I01 PORTADACONSUMER TESTING SERVICES-LABORATORYCdigo:CTS-LAB-F-40-02INFORME CONFIRMACIN Y/O VALIDACINVersin:1FechaOct-14AutorPaola CastilloAprobado por:Camilo Alfonso

MTODO DE ANALISIS: DETERMINACION DE VITAMINA B6 (PIRIDOXINA) POR CROMATOGRAFIA LQUIDA DE ALTA EFICIENCIA (UHPLC)

MTODO DE REFERENCIA: AOAC Official Method 940.33. Rivoflavin (Vitamin B2) in Vitamin Preparations. Microbiological Methods.

AOAC Official Method 970.65. Rivoflavin (Vitamin B2) in Fodd and Vitamin Preparations.

AOAC Official Method 952.20. Cobalamin (Vitamin B12) in Vitamin Preparations. Microbiological Methods.

Food Analysis by HPLC, Leo M.L. Nollet. Second Edition. Cap X, Quantitative Determination of water- soluble vitamins, pp 403-469, 1992.

AOAC Official Method 944.13. Nicin (Vitamin B3) and Nicotinamide in Vitamin Preparations. Microbiological Methods.

AOAC Official Method 2004.07. Piridoxin (Vitamin B6) in Reconstituted Infant Formula. Liquid Chromatographic Method.

MATRIZ: Cereales

VALIDACIN No: IV-XX-XX

REALIZADO POR:Nombres Sandra Morales A - Ana ForeroCargo

REVISADO POR:Nombre Cargo APROBADO POR:Nombre Cargo|

FECHA: 31/03/2015

Esta es una COPIA NO CONTROLADALa versin aprobada ms reciente de este documento se encuentra en Share PointPag 1 de 9CONFIDENCIAL

I02 INFORMECONSUMER TESTING SERVICES-LABORATORYCdigo:CTS-LAB-F-40-02INFORME CONFIRMACIN Y/O VALIDACINVersin:1FechaOct-14AutorPaola CastilloAprobado por:Camilo Alfonso

1. OBJETIVOS

-Demostrar experimentalmente que las condiciones del laboratorio Consumer Testing Services de SGS Colombia, cumplen con los criterios de aceptacion establecidos para el analisis de complejo B (Vitamina B2, B3, B5, B6, B9 y B12) en alimentos (procedimiento CTS-LAB-P-XX). Estos criterios son: Exactitud, precision, Limite de deteccin, limite de cuantificacion, reproducibilidad, repetibilidad, porcentaje de recuperacion, incertidumbre y robustez.

2. ALCANCE

El presente informe de validacion aplica para el rea de anlisis de cromatografa lquida en la determinacin de Complejo B (Vitamina B2, B3, B5, B6, B9, B12) en matriz de Cereales; en el laboratorio de Consumer Testing Services de SGS Colombia

3. REACTIVOS NECESARIOS-Acetonitrilo grado HPLC-Agua tipo I o grado HpLC-Fosfato cido de potasio (K2HPO4)-Fosfato di cido de potasio (KH2PO4)-Acido Fosfrico al 85%-cido Clorhidrico-Hidroxido de Sodio-Estandar de Riboflavina (Vitamina B2)4. EQUIPOS NECESARIOS- Sistema de UHPLC con detector UV-VIS ENVI-FOOD-21-Columna para UHPLC Kinetix C18 2.6 m, 2.1 x 100 mm o equivalente-Balanza analtica ENVI-LAB-BO-59 y/o ENVI-LAB-BO-60-Ultrasonido termostatado ENVI-LAB-BO-97-Agitador Vortex ENVI-FOOD-18-Centrifuga ENVI-LAB-BO-57-Autoclave-Transfer pipeta de 10 100 uL ENVI-LAB-BO-12-Transfer pipeta de 100 1000 uL ENVI-LAB-BO-13-Transfer pipeta de 0.5 5 mL ENVI-FOOD-225. MATERIALES-Balon forado ambar de 5 mL, 10 mL, 25 mL y 50 mL.-Pipeta clase A de 25 mL-Balon aforado de 1000 mL.-Vasos de precipitados.-Erlenmeyer de 250 mL6. ABREVIATURASN.A

Esta es una COPIA NO CONTROLADALa versin aprobada ms reciente de este documento se encuentra en Share PointPag 2 de 9CONFIDENCIAL

I03 INFORMECONSUMER TESTING SERVICES-LABORATORYCdigo:CTS-LAB-F-40-02INFORME CONFIRMACIN Y/O VALIDACINVersin:1FechaOct-14AutorPaola CastilloAprobado por:Camilo Alfonso

7. PROCEDIMIENTO

La validacin se llev a cabo siguiendo el procedimiento de confirmacin Validacin, de acuerdo al procedimiento de laboratorio CTS-LAB-P-XX.

