laporan mikro.docx

5/24/2018 laporan mikro.docx

1/37

PENDAHULUAN

Sistem imun manusia berperan penting dalam menghadapi infeksi dari

berbagai mikroorganisme yang pathogen. Imun manusia memiliki respon non-spesifik

dan spesifik. Imun manusia juga terdiri atas imunitas selular dan humoral. Disebut

imunitas selular karena imun yang bekerja saling berkomunikasi melalui sitokin.

Sedangkan yang imunitas humoral bereaksi dengan membentuk antibody yang

spesifik.

Mikroorganisme yang dapat menyerang manusia bervariasi dan masing-

masing memiliki ciri khas tersendiri. Karena itu dapat dilakukan berbagai

pemeriksaan yang akhirnya berguna untuk melakukan penegakan diagnosis.

Metode-metode yang dilakukan sebagian akan di perlihatkan melalui video

pada praktikum kali ini. Seperti mengambil specimen dengan swab pada luka maupun

daerah yang dicurigai terdapat mikroorganisme. Praktikum berlangsung tanpa dapat

dilakukan praktek dan hanya slide show dan video lecture saja.

TUJUAN

1. Umum.Bila dihadapkan pada kasus infeksi, mahasiswa mampu merencanakan

pemeriksaan laboratorium dan melakukan penilaian hasil pemeriksaan

mikrobiologi secara tepat dalam upaya menegakkan diagnosis, memantau

aktifitas penyakit dan pengobatan serta menentukan prognosis penyakit

infeksi.

2. Khusus- Serologi Infeksi

a. Memahami prinsip berbagai pemeriksaan serologi untuk mendiagnosispenyakit infeksi

b. Memahami cara pemeriksaan serologic. Mampu menginterpretasi hasil uji serologi, dengue, HIV, dan demam tifoid

- Uji Sensitifitas Mikrobaa. Memahami prinsip berbagai uji sensitifitas antibakteri, antijamur, dan

antivirus

b. Mampu menginterpretasi hasil uji sensitifitas antimikroba


2/37

- Teknik molecular untuk diagnosis infeksia. Memahami prinsip berbagai uji molecular penyakit infeksi

b. Mampu menginterpretasi hasil PCR untuk mendiagnosis penyakit infeksi- Mikroorganisme penyebab infeksi oportunis

a. Memahami sifat-sifat mikroorganisme penyebab infeksi oportunisb. Memahami cara pemeriksaan mikroorganisme penyebab infeksi oportunis

ALAT DAN BAHAN

1. Pengamatan- Mikroskop- Sediaan Mikroskopik- Slide Show- Alat Tulis- Buku Laporan Praktikum

2. Video Lecture

- LCD Projector

- Laptop

CARA KERJA

1. Pengamatan- Mengamati sediaan yang terbagi menjadi 5 baris meja- Menggambar hasil pengamatan pada mikroskopis dan menganalisis slide yang tertera

pada meja

- Menulis Laporan beserta pembahasannya2. Video Lecture

- Mengamati Video

- Melakukan Analisa

- Menulis Laporan beserta pembahasannya


3/37

DASAR TEORI

Pemeriksaan serologi adalah pemeriksaan yang menggunakan serum seperti pemeriksaan

pada dugaan demam dengue. Demam dengue dapat merupakan infeksi pertama kali yang

disebut infeksi primer dan dikenal sebagai demam dengue, serta infeksi kedua kali yangdisebut infeksi sekunder yang dapat menimbulkan penyakit demam berdarah yang dikenal

sebagai dengue haemorragic fever (DHF) yang dapat mengalami renjatan dan berakhir

dengan kematian. Pada demam dengue, pemeriksaan serologi yang tersedia adalah

pemeriksaan antigen NS-1, IgA-anti dengue, antibodi dengue IgG dan IgM.

Pemeriksaan antigen NS-1 dengue dapat dilakukan pada hari pertama sampai hari

kesembilan dari demam baik pada infeksi primer maupun infeksi sekunder, sehingga antigen

NS-1 ini merupakan pemeriksaan dini untuk mengetahui adanya infeksi dengan virus dengue.

Pada infeksi primer didapatkan kadar antibodi IgM setelah hari ke 4 5 demam dan

antibodi IgG akan timbul setelah hari ke 14 demam dan bertahan dalam jangka waktu yang

lama. Pada infeksi sekunder, antibodi IgG akan timbul lebih dahulu yaitu 1 2 hari setelah

gejala demam timbul dan antibodi IgM akan timbul pada setelah hari ke 510 demam.

Selain itu dikenal juga pemeriksaan antibodi dengue IgA yang merupakan pertanda

serologi infeksi yang aktif. Kadar antibodi dengue IgA lebih tinggi pada infeksi akut yang

akan mengalami renjatan dibanding dengan penderita infeksi primer/sekunder sehingga dapat

dikatakan kadar IgA berkorelasi dengan beratnya penyakit.

Pemeriksaan serologi tersebut di atas mempunyai hasil yang sangat bervariasi tergantung

pada respon imun penderita.

Pemeriksaan Widal adalah pemeriksaan yang bertujuan mengetahui adanya demam tifoid

yang disebabkan oleh infeksi kuman Salmonella typhi atau Salmonella paratyphi A,B,C.

Pemeriksaan Widal sering menunjukkan reaksi silang dengan kuman usus sehingga

pemeriksaan ini tidak bersifat spesifik. Untuk mendeteksi infeksi dengan Salmonella typhi

yang spesifik dapat diperiksa Salmonella typhiIgM.

Dalam percobaan ini akan dilakukan uji sensitifitas, yang merupakan suatu teknik untuk

menetapkan sensitifitas suatu antimikroba dengan mengukur efek senyawa tersebut pada

pertumbuhan suatu mikroorganisme, yaitu seberapa besar hambatan pertumbuhan yang dapat

dilakukan oleh antimikroba dan untuk mengetahui apakah suatu antimikroba dapat

membunuh jenis mikroba berspektrum luas atau hanya dapat membunuh satu jenis mikroba

yang disebut spektrum sempit, karena hanya beberapa penyakit yang tidak cocok dengan

antimikroba dan terhadap penyakit yang fatal, serta berhubungan dengan waktu inkubasi


4/37

untuk melihat antimikroba mana yang kerjanya lebih cepat menghambat atau membunuh

mikroba lain. Alasan penggunaan beberapa macam antimikroba yaitu untuk melihat

antimikroba mana yang kerjanya lebih cepat menghambat atau membunuh mikroba.

PCR (Polymerase Chain Reaction), metode ini mulai banyak dipergunakan. Pada cara ini

dilakukan perbanyakan DNA kuman yang kemudian diindentifikasi dengan DNAprobeyang

spesifik. Kelebihan uji ini dapat mendeteksi kuman yang terdapat dalam jumlah sedikit

(sensitifitas tinggi) serta kekhasan (spesifitas) yang tinggi pula. Spesimen yang digunakan

dapat berupa darah, urin, cairan tubuh lainnya serta jaringan biopsi.


5/37

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. MIKROSKOPIK- Aspergilus f lavus

Konidiofor tidak berwarna, kasar, berdinding tebal dan mengukur sampai 1 mm

panjang 10-20 um lebar. perluasan terminal menghasilkan bola atau vesikel subglobose, 10-

60 um dengan diameter. struktur ini membawa sterigmata atas seluruh permukaan dan ini

diatur dalam salah satu seri tunggal atau ganda. konidia yang pyriform untuk bulat, kasar

berdinding, tidak berwarna atau kuning-hijau dalam warna dan rata-rata diameter 3-4 um.

- Candida albicans

Candida albicans adalah spesies cendawan patogen dari golongan deuteromycota.

