HEMOTERAPIA UCB
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HEMOTERAPIA LABORATORIAL
(Hemocomponentes e Hemoderivados)2012.1
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Prof. Dr. Patrick Menezes
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EMENTA
Imunohematologia 7 P. Histrico da hemoterapia.
Conceitos bsicos de imunohematologia,principais grupos sanguneos,Caractersticas do doador.Importncia clnica, Reaestransfusionais, Prova de Coombs.
Banco de sangue Aulas prticas abordando as principaistcnicas de imunohematologia. Provacruzada, GSRh, Coombs, PAI, Provareversa, Pesquisa de D fraco.
Hemoterapia Estudo dos principais testes sorolgicosempregados em hemoterapia
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Hemoterapia
Hemoterapia oemprego teraputicodos componentes do
sangue;
Hemocomponentes ouHemoderivados).
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Eritropoese
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Introduo
1 unidade de sangue total = 450 ml de sangue+ 50 ml de anticoagulante
Sangue total aps centrifugao
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UNIVERSIDADE FEDERAL DO ESTADO DO RIO DE JANEIROHOSPITAL UNIVERSITRIO GAFFRE E GUINLE
UNIRIO / HUGG / LPC
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Revisando conceitos...
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O que imuno-hematologia
o estudo da compatibilidade
imunolgica entre componentessanguneos e seus receptores
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Imuno-hematologia eritrocitria
grupo sanguneo: antgenos de superfcie doseritrcitos
hoje conhecidos mais de 250 antgenosagrupados em 29 sistemas.
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Antgenos eritrocitrios
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Aglutinao
As reaes antgeno-anticorpo so reveladasatravs do fenmeno da aglutinao.
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Atuao do biomdico nobanco de sangue
Executar o processamento de sangue e suassorologia;
Realizar exames pr e ps transfusionais;
Assumir chefias tcnicas, assessorias e direo
de unidades;
Manusear equipamentos;
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Nivelamento de conceitos
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O sangue e as diferentes culturas
Culto ao sangue nasreligies
Sacrifcios realizados em
diferentes povos:Astecas,Maias, povos dafrica, Europeus...
Papa Inocncio VIII (1492)
Este arquivo est disponvel em:http://www.ccb.ufsc.br/~cristina/sm_2005_1_med7002.htm 15
http://www.ccb.ufsc.br/~cristina/sm_2005_1_med7002.htmhttp://www.ccb.ufsc.br/~cristina/sm_2005_1_med7002.htmhttp://www.ccb.ufsc.br/~cristina/sm_2005_1_med7002.htm -
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Histria da Hemoterapia
Na Grcia antiga os nobres bebiam o sangue dosgladiadores mortos na arena.
1492- O papa Inocncio VIII ingeriu o sangue de trsjovens em busca da cura.
1667- Jean Baptiste Denis , mdico do rei Luis XIV,infundiu sangue de carneiro em um doente mental .
1788- Pontick e Landois realizaram transfuses entreanimais da mesma espcie.
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Histria da Hemoterapia
1818 - James Blundell transfundiu sangue humano emmulheres com hemorragia ps parto, ( primeira transfuso ).
1901 - Karl Landstainer descobre os grupos sanguneosABO .
1936 - Em Barcelona surgiu o primeiro banco de sangue,durante a guerra civil espanhola. Enfrentavam problemasrelacionados a coagulao do sangue.
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Histria da Hemoterapia
1940- Levine descobre o fator Rh.
Aps a II guerra mundial surgem no Brasil os primeirosbancos de sangue privados.
1970 - Implantao dos HEMOCENTROS, iniciando uma
poltica do sangue.