7.1 Preparacin de la muestra

Homogenizar la muestra, en caso de que sea necesario tamizar. Pesar 5 gramos de la muestra en un tubo falcn y ponerlo en un Erlenmeyer de 250 mL boca 24/40. Adicionar 50 mL de solucin de cido clorhidrico 0.1 M y agitar. Hidrolizar en autoclave en el modo fase esterilizacin de lquidos durante 30 min a 121C, o hidrolizar en bao maria a 50 C durante 30 minutos (Se recomienda realizar la extraccin por autoclave). Enfriar a temperatura ambiente. Ajustar a pH 4-4,5 empleano una solucion de hidroxido de sodio al 15%. Agregar 320 mg de Amilasa y 250 mg de Papaina a la muestra. Las dos deben agregarse al tiempo. Tapar y llevar a una estufa por 2 horas a temperatura de 45-50C o toda la noche (15 horas) a 37C. Enfriar a temperatura ambiente y pasar a un balon actnico, llevar a volumen con agua tipo I. Centrifugar a 2000 rpm durante 10 minutos. Del sobrenadante tomar 5 mL y llevar a volumen con agua tipo I. Filtrar por filtros de 0.22 m y proceder a su lectura.

7.2 Preparacin del adicionado de laboratorio Homogenizar la muestra, en caso de ser necesario tamizar. Pesar 5 gramos de la muestra en unerlenmeyer y adicionar 1.5 mL del estndar de 1000 mg/L sobre la muestra. Homogenizar la muestra en el vortex durante 30 segundos aproximadamente y continuar con la extraccin como si fuera una muestra, descontar el volumen adicionado de los estandares al volumen de extraccin.

7.1. INFORMACIN GENERAL:

Tabla No. 1: Informacin general de la validacin Si aplicaEstandar Vitamina B6 (Piridoxina)PATRN O MATERIAL DE REFERENCIA:Vitamina B6 (Piridoxina)PUREZA DEL PATRN:99.80%LOTE:00022731-95VOBSERVACIONES:CDXA-13-4984

Esta es una COPIA NO CONTROLADALa versin aprobada ms reciente de este documento se encuentra en Share PointPag 3 de 9CONFIDENCIAL

I04 INFORME CONSUMER TESTING SERVICES-LABORATORYCdigo:CTS-LAB-F-40-02INFORME CONFIRMACIN Y/O VALIDACINVersin:1FechaOct-14AutorPaola CastilloAprobado por:Camilo Alfonso

7.3. PREPARACIN DE LAS MUESTRAS (SI APLICA):

Tabla No. 3: Muestras Adicionadas.MuestraMuestra Inicial Peso Factor de dilucionEstandar Utilizado Concentracion inicial Concentracin del Adicionado5,0000 gNA1000 mg/L30 mg/L

7.4 VALIDACIN DE PARMETROS:

RANGO DE TRABAJO:Estar definido de acuerdo a la curva de calibracinLINEALIDAD:Se realizar lectura del rango lineal que se determine 3 veces para verificar respuesta lineal del detector UV - VISIBLE vs Concentracin del analito (Vitamina B6).LDI:Se realizara la lectura de 10 blanco de fase mvil para determinacin de interferenciasLDM:Se evaluar el LDM realizando minmo 6 ensayos por analista sobre un estandar, por dilucin sucesiva para calcular el lmite de deteccion del mtodo. El lmite de deteccin puede ser calculado como: LOD=3,3* SDRLCM:El lmite de cuantificacin puede ser calculado como:LOQ=10* SDR EXACTITUD:Se evaluar con estndares, de concentracin 30 mg/mL de Vitamina C.REPETIBILIDAD:Se evaluar la repetibilidad cuantificando muestras en das diferentes bajo condiciones de repetibilidad.REPRODUCIBILIDAD:Se evaluar la reproducibilidad cuantificando muestras realizadas en das diferentes bajo condiciones de reproducibilidad (Dos analistas).OBSERVACIONES:Se revisara la robustez del mtodo empleando tcnica de analisis de homogeneidad de varianza sobre estadistico de Fisher.

