5/20/2018 Isolasi & Koloni

1/12

ISOLASI & KOLONI

KUMAN

5/20/2018 Isolasi & Koloni

2/12

CARA MELAKUKAN ISOLASI(MEMBIAK/MENANAM) KUMAN

Tujuanmelihat/identifikasi koloni kuman untuk identifikasi

spesies kuman, memperbanyak jumlah kuman

serta mendapatkan biakan murni (pure culture)

Pada media cair :mencelupkan 1 se/sengkelit (inoculating loop) berisi kuman

dalam spesimen/suspensidengan pipet tetes, diteteskan beberapa tetes (2-5 tetes)spesimen/suspensi kuman

5/20/2018 Isolasi & Koloni

3/12

Pada media padat :

1. Streak culture(metode goresan)Goresan-goresan dibuat sejajar tdk bersentuhan

supaya terjadi penipisan jumlah kuman, sehinggadiperoleh koloni-koloni terpisah (tdk berhimpitan)untuk memudahkan identifikasi koloni kuman

5/20/2018 Isolasi & Koloni

4/12

2. Slant culturedengan membuat goresan-goresan pada permukaan

media padat di tabung (permukaannya dibuatmiring) biakan miring

3. Stab culture(biakan tusuk)

dengan cara menusukkan se berisi kuman secarategak lurus pada media padat dalam tabung(misalnya media agar tegak)

5/20/2018 Isolasi & Koloni

5/12

4. Pour culture(biakan tuang)

biakan kuman yg dibuat dengan cara mencampurkankuman yang akan dibiak ke dalam media agar yangbelum membeku (suhunya tidak terlalu panas sehinggakuman tidak mati), kemudian campuran tersebut

dituang ke dalam plat dan dibiarkan membeku (dingin)

5/20/2018 Isolasi & Koloni

6/12

Setelah melakukan inokulasi (penanaman) dilanjutkan

dgn inkubasi (pengeraman) dalam alat inkubator padasuhu yg sesuai (biasanya 37C) selama 18-24 jam (kumanaerob)

Untuk kuman anaerob sebelum dimasukkan ke dalaminkubator, dimasukkan dahulu ke dalam anaerob jar(sungkup anaerob) untuk menciptakan suasana anaerob,karena kuman anaerob tdk dpt hidup pada suasana aerob(suasana yg terdpt oksigen)

5/20/2018 Isolasi & Koloni

7/12

KOLONI KUMAN

Kuman pada media padatmembentuk koloni

Kolonikuman

sekelompok/kumpulan kuman sebagai hasil

pertumbuhan dan perkembangbiakan suatu kuman

Koloni kuman dapat dilihat dan diamati berbedabentuk dan sifatnya, tergantung jenis kumannya maka

koloni kuman dapat digunakan untuk membantuidentifikasi spesies kuman (langkah kedua)

5/20/2018 Isolasi & Koloni

8/12

Hal-hal yang diperhatikan dalam identifikasi koloni kuman :

1. ukuran/diameterkoloni kuman dlm. mm

2. bentukkoloni (bulat/menjalar/bersulam /tidak teratur)3. penampangpermukaan koloni (cekung/cembung/datar)4. permukaan & tepihalus (Smooth = S) atau kasar

(Rough = R)

5. mengkilap/buram (glossy/opaque)6. warna koloni (pigmen: putih/kekuningan /kuning emas/

kehijauan/ ungu/merah)7. jernih atau keruh8. viskositas koloni : lunak seperti mentega, kering, keras,

berlendir/mukoid= M(koloni kuman yg punya kapsul)

5/20/2018 Isolasi & Koloni

9/12

9. bila kuman tumbuh pd media agar darah zonahemolisis.

Jenis zona hemolisis :

> hemolisis (ada zona kehijauan di sekitar koloni)> hemolisis (ada zona hemolisis jernih transparan

di sekitar koloni)> hemolisis gamma(tidak ada zona hemolisis di

sekitar koloni)

5/20/2018 Isolasi & Koloni

10/12

Beberapa contoh koloni berpigmen :> koloni pigmen merah mis. Serratia marcesens> koloni pigmen ungu mis. Chromobacterium

violaceum> koloni hijau mis. Pseudomonas aeruginosa> koloni kuning emas mis. Staphylococcus aureus> koloni putih mis. Staphylococcus epidermidis

> koloni kuning kering mis. M. tuberculosis

S. marcesens P. aeruginosa S. aureusC. violaceum

5/20/2018 Isolasi & Koloni

11/12

Beberapa contoh bentuk koloni kuman :

> koloni menjalarmis. kuman Proteus vulgaris

> koloni bersulammis. kuman Bacillus mycoides> koloni mukoidmis. kuman Klebsiella pneumoniae> koloni jernih seperti titik-titik air, dgn zona

hemolisis betamis. Streptococcus pyogenes> koloni jernih dengan zona hemolisis alpha,

mis. Streptococcus viridans

Koloni Bersulaman

5/20/2018 Isolasi & Koloni

12/12

Koloni mukoid Koloni menjalar Koloni rough

Koloni smooth

(Staphylococcus)

Koloni smooth

(Streptococcus)

Koloni S. aureusdi

MSA