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m 1975, 57, n ° 10.

D~gradation s61ective et instabilit~ des prot~ines

On salt depuis plusieurs ann~es ddj~ que la bactdrie Escherichia coli poss~de un syst&me de d~gradation des prot~ines qui a la capacitd de distinguer entre les polypeptides normaux (qui sont plus sta- bles) et les polypeptides aberrants (qui sont plus rapidement d~gradds). Toutes sortes d" observations viennent fonder cette affirmation : L'incorporation d'ana- Iogues d'acides amines dans les pro- t~ines, des erreurs dans la synthdse pro- tdique affectent la stabilit~ des prot~ines, de m~me que rattachement de substrats, coenzymes et autres ligands (cf. in Gold- berg, 1972, Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 65, 422, et revue par Goidberg et Dice, 1974, Annu. Rev. Biochem., 4/I, 835).

La presence de mutations amber dans le g~ne Z de I'op~ron lactose provoque la synthbse de chaines de ~ galactosidase incompl~tes, et les polypeptides incom- plets sont en g~n~ral rapidement ddgra- dds. C'est sur cette observation que sont bas~es les stratdgies ~labordes par Buk- hari et Zipser (1973, Nature New Biol., ~43, 238) et Apte, Rhodes et Zipser (1975, Nature, 2§1, 329) pour isoler des mutants d'E. coil affectds dans le ou les syst~mes de ddgradation des prot~ines incompl~tes.

Bukhari et Zipser (1973) fondent leur s~lection sur I'id~e que rabsence de com- pigmentation intracistronique entre cer- taines paires de mutants Z- est due ~ la d~gradation des polypeptides incomplets. La bact~rie est porteuse de deux gdnes Z mut~s. L'un (sur le chromosome) est d~l~t~ aux deux tiers, et produit le frag- ment o~ terminal de la ~ galactosidase. L'autre (port~ par un dpisome) possdde une mutation ochre et produit la partie opdrateur proximale du polypeptide. La bact~rie est recA-, afin de limiter la recombinaison entre les deux g&nes Z, et porte une mutation amber dans /'op~ron tryptophane, afin que des mutations de type suppresseur (qui rendraient la bac-

t~rie simultandment lac* et trp ÷) puissent ~tre facilement rep~r~es. A partir de I'hd- t~rog6note lac-, on s61ectionne des lac*, au nombre desquels on trouve des mu- tants, baptis~s deg-, du syst~)me de d6gra- dation bact~rien.

Dans cette s~lection, seuls ies frag- ments possddant I'extr~mit~ N terminale normale (i.e. terminds par suite de la mu- tation ochre ou amber) sont instables. Soupponnant qu'i l pourrait exister une autre classe de mutants deg" chez lesquels la stabilitd de I'extr~mit6 C terminale serait affectde, Apte et al ont recommencd la s~lection en partant d'h6t~rog~notes produisant une extr~mitd C terminale ins- table. Tel est le cas dans des souches ob ce fragment est synthdtis6 par suite de /'introduction d'une mutation de r6initia- tion ~ la suite d'une mutation amber dans ie g&ne Z. Effectivement, la s61ection four- nit des mutants chez /esquels les polypep- tides C terminaux sont plus stables.

En rdsumd, on distingue deux classes de fragments : les fragments T, qui sont produits par terminaison prdrnatur~e et qui possbdent une extr6mit6 N termlnale norma/e, et les fragments R, qui sont pro- duits par une r~initiation, et qui possqJdent une extr~mit6 C terminale normale. I I existe (au moins) deux classes de mu- tants d'E. coil, deg T et deg R. Chez les deg R, /es fragments R sont stabilis6s, mais pas les fragments T. Chez les deg T, c'est /'inverse. Les crit~res de stabilit~ sont varids : fonctionnels tout d'abord (restauration de I" activit6 enzymatique chez les hdtdrogdnotes). Le remplacement de 1"6pisome permet d'introduire plusieurs types de mutations dans Z et de vdrifler que /es mutations deg R ou deg T sont