0

Esta es una COPIA NO CONTROLADALa versin aprobada ms reciente de este documento se encuentra en Share PointPag 4 de 9CONFIDENCIAL

I07 RESULTADOSLABORATORIOS DE ENSAYOSCdigo:CTS-LAB-F-40-02INFORME CONFIRMACIN Y/O VALIDACINVersin:1FechaOct-14AutorPaola CastilloAprobado por:Camilo Alfonso

8. RESUMEN RESULTADOS DE LA VALIDACIN

PARMETROVALOR OBTENIDOLDI0.000LDM1.034LCM2.063COEFICIENTE DE VARIACION0.648Sr0.568SR0.641RSDr1.947RSDR2.198r1.590R1.796LIMITE RSDr (%)4.867LIMITE RSDR (%)5.496% RECUPERACION98.36

La versin aprobada ms reciente de este documento se encuentra en Share PointPag 7 de 9CONFIDENCIAL

I08 CONCLUSIONESCONSUMER TESTING SERVICES-LABORATORYCdigo:CTS-LAB-F-40-02INFORME CONFIRMACIN Y/O VALIDACINVersin:1FechaOct-14AutorPaola CastilloAprobado por:Camilo Alfonso

9. CONCLUSIONES

-Se realiz la evaluacin de los parmetros establecidos dentro de la validacin. Por medio de anlisis estadstico, se observa que dicha evaluacin se ajusta satisfactoriamente a los lmites establecidos, y aplican para el presente procedimiento.

-Para determinar el porcentaje de recuperacin se fortificaron muestras de cereal con cantidades conocidas del estndar de Vitamina B6 se analizaron y se obtuvo un porcentaje de recuperacin de 70.0%, asegurando el resultado para la determinacin del analito bajo evaluacin; y la tcnica es recomendable ya que no presenta interferencias significativas en su desarrollo.

-Segn los resultados obtenidos y presentados en este informe, el mtodo para anlisis de Vitamina B6, por mtodo cromatogrfico en matrices de Cereales, se ajusta al uso propuesto en el plan de validacin y/o confirmacin y es idneo para ser aplicado en las condiciones particulares del laboratorio de Cromatografa de Gases siguiendo el respectivo procedimiento estndar de operacin CTS-LAB-P-XX. Por lo tanto se autoriza su utilizacin bajo dichas condiciones a partir de la fecha

11. ANEXOS-Plan de validacin-Formatos Primarios de validacinFIN DEL INFORME

La versin aprobada ms reciente de este documento se encuentra en Share PointPag 8 de 9CONFIDENCIAL

CURVA 1CONSUMER TESTING SERVICES-LABORATORYCdigo:CTS-LAB-F-40-02INFORME CONFIRMACIN Y/O VALIDACINVersin:1FechaOct-14AutorPaola CastilloAprobado por:Camilo Alfonso

ANEXO 1. Curvas de calibracion Vitamina B6 (PIRIDOXINA)Tabla 1. Datos obtenidos para la curva de calibracion Vitamina B6 Analista IConcentracin (mg B5/L)t retencin (min)Area (uA/min)Concentracin Real% Error 0.11.310.02810.117.70.51.310.15180.523.511.310.30181.011.431.310.88892.961.451.311.51235.020.5101.313.00689.970.3151.314.536715.040.3201.316.014419.930.3251.317.550325.020.1501.3115.094350.010.0 Grafica 1. Curva de Calibracin de Vitamina B6 Analista I

Esta es una COPIA NO CONTROLADALa versin aprobada ms reciente de este documento se encuentra en Share PointPag 2 de 9CONFIDENCIAL

CURVA 2CONSUMER TESTING SERVICES-LABORATORYCdigo:CTS-LAB-F-40-02INFORME CONFIRMACIN Y/O VALIDACINVersin:1FechaOct-14AutorPaola CastilloAprobado por:Camilo Alfonso

ANEXO 1. Curvas de calibracion Vitamina B6 (PIRIDOXINA)Tabla 1. Datos obtenidos para la curva de calibracion Vitamina B6 Analista IIConcentracin (mg B5/L)t retencin (min)Area (uA/min)Concentracin Real% Error 0.11.310.03010.104.80.51.310.14610.491.811.310.30331.011.431.310.88152.942.151.311.50465.010.2101.313.040310.121.2151.314.475714.900.7201.315.997119.960.2251.317.535425.080.3501.3115.021249.990.0 Grafica 1. Curva de Calibracin de Vitamina B6 Analista II

Esta es una COPIA NO CONTROLADALa versin aprobada ms reciente de este documento se encuentra en Share PointPag 2 de 9CONFIDENCIAL

CURVA 3CONSUMER TESTING SERVICES-LABORATORYCdigo:CTS-LAB-F-40-02INFORME CONFIRMACIN Y/O VALIDACINVersin:1FechaOct-14AutorPaola CastilloAprobado por:Camilo Alfonso

