ISOLASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN …repository.ump.ac.id/1842/1/Fitri Aryanti Cover.pdfi...
Transcript of ISOLASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN …repository.ump.ac.id/1842/1/Fitri Aryanti Cover.pdfi...
i
ISOLASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN
EKSTRAK BIJI PINANG
Skripsi
Untuk memenuhi sebagian persyaratan
Mencapai Derajat Sarjana S-1
Oleh
FITRI ARYANTI
1108010091
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
PURWOKERTO
2015
Isolasi dan Uji..., Fitri Aryanti, Fakultas Farmasi UMP, 2015
ii
Isolasi dan Uji..., Fitri Aryanti, Fakultas Farmasi UMP, 2015
iii
Isolasi dan Uji..., Fitri Aryanti, Fakultas Farmasi UMP, 2015
iv
PERNYATAAN
Yang bertandatangan dibawah ini, saya :
Nama : FITRI ARYANTI
NIM : 1108010091
Program Studi : Farmasi
Fakultas / Universitas : Farmasi/Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa skripsi ini adalah hasil dari
proses penelitian saya yang telah dilakukan sesuai dengan prosedur penelitian
yang benar dengan arahan dari dosen pembimbing dan bukan hasil penjiplakan
dari karya orang lain atau terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh
gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan penulis
juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan orang
lain kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam
daftar pustaka.
Demikian pernyataan ini, dan apabila kelak di kemudian hari terbukti ada
unsur penjiplakan, maka saya bersedia mempertanggungjawabkan sesuai dengan
ketentuan yang berlaku.
Purwokerto, Agustus 2015
Yang menyatakan,
FITRI ARYANTI
Isolasi dan Uji..., Fitri Aryanti, Fakultas Farmasi UMP, 2015
v
INTISARI
FITRI ARYANTI. Isolasi dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Biji Pinang.
Dibawah bimbingan ASMIYENTI DJALIASRIN DJALIL dan RETNO
WAHYUNINGRUM.
Latar Belakang : Ekstrak Etanol Biji Pinang memperlihatkan aktivitas
antioksidan yaitu IC50 sebesar 0,409 mg/mL yang lebih besar dibandingkan
vitamin C sebagai kontrol positif dengan nilai IC50 sebesar 0,964 mg/mL.
Berdasarkan landasan tersebut membuktikan bahwa ekstrak biji pinang berpotensi
sebagai antioksidan tetapi belum ada penelitian yang mengisolasi kandungan
kimia dari berbagai macam fraksi pada ekstrak biji pinang. Oleh karena itu perlu
dilakukan isolasi kandungan kimia dari beberapa fraksi dan uji aktifitas
antioksidan pada ekstrak dan berbagai fraksi biji pinang.
Tujuan Penelitian : Tujuan dari penelitian ini adalah mengisolasi kandungan
kimia dari fraksi dan menguji aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi biji pinang.
Metode Penelitian : Penelitian ini dilakukan dengan radikal DPPH untuk ekstrak
metanol, fraksi metanol-air, fraksi n-heksan, fraksi etilasetat, fraksi metanol biji
pinang dan untuk mengisolasi kandungan kimia dari fraksi metanol menggunakan
Kromatografi Lapis Tipis, Kromatografi Lapis Tipis Preparatif dan
Spektrofotometri UV-Vis.
Hasil : IC50 pada fraksi metanol adalah yang paling kecil dibandingkan dengan
fraksi metanol-air, fraksi etilasetat dan fraksi n-heksan yaitu 20,738 ppm karena
senyawa aktif biji pinang tertarik pada fraksi metanol sehingga aktivitas
antioksidannya paling besar. Hasil isolasi menggunakan metode KLT dan KLT
Preparatif adalah 84,6 mg yang kemudian diuji aktivitas antioksidan dengan IC50
sebesar 22396,3 ppm.
