LCMS Cuadrupolo Simple de - agilent.com · Seminario en línea 28 Junio 2010 Juan Aybar...

Seminario en línea28 Junio 2010

Juan Aybar

[email protected]

Especialista GCMS/LCMS

AGILENT TECHNOLOGIES

LCMS Cuadrupolo Simple de Agilent. Un

modo sencillo de mejorar las

características de su método UV

mailto:[email protected]



Agenda

1. La nueva Agilent. Novedades en la gama de productos LC/MS

2. LC/MS Cuadrupolo Simple. La serie 6100 de Agilent Technologies. Mejoras en cada modelo

3. Un modo sencillo de mejorar el rendimiento de su método ultravioleta. Consideraciones prácticas y aplicaciones

Agilent 6150 SQ

Portafolio de productos de Agilent¡¡Crecimiento espectacular en los últimos años!!

GC-MS

GC/MS QQQGC/MS Sq

LC-MS

Sq

QQQQTOF

TOF

IPC-MS CE-MS

6490 Triple Quadrupole LC/MS System

with iFunnel Technology

4

6490 Triple Cuadrupolo LC/MS

¡Sensibilidad a nivel de zeptomoles!

Mucho mejor rendimiento en un equipo de tamaño reducido

iFunnel Technology

• Novedades en el sistema de muestreo iónico a Patm

• Mejoras en sensibilidad ESI 10X

• Mejora la robustez del ensayo, simplifica la preparación de muestra

Celda de colisión curva de diámetro disminuido

• Transmisión iónica eficiente, reducción de ruido

• Diseño Compacto

Nuevas capacidades de medida

• Aislamiento de precursores 0.4 m/z para reducción de interferencias

• Dynamic MRM

• Scanning dependiente de resultados

6540 Ultra High

Definition Q-TOF LC/MS

6540 UHD Q-TOF LC/MS¡Rendimientos de investigación en equipos de sobremesa!

Acceso rutinario a datos de alta resolución/masa exacta

• Mantenimiento automático de la calibración

• Sin influencia de las fluctuaciones de temperatura en el laboratorio

Rendimientos extraordinarios

• >40,000 resolución a 20 espectros /segundo

• 5 órdenes de magnitud de rango dinámico espectral

• <1 ppm MS; <2 ppm MS/MS

• Sensibilidad a niveles de QqQ

Hacia nuevas aplicaciones

• Análisis y caracterización de muestras complejas

• Mass Profiler Professional para análisis diferencial

• Screening de compuestos no-Target

• Qual / Quan – Capacidades cuantitativas garantizadas

Portafolio de productos de Agilent

Y ahora también…

Cromatografía Flash


Y ahora también…

Micro GC’s

GC/MS Ion Trap

Espectroscopía elemental

Absorción atómica ICP-OES

Espectroscopía molecular

UVIR

http://www.varianinc.com/nav/products/chrom/gcms/240ms&cid=LMKOOIIKFM


Y ahora también…

Difracción de Rayos X

Resonancia Magnética Nuclear

Agenda




Agilent 6150 SQ

Demanda de sistemas LCMS SQ en función de la industria

SQ Market Data (SDI Report 2009)

Skimmer Torr to mTorr

Octopole ion guide

Atmosphere to Torr transfer

capillary

++ ++

++++

+

quadrupole

HED detector

LensesmTorr to uTorr

HPLC inlet

Nebulizer

Nebulizer gas inlet

heated N2

High voltage electrode

Esquema de sistemas cuadrupolo simple Agilent Technologies Serie 6100

Agilent Technologies.Una apuesta segura en cuadrupolo simple

1. Más de 10 años de desarrollo de la plataforma LCMS SQ con mas de 3000 sistemas instalados

2. Líder de la industria en durabilidad y facilidad de uso

3. El más amplio rango de fuentes de ionización

4. La combinación 1290 Infinity LC/6150 ofrece la mayor capacidad de procesado y velocidad de scan con insuperable calidad espectral

5. Soluciones de software para entornos walk-up (EZ Access), rápida revisión de datos (Analytical Studio Reviewer) y trabajo con Mass Hunter para mejoras en análisis cuantitativo y reporting

6. Protección de la inversión con posibilidad de upgrades y crecimiento dentro de la plataforma usando el mismo software

Serie 6100B SQ. ¿Qué hay nuevo?