ANEXO 1. Curvas de calibracion Vitamina B6 (PIRIDOXINA)Tabla 1. Datos obtenidos para la curva de calibracion Vitamina B6 Analista IConcentracin (mg B5/L)t retencin (min)Area (uA/min)Concentracin Real% Error 0.11.310.03030.117.20.51.310.15540.524.411.310.30111.010.531.310.87752.922.851.311.49894.980.5101.313.01029.990.1151.314.542915.070.5201.315.985319.860.7251.317.602825.220.9501.3115.056049.940.1 Grafica 1. Curva de Calibracin de Vitamina B6 Analista I

PARAMETROS DE VALIDACIONENVIRONMENTAL SERVICESCdigo:ENVI-LAB-P-F-02-04PARAMETROS DE VALIDACINVersin:1FechaMar-14AutorJunior iquenAprobado por:Tatiana Bernal

LABORATORIO ENVIRONMENTAL SERVICES SGS COLOMBIA S.AANALITO:VITAMINA B6MTODO:Mtodo InternoUNIDADmg/100gANALISTA:SANDRA MORALES/ANA FORERO FECHAS:16/03/15-31/03/15MATRIZ:Cereales

Nombre:BlancoLDM LCMEbEmEaM1
Luffi: HarinaM2M2
Luffi: Cereal de MesaAa-M1Concentracin:0.001.002.004.0030.00200.0030.00DATOS LEIDOS10.001.0232.0223.92828.452198.92938.96869.31620.001.0032.0273.91128.474199.77739.70669.32130.001.0212.0333.93228.183198.78839.65069.19140.001.0172.0283.94128.504198.91139.73669.34950.001.0152.0363.92628.492198.47939.30369.14660.001.0232.0503.92328.442199.63040.03569.20570.000.9972.0273.93628.490199.87940.07168.94280.001.0202.0183.92229.547200.49739.95469.16390.001.0092.0143.95129.484199.24239.76668.992100.001.0072.0023.96229.530198.78639.71868.902110.001.0153.93629.492198.42139.45768.811120.001.0173.92729.546197.14839.13268.726130.001.0273.96929.446196.60938.99968.796140.001.0113.93829.612196.41639.26968.979150.001.0093.92229.486194.96039.17468.508160.001.0153.94029.555196.89338.91368.557170.001.0113.95129.620196.03138.85668.716180.000.9703.94729.530196.81439.35968.535190.000.98029.586195.49339.51568.961 200.0029.565196.37139.3968.996Valor TT para rechazo2.562.472.182.502.562.562.560.000.002.56T para LC2.092.122.262.112.092.092.090.000.002.09T para LDM2.542.582.822.572.542.542.540.000.002.54RECHAZOValor mnimo0.001.002.003.9128.18194.9638.860.000.0068.51Valor mximo0.001.032.053.9729.62200.5040.070.000.0069.35T bajoERROR:#DIV/0!2.181.841.721.771.811.58ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!1.70T altoERROR:#DIV/0!1.711.872.150.861.601.66ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!1.50Valor rechaz. 1Valor rechaz. 2Valor rechaz. 3Valor rechaz. 4ESTADSTICAN total datos201710182046450020N datos OK201710182020200020Promedio0.001.012.033.9429.15197.9039.45ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!68.956Desv. estndar0.000.010.010.010.551.620.37ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!0.2630Coef. variacin, %ERROR:#DIV/0!0.80.60.41.90.80.9ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!0.4Error, %1.41.31.62.81.0Recuperacin, %9893.898.098.4LC 950.000.000.010.010.260.760.18ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!0.1229LDI0.00LDM Estimado1.034LCM Estimado2.063OBSERVACIONES:

FIRMA Y FECHA:Supervisor de LaboratorioNataly CastellanosJefe de laboratorio:Armando Hernanadez

CARTA DE VERACIDAD

CONSUMER TESTING SERVICES-LABORATORYCdigo:CTS-LAB-F-40-02INFORME CONFIRMACIN Y/O VALIDACINVersin:1FechaOct-14AutorPaola CastilloAprobado por:Camilo AlfonsoRECONFIRMACIN DE LA VERACIDAD DEL METODO POR ESTANDARES

1. PROCEDIMIENTO

Para la evaluacin de la veracidad, se hara una revisin de las cartas de control, y el comportamiento de estas, con la mayor cantidad de datos posibles como para establecer los nuevos limites de aceptacin de las cartas y el nuevo valor del Estandar ajustado.