Kesimpulan : aktivitas antioksidan fraksi metanol lebih baik dibandingkan fraksi
metanol-air, fraksi etilasetat dan fraksi n-heksan. Fraksi metanol telah diisolasi
yang membuktikan senyawa aktif sebagai antioksidan.
Kata kunci : antioksidan, ekstrak metanol biji pinang, fraksi metanol
Isolasi dan Uji..., Fitri Aryanti, Fakultas Farmasi UMP, 2015
vi
ABSTRACK
FITRI Aryanti. Isolation and Antioxidant Activity Test of areca seed extract.
Under the supervisor of ASMIYENTI DJALIASRIN DJALIL and RETNO
WAHYUNINGRUM.
Background: The Extract of areca seed ethanol showed that the antioxidant
activity IC50 of 0.409 mg / mL was greater than vitamin c as a positive control
with IC50 value of 0.964 mg / mL. Based on these premises proves that areca seed
extract has potential as an antioxidant yet there was no further research that isolate
the chemical constituents of the various factions in the areca seed extracts.
Therefore it was necessary to isolate chemical constituents of some fractions and
antioxidant activity test of the extracts and various fractions of areca seed.
Objective: The objective of this study was to isolate the chemical constituents of
the fractions and tested the extracts of antioxidant activity and fractions of areca
seed.
Methods of the research: The study was carried out by radical DPPH for the
methanol extract, fraction of methanol-water, the fraction of n-hexane, fraction of
ethyl acetate, methanol fraction areca seed and to isolate the chemical constituents
of the methanol fraction using Thin Layer Chromatography, preparative thin layer
chromatography and spectrophotometry UV -Vis.
Results: the result revealed that methanol fraction with IC50 is the smallest
fraction (20.738 ppm) compared by the methanol-water fractions, fractions ethyl
acetate and n-hexane fraction. It was because of the active compounds of areca
nut adsorbed into methanol fraction. Therefore, those fractions have the greatest
antioxidant activity. The method of isolation was using 84.6 mg TLC and TLC
Preparative then it tested by the antioxidant activity with IC50 of 22396.3 ppm.
Conclusion: The antioxidant activity of the methanol fraction was better than the
methanol-water fractions, fractions ethyl acetate and n-hexane fraction. The
Methanol fraction that had been isolated proved the active compounds as
antioxidants.
Keywords: antioxidants, methanol extract of areca seed, methanol fraction.
Isolasi dan Uji..., Fitri Aryanti, Fakultas Farmasi UMP, 2015
vii
PERSEMBAHAN
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah memberikan
petunjuk dan kemudahan, sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik
dan lancar.
Skripsi ini penulis persembahkan untuk:
Orangtuaku yang selalu memberikan dukungan serta doa yang selalu
mengiringi hidupku dalam menempuh segala hal.
Kakak-kakakku, adikku dan keponakanku yang selalu memberikan
semangat dan motivasi untukku.
Emon, Lele, Aminah, Icon, Devi, Mas Enggi, Anya, Ghelsa, kelompok
praktikum RA, Bu woro, Pak mamat dan teman-teman seangkatan yang
telah membantu dan selalu memberikan dukungan untukku.
Kedua pembimbing yang selalu membimbing dan memberi nasehat
dengan sabar selama ini
Mba viji, Pindut, Ira, Helmi, Mba Santi, Mba devi,dan teman-teman kos
yang menemani dan menghibur
Isolasi dan Uji..., Fitri Aryanti, Fakultas Farmasi UMP, 2015
viii
MOTTO
Dibalik kesulitan ada Kemudahan sesudahnya
Teruslah berfikir positif, karena dengan itu dapat menutupi segala hal-hal negatif
dan segala ketakutan yang menghampiri diri
Dimana ada kemauan, disitu pasti ada jalan menuju kebaikan
Lakukan semuanya dengan penuh kesabaran agar hasilnya tidak sia-sia.