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Karl Landsteiner (1868-1943)Nobel de Medicina em 1930
Gentipos Grupo Sanguneo Anticorpos
AA A Anti-B
AO A Anti-B
BB B Anti-A BO B Anti-A
AB AB -
OO O Anti-A e B
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AntgenoA
Grupo sanguneo ABO
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Anticorpo anti-B
Antgeno B
AntgenoABNenhum anticorpo
Anticorpo anti-A
Antgeno H(O)
Anticorpo anti-A, Anti-B
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Frequncias de ABO
grupo O, 45%grupo A, 41%grupo B, 10%grupo AB, 4%
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Funo dos grupos sanguneos
Receptores de vrus, bactrias e parasitosSistema de grupo sanguneo MNS, Duffy e outros
Participao no fenmeno de adeso de molculasSistema de Grupo Sanguneo Duffy e outros
TransporteSistema de Grupo Sanguneo Kidd e outros
Ao enzimticaSistema de Grupo Sanguneo Kell e outros
Funo protica estruturalsistema de grupo sanguneo Gerbich e outros membrana (estomatcitos)
***dieta do grupo sanguneo????????????
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PABO
LewisGLOB
HI
LWXg
DuffyLutheran
IndianRaphJMHOka
Carboidratos
Glicoproteinas deestrutura ou funo
desconhecida
Regulao decomplemento
Molculas de adeso
Transporte e canais
Enzimas
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Outros sistemas antignicos
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As transfuses podem ser:
Isogrupoquando doador e receptor sodo mesmo grupo ABO
Heterogrupodoador e receptor so degrupo sanguneo diferente
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Compatibilidade
Sangue: tipagem ABO / Rh (D)
PAI: C, D,e E, Kell, Duffy, Kidd, MNS....
H > de 500 Ags identificados
Prova Cruzada Soro do receptor + hemceas do doador=
incubao simular RT in vitro
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SUBSTITUTOS DO SANGUECARREADORES ARTIFICIAIS DE
OXIGNIOLIVRE DE CLULAS
FONTE: Dra.Marcia Cristina Zago Novaretti
Fundao Pr-Sangue.
Disciplina de Hematologia FMUSP
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Linhas de PesquisasTipos de
substitutosdo sangue Background
Base para o
desenvolvimento dossubstitutos de G V
Biosinttico Imita a naturezautilizando ahemoglobina para
liberar oxignio aostecidos
Produo de fluidos injetveisbaseados nas modificaesqumicas da hemoglobina(HBOC)
Abitico Uso de produtosqumicostotalmentesintticos paraliberar oxignioaos tecidos
Produzindo compostosinjetveis de emulso deperfluoroqumicos (PFCs)
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Carreadores artificiais de oxignioem preparados de hemoglobina
Dissociao da hemoglobina (toxicidade renal)
Ao vasoconstritora ao se ligar ao xido ntrico
Afeta a liberao de fatores relaxantes pela clula muscular
A HEMOGLOBINA LIVRE DE CLULAS
PRECISA SER MODIFICADA PARA USO TRANSFUSIONAL
Carreadores de oxignio
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Carreadores de oxigniolivre de clulas
Hb Polimerizada Emulso de Perfluorocarbono
Hb Conjugada
Hb cross-linked
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Polyheme (Northfield Lab.)
Aprovado pela FDA, fase III de testes clnicos
32 centros de trauma
>3.000 casos de trauma
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Carreadores Artificiais de oxignio
Eficcia e segurana No se conseguiu at o momento obter um substituto de
hemcias que seja seguro e eficaz
Possibilidade de uso em situaes extremas (antes doatendimento mdico em casos de acidentes, guerras) com
manuteno da volemia .
****AGUARDANDO NOVOS ESTUDOS
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MEDICINA LEGAL
O estudo dos grupos sanguneo tambm tem suaaplicao, atravs da:
utilizao das tcnicas moleculares,
nos estudos de paternidadee no reconhecimento de cadveres.
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SISTEMA Rh
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SISTEMA RhHISTRICO
1939 - LEVINE E STETSON
Uma mulher aps ter dado a luz a uma criana com DHRNapresentou reao transfusional grave aps ter sidotransfundida com o sangue ABO compatvel do marido.
O soro desta mulher aglutinava 80% das hemcias ABO-
compatveis.