/'ext~rieur de I'opdron lactose. Des cri- t~res biochimiques viennent appuyer les donn~es fonctionnelles : Apr~s immuno- precipitation des fragments R et T radio- actifs et ~/ution de ces derniers, on pro- cbde ~ une ~lectrophor~se qui permet de ddterminer la quantit6 de fragment prd- sent. De fapon typique, la demi-vie d'un fragment passe de quelque 5 minutes dans une souche deg* ~ environ 30 mi-

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nutes dans une deg-. Diff~rents fragments R et T de ~ galactosidase ont dt6 exa- minds, mais i l n'existe aucune donn~e portant sur d'autres gdnes. En d~pit de cela, i l para~t fort probable que les muta- tions deg T et deg R ne sent pas spdci- fiques de I'op~ron lactose, et qu' i l existe, chez E. coil (au moins) deux syst~mes de d~gradation affectant respectivement la stabilitd des fragments N e t C termi- naux des po/ypeptides.

Ceci dtant admis, sur quelles bases le syst~me deg discrimine-t-i l entre des pro- tdines ~ anormales )) ou incompl~tes et des prot~ines normales ? Cette int~res- sante question est pour /'instant sans rdponse. La structure tridimensionnelle pourrait }ouer un r61e, et la proposition gdn6rale a ~t~ faite que la d~naturation constitue le facteur l imitant dans la d~- gradation des prot~ines (Bond, 1975, Fed. Prec., 34, 65). Toutefois, i/ ressort du travail classique de Celada et al ( I974, Biochemistry, 13, 5543) que des anticorps dirig~s centre des fragments de ~ galac- tosidase r~agissent centre I'enzyme en- ti~re. Ceci suggdre que les fragments ~tu- di~s poss~dent d'embl6e la structure qu'i ls adoptent dans la prot~ine complete, et que la protdine adopte sa configuration d~finitive ~ partir de centres de nucl6ation plus ou moins inddpendants. Teutefois, une correlation entre la stabilit6 des frag- ments et leur capacit~ d'induire la syn- th~,se d'anticorps r~agissant centre la pro- t~ine enti~,re n'a pas (=td 6tabfie, en sorte qu' i i est difficile de conclure.

L'existence du syst~me deg est peut- ~tre ~ rapprocher d'un certain nombre d'observations touchant ~ la physiologie des bactdriophages, en particulier lambda. II existe chez lambda au moins dix pro- t~ines r~gulatrices produites par les g~nes cl, cll, cllt, N, cro et Q. A I'exception du r~presseur produit par ie g~ne cl, toutes sent probablement instables (cf. in Rei- chardt, 1975, J. Mol. Biol., 98, 267). En outre, la prot6ine xis qui intervient dans I'excision du prophage (Weisberg and Gottesman, 1971, in The Bacteriophage Lambda, A. D. Hershey ed., Cold Spring Harbor, N.Y. p. 489) est, elle aussi, ins- table. !1 est facile d'imaginer que I'insta- bil i td fonctionnelle de toutes ces prot~ines assure la rdversibilit~ de certains syst~mes bio/ogiques. Par exemple, I' instabilit~ des inducteurs du cycle lytique N et Q est de

nature ~ favoriser I'~tablissement de la lysogdnie, etc.. . II serait int~ressant de savoir si le syst~me deg est impliqud dans ces phdnom~nes.

Le probl~me de la ddgradation des pro- t~ines est en fair de portde plus g~n~rale. L'id~e s" est rdpandue que chez les cellules eucaryotes notamment, la stabilitd des protdines pourrait constituer une r~gula- tion posttranscriptionnelle majeure (pour revues, voir Hersko, 1973, Fogarty Inter- national Conference Proceedings, 25, 95 ; Goldberg and Dice, d~]~} citds).

Ceci explique qu'un important travail syst6matique soit en cours afin d'~tablir des correlations entre certains paramdtres structuraux des prot~ines et leur stabilitY. Selon Pronty et al (1975, J. Biol. Chem., 248, 4270), la taille jouerait un r61e, les grosses protdines, ~tant, en gdn~ral, plus rapidement d~grad~es que les petites. Selon Dice et Goldberg (1975, Prec. Nat. Acad. Sci. USA, 72, 3893 : cet article con- tient une bibliographie nourrie), i l existe une correlation entre le point iso61ectrique des prot~ines et leur s tabi l i tY; les pro- t~ines acides sent ddgrad~es plus rapide- ment que les prot~ines basiques ou neutres. Ces corrdlations souffrent de nombreuses exceptions, et leur significa- tion n'est pas tr~s claire.

