Huella genética del ADN
description
Transcript of Huella genética del ADN
1
Huella genética del ADN
Introducción e instruciones de trabajo sobre el proceso
del experimento
Huella Genética
2
Contenido
1. Introducción de la huella de ADN
1.1 Areas de aplicación
1.2 Comparación clásica y procedimiento moderno
1.3 Origen del marcador de ADN
1.4 Enzimas de restricción
Huella Genética
3
1.1 Areas de aplicación
• Marcadores para la identificación forense ej: sangre / células de la piel, pelo, esperma..• Comprobación de genes extraños: - en organismos (¿son transgénicos?) - en alimentos (¿verdaderamente están hechas las hamburguesas de carne de vaca?• Descubrimiento de una madre o padre biológico• Comprobar si los gemelos son genéticamente idénticos
Huella Genética
4
1.2 ComparaciónProcedim. Clásico Procedim. Moderno
Intrones Minisatellites VNTRs 15 - 300 bp
Restricción Electroforesis en gel de agarosa Blotting
Hibridacion con VNTR (número variable de repeticiones en tándem)
Intrones Microsatellites
STR 4 - 6 bp
PCR Electroforesis en gel de agarosa
Huella Genética
5
Las áreas de AND son más cortas con un máximo de
5000 bp (vs. 20 000 bp)
La técnica de PCR es más barata y rápida (1 día)
Ventajas del procedimiento moderno
Huella Genética
6
Secciones de ADN investigadas
Las secuencias repetidas en los intrones son diferentes individualmente.
Las secuencias polimórficas aparecen a través de diferencias en un par de bases una secuencia de reconocimiento se pierde diferente patrón de bandas en el gel
Intrón 1CCTATTA5 veces repetido
Intrón 3CCTATTA10 veces repetido
Exón Intrón 2sinCCTATTA
Exón
Huella Genética
8
1.3 Origen del marcador de ADN: Lambda-Phage
cabeza
cola
Organizada por E. coli Genoma 48502 Bp
(secuenciado en 1982)
El Genoma es cortado por la encima de restricción Eco RI
Huella Genética
9
EcoR1 G A A T T CCorta las terminaciones C T T A A G
Pst1 C T G C A G(Providencia stuartii) G A C G T C
- HaeIII G G C C Corta los extremos romos C C G G
1.4 Enzimas de restricción
Huella Genética