Isolasi dan Uji..., Fitri Aryanti, Fakultas Farmasi UMP, 2015
ix
PRAKATA
Dengan mengucap Alhamdulillahi Robil’allamin, dan segala puji syukur
senantiasa peneliti panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan
rahmat, hidayah dan inayahnya, sehingga peneliti dapat menyusun dan
menyelesaikan skripsi ini. Sholawat dan salam senantiasa tercurahkan kepada
Nabi Besar Muhammad SAW berserta keluarga dan sahabatnya.
Penyelesaian skripsi ini tidak terlepas dari bantuan dan dukungan dari
berbagai pihak yang telah memberikan bantuan yang sangat berarti bagi peneliti,
baik secara moral maupun materi. Untuk itu, peneliti mengucapkan terima kasih
kepada :
1. Dr. H. Syamsuhadi Irsyad, SH, M.H Rektor Universitas Muhammadiyah
Purwokerto.
2. Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si., Apt. Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Purwokerto.
3. Dr. Asmiyenti Djaliasrin Djalil, M.Si. Ketua Bidang Kemahasiswaan
Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto dan Dosen Pembimbing
I yang telah membimbing, memotivasi dan mendukung terlaksananya
ujian skripsi dan memberikan kesempatan hingga peneliti selesai studi.
4. Retno Wahyuningrum,S.Farm., M.Si., Apt. Dosen Pembimbing II yang
selalu sabar membimbing dan mengarahkan dalam penyusunan skripsi.
5. Semua pihak yang telah membantu hingga terselesaikannya skripsi ini.
Semoga semua bimbingan, dorongan dan bantuan yang telah diberikan
kepada peneliti mendapatkan pahala dari Allah SWT. Teriring harapan
semoga skripsi ini dapat bermanfaat khususnya bagi peneliti dan pembaca.
Purwokerto, Agustus 2014
Peneliti
Isolasi dan Uji..., Fitri Aryanti, Fakultas Farmasi UMP, 2015
x
RIWAYAT HIDUP
Nama : Fitri Aryanti
NIM / Angkatan : 1108010091 / 2011
Tempat / Tanggal Lahir : Cilacap, 12 April 1992
Jenis Kelamin : Perempuan
Agama : Islam
Alamat : Jln.Jaga desa no.68 Pahonjean, Majenang, Cilacap
Riwayat Pendidikan:
1. Perguruan Tinggi :Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Purwokerto (Angkatan 2011)
2. SMA / Tahun Lulus : SMK Farmasi Majenang / Tahun 2010
3. SMP / Tahun Lulus : SMP Negeri 2 Majenang / Tahun 2007
4. SD / Tahun Lulus : SD Negeri 1 Pahonjean / Tahun 2004
Isolasi dan Uji..., Fitri Aryanti, Fakultas Farmasi UMP, 2015
xi
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ...................................................................................... .i
HALAMAN PERSETUJUAN ...................................................................... ii
HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................ iii
HALAMAN PERNYATAAN ........................................................................ iv
INTISARI ....................................................................................................... v
ABSTRACT ..................................................................................................... vi
HALAMAN PERSEMBAHAN .................................................................... vii
MOTTO .......................................................................................................... viii
PRAKATA ...................................................................................................... ix
RIWAYAT HIDUP......................................................................................... x
DAFTAR ISI ................................................................................................... xi
DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xiii
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xiv
BAB I PENDAHULUAN ........................................................................ .. 1
A. Latar Belakang Masalah ......................................................... .. 1
B. Perumusan Masalah ............................................................... .. 2
C. Tujuan Penelitian ................................................................... .. 2
D. Manfaat Penelitian ................................................................. .. 2
BAB II TINJAUAN PUSTAKA .............................................................. .. 3
A. Tinjauan buah pinang ............................................................. .. 3
B. Antioksidan dan Radikal Bebas ............................................. .. 4
C. Ekstraksi ................................................................................. .. 6
D. Fraksinasi dan Isolasi Ekstrak ................................................ .. 7
E. Kromatografi Lapis Tipis ....................................................... .. 8
F. Kromatografi Lapis Tipis Preparatif ...................................... .. 9
G. Uji Antioksidan 1,1 DPPH... .................................................. .. 10
H. Spektrofotometri Ultraviolet-Visible........................................... 11
BAB III METODOLOGI PENELITIAN ................................................ 12
A. Jenis dan Rancangan Penelitian ............................................. 12
Isolasi dan Uji..., Fitri Aryanti, Fakultas Farmasi UMP, 2015
xii
