LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM ANALISIS

FISIKOKIMIA

Identifikasi Senyawa-Senyawa Golongan Barbiturat, dan Antibiotika

Disusun Oleh :

Feby Shyntia A

260110120184

LABORATORIUM ANALISIS FISIKOKIMIA 2

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS PADJADJARAN

2014

I. Tujuan

Mengetahui dan memahami cara mengidentifikasi senyawa-senyawa

golongan barbiturat dan antibiotika.

II. Prinsip

1. Reaksi identifikasi golongan barbiturate

Pembentukan kompleks berwarna dengan reagensia Parri. Caranya: zat,

harus bebas air, di atas kertas saring, tambahkan pereaksi Parri (larutan

kobal nitrat dalam alcohol), paparkan kertas saring di atas uap amonia.

2. Reaksi identifikasi golongan antibiotika

Reaksi dengan asam pekat atau basa pekat.

III. Reaksi

GOLONGAN BARBITURAT

1. Luminal

\

(Svehla, 1989)

2. Barbital

(Clark, 2003)

GOLONGAN ANTIBIOTIKA

1. Amoksisilin

(Roth, 1985)

2. Kloramfenikol

(Svehla, 1989)

3. Tetrasiklin

(Kelly, 2009)

IV. Data Pengamatan

Senyawa Reagensia Perlakuan Hasil

Luminal Koppayi-

Zwikker

Zat + Reagensia

Koppayi-Zwikker

Terbentuk larutan

merah muda yang

lama-kelamaan

menguap

Liebermann Zat + Reagensia

Liebermann

Larutan jingga

Kristal Zat + Aseton,

dilarutkan + Air

Terbentuk kristal

Barbital Koppayi-

Zwikker

Zat + Reagensia

Koppayi-Zwikker

Terbentuk larutan

merah muda yang

lama-kelamaan

menguap

Kristal Zat + Aseton,

dilarutkan + Air

Terbentuk kristal

Amoksisilin H2SO4 Zat + H2SO4 Terbentuk larutan

kuning dan serbuk tak

larut

Pada UV 254 nm

berfluorosensi warna

kuning neon

Kristal Zat + Aseton,

dilarutkan + Air

Terbentuk kristal

Kloram-

fenikol

Uji Fujiwara Zat + Fujiwara,

dipanaskan

Larutan bening,

setelah dipanaskan

menjadi larutan jingga

Nessler Zat + Nessler,

dipanaskan

Larutan bening setelah

dipanaskan menjadi

larutan kuning

Kristal Zat + Aseton,

dilarutkan + Air

Terbentuk kristal khas

Tetrasiklin Benedict Zat + Reagensia

Benedict

Larutan biru setelah

dipanaskan menjadi

larutan hijau tua

dengan endapan

merah

Formalin-

Asam sulfat

Zat + Formalin +

Asam Sulfat

Larutan jingga, setelah

dipanaskan menjadi

larutan jingga

Liebermann Zat + Reagensia

Liebermann

Larutan hitam pekat

Mandelin Zat + Reagensia

Mandelin

Larutan coklat

Marquis Zat + Reagensia

Marquis

Larutan hitam

Asam Sulfat Zat + Asam sulfat Larutan kuning

endapan jinga

V. Pembahasan

Seyawa yang diidentifikasi pada praktikum kali ini adalah senyawa-

senyawa golongan barbiturat dan golongan antibiotika. Senyawa-senyawa

golongan barbiturat yang diidentifikasi adalah Luminal dan Barbital.

Sedangkan senyawa-senyawa antibiotika yang diidentifikasi adalah

Amoksisilin, Kloramfenikol, dan Tetrasiklin.

