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Hs CRP e MPO: punto di vista del Laboratorio
Dr. Maria Morello
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L’Aterosclerosi è una patologia infiammatoria cronica multifattoriale controllata dal sisitema immunitario in cui vengono coinvolti vari elementi che contribuiscono alla
formazione della placca, crescita ed eventuale rottura.
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Marcatori utili come indicatori del processo aterosclerotico e/o predittori di complicanza cardiovascolare (CVD):
- Citochine- Molecole di adesione- Fibrinogeno- Siero Amiloide A (SAA)- Proteina C Reattiva (CRP)- Leucociti e velocità di eritrosedimentazione- Enzimi coinvolti nello stress ossidativo-Mieloperossidasi (MPO)
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Caratteristiche Biomarcatori di Infiammazione:
- Stabilità dell’analita
- Capacità di standardizzare il metodo e controllare la variabilità
- Valore predittivo (positivo o negativo)
- Correlazione quantitativa dell’analita con la gravità della malattia
- Rapida disponibilità dei risultati e costo contenuto
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MIELOPEROSSIDASI (MPO)
La MPO è una glicoproteina eterodimerica che viene immagazzinata nei granuli azzurrofili dei neutrofili e
nei macrofagi, non è espressa nei linfociti, piastrine ed eritriciti
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- Neutrophils and monocytes kill microbes
with MPO
- MPO aids in creation of HOCL (essentially
bleach)
- HOCL is cytotoxic. It is used to destroy invading parasites and pathogens
MPO in Microbial Killing
H2O2 + Cl- +H+ → H2O + HOCl
HOCL→OCl-
MPO generated oxidants cause tissue injury
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Localizzazione della MPO e dell’HOCl/OCl-
nelle Placche Ateromatose
Sugiyama S. et al. Am.J.Pathol 2001 Shepherd J. et al. Chem. Biol. 2007
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Azioni della Mieloperossidasi (MPO)
MPO
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Mieloperossidasi ed Infiammazione
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Misurazioni della Mieloperossidasi
- Spettrofotometria: misura l’attività enzimatica della MPO (in presenza dei substrati H2O2 e Odianisinodina diicloride)
- Citofluorimetria: misura indiretta della MPO mediante indice di degranulazione dei neutrofili circolanti
- ELISA (Test rapido CardioMPO) Risultati disponibili dopo 2-3 ore dal prelievo. Valore predittivo superiore alla Troponina e CK-MB
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DOSAGGIO ELISA (CardioMPO)
Valori di MPO superiori a 350 mg/L sono da considerarsi a “rischio”
-Misura di MPO utile per identificare pazienti a “rischio” di malattie cardiovascolari, ma apparentemente in salute (Prevenzione primaria)
- Misura di MPO utile per identificare pazienti con dolore toracico a “rischio” di CVD (Prevenzione di II livello)
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MPO e monitoraggio MACE (Major AdverseCardiovascular Events)
Baldus et al. Circul. 2003
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MPO and Troponina
Loria V et al. 2008
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Localizzazione della Proteina C (CRP)
Yasojima K et al Am.J.Pathol. 2001
In situ hybridization in Liver
Western blotDetection of CRP in plaque extract
La principale sorgente di CRP è il fegato, nei processi infiammatori la sintesi di proteina C viene stimolata dalle interleuchine (IL-6)
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CRP in macrofagi e miociti
Yasojima K et al Am.J.Pathol. 2001
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Interazioni tra Proteina C, Mieloperossidasi e Proteasi
- C-Reactive Protein Stimulates Myeloperoxidase from Polymorphonuclear Cells and Monocytes: implications
for Acute Coronary Syndromes(Singh et al. Clin. Chem. 2009)
- Formation of nitric oxide-derived oxidants by mieloperoxidase in
monocytes: pathways for monocyte-mediated protein nitration and lipid
peroxidation in vivo.
(Hazen SL et al Circ Res.1999)
- Human C-reactive protein promotes oxidized low-density lipoprotein uptake and matrix metalloproteinase-9
release in Wistar rats.(Singh et al. 2008 J. Lipid Res 2008)
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Differenze tra CRP ed hsCRP
- Entrambi i tests misurano le stesse molecole nel sangue
- CRP è consigliato in pazienti a rischio di infezioni virali, batteriche, o pazienti affetti da malattie infiammatorie croniche (es. artrite reumatoide). Misura di CRP compresa tra 10-1000 mg/L
- hsCRP è consigliato a pazienti in salute per determinare il rischio di patologie cardiovascolari e misura la CRP compresa tra 0.5 – 10 mg/L
- hsCRP è molto più sensibile ed è utile a determinare concentrazioni di CRP inferiori a 5 mg/L
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High-sensitivity C-reactive protein (hsCRP) è un marker infiammatorio utile
per il riconoscimento del fattore di rischio di patologie cardiovascolari.
I livelli di hsCRP vengono misurati nel sangue mediante metodo nefelometrico ed
immunoturbidimetrico e vengono espressi in mg/L
Low risk <1.0 mg/L
Average risk 1.0-3.0 mg/L
High risk >3.0 mg/L
Very high risk >10.0 mg/L Clin. Chem 2009
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Test rapido per MPO ed hsCRP
Prelevatore (10 ml sangue) Analizzatore (metodo colorimetrico e fluorimetrico)
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Thank You