HbA1c por electroforesis capilar
Transcript of HbA1c por electroforesis capilar
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Determinación de HbA1c por Electroforesis Capilar…
Mucho más que un resultado
Dra. Carla A. Lucarelli
Depto de Química Clínica
IACA LABORATORIOS
1 de Noviembre 2016
Dra. Carla A. Lucarelli
Depto de Química Clínica
IACA LABORATORIOS
10 de diciembre del 2020
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Rol del Laboratorio
Classification and Diagnosis of Diabetes: Standards of Medical Care in Diabetes 2020
VENTAJAS
• No requiere ayuno
• Mayor estabilidad
preanalítica
• Menor alteración por
estrés y enfermedad
DESVENTAJAS
• Baja sensibilidad en el
punto de corte
• Mayor costo
• Limitada disponibilidad
• Falla en la correlación
entre A1C y glucosa
promedio en ciertos
individuos
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Método certificado por el
NGSP y estandarizado para
el estudio del control y
complicaciones de la
Diabetes (DCCT)
Usar un ensayo sin
interferencia por
hemoglobinopatías
En condiciones asociadas a
una relación alterada entre
A1C y glucemia, no debe
ser usada como criterio de
diagnóstico
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El nivel de HbA1c dependerá
de los factores que afectan a la
hemoglobina
El conocimiento de variantes
de hemoglobina no conocidas
o antecedentes genéticos
pueden guiar en la
interpretación de los resultados
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96% HbA
< 3,0% HbA2
< 1% HbF
¿Qué es la HbA1c?
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¿Cuál es el método de referencia?
Pasos:
• Separación y
hemólisis de los
eritrocitos
• Escisión enzimática
de la hemoglobina
• Separación y
medición
No se realizan en
laboratorios de rutina
Clin Chem Lab Med 2002; 40(1):78–89
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Métodos de Rutina
Diferencias en las
moléculas de la
hemoglobina glicada y
la hemoglobina
no-glicada
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Electroforesis Capilar
• Separación de moléculas cargadas en función de su movilidad electroforética
• Permite una cuantificación precisa de la fracción HbA1c de la hemoglobina
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Exactitud
Método certificado por el NGSP y estandarizado para el estudio del control y complicaciones de la Diabetes (DCCT)
Evite y detecte interferencias analíticas y clínicas
Valor agregado en el informe emitido
Elección de un método
Velocidad de proceso
Cumplimiento de promesa de
resultados
Volumen de muestra
Conexión con el SIL
Costo
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Utilization of assay performance characteristics to estimate hemoglobin A1c result reliability. Clin Chem. 2014 Aug;60(8):1073-9.
Cv< 2%
Sesgo muy bajo
Exactitud
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Valor de referencia para el cambio
VRC% = √2 x 1,96 x √(CVa%)2 + (CVi%)2
CVa% = Coeficiente de
variación analítico.
CVi% = Coeficiente de
variación Intra individuo
Z = es un estadístico
Cambio clínicamente significativo : 0,5%
CVi HbA1c: 1,0% ( Rohlfing et al.)/1,9% (VB)
CVa del método: < 2%VRC: 6,18%/ 7,64%
HbA1c :7,0% +/-0,4
+/-0,5
Asegura que el cambio de
0,5% es estadísticamente
significativo y no debido a la
variación analítica
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Exactitud
Método certificado por el NGSP y estandarizado para el estudio del control y complicaciones de la Diabetes (DCCT)
Evite y detecte interferencias analíticas y clínicas
Valor agregado en el informe emitido
Elección de un método
Velocidad de proceso
Cumplimiento de promesa de
resultados
Volumen de muestra
Conexión con el SIL
Costo
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Método Certificado por NGSP-IFCC
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Exactitud
Método certificado por el NGSP y estandarizado para el estudio del control y complicaciones de la Diabetes (DCCT)
Evite y detecte interferencias analíticas y clínicas
Valor agregado en el informe emitido
Elección de un método
Velocidad de proceso
Cumplimiento de promesa de
resultados
Volumen de muestra
Conexión con el SIL
Costo
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Interferencias Clínicas
Situaciones que acorten la
vida media del eritrocito
Situaciones que prolonguen la
vida media del eritrocitoAlteración de la glicación
Interferencia
positiva
Tratamiento con
antirretrovirales e
hipertrigliceridemia
Interferencia
negativa
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Interferencias Analíticas
HbA1c Lábil • se forma durante la fase postprandial
• en pacientes diabéticos que controlan mal su glucemia
First evaluation of Capillarys 2 Flex Piercing (Sebia) as a new analyzer for HbA1c assay by capillary electrophoresis.Clin Chem Lab Med. 2012 Oct 1;50(10):1769-75..