Reaksi identifikasi umum untuk senyawa golongan barbiturat adalah

reaksi pembentukan kompleks dengan reagensia Parri, dengan cara meletakan

zat (sampel) bebas air diatas kertas saring, ditambahkan reagensia Parri,

kemudian kertas saring tersebut dipaparkan diatas uap amonia, hasil yang

didapat merupakan kompleks berwarna ungu. Senyawa golongan barbiturat

yang pertama kali diidentifikasi adalah senyawa luminal, yang diidentifikasi

dengan reagensia Koppayi-Zwikker, Liebermann, dan pengamatan bentuk

kristal aseton-air. Reagensia Koppayi-Zwikker digunakan untuk

mengidentifikasi senyawa yang memiliki gugus karbonil dan amina pada

karbon yang berdampingan, reagensia koppayi-zwikker akan memberikan

hasil positif pada senyawa tersebut berupa perubahan warna larutan sampel

menjadi ungu. Senyawa Luminal memiliki gugus karbonil dan amina pada

karbon yang berdampingan, hasil yang didapat dari praktikum ini larutan

sampel berubah warna bukan menjadi ungu melainkan menjadi merah muda.

Hal ini dapat disebabkan karena pada saat identifikasi, perbandingan antara

jumlah sampel dan reagensia tidak sesuai, sehingga warna yang dihasilkan

tidak sempurna. Larutan yang terbentuk lama kelamaan menguap karena

reagen koppayi-zwikker terdiri dari kobal nitrat dalam etanol, etanol ini lah

yang menyebebkan menguapnya larutan. Reagensia Liebermann dapat

digunakan untuk identifikasi senyawa yang memiliki cincin benzen

terdistribusi tunggal, reagensia Liebermann akan memberikan hasil positif

pada senyawa tersebut berupa perubahan warna larutan sampel menjadi

jingga. Senyawa Luminal merupakan cincin benzen terdistribusi tunggal,

hasil yang didapat dari praktikum ini larutan sampel berubah warna menjadi

jingga, yg membuktikan bahwa memang benar senyawa Luminal merupakan

benzene terdistribusi tunggal. Pembentukan kristal Luminal dilakukan dengan

metode kristalisasi aseton-air yang berprinsip rekristalisasi. Senyawa luminal

bersifat sangat sukar larut dalam air dan larut dalam etanol, dalam eter, dalam

alkali hidroksida dan dalam alkali karbonat (Menteri Kesehatan RI, 1995).

Dengan kelarutan Luminal ini, proses rekristalisasi dapat terjadi. Mula-mula

sampel dilarutkan dengan aseton, kemudian diteteskan ke atas object glass

yang sudah terdapat aquadest diatasnya. Dengan penetesan tersebut, aseton

akan menguap dan senyawa Luminal akan membentuk kristal karena tidak

dapat terlarut dalam aquadest.

Senyawa golongan barbiturat selanjutnya adalah barbital, yang

diidentifikasi dengan reagensia Koppayi-Zwikker dan pengamatan bentuk

kristal aseton-air. Senyawa Barbital tidak diidentifikasi dengan reagensia

Liebermann karena senyawa barbital bukanlah senyawa benzen yang

terdistribusi tunggal, atau jika diuji dengan reagensia Liebermann akan

memberikan hasil negatif. Reagensia Koppayi-Zwikker digunakan untuk

mengidentifikasi senyawa yang memiliki gugus karbonil dan amina pada

karbon yang berdampingan, reagensia koppayi-zwikker akan memberikan

hasil positif pada senyawa tersebut berupa perubahan warna larutan sampel

menjadi ungu. Senyawa Barbital memiliki gugus karbonil dan amina pada

karbon yang berdampingan, hasil yang didapat dari praktikum ini larutan

sampel berubah warna bukan menjadi ungu melainkan menjadi merah muda.