1290 Infinity LC1290 Binary

1290 Infinity LC1290 Binary

1200 Series1200 Isocratic

1200 Quaternary

1200 Binary

1200 Binary SL (RRLC)

1120 Compact LC1120 Isocratic

1120 Gradient

1260 Infinity LC1260 Isocratic

1260 Quaternary

1260 Binary

1220 Infinity LC1220 Isocratic

1220 Gradient

NUEVO Agilent 1200 Infinity SeriesPortfolio LC Analítico

LCMS

6130

LCMS

6150

LCMS

6120

Modelos de la Serie 6100B SQ

Nuevo LC/MS SQ portfolio dirigido a satisfacerlas necesidades de cada cliente y cada entornode trabajo:

6120 es el sistema que proporciona unamayor facilidad de uso y el punto de entradaideal para laboratorios que quieren añadir MSa sus capacidades

6130 es el sistema mas flexibleproporcionando el mayor rango de masa ysensibilidad

6150 es el sistema de mejor rendimientodirigido a entornos de trabajo de altaproductividad (velocidad de scan y fidelidadcromatográfica)

Especificaciones para la familia 6100B SQ

Specification G6120B G6130B G6150B

Mass Range 10-2000m/z 2-3000m/z 10-1350m/z

Scan Speed 2500u/s 2500u/s,

5250u/s

10000u/s,

2500u/s

POS/NEG Switching

Speed

300 msec 50 msec 20 msec

SIM Sensitivity *

reserpine

10pg

20:1 p-p

1pg

20:1 p-p

1pg

100:1 p-p

Scan Sensitivity

resperpine

None 50pg

20:1 p-p

50pg

20:1 p-p

Mass Accuracy

Mass Axis Stab.

+-0.13u

+-0.1u or 100ppm

12hrs

+-0.13u

+-0.1u or 100ppm

12hrs

+-0.13u

+-0.1u or 100ppm

12hrs

API-MS es un método de detección paramuestras en fase liquida (HPLC, FIA, Infusion).

La muestra se desolvata, ioniza y analizabasado en su relación masa/carga y finalmente detectada

Posibilidades ESI, APCI, APPI, MMI, nano-ESI, Chip-MS, ….

Algunas de sus principales aportaciones son: Compatibilidad con un amplísimo rango de compuestos Sensibilidad a nivel de fg - pg Información Cuantitativa/Cualitativa Mayor efectividad en trabajo en matriz compleja

Espectrometría de masas con ionización a presión atmosférica

Coulomb Explosions

Rayleigh

Limit

Reached

+ ++

++

++

++

+-

--

-

-

+ ++

++

++

++

+----

-+

+++++ --

+

+++++ --

Evaporation

+

+

Charged Droplets

Analyte Ion

Solvent Ion Cluster

Analyte Ions

Solvent Ion Clusters

Salts/Ion pairs

Neutrals

Ionización por ElectrosprayTeoría

Proceso de ionización que usa un campo eléctrico para generar gotascargadas e iones de los analitos de interés por evaporación iónica parasiguiente análisis MS. El proceso es asistido neumáticamente

1220 Infinity LC + Agilent 6120 SQLa solución más fiable y económica para entrar en LCMS

- Análisis POS/NEG- Rango de masas hasta 2000 m/z- Amplio rango de fuentes disponibles- Autotune- Sensibilidad a nivel de pg- Toda las herramientas de software disponibles

Agilent 1290 Infinity LC Infinitamente Mejor para UHPLC y HPLC

MásFlexible

Más Sensible

MásPotente

El mejor en su clase

Sensibilidad UV : 2 – 20x con celda 1 cm

8 – 80x con celda UHS de 6 cm

Independiente de las condiciones.

