ELEKTROFORESIS

Disusun Oleh:Kelompok IVBertha Dwi Julinta Lase NIM 121524024Ainul Mardiah NIM 121524022Fhizri AyuningtyasNIM 121524031Fauzi NIM 121524033Tarry Hayati Tamimi NIM 121524040**

**Pengertian dan JenisPengertian Elektroforesis adalah suatu teknik pemisahan/analisis kualitatif suatu zat dengan bantuan arus listrik.

Prinsip pemisahan dalam elektroforesis didasarkan atas perbedaan migrasi komponen pada fasa pendukung, karena adanya perbedaan muatan dan massa molekul.

**Pengertian dan Jenis Teknik ElektroforesisDibedakan atas Teknik Konvensional KapilerDibedakan atas Teknik Frontal (moving boundary): tak berpendukungZonal : berpendukungb. Jenis-jenis Teknik Elektroforesis

**Pengertian dan JenisT.E.F. konvensional : Ukuran alat /jumlah cuplikan/fasa pembawa cukup besar Menggunakan arus listrik dengan tegangan tidak terlalu besar ( beberapa puluh volt saja) Proses lama (lebih dari 0,5 jam)

Teknik Elektroforesis Konvensional dibagi menjadi 2 yaitu:elektroforesis larutan (moving boundary electrophoresis)elektroforesis daerah (zone electrophoresis).

1. Elektroforesis larutan (moving boundary electrophoresis) Pada teknik elektroforesis larutan, larutan penyangga yang mengandung makro-molekul ditempatkan dalam suatu kamar tertutup dan dialiri arus listrik. Kecepatan migrasi dari makro-molekul diukur dengan jalan melihat terjadinya pemisahan dari molekul (terlihat seperti pita) di dalam pelarut.2. Elektroforesis daerah (zone electrophoresis) adalah menggunakan suatu bahan padat yang berfungsi sebagai media penunjang yang berisi (diberi) larutan penyangga. **

**Pengertian dan JenisT.E.F. kapiler : Ukuran alat /jumlah cuplikan/fasa pembawa sangat sedikit/kecil Proses cepat (kurang dari 0,5 jam)Pendukung:pipa kapiler terbuat dari gelas dengan panjang bermeter-meter. Elektrolit: larutan bufer Memerlukan larutan elektrolit dan komponen cuplikan sedikit (mikro).

**Kegunaan/ManfaatKegunaan / manfaat Pemisahan dan analisis senyawa bermuatan Pemisahan dan analisis makromolekul seperti protein, polisakarida, as. Nukleat Pemisahan dan analisis campuran senyawa bermuatan dan tak bermuatan ( untuk E.F. kapiler)

**Peralatan dan cara KerjaGambar Alat ElektroforesisSenyawa tidak berwarna dapat dilihat dengan paparan sinar UV

**Peralatan dan cara KerjaKomponen utama alat 1. Larutan elektrolit 2. Zat pendukung3. Elektroda Adalah larutan pembawa komponenumumnya bufer dengan pH tertentu.tempat pemisahan terjadi, biasanya berupakertas (selulosa asetat, selulosa nitrat), gelkanji, gel poliakrilamid, busa poliuretan,agar-agar.katoda dan anoda yang dihubungkanDengan arus listrik.

**Peralatan dan cara KerjaCara Kerja1. Wadah dijenuhkan dengan larutan elektrolit 2. Cuplikan ditotolkan pada fasa pendukung3. Pendukung dengan tootolan cuplikan dijenuhkan dengan uap elektrolit.4. Ujung-ujung pendukung dicelupkan ke dalam elektrolit5. Kedua elektroda dihubungkan 6. Pemisahan dimulai7. Hasil pemisahan dihubungkan dengan detektor untuk keperluan analisis kualitatif dan kuantitatif

**Pemisahan dengan Teknik ElektroforesisProses Pemisahan Untuk Melihat Animasi Klik di sini!

**Pemisahan dengan Teknik ElektroforesisPada fasa pendukungSetelah Melaluidetektor

**Pemisahan dengan Teknik ElektroforesisPerhatikan migrasi komponen berikut ini pada waktu yang samaUntuk Animasi Klik Di sini!

**Faktor-faktor yang Mempengaruhi PemisahanFaktor yang mempengaruhi pemisahandengan Elektroforesis Daerah 1. Kemobilan ion/partikel (): 2. Derajat onisasi 3. Pembentukan Kompleks Bermuatan 4. Konsentrasi larutan elektrolit

**Kelebihan/Kelemahan Teknik ElektroforesisKelebihan Teknik ElektroforesisMudah untuk molekul besar dan bermuatan. Dapat digabungkan dengan kromatografi (Lempeng tipis).Lebih cepat dari kromatografi biasa. Alat dan teknik sederhana.

**Kelebihan/Kelemahan Teknik ElektroforesisKelemahan Teknik ElektroforesisSulit untuk analisis kuantitatif, kecuali dengan EF tidak berpendukung.Kelemahan teknik ZEF dapat diatasi denganelektroforesis kapilerSukar mendeteksi konsentrasi rendah.Sukar untuk senyawa tidak bermuatan.

**Teknik Elektroforesis KapilerTeknik Elektroforesis KapilerKarakteristik Elektrolit: larutan bufer Tegangan 10.000 30.000 V.Mekanisme berbeda dari EF konvensional.

**Teknik Elektroforesis Kapiler

**Teknik Elektroforesis Kapiler

**Beberapa Diagnostik Kesehatan Yang Menggunakan ElektroforesisPemeriksaan ProteinPemeriksaan protein elektroforesis merupakan pengukuran protein dalam darah dengan menggunakan metode elektroforesis, yaitu memisahkan protein berdasarkan sifat fisik protein itu sendiri (albumin, alpha1-globulin, alpha2-globulin, beta-globulin, dan gamma-globulin)

Manfaat Pemeriksaan : Skrining, diagnosis dan evaluasi beberapa penyakit atau kondisi seperti hepatitis (autoimun), sirosis, inflamasi kronik, abnormalitas alpha1-antitrypsin.

Persyaratan & Jenis Sampel : Serum 0.3 MlNilai Rujukan :Protein Elektroforesis(A/G rasio) : 1.39 - 2.23%,Protein Elektroforesis(albumin) : 60.3 - 71.4% (4.6 - 5.4 g/dL),Protein Elektroforesis(alfa-1) : 1.4 - 2.9% (0.1 - 0.2 g/dL),Protein Elektroforesis(alfa-2) : 7.2 - 11.3% (0.5 - 0.85 g/dL),Protein Elektroforesis(Beta) : 8.1 - 12.7% (0.6 - 1.0 g/dL),Protein Elektroforesis(Gamma) : 8.7 - 16.0% (0.6 - 1.2 g/dL)

**Analisa Hb Elektroforesa meupakan pemeriksaan untuk mendeteksi beberapa jenis Hb (S atau D; C atau E) secara kualitatif atau semi-kuantitatif. Pemeriksaan ini juga mampu memisahkan HbA dan HbA2. Manfaat Pemeriksaan:Mendiagnosis hemoglobinopati dan thalassemia, dan evaluasi kondisi anemia hemolitik.Persyaratan & Jenis Sampel:1 mL Darah EDTA

Nilai Rujukan: HbA : 95-98%HbA2 : 1,5-3,5%HbF : 2,0%

2. Analisis Darah (Hb)

TERIMA KASIH**