Hal ini dapat disebabkan karena pada saat identifikasi, perbandingan jumlah

sampel dengan reagensia tidak sesuai sehingga warna yang dihasilkan tidak

sempurna. Larutan yang terbentuk lama kelamaan menguap karena reagen

koppayi-zwikker terdiri dari kobal nitrat dalam etanol, etanol ini lah yang

menyebebkan menguapnya larutan. Pembentukan kristal Barbital dilakukan

dengan metode kristalisasi aseton-air yang berprinsip rekristalisasi. Senyawa

Barbital bersifat larut dalam 130 bagian air dan dalam 6 bagian aseton

(Menteri Kesehatan RI, 1979). Dengan kelarutan Barbital ini, proses

rekristalisasi dapat terjadi. Mula-mula sampel dilarutkan dengan aseton,

kemudian diteteskan ke atas object glass yang sudah terdapat aquadest

diatasnya. Dengan penetesan tersebut, aseton akan menguap dan senyawa

Barbital akan membentuk kristal karena tidak dapat terlarut dalam aquadest.

Reaksi identifikasi umum untuk senyawa golongan antibiotika adalah

reaksi dengan asam pekat atau basa pekat. Senyawa golongan antibiotika yang

pertama kali diidentifikasi adalah senyawa amoksisilin, yang diidentifikasi

dengan pengamatan fluorosensi setelah penambahan H2SO4 dan pengamatan

bentuk kristal aseton-air. Amoksisilin diuji dengan cara direaksikan dengan

H2SO4, dan didapatkan hasil berupa larutan berwarna kuning dengan endapan

yang menandakan amoksisilin tidak larut sempurna dalam H2SO4, selanjutnya

dilakukan pengamatan dibawah sinar UV 254 nm. Pengamatan fluorosensi

dibawah sinar UV 254 nm dilakukan karena pada panjang gelombang 254 nm,

suatu zat yang dapat berfluorosensi akan memancarkan fluorosensinya,

sedangkan jika menggunakan panjang gelombang 366 nm maka yang akan

memancarkan fluorosensi bukanlah zat (sampel) melainkan

wadah/background dari sampel tersebut (misal: Silica gel). Penambahan

H2SO4 yang dilakukan sebelumnya tidak hanya untuk identifikasi folongan

antibiotika melainkan juga untuk memberikan suasana asam pada sampel.

Dan pada saat dilihat di bawah sinar UV, hasil dari reaksi ini adalah

terbentuknya fluoresensi kuning neon. Pembentukan kristal Amoksisilin

dilakukan dengan metode kristalisasi aseton-air yang berprinsip rekristalisasi.

Senyawa Amoksisilin bersifat sukar larut dalam air dan methanol, tidak larut

dalam benzene, dalam karbon tetraklorida, dan dalam kloroform (Menteri

Kesehatan RI, 1995). Dengan kelarutan Amoksisilin ini, proses rekristalisasi

dapat terjadi. Mula-mula sampel dilarutkan dengan aseton, kemudian

diteteskan ke atas object glass yang sudah terdapat aquadest diatasnya.

Dengan penetesan tersebut, aseton akan menguap dan senyawa Amoksisilin

akan membentuk kristal karena tidak dapat terlarut dalam aquadest.

Senyawa golongan antibiotika selanjutnya adalah Kloramfenikol, yang

diidentifikasi dengan uji Fujiwara, Raegensia Nessler, dan pengamatan

bentuk kristal. Reagensia Fujiwara digunakan untuk mengidentifikasi

senyawa yang memiliki paling tidak dua atom halogen yang terikat pada satu

atom karbon, reagensia ini memberikan hasil positif berupa warna merah pada

lapisan piridin. Pada senyawa Kloramfenikol terdapat gugus CHCl2, hasil

yang didapat pada saat praktikum bukanlah lapisan piridin berwarna merah,

melainkan larutan jingga. Hal ini dapat terjadi karena pada saat praktikum

tidak dilakukan penambahan piridin sehingga warna merah tetap bercampur

dan tidak tertarik membentuk lapisan berwarna merah. Identifikasi

selanjutnya yaitu menggunakan reagensia Nessler. Reagensia Nessler

digunakan untuk menguji adanya senyawa amida alifatik, yang ditunjukkan

dengan reaksi positif berupa perubahan warne menjadi warna coklat jingga.