1940 - LANDSTEINER and WIENER
Soro de coelho imunizados com hemcias do MacacoRhesus aglutinavam cerca de 85% das hemcias humanas.
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Por homenagem a LANDSTEINER e WIENER anomenclatura do Sistema foi mantida como Rh.
O alo-anticorpo humano foi renomeado anti-D.
Os antgenos Rh esto presentes nas hemcias desde a6a semana de vida intra-uterina.
Os receptores Rh (D) positivos podem receberhemciasRh (D) positivo ou Rh (D) negativo;
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O sistema Rh o maior e mais complexo sistema de gruposangneo.
At o momento, pelo menos 49 antgenos tm sidodefinidos por anticorpos Rh especficos .
O antgeno D altamente imunognico (antignico),seguido pelos antgenos c e E.
IMPORTNCIA EM OBSTETRCIA**
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O sistema Rh apresenta certa complexidade gentica, almde variaes qualitativas e quantitativas em sua expresso.
Assim, so usadas as seguintes designaes:
O termo Rh Fracosubstituiu a designao Du. Este termo representauma variao quantitativa na expresso do antgeno D.
O termo Rhnulldesigna uma condio rara, em que os antgenos dosistema Rh esto completamente ausentes.
O termo "CDE" designa a determinao, recomendada para ospacientes Rh negativos, de outros antgenos menos freqentes dosistema
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Legislao brasileira
Em 1980, criado o programanacional de sangue e derivados( Pr - sangue )
Lei de proibio dacomercializao do sangue: Pelosartigos 197 e 198 da constituio
federal de 1988, o poder pblico responsvel pelas aesreferentes ao uso de derivados;
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CICLO DO SANGUE
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SUBSISTEMACOLETA
SUBSISTEMAHEMOCOMPONENTES
SUBSISTEMALABORATRIO
Recepo Registro
Pr-triagem TriagemHematolgica
TriagemClnica Coleta
ColetaExterna
ServioSocial
Processamento
Estoque/Rotulagem Distribuio
ExpurgoImunohemato-logia
RecepoLaboratrio
Sorologia
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Tipos de Doadores
Doadores espontneos
Doadores de reposio
Doadores autlogos
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Tipos de Transfuso
Programada: Para determinado dia e hora.
No urgente:A se realizar dentro das 24 hs.
Urgente:A se realizar dentro das 3hs.
De extrema urgncia: Quando o retardo do incio datransfuso coloque a vida do paciente em risco.
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descrita em 1921
Binmio doador/receptor constitudo pelo mesmoindivduo.
doao autloga pr-operatria requer a autorizao do
mdico.
O sangue retirado pode ser mantido preservado de 30 a 42dias em geladeira.
No existe excluso permanente;
NO correto por crenas religiosas *
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Transfuso autloga
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ProtocoloAUTOTRANSFUSO
Qualquer indivduo adulto no perodo de at 5 a 45 diasantes de cirurgia eletiva;
Protocolo de retirada e reinfuso:- 1u - 7 dias antes da cirurgia- 2 u - 14 dias antes da cirurgia- 3 u - 21 dias antes da cirurgia
- 4 u - 28 dias antes da cirurgia- 5 u - 35 dias antes da cirurgia- 6 u - 42dias antes da cirurgia
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Rotina de admisso para odoador
Cadastro
Pr-triagem
(triagem hematolgica)
Triagem clnica
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Seleo clnica de
doadores Idade : entre 18 e 65 anos18 anos completos e 65 anos
completos, 11 meses e 29 dias.
Peso > 50 kg - mnimo de 400ml de sangue. AC/Bolsa
Estar bem de sade
No estar em jejum
Homens: de 2 em 2 meses, at 4 vezes/ano Mulheres: de 3 em 3 meses, at 3 vezes/ano
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RDC N 57, DE 16 DE DEZEMBRO DE 2010
RDC 153 DE 14/06/04 anterior
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RESOLUO VIGENTE
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DOAO
Voluntria
Annima
Altrusta
No remunerado
Sigilosa
Consentimento por escrito48
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INTERVALO 2/2 meses4 doaes/ano
3/3 meses3 doaes/ano
Autloga protocolo Acima de 60 anos - a cada 6 meses**A reposio do plasma pelo organismo ocorre em 24 horas e a
dos glbulos vermelhos em 4 semanas.