La evaluacin de los limites de Control fuero evaluados entre: 3/22/15y3/26/15

Datos de la Confirmacin del EstandarLimites EstablecidosPromedio29.29Lab batchFechaValorAnalista que validoNValorMedia LCILAILASLCSDesv. Est.1.031N.A2015-03-2228.452Ana Forero128.45229.2926.2127.2331.3432.372N.A2015-03-2229.547Ana Forero229.54729.2926.2127.2331.3432.373N.A2015-03-2228.474Ana Forero328.47429.2926.2127.2331.3432.374N.A2015-03-2229.484Ana Forero429.48429.2926.2127.2331.3432.375N.A2015-03-2229.530Ana Forero529.53029.2926.2127.2331.3432.376N.A2015-03-2228.183Ana Forero628.18329.2926.2127.2331.3432.377N.A2015-03-2229.700Ana Forero729.70029.2926.2127.2331.3432.378N.A2015-03-2228.504Ana Forero828.50429.2926.2127.2331.3432.379N.A2015-03-2629.115Ana Forero929.11529.2926.2127.2331.3432.3710N.A2015-03-2228.492Sandra Morales1028.49229.2926.2127.2331.3432.37LIMITES DE CONTROL LUEGO DE LA RE-EVALUACIN11N.A2015-03-2229.565Sandra Morales1129.56529.2926.2127.2331.3432.3712N.A2015-03-2228.442Sandra Morales1228.44229.2926.2127.2331.3432.3713N.A2015-03-2229.620Sandra Morales1329.62029.2926.2127.2331.3432.37LCSMEDIA + 3S32.3714N.A2015-03-2229.446Sandra Morales1429.44629.2926.2127.2331.3432.37LASMEDIA + 2S31.3415N.A2015-03-2628.971Sandra Morales1528.97129.2926.2127.2331.3432.37MEDIAMEDIA29.2916N.A2015-03-2229.492Sandra Morales1629.49229.2926.2127.2331.3432.37LAIMEDIA - 2S27.2317N.A2015-03-2229.546Sandra Morales1729.54629.2926.2127.2331.3432.37LCIMEDIA - 3S26.2118N.A2015-03-2228.490Sandra Morales1828.49029.2926.2127.2331.3432.3719N.A2015-03-2229.612Sandra Morales1929.61229.2926.2127.2331.3432.3720N.A2015-03-2229.486Sandra Morales1929.48629.2926.2127.2331.3432.3721N.A2015-03-2229.555Sandra Morales1929.55529.2926.2127.2331.3432.37Comentarios22N.A2015-03-2628.982Sandra Morales1928.98229.2926.2127.2331.3432.3723N.A2015-03-2229.530Sandra Morales2029.53029.2926.2127.2331.3432.3724N.A2015-03-2628.809Sandra Morales2128.80929.2926.2127.2331.3432.3725N.A2015-03-2229.586Sandra Morales2229.58629.2926.2127.2331.3432.3726N.A2015-03-2628.903Sandra Morales2328.90329.2926.2127.2331.3432.3727N.A2015-03-2629.012Sandra Morales2429.01229.2926.2127.2331.3432.3728N.A2015-03-2229.691Sandra Morales2529.69129.2926.2127.2331.3432.3729N.A2015-03-2634.184Sandra Morales2634.18429.2926.2127.2331.3432.3730N.A2015-03-2628.502Sandra Morales2728.50229.2926.2127.2331.3432.3731N.A2015-03-2629.058Sandra Morales2829.05829.2926.2127.2331.3432.37

COPIA CONTROLADALa versin ms reciente de este documento se encuentra en Share Point CONFIDENCIAL4 de 7

CARTA PRECISINCONSUMER TESTING SERVICES-LABORATORYCdigo:CTS-LAB-F-40-02INFORME CONFIRMACIN Y/O VALIDACINVersin:1FechaOct-14AutorPaola CastilloAprobado por:Camilo AlfonsoANEXO 4. CARTA DE CONTROL DE PRECISIN VITAMINA B6

