTEGGIO

1 PCA 77 60 68,5 144,5 12,02 0,1755 0,0307952 PCA 77 74 75,5 4,5 2,12 0,0281 0,0007893 PCA 44 43 43,5 0,5 0,71 0,0163 0,0002644 PCA 66 76 71 50 7,07 0,0996 0,0099195 PCA 45 43 44 2 1,41 0,0321 0,0010336 #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0!7 #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0!8 #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0!9 #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0!

10 #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0!

NON CONFORMITA' RISCONTRATE: non accettabilità della prova senza interpretazione della colonia….RIPETERE PROVA

PROVE DI IDONEITA' ALL'ESECUZIONE DEL CONTEGGIO: valutazione ripetibilità

DATA:14/06/04

VALUTAZIONE RIPETIBILITA' DEL CONTEGGIORIPETIBILITA'

TOTALE MEDIA RIPETIBILITA'

Senza interpretazione della colonia

0,09 NON ACCETTABILE

Con interpretazione della colonia

#DIV/0! #DIV/0!

n

uu

n

i

A

1

2

2

Scarto tipo:

1

2

n

CCs i

Scarto tipo relativo: C

sui

Ci il conteggio ottenuto sulla piastra

il conteggio medioC



Tutti gli operatori

Occorre inserire i conteggi ottenuti dagli operatori e dal RS sulla stessa piastra nel modulo 5 per verificare la dispersione dei dati ottenuti e quindi la riproducibilità dei conteggi ottenuti dai vari operatori.

Per confrontare la ripetibilità di conteggio dei vari operatori in automatico viene applicata l’equazione confrontando gli operatori a due a due per comprendere se i conteggi ottenuti dai vari operatori sono tra loro congruenti o statisticamente differenti.

i

i

isp C

C

Cn 22

dove Ci è il valore di conteggio riscontrato nella capsula


OPERATORI VALUTATI: A: Elisa Codega

221 225 218 225 221 218226 226 214 226 226 214122 125 114 125 122 114121 124 116 124 121 116

97 98 93 98 97 9397 98 92 98 97 92

103 110 102 110 103 102108 110 103 110 108 103210 224 214 224 210 214212 223 215 223 212 215

53 55 52 55 53 5252 55 54 55 52 5449 53 54 53 49 5451 52 54 52 51 5491 89 89 89 91 8989 89 88 89 89 8877 77 77 77 77 7777 77 77 77 77 7735 40 37 40 35 3738 38 37 38 38 37


accettabile

accettabile

DATA:03/07/04

PROVE DI IDONEITA' ALL'ESECUZIONE DEL CONTEGGIO: prova di riproducibilità

CONTEGGIO OPERATORE A E RS CONTEGGIO OPERATORE B E RS CONTEGGIO OPERATORE A E B

B: -------------

A RSRIPRODUCIBILITA'

BRIPRODUCIBILITA'

Xsp Xsp XspB RS

RIPRODUCIBILITA'A

PCA0,08 COMPATIBILITA' ACCETTABILE 0,45 COMPATIBILITA' ACCETTABILE 0,35 COMPATIBILITA' ACCETTABILE





CID0,13 COMPATIBILITA' ACCETTABILE 0,11 COMPATIBILITA' ACCETTABILE 0,05 COMPATIBILITA' ACCETTABILE

CID0,17 COMPATIBILITA' ACCETTABILE 0,05 COMPATIBILITA' ACCETTABILE 0,35 COMPATIBILITA' ACCETTABILE

BP0,03 COMPATIBILITA' ACCETTABILE 0,01 COMPATIBILITA' ACCETTABILE 0,05 COMPATIBILITA' ACCETTABILE

BP0,00 COMPATIBILITA' ACCETTABILE 0,00 COMPATIBILITA' ACCETTABILE 0,00 COMPATIBILITA' ACCETTABILE

MYP0,34 COMPATIBILITA' ACCETTABILE 0,16 COMPATIBILITA' ACCETTABILE 0,13 COMPATIBILITA' ACCETTABILE

Riproducibilita' operatore A: ELISA CODEGASenza identificazione morfologica non accettabile

