Growth Hormone (hGH) - Diagnostic Products Corporation · 2016-04-17 · hyposecretion include...

Growth Hormone (hGH)

IMMULITE® 2000Growth Hormone (hGH)

2 IMMULITE 2000 Growth Hormone (hGH) (PIL2KGH-14, 2005-05-09)

English

Intended Use: For in vitro diagnostic usewith the IMMULITE 2000 Analyzer — forthe quantitative measurement of humangrowth hormone in serum, as an aid inpatient management.Catalog Number: L2KGH2 (200 tests)Test Code: GH Color: Light GrayCDC Analyte Identifier Code: 2547CDC Test System Identifier Code: 10418CLIA Complexity Category: Moderate

Summary and ExplanationHuman growth hormone (hGH,somatotropin) is a polypeptide originatingin the anterior pituitary. It is 191 aminoacids in length and has a molecular massof approximately 22,000 daltons. Itsmetabolic effects are primarily anabolic. Itpromotes protein conservation andengages a wide range of mechanisms forprotein synthesis. It also enhancesglucose transport and facilitates thebuildup of glycogen stores. Another familyof peptide hormones, the somatomedins,mediates its cascade of growth-promotingactions.1

Measurement of hGH is primarily ofinterest in the diagnosis and treatment ofvarious forms of inappropriate growthhormone secretion. Clinical disorders ofhyposecretion include dwarfism andunattained growth potential.Hypersecretion is associated withgigantism and acromegaly.

Caution must be exercised in the clinicalinterpretation of growth hormone levels.These vary throughout the day, making itdifficult to define a reference range or tojudge an individual's status based onsingle determinations. Many factors areknown to influence the rate of growthhormone secretion, including periods ofsleep and wakefulness, exercise, stress,hypoglycemia, estrogens, corticosteroids,L-dopa, and others.1 Because of itssimilarity to prolactin and placental

lactogen, earlier growth hormoneimmunoassays were often plagued withfalsely high values in pregnant andlactating women.Because not all acromegalic individualshave elevated baseline levels,suppression tests based on glucoseloading are of value in this context. Inspite of the induced hyperglycemia, thereis rarely a decrease from baseline levels inacromegaly.2

Growth hormone-deficient individuals havefasting/resting levels similar to those foundin healthy individuals. Various challengetests have therefore been devised todifferentiate these groups. Thus, with theonset of deep sleep or after 15 to 20minutes of vigorous exercise, growthhormone levels normally show a rise.Other tests of growth hormoneresponsiveness are based on theadministration of L-dopa, arginine andinsulin. Propanolol or estrogen aresometimes given in conjunction with theprimary stimulus to accentuate theresponse.4,5

A small number of cases of dwarfism havebeen documented in which both the basallevel and the response to challengetesting were normal. Such cases mayinvolve tissue insensitivity to either growthhormone or the somatomedins, or thepresence of antibodies or immunoreactivebut biologically inactive growth hormone.4

Principle of the ProcedureIMMULITE 2000 Growth Hormone is asolid-phase, two-site chemiluminescentimmunometric assay.The solid phase (bead) is coated withmurine monoclonal anti-hGH antibody.The reagent contains alkalinephosphatase (bovine calf intestine)conjugated to a rabbit anti-hGH polyclonalantibody. The reagent and hGH in thesample are incubated together with abead coated with a murine anti-hGHmonoclonal antibody to form an antibody-sandwich complex. Unbound enzymeconjugate is then removed by a centrifugal

IMMULITE 2000 Growth Hormone (hGH) (PIL2KGH-14, 2005-05-09) 3

wash. Finally, chemiluminescent substrateis added to the bead and signal isgenerated in proportion to the boundenzyme.Incubation Cycles: 1 × 30 minutes.

Specimen CollectionPatient must be fasting and at completerest 30 minutes before blood collection.6,7

The use of an ultracentrifuge isrecommended to clear lipemic samples.Hemolyzed samples may indicatemistreatment of a specimen before receiptby the laboratory; hence the results shouldbe interpreted with caution.

Centrifuging serum samples before acomplete clot forms may result in thepresence of fibrin. To prevent erroneousresults due to the presence of fibrin,ensure that complete clot formation hastaken place prior to centrifugation ofsamples. Some samples, particularlythose from patients receivinganticoagulant therapy, may requireincreased clotting time.

Blood collection tubes from differentmanufacturers may yield differing values,depending on materials and additives,including gel or physical barriers, clotactivators and/or anticoagulants.IMMULITE 2000 Growth Hormone has notbeen tested with all possible variations oftube types. Consult the section onAlternate Sample Types for details ontubes that have been tested.Volume Required: 25 µL serum.

Storage: Refrigerate immediately. Stableat 2–8°C for 8 hours,6,7 or for 2 months(aliquotted) at –20°C. Avoid repeatedthawing and freezing.