Hemoglobina Carbamilada• Proceso normal, aumentado en pacientes renales
• El ácido isociánico, resultante de la degradación de la urea sérica se
une a la valina N-terminal de la cadena b-globina de la HbA
No se observa pico
adicional y no hay
modificación en la áreas de
los picos HbA0 y HbA1c
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• Hemoglobina Fetal
Puede observarse en casos de b-talasemia, enfermedad de células falciformes, embarazo, anemia, leucemia, diabetes insulino dependiente, hipertiroidismo, persistencia hereditaria de HbF.
Fácil de
visualizar.
No interfiere
hasta 23%
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Hemoglobinopatías
Modificación de la secuencia de aminoácidos de las
cadenas de globina que generan hemoglobina anormal
Las variantes de hemoglobina y sus
formas glicadas pueden interferir con la
medición de la HbA1c a través de
diferentes mecanismos dependiendo de
la técnica utilizada
Interferencia
analíticaDesempeño del método
Interferencia
clínicaAlteración de la vida
media del GR
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Interferencia clínica
Puede inducir
a una mala
interpretación
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Interferencia analítica
La alta
resolución de la
electroforesis
capilar permite
una separación
perfecta de las
variantes de
hemoglobina más
comunes de la
HbA1c y de
HbA0.
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Mayor resolución
Grafico más amigable
Am J Clin Pathol 2014;141:867-877 873
873 DOI: 10.1309/AJCPRU5QC2JBANSV
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HbA1c y β Talasemia
Descubrimiento
incidental de un
HbA2 elevada
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¿Antes que pasaba?
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Casos atípicos
Valor muy bajo
Dos picos???
Fructosamina : 500 µmol/L
Posible variante en la
HbA
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No se
cuantifica
Pico atípico
Variante de
hemoglobina que
migra en zona de
hemoglobina fetal
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¿Cuándo sospechar su presencia?
• Discordancia entre la medición de glucosa de autocontrol del paciente y el valor de A1c
• Resultado de A1c> 15% o < 4%
• Resultado A1c notablemente diferente en comparación con el valor anterior cuando se usa un método diferente para medir
• Presencia de anemia con índices anormales de glóbulos rojos en un hemograma completo
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Seguimiento Diagnóstico
Paciente
¿Cómo informamos?
![Page 33: HbA1c por electroforesis capilar](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022080102/62e62456b872404cc576b3ac/html5/thumbnails/33.jpg)
Perfil electroforético sin
alteraciones
![Page 34: HbA1c por electroforesis capilar](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022080102/62e62456b872404cc576b3ac/html5/thumbnails/34.jpg)
Perfil atípico sin
interferencia
analítica en el
resultado
**
Observaciones:
Se observa un perfil atípico con posible presencia de una variante de hemoglobina, que interfiere en la obtención del
resultado.
Se sugiere solicitar electroforesis capilar de hemoglobina y utilizar otro analito para el monitoreo del paciente.
Perfil atípico con
interferencia
analítica en el
resultado
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HbA1c vs SARS-CoV-2
La prueba de HbA1c es
necesaria para el manejo de
pacientes. Es un factor de
riesgo independiente
![Page 36: HbA1c por electroforesis capilar](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022080102/62e62456b872404cc576b3ac/html5/thumbnails/36.jpg)
Desafíos
Consenso en los modelos de informe
Feedback con los médicos solicitantes
![Page 37: HbA1c por electroforesis capilar](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022080102/62e62456b872404cc576b3ac/html5/thumbnails/37.jpg)
Muchas gracias!!!