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Gravidez: Inapta at 12 semanas ps parto
Aborto: Inapta at 12 semanas
Lactao: Inapta at 12 meses ps parto
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ANEMIA Hb 12,5 Ht 38
Hb 13 Ht 39O doador atinge o estoque de ferro que apresentava antes da doao,
40 a 60 dias para os homens e de 50 a 90 dias para as mulheres.
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ALERGIAS
APTOS Assintomticos
INAPTO TEMPORRIO
at 72 h ps medicao
INAPTO DEFINITIVO- atopias severas
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INAPTOS DEFINITIVOS
HIV
Chagas
Doena de encelopatia espongiforme humana
Transplante crnea ou material biolgico base de duramter
Uso drogas injetveis ilcitas
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INAPTOS
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INAPTOSTEMPORRIOS 12 M
Aps cura de DST e sexo por troca e seus parceiros
Sexo com parceria desconhecida sem preservativo
Vtimas estupro
que tiveram relao com outros homens ou as parceiras
sexuais destes
Percing ou tatuagem *
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e que tiveram relao sexual com pessoa c/ examereagente p/ HIV ou Hepatite C ou B ou outra infecosexual ou sangunea
Detidos por mais de 24 horas
Exposio sangue ou material biolgico
Parceiros hemodialisados ou transfundidos
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CIRURGIAS
GRANDE PORTE6m a 12 m
PEQUENO PORTE3 m
TRATAMENTO DENTRIO
72 h
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TRIAGEM CLNICA DE
DOADORES DE SANGUE
Mtodo importante capaz de captar overdadeiro doador de sangue.
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Finalidade da entrevista Avaliar os antecedentes patolgicos e
os possveis fatores de risco daquele candidato doao.
So investigados dados que protegem tanto o doador
quanto o receptor.
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VOTO DE AUTO EXCLUSO
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VOTO DE AUTO-EXCLUSO
Esta informao prestada por voc confidencial e ser mantida
sob sigilo. No tem qualquer implicao pessoal. Tem a finalidadede proteger a pessoa que ir receber seu sangue.
RESPONDA COM SINCERIDADE MARCANDO COM XUMA DAS ALTERNATIVAS.
Meu sanguePODE SER USADO PARA TRANSFUSO.
Meu sangue NO PODE SER USADO PARA
TRANSFUSO, pois estou ou passei por situaode risco (homossexual, bissexual, heterossexual commltiplos(as) parceiros(as) e/ou viciado em drogas.
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Afrese
Leucafrese
TrombocitafereseEritrocitaferese
Plasmafrese
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A h f d li d 2 bj ti
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A hemafrese pode ser realizada com 2 objetivos
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Transfusional:Definido como a obteno de um hemocomponente a partirde um doador nico. Ex.: 8u de plaquetasO principal hemocomponente coletado o concentrado de plaquetas
Teraputico:Tratamento de um grande nmero de patologias
Objetivo de remover um elemento patognicoou umasubstncia fisiolgica presente em concentraes
indesejveisna circulao.
Alguns doadores de sangue normalmente devido
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Alguns doadores de sangue, normalmente devido ansiedade, podem apresentar efeitos adversos doao, sendo mais freqente a ocorrncia de:
A) tetaniaB) vmitos;C) lipotimia.D) parestesiaE) convulso;
Lipotmia vulgarmente designada por perda dos sentidos, desmaio ou desfalecimento. Tetania / espasmos musculares; Parestesia/ sensaes cutneas subjetivas (ex., frio, calor, formigamento, presso, etc.) Convulso/ contraes involuntrias dos msculos, de inicio sbito.