Warnings and PrecautionsFor in vitro diagnostic use.Reagents: Store at 2–8°C. Dispose of inaccordance with applicable laws.

Follow universal precautions, and handleall components as if capable oftransmitting infectious agents. Sourcematerials derived from human blood weretested and found nonreactive for syphilis;for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitisB surface antigen; and for antibodies tohepatitis C.

Sodium azide, at concentrations less than0.1 g/dL, has been added as apreservative. On disposal, flush with largevolumes of water to prevent the buildup ofpotentially explosive metal azides in leadand copper plumbing.Chemiluminescent Substrate: Avoidcontamination and exposure to directsunlight. (See insert.)Water: Use distilled or deionized water.

Materials SuppliedComponents are a matched set. Labels onthe inside box are needed for the assay.

GH Bead Pack (L2GH12)With barcode. 200 beads, coated withmurine monoclonal anti-hGH antibody.Stable at 2–8°C until expiration date.L2KGH2: 1 pack.

GH Reagent Wedge (L2GHA2)With barcode. 11.5 mL alkalinephosphatase (bovine calf intestine)conjugated to rabbit polyclonal anti-hGHantibody in buffer. Stable at 2–8°C untilexpiration date.L2KGH2: 1 wedge.Before use, tear off the top of the label atthe perforations, without damaging thebarcode. Remove the foil seal from the topof wedge; snap the sliding cover down intothe ramps on the reagent lid.

GH Adjustors (LGHL, LGHH)Two vials (Low and High) containinglyophilized hGH in a nonhuman serum,with preservative. Reconstitute each vialwith 3.0 mL distilled or deionized water.Mix by gentle swirling or inversion until thelyophilized material is fully dissolved.Stable at 2–8°C for 30 days afterreconstitution, or for 6 months (aliquotted)at –20°C.L2KGH2: 1 set.Before making an adjustment, place theappropriate Aliquot Labels (supplied withthe kit) on test tubes so that the barcodescan be read by the on-board reader.


Kit Components SuppliedSeparately

Multi-Diluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4)For the on-board dilution of high samples.One vial of concentrated (ready-to-use),nonhuman protein/buffer matrix, withpreservative. Stable at 2–8°C for 30 daysafter opening, or for 6 months (aliquotted)at –20°C.L2M2Z: 25 mL. L2M2Z4: 55 mLBarcode labels are provided for use withthe diluent. Before use, place anappropriate label on a 16 × 100 mm testtube, so that the barcodes can be read bythe on-board reader.L2M2Z: 3 labels L2M2Z4: 5 labels

L2SUBM: Chemiluminescent SubstrateL2PWSM: Probe WashL2KPM: Probe Cleaning KitLRXT: Reaction Tubes (disposable)L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes(16 × 100 mm)L2ZC: 250 Sample Diluent Tube CapsCON6: Tri-level, multi-constituent control

Also RequiredDistilled or deionized water; test tubes;controls.

Assay ProcedureNote that for optimal performance, it isimportant to perform all routinemaintenance procedures as defined in theIMMULITE 2000 Operator's Manual.See the IMMULITE 2000 Operator'sManual for: preparation, setup, dilutions,adjustment, assay and quality controlprocedures.Recommended Adjustment Interval:2 weeks.Quality Control Samples: Use controlsor serum pools with at least two levels(low and high) of human growth hormone.

Expected ValuesA study performed at a large referencelaboratory in the western United States on59 healthy adult males and 60 healthyadult females yielded the followingreference intervals:

Males: Up to 1 ng/mLFemales: Up to 10 ng/mL

Secretion of growth hormone by thepituitary gland is episodic and pulsatile,and transient levels up to 40 ng/mL havebeen observed in healthy subjects.Because serum levels are rather lowbetween pulses in healthy individuals,immunoassays with sufficient sensitivityare necessary to distinguish patients withabnormally low values from healthysubjects who have values that happen tofall in the low-normal range. Thus, basal orrandom levels of hGH provide littlediagnostic information. In someindividuals, spontaneous growth hormonesecretion is better monitored by using acontinuous withdrawal pump, or bydrawing specimens for hGH assay every20 to 30 minutes over a 12-to-24-hourperiod. A number of provocative testsdesigned to stimulate or suppress releaseare also used to assess growth hormonesecretion; the definition of abnormalresponses varies with the laboratory.1

Consider these limits as guidelines only.Each laboratory should establish its ownreference ranges.

LimitationsPatients on hGH therapy may develophuman antibodies to hGH that will interferein the assay and cause falsely low values.

Heterophilic antibodies in human serumcan react with the immunoglobulinsincluded in the assay components causinginterference with in vitro immunoassays.[See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilicantibodies: a problem for allimmunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Samples from patients routinelyexposed to animals or animal serumproducts can demonstrate this type ofinterference potentially causing ananomalous result. These reagents havebeen formulated to minimize the risk ofinterference; however, potentialinteractions between rare sera and testcomponents can occur. For diagnosticpurposes, the results obtained from thisassay should always be used incombination with the clinical examination,patient medical history, and other findings.