Mais quelle est au juste la fonction du syst~me deg ? Les mutants deg croissent assez normalement mais sent souvent mucoides. Le systdme deg n" est donc pro- bablement pas essentiel ~ la vie bact6rien- ne. Joue-t-il un r61e dans la division cellu- laire ? Joue-t-il un r61e de correction des erreurs ? ou aurait-il m~me quelque fonc- tion de style immunitaire pour d~grader les protdines 6trang~res ~ ia bact~rie ?

1975, 57, n ° 10.

IX

Cours de la FEBS sur la ¢( Bio6nerg6tique

des mitochondries ))

Varsovie, Pologne, du 13 au 27 ]uin 1976.

Ce cours est dgalement soutenu par I'Acad&mie des Sciences de Pologne, et la Soci~t~ polonaise de Biochimie. II consis- tera en confdrences sur lee probldmes les plus importants et les rdsultats r~cents de la bio~nergdtique des mitochondries, ainsi qu'en travaux pratiques.

Tout renseignement suppldmentaire peut ~tre demandd au : Pr. L. Wojtczak, Nencki Institute of Experimental Biology Pasteura 3, 02-093 Warszawa, Poland.

chercheurs plein temps relevant d'organismes de recherche (INSERM CNRS etc...) avec la liste de leurs publica- tions.

personnel technique et administratff existant, en indiquant rappartenance administrative.

5. Lee dquipements dont ils disposent actuellement et qu'ils pourraient transf~- rer dans lee Iocaux qui seraient mis ~ leur disposition.

6. Les contrats de recherches (INSERM - - CNRS - - DGRST . . DRME etc...) dont eux-m~mes, ou les chercheurs rele- vant de leur autorit~, sont bdndficiaires.

Pour tous renseignements concernant lee documents administratifs ndcessaires

la constitution des dossiers de candida- ture, pri&re de s'adresser au Service des A ssembldes et des Commissions Scienti- fiques (584-01-41 poste 340).

Appel d'offre pour une unit6 de recherche de I ' INSERM

La Direction d'une Unit& de recherche ddj~ ~quip~e, situ~e au Centre Mddico- Chirurgical Foch (40, rue Worth, 92 Su- resnes), est actuellement vacante.

L'orientation scientifique de cette Unitd est la Physiologie et la Physiopathologie cdr~brale.

Lee candidate ~ la Direction de cette Unitd devront ddposer leur demande I'INSERM m Direction Scientifique Service des Assemblies et des Scienti- fiques, 101, rue de Tolbiac 75645 Paris Cedex 13, avant le 21 janvier 1976.

II devront fournir ies documents sui- vants :

1. Une fiche administrative ~ ~tablir en 3 exemplaires (~ demander ~ I 'Adminis- tration ).

2. Le programme de recherche qu'i ls envisagent de d~velopper dans i'~ventua- lit~ ob cette Unit~ leur serait attr ibute (en 3 exemplaires).

3. Leurs titres et travaux scientifiques (se i imiter ~ la liste des brevets et ~ celle des publications parues dans les revues d'audience internationale n'acceptant que des travaux originaux).

4. La composition de I'~quipe de recherche :

Appel d'offre pour les actions th6matiques

INSERM 1976

L'INSERM lance d~s ~ prdsent, pour 1976, deux s~ries d'actions th~matiques.

La premiere comprend :

AT 76-59 Coopdration cellulaire et plus particulidrement dans les r~actions immunitaires.

AT 76-60 Aspects gdn~tiques des inter- actions h6te virus dans les systdmes animaux.

A T 76-6 I R~gulation motrice, aspects neurophysiologiques et neuro- chimiques. A gressivit~ et auto-agressivitd. Interactions entre paroi vascu- laire et plaquettes.

A T 76-62 A T 76-63

19'75, 57, n ° 10.

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AT 76 64 Physiopathologie de rhyper- tension artdrielle (~) I'exclu- sion des aspects dpiddmiolo- giques et pharmacologiques).

A T 76-65 Pharmacologie p6rinatale. AT 76-66 Chirurgie expdrimentale.