Spesies cendawan ini merupakan penyebabinfeksi oportunistik yang disebutkandidiasispada

kulit, mukosa, dan organ dalam manusia. Beberapa karakteristik dari spesies ini adalah

berbentuk seperti telur (ovoid) atau sferis dengandiameter 3-5 m dan dapat memproduksi

pseudohifa. Spesies C. albicansmemiliki dua jenis morfologi, yaitu bentuk seperti khamir
http://id.wikipedia.org/wiki/Spesieshttp://id.wikipedia.org/wiki/Cendawanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Patogenhttp://id.wikipedia.org/wiki/Deuteromycotahttp://id.wikipedia.org/wiki/Infeksi_oportunistikhttp://id.wikipedia.org/wiki/Kandidiasishttp://id.wikipedia.org/wiki/Kulithttp://id.wikipedia.org/wiki/Mukosahttp://id.wikipedia.org/wiki/Telurhttp://id.wikipedia.org/wiki/Diameterhttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Pseudohifa&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Khamirhttp://id.wikipedia.org/wiki/Khamirhttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Pseudohifa&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Diameterhttp://id.wikipedia.org/wiki/Telurhttp://id.wikipedia.org/wiki/Mukosahttp://id.wikipedia.org/wiki/Kulithttp://id.wikipedia.org/wiki/Kandidiasishttp://id.wikipedia.org/wiki/Infeksi_oportunistikhttp://id.wikipedia.org/wiki/Deuteromycotahttp://id.wikipedia.org/wiki/Patogenhttp://id.wikipedia.org/wiki/Cendawanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Spesies


6/37

dan bentukhifa.Selain itu,fenotipe atau penampakanmikroorganisme ini juga dapat berubah

dari berwarna putih dan rata menjadi kerut tidak beraturan, berbentuk bintang, lingkaran,

bentuk seperti topi, dan tidak tembus cahaya. Cendawan ini memiliki kemampuan untuk

menempel pada sel inang dan melakukan kolonisasi.

- Pewarnaan ziehl neelsen Mycobacterium tuberculosis

Pewarnaan Ziehl Neelsen, termasuk pewarnaan tahan asam. Biasanya dipakai untuk

mewarnai golongan Mycobacterium (M. tuberculosis dan M. leprae) dan

Actinomyces.Bakteri genus Mycobacterium dan beberapa spesies nocardia pada dinding

selnya mengandung banyak zat lipid (lemak) sehingga bersifat permeable dengan pewarnaan

biasa. Bakteri tersebut bersifat tahan asam (+) terhadap pewarnaan tahan asam. Pewarnaan

tahan asam dapat digunakan untuk membantu menegakkan diagnosa tuberculosis.Pewarnaan

ini merupakan prosedur untuk membedakan bakteri menjadi 2 kelompok tahan asam dan

tidak tahan asam. Bila zat warna yang telah terpenetrasi tidak dapat dilarutkan dengan

alkohol asam, maka bakteri tersebut disebut tahan asam sedangkan sebaliknya disebut tidak

tahan asam. Bahan pemeriksaan TB biasanya berupa sputum yang diambil dari pasien

tersangka KP (Koch pulmonum), tetapi dapat pula diambil dari lokasi lain seperti cairan otak

(Liquor Cerebro Spinalis), getah lambung, urine, ulkus, dll.

Prinsip Pewarnaan

Bakteri tahan asam (BTA) akan memberikan warna merah, sedangkan yang tidak tahan asam

akan berwarna biru.

Mycobacterium tuberculosis

Mycobacterium tuberculosisadalah bakteri penyebab penyakit tuberkulosa.Mycobacterium

tuberculosis pertama kali dideskripsikan pada tanggal 24 Maret 1882 oleh Robert Koch.

Bakteri ini juga disebut abasilusKoch.
http://id.wikipedia.org/wiki/Hifahttp://id.wikipedia.org/wiki/Fenotipehttp://id.wikipedia.org/wiki/Mikroorganismehttp://id.wikipedia.org/wiki/Bintanghttp://id.wikipedia.org/wiki/Lingkaranhttp://id.wikipedia.org/wiki/Cendawanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Tuberkulosahttp://id.wikipedia.org/wiki/24_Marethttp://id.wikipedia.org/wiki/1882http://id.wikipedia.org/wiki/Robert_Kochhttp://id.wikipedia.org/wiki/Robert_Kochhttp://id.wikipedia.org/wiki/Robert_Kochhttp://id.wikipedia.org/wiki/Robert_Kochhttp://id.wikipedia.org/wiki/1882http://id.wikipedia.org/wiki/24_Marethttp://id.wikipedia.org/wiki/Tuberkulosahttp://id.wikipedia.org/wiki/Cendawanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Lingkaranhttp://id.wikipedia.org/wiki/Bintanghttp://id.wikipedia.org/wiki/Mikroorganismehttp://id.wikipedia.org/wiki/Fenotipehttp://id.wikipedia.org/wiki/Hifa


7/37

- Klebsiella

Klasifikasi Klebsiella

Kingdom : Bacteria

Phylum : Proteobacteria

Class : Gamma Proteobacteria

Orde : Enterobacteriales

Family : Enterobacteriaceae

Genus : Klebsiella

Species : K. pneumonia

Klebsiella pneumoniapertama kali ditemukan oleh Carl Friedlander. Carl Friedlander

adalah patologis dan mikrobiologis dari Jerman yang membantu penemuan bakteri penyebab

pneumonia pada tahun 1882. Carl Friedlander adalah orang yang pertama kali

mengidentifikasi bakteri Klebsiella pneumonia dari paru-paru orang yang meninggal karena

pneumonia. Karena jasanya, Klebsiella pneumonia sering pula disebut bakteri Friedlander.

Klebsiella pneumonia adalah bakteri Gram negatif yang berbentuk batang (basil). Klebsiella

pneumonia tergolong bakteri yang tidak dapat melakukan pergerakan (non motil).

Berdasarkan kebutuhannya akan oksigen, Klebsiella pneumonia merupakan bakteri fakultatif

anaerob.

Klebsiella pneumonia menyebabkan pneumonia dapat menginfeksi tempat lain di

samping saluran pernafasan. Klebsiella merupakan suatu bakteri yang menimbulkan penyakit

infeksi saluran pernapasan atas (hidung) yang kronis dan endemik di berbagai negara,

termasuk Indonesia. Bakteri ini diberi nama berdasarkan penemunya, yaitu Edwin Klebs,


8/37

seorang ahli mikrobiologi jerman di abad ke-19. Bakteri genusKlebsiellatermasuk ke dalam

suku Klebsiellae, anggota famili Enterobacteriaceae.

Klebsiella pneumonia/Fridlander bacillusditemukan di dalam hidung, flora normal usus

dan akan patogen bila menderita penyakit lain (penyakit paru-paru yang kronis).

1. Klebsiella ozaena penyebab penyakit azoena : mukosa hidung menjadi atrpopisprogresif dan berlendir serta berbau amis

2. Klebsiella rhinoscleromatis : penyebab penyakit rhinocleloma yaitu penyakitmenahun berupa granula dengan tanda-tanda sclerosis dan hipertropi jaringan dan

menyebabkan kerusakan hidung dan farings.

3. Klebsiella aerogenes/Aerobacter aerogenesKuman ini mempunyai sifat sama dengan E. coli,terdapat di air, tanah, sampah dan lain

sebagainya.

Dibedakan pada tes IMVic

E. coli : ++

Klebsiella aerogenes : ++

Masuk dalam tubuh per oral, infeksi pada saluran urine biasanya setelah kateterisasi,

maka perlu tes resistensi dahulu : Pada pasien usia Lanjut atau pasien dengan respon imun

rendah, pneumonia tidak khas, yaitu berupa gejala non pernafasan seperti pusing, perburukan

dan penyakit yang sudah ada sebelumnya dan pingsan. Biasanya frekuensi napas bertambah

cepat dan jarang ditemukan demam.

Klebsiella pneumonia dapat memfermentasikan laktosa. Pada test dengan indol,

lebsiella pneumonia akan menunjukkan hasil negatif. Klebsiella pneumonia dapat mereduksi

nitrat. Klebsiella pneumonia banyak ditemukan di mulut, kulit, dan sal usus, namun habitat

alami dari Klebsiella pneumonia adalah di tanah.

Klebsiella pneumonia dapat menyebabkan pneumonia. Pneumonia adalah proses

infeksi akut yang mengenai jaringan paru-paru (alveoli). Pneumonia yang disebabkan oleh

Klebsiella pneumonia dapat berupa pneumonia komuniti atau community acquired


9/37

pnuemonia. Pneumonia komuniti atau community acquired pnuemonia adalah pneumonia

yang di dapatkan dari masyarakat. Strain baru dari Klebsiella pneumonia dapat menyebabkan

pneumonia nosomikal atau hospitality acquired pneumonia, yang berarti penyakit peumonia

tersebut di dapatkan saat pasien berada di rumah sakit atau tempat pelayanan kesehatan.

Klebsiella pneumonia umumnya menyerang orang dengan kekebalan tubuh lemah,

seperti alkoholis, orang dengan penyakit diabetes dan orang dengan penyakit kronik paru-

paru.