Kloramfenikol merupakan senyawa amida alifatik, pada praktikum, hasil

yang didapat bukanlah larutan berwarna coklat jingga melainkan larutan

berwarna kuning. Hal ini dapat terjadi karena senyawa siklik yang terdapat

pada sampel dapat memperlambat reaksi sehingga pemanasan yang dilakukan

harus lebih lama. Pembentukan kristal Kloramfenikol dilakukan dengan

metode kristalisasi aseton-air yang berprinsip rekristalisasi. Senyawa

Kloramfenikol bersifat sukar larut dalam air, mudah larut dalam etanol, dalam

propilenglikol, dalam aseton, dan dalam etil asetat (Menteri Kesehatan RI,

1995). Dengan kelarutan Kloramfenikol ini, proses rekristalisasi dapat terjadi.

Mula-mula sampel dilarutkan dengan aseton, kemudian diteteskan ke atas

object glass yang sudah terdapat aquadest diatasnya. Dengan penetesan

tersebut, aseton akan menguap dan senyawa Kloramfenikol akan membentuk

kristal karena tidak dapat terlarut dalam aquadest.

Senyawa golongan antibiotika terakhir yang diidentifikasi adalah

Tetrasiklin, yang diidentifikasi dengan reagensia Benedict, Senyawa

formalin-asam sulfat, reagensia Liebermann, reagensia Mandelin, reagensia

Marquis, dan senyawa asam sulfat. Reagensia Benedict digunakan untuk

mengidentifikasi senyawa-senyawa yang mengandung paling sedikit 4 gugus

hidroksil pada rantai alifatik, dengan memberikan reaksi positif berupa

terbentuknya endapan merah Cu2O akibat reaksi dengan zat-zat pereduksi.

Senyawa Tetrasiklin memiliki lebih dari 4 gugus hidroksil pada rantai

alifatiknya, pada praktikum didapatkan hasil endapan berwarna merah dengan

larutan berwarna hijau, karena adanya larutan berwarna hijau ini, warna

endapan menjadi tidak terlihat dengan jelas, sehingga perlu dilakukan

memisahan endapan dengan larutannya menggunakan pipet Pasteur supaya

endapan tidak ikut terbawa saat larutan dipipet. Identifikasi selanjutnya adalah

dengan penambahan formalin dan asam sulfat (6:4) yang bebas endapan, jika

terdapat endapan pada formalin-asam sulfat ini maka sebelum ditambahkan

kedalam sampel, formalin-asam sulfat harus dipanaskan terlebih dahulu pada

100oC selama 1 menit. Identifikasi ini akan memberikan hasil positif berupa

perubahan warna menjadi jingga terhadap senyawa benzodiazepine,

fenotiazin, tetrasiklin, dan tioksanten. Pada praktikum kali ini didapat hasil

berupa perubahan warna menjadi jingga karena sampel merupakan senyawa

tetrasiklin. Identifikasi berikutnya adalah dengan menggunakan reagensia

Liebermann. Setelah ditambahkan pereaksi Liebermann , sampel tidak larut

dan terdapat endapan berwarna jingga. Agar reaksi berlangsung, pengujian

Liebermann ini harus dipanaskan tetapi pada saat praktikum tidak dilakukan

pemanasan sehingga reaksi tidak dapat diamati. Jika dilakukan dengan benar,

warna jingga akan diberikan oleh senyawa yang mengandung cincin benzene

tersubstitusi tunggal yang tidak bergabung dengan gugus karbanit, amida atau

C=N-O. Warna jingga atau coklat diberikan oleh beberapa senyawa yang

mengandung dua cincin benzene tersubstitusi mono yang tergabung dengan

satu atom karbon atau atom karbon berdampingan. Beragam warna diberikan

oleh senyawa yang mengandung gugus hidroksil, O-alkil atau O-CH2-O yang

terikat pada cincin benzene atau terikat pada struktur yang mengandung cincin

benzene. Cincin benzene harus tidak mengikat NO2, halogen atau substituent

O- pada posisi terhadap substituent oksi. Kemudian sampel diidentifikasi

dengan reagensia Mandelin. Setelah penambahan reagensia Mandelin ke

dalam sampel, terjadi reaksi pembentukan kompleks berwarna coklat.