Performance DataSee Tables and Graphs for datarepresentative of the assay's performance.Results are expressed in ng/mL. (Unless


otherwise noted, all were generated onserum samples collected in tubes withoutgel barriers or clot-promoting additives.)Beginning with kit lot 206, Alternate Unit 1encoded in the kit bar code is in terms ofWHO NIBSC 2nd IS 98/574. AlternateUnit 1 encoded in the kit bar code in priorkit lots is in terms of WHO NIBSC1st IS80/505. This change requiresinformation from previous kit lots to bedeleted from the Immulite 2000 kitdatabase.Please note that once kit lots 206 orhigher are scanned, ALL results printedusing Alternate Unit 1, irrespective ofthe kit lot used to generate the results,will be expressed relative to WHONIBSC 2nd International Standard98/574 for r-DNA Growth Hormone.Conversion Factor:ng/mL × 2.4 → mIU/LWHO NIBSC 2nd IS 98/574(For kit lots 206 and up)

ng/mL × 2.6 → mIU/LWHO NIBSC 1st IS 80/505(For kit lots 205 and below)

Calibration Range: Up to 40 ng/mL(96 mIU/L) WHO NIBSC 2nd IS 98/574(104 mIU/L) WHO NIBSC 1st IS 80/505

Analytical Sensitivity: 0.01 ng/mLHigh Dose Hook Effect: None up to17,000 ng/mL

Precision: Five samples were processedin duplicate over the course of 20 days,two runs per day, for a total of 40 runs and80 replicates. (See "Precision" table.)

Linearity: Samples were assayed undervarious dilutions. (See "Linearity" table forrepresentative data.)Recovery: Samples spiked 1 to 19 withthree hGH solutions (120, 240 and480 ng/mL) were assayed. (See"Recovery" table for representative data.)Specificity: The antibody is highly specificfor human growth hormone. (See"Specificity" table.)

Bilirubin: Presence of conjugated andunconjugated bilirubin in concentrationsup to 200 mg/L has no effect on results,within the precision of the assay.

Hemolysis: Presence of hemoglobin inconcentrations up to 512 mg/dL has no

effect on results, within the precision of theassay.

Lipemia: Presence of triglycerides inconcentrations up to 3,000 mg/dL has noeffect on results, within the precision of theassay.

Alternate Sample Type: To assess theeffect of alternate sample types, bloodwas collected from 20 volunteers intoplain, heparinized, EDTA and BectonDickinson SST® vacutainer tubes. Equalvolumes of the matched samples werespiked with various concentrations ofhGH, to obtain values throughout thecalibration range of the assay, and thenassayed by the IMMULITE 2000 GrowthHormone procedure.(Heparin) = 0.99 (Serum) + 0.07 ng/mLr = 0.997

(EDTA) = 1.0 (Serum) – 0.01 ng/mLr = 0.997

(SST) = 0.98 (Plain Tubes) + 0.02 ng/mLr = 0.999

Means:4.15 ng/mL (Heparin)4.12 ng/mL (EDTA)4.14 ng/mL (Serum)4.09 ng/mL (SST)

Method Comparison: The assay wascompared to DPC's IMMULITE GrowthHormone on 206 samples. (Concentrationrange: approximately 0.01 to 40 ng/mL.See graph.) By linear regression:(IML 2000) = 0.98 (IML) + 0.41 ng/mLr = 0.991

Means:8.6 ng/mL (IMMULITE 2000)8.4 ng/mL (IMMULITE)

References1) Whitley RJ, Meikle AW, Watts NB.Endocrinology. Part 2: Protein hormones. In:Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz textbookof clinical chemistry. 2nd ed. Philadelphia:Saunders, 1994: 1665-70. 2) Daughaday WM,Cryer PE. Growth hormone hypersecretion andacromegaly. Hospital Practice. no. 8 August1978;13:75-80. 3) Raite S. The standards forhuman growth hormone assays. In: Laron Z,Butenandt O, editors. Evaluation of GrowthHormone Secretion. Basel: Karger, 1983: 162-9.4) Van Wyk JJ. Diagnosis of growth hormonedeficiency and other causes of growth failure.The Endocrine Society: Syllabus for the 35thAnnual Postgraduate Assembly October 1983:90-106. 5) Van Wyk JJ, Underwood L. Growthhormone, somatomedins and growth failure.Hospital Practice no. 8 August 1978;13:57-67. 6)


Tietz NW, editor. Clinical guide to laboratorytests. 3rd ed. Philadelphia: W.B. Saunders,1995: 300. 7) Burtis CA, Ashwood ER, editors.Tietz textbook of clinical chemistry. 2nd ed.Philadelphia: W.B. Saunders, 1994: 1670.