Sensibilidad MS/MS: < 1 fg con “Jet Stream”.

Contaminación cruzada: < 0.002% Clorhexidina.

Admite todo tipo de columnas analíticas SIN limitación.

Permite transferir métodos DE / A cualquier (U)HPLC.

Inyección flexible: “flow-through” y con “loop” fijo.

La mayor capacidad de muestreo: > 2000 muestras/día.

Soluciones Multi-método y de Desarrollo Automatizado de

Métodos: hasta 8 columnas, 26 disolventes y 6 zonas de

temperatura.

El mejor en su clase

Resolución y Velocidad: 1200 bar (2 ml/min)

800 bar (5 ml/min)

20ul volumen retardo

Columnas RRHD (1.8µm / 1200bar): N=50.000 en 3min

Agilent Jet Stream – Generación Iónica de alto rendimiento

Dinámica de Gases

El gas supercalentado colima el spray del nebulizador y crea una fuente capaz de generar un mayor número de iones

Nozzle voltage

Capilar de muestreodieléctrico

Gas de nebulizacion

Gas de apoyo super-calentado

Gas de secado

Nebulizador mejoradode alta eficiencia

Patent Pending

6150B LCMS Cuadrupolo SimpleMejoras en sensibilidad - 1pg reserpina SIM

Para cualquier laboratorio haciendo tareas

de cuantificación esto implica mejoras

dramáticas en los LODs / LOQs

4 Inyecciones

Replicadas de Reserpina

S/N media (peak to

peak) > 100:1

Agilent Jet Stream para diferentes clases de compuestos Ideal para mezclas complejas en etapas de “drug discovery”

Month ##, 200X

Positiv

eN

egative

Versatility APCI MM AJS

Indole 3 2 1

Carbazole 2 1 3

Myristicin 3 2 1

Praziquantel 1 2 3

Ergocalciferol 2 1 3

1-naphthol 2 1 3

2-phenylphenol 1 2 3

9-phenanthrol 2 2 3

Uracil 1 3 2

Rank (Normalized) 30.9 29.1 40.0

Chromatographic

Performance APCI MM AJS

Indole 2 1 3

Carbazole 3 1 2

Myristicin 2 1 3

Praziquantel 2 1 3

Ergocalciferol 2 1 3

1-naphthol 2 1 3

2-phenylphenol 2 1 3

9-phenanthrol 3 1 2

Uracil 2 1 3

Rank (Normalized) 37.0 16.7 46.3

Mayores valores aseguran mejores resultados

Mejor ionización Menor anchura de pico

Agilent Jet Stream vs. ESIMejoras en anchura de pico

min0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9

0

1000000

2000000

3000000

4000000

5000000

6000000

7000000

8000000

9000000

0.2

25

0.2

90

0.3

33

0.8

03

min*0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9

0

1000000

2000000

3000000

4000000

5000000

6000000

7000000

8000000

9000000

0.2

25

0.2

91

0.3

35

0.8

03

0.79 sec

0.89 sec

0.92 sec

0.96 sec

0.83 sec

1.06 sec1.08 sec

1.01 sec

Señal: 5.9 X

Anchuras de Pico: 12 -15 %

menores

Agilent Jet Stream

Standard ESI source

Sensibilidad

mejorada

Picos

cromatográficos

más estrechos

Menores

posibilidades de

perder un

compuesto

(hombro de un

pico)

Ionización mejorada con AJS Más compuestos ionizados – Mayor productividad

100pg 9-fenantrol (MeOH)

APCI

Multimodo (MM)

AJS ( 4 X vs. MM)

Ejemplo de

ionización

negativa

con flujos

de 0.5

mL/min

Time (min)