- Staphylococcus aureus

Staphylococcus aureus (S. aureus) adalah bakteri gram positif yang menghasilkan

pigmen kuning, bersifat aerob fakultatif, tidak menghasilkanspora dan tidak motil, umumnya

tumbuh berpasangan maupun berkelompok, dengan diameter sekitar 0,8-1,0 m. S. aureus

tumbuh dengan optimum pada suhu 37oC dengan waktu pembelahan 0,47 jam. S. aureus

merupakan mikroflora normal manusia. Bakteri ini biasanya terdapat pada saluran

pernapasan atas dan kulit. Keberadaan S. aureus pada saluran pernapasan atas dan kulit pada

individu jarang menyebabkan penyakit, individu sehat biasanya hanya berperan sebagai

karier. Infeksi serius akan terjadi ketika resistensi inang melemah karena adanya perubahan

hormon; adanya penyakit, luka, atau perlakuan menggunakan steroid atau obat lain yang

memengaruhi imunitas sehingga terjadi pelemahan inang.

Infeksi S. aureus diasosiasikan dengan beberapa kondisi patologi, diantaranya bisul,

jerawat,pneumonia,meningitis,danarthritits.Sebagian besar penyakit yang disebabkan oleh

bakteri ini memproduksi nanah, oleh karena itu bakteri ini disebut piogenik. S. aureus juga

menghasilkan katalase, yaitu enzim yang mengkonversi H2O2 menjadi H2O dan O2, dan

koagulase, enzim yang menyebabkan fibrin berkoagulasi dan menggumpal. Koagulase

diasosiasikan dengan patogenitas karena penggumpalan fibrin yang disebabkan oleh enzim
http://id.wikipedia.org/wiki/Bakteri_gram_positifhttp://id.wikipedia.org/wiki/Sporahttp://id.wikipedia.org/wiki/Mikroflora_normal_manusiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Steroidhttp://id.wikipedia.org/wiki/Jerawathttp://id.wikipedia.org/wiki/Pneumoniahttp://id.wikipedia.org/wiki/Meningitishttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Arthritits&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Katalase&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Koagulase&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Fibrinhttp://id.wikipedia.org/wiki/Fibrinhttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Koagulase&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Katalase&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Arthritits&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Meningitishttp://id.wikipedia.org/wiki/Pneumoniahttp://id.wikipedia.org/wiki/Jerawathttp://id.wikipedia.org/wiki/Steroidhttp://id.wikipedia.org/wiki/Mikroflora_normal_manusiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Mikroflora_normal_manusiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Sporahttp://id.wikipedia.org/wiki/Bakteri_gram_positif


10/37

ini terakumulasi di sekitar bakteri sehingga agen pelindung inang kesulitan mencapai bakteri

danfagositosis terhambat.

- Cryptococcus neoformans

Cryptococcus neoformansadalah salah satuspesiescendawanpatogenpada manusia.

Spesies ini terdiri dari dua jenis, yaitu C. neoformansvar. neoformansdan C. neovormans

var. gattii. Cendawan ini ditemukan pertama kali oleh Otto Busse dan Abraham Buschke

pada tahun 1984. Beberapa katarakteristik dari cendawan ini adalah berbentuk khamir

terenkspsulasi dengan ukuran 4-7 hingga 4-8 m, dapat menggunakan berbagai macam

sumber karbon, memproduksi enzim urease dan fenoloksidase. C. neovormans memiliki

kapsul yang berperan bagi virulensinya dan terbuat dari polisakarida, enzim, serta protein.

Bakteri ini dapat menginfeksi manusia normal serta yang memilikisistem imun yang rentan.

Bakteri ini dapat tumbuh dengan baik pada suhu tubuh manusia ( 37 C).

- Escherichia coli
http://id.wikipedia.org/wiki/Fagositosishttp://id.wikipedia.org/wiki/Spesieshttp://id.wikipedia.org/wiki/Cendawanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Patogenhttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Otto_Busse&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Abraham_Buschke&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Karbonhttp://id.wikipedia.org/wiki/Enzimhttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Urease&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Fenoloksidase&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Polisakaridahttp://id.wikipedia.org/wiki/Enzimhttp://id.wikipedia.org/wiki/Proteinhttp://id.wikipedia.org/wiki/Sistem_imunhttp://id.wikipedia.org/wiki/Sistem_imunhttp://id.wikipedia.org/wiki/Proteinhttp://id.wikipedia.org/wiki/Enzimhttp://id.wikipedia.org/wiki/Polisakaridahttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Fenoloksidase&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Urease&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Enzimhttp://id.wikipedia.org/wiki/Karbonhttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Abraham_Buschke&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Otto_Busse&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Patogenhttp://id.wikipedia.org/wiki/Cendawanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Spesieshttp://id.wikipedia.org/wiki/Fagositosis


11/37

Escherichia coli, atau biasa disingkat E. coli, adalah salah satu jenis spesies utama

bakteri gram negatif. Pada umumnya, bakteri yang ditemukan oleh Theodor Escherich ini

dapat ditemukan dalam usus besar manusia. Kebanyakan E. Coli tidak berbahaya, tetapi

beberapa, sepertiE. ColitipeO157:H7,dapat mengakibatkan keracunan makanan yang serius

pada manusia yaitu diare berdarah karena eksotoksin yang dihasilkan bernama verotoksin.

Toksin ini bekerja dengan cara menghilangkan satu basa adenin dari unit 28S rRNA,

sehingga menghentikan sintesis protein. Sumber bakteri ini contohnya adalah daging yang

belum masak, seperti daging hamburger yang belum matang. E. Coliyang tidak berbahaya

dapat menguntungkan manusia dengan memproduksi vitamin K2, atau dengan mencegah

baketi lain di dalam usus.E. colibanyak digunakan dalam teknologirekayasa genetika.Biasa

digunakan sebagai vektor untuk menyisipkan gen-gen tertentu yang diinginkan untuk

dikembangkan. E. coli dipilih karena pertumbuhannya sangat cepat dan mudah dalam

penanganannya. Negara-negara di eropa sekarang sangat mewapadai penyebaran bakteri

E.Coli ini, mereka bahkan melarang mengimpor sayuran dari luar

B. MEDIA PEMBIAKAN- Staphylococcus sp

Staphylococcus sp adalah bakeri yang bersifat oportunistik dan menjadi

bakterimia yang masuk saat pengambilan darah walaupun diberi desinfektan, bakteri

ini tetap masuk melalui intravena, kateter, atau tempat tusukan jarum dan

menyebabkan infeksi. Bakterimia adalah keadaan dimana terdapatnya bakteri yang

mampu hidup dalam aliran darahStaphylococcus spcepat menjadi resisten terhadap

beberapa antimikroba. Dinding sel bakteri Staphylococcus sp mengandung banyak

lapisan peptidoglikan yang membentuk struktur tebal dan kaku, serta mengandung

asam teikoat yang mengandung alcohol dan fosfat. Gambaran meningkatnya resistensi

suatu mikroba tergantung pada lamanya penggunaan suatu antibiotik dan pemberian
http://id.wikipedia.org/wiki/Spesieshttp://id.wikipedia.org/wiki/Bakterihttp://id.wikipedia.org/wiki/Gram_negatifhttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Theodor_Escherich&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Usus_besarhttp://id.wikipedia.org/wiki/Manusiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Escherichia_coli_O157:H7http://id.wikipedia.org/wiki/Diarehttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Eksotoksin&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Verotoksin&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Adeninhttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=RRNA&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Proteinhttp://id.wikipedia.org/wiki/Vitamin_Khttp://id.wikipedia.org/wiki/Vitamin_Khttp://id.wikipedia.org/wiki/Rekayasa_genetikahttp://id.wikipedia.org/wiki/Vektorhttp://id.wikipedia.org/wiki/Genhttp://id.wikipedia.org/wiki/Genhttp://id.wikipedia.org/wiki/Vektorhttp://id.wikipedia.org/wiki/Rekayasa_genetikahttp://id.wikipedia.org/wiki/Vitamin_Khttp://id.wikipedia.org/wiki/Proteinhttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=RRNA&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Adeninhttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Verotoksin&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Eksotoksin&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Diarehttp://id.wikipedia.org/wiki/Escherichia_coli_O157:H7http://id.wikipedia.org/wiki/Manusiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Usus_besarhttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Theodor_Escherich&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Gram_negatifhttp://id.wikipedia.org/wiki/Bakterihttp://id.wikipedia.org/wiki/Spesies


12/37

jenis antibiotik, peningkatan resistensi ini semakin cepat akibat dari penggunaan

antibiotik yang tidak tepat yakni dalam pemberian dosis. Oleh karena itu sangat perlu

dilakukan uji sensitivitas bakteri yang mungkin bersifat resisten.