Con identificazione morfologica non accettabile


OPERATORI VALUTATI:

42 41 77 41 42 7753 40 60 40 53 6064 72 77 72 64 7772 70 74 70 72 7444 38 44 38 44 4446 39 43 39 46 4352 56 66 56 52 6665 58 76 58 65 7639 35 45 35 39 4541 34 43 34 41 43

PROVE DI IDONEITA' ALL'ESECUZIONE DEL CONTEGGIO: prova di riproducibilità

CONTEGGIO OPERATORE A E RS CONTEGGIO OPERATORE B E RS CONTEGGIO OPERATORE A E B

A RSRIPRODUCIBILITA'

BRIPRODUCIBILITA'

Xsp Xsp XspB RS

RIPRODUCIBILITA'A

PCA2,50 COMPATIBILITA' ACCETTABILE 17,05 COMPATIBILITA' NON ACCETTABILE 11,14 COMPATIBILITA' CRITICA





DATA:14/06/04B: ----------------- A: -------------

Il criterio su cui si basa il confronto è il seguente:<7,815: DIFFERENZA ACCETTABILE e quindi OPERATORI CONGRUENTI7,815> >11,345: DIFFERENZA CRITICA >11,345: DIFFERENZA NON ACCETTABILE e quindi OPERATORI

STATISTICAMENTE DIFFERENTI

2sp

2sp

2sp

Nel caso in cui i ottenuti dall’operatore valutato, sia rispetto al RS che all’altro operatore, risultino accettabili nel 95% dei casi, si ritiene che l’operatore conti in maniera riproducibile.

2sp


MESE DI agosto-gennaio

ANNO:2003-2004

riproducibilità

VALUTAZIONE COMPLESSIVA DELL'IDONEITA' DEL LABORATORIO

R totale

ripetibilità

VALUTAZIONE CONTEGGIO

G 2tot G 2totAccettabilità

risultati

NOME OPERATORE

ripetibilità proporzionalità

VALUTAZIONE INOCULO

senza identificazione con identificazione

op 1 40 21,23 5 4,18 0,005 0,01 ACCETTABILE

op 2 33 37,87 8 3,28 0,02 0,03 ACCETTABILE

op 3 6 14,22 15 11,57 0,02 0,02 ACCETTABILE

op 4 4 14 10 21,97 0,02 0,03 ACCETTABILE

op 5 6 18,91 15 23,5 0,02 0,02 ACCETTABILE

op 6 6 15,33 15 4,068 0,007 0 ACCETTABILE

op 7 6 8,482 15 11,85 0,01 0,01 ACCETTABILE

op 8 6 13,9 15 21,2 0,01 0 ACCETTABILE

op 9 6 5,96 15 14,031 0,02 0,03 ACCETTABILE

senza ident. con identif ic. media

G2 totale 0,016 0,023 0,02

CONTEGGIO

routin

no attività routinaria

IDONEITA'

149,902 115,649

R totaleG 2tot G 2tot

Accettabilità risultati

NOME OPERATORE

113 113

INOCULORIPETIBILITA'

RIPETIBILITA' PROPORZIONALITA'

TOTALE PROVEX2 limite

IDONEITA'

PROSPETTO RIASSUNTIVO IDONEITA' DEL LABORATORIO

Accettabile: SI NOAccettabile: SI NO

Accettabile: SI NOAccettabile: SI NO

IDONEITA'

ACCETTABILE

Ripetibilità

113 113151 151

ACCETTABILE

Proporzionalità

CONTEGGIO

RipetibilitàRiproducibilità

INOCULO

Operatori coinvolti

nell’attività routinaria

Operatori non coinvolti nell’attività routinaria

Il Laboratorio risulta quindi complessivamente idoneo all’esecuzione delle analisi microbiologiche quantitative poiché tutti gli operatori mostrano abilità e competenza nell’esecuzione dell’inoculo e del conteggio.

Lecco 15-16 dicembre 2005 Valutazione performances delloperatore Elisa Codega Laboratorio di Sanità...

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