Resp

onse

Scan a frecuencias de 10,000 Da / sec con resolución

isotópica del pico cromatográfico

Mayor confianza en la identificación de compuestos

min0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8

0

200000

400000

600000

800000

1000000

12000000.1

99

0.3

50

1.1

65

1.3

23

1.5

49

1.7

08

284 286

286

287

285

C10H9ClN4O2S

Todas las contribuciones isotópicas están presentes

Adquisición multi-señal con sistemas 6150 LCMS SQ

Adquisición de hasta 4 señales de modo simultáneo para maximizar el rendimiento del equipo

Modelo 6150 – Fast LC10.000 u/s20 ms POS/NEGMantenimiento de ratios isotópicos para una buena confirmación

Analytical Studio Reviewer (ASR) Rápida revisión de datos en entornos de máxima exigencia de procesado

•Reportingadaptable al gustodel usuario

•Fácil de usar

•Fácil de interpretar

•Confirmación depresencia decompuesto o purezade pico por MS/UV

Condiciones CEMuestra: 10mg/L alcaloides naturalesInyección: 500 mbar*sCapilar: 90 cm x 50 µm diámetro internoElectrolito: 50 mM ácido fórmico

200 mM trimethyl-b-CDPrecond.: run buffer, 4 min @ 1 barVoltaje: 30 kVTemp: 20 CDet.: Señal 200/10 nm

Condiciones MSSheath: 4 µL/min 5 mM acetato de

amonio en 50 % metanolGas nebulizador: nitrógeno, 10 psi Gas de secado: nitrógeno, 6 l/min, 300 CAcq.: pos. mode, Vcap - 4 kV, fragmentor 40 V, Gain 1, SIM (m/z 209.2, 304.1)

Análisis de pequeñas moléculas con CE-MS

min0 5 10 15 20 250

1000

2000

3000

4000SIM m/z = 290+304

m/z = 290

m/z = 304

Alcaloides naturales

El análisis en CE-MS

consigue detecciones

totalmente certeras en

matrices complejas Datos tomados de la Nota de

Aplicaciones 5968-9414E

Colección de fracciones basadas en m/z

Bomba auxiliar

Detector UV MSDDivisor

Colector fracciones

Flujo principal

Flujo dividido

Flujo auxiliar

El pico debe llegar al colector de fracciones DESPUÉS de ladetección en el espectrómetro

El retraso de tiempo entre el colector y el MS debe ser conocido y

REPRODUCIBLE FRACTION DELAY SENSOR

Configuración con MS

Mass based fraction collection

Colección basada en tiempo (6 fracciones)

Colección basada en picos (3 fracciones)

Colección basada en m/z (1 fracción)

Nota de aplicación: 5989-5937EN

HPLC-Chip/MSBeneficios

Columna de Enriquecimiento

Aguja de spray

µ-filtro

Columna Analítica

Poliimida Inerte Max. Eficiencia & Sensibilidad

Volumen muerto cero para mejorcromatografía

LC/MS sensibilidad

Sin problemas. Todo en Uno Canales creados por ablacion láser Columna Analítica Columna de Enriquecimiento Conexión con Microvalvula Punta de nano-electrospray Micro-filtros

Sin tiempos perdidos Sin obturaciones de la aguja de spray Recambios Plug-&-Play

HPLC-Chip Mejora Considerablemente las Prestaciones de la Nano-Cromatografía

10 12 14 16 18 20 22 24 Time [min]

0

2

4

6

x107

Intensity

0.0

0.5

1.0

1.5

2.0

x108

EIC m/z 985.6

Nanospray Convencional

75 µm x 150 mm

HPLC-Chip /MS

75 µm x 43 mm

NanoArea = ½ (46)(8e7) = 1.85e9

ChipArea = ½ (15.5)(2.3e8) = 1.78e9

Proporcionará mejor Sensibilidad y Resolución para la detección de

péptidos y componentes minoritarios

El HPLC-Chip puede también utilizarse como fuente nano-Electrospray convencional, con nano-columnas tradicionales y nano-agujas clásicas, o bien con el Chip de Infusión