- Escheri chia coli

E. Coli merupakan bakteri fakultatif anaerob, kemoorganotropik, mempunyai tipe

metabolisme fermentasi dan respirasi tetapi pertumbuhannya paling sedikit banyak di

bawah keadaan anaerob. pertumbuhan yang baik pada suhu optimal 370C pada media

yang mengandung 1% peptone sebagai sumber karbon dan nitrogen. E. Coli

memfermentasikan laktosa dan memproduksi indol yang digunakan untuk

mengidentifikasikan bakteri pada makanan dan air. E. coliberbentuk besar (2-3 mm),

circular, konveks dan koloni tidak berpigmen pada nutrient dan media darah. E. Coli

dapat bertahan hingga suhu 600C selama 15 menit atau pada 550C selama 60 menit.

Resistensi E. coli terhadap berbagai antibiotika telah banyak dilaporkan, khususnya

antibiotika golongan -laktam. Salah satu obat pilihan yang digunakan untuk

mengobati infeksi saluran urin yang disebabkan olehE. coli adalah ampisilin. Namun

E. coli dilaporkan telah resisten terhadap ampisilin sehingga tidak digunakan lagi.

Untuk menanggulangi terjadinya resistensi pada ampisilin maka diperlukan

pengobatan antimikroba yang lain seperti trimethoprim-sulfamethoxazol (TMP-SMZ), siprofloxacin, norfloxacin, nitrofurantoin, dan fluoroquinolon.

- Staphylococcus epidermidis


13/37

Staphylococcus epidermidisadalah salah satu spesies bakteri dari

genus Staphylococcusyang diketahui dapat menyebabkan infeksi

oportunistik (menyerang individu dengan sistem kekebalan tubuh yang lemah).

Beberapa karakteristik bakteri ini adalah fakultatif, koagulase negatif, katalase positif,

gram positif, berbentuk kokus, dan berdiameter 0,51,5 m. Bakteri ini secara alami

hidup pada kulit dan membran mukosa manusia. Infeksi Staphylococcus epidermidis

dapat terjadi karena bakteri ini membentuk biofilm pada alat-alat medis di rumah

sakit dan menulari orang-orang di lingkungan rumah sakit tersebut (infeksi

nosokomial). Secara klinis, bakteri ini menyerang orang-orang yang rentan atau

imunitas rendah, seperti penderita AIDS, pasien kritis, pengguna obat terlarang

(narkotika), bayi yang baru lahir, dan pasien rumah sakit yang dirawat dalam waktu

lama. Organisme ini menghasilkan glycocalyx "lendir" yang bertindak sebagai

perekat mengikuti ke plastik dan sel, menyebabkan resistensi terhadap fagositosis dan

antibiotik. Staphylococcus epidermidisdapat bertahan di permukaan yang kering

untuk waktu yang lama. Staphylococcus epidermidismempunyai kepekaan tertinggi

berturut-turut terhadap kanamisin, netilmisin, tobramisin, sefotaksim, seftizoksim,

amoksisilin-asam klavulanat dan kotrimoksazol. Resistensi tertinggi berturut-turut

terhadap ampisilin, amoksisilin, penisilin G. tetrasiklin dan kloramfenikol.

- Methicil l in Resistant Staphylococcus aureus(MRSA)

Digunakan antibiotik oxacillin dan cefoxitin. Isolat bakteri Staphylococcus

dilakukan uji koagulase / sthaphylase untuk membedakan antara koagulase positif dan

koagulase negative. Staphylococcusdengan koagulase positif adalah Staphylococcus

aureus. Interpretasi hasil MRSA, apabila ditemukan: Oxacillin 1 g 13 mm dan

Cefoxitin 30 g 22 mm (standard CLSI yang digunakan saat ini).


14/37

- Staphylococcus aur eus

Staphylococcus aureus(S. aureus) adalahbakteri gram positif yang menghasilkan

pigmen kuning, bersifat aerob fakultatif, tidak menghasilkansporadan tidak motil,

umumnya tumbuh berpasangan maupun berkelompok, dengan diameter sekitar 0,8-1,0 m. S. aureustumbuh dengan optimum pada suhu 37oC dengan waktu

pembelahan 0,47 jam. S. aureusmerupakanmikroflora normal manusia. Bakteri ini

biasanya terdapat pada saluran pernapasan atas dan kulit. Keberadaan S. aureuspada

saluran pernapasan atas dan kulit pada individu jarang menyebabkan penyakit,

individu sehat biasanya hanya berperan sebagai karier. Infeksi serius akan terjadi

ketika resistensi inang melemah karena adanya perubahan hormon; adanya penyakit,

luka, atau perlakuan menggunakansteroid atau obat lain yang memengaruhi imunitas

sehingga terjadi pelemahan inang.

Hampir semua isolat S. aureusresisten terhadappenisilin.Hal ini disebabkan oleh

keberadaan enzim -laktamase yang dapat merusak struktur -laktam pada penisilin.

Untuk mengatasi hal ini, dapat digunakan penisilin yang bersifat resisten -laktamase,

contohnya nafcillin atau oksasilin. Sebagian isolat S. aureusresisten

terhadapmethisilin karena adanya modifikasi protein pengikat penisilin. Protein ini

mengkode peptidoglikan transpeptidase baru yang mempunyai afinitas rendah

terhadap antibiotic -laktam, sehingga terapi -laktam tidak responsif. Salah satu

contoh antibiotik yang digunakan terhadap MRSA adalahvankomisin.
http://id.wikipedia.org/wiki/Bakteri_gram_positifhttp://id.wikipedia.org/wiki/Bakteri_gram_positifhttp://id.wikipedia.org/wiki/Sporahttp://id.wikipedia.org/wiki/Sporahttp://id.wikipedia.org/wiki/Sporahttp://id.wikipedia.org/wiki/Mikroflora_normal_manusiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Mikroflora_normal_manusiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Mikroflora_normal_manusiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Steroidhttp://id.wikipedia.org/wiki/Steroidhttp://id.wikipedia.org/wiki/Penisilinhttp://id.wikipedia.org/wiki/Penisilinhttp://id.wikipedia.org/wiki/Penisilinhttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Methisilin&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Vankomisin&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Vankomisin&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Methisilin&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Penisilinhttp://id.wikipedia.org/wiki/Steroidhttp://id.wikipedia.org/wiki/Mikroflora_normal_manusiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Sporahttp://id.wikipedia.org/wiki/Bakteri_gram_positif


15/37

- Klebsiella

Klebsiella Pneumoniaadalah jenis bakteri patogen nosokomial yang penting, yang

memperlihatkan terutama resistensinya terhadap antibiotika.Infeksi bakteri ini bukan

satu satunya penyebab kematian akan tetapi mempunyai kontribusi yang besar.Bakteri tersebu juga patogen yang utama pada neonatal, dengan menyebabkan

beberapa infeksi antara lain sepsis, meningitis, dan necrosis enterocolitis dan infeksi

respiratori terutama pada pasien yang sebelumnya sakir respiratori. Telah dilaporkan

bahwa dijumpaiKlebsiella Pneumoniayang membawa plasmid dengan aktifitas -

laktamase tinggi sehingga resisten terhadap cefoksitin dan 7--metoksi- laktam serta

oksimono -laktam antibiotika. Bakteri jenis ini telah dijumpai di dalam isolat

diberbagai negara. Penemuan ESBL (Extended Spektrum Beta Lactamase) dalam

bakteri basil gram negatif terutama Klebsiella Pneumonia dan E.coli telah

mendapatkan perhatian yang begitu besar, karena bakteri tersebut telah resisten

terhadap sefalosforin terbaru dan monobaktam sehingga menyebabkan banyak

problem. Kemudian dibuat sefalosforin yang membawa substitusi pada 7 dengan

hasil stabilitas yang lebih besar terhadap -laktamase bakteri daripada sefalosporin

yang tidak di substitusi. Aktifitas terbesar dari derivat tersebut adalah pada substitusi

dengan 7-formamido sfoperazon atau analognya, yakni sekitar 2-4 kali akan lebih

aktif daripada ureido lain atau derifat asil amino.


