Identificarea Agentului Etiologic

7/25/2019 Identificarea Agentului Etiologic

1/17

Principalele metode

identifcare aagentului etiologic


2/17

identifcare a agentuluietiologic

Scopul fnal al examinrii oricrui prelevat este identifcaragentului etiologic, care n unele situaii se poate realiza pdatelor oerite de caracterele morotinctoriale i de cultur

n cele mai multe cazuri este nevoie de completarea inorcu cele oerite de:

caracterele metabolice generale de gen! i particulare d

specie!"caracterele antigenice"

caracterele proprietilor de patogenitate ale bacteriei n


3/17

Teste metabolice de identifcar

n investigarea proprietilor metabolice, accentul este pus pe cegenerale: catalaza, oxidaza, testele de ermentare#oxidare $#%! glucozei i producerea de gaz. &entru determinri suplimentare solosesc i alte teste.

Catalaza

'atalazele sunt enzime care catalizeaz descompunerea apei

n ap i oxigen:()(%( * catalaz+ ()(% * %(

-estul este pozitiv dac bacteriile au metabolism oxidativ, i sprin descompunerea pe supraaa culturii a soluiei reactiv idroperoxid / )(%( / 012!, fe n tubul cu cultur, fe ntr#o suspensiecultur pe lam. 3pariia bulelor de gaz denot un rezultat pozitiv


4/17


5/17

Teste metabolice deidentifcare

Testul fermentare-oxidare (testul F-O) Principiul. 4odul de degradare a glucozei sau altui substrat dbacterii: pe cale ermentativ $! / prin osorilare" prin oxidare directprin ambele modaliti $*%!.

Se utilizeaz o geloz cu adaos de glucoz sau alt substrat, indicator de p) albastru de bromtimol!. 4ediul repartizat n tuburi se

nsm5neaz n toat coloana. 6up incubare, prin degradarea subst

ormare de acizi, indicatorul va vira n galben.7acteriile care degradeaz oxidativ glucoza, vireaz n galben numai supraa. 7acteriile care degradeaz oxidativ i ermentativ glucoza,galben toat coloana mediului, iar cele care degradeaz ermentativ svireaz coloana mediului n galben numai n prounzime anaerobii!.


6/17


Fermentarea hidrailor de carbon8tilizeaz medii de cultur cu bulion de baz pentru ermentaconine unul din carboidrai: glucoz, lactoz, zaaroz, mandulcit.

4ediile cu p) de 9,0#9,( indicator: albastru de bromtmol!,repartizate n tubuoare de ermentaie, se inoculeaz cu o ca

mic dintr#o cultur t5nr 0;#(< ore de incubare!. =ncubate se examineaz zilnic @#1 zile, not5ndu#se producia de acid pvirarea mediului! i volumul de gaz produs de bacteriile aerog

-estul este util identifcrii grupurilor principale de Enterobac


7/17


8/17


OxidazaAsteoenzim oxidativ prezent la unele specii bacterieacioneaz asupra unor amine aromate produc5nd compucolorai. $iind pozitiv la genul Neisseria, se olosete nidentifcarea meningococilor i gonococilor.

&entru executarea testului sunt mai multe procedee, dintmetoda Bovacs este recvent olosit. 3ceasta const n munei 5ii de 5rtie de fltru n reactivul pentru oxidaz, peaplic o poriune din colonie, cu ansa. -estul pozitiv se traprin apariia culorii purpurii n decurs de 0< secunde.


9/17


Producerea de hidrogen sulfurat8nele microorganisme posed o enzim din grupul liazeliaze!, care acioneaz pe substane organice, ca cisteinsau pe produi anorganici ca sulurii#tiosulurii, d5nd nH2Sidrogen sulurat!, care intr n combinaie cu srufer sau de plumb, produc5nd suluri de culoare neagr.

-enica de reerin pentru testarea ormrii de H2S, estolosirea mediului -S=

&entru eectuarea testului, mediul se nsm5neaz prindepunerea culturii n striuri, pe partea nclinat, i prin

prii drepte. n maCoritatea cazurilor, reacia pozitiv ap(@ de ore, i se evideniaz prin nnegrirea coloanei dre


10/17


11/17


Testul ureazeiAnzima ureaz, prezent la unele bacterii, arecapacitatea de a scinda ureea, cu eliberarea de 'D)>. &roducerea de amoniac, se nsoete de viraspre alcalin a mediului, decelabil prin indicatoruenol. -estul este util n identifcarea germenilor genurile Proteusi Yersinia, i se execut pe med4=8. Eeacia pozitiv: virarea spre rouFroz a me


12/17



13/17


Sisteme de echipamente (ituri) comerciale

Sistemele de identifcare biocimic miniaturizate sunt obinute din surse comerciaexemplu sistemele 3&=. 3cestea sunt compuse dintr#o plac de plastic av5nd cupe mminiaturizate! care conin substane desidratate. $iecare cup are un mic orifciu eectuarea testului, o suspensie salin ser fziologic! conin5nd cultur dintr#un miceste introdus cu o pipet &asteur n orifciul cupelor p5n la umplere, placa de plasacoper apoi cu un capac i se plaseaz ntr#o camer umed din plastic, cu care se>9


14/17


15/17

Identifcarea dupcaracterele antigenice

6efnirea caracterelor antigenice are o valoare dierit, de lbacterie la alta. 3stel, n identifcarea germenilor din grupuSalmonella, Shigella i Vibrio cholerae, procedeul este indis

n alte cazuri, determinarea structurilor antigenice are valoredus meningococi, pneumococi!, n comparaie cu proprmorologice, culturale i metabolice pe care aceste determ

completeaz.'ercetarea caracterelor antigenice se eectueaz n mod pprin reacia de aglutinare pe lam sau n tuburi, cu seruri imseruri de animale imunizate cu antigene / bacterii / cunos


16/17

Determinarea caracterelode patogenitate

'ercetarea proprietilor de patogenitate in vivovitro, prin reproducerea ineciei experimentale animale de laborator oareci albi, cobai, iepuri!evidenierea toxinogenezei eliberri de toxine!,unor produi extracelulari netoxici, oer posibil

identifcare sigur pentru un numr redus de ge


17/17

Identifcarea rapid a microorganismprin metode ale biologiei moleculare

=dentifcarea microorganismelor prin metobiologie molecular este posibil la ora acprin sonde de 36D i prin amplifcarea genacizilor nucleici, metode de depistare iidentifcare rapid a unor microorganismese cultiv lent sau nu se pot cultiva.

Identificarea Agentului Etiologic

Documents

Transcript of Identificarea Agentului Etiologic