15.7 secs

6 secs

• x2.5 capacidad de separación de picos• Reduce complejidad del MS • Reduce posibles supresiones ionización

HPLC-Chip/MS Mejora en Sensibilidad – Estudio Metabolitos: Incubación “in vitro” de 30µM Buspirona

Peaks 1 to 3 [M+H]+ = 376 N,N-desethyl hydroxybuspironePeaks 4 [M+H]+ = 360 N,N-desethyl buspirone

>100x sensibilidad

1 2

3

4

1

2

3

4

0 5 10 15 20 25 30 Time [min]

0

2

4

6

8

0 5 10 15 20 25 30 Time [min]

0

1

2

3

4

x10

1 2

3

4

1

2

3

4

0 5 10 15 20 25 30 Time [min]

0

2

4

6

8

0 5 10 15 20 25 30 Time [min]

0

1

2

3

4

6

x10 7

EIC m/z 360; 376Columna microbore

HPLC-Chip

Zorbax SB Aq 2.1 x 50 mm

Inj Vol = 5 µl

53 ng fármaco total inyectado

Enrichment : 40 nl Zorbax SB Aq 5umAnalytical 75 µm x 43mm Zorbax SB Aq 3.5umInj Vol = 5 ul

0.530 ng fármaco total inyectado

Posibilidad de trabajo MassHunter Qual/QuantBatch-at-a-glance. Vistas de batch procesado

Agenda




Agilent 6150 SQ

Consideraciones para el acoplamiento MS – HPLC• El paso a detección MS REQUIERE la formacion de iones

• Una formación iónica consistente y reproducible es la base para la obtención de medidas efectivas

• La formación de iones sigue normas bien conocidas tanto en el trabajo ESI/APCI

• La formación de iones en la fuente (interfase gas-liquido) es la clave del éxito

• El resto del sistema MS trabajando en rutina no requiere de grandes atenciones una vez se ha realizado el proceso de optimizacion

La importancia de la ionizacion

¿Cuándo es apropiado trabajar en ESI?

Electrospray puede usarse para trabajar con solutos ionizables de alto y bajo peso molecular

El analito de interés debe ser capaz de portar carga en solución

Ejemplos:

a) Muestras que contienen heteroátomos: carbamatos, benzodiacepinas

b) Acidos o bases

c) Especies iónicas: fosfatos, conjugados con grupos sulfato, aminas …

d) Muestras que se multi-cargan en disolucion (i.e. peptidos, proteinas, oligonucleotidos)

e) Compuestos que pueden aceptar carga inducida

A evitar – muestras con grupos no polares en los que la inducción de carga no se un proceso eficiente

¿Cuándo es apropiado trabajar en APCI?

Muestras

Compuestos de peso molecular/polaridad intermedias: PAHs, PCBs, ácidosgrasos, ftalatos.

Compuestos que no contienen grupos ácidos/básicos (e.g. hidrocarburos, alcoholes, aldehidos, cetonas y ésteres)

Muestras con heteroátomos: ureas, benzodiacepinas, carbamatos

Muestras que exhiben un mal comportamiento ESI

Parámetros en solución

Mucho menos sensible a las condiciones de disolución que ESI

Tolera mayores flujos que ESI

Acomoda algunos disolventes no compatibles normalmente con ESI

Muestras a Evitar

Debido a la evaporación previa – Muestras térmicamente lábiles

Muestras cargadas en disolución

Biomoléculas – Habitualmente no volatiles

MW = 308

100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 400 420

6000

14000

22000

30000

38000

46000

m/z-->

Abundance 309

[M+H]+

API-ES spectrum of Phenylbutazone

¿Qué información espectral se obtiene? Iones monocargados en ESI or APCI

650 700 750 800 850 900 950 1000 1050 1100 1150 1200 1250

Abundance

5000

10000

15000

20000

25000

30000

35000

40000

m/z-->

A+25

679.45

A+24

707.65

A+23

738.45

A+22

771.90

A+21

808.60 A+20

848.95A+19

893.55A+18

943.15A+17

998.55A+16

1060.85A+15

1131.50 A+14

1212.30

Abundance

16400 16600 16800 17000 17200 17400 17600m/z-->

40000

80000

120000

160000

200000

240000

280000A

16959.09Assume adduct is a proton:

M1=(A+n)/n

M2=(A+n+1)/(n+1)

Solve for A

API-ES spectrum of Myoglobin

¿Qué información espectral se obtiene? Iones poli-cargados en electrospray

Adaptar métodos existentes de LC a LC/API-MS

Sustituir tampones no volátiles por tampones volátiles a concentraciones <10 mM en ESI o <100 mM en APCI

• Substituir fosfatos y boratos por acetato amónico, formiato amónico o TFA

• Si no hay más remedio que usar un tampón no volátil, seleccionar uno en el que solo su catión/anión sea no volátil y usarlo a la concentración menor que sea posible (i.e. ammonium phosphate) manteniendo el i.d. de columna en el entorno - 2.1 o 1.0 mm y el flujo lo más bajo posible

Mantener el pH de la separación original usando aditivos volátiles – formico, acetico, TFA, hidróxido amónico

Usar reactivos de par iónico sólo cuando sea necesario – acido heptafluorobutirico (HFBA) y tributilamina (TBA)

Efecto de la concentración de tampón volátil sobre la señal ESI

A concentraciones elevadas de tampón el analito tiene dificultades para escapar de la gota. Moleculas más pequeñas como la cafeína se desorben antes en el proceso de ionizacion

43

ESI

0.00E+00

6.00E+06

1.20E+07

0 50 100 150 200 250 300 350

Concentration (mM)A

rea

Reserpine Caffeine

Análisis de Inyección de Flujo por APCIChequeo de las condiciones LC para mejorar la respuesta MS

44

Abundance

mAU

10

20

50000

100000

150000

2000

4000

min1 2 3 40

UV

EIC, m/z 285

TICScan mode

Signal suppression!

La señal de la sulfacloropiridazina es claramente suprimida porla presencia de la sal – HBSS – disolución salina de Hank

Ejemplo: Traslado de un método de identificación de impurezas en un formulado contral el asmaUso de tampón no volátil y necesidad de identificación de impurezas desconocidas

Situacion

• Método HPLC-UV contiene ácido fosfórico que se ha usado en fases de desarrollo y escalado

• Se observan picos inesperados al analizar controles de estabilidad

Solucion

• Desarrollo de un método HPLC-MS de rendimientocromatográfico compatible al HPLC-UV

• Identificación de impurezas por LC-MS

Comparación de métodos cromatográficos Análisis de ingredientes activos del formulado

LC-UV method

Solvent A = 0.03%Triethylamine in Water, pH adjusted to 3.0 with phosphoric acid. Solvent B = Acetonitrile

LC-UV-MS method

Solvent A = 0.1% Formic acid in Water, pH = 2.7. Solvent B = Acetonitrile

100

0

25

50

75

Acquisition Time (min)

2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24

DAD1 - B:Sig=280,10 Ref=550

mAU

API

- Mantener pH con aditivosvolatiles – i.e. formico

- Uso de reactivos de par-ionicosolo si estrictamente necesario

Comparación de resultados LC/UV - LC/MS Mezcla de test de Impurezas

1

40

42

44

46DAD1 - B:Sig=280,10


3 6 9 12 15 18 21 24

Resp

onse

(%

)

0

10

20

30

40+ TIC Scan

API*

Impurity A

Impurity G Impurity CImpurity D

Impurity E

*API- active pharmaceutical ingredient

Los cambioscromatográficos no han

afectado la separación/resolucion de

las impurezas

Información extra con adquisiciones MSAnálisis de impurezas en controles de estabilidad (dos meses)