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Provas anteriores
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PROCESSAMENTODO SANGUE
Fracionamento do sangue
Obteno de Componentes
Testagem do sangue coletado
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FRACIONAMENTO
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FRACIONAMENTO
PREPARAO DOS HEMOCOMPONENTESConcentrado de Hemcias
Plasma
Concentrado de PlaquetasCrioprecipitado
ENCAMINHAMENTO PARA ESTOCAGEM( aguardar liberao)
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Processamento em Sistema
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Processamento em SistemaFechado
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SOROLOGIA
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SOROLOGIA
TRIAGEM SOROLGICA: Testes de Altasensibilidade
Hepatite B: HBSAg, Anti-HBcHepatite C : Anti-HCVVDRLElisa ChagasElisa HTLV 1-2Elisa HIV1-2
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Segurana Transfusional
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Segurana Transfusional(rastrear)
Coleta de amostra e administrao dehemocomponentes
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LIBERAO
Devem ser mantidos em quarentena, ou seja,separados dos produtos liberados.
somente liberar aps o trmino de todos ostestes laboratoriais e autorizados pelo controlede qualidade.
Os produtos devem ser liberados somente porpessoas autorizadas.
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C di d
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Condies deArmazenamento
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PR ESTOQUE:- aguarda resultado sorolgico e tipagem
DESCARTE:- sorologia positiva
ESTOQUE:- de acordo com a data de validade
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Separao
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Separao
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Armazenamento
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O TRANSFUSO????
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O que TRANSFUSO????
a administrao de produtos sangneos(hemoderivados) que podem ter origem
autloga ou alognica
Indicao: reposio de clulas ou protenasnecessrias para funes especficas
H d i d
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Hemoderivados
Sangue total: coletado em soluo comcido ctrico + glicose
Indicaes RESTRITAS
PrticaFracionamento/ Processamento
F i
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Fracionamento
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Concentrado de Hemcias
Volume: 280-400ml Massa de Clulas:150-250ml
Estocagem: 42d (1-6C) Hematcrito da Bolsa: 50% Indicaes
Sangramento Agudo Anemia Normovolmica
Cada Unidade de CH: Hbem 1g e o Ht em 3%
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Concentrado de Plaquetas Comuns: derivados do ST em
que PRP d origem ao CPl35-60ml = 1U Plaquetas
Por Plaquetafrese: 1U de 1nico doador= 5-8 U PlaquetasIndicaes:TrombocitopeniasTrombocitopatias
Dose: 1U/ 10Kg
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Plasma
PFC: separado do ST econgelado at 8h ps coleta
1U= 200/225ml
Dose: 10-15ml/Kg
Indicaes: Coagulopatia
C i i it d
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Crioprecipitado
Derivado do Plasma descongelado lento 1U: 5-15ml Rico em: FVIII, FXIII, fibrinognio, FvW Indicaes
Hipofibrinogenemia Deficincia de Fator XIII
Dose: 1U/ 10kg de peso
O t H d i d
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Outros Hemoderivados
Albumina
Gamaglobulina
Fatores de Coagulao Especficos
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HEMODERIVADOS
FATOR VIII FATOR IX
ALBUMINA IMUNOGLOBULINA
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VALIDADE DOS HEMOCOMPONENTES
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VALIDADE DOS HEMOCOMPONENTES
HEMCIASdepende do tipo de anticoagulante:- CPDA 1 35 dias (mais usada) cido ctrico,Citrato de sdio.Fosfato de Sdio,Dextrose e Adenina
- CPD SAG Manitol 42 dias Aumenta a sobrevida e possibilita o armazenamento das hemcias por at
42 dias entre 2C a 6C cido ctrico,Citrato de sdio,Fosfato de Sdio,Dextrose,glicose, NaCl..
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VALIDADE DOS HEMOCOMPONENTES
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VALIDADE DOS HEMOCOMPONENTES
PLASMA - 1 ANO a -20C
PLAQUETAS - 3 a 5 DIAS
CRIOPRECIPITADO - 1 ANO
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90
Comit Transfusional
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LEGISLAES
MANUAL DA QUALIDADE
REGULAMENTOSPROCEDIMENTOSOPERACIONAIS PADRO
DOCUMENTOS
TREINAMENTO CONTNUO
REGISTROS
R t f i i
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Reaes transfusionais
Aproximadamente 10% dos receptores apresentamreaes transfusionais.