16/37

- Cryptococcus

Cryptococcus adalah jamur termasuk jenis ragi yang berada di lingkungan dan

tersebar luas. Organisme ini termasuk phylum Basidiomycota, class

Heterobasidiomycetes, order Filobasidiales, family Filobasidiaceae. GenusCryptococcus meliputi lebih dari 37 spesies, walaupun demikian hanya C. neoformans

yang umumnya dianggap patogen.

- Aspergillus

Aspergillusmerupakan kapang yang banyak tersebar luas di alam, dan

kebanyakan spesies ini sering menyebabkan kerusakan makanan, tetapi beberapa

spesies digunakan dalam fermentasi makanan.AspergillusjenisAspergillusclavatusjuga dapat memproduksi clavasin yang merupakan komponen

antibiotik.Aspergillus dapat tumbuh baik pada substrat dengan konsentasi gula dan

garam tinggi. Ciri-ciri spesifikAspergillus adalah hifa septat dan miselium bercabang,

koloni kompak, konidiofora septat atau nonseptat yang membengkak menjadi vesikel

pada ujungnya, dan membawa sterigmata dimana tumbuh konidia. Konidia

membentuk rantai yang berwarna hijau, coklat atau hitam. Beberapa spesies tumbuh

baik pada suhu 37oC atau lebih. Jamur ini dapat menimbulkan penyakit yang lain

yang disebut dengan istilah Aspergillogis.


17/37

Isavukonazol (BAL-4815) merupakan metabolit aktif dari pro-drug

isavukonazonium (BAL-8557) bersifat larut air, sangat baik dalam penggunaan oral

dan intravena, dan berfungsi menghambat biosintesis ergosterol dan memiliki sifat

farmakokinetik yang sangat baik. Isavukonazol telah diuji dalam mengatasi

Aspergillus sp. serta beberapa Aspergillus sp.yang resisten terhadap obat antijamur

lain.

- Candida albicans

Penghambatan terhadap pertumbuhan mikroorganisme, yaitu zona hambatan akan

terlihat sebagai daerah jernih di sekitar daerah yang mengandung zat antibakteri.

Diameter zona hambatan pertumbuhan bakteri menunjukkan sensitivitas bakteri

terhadap zat antibakteri. Selanjutnya dikatakan bahwa semakin lebar diameter zona

hambatan yang terbentuk bakteri tersebut semakin sensitif. Pada cawan petri terdapat

zona hambat yang ditandai dengan daerah sekitar antibiotik berwarna bening.

Terdapatnya zona hambat pada percobaan tersebut disebabkan karena khamir

jenis Candida albicans tersebut tidak resisten terhadap antibiotik yang ditanam pada

media yang sama. Resistensi ini merupakan suatu sifat tidak terganggunya kehidupan

sel mikroba oleh antimikroba. Sifat ini merupakan suatu mekanisme alamiah untuk

bertahan hidup. Resistensi dari khamir tersebut biasanya disebabkan karena khamir

jenis Candida albicans tersebut dapat menghasilkan suatu enzim yang dapat

menghancurkan antibiotik tersebut.


18/37

- Extended Spectrum BetaLactamase(ESBL)

a. Standard disc diffusion methodUji ini bertujuan untuk mendeteksi adanya ESBL dengan metode berdasarkan

difusi cakram menggunakan sefotaksin 30 g, seftazidim 30 g, seftriakson 30 g,aztreonam 30 g, dan cefpodoksim 10 g. apabila satu atau lebih antibiotik

menunjukkan hasil resisten, dilakukan uji konfirmasi menggunakan metoda cakram

ganda.

b. Metoda cakram ganda (double disc method)Berbagai disk antibiotic sefalosporin generasi 3 (seftazidim 30 g, aztreonam

30 g, atau sefodoksim 10 g) diletakkan dengan jarak sebesar 15-20 mm (jarak

pinggir ke pinggir disk) dari disk asam klavulanat secara aseptic. Adanya pelebaran

zona hambatan antara kedua disk menunjukkan ESBL positif.

c. Minimum inhibitory concentration (E-tast_ ESBLMetoda ini menggunakan kombinasi 2 strip E-test misalnya: seftazidim /

ceftazidim-asam klavulanat dan sefotaksim asam klavulanat. Keduanya

diinokulasikan pada permukaan lempeng agar dan diinkubasi selama semalam.

Penurunan pengenceran 3 log 2 dikatakan ESBL positif. Catatan: tidak semua strain

yang memproduksi ESBL spesifik untuk seftazidim, strain dengan substrat spesifik

mungkin tidak terdeteksi jika uji hanya menggunakan seftazidim / asam klavulanat

saja; oleh karena itu sefotaksim juga digunakan.

- Pemeriksaan MRSA (Methi cil li n Resistant Stapyllococcus aureus) Isolat bakteri Stapyllococcus dilakukan dengan uji koagulase untuk

membedakan antara Koagulase (+) dan Koagulase (-)

Stapyllococcus dengan koagulase (+)Stapyllococcus aureus


19/37

Dilakukan uji kepekaan bakteri dengan menggunakan cakram Oxacillin danCefoxitin

Interpretasi hasil MRSA, apabila ditemukan zona hambat, yaitu : Oxacillin 1g 13 mm dan Cefoxitin 30 g 22 mm

- Kepekaan bakteri terhadap antibiotikCara difusi cakram :

Memakai kertas saring berbentuk cakram yang telah mengandung antibiotikdengan dosis tertentu dan diletakan pada lempeng agar Mueller-Hinton yang

telah ditanami bakteri.

Menentukan lebar zona hambatan (zona jernih disekitar cakram antibiotikdimana tidak ada pertumbuhan bakteri). Besarnya zona hambatan ini

tergantung dari daya difusi antibiotik kedalam media agar dan kepekaan

bakteri terhadap antibiotik tersebut.

- Blood Agar (BA)


20/37

Agar darah digunakan untuk menanam berbagai patogen terutama yang

lebih sulit untuk tumbuh. Agar darah juga diperlukan untuk mendeteksi dan

membedakan bakteri hemolitik, khususnya Staphylococcus dan Streptococcus.

Pada agar darah S. Aureus menghasilkan warna kuning krim atau kadang-kadang warna putih.

- Media Kultur

a. Mac ConkeyMedia selektif untuk isolasi dan identifikasi bakteri Gram negatif terutama bakteri

yang berasal dari tinja dan urin.

b. Agar DarahUntuk isolasi dan pertumbuhan berbagai macam mikroorganisme,terutama yang

patogen dan menetapkan bentuk hemolisa dari bakteri-bakteri tersebut.

c. Agar CoklatAgar coklat sama seperti agar darah tetapi pada agar coklat darah yang digunakan di

lisiskan terlebih dahulu sebelum dimasukan kelarutan agar. Darah yang lisis

memberikan warna coklat pada media sehingga disebut dengan agar coklat.

d. MSA (Manitol Salt agar)


21/37

Madia selektif dan differensial media bersifat yang bersifat khusus (bakteri

tertentu),untuk mendeteksi bakteri Staphylococcus petogen. Hanya mikroorganisme

yang tahan terhadap garam yang dapat tumbuh pada media ini, karena konsentrasi

garamnya yang tinggi.

- Alat yang digunakan dalam pengambilan spesimen darah

Gambar diatas merupakan alat yang digunakan untuk pengambilan

darah untuk dikultur. Pengambilan dari spesimen darah untuk kultur harus saatpasien demam dan sebisa mungkin sebelum pasien diberikan antibiotik.

- Kultur Pada Aerob dan AnaerobKultur darah dimasukkan ke dalam botol khusus yang berisi media

khusus yang akan mendukung pertumbuhan dan memungkinkan deteksi

mikro-organisme yang lebih memilih oksigen (aerob) atau yang berkembang

dalam lingkungan yang kekurangan oksigen (anaerob).

- Metode Kultur Darah Minimal 10 ml darah diambil melaluivenipuncture dan disuntikkan ke dalam

dua atau lebih "botol darah" dengan spesifik Media untuk aerobik dan

anaerobik organisme . Sebuah media yang umum digunakan untuk anaerob

adalahkaldu thioglycollate .
http://translate.googleusercontent.com/translate_c?depth=1&hl=id&prev=/search%3Fq%3Dblood%2Bculture%2Banaerob%2Band%2Baerob%26biw%3D806%26bih%3D507&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Venipuncture&usg=ALkJrhjGjnJB3KdSIQ9sBI6oRxF6PgGYbQhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?depth=1&hl=id&prev=/search%3Fq%3Dblood%2Bculture%2Banaerob%2Band%2Baerob%26biw%3D806%26bih%3D507&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Growth_medium&usg=ALkJrhgxunQIz0uf-oQUe2znT_7ZexDBTAhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?depth=1&hl=id&prev=/search%3Fq%3Dblood%2Bculture%2Banaerob%2Band%2Baerob%26biw%3D806%26bih%3D507&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Aerobic_organism&usg=ALkJrhje1qoF4YheFHrKP80Fr-PIQjqZ-Ahttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?depth=1&hl=id&prev=/search%3Fq%3Dblood%2Bculture%2Banaerob%2Band%2Baerob%26biw%3D806%26bih%3D507&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Anaerobic_organism&usg=ALkJrhijbqzyMAFcs0ghM4u1itvgAkIF-ghttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?depth=1&hl=id&prev=/search%3Fq%3Dblood%2Bculture%2Banaerob%2Band%2Baerob%26biw%3D806%26bih%3D507&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Thioglycollate_broth&usg=ALkJrhjvfH2SrYNyXnE8jusCkjv4ez_WQQhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?depth=1&hl=id&prev=/search%3Fq%3Dblood%2Bculture%2Banaerob%2Band%2Baerob%26biw%3D806%26bih%3D507&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Thioglycollate_broth&usg=ALkJrhjvfH2SrYNyXnE8jusCkjv4ez_WQQhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?depth=1&hl=id&prev=/search%3Fq%3Dblood%2Bculture%2Banaerob%2Band%2Baerob%26biw%3D806%26bih%3D507&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Anaerobic_organism&usg=ALkJrhijbqzyMAFcs0ghM4u1itvgAkIF-ghttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?depth=1&hl=id&prev=/search%3Fq%3Dblood%2Bculture%2Banaerob%2Band%2Baerob%26biw%3D806%26bih%3D507&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Aerobic_organism&usg=ALkJrhje1qoF4YheFHrKP80Fr-PIQjqZ-Ahttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?depth=1&hl=id&prev=/search%3Fq%3Dblood%2Bculture%2Banaerob%2Band%2Baerob%26biw%3D806%26bih%3D507&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Growth_medium&usg=ALkJrhgxunQIz0uf-oQUe2znT_7ZexDBTAhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?depth=1&hl=id&prev=/search%3Fq%3Dblood%2Bculture%2Banaerob%2Band%2Baerob%26biw%3D806%26bih%3D507&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Venipuncture&usg=ALkJrhjGjnJB3KdSIQ9sBI6oRxF6PgGYbQ


22/37

Darah dikumpulkan dengan menggunakan teknik aseptik. Hal inimembutuhkan baik bagian atas botol kultur dan daerah venipuncture pasien

dibersihkan sebelum pengumpulan dengan kapas 70%isopropil alkohol.

Untuk memaksimalkan hasil diagnostik kultur darah beberapa set kultur(masing-masing set terdiri dari botol aerobik & anaerobik diisi dengan 3-10

mL) dapat dipesan oleh staf medis.

Setelah inokulasi botol kultur, kesempatan dengan jarum baru dan bukanyang digunakan untuk venepuncture, mereka akan dikirim ke departemen

mikrobiologi patologi klinis.

Berikut botol dimasukkan ke dalam mesin kultur darah, yang menetaskanspesimen pada suhu tubuh. Instrumen kultur darah laporan kultur positif

darah (kultur dengan bakteri ini, yang mengindikasikan pasien " bacteremic

"). Kebanyakan kultur dipantau selama 5 hari setelah botol negatif akan

dihapus.

Jika vial adalah positif, mikrobiolog akan melakukan Gram Stain dalamdarah untuk cepat, general ID dari bakteri, mereka akan melaporkan kepada

dokter yang hadir dari pasien bacteremic. Darah ini juga subkultur atau

"subbed" ke piring agar untuk mengisolasi organisme patogen untuk kultur

dan uji kepekaan, yang memakan waktu sampai 3 hari.

Kultur & sensitivitas (C & S) Proses ini mengidentifikasi spesies bakteri.Sensitivitas antibiotik yang kemudian dinilai pada isolat bakteri untuk

menginformasikan dokter, antibiotik yang tepat untuk pengobatan.

Kultur Aerob
http://translate.googleusercontent.com/translate_c?depth=1&hl=id&prev=/search%3Fq%3Dblood%2Bculture%2Banaerob%2Band%2Baerob%26biw%3D806%26bih%3D507&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Isopropyl_alcohol&usg=ALkJrhgB9EVCdIjQ0t4jbRYbMn6unirRWAhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?depth=1&hl=id&prev=/search%3Fq%3Dblood%2Bculture%2Banaerob%2Band%2Baerob%26biw%3D806%26bih%3D507&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Bacteremic&usg=ALkJrhhwMaOCjnlp6Fs6IvDEuRCdEsazGQhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?depth=1&hl=id&prev=/search%3Fq%3Dblood%2Bculture%2Banaerob%2Band%2Baerob%26biw%3D806%26bih%3D507&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Bacteremic&usg=ALkJrhhwMaOCjnlp6Fs6IvDEuRCdEsazGQhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?depth=1&hl=id&prev=/search%3Fq%3Dblood%2Bculture%2Banaerob%2Band%2Baerob%26biw%3D806%26bih%3D507&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Isopropyl_alcohol&usg=ALkJrhgB9EVCdIjQ0t4jbRYbMn6unirRWA


23/37

Kultur Anaerob

- Pengumpulan Darah Pada KulturPada orang sehat, spesimen darah yang di ambil dengan baik bersifat streil.

Meskipun mikroorganisme yang berasal dari flora saluran cerna dan napas normal

sesekali masuk ke dalam darah, mereka dengan cepat dikeluarkan oleh sistem

retikuloendotelial. Mikroorganisme yang hanya muncul sebentar ini jarang

berdampak terhadap hasil kultur darah. Kontaminasi kultur darah oelh flora normal

kulit normal paling sering disebabkan oleh kesalahan dalam pengambilan darah. Oleh

sebab itu, teknik yang tepat dalam melakukan kultur darah teramat penting.

Aturan-aturan berikut,jika diterapkan secara ketat, membuahkan hasil yang

dapat diandalkan:

1. Terapkan teknik aseptik yang ketat. Pakailah sarung tangan-tidak perlu harussteril.

2. Pasang torniket dan tentukan lokasi vena dengan palpasi. Lepaskan torniketsementara kulit sedang dibersihkan.

3. Bersihkan kulit yang akan menjadi lokasi pungsi vena dengan baik menggunakanisopropil alkohol 70-95%. Dengan tinktur iodine 2% atau klorheksidin 2%, mulai

pembersihan kulit dari lokasi pungsi vena, kemudian buat lingkaran konsentrik ke

luar dengan diameter yang semakin besar. Biarkan sediaan antiseptik mengering

selama setidaknya 30 detik. Jangan sentuh kulit setelah dibersihkan.


24/37

4. Pasang kembali torniket, lakukan pungsi venadan (untuk orang dewasa) ambilsetidaknya 20 mL darah.

5. Masukkan darah ke botol kultur darah yang telah diberi label aerobik dananaerobik.

6. Bawalah spesimen segera ke laboratorium, atau tempatkan di dalam inkubatordalam suhu 370C.

- Pengumpulan darah Pada Bactec Vials

1. Persiapkan Bactec Vialsa. Tandai Bactec kultur vial dengan label

b. Pindahkan tanda dibalik tutup dari Bactec kultur vialc. Bersihkan bagian atas botol dengan swab alkohol dan biarkan kering

2. Pengumpulan daraha. Mengupas terpisah paket dan pindahkan koleksi darah set.

Memindahkan penutup jarum di sayap.

b. Melakukan venipuncture dengan memegang sayap seperti yangditunjukkan. JANGAN memegang perisai keselamatan kuning.

c. Mendorong dan tahan pemegang Vacutainer lebih atas dari vialMengumpulkan darah ke tingkat yang diinginkan dalam botol.

Memindahkan pemegang dari vial.


25/37

- Pengumpulan Pada Jarum suntik dan Semprit1. Menggunakan teknik aseptik, pasang jarum suntik untuk sebuah jarum suntik 20

ml dengan jarum 21 gauge dianjurkan tetapi ukuran lain dapat digunakan

2. Masukkan jarum ke dalam vena disiapkan dan mengumpulkan 10 sampai 20 mldarah dalam semprit

3. Menarik jarum setelah mengumpulkan 10-20 ml darah dalam semprit4. Mendistribusikan darah yang sama ke dalam botol aerobik dan anaerobik

C. SEROLOGI- Tes Dilusi


26/37

Uji antibiotik antimikroba mengukur respons pertumbuhan populasi mikroorganisme

terhadap antigen antimikroba. Tujuan assay antimikroba (termasuk antibiotik dan substansi

antimikroba non antibiotik misalnya fenol, bisfenol, aldehid adalah untuk menentukan

potensi dan kontrol kualitas senyawa antimikroba, untuk farmakokinetik obat pada hewanatau manusia dan untuk memonitor dan mengontrol kemoterapi obat. Kegunaan uji

antimikroba adalah diperolehnya suatu sistem pengobatan yang efektif dan efisien. Salah satu

uji antimikroba adalah metode dilusi.

Metode dilusi dibedakan menjadi dua yaitu dilusi cair (broth dilution) dan dilusi padat

(solid dilution). Gambar di atas adalah menunjukkan metode dilusi cair dimana metode ini

digunakan untuk mengukur MIC (minimum inhibitory concentration) dengan membuat seri

pengenceran antimikroba pada medium cair yang ditambahkan dengan mikroba uji. Larutan

uji agen antimikroba pada kadar terkecil yang terlihat jernih tanpa adanya pertumbuhan

mikroba uji ditetapkan sebagai MIC. Selanjutnya larutan yang jernih tersebut dikultur ulang

pada media cair tanpa penambahan mikroba uji ataupun agen antimikroba dan diinkubasi

selama 18-24 jam. Media cair yang tetap terlihat jernih setelah inkubasi ditetapkan sebagai

MBC (minimum bactericidal concentration).

- E-test


27/37

E-test adalah metode kuantitatif yang menggunakan cara dilusi dan difusi

E-test dapat digunakan untuk menentukan MIC untuk organisme fastidious seperti S.

pneumoniae, streptokokus -hemolitikus, N. gonorrhoeae, Haemophilus sp.dan anaerob.

E test adalah metode yang sederhana, akurat dan dapat diandalkan untuk menentukan

MIC untuk spektrum yang luas dari agen infeksi.

Metode E-test digunakan untuk mengestimasi MIC (minimum inhibitory

concentration) atau KHM (kadar hambat minimum), yaitu konsentrasi minimal suatu

agen antimikroba untuk dapat menghabat pertumbuhan mikroorganisme.

Pada metode ini digunakan strip plastik yang mengandung agen antimikroba dari

kadar terendah hingga tertinggi dan diletakkan permukaan media agar yang telah

ditanami mikroorganisme. Pengamatan dilakukan pada area jernih yang ditimbulkannya

yang menunjukkan kadar agen antimikroba yang menghambat pertumbuhan

mikroorganisme pada media agar. Ada 5 jenis teknik Difusi adalah :

1. Kirby-Bauer. Menggunakan kertas disk yang sudah mengandung antibiotic dandiketahui konsentrasinya.

2. Sumuran. Pada media agar ditambahkan suspensi bakteri, kemudian dibuat lubangditengah dan ditetesi antibiotic.

3. Pour plate. Suspensi bakteri diambil menggunakan ose lalu dimasukkan dalam mediaagar, setelah beku digunakan disk antibiotik diatasnya.

4. E-test. Menggunakan plastic strip yang mengandung antibiotik yang sudah diketahuikonsentrasinya.

5. Gradient test. Seperti cara sumuran hanya saja lubang yang dibuat menyerupai garistengah, sehingga media pada petri terbelah dua.


28/37

- Pemeriksaan Anti-Dengue IgG / IgM

Berdasarkan kualitatif, deteksi dari antibodi IgM dan IgG infeksi virus dengue padaserum, plasma dan darah dapat digunakan untuk membedakan antara infeksi primer dan

sekunder. Ini mendeteksi awal adanya infeksi virus dengue yang dapat menyebabkan demam

berdarah dengue dan dengue syok sindrom.

Tes ini hanya digunakan kepada pasien yang berdasarkan tanda dan gejala infeksi

virus dengue. Hasil positif hanya dugaan sementara dan harus dipastikan dengan isolasi virus,

analisis serum, deteksi antigen dengan imunohistokimia atau deteksi asam nukleat virus

untuk mengkonfirmasi infeksi virus dengue. Spesimen yang digunakan pada pemeriksaan ini

adalah serum. Serum harus dipisahkan sesegera mungkin dan didinginkan pada 2-8oC atau

disimpan beku pada -20o atau lebih dingin apabila tidak dilakukan pemeriksaan tidak lebih

dari 2 hari.

Ketika sejumlah serum / plasma / wholebloodpasien yang mengandung anti dengue

IgG / IgM diteteskan pada lubang sampel, antidengue IgG / IgM akan bereaksi dengan


29/37

rekombinan virus dengue yang terdapat dalam protein koloidal emas , membentuk kompleks

antigenantibodi kemudian kompleks antigenantibodi tersebut akan bermigrasi sepanjang

membran kemudian akan mengikat antibodi dengue IgG / IgM yang spesifik yang terletak

pada daerah Mdan T membentuk kompleks antibodi antigenantibodi sehingga akan

menghasilkan reaksi warna.

Hasil dari pemeriksaan ini adalah:

Infeksi primer : antibodi serum IgM didapatkan dari pasien dengue paling cepat 3-5hari setelah onset dari demam, pada umumnya berlangsung selama 30-90 hari.

Infeksi sekunder : dikarakteristikan oleh tingginya level IgG yang dapat atau tidakdapat diikuti oleh kenaikan dari level IgM.

Sensitivitas pengujian: Primer dengue : IgM positif saat IgG negatif Infeksi sekunder : positif IgG ada dengan atau tanpa hasil positif IgM


30/37

- Pemeriksaan Dengue NS1 Ag

Pemeriksaan Non Struktural 1 (NS1) ditujukan untuk mendeteksi virus dengue lebih

awal. Virus dengue memiliki 3 protein structural dan7 protein non structural. NS1 adalah

glikoprotein non structural yang diperlukan untuk kelangsungan hidup virus. Keuntungan

mendeteksi antigen NS1 yaitu untuk mengetahui adanya infeksi dengue pada penderita

tersebut pada fase awal demam, tanpa perlu menunggu terbentuknya antibodi. Dengan

demikian dapat segera dilakukan terapi suportif dan pemantauan pasien. Hal ini tentunya

akan mengurangi risiko komplikasi seperti demam berdarah dengue dan dengue shock

syndrome yang dapat berakibat kematian.

Pemeriksaan Dengue NS1 Antigen sebaiknya dilakukan pada penderita yang

mengalami demam disertai gejala klinis infeksi virus dengue (pada hari 1-3 mulai demam)

untuk mendeteksi infeksi akut disebabkan virus dengue. Positivitas dan kadar Ag NS1

Dengue tertinggi pada hari-hari awal demam dan akan menurun dengan bertambahnya hari

demam, sehingga sebaiknya dilakukan sebelum hari keempat demam.
http://gudanginspirasi.wordpress.com/2009/01/11/pemeriksaan-antigen-ns1-dengue/http://gudanginspirasi.wordpress.com/2009/01/11/pemeriksaan-antigen-ns1-dengue/http://gudanginspirasi.wordpress.com/2009/01/11/pemeriksaan-antigen-ns1-dengue/


31/37

Interpretasi data:

Hasil negatif : Hanya ada satu band / garis warna pada garis C pada jendela uji.

Hasil positif : Terdapat dua band/garis warna pada garis T dan C padajendela uji.

Hasil tidak valid :Tidak ada garis warna pada band C maupun T dalam jendela hasil.

Hanya terbentuk garis warna pada Band T dalam jendela hasil

- Polymerase Chain Reaction


32/37

Survei virologi pada nyamuk vektor dapat digunakan sebagai Sistem

Kewaspadaan Dini untuk mencegah penularan Demam dengue di suatu daerah.

Pemeriksaan laboratoris untuk deteksi virus Dengue pada nyamuk seperti isolasi

virus, Polymerase Chain Reaction (PCR).

Gambar dibawah Polymerase Chain Reaction untuk Tuberkulosis dan RT-

PCR Dengue

Isolasi virus Dengue yaitu adanya antigen vius spesifik atau RNA dalam

jaringan atau serum. Isolasi virus merupakan pendekatan yang paling menentukan.

Namun, teknik yang ada saat ini membutuhkan tingkat keahian teknis dan

perlengkapan yang relative tinggi. Uji serologi cukup mudah dilakukan dan lebih

dilakukan , namun reaksi silang antara antibodi Dengue dan Flavivirus lainnya dapat

menimbulkan hasil positif palsu. Spesimen harus diambil sebelum 4 hari setelah


33/37

timbul gejala dan diproses secepatnya. Spesimen yang sesuai untuk isolasi irus

meliputi serum fase akut, plasma atau lapisan leukosit.

D. TES WIDALUji Widal merupakan suatu metode

serologi baku dan rutin digunakan sejak

tahun 1896. Prinsip ujiWidal adalah

memeriksa reaksi antara antibodi aglutinin

dalam serum penderita yangtelah

mengalami pengenceran berbeda-beda

terhadap antigen somatik

(O) dan flagela (H) yang ditambahkan

dalam jumlah yang sama sehingga terjadi

aglutinasi. Pengenceran tertinggiyang masih menimbulkan aglutinasi menunjukkan titer

antibodi dalam serum. Teknik aglutinasi ini dapatdilakukan dengan menggunakan uji

hapusan (slide test) atau uji tabung (tube test). Uji hapusandapat dilakukan secara cepat dan

digunakan dalam prosedur penapisan sedangkan uji tabungmembutuhkan teknik yang lebih

rumit tetapi dapat digunakan untuk konfirmasi hasil dari ujihapusan.

Penelitian pada anak oleh Choo dkk (1990) mendapatkan sensitivitas danspesifisitas

masing-masing sebesar 89% pada titer O atau H >1/40 dengan nilai prediksi

positifsebesar 34.2% dan nilai prediksi negatif sebesar 99.2%. Beberapa penelitian pada

kasus demamtifoid anak dengan hasil biakan positif, ternyata hanya didapatkan sensitivitas

uji Widal sebesar 64-74% dan spesifisitas sebesar 76-83%. Interpretasi dari

uji Widal ini harus memperhatikan beberapa faktor antara lain sensitivitas,spesifisitas,

stadiumpenyakit; faktor penderita seperti status imunitas dan status gizi yang dapat

mempengaruhipembentukan antibodi; gambaran imunologis dari masyarakat setempat

(daerahendemis atau non-endemis); faktor antigen; teknik serta reagen yang digunakan.

Kelemahan uji Widal yaitu rendahnya sensitivitas dan spesifisitas serta sulitnyamelak

ukaninterpretasi hasil membatasi penggunaannya dalam penatalaksanaan penderita demam

tifoid akantetapi hasil uji Widal yang positif akan memperkuat dugaan pada tersangka

penderita demam tifoid(penanda infeksi). Saat ini walaupun telah digunakan secara luas di

seluruh dunia, manfaatnyamasih diperdebatkan dan sulit dijadikan pegangan karena belum


34/37

ada kesepakatanakan nilai standaraglutinasi (cut-off point). Untuk mencari standar titer uji

Widal seharusnya ditentukan titer dasar(baseline titer) pada anak sehat di populasi dimana

pada daerah endemis seperti Indonesia akandidapatkan peningkatan titer antibodi O dan H

pada anak-anak sehat.

Beberapa hal yang sering disalahartikan : Pemeriksaan widal positif dianggap ada kuman dalam tubuh, hal ini

pengertianyang salah. Uji widal hanya menunjukkan adanya antibodi terhadap

kuman Salmonella.

Pemeriksaan widal yang diulang setelah pengobatan dan menunjukkanhasilpositif dianggap masih menderita tifus, ini juga pengertian yang salah.

Setelah seseorang menderitatifus dan mendapat pengobatan, hasil uji widal

tetap positif untuk waktu yang lama sehingga ujiwidal tidak dapat digunakan

sebagai acuan untuk menyatakan kesembuhan.

Hasil ulangpemeriksaan widal positif setelah mendapat pengobatan tifus,bukan indikasi untuk mengulang pengobatanbilamana tidak lagi didapatkan

gejala yang sesuai.

Hasil uji negatif dianggap tidak menderita tifus:Uji widal umumnya menunjukkan hasil positif 5 hari atau lebih setelah infeksi.

Karena itu bila infeksibaru berlangsung beberapa hari, sering kali hasilnya masih

negatifdan baru akan positif bilamana pemeriksaan diulang. Dengan demikian,hasil uji widal

negatif,terutama pada beberapa hari pertama demam belum dapat menyingkirkan

kemungkinan tifus.

PENILAIAN

Titer widal biasanya angka kelipatan :1/32 , 1/64 , 1/160 , 1/320 , 1/640.Peningkatan t

iter uji Widal 4 x (selama 2-3 minggu) : dinyatakan (+).- Titer 1/160 : masih dilihatdulu

dalam 1 minggu kedepan, apakah ada kenaikan titer.Jika ada, maka dinyatakan (+).- Jika 1

xpemeriksaan langsung 1/320 atau 1/640, langsung dinyatakan (+) pada pasiendengan gejala

kliniskhas.


35/37

Uji Widal didasarkan pada :

Antigen O ( somatic / badan ) Antigen H ( flagel/semacam ekorsebagai alat gerak )Jika masuk ke dalam tubuh kita,

maka timbul reaksi antigen-antibodi.

ANTIBODI terhadap Antigen O : setelah 6 sampai 8 hari dari awal penyakit.

Antigen H : 10-12 hari dari awal penyakit.

Uji ini memiliki tingkat sensitivitas dan spesifitas sedang (moderate).Pada kultur yan

g terbukti positif, uji Widal yang menunjukkan nilai negatif b i sa mencapai 30

persen.Beberapa keterbatasan uji Widal ini adalah:

1. Negatif PalsuPemberian antibiotika yang dilakukan sebelumnya (ini kejadian paling sering

dinegarakita, demamkasih antibiotikatidak sembuh dalam 5 harites Widal)

menghalangi respon antibodi.Padahal sebenarnya bisa positif jika dilakukan kultur darah.

2. Positif Palsu

Beberapa jenis serotipe Salmonella lainnya (misalnya S. paratyphi A, B, C) memilikiantigen O dan Hjuga, sehingga menimbulkan reaksi silang dengan jenis

bakterilainnya, dan bisa menimbulkan hasil positif palsu (false positive). Padahal

sebenarnya yang positif kuman non S. typhi(bukan tifoid).

Beberapa penyakit lainnya : malaria, tetanus, sirosis, dll. Padadaerah yang endemikseperti Indonesia (apalagi Jakarta, bagi yang hobi makangado-

gado, ketoprak ) ditentukan nilai batas minimal pada populasi normal.Sehingga

kemungkinan seseor ang menderita demam tifoid sangat besar pada nilaiminimal titer

tertentu.

Pada dasarnya pemeriksaan Widal ini merupakan pemeriksan yang dapat dilakukan

sebagai penunjang diagnosis bukan menjadi yang pertama. Karena yang terbaik adalah

dilakukan pemeriksaan fisik dan anamnesi.


36/37

KESIMPULAN

Dari praktikum ini dapat diketahui gambaran mikroskopik maupun

makroskopik dari bakteri dan jamur yang merupakan penyebab infeksi tersering pada

manusia. Cara pengambilan serta media biakan dari setiap bakteri maupun jamurmemiliki ciri khas tertentu. Selain itu, tes serologi dari jamur maupun bakteri yang

menginfeksi manusia memiliki syarat serta ketentuan sendiri dan cara penggunaan tes

serologi ini juaga beragam.


37/37

DAFTAR PUSTAKA

1. Irianto K.Mikrobiologi Menguak Dunia Mikroorganisme JilidI. Bandung: YramaWidya. 2010.

2. Fakultas Kedokteran Universitas Palangka Raya.Buku Penuntun Praktikum (BPP)Modul Infeksi dan Imunologi Semester VI. Palangka Raya: Universitas Palangka

Raya. 2014.

3. Mandal BK, Wilkins EGL, Dunbar EM, Mayon-White RT.Lecture Notes: PenyakitInfeksi. Edisi 6. Jakarta: Erlangga.2008.

4. Waluyo L. Mikrobiologi Umum. UMM Press : Malang. 20045. Zubaidah E. Mikrobiologi Umum. Universitas Brawijaya: Malang. 2006

laporan mikro.docx

Documents

Transcript of laporan mikro.docx