Numero de Datos 15SR2.29Linea Central % R3.351Limite de Advertencia % (WL)8Limite de Accin % (CL)10FechaMuestraDuplicadoAnalistaRPD (%)RiRi2RWL (R+2SR)CL (R+2SR)13/26/15144.55153.94Sandra M.6.290.06339.5983.35181023/26/15151.40147.71Sandra M.2.470.0256.0903.35181033/26/15149.69148.54Sandra M.0.770.0080.5923.35181043/26/15146.51149.32Sandra M.1.900.0193.6043.35181053/26/15137.99148.03Sandra M.7.020.07049.3373.35181063/26/15146.03147.91Sandra M.1.280.0131.6373.35181083/26/15146.24143.67Sandra M.1.780.0183.1523.35181093/26/15137.78146.22Sandra M.5.940.05935.3183.351810113/26/15142.37140.03Sandra M.1.650.0172.7333.351810123/26/15129.68135.83Sandra M.4.630.04621.4243.351810133/26/15135.24135.44Sandra M.0.150.0020.0233.351810153/26/15137.42139.82Sandra M.1.730.0172.9953.351810163/26/15163.37162.92Sandra M.0.270.0030.0743.351810173/26/15156.13164.91Sandra M.5.470.05529.9033.351810183/26/15154.14163.97Sandra M.6.180.06238.1593.351810193/26/15159.79164.23Sandra M.2.740.0277.5073.351810203/26/15163.87161.15Sandra M.1.670.0172.7983.351810213/26/15163.72164.28Sandra M.0.340.0030.1183.351810223/26/15165.99165.40Sandra M.0.350.0040.1243.351810233/26/15163.75160.16Sandra M.2.210.0224.8893.351810243/26/15163.54154.91Sandra M.5.420.05429.3673.351810253/26/15162.77157.31Sandra M.3.410.03411.6243.351810263/26/15161.48160.88Sandra M.0.370.0040.1383.351810273/26/15161.52160.48Sandra M.0.640.0060.4113.35181028ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!29ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!30ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!31ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!32ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!33ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!34ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!35ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!36ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!37ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!38ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!39ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!40ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!41ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!42ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!43ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!44ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!45ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!46ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!47ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!48ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!49ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!50ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!51ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!52ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!53ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!54ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!ERROR:#DIV/0!

PRECISION

CONSUMER TESTING SERVICES LABORATORYCdigo:CTS-LAB-P-40-02PARAMETROS DE PRECISIN Versin:1FechaMar-14AutorJunior iquenAprobado por:

ESTIMACIN DE LA PRECISIN PARA VITAMINA B6

1. EVALUACIN DE LA MUESTRA (CEREAL) VITAMINA B6 (mg/100 g)Tabla de h de Mandel

128.45ReplicasAnalistasA. TECNICAS GRAFICAS DE CONSISTENCIA PARA LA COHERENCIA DE LOS DATOSal 1%al 5%129.55Sandra AnaSandra31.151.15129.49128.4528.1828.49 GRAFICA DE h DE MANDEL GRAFICA DE k DE MANDEL41.491.42128.47229.5529.5329.5551.721.57129.48329.4929.6229.5961.871.66129.55428.4728.5028.4471.981.71128.18529.4829.4929.4582.061.7510.00629.5529.5329.5692.131.7810.00728.4929.6129.6910.00Tabla de k de Mandel2ERROR:#REF!229.53Laboratorio o Analistask de Mandel229.62al 1%al 5%228.50Promedio29.069629.210129.252523456789102345678910229.49S.D0.55990.60100.541631.711.641.581.531.491.461.431.411.3931.651.531.451.41.371.341.321.31.29229.53VAR0.31350.36120.293341.911.771.671.61.551.511.481.451.4341.761.591.51.441.41.371.351.331.31229.61hij-1.12610.34190.784252.051.851.731.651.591.551.511.481.4651.811.621.531.461.421.391.361.341.3220.00kij0.98570.86390.550462.141.91.771.681.621.571.531.51.4761.851.641.541.481.431.41.371.351.3320.00Dentro de los Laboratorios72.21.941.791.71.631.581.541.511.4871.871.661.551.491.441.411.381.361.3420.00Inconsist. h ij NONONOB. PRUEBA NUMERICA DE LOS VALORES ATIPICOS82.251.971.811.711.651.591.551.521.4981.881.671.561.51.451.411.381.361.34328.49Entre Laboratorios92.291.991.821.731.661.61.561.531.591.91.681.571.51.451.421.391.361.35329.55Inconsist. k ij NONONOMaximoMinimo329.59Grubbs0.784201.12611Entre laboratoriosNivel de Significancia (de tablas)328.44Prom. Total29.177Inconsist. GrubbsNONO1%5%329.45S.D de prom.0.096Cochrane0.373Dentro de los laboratoriosh-Mandel1.1801.180329.56Suma de VAR0.968Inconsist. CochranNOK-Mandel1.4601.340329.69Cochran0.7930.70730.00No existen valores incoherentes ni valores atipicos, se procede a determinar los parametros de precisionGrubbs1.1551.15530.0030.002. DETERMINACIN DE LOS PARAMETROS DE PRECISIN SEGN LA NTP 5725 Tabla de CochraneAnlisis de varianza de un factorPARAMETROS DE PRECISIN Laboratorio o AnalistasCochranRESUMENPROM.29.177al 1%al 5%GruposCuentaSumaPromedioVarianzaSr0.56823456789102345678910Columna 17203.487159761529.06959425160.3134924539SR0.641.20.9950.9790.9590.9370.9370.9370.9370.93720.9750.9390.9060.8770.8770.8770.8770.877Columna 27204.470834139229.21011916270.3612174528RSDr1.94730.9930.9420.8830.8340.7930.7930.7930.7930.79330.9670.8710.7980.7460.7070.7070.7070.7070.707Columna 37204.767201842829.25245740610.2932764352RSDR2.19840.9680.8640.7810.7210.6760.6760.6760.6760.67640.9060.7670.6840.6290.5900.5900.5900.5900.590r1.59050.9280.7880.6960.6330.5880.5880.5880.5880.58850.8410.6840.5980.5440.5060.5060.5060.5060.506R1.79660.8830.7220.6260.5640.5200.5200.5200.5200.52060.7810.6160.5320.4800.4450.4450.4450.4450.445ANLISIS DE VARIANZALIMITE RSDr (%)4.970.8380.6640.5680.5080.4660.4660.4660.4660.46670.7270.5610.4800.4310.3970.3970.3970.3970.397Origen de las variacionesSuma de cuadradosGrados de libertadPromedio de los cuadradosFProbabilidadValor crtico para FLIMITE RSDR (%)5.580.7940.6150.5210.4630.4230.4230.4230.4230.42380.6800.5160.4380.3910.3600.3600.3600.3600.360Entre grupos0.128283658420.06414182920.19878946560.82149792773.5545571457LOD2.1290.7540.5730.4810.4250.3870.3870.3870.3870.38790.6380.4780.4030.5800.3290.3290.3290.3290.329Dentro de los grupos5.8079180515180.322662114LOQ6.41Tabla de GrubbsTotal5.9362017120LeyendaDefinicion de los ParametrosLaboratorio o AnalistasGRUBBS SrDesviacion Standard de repetibilidadsup. al 1%sup. al 5%SRDesviacion Standard de Reproducibilidad31.1551.155RSDrDes. Stand. relativa de repetibilidad41.4961.481RSDRDes. Stand. relativa de Reproducibilidad51.7641.715rRepetibilidad61.9731.887RReproducibilidad72.1392.02Limite RSDrLimite de Repetibilidad82.2742.126Limite RSDRLimite de Reproducibilidad92.3872.215

Rango del Patron Obtenido29.177 +/- 1.796

Tabla de h de Mandelal 1%al 5%31.151.1541.491.4251.721.5761.871.6671.981.7182.061.7592.131.78

Tabla de k de Mandel

Laboratorio o Analistask de Mandelal 1%al 5%2345678910234567891031.711.641.581.531.491.461.431.411.3931.651.531.451.41.371.341.321.31.2941.911.771.671.61.551.511.481.451.4341.761.591.51.441.41.371.351.331.3152.051.851.731.651.591.551.511.481.4651.811.621.531.461.421.391.361.341.3262.141.91.771.681.621.571.531.51.4761.851.641.541.481.431.41.371.351.3372.21.941.791.71.631.581.541.511.4871.871.661.551.491.441.411.381.361.3482.251.971.811.711.651.591.551.521.4981.881.671.561.51.451.411.381.361.3492.291.991.821.731.661.61.561.531.591.91.681.571.51.451.421.391.361.35

Nivel de Significancia (de tablas)1%5%h-MandelERROR:#N/AERROR:#N/AK-MandelERROR:#VALUE!ERROR:#VALUE!CochranERROR:#VALUE!ERROR:#VALUE!GrubbsERROR:#N/AERROR:#N/A

Tabla de Cochrane

Laboratorio o AnalistasCochranal 1%al 5%2345678910234567891020.9950.9790.9590.9370.9370.9370.9370.93720.9750.9390.9060.8770.8770.8770.8770.87730.9930.9420.8830.8340.7930.7930.7930.7930.79330.9670.8710.7980.7460.7070.7070.7070.7070.70740.9680.8640.7810.7210.6760.6760.6760.6760.67640.9060.7670.6840.6290.5900.5900.5900.5900.59050.9280.7880.6960.6330.5880.5880.5880.5880.58850.8410.6840.5980.5440.5060.5060.5060.5060.50660.8830.7220.6260.5640.5200.5200.5200.5200.52060.7810.6160.5320.4800.4450.4450.4450.4450.44570.8380.6640.5680.5080.4660.4660.4660.4660.46670.7270.5610.4800.4310.3970.3970.3970.3970.39780.7940.6150.5210.4630.4230.4230.4230.4230.42380.6800.5160.4380.3910.3600.3600.3600.3600.36090.7540.5730.4810.4250.3870.3870.3870.3870.38790.6380.4780.4030.5800.3290.3290.3290.3290.329

Tabla de Grubbs

Laboratorio o AnalistasGRUBBS sup. al 1%sup. al 5%31.1551.15541.4961.48151.7641.71561.9731.88772.1392.0282.2742.12692.3872.215