Toda a reao transfusional deve serregistrada e
notificada.
Classificao:
Agudas ou imediatas Tardias
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Complicaes transfusionais
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Complicaes transfusionaisImune No -imune
Imediatas
Reao febril no-hemoltica Sobrecarga volmica
Reao hemoltica aguda Contaminao bacteriana
Reao alrgica (leve, moderada, grave) Hipotenso por inibidor
da ECA
TRALI (Transfusion Related Lung Injury) Hemlise no-imune
Hipocalcemia
Embolia area
Hipotermia
Tardias Aloimunizao eritrocitria Doenas infecciosas
R t f i i d
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Reaes transfusionais agudas
Hemolticas imunes
Erro na identificao da amostra colhida.Erro na identificao da bolsa.
Erro na identificao do paciente.
Febre, mal estar, agitao, dispnia, nuseas, cefalia,hipotenso, perda da conscincia.
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Febris no hemolticas
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Febris no hemolticas
Pode ocorrer logo aps o incio da transfuso ouat 4hs aps o trmino.
Presena de anticorpos citotxicos.
Tremores, calafrio, cefalia, nusea e vmitos,febre, calafrios, alteraes respiratrias, como
taquipnia e ou dispnia.
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Alrgicas e anafilticas
Pode ocorrer aps o incio da transfuso ou at 2hs aps otrmino.
Anticorpos ou desconhecidas.
Urticria, eritema, tosse, cefalia, dispnia, hipertenso,edema de glote e at o quadro de anafilaxia.
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Hipervolemia
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Hipervolemia
Quando recebe infuso de grande volume de sangue ou ainfuso muito rpida.
Pacientes com ICC ou insuficincia renal.
Hipertenso, dispnia, cianose, tosse, dor precordial e at
edema pulmonar.
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C t i b t i
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Contaminao bacteriana
Bactrias que resistem s temperaturas de refrigerao.
A gravidade depende do microorganismo contaminante e do
estado geral do paciente.
Febre, Vmito, hipotenso, dor abdominal, choque sptico.
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Paciente 20 anos, vtima de acidente automobilstico, d entrada nopronto socorro com mltiplos ferimentos perda sangunea
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pronto socorro com mltiplos ferimentos, perda sanguneaestimada maior que 40% da volemia. Foi solicitada transfuso de
dois concentrados de hemcias.
O banco de sangue deve:
Liberar as bolsas tipo O negativo, se o termo de responsabilidade
estiver assinado. Dar continuidade s provas de compatibilidade..
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Provas anteriores
Impresso I
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Testes laboratoriais tcnicas
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Testes laboratoriais - tcnicas
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Apresentao das tcnicas
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Imunohematolgicas
Tcnica em lmina
Ainda utilizada
Baixa sensibilidade
Grande margem de erro
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Tcnica em tubo
Mais utilizado
Custo acessvel
Boa sensibilidade
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TCNICA DE GEL-CENTRIFUGAO EMCOLUNA DE AGAROSE
Alta sensibilidade; Utiliza pouca quantidade
de amostra;
O resultado pode serarmazenado; Custo elevado.
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http://images.google.com.br/imgres?imgurl=http://www.ortho-wire.com/pt/blood-group-serology/learning-library/abo-blood-group-system/images/pic_09.gif&imgrefurl=http://www.ortho-wire.com/pt/blood-group-serology/learning-library/abo-blood-group-system/page4.cfm& -
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Microplaca
Alta sensibilidade;
proporciona agilidade emgrandes rotinas;
Alto custo.
"leitor fotomtrico demicroplacas"
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As reaes antgeno-anticorpo so reveladas atravs do
fenmeno da AGLUTINAO ; Amais importante ferramenta de trabalho dos
imunematologistas.
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Antgenos dos eritrcitos /
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Anticorpos sricos
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O fenmeno da aglutinao a reao antgeno-anticorpo
Controle de qualidade dos reagentes p/
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imunohematologia
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Positivo 4+
Positivo 3+
Positivo 2+
Positivo 1+
Fracamentepositivo
negativo
HEMLISE
LAVAGEM DE HEMCIAS
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Quando uma tcnica prev a utilizao de hemcias lavadas, devemosrealizar esta lavagem da forma correta efetuando-a pelo menos 3vezes.
1 Centrifugar a amostra a 4000 rpm por 5 min.
2 Separar o plasma ou soro para outro tubo previamente etiquetado;
3 Identificar outro tubo e pingar 4 gotas do concentrado de hemciasda amostra a ser preparada
4 Encher o tubo com salina fisiolgica at 1 cm da borda. Tampar. 5 Homogeneizar e Centrifugar a amostra a 3.400 rpm durante 1 minuto
e 30 segundos
6 Retirar completamente o sobrenadante aps a lavagem invertendo-se o o tubo rapidamente
7 Repetir os itens 4, 5 e 6 por mais 2 vezes 8 Preparar a suspenso de hemcias.
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PREPARO DAS SUSPENSES
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SUSPENSO DE HEMCIAS A 2%
0,1 ml de concentrado de hemcias + 4,9 ml de salina
1 gota de concentrado de hemcias + 49 gotas de salina
SUSPENSO DE HEMCIAS A 5%***
0,1 ml de concentrado de hemcias + 1,9 ml de salina
1 gota de concentrado de hemcias + 19 gotas de salina
SUSPENSO DE HEMCIAS A 10%
0,1 ml de concentrado de hemcias + 0,9 ml de salina
1 gota de concentrado de hemcias + 9 gotas de salina
SUSPENSO DE HEMCIAS A 50% 0,4 ml de concentrado de hemcias + 0,8 ml de salina
4 gotas de concentrado de hemcias + 8 gotas de salina
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INTENSIDADE DAS REAES
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4 + boto slido com pequenos grumos e fundo claro 3 + grumos grandes e numerosos com fundo claro 2 + grumos pequenos e numerosos com fundo rseo 1 + grumos pequenos e fundo bastante rseo W presena de minsculas aglutinaes em fundo
bastante rseo 0ausncia de aglutinao, fundo bastante rseo com
hemcias em suspenso. CM campo misto caracteriza-se pela presena de
aglutinaes e de hemcias em suspenso, com fundo
rseo He hemlise total ou parcial das hemcias. indicador de
positividade
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DETERMINAO DO GRUPOABO
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PROVA DIRETA OU GLOBULAR (BETH VINCENT) Consiste em por em contato soros-teste conhecidos, anti-A, anti-
B e anti-AB, com glbulos vermelhos (GV) a serem testados, parase identificar a presena ou no dos antgenos A e B.
PROVA REVERSA, SRICA (SIMONIN) Consiste em colocar em contato o soro a testar com pelo menos
GV conhecidos A1 e B, permitindo reconhecer a presena ou no
de anticorpos dirigidos contra estes antgenos.
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ABO
DETERMINAO DO GRUPO ABO
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DETERMINAO DO GRUPO ABO
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DETERMINAO DO TIPO Rho (D)
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1. Identificar dois tubos de ensaio, como D e CTL.
2. No tubo identificado como D, colocar uma gota de soro anti Rho (D)e no tubo identificado como CTL, uma gota de Controle Rh;
3. Aos dois tubos adicionar uma gota de suspenso de GV a 5% emsoluo salina. Essa suspenso, pode ser feita no prprio plasmaou soro;
4. Misturar bem e centrifugar os dois tubos a 3400 rpm por 15segundos ou 1000 rpm por 1 minuto;
5. Ressuspender o sedimento, agitando delicadamente os tubos e lermacroscopicamente a aglutinao;
6. Se o teste for negativo (aglutinao ausente), proceder conforme
indicado no teste para pesquisa de D fraco.
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Controle Rh um reagente que contm o meio macromolecular utilizado
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um reagente que contm o meio macromolecular utilizadona fabricao de soro anti-Rho (D), mas que
imunologicamente inerte (isto , no contm anticorpos).
Em virtude do meio com alto peso molecular (AC IgG e
potencializadores) q o anti-D apresenta - podem ocorrerreaes falso positivas.
um testemunho negativo, e deve ser do mesmo fabricantedo anti-D utilizado.
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Pesquisa de D fraco
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1. Incubar ambos os tubos (D e CTL) por 15 minutos embanho-Maria a 370C;
2. Lavar os GV de cada tubo por trs vezes, em soluosalina fisiolgica. Decantar completamente por inversorpida dos tubos, aps a ltima lavagem;
3. A cada tubo, acrescentar duas gotas de soro anti-globulinahumana de amplo espectro ou soro de Coombs;
4. Centrifugar 3400 rpm por 15 segundos ou 1000 rpm por 1minuto;
5. Ressuspender o "boto" de GV, por agitao delicada eexaminar para aglutinao macroscpica;
6. Anotar os resultados
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A reao das hemcias com o controle de Rh0deve ser:
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deve ser:
A) positiva
B) Negativa.C) positiva se o Rh0 for negativo
D) negativa se o Rh0 for negativo
E) positiva se o Rh0 for positivo
Se a reao com o soro-controle de Rh for positiva, a tipagem Rh considerada invlida.
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Provas anteriores
TCNICA DO COOMBS DIRETO (CD)
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1. Coletar a amostra de sangue
2. Preparar uma suspenso de hemcias a 5%. 3. Colocar uma gota desta suspenso em um tubo de
hemlise.
4. Lavar trs vezes com salina fisiolgica.
5. Adicionar 2 gotas da antiglobulina humana poli-especfica (anti-IgG e anti-C3d)
6. Centrifugar 3400 rpm 15 segundos
7. Ressuspender suavemente o boto de hemcias
8. Observar a presena ou no de aglutinados 9. Anotar os resultados
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As principais indicaes para a prova de Coombs diretaincluem:
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incluem:
a) deteco de certos antgenos fracos nas plaquetas;
b) diagnstico de anemia hemoltica em adultosc) demonstrao de anticorpos anti-B;
d) deteco de certos antgenos fracos nas plaquetas;
e) deteco de anticorpos incompletos, no soro, para
triagem pr-transfusional.
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Provas anteriores
As hemcias do sangue devem ser lavadas em sorofi i l i l t t d di d
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fisiolgico pelo menos trs vezes antes da adio doreagente AGH para:
A) Eliminar as clulas hemolisadasB) remover traos de globulinas sricas livres
C) neutralizar o excesso de reagente
D) aumentar a ligao do antgeno ao anticorpo
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Provas anteriores
As principais indicaes para a prova de Coombs indiretaincluem:
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incluem:
a) deteco de anticorpos desconhecidos no soro, para
triagem pr-transfusional;b) deteco de anticorpos no soro, para finalidades de
titulao;
c) deteco de certos antgenos fracos nas plaquetas;
d) demonstrao de auto-anticorpos do tipocrioaglutinina;
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Provas anteriores
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Refernc ias b ib l iog rficas
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BAIN, Barbara J. Clulas Sanguneas: Um guia Prtico. Artmed, 3a ed.,
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BLOODLINE - Site de Hematologia (www.bloodline.net)
CARVALHO, William de Freitas. Tcnicas mdicas de hematologia eimunohematologia. 7a ed. Coopmed: Belo Horizonte, 1999
FAILACE, R. Hemograma. Manual e interpretao. 3a ed. Editora ArtesMdicas Porta Alegre, 1995
HENRY, John Bernard. Diagnsticos clnicos e conduta teraputica porexames laboratoriais.
Manual Sistema Vacutainer
Pequeno guia para coleta de sangue.Becton-Dickinson
http://www.bloodline.net/http://www.bloodline.net/