La date de d6p6t des projets est fix~e au 15 janvier 1976.

La seconde comprend :

AT 76-67 Validitd des mdthodes de diagnostic et de traitement uti!isant des rayonnements non ionisants (micro-ondes, ultra-sons, lasers...). Tol6- rances, dosimdtrie, effets bio- Iogiques de ces rayonnements.

A T 76-68 Diagnostic pr~coce des mal- formations cong(mitales et handicaps contractds au cours des trois premiers mois de la grossesse.

AT 76-69 Etiologie m D~pistage pr~,- coce, diagnostic, dvaluation et ~volution des ddficiences mentales de I" enfant.

AT 76-70 Biologie et pathologie du muscle squelettique.

La date de d~p~t des pro jets est fix~e au 15 mars 1976.

Le montant des contrats ne pourra exc6- t i e r45000 F par an dont 4 000 F de cr6- dits de missions et 3 000 F de credits de vacations,

Les demandes de formulaires corres- pondant ~ chacune de ces actions thdma- tiques devront btre faites auprds du Ser- vice de Gestion des Formations de Re- cherche et des Contrats.

Peuvent prdsenter des demandes de contrats :

Directeurs et Maitres de recherches de I~NSERM, Chercheurs ~ plein temps, ayant dans un autre organisme de recherches un grade identique ou assimilable ~ celui de Directeur ou MaTtre de Recherches. Charges de Recherches de i'INSERM. Attachds de Recherches de I'INSERM qui, satisfaisant aux crit~res objectifs ddfinis par le Conseil Scientifique pour r6quivalence au grade de Chargd de Recherches, ont ~t6 inform6s indivi- duellement par I'Administration.

Charges de Recherches des orga- nismes de recherche (C.N.R.S., LN. R.A., CL Bernard...) travaillant effec- tivement dans les Unit~s et Groupes de I'INSERM et figurant sur le profi l du laboratoire. Professeurs titulaires, Professeurs sans chaire et Maitres de Conf6rence des Centres hospitalo-universitaires et des autres Facult6s. Chefs de Clinique, Chefs de Travaux, Maitres-A ssistants justifiant d" au moins une publication de leurs tra- vaux, • parmi ies trois premiers signataires

de cette publication • au cours des deux derni~res ann6es

6coulees • dans une revue d'audience interna-

tionale.

INSERM, 101, rue de Tolbiac, 75645 Paris Cedex 13.

1975, 57, n ° 10.

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Forum des jeunes

Le Forum des Jeunes de la Soci~t~ de Chimie Biologique se tiendra cette annde

Lisbonne du 24 au 27 mars 1976.

Programme Les sessions se d6rouleront du mercre-

di 24 au samedi 27 mars au matin. Elles comporteront des communications, des tables rondes et des pr6sentations de pos- ters dans les 5 thames suivants :

acmes nucl~iques enzymologie glycoprotdines

m lipides et lipoprot~ines membranes.

Une visite de la ville et des environs est dgalement pr6vue les apr~s-midi des samedi 27 et dimanche 28 mars ainsi qu'un diner d'adieu le samedi 27 au soir.

Un vol charter de la TAP est organis6 de Paris ~ Lisbonne le mardi 23 mars et de Lisbonne ~ Paris le lundi 29 mars.

Inscriptions Elles seront prises jusqu'au l " r f~vrier

1975. Les participants d~j~ prdinscrits recevront directement un formulaire d'ins- cription. Les autres jeunes biochimistes ddsirant s'inscrire sont prids de demander un formulaire d'inscription.

soit au Pr Halpern, Faculta de Medici- na de Santana, Lisbonne, Portugal soit au Secretariat Permanent du Forum des Jeunes, Centre de Neuro- chimie, 11 rue Humann, 67085 Stras- bourg.

Trois modalit6s d'inscription sont of- fertes aux participants : 1 voyage A.R. + Iogement et petit d~-

jeuner -F visite de la ville, diner d'adieu et excursion : 5120 escudos soit 850 F.

w iogement et petit d~]euner -F visite de la ville, diner d'adieu et excursion : 1870 escudos soit 300 Fo visite de la ville, diner d'adieu et excursion : 650 escudos soit 104 F.

19~75, 57, n ° 10.