Introduzione delle analisi Insulina e hGH in Eolab · PDF fileMalattie associate all’hGH...

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Lavoro di diploma, SSMT Locarno, Tecnici di Analisi Biomediche

Introduzione delle analisi Insulina e hGH in EOLAB

Lavoro di diploma Carolina de Almeida

Figura 1: Immulite 2000

Scuola Superiore Medico Tecnica Locarno Tecnici in Analisi Biomediche

Laboratorio Centrale di Chimica e di Immunologia

Clinica di Bellinzona Responsabile: Dottor Franco Keller

Anno 2010/2011

Lavoro di diploma, SSMT Locarno, Tecnici di Analisi Biomediche ABSTRACT

1

Introduzione e obbiettivo I dosaggi di insulina esercitano un ruolo essenziale nellidentificazione degli insulinomi. I dosaggi dellhGH invece sono utili principalmente nella diagnosi e per il trattamento delle varie forme di secrezione anomala dellhGH. Uniposecrezione pu essere indice di nanismo e di potenziale di crescita non raggiunto mentre unipersecrezione pu indicare gigantismo ed acromegalia. Le analisi di insulina richieste in Ticino vengono spedite a Viollier di Allschwil, mentre quelle dellhGH vengono spedite allInselspital di Berna. Lobbiettivo introdurre al LC-CIC di Bellinzona queste due analisi, facendo un confronto tra i dati ottenuti nel laboratorio esterno ed i dati ottenuti al LC-CIC e valutando se ci sono differenze clinicamente significative tra questi.

Materiali e metodi Per questo lavoro sono state prese a caso 30 aliquote per linsulina e 29 per lhGH che sono state conservate a -20C durante 2 mesi. Sono poi state analizzate con lapparecchio Immulite 2000 con metodo di dosaggio immunometrico in fase solida a doppio sito, in chemiluminescenza. I dati sono stati analizzati e interpretati tramite il software Analyse-it Ltd., Leeds, UK, versione 2.20.

Risultati Linsulina misurata al LC-CIC ha uno scostamento proporzionale rispetto ai valori del Viollier. Questo dovuto al fatto che gli apparecchi sono diversi. LhGH misurato al LC-CIC ha un leggero scostamento costante e proporzionale rispetto allInselspital. Gli apparecchi in questo caso sono gli stessi.

Conclusioni Per linsulina da misurare in pazienti che hanno gi dei valori precedenti, il medico potr decidere se continuare a spedire le analisi o se iniziare a farle al LC-CIC con o senza una formula di correzione dei valori. LhGH potr essere analizzato al LC-CIC senza che per i pazienti con valori precedenti vi siano problemi di interpretazione e relazione ossia le misurazioni sono comparabili.

Introduction and objective Measurements of insulin have a essential role in the identification of insulinomas. Measurements of hGH on the other hand are mainly useful for the diagnosis and the treatment of the various kinds of abnormal hGH secretion. Hiposecretion can be an index of dwarfism or of growth potential not reached whereas a hypersecretion can indicate a gigantism or an acromegalia. Analyses of insulin which are requested in Ticino are sent to Viollier of Allschwil while the hGH analyses are sent to Inselspital in Bern. The objective of the research was to introduce at LC-CIC of Bellinzona two new analysis, making a comparision between the data obtained at the LC-CIC and evalueiting if there are clinical significant differences between those ones.

Materials and Methods For this study 30 aliquots for insulin and 29 for hGH were taken randomly and were conserved at -20 C for 2 months. They were than analysed with the Immulite 2000 with the method of solid-phase, two-site chemiluminescent immunometric assay. The data were analysed and interpretated with the software Analyse-it Ltd., Leeds, UK, 2.20 version.

Results The insuline measured at the LC-CIC has a proportional bias compared to the values of Viollier. This can be explained by the use of different apparatus. The hGH measured at the LC-CIC has a low, constant and proportional bias compared to the values of Inselspital.

Conclusions For the measurement of insulin in patients who have previous test results, the doctor will be able to decide whether to continue to send the analyses to external laboratories or start to make them at the LC-CIC with or without a correction formula of the value. The hGH can be analysed at the LC-CIC and for the patients with previous test results there are no problems of interpretation that is to say the measurements are comparable.

Lavoro di diploma, SSMT Locarno, Tecnici di Analisi Biomediche

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Indice I Introduzione ............................................................................................................................... 4

1.1. Ormone della crescita (hGH)............................................................................................. 41.1.1. Cause di ipopituitarismo ............................................................................................. 41.1.2. Perch e quando fare il test di stimolazione per lhGH? ............................................ 41.1.3. GH usato come terapia e farmacogenomica ............................................................... 51.1.4. Altre analisi correlate all hGH .................................................................................. 51.1.5. Malattie associate allhGH ......................................................................................... 6

1.2. Insulina .............................................................................................................................. 71.2.1. Introduzione ................................................................................................................ 71.2.2. Regolazione della secrezione ..................................................................................... 71.2.3. Azione dellinsulina ................................................................................................... 81.2.4. Scopo dellanalisi di insulina ..................................................................................... 81.2.5. Insulinoma .................................................................................................................. 91.2.6. Test che possono essere associati allanalisi di insulina: ........................................... 9

II Obiettivo ................................................................................................................................. 10III Materiali e metodi.................................................................................................................. 11

3.1. Differenze tra gli apparecchi ........................................................................................... 113.2. Metodo della ADVIA Centaur XP Immunoassay System ........................................... 113.3. Immulite 2000 ................................................................................................................. 123.4. Reazione in chemiluminescenza dellImmulite 2000...................................................... 123.5. Esecuzione del test da carico ........................................................................................... 13

3.5.1. Test da carico di glucosio con dosaggio dellhGH ................................................... 133.5.2. Test al GHRH ........................................................................................................... 13

3.6. Raccolta dei campioni e kit usati ..................................................................................... 133.7. Software di analisi statistica ............................................................................................ 13

IV Risultati ................................................................................................................................. 144.1. Introduzione ..................................................................................................................... 144.2. Calibrazioni e controlli: ................................................................................................... 144.3 Dati ottenuti ...................................................................................................................... 144.4. Analisi statistica human Growth Hormone ..................................................................... 16

4.4.1. Metodo delle differenze Altman & Bland ................................................................ 164.4.2. Regressione secondo Deming................................................................................... 17

4.5. Analisi statistica Insulina ................................................................................................. 194.5.1. Altman Bland Test-Metodo delle differenze ............................................................ 194.5.2. Analisi degli outliers con il metodo di Tukey applicato alla statistica bivariata. ..... 214.5.3. Passing e Bablok....................................................................................................... 21

Lavoro di diploma, SSMT Locarno, Tecnici di Analisi Biomediche

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4.6 Stima dei costi dei reattivi di insulina e hGH per un anno al LC-CIC ............................. 23V Discussione ............................................................................................................................. 24VI Conclusioni ........................................................................................................................... 25VI Ringraziamenti ...................................................................................................................... 26VII Bibliografia .......................................................................................................................... 27VIII Allegati ............................................................................................................................... 27Indice delle Figure Figura 1: Immulite