Tetrasiklin juga dapat diidentifikasi dengan menggunakan reagensia Marquis.

Pada praktikum ini dihasilkan endapan larutan berwarna hitam dengan cincin

jingga dipinggirnya. Seharusnya, setelah tetrasiklin direaksikan dengan

pereaksi marquis dihasilkan warna merah anggur dengan cincin warna kuning

jingga ditepi merah anggur. Berbagai senyawa yang cenderung

mempertahankan respons terhadap reagensia pada ujung spectrum ungu,

dengan urutan yang menurun adalah cincin sulfur (dengan atau tanpa cincin

aromatic), cincin oksigen (dengan cincin aromatic) , cincin oksigen atau sulfur

luar (dengan cincin aromatic); senyawa aromatic yang seluruhnya terdiri dari

C H dan N. sehingga terdapat kecenderungan respons terhadap reagen

Marquis bergerak secara bertahap kearah panjang gelombang yang lebih jauh

yaitu melalui warna hijau, jingga ,merah, karena rasio C, H dan N terhadap

gugus lain dalam molekul meningkat. Warna yang dihasilkan adalah larutan

berwarna hitam disebabkan adanya kesalahan dalam melakukan reaksi ini,

kesalahan itu bisa dikarenakan formaldehid yang sudah rusak atau karena

proporsi reagen dan sampel yang direaksikan tidak ada dalam kesetimbangan

sehingga hasil yang diperoleh tidak sesuai literatur. Identifikasi terakhir dari

senyawa Tetrasiklin adalah dengan penambahan H2SO4 ke dalam sampel.

Antibiotik akan membentuk kompleks berwarna kuning hingga jingga jika

direaksikan dengan asam kuat atau basa kuat. Pada prktikum kali ini

perubahan warna yang terjadi pada sampel setelah penambahan H2SO4 adalah

larutan kuning dengan endapan jingga. Terbentuknya endapan dapat terjadi

karena H2SO4 yang kurang pekat ataupun sifat tetrasiklin yang tidak larut

sempurna dalam H2SO4.

VI. Kesimpulan

Senyawa-senyawa golongan barbiturate secara umum dapat

diidentifikasi dengan reaksi pengkopelan menggunakan reagensia Parri,

dengan cara meletakan zat (sampel) bebas air diatas kertas saring,

ditambahkan reagensia Parri, kemudian kertas saring tersebut dipaparkan

diatas uap amonia, dan hasil yang didapat merupakan kompleks berwarna

ungu. Sedangkan senyawa-senyawa golongan antibiotika secara umum dapat

diidentifikasi dengan penambahan asam kuat atau basa kuat pada sampel

untuk membentuk kompleks berwarna kuning hingga jingga.

DAFTAR PUSTAKA

Clark, A.V. 2003. Theory and Practise of Chemistry. SAGE Publications. London

Kelly. 2009. Identity of Phenol. Available Online at

www.sciencemadness.org/talk/files.php?pid=219850&aid=15724 (diakses

29 September 2014)

Menteri Kesehatan RI. 1979. Farmakope Indonesia, Edisi Ketiga. Departemen

Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta

Menteri Kesehatan RI. 1995. Farmakope Indonesia, Edisi Keempat. Departemen

Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta

Roth, Hermann J. Dan Gottfried Blaschke. 1985. Analisis Farmasi. Yogyakarta:

Gadjah Mada University Press.

Svehla. 1989. Vogel's Qualitative Inorganic Analysis, 7th Edition. Prentice Hall.

London