hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI-...
Transcript of hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI-...
![Page 1: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/1.jpg)
Retikulocytární
hemoglobin
Soňa Vytisková
1
![Page 2: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/2.jpg)
Úvod
2
![Page 3: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/3.jpg)
3
Erytropoeza
Proerytroblast Basofilní
erytroblast Polychromatický
erytroblast
Ortochromatický
erytroblast
Retikulocyt Erytrocyt
Zmenšování velikosti buňky
Nárůst syntézy HGB
Kostní dřeň Krev
1-3 dny KD / 1-2dny PK
Retikulocyt obsahuje zbytky organel obsahující RNA (ribozomy, zbytky
endoplazmatického retikula).
![Page 4: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/4.jpg)
Erytrocyty a retikulocyty
Vzhledem k tomu, že normální doba života RBC je 120 dní, zhruba 1/120 (~1%) nových RBC musí být denně doplněno do periferní krve, aby byl zachován jejich konstantní počet.
Erytrocyty jsou „dlouhověké“ a mohou nám vypovídat o erytropoetické aktivitě během několika posledních měsíců.
◦Erytrocyty již neprodukují nový hemoglobin.
Naproti tomu retikulocyty jsou „krátkověké“ a mohou nám proto poskytnout informace o aktuální erytropoetické aktivitě.
◦Retikulocyty stále produkují Hgb.
![Page 5: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/5.jpg)
Erytrocyty – nové parametry
5
HPO -% hypochromních erytrocytů
HPR -% hyperchromních erytrocytů
MIC - % mikrocytů
MAC - % makrocytů
střední koncentrace korpuskulárního HGB
obsah korpuskulárního HGB
šíře distribuce dle koncentrace HGB
šíře distribuce dle obsahu buněčného hemoglobinu
stanovení počtu fragmentů (schistocytů)
![Page 6: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/6.jpg)
Retikulocyty – nové parametry
6
Retikulohematokrit
Koncentrace HGB v retikulocytech
Rozdíl mezi koncentrací HGB v RBC a RETI
Střední objem RETI
Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka)
Šíře distribuce RETI
Mladší a starší vývojové formy RETI (IRF, LFR, MFR, HFR)
Střední koncentrace korpuskulárního HGB v RETI
Obsah buněčného HGB v RETI
Šíře distribuce dle koncentrace HGB v RETI
Šíře distribuce dle buněčného obsahu HGB v RETI
![Page 7: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/7.jpg)
Princip stanovení
7
![Page 8: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/8.jpg)
Retikulocyty – metody stanovení
8
Mikroskop:
barvení brilantkresylovou nebo metylenovou
modří – barví se tzv. substatnia granulofilametosa
Fluorescenční metoda: Sysmex
Abbott
Cytochemická metoda: Beckman Coulter
Advia
Dle množství zbytkové RNA rozeznáváme zralé a nezralé retikulocyty (IRF).
![Page 9: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/9.jpg)
9
Mieho teorie Při průchodu světla skrze kulovitý (sférický) objekt dochází k jeho odchýlení (difrakci)
o vnitřní strukturu objektu
Publikováno 1908
Kulaté částice rozptylují světlo tak, že rozptýlené světlo tyto částice popisuje co do
velikosti a obsahu
Mieho teorii lze aplikovat na jakýkoli kulovitý objekt - erytrocyty nevyjímaje, avšak za
předpokladu, že jsou izovolumetricky sferizovány.
Mohandas et al. Accurate and independent measurement of volume and hemoglobin
concentration of individual red cells by laser scattering, Blood, 1986: 68:506-213
![Page 10: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/10.jpg)
10
Mieho teorie
High refractive index Low refractive index
![Page 11: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/11.jpg)
Princip stanovení
Advia
11
![Page 12: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/12.jpg)
Advia – parametr CHr
12
![Page 13: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/13.jpg)
Erytrogram, histogram CHr
13
![Page 14: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/14.jpg)
Princip stanovení
Abbott
14
![Page 15: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/15.jpg)
Sapphire – parametr MCHr
15
Laser
488 nm
Optical flow
cell
7º detector
0º detector
PMT2 PMT3
PMT1
90º detector
FL1
detector
• Identifikace retikulocytů
•FL1 (intensita fluorescence, RNA)
•Koncentrace hemoglobinu v buňce
•IAS (lom světla v 7º; log + lin)
•PSS (lom světla 90º)
•Objem buňky
•ALL (lom světla 0º)
•PSS (lom světla 90º)
![Page 16: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/16.jpg)
Put science on your side.
Optické RBC parametery Diagram „Objem vs. CHC“ (MCVr, MCHr, CHCr)
MCVr
85.7 fL
CHCr
289 g/L
MCHr = MCVr x CHCr
Červené tečky: RBC
Zelené tečky: retikulocyty
![Page 17: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/17.jpg)
Put science on your side.
Erytrogram
Červené tečky: RBC
Zelené tečky: retikulocyty
Normocytic, normochromic Microcytic, hypochromic
--------
Microcytic------
------
Macrocytic------ -
----
-
Hypochro
mic
---
-
![Page 18: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/18.jpg)
Princip stanovení Sysmex
18
![Page 19: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/19.jpg)
19
RET Channel – RET-He vs. RBC-He
RBC-He
● RBC haemoglobin equivalent
● Calculated from RET-RBC-Y
RB
C-
Are
a
IRF - Area LFR-Area
Fluorescence-Thrombocytes
Fluorescent light intensity
Fo
rward
scatt
ere
d l
igh
t in
ten
sit
y
DELTA-He
RET-He - RBC-He
RBC-He
RET-He
RET-He
● Reticulocyte haemoglobin equivalent
● Calculated from RET-Y
Sysmex – parametr Ret-He
![Page 20: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/20.jpg)
Ret-He – r. 2005
20
![Page 21: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/21.jpg)
Ret-He
21
![Page 22: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/22.jpg)
Ret-He
22
![Page 23: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/23.jpg)
Kontrola kvality
23
![Page 24: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/24.jpg)
Klinické využití
24
![Page 25: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/25.jpg)
Retikulocytární hemoglobin Nazývaný „krátkodobým ekvivalentem MCH“ – oproti MCH poskytuje
potřebnou informaci v horizontu dní
Retikulocyty v krevním oběhu pouze několik dní – díky svému rychlejšímu obratu jsou jejich parametry rychlejším a citlivějším indikátorem činnosti kostní dřeně (zejména její schopnosti využívat železo k syntéze hemoglobinu)
Zvýšené hodnoty retikulocytů pouze informují o počínající reakci kostní dřeně na stimulaci, nic však nevypovídají o skutečné kvalitě retikulocytů – obsahu hemoglobinu v nich
Prokazuje utilizaci železa ve tvorbě hemu, může být indikátorem nedostatku železa v kostní dřeni podobně jako barvení na železo v KD (Fishbane S., Mast A. E., Blood 2002)
![Page 26: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/26.jpg)
Sledování erytropoetické aktivity kostní dřeně
obsah hemoglobinu v retikulocytech odráží aktuální stav a kvalitu erytropoézy
Poskytuje informace o hemoglobinizaci v průběhu erytropoézy v reálném čase
Diagnostika a monitorace léčby anemie z nedostatku železa, optimalizace léčby železem
Účinný parametr při monitoringu kinetiky železa
Časná diagnostika funkčního nedostatku železa, odlišení funkčního a nefunkčního nedostatku železa
Účinný parametr pro optimalizaci a racionalizaci léčby erytropoetinem, zejména u pacientů podrobujících se chemoterapeutické léčbě a u dětí
Obdoba glykemie a % HbA1c
Klinické využití Ret-He
![Page 27: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/27.jpg)
Retikulocytární hemoglobin vs. klasické parametry metabolismu Fe
Sérové železo
Sérový feritin – zásoby železa v organismu
Saturace transferinu – prezentuje mobilizaci železa
Solubilní transferrinový receptor (sTfR) a sTfR-F index (sTfR/log ferritin)
Hepcidin
Zn Protoporfyrin
RET-He - není ovlivněn reakcí akutní fáze, obsah hemoglobinu v retikulocytech je snížen bez ohledu na přítomnost či nepřítomnost zánětu
![Page 28: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/28.jpg)
dle dosud publikovaných údajů je největší klinické využití v oblasti léčby dialyzovaných pacientů EPO
1997 „FDA approved“: metoda validovaná pro pacienty podstupující hemodialýzu
Nefrolofická guidelines (Evropské pokyny pro osvědčené postupy (EBPG) nebo iniciativa
pro kvalitu výsledků vyšetření ledvinových onemocnění, National Kidney Foundation Kidney Disease Outcome Quality Initiative (NKF KDOQI).
Klinické využití - nefrologie
![Page 29: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/29.jpg)
29
Klinické využití - pediatrie
![Page 30: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/30.jpg)
Klinické využití - gravidita
![Page 31: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/31.jpg)
Refereční rozmezí: 28 -35 pg (Sysmex) ◦ Hodnoty nižší než 28 pg se považují za projev funkčního nedostatku železa
Vydávání výsledků pro klinická pracoviště od 6. 4. 2016
Počet vyšetření RET-He: cca 130 RET-He /měsíc
FN Brno
![Page 32: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/32.jpg)
Závěr
32
![Page 33: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/33.jpg)
Měření RET-He je rychlé, časově nenáročné
Nízké náklady pro laboratoře i zdravotní pojišťovny ◦ 96857 – stanovení počtu retikulocytů na automatickém
analyzátrou – 66 bodů
◦ Vykazovat s KO
Časný ukazatel onemocnění/odpovědi na léčbu: dříve než klinické hematologické či biochemické ukazatele
Vysoká výpovědní hodnota ◦ 100% citlivost pro diagnostiku deficitu železa
◦ 80% specifita pro diagnostiku deficitu železa
Shrnutí
![Page 34: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/34.jpg)
Poděkování
![Page 35: hemoglobin - Sysmex Partec · 2016. 11. 30. · Střední objem RETI Střední obsah HGB v RETI- Ret-He, CHr, MCHr (od 6. 4. 2016 – žádanka) Šíře distribuce RETI Mladší a](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022052409/6099a20eb6460a43514847f1/html5/thumbnails/35.jpg)
Děkuji za pozornost
35