Technical AssistanceIn the United States, contact DPC'sTechnical Services department.Tel: 800.372.1782 or 973.927.2828Fax: 973.927.4101. Outside the UnitedStates, contact your National Distributor.Manufactured by EURO/DPC Ltd. under aQuality System registered to ISO 13485:2003.

Tables and Graphs

Precision (ng/mL)

Within-Run1 Total2

Mean3 SD4 CV5 SD CV

1 2.6 0.09 3.5% 0.17 6.5%2 3.7 0.17 4.6% 0.21 5.7%

3 5.3 0.18 3.4% 0.29 5.5%

4 7.9 0.23 2.9% 0.33 4.2%

5 17 0.72 4.2% 1.13 6.6%

Specificity

Compound1ng/mLAdded2

% Crossreactivity3

FSH 10,000 0.001%

Free Beta HCG 280 ND

HPL 100 0.03%

LH 3,663 0.5%

40,000 ND

10,000 ND

1,000 ND

Prolactin

200 ND

TSH 11,125 0.01%ND: nondetectable4

Linearity (ng/mL)

Dilution1 Observed2 Expected3 %O/E4

1 8 in 85 6.5 — —

4 in 8 3.4 3.3 103%

2 in 8 1.7 1.6 106%

1 in 8 0.78 0.81 96%

2 8 in 8 6.7 — —

4 in 8 3.5 3.4 103%

2 in 8 1.7 1.7 100%

1 in 8 0.80 0.84 95%

3 8 in 8 11 — —

4 in 8 5.3 5.5 96%

2 in 8 2.6 2.8 93%

1 in 8 1.2 1.4 86%

4 8 in 8 12 — —

4 in 8 6.1 6.0 102%

2 in 8 2.9 3.0 97%

1 in 8 1.4 1.5 93%

5 8 in 8 24 — —

4 in 8 12 12 100%

2 in 8 6.1 6.0 102%

1 in 8 3.1 3.0 103%

6 8 in 8 27 — —

4 in 8 12 14 86%

2 in 8 5.9 7.0 84%

1 in 8 3.0 3.5 86%


Recovery (ng/mL)

Solution1 Observed2 Expected3 %O/E4

1 — 0.01 — —

A 5.65 6.01 94%

B 10.9 12.0 91%

C 22.3 24.0 93%

2 — 0.98 — —

A 6.53 6.93 94%

B 12.9 12.9 100%

C 22.3 24.9 90%

3 — 2.41 — —

A 7.66 8.29 92%

B 12.9 14.3 90%

C 26.1 26.3 99%

4 — 3.54 — —

A 8.63 9.36 92%

B 14.3 15.4 93%

C 26.0 27.4 95%

5 — 7.75 — —

A 13.9 13.4 104%

B 19.3 19.4 99%

C 31.1 31.4 99%

Method Comparison

IMMULITE Growth Hormone, ng/mL 0 10 20 30 40

IMM

ULI

TE 2

000

Gro

wth

Hor

mon

e

0

10

20

30

40

a7

(IML 2000) = 0.98 (IML) + 0.41 ng/mLr = 0.991

Deutsch. Precision: 1Intra-Assay, 2Gesamt,3Mittelwert, 4S (Standardabweichung), 5CV(Variationskoeffizient). Linearity: 1Verdünnung,2Beobachtet (B), 3Erwartet (E), 4% B/E, 58 in 8.Recovery: 1Lösung, 2Beobachtet (B), 3Erwartet(E), 4% B/E. Specificity: 1Verbindung,2zugesetzte Menge, 3% Kreuzreaktivität, 4NN:Nicht nachweisbar. Method Comparison.Growth Hormone: HumanesWachstumshormon. Menstrual Cycle Graph.

Cycle Day: Normalized to LH Peak: Zyklustag:bezogen auf LH-Peak

Español. Precision: 1Intraensayo, 2Total,3Media, 4DS, 5CV. Linearity: 1Dilución,2Observado (O), 3Esperado (E), 4%O/E, 58 en 8.Recovery: 1Solución, 2Observado (O),3Esperado (E), 4%O/E. Specificity:1Compuesto, 2Cantidad añadida, 3% Reaccióncruzada, 4ND: no detectable. MethodComparison. Growth Hormone: Hormona deCrecimiento. Menstrual Cycle Graph. CycleDay: Normalized to LH Peak: Día del Ciclo:referido al pico de LH

Français. Precision: 1Intraessai, 2Total,3Moyenne, 4SD, 5CV. Linearity: 1Dilution,2Observé (O), 3Attendu (A), 4%O/A, 58 dans 8.Recovery: 1Solution, 2Observé (O), 3Attendu(A), 4%O/A. Specificity: 1Composé, 2ajouté,3Réaction croisée%. 4ND: non détectable.Method Comparison. Growth Hormone: hGH.Menstrual Cycle Graph. Cycle Day:Normalized to LH Peak: Jour du cycle normalisepar rapport au pic de LH

