Kelompok 12 VIROLOGI.pptx

7/17/2019 Kelompok 12 VIROLOGI.pptx

http://slidepdf.com/reader/full/kelompok-12-virologipptx 1/24

Dian Yustisia RRismauzy Marwan

Rosidah

Yuliana Sandra P

Diagnosa Laboratorium dan Jaminan Mutu Pemeriksaan Virologi



Diagnosis Virus

Secara umum, tes diagnostik daat dikelomokkan

men!adi " kategori# Yaitu $

% Pemeriksaan langsung &direct detection'

% Pemeriksaan tidak langsung &(irus isolasi',

% Serologi#



% Dalam emeriksaan langsung, sesimen klinis dieriksa

langsung untuk kehadiran artikel (irus, (irus antigen

atau asam nukleat (irus#

% Dalam emeriksaan tidak langsung, sesimen ke kultursel, telur atau hewan dalam uaya untuk menumbuhkan

(irus$ ini disebut isolasi (irus# Serologi sebenarnya

meruakan !auh sebagian besar eker!aan dari setia

laboratorium (irologi#



% Diagnosis serologis daat dilakukan dengan deteksi

eningkatan titer antibodi antara taha akut dan sembuh

dari in)eksi, atau deteksi *gM# Secara umum, sebagian

besar in)eksi (irus umum daat didiagnosis dengan

serologi# Sesimen yang digunakan untuk arah deteksidan isolasi (irus sangat enting#



Pemeriksaan Langsung

% +lectron Microscoy mor)ologi kekebalan tubuh

mikrosko elektron

% -ahaya mikrosko enamilan histologis . misalnya

badan inklusi

% /ntigen deteksi imuno)luoresensi, +L*S/ dll

% 0eknik molekuler untuk deteksi langsung dari genom

(irus



Pemeriksaan 0idak Langsung

% 1ultur Sel . e)ek sitoatik, haemadsortion, kon)irmasi

oleh netralisasi, gangguan, dll imuno)luoresensi

% 0elur ocks di -/M . haemagglutination, badan inklusi

% Penyakit hewan atau kon)irmasi mati oleh netralisasi

Serologi

% Deteksi meningkatnya titer antibodi antara taha akut dan

sembuh dari in)eksi, atau deteksi *gM ada in)eksi rimer



Pemeriksaan Langsung (Direct)

% Metode emeriksaan langsung sering !uga disebut

metode diagnostik ceat karena mereka biasanya daat

memberikan hasil yang baik dalam yang sama atau hari

berikutnya#

% 2al ini sangat berguna dalam kasus.kasus ketika

mana!emen klinis asien sangat tergantung ada

ketersediaan ceat hasil laboratorium misalnya

diagnosis in)eksi RSV ada neonatus, atau in)eksi -MV

berat ada asien immunocomromised



Deteksi Antigen

% -ontoh deteksi antigen

termasuk engu!ian

imuno)luoresensi dari

asirasi naso)aring untuk

(irus ernaasan misalnya#

RSV, )lu /, )lu 3, dan

adeno(irus, deteksi antigen

rota(irus dalam tin!a, tes

45 -MV antigenaemia,deteksi 2SV dan V6V di

scraings kulit, dan deteksi

23s/g dalam serum



Electron Microscopy (EM)

% Virus diagnosis dengan mikrosko

elektron bergantung ada deteksi

dan identi)ikasi (irus berdasarkan

mor)ologi karakteristik mereka#

% 1euntungan utama dari (irus

diagnosis oleh +M adalah

kemamuan untuk

mem(isualisasikan (irus# Dengan

mengidenti)ikasi (irus secara

langsung, adalah mungkin untuk

melakukan emeriksaan tana

konse terbentuk dari agen

etiologi, berbeda dengan orang.

orang yang membutuhkan tes

robe (irus tertentu

% /da 7 !enis *+M, sederhana

*+M, di mana sesimen

diinkubasi dengan antibodi

sesi)ik sebelum

ewarnaan denganharaan bahwa antibodi

akan menggumalkan

sesimen, dan )ase adat

*+M &SP*+M', di mana

coy kotak dilaisi dengan

antibodi sesi)ik yang

digunakan untuk

menangka artikel (irus

dari sesimen#



Mikroskop Cahaya

% Virus merelikasi sering menghasilkan erubahan

histologis ada sel yang terin)eksi# Perubahan ini

mungkin karakteristik atau non.sesi)ik# 0ubuh (irusinklusi ada dasarnya koleksi merelikasi artikel (irus

baik di dalam inti atau sitolasma#

% -ontoh badan inklusi meliuti badan negri dan badan

inklusi cytomegalic ditemukan di rabies dan in)eksi -MVmasing.masing# Meskiun tidak sensiti) atau sesi)ik,

histologi teta ber)ungsi sebagai tambahan yang

berguna dalam diagnosis in)eksi (irus tertentu#



Viral Genom Deteksi

% Metode berdasarkan deteksi genom (irus !uga sering dikenal

sebagai metode molekuler# 2al ini sering mengatakan bahwa

metode molekuler adalah arah masa dean diagnosis (irus#

% 8amun dalam rakteknya, meskiun enggunaan metode ini

memang meningkat, eran yang dimainkan oleh metode

molekuler di laboratorium (irus diagnostik rutin masih kecil

dibandingkan dengan metode kon(ensional# Sudah asti

bahwa meskiun eran metode molekuler akan meningkat

esat dalam teknik molekuler dekat )uture#-lassical seerti

dot.blot dan Southern blot.tergantung ada enggunaan

robe D8/ R8/ sesi)ik untuk hibridisasi#



Pemeriksaan Tidak Langsung

!ndirect (!solasi Virus)

% 1ultur sel, telur, dan hewan daat digunakan untuk

isolasi# 8amun telur dan hewan yang sulit untuk

menangani dan laboratorium diagnostik yang aling (iral

bergantung ada kultur sel sa!a# /da " !enis kultur sel$

% Sel rimer

% Sel semi.kontinyu

% Sel terus menerus



!denti"ikasi Perkem#angan Virus

% 1eberadaan (irus berkembang biasanya terdeteksi oleh$

% Sitoatik +))ect &-P+' . mungkin khusus atau non.sesi)ik misalnya 2SV dan -MV menghasilkan -P+

tertentu, sedangkan entero(irus tidak#

% 2aemadsortion . sel memeroleh kemamuan untuk

menemel sel darah merah mamalia# 2aemadsortionterutama digunakan untuk mendeteksi in)luenza dan

arain)luenza(iruses



Masalah dengan kultur sel

% Masalah utama dengan kultur sel adalah !angka waktu

yang an!ang &hingga 9 minggu' dierlukan untuk

hasilnya akan tersedia# Juga, sensiti(itas yang rendahdan tergantung ada banyak )aktor, seerti kondisi

sesimen, dan kondisi lembar sel# 1ultur sel !uga sangat

rentan terhada kontaminasi bakteri dan zat.zat beracun

dalam sesimen# 0erakhir, banyak (irus tidak akan

tumbuh dalam kultur sel sama sekali misalnya 2eatitis3 dan -, (irus diare, ar(o(irus dll#



$apid kultur teknik

% Salah satu kontribusi aling signi)ikan untuk diagnosis

ceat telah eneraan budaya sentri)ugasi untuk

diagnosis (irus# Selama beberaa tahun, telah diakuibahwa keceatan rendah sentri)ugasi sesimen ke

monolayers sel meningkatkan in)ekti(itas (irus tertentu

serta klamidia# 1ultur sel ternoda oleh antibodi

monoklonal untuk kehadiran antigen (irus sesi)ik 79.9:

!am kemudian



Serologi

% Serologi membentuk andalan diagnosis (irus# *nilah yang

ter!adi dalam reson imun humoral utama untuk antigen#

Setelah emaaran, antibodi ertama yang muncul adalah

*gM, yang diikuti oleh titer !auh lebih tinggi dari *g;#

% Dalam kasus rein)eksi, tingkat *gM sesi)ik baik teta sama

atau naik sedikit# 0ai *g; tunas dengan ceat dan !auh

lebih awal dari ada in)eksi rimer# 3anyak !enis tes

serologi yang tersedia# Dengan beberaa tes seerti +*/

dan R*/, satu daat melihat khusus untuk *gM atau *g;,sedangkan dengan tes lain seerti -<0 dan 2/*, satu

hanya daat mendeteksi antibodi total, yang terdiri

terutama *g;#



%eter#atasan diagnosis serologi

% =ntuk (irus seerti rubella dan heatitis /, timbulnya ge!ala klinis

berteatan dengan erkembangan antibodi# Deteksi *gM atau

meningkatnya titer *g; dalam serum asien akan menun!ukkan

enyakit akti)#

% 8amun, banyak (irus sering menghasilkan enyakit klinis sebelum

munculnya antibodi seerti ernaasan dan (irus diare# Jadi dalam

hal ini, setia diagnosis serologis akan retrosekti) dan oleh karena

itu tidak akan berguna#

% /da !uga (irus yang menghasilkan bulan enyakit klinis atau tahun

setelah terin)eksi 2*V misalnya dan rabies# Dalam kasus (irus ini,

kehadiran hanya antibodi yang cuku untuk membuat diagnosis

de)initi)#



=!i <iksasi di microtiter iring# 3aris > dan 7

ameran )iksasi komlemen dieroleh

dengan sesimen serum )ase akut dan

sembuh, masing.masing# &Pengenceran

serum 7 kali liat yang digunakan' diamati

eningkatan 9 kali liat signi)ikan danmenun!ukkan in)eksi#

Lemeng +L*S/$ sumur berwarna

menun!ukkan reakti(itas# Semakin gela

warnanya, semakin tinggi yang reakti(itas



Anti#odi dalam C&'

% Pada orang yang sehat, harus ada sedikit atau tidak ada

antibodi dalam -S<# Mana ada meningitis (irus atau

ense)alitis, antibodi daat dihasilkan terhada (irus olehlim)osit dalam -S<# 0emuan antibodi dalam -S<

dikatakan signi)ikan ketika rasio antara titer antibodi

dalam serum dan bahwa dalam -S< kurang dari >??#



uality Control di Virologi %linis

% 1ontrol kualitas di laboratorium klinis terdiri dari satu set

rosedur yang dirancang untuk membantu memastikan

engiriman keada sta) medis hasil laboratorium yangkonsisten dan akurat# 2asil ini harus diberikan secara

teat waktu sementara data masih rele(an secara#

Sebuah laboratorium (irologi klinis harus dirancang

sedemikian sehingga klinis 3iohazard yang risiko untuk

ersonil laboratorium dan masyarakat umumdiminimalkan dan bahwa budaya dilindungi dari

encemaran lingkungan#



0ransotasi Sesimen

% Sesimen untuk isolasi (irus sering diadakan untuk

!angka waktu yang lama sebelum mencaai

laboratorium# Virus menyelimuti seerti RSV dan -MVsangat bertanggung !awab untuk suhu kamar dan

)reeze.thaw siklus sedangkan (irus non.menyelimuti

seerti entero(irus mentolerir kondisi ini dengan baik#

Sebagai aturan umum, sesimen (irus diadakan untuk

!angka endek harus didinginkan, sedangkan untukwaktu yang lebih lama daat dibekukan ada .7? atau

.@?o -#



1ultur Jaringan dan Media

% 1ultur !aringan teta andalan non.serologis diagnosis (irus# Aleh

karena itu, kontrol kualitas yang memadai untuk komersial dibeli

atau untuk ersiaan di rumah sel kultur !aringan sangat enting#

Dalam garis sel tertentu, mungkin ada (ariasi yang signi)ikandalam sensiti(itas untuk isolasi (irus yang mungkin tergantung

ada subline sel tertentu atau clone dan nomor ayat#

% *n)ormasi tentang garis sel tertentu harus dicatat ngotot

termasuk sumber, !enis, !umlah bagian, con)luency dan kondisisel# 2ilangnya garis sel rutin assaged untuk digunakan daat

menyebabkan gangguan arah alur ker!a dan karena itu,

ketentuan harus dibuat untuk sel back.u dalam acara

kontaminasi atau laboratorium kecelakaan#



Sistem back.u meliutiB

% Pembekuan dan enyimanan sel bagian rendah ada

.@? -# ;unakan dari termos saham diasangkan# 1etika

termos mencaai con)luency, hanya satu yangassaged, sedangkan labu kedua diadakan sebagai

back u samai menamilkan termos baru ertumbuhan

yang baik#

% Membawa satu set aralel termos saham menggunakansatu set terisah reagen kultur !aringan dan gelas#



0+R*M/ 1/S*2

Kelompok 12 VIROLOGI.pptx

Documents

Transcript of Kelompok 12 VIROLOGI.pptx