B. Variabel Penelitian ................................................................. 12
1. Variabel Bebas ................................................................ 12
2. Variabel Tergantung ....................................................... 12
3. Variabel Terkendali ......................................................... 12
C. Definisi Variabel Operasional ................................................ 12
D. Waktu dan tempat Penelitian.................................................. 13
E. Alat dan Bahan ....................................................................... 13
F. Prosedur Penelitian................................................................. 14
1. Pengumpulan dan Penyiapan Sampel ............................. 14
2. Determinasi Bahan .......................................................... 14
3. Maserasi Biji Pinang ....................................................... 14
4. Fraksinasi ........................................................................ 14
5. Uji Aktivitas Antioksidan ............................................... 15
6. Identifikasi senyawa dengan KLT .................................. 18
7. Kromatografi Lapis Tipis Preparatif ............................... 18
8. Uji Aktivitas Antioksidan isolat dengan Spektrofotometri Uv-
vis .................................................................................... 19
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................... 20
A. Determinasi Tanaman ............................................................ 20
B. Penyiapan Bahan .................................................................... 20
C. Pembuatan Ekstrak Biji Pinang .............................................. 21
D. Fraksinasi Ekstrak Biji Pinang ............................................... 22
E. Uji aktivitas Antioksidan ....................................................... 23
F. Identifikasi senyawa menggunakan KLT............................... 28
G. Kromatografi Lapis Tipis Preparatif....................................... 30
H. Uji Aktivitas antioksidan Isolat.............................................. 30
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ................................................... 32
DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 33
LAMPIRAN .................................................................................................... 35
Isolasi dan Uji..., Fitri Aryanti, Fakultas Farmasi UMP, 2015
xiii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Buah Pinang ...................................................................................... 3
Gambar 2. Ektrak Kering biji pinang .................................................................. 22
Gambar 3. Scanning (λ maks) larutan DPPH ...................................................... 23
Gambar 4. Prinsip penangkapan H oleh DPPH .................................................. 24
Gambar 5. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan %penghambatan ekstrak
metanol.... .............................................................................................. 25
Gambar 6. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan %penghambatan fraksi
metanol.... .............................................................................................. 25
Gambar 7. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan %penghambatan fraksi
metanol-air.... ........................................................................................ 26
Gambar 8. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan %penghambatan fraksi n-
heksan.... ............................................................................................... 26
Gambar 9. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan %penghambatan fraksi
etilasetat.... ............................................................................................ 27
Gambar 10. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan %penghambatan vitamin
C.... ........................................................................................................ 27
Gambar 11. Lempeng KLT setelah disemprot H2SO4, NaNO2, FeCl3... .............. 29
Gambar 12. Hasil pengukuran λ maks isolat ...................................................... 23
Isolasi dan Uji..., Fitri Aryanti, Fakultas Farmasi UMP, 2015
xiv
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat determinasi ............................................................................ 35
Lampiran 2. Perhitungan rendemen ekstrak biji pinang ..................................... 36
Lampiran 3. Tahapan Fraksinasi ......................................................................... 37
Lampiran 4. Perhitungan Uji daya tangkap radikal bebas (%penghambatan), IC50
dan IC20 dengan radikal DPPH ...................................................... 38
Lampiran 5. Perhitungan Standar Deviasi (SD) untuk IC50 dan IC20 ................. 57
Isolasi dan Uji..., Fitri Aryanti, Fakultas Farmasi UMP, 2015