3 6 9 12 15 18 21 24

Resp

onse

(%

)

-1.8

-1.2

-0.6

0.6

1.2

0

10

30

50

70

DAD1 - B:Sig=280,10

+ TIC Scan

Impurity A

Impurity GImpurity D

Unknown 358

Unknown 497

Impurity B

Dos nuevasimpurezas

desconocidasdeben ser

identificadas al superar el umbral

del 0.1%

MW: 358MW: 497

Aunque se ven en UV, no podemos

tener informacionestructural al

carecer de patrón

MS y UV proporcionan informacion complementariaImpurezas conocidas – Impureza B

2x10

0

- Scan (4.02-4.19 min)136.0

163.9112.6

3x10 - Scan (3.82-4.17 min)136.0

164.0

113.0

Counts vs. Mass-to-Charge (m/z)100 105 110 115 120 125 130 135 140 145 150 155 160 165 170 175 180 185

2x10 + Scan (3.94-4.16 min)138.0

166.0

3x10 + Scan (3.89-4.13 min)138.0

166.0

148.0111.0120.0 187.9 204.0 219.8 260.9100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280

MS+

MS-

Sample

Standard

Sample

Standard

Adquisicion y

evaluacion de

datos en +/-

Comparar muestra y

estandar para verificar la impureza

Revision de datos MS basandonos en DAD

La confirmacion de impurezas es sencilla cuando existen materiales de referencia

El caso complicadoEncontrar impurezas desconocidas usando UV y MS

-1

-0.5

0

6x106


18.2 18.4 18.6 18.8 19 19.2 19.4 19.6 19.8 20

TIC

DAD

+EIC 653

+EIC 498

Peak of Interest

Coeluting Peaks Not of Interest (See EIC for 653 below)

Peak of Interest

Not of Interest1.5x106

6x107

mA

U

• En el TIC, se observan picos coeluyendo

• El pico de interés se observa en DAD pero no

puede identificarse

• Los datos de espectro indican MW 653 y 498

a RTs similares

• Extracted Ion Chromatogram (EIC)

Ilustra cual es el pico de interés

• NO se requiere una gran resolucion cromatografica

para hacer el trabajo

Los datos de espectro identifican el pico de interesPeso molecular 497 confirmado

70%

Mass-to-Charge (m/z)

100%

%B

PI

- Scan

496.0

100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000

+ Scan498.2

260.3

100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000

Datos espectrales en ESI

positivo/negativo usados para la confirmación

Especificaciones para la familia 6100B SQ

Specification G6120B G6130B G6150B

Mass Range 10-2000m/z 2-3000m/z 10-1350m/z

Scan Speed 2500u/s 2500u/s,

5250u/s

10000u/s,

2500u/s

POS/NEG Switching

Speed

300 msec 50 msec 20 msec

SIM Sensitivity *

reserpine

10pg

20:1 p-p

1pg

20:1 p-p

1pg

100:1 p-p

Scan Sensitivity

resperpine

None 50pg

20:1 p-p

50pg

20:1 p-p

Mass Accuracy

Mass Axis Stab.

+-0.13u

+-0.1u or 100ppm

12hrs

+-0.13u

+-0.1u or 100ppm

12hrs

+-0.13u

+-0.1u or 100ppm

12hrs

Gracias por su atención

Juan AybarEspecialista de Producto GCMS/LCMS

Agilent Technologies Spain901.11.68.90

[email protected]

http://www.chem.agilent.com/en-

us/products/instruments/ms/6100SeriesQuadrupoleLCMSSystems/pages/default.aspx




http://www.chem.agilent.com/en-us/products/instruments/ms/6100SeriesQuadrupoleLCMSSystems/pages/default.aspx



LCMS Cuadrupolo Simple de - agilent.com · Seminario en línea 28 Junio 2010 Juan Aybar...

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