INCERTIDUMBRE

CONSUMER TESTING SERVICES LABORATORYCdigo:CTS-LAB-P-40-02ESTIMACION DE INCERTIDUMBRE Versin:1FechaMar-14AutorJunior iquenAprobado por:Armando Hernandez

CLCULOS DE INCERTIDUMBRE DE MTODOS QUE REQUIEREN CURVA DE CALIBRACIN

1. Incertidumbre del instrumento en la preparacin de la curva de calibracinb1 (pendiente)0.3013b0 (intercepto)-0.0026Concentracin (mg B6/L)Seal medida (Area)PromedioS (desviacin Residuales)0.0055
Luffi: El Error se reparte a tres curvas de calibracion, normalmente se realiza una para hacer la lectura de las muestras0.10.02810.03010.03030.0p (replica de estandar evaluado)20.50.15180.14610.15540.2n (N pto curva*N pto Abs301.00.30180.30330.30110.3C promedio puntos curva12.96003.00.88890.88150.87750.9Sxx (desviacin de regresin)22065.01.51231.50461.49891.5C media Estandar evaluado mg/L510.03.00683.04033.01023.015.04.53674.47574.54294.520.06.01445.99715.98536.025.07.55037.53547.60287.650.015.094315.021215.056015.1u(c0)0.0136% Incertidumbre0.27

2. Incertidumbre debido al Peso de Balanza

Masa (g)Incertidumbre Calibracin de la balanza
Luffi: Segn el certificado de Calibracin de la balanza (ENVI-LAB-BO-59)Incertidumbre Resolucin de Balanza
Luffi: Manual de la Balanza ENVI-LAB-BO-59Incertidumbre Repetibilidad
Luffi: Del Certificado de Calibracion de la balanzaIncertidumbre Estandar50.00010.00010.00006Incertidumbre Estandar0.000050.000060.00001
Luffi: Repetibilidad para seis datos. Tncertidumbre tipo A, t (95% conF (n-1)=2.870.00008 3. Incertidumbre debido al Volumen de Alicuota de Extracto

Volumen (mL)Incertidumbre Especificacin del material de vidrio (mL)Incertidumbre por la Variacin de Volumen (mL)Variacin de temperaturaIncertidumbre Estandar250.030.05190.01050
Luffi: 2 es la variacin de temp. Que puede haber en el ambiente y 0.00021 coeficiente de dilatacion del agua

Incertidumbre Estandar0.012250.025950.006060.029334. Incertidumbre debido a la Repetibilidad de la Concentracin Medida

FactorConcentracin en la cual se evalua la repetibilidad (mg/L)Desviacin estandar para la Repetibilidad a dicha concentracinIncertidumbre EstandarConcentracinDesviacin EstandarPorcentaje15.000.01530.015330.30650.10.0066.005. Incertidumbre debido al Factor de dilucin0.180.0095.0031.830.060.19Volumen (mL)Incertidumbre Especificacin del material de vidrio (mL)Incertidumbre por la Variacin de Volumen (mL)Variacin de temperaturaIncertidumbre Estandar412.280.90.2210.0080.00300.00042
Luffi: 2 es la variacin de temp. Que puede haber en el ambiente y 0.00021 coeficiente de dilatacion del agua

Incertidumbre Estandar0.003270.001500.000240.00360100.040.00520.00420
Luffi: 2 es la variacin de temp. Que puede haber en el ambiente y 0.00021 coeficiente de dilatacion del agua

Incertidumbre Estandar0.016330.002600.002420.01671100.03975. Incertidumbre debido al Factor de dilucin

Incertidumbre MRC0.0098411qsd

Calculo de la Incertidumbre Combinada

Incertidumbre combinada u(c0)0.0944Calculo de la Incertidumbre Expandida

Factor, U Expandida, nivel confianza 95% (mg VC/L)0.1887

Factor
pedro_lopez: pedro_lopez:Esta se obtiene multiplicando el factor por la concentracin de la muestra.

0.0189Porcentaje de Incertidumbre3.8Concentracin Muestras(mg B6/L)5.00Volumen de Enrase (mL)50ResumenConcentracin (mg B6/100mg)10ValorIncert. Est.Inc. Rel.% Inc. Incertidumbre (mg B6/100mg) (+/-)0.4 Curva de Calibracion50.01360.00272449788.2% Incertidumbre4Peso de la muestra50.000080.00001523210.0Volumen de Extraccion250.029330.00117313433.5Repetibilidad10.015330.01532546.4Factor de Dilucin100.03970.003970961312.0Material de Referencia10.009840.0098429.80.0330488254