Italiano. Precision: 1Intra-serie, 2Totale, 3Media,4SD (Deviazione Standard), 5CV (Coefficiente diVariazione). Linearity: 1Diluizione, 2Osservato(O), 3Atteso (A), 4%O/A, 58 in 8. Recovery:1Soluzione, 2Osservato (O), 3Atteso (A), 4%O/A.Specificity: 1Composto, 2quantità aggiunta,3Percentuale di Crossreattività, 4ND: nondeterminabile. Method Comparison. GrowthHormone: hGH. Menstrual Cycle Graph. CycleDay: Normalized to LH Peak: Ciclo Giornaliero:Normalizzato/i al Picco di LH

Português. Precision: 1Entre-ensaios, 2Total,3Média, 4Desvio padrão, 5Coeficiente devariação. Linearity: 1Diluição, 2Observado (O),3Esperado (E), 4%O/E, 58 em 8. Recovery:1Solução, 2Observado (O), 3Esperado (E),4%O/E. Specificity: 1Composto, 2Quantidadeadicionada, 3Percentagem de reacção cruzada,4ND: não detectável. Method Comparison.Growth Hormone: Hormona de crescimento.Menstrual Cycle Graph. Cycle Day:Normalized to LH Peak: Dia do Ciclo:Normalizado até Pico de LH.

Deutsch

hGH (humanesWachstumshormon)Anwendung: Zur in vitro-Diagnostik unterVerwendung des IMMULITE 2000Systems – zur quantitativen Bestimmungvon humanen Wachstumshormon (hGH)im Serum, als Hilfestellung in derTherapie- und Verlaufskontrolle.Artikelnummern: L2KGH2 (200 Tests)


Testcode: GH Farbe: hellgrau

Klinische RelevanzHumanes Wachstumshormon,Somatotropes Hormon (STH) oderHuman-Growth-Hormon (hGH), ist eineinkettiges Proteohormon, das aus 191Aminosäuren und 2 Disulfidbrückenbesteht. Seine Molmasse beträgtca. 22 000 Dalton. Die Synthese desWachstumshormons findet in denRibosomen der acidophilen somatotropenZellen des Hypophysen-Vorderlappensstatt. Dies geschieht unter demstimulierenden Einfluß des imHypothalamus gebildeten Growth-Hormon-Releasing-Hormons (GH-RH)über einen negativenRückkoppelungsmechanismus. Dietägliche Produktionsrate beträgt beimErwachsenen etwa 350 µg/24 Stunden.

Das hGH besitzt einen proteinanabolenEffekt. Es beeinflußt den Protein-, denKohlenhydrat- und den Fettstoffwechsel,aber auch den Elektrolyt- undWasserhaushalt. hGH führt zurVerminderung der Stickstoffausscheidungund dadurch zur positiven Stickstoffbilanz.Der Aminosäurentransport in der Zelle undder Einbau der Aminosäuren ins Eiweißwird gefördert. Es stimuliert zudem dieRNA-Polymeraseaktivität. Mediatoren derwachstumsfördernden Wirkung des hGHsind die Somatomedine, eine andereGruppe von Peptidhormonen.1

Die Bestimmung der Serum-hGH-Spiegelist insbesondere von Bedeutung fürDiagnose und Therapiekontrolle vonStörungen der hGH-Sekretion. KlinischeBilder einer hGH-Hyposekretion sindZwergwuchs und Minderwuchs. Resultateiner Hypersekretion von hGH sindGigantismus und Akromegalie.2

Die klinische Interpretation von basalenhGH-Spiegeln kann nur mit äußersterVorsicht erfolgen. Infolge des circadianenRhythmus des hGH ist es äußerstschwierig, Referenzwerte zu definierenbzw. einzelne Basalwertbestimmungen zuinterpretieren. Zahlreiche Faktoren, wieSchlaf, Schlaflosigkeit, körperlicheBelastung, Stress, Hypoglykämie,Östrogene, Kortikosteroide, L-Dopa u.a.können die hGH-Sekretion beeinflussen.1Wegen der Ähnlichkeit des hGH zuProlaktin und HPL wurden mit älteren

hGH-Assays bei schwangeren undstillenden Frauen oft falsch erhöhte hGH-Spiegel bestimmt.Da nicht alle akromegalen Patientenerhöhte hGH-Basalwerte aufweisen, sindin diesen Fällen Glukose-Suppressionsteste von klinischerBedeutung. Bei Gesunden kommt es nachoraler Glukosezufuhr zu einem Abfall derhGH-Konzentrationen auf nichtnachweisbare Werte. Bei Patienten mitAkromegalie ist hGH entweder nichtsupprimierbar, oder es findet sich einparadoxer Anstieg.Patienten mit hGH-Mangel haben basalehGH-Spiegel, ähnlich denen vonGesunden. Zur Differentialdiagnostik deshGH-Mangels werden daher verschiedeneFunktionsteste eingesetzt. So führt zumBeispiel eine körperliche Belastung von15-20 Minuten bei Gesunden zu einemAnstieg der hGH-Spiegel. AndereFunktionsteste zur Überprüfung der hGH-Antwort basieren auf der Verabreichungvon L-Dopa, Arginin oder Insulin. Inmanchen Fällen werden Propanolol oderÖstrogene in Kombination mit demprimären Stimulus verabreicht, um diehGH-Antwort zu verstärken.4,5

Es ist eine kleine Zahl von Patienten mitZwergwuchs dokumentiert, die sowohlnormale hGH-Basalwerte, als auch einenormale Antwort auf Funktionstestezeigten. In solchen Fällen kann eineUnempfindlichkeit der Gewebe auf hGHoder die Somatomedine (IGF's) vorliegen,es können Antikörper vorhanden sein oderdas gebildete hGH ist immunreaktiv, aberbiologisch inaktiv.4

MethodikIMMULITE 2000 Wachstumshormon istein Festphasen, zwei Phasen-Chemilumineszenz immunometrischerAssay.Die Festphase(Kugel) ist mit einemmonoklonalen Maus-anti-hGH-Antikörperbeschichtet. Das Reagenz enthältAlkalische Phosphatase(Rinderkalbsdarm), die an einenpolyklonalen Kaninchen-anti-hGHkonjugiert ist. Das Reagenz und hGH ausder Probe werden gemeinsam mit einermit monoklonalen Maus-anti-hGH-Antikörper beschichteten Kugel inkubiertum einen Antikörper-Sandwich-Komplex


zu bilden. Unkonjugiertes Enzymkonjugatwird anschließend durch einen Zentrifugal-Waschschritt entfernt. Zuletzt wirdChemilumineszenz-Substrat zur Kugelhinzugefügt und das Messsignal wird imVerhältnis zum gebundenen Enzymgebildet.Inkubationszyklen: 1 × 30 Minuten.

ProbengewinnungDie Patienten müssen nüchtern sein und30 Minuten vor der Blutentnahmevollkommen ruhen.6,7

Der Einsatz einer Ultrazentrifuge wird zurKlärung von lipämischen Probenempfohlen.Bei hämolysierten Proben besteht dieMöglichkeit einer unsachgemäßenHandhabung vor Eintreffen im Labor,daher sind die Ergebnisse zurückhaltendzu interpretieren.

Die Zentrifugation der Serumproben vordem völligen Abschluss der Gerinnungkann zu Fibringerinnseln führen. Umfehlerhaften Analysenergebnissen infolgevon Gerinnseln vorzubeugen, istsicherzustellen, dass die Gerinnung vorder Zentrifugation der Proben vollständigabgeschlossen ist. Insbesondere Probenvon Patienten unter Antikoagulantien-therapie können eine verlängerteGerinnungszeit aufweisen.Blutentnahmeröhrchen von verschiedenenHerstellern können differierende Werteverursachen. Dies hängt von denverwendeten Materialien und Additiven(Gel oder physische Trennbarrieren,Gerinnungsaktivatoren und /oderAntikoagulantien) ab. IMMULITE 2000Wachstumshormon sind nicht mit allenmöglichen Röhrchenvariationenausgetestet worden. Details dergetesteten Röhrchenarten sind demKapitel "Alternative Probenarten" zuentnehmen.Erforderliche Menge: 25 µl Serum.

Lagerung: Sofort einkühlen. 8 Stundenbei 2–8°C haltbar,6,7 oder 2 Monate bei–20°C (aliquotiert). WiederholtesEinfrieren/Auftauen vermeiden.

Hinweise undVorsichtsmaßnahmenZur In-vitro-Diagnostik.

Reagenzien: Bei 2–8°C lagern. UnterEinhaltung der geltenden gesetzlichenVorschriften entsorgen.Die generell geltendenVorsichtsmaßnahmen sind einzuhaltenund alle Komponenten als potenziellinfektiös zu behandeln. Alle ausmenschlichem Blut gewonnenenMaterialien wurden auf Syphilis,Antikörper gegen HIV-1 und HIV-2,Hepatitis-B-Oberflächenantigen undHepatitis-C-Antikörper untersucht undnegativ befundet.

Einige Reagenzien enthalten alsKonservierungsmittel Natriumazid(<0,1 g/dl). Um die Bildung von explosivenMetallaziden in Blei- und Kupferrohren zuverhindern, sollten die Reagenzien nurzusammen mit großen Wassermengen indie Kanalisation gespült werden.

Chemilumineszenz–Substratmodul:Kontamination und direkteSonneneinstrahlung vermeiden. SiehePackungsbeilage.

Wasser: Destilliertes bzw. deionisiertesWasser benutzen.

Im Lieferumfang enthaltenDie Bestandteile der Testpackung sindaufeinander abgestimmt. Die Barcode-Aufkleber auf der Innenverpackungwerden zur Testdurchführung gebraucht.

GH- Kugel-Container (L2GH12)Der barcodierte Kugel-Container enthält200 Kugeln, beschichtet mit monoklonalenanti-hGH-Antikörpern (Maus). Bei 2–8°Cbis zum Verfallsdatum haltbar.L2KGH2: 1 Container

GH- Reagenzbehälter (L2GHA2)Der barcodierte Reagenzbehälter enthält11, 5 ml alkalische Phosphatase (Kalb)konjugiert mit polyklonalen anti-hGH-Antikörpern (Kaninchen) in Puffermatrix.Bei 2–8°C bis zum Verfallsdatum haltbar.L2KGH2: 1 BehälterVor Gebrauch den Aufkleber an derPerforation abreißen, ohne dabei dieBarcodierung zu beschädigen. Die Folievon der Oberseite des Containersentfernen. Den Schiebedeckel nach untenin die Führung des Reagenziendeckelseinrasten lassen.


GH- Kalibratoren (LGHL, LGHH)Zwei Fläschchen (niedrig und hoch) vonlyophilisiertem hGH in nichthumanemSerum (mit Konservierungsmittel).Rekonstitution jeder Flasche durchZugabe von 3,0 ml destilliertem Wasser.Zum Mischen leicht schwenken oderumdrehen. Stabil bei 2–8°C für 30 Tagenach Rekonstitution, oder für 6 Monate(portioniert) bei –20°C.L2KGH2: 1 Set.

Vor der Kalibrierung die entsprechendenAufkleber (dem Kit beiliegend) auf dieRöhrchen kleben, so daß die Barcodesvom Barcodereader des Systems gelesenwerden können.

Separat erhältliche Testsystem-Komponenten

Multidiluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4)Zur on-board Verdünnung vonPatientproben. Eine Flasche mit einemgebrauchsfertigen Konzentrat aus einernichthumanen Protein/ Puffer-Matrixversetzt mit Konservierungs-stoffen.Lagerung: 30 Tage (nach Öffnen) bei 2–8°C oder 6 Monate bei –20°C (aliquotiert).L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 mlZum Einsatz des Verdünnungsreagenz(Diluents) werden Barcode Etikettenmitgeliefert. Vor Verwendung einentsprechendes Etikett so auf ein16×100 mm Teströhrchen kleben, dass esvom eingebauten Barcode Readergelesen werden kann.L2M2Z: 3 Etiketten. L2M2Z4: 5 Etiketten.L2SUBM: Chemilumineszenz-SubstratmodulL2PWSM: WaschmodulL2KPM: ReinigungsmodulLRXT: (Wegwerf-) ReaktionsgefäßeL2ZT: 250 Teströhrchen (16 × 100 mm)für die ProbenverdünnungL2ZC: 250 Röhrchenverschlüsse für dieProbenverdünnungCON6: 3 Konzentrationen, Multikontrolle

Ebenfalls benötigt:Destilliertes bzw. deionisiertes Wasser;Teströhrchen, Kontrollen.

TestdurchführungFür eine optimale Funktion des Gerätes istunbedingt zu beachten, dass dieWartungen, wie im IMMULITE

2000-Handbuch beschrieben, regelmäßigdurchgeführt werden.

Hinweise zur Vorbereitung, täglichenInbetriebnahme des Systems, derKalibrierung sowie Verfahren zur Test-und Qualitätskontrolle entnehmen Sie bittedem IMMULITE 2000-Handbuch.Empfohlenes Kalibrationsintervall:2 Wochen.Qualitätskontrollseren: Kontrollen oderSeren mit hGH in zumindest zweiKonzentrationen (niedrige und hohe)verwenden.

ReferenzwerteEine Studie, durchgeführt in einem großenReferenzlabor im Westen der USA, mit 59gesunden Männern und 60 gesundenFrauen ergab folgende Referenzbereiche:

Männer: bis 1 ng/mlFrauen: bis 10 ng/ml

Die Sekretion des Wachstumshormonsdurch die Hypophyse erfolgt beiGesunden episodisch und pulsatil mit GH-Spitzen bis 40 ng/ml. Da die GH-Serumspiegel zwischen den PulsenGesunder sehr niedrig sind, müssenImmunoassays mit ausreichenderSensitivität zwischen pathologischniedrigen GH-Spiegeln von Patienten undGH-Spiegeln von Gesunden, die in denniedrig-normalen Bereich abgefallen sind,differenzieren können. Daher ermöglichenbasale hGH-Spiegel nur eineeingeschränkte diagnostische Information.Bei einzelnen diagnostischenFragestellungen kann die spontane GH-Sekretion besser durch Verwndung eineskontinuierlich arbeitendenBlutabnahmesystems oder durchBlutentnahmen alle 20–30 Minuten übereine 12–24h-Periode überprüft werden.Eine Reihe von Provokationstesten(Stimulations- bzw. Suppressionsteste)werden ebenfalls eingesetzt, umStörungen in der GH-Sekretion zuüberprüfen. Die Definition einerabnormalen Testantwort differiert starkzwischen den einzelnen Laboratorien. 1

Betrachten Sie diese Grenzwerte nur alsRichtlinien. Jedes Labor sollte eigeneReferenzbereiche ermitteln.


Grenzen der MethodePatienten unter hGH-Therapie könnenhumane Antikörper gegen hGH bilden, diemit dem Assay interferieren und zu falscherniedrigten Werten führen können.Heterophile Antikörper in Humanserenkönnen mit Immunglobulinen aus denAssaykomponenten reagieren undInterferenzerscheinungen innerhalb des invitro Immunoassays verursachen. (Clin.Chem. 1988:34:27-33) Proben vonPatienten, die häufig mit Tier- bzw.Tierserumprodukten zu tun haben, könnendie erwähnten Interferenzen verursachenund zu anomalen Resultaten führen. Dieverwendeten Reagenzien sind sokonzipiert, dass das Risiko einerInterferenz mit den zu messenden Probenminimiert ist. Dennoch können potentiellInteraktionen zwischen seltenen Serenund den Testkomponenten auftreten. Zudiagnostischen Zwecken sollten die mitdem Assay erhaltenen Ergebnisse immerin Kombination mit der klinischenUntersuchung, der Patientenanamneseund anderen Befunden gesehen werden.

LeistungsdatenSiehe Tabellen und Grafiken mitrepräsentativen Daten für den Assay. DieErgebnisse sind in ng/ml angegeben.(Sofern nicht anders angegeben, wurdenhierfür Serumproben in Röhrchen ohneGeltrennung und Gerinnungshilfeneingesetzt.)

Ab Kit-Charge 206 bezieht sich die im Kit-Barcode integrierte alternative Einheit 1auf den internationalen WHO StandardNIBSC 2. 98/574. Für Kit-Charge 205 undniedriger bezieht sich die im Kit-Barcodeintegrierte alternative Einheit 1 auf deninternationalen WHO-Standard NIBSC 1.80/505. Dieser Wechsel erfordert dasLöschen der Kit-Informationen frühererKit-Chargen aus der IMMULITE 2000Kit-Datenbank.Bitte beachten Sie, dass nacheinmaligem Scannen der Kit-Charge206 oder höher alle Ergebnisangabenin der alternativen Einheit 1,unabhängig von der Kit-Charge, inBezug auf den internationalen WHO-Standard NIBSC 2. 98/574 für r-DNAWachstumshorm ausgegeben werden.

Umrechnungsfaktor:ng/ml × 2,4 → mIU/lWHO NIBSC 2. IS 98/574(Für Kit-Chargen 206 und höher)

ng/ml × 2,6 → mIU/lWHO NIBSC 1. IS 80/505(Für Kit-Chargen 205 und niedriger)

Messbereich: bis 40 ng/ml(96 mIU/l) WHO NIBSC 2. IS 98/574(104 mIU/l) WHO NIBSC 1. IS 80/505

Analytische Sensitivität: 0,01 ng/mlHigh-Dose-Hook-Effekt: KeinEffekt bis zu 17 000 ng/ml

Präzision: Die Proben wurden innerhalbvon 20 Tagen mit jeweils zweiTestansätzen in Doppelbestimmunggemessen (insgesamt 40 Bestimmungenund 80 Einzelmessungen). (Siehe Tabelle”Precision”.)Linearität: Proben wurden inverschiedenen Verdünnungen getestet.(Repräsentative Daten entnehmen Siebitte der Tabelle „Linearität“.)Wiederfindung: Proben wurden mit dreihGH Lösungen (120, 240 und 480 ng/ml)im Verhältnis von 1:19 versetzt. (SieheTabelle ”Recovery” für repräsentativeDaten.)Spezifität: Der Assay ist hochspezifischfür hGH. (Siehe Tabelle ”Specificity”.)Bilirubin: Konjugiertes undunkonjugiertes Bilirubin hat inKonzentrationen bis zu 200 mg/l keinenEinfluss auf die Messung, der größer alsdie Impräzision des Assays selbst ist.Hämolyse: Hämoglobin hat inKonzentrationen bis zu 512 mg/dl keinenEinfluss auf die Ergebnisse, der größer alsdie Impräzision des Assays selbst ist.Lipämie: Triglyceride haben inKonzentrationen bis zu 3 000 mg/dlkeinen Einfluss auf die Ergebnisse, dergrößer als die Impräzision des Assaysselbst ist.Alternativer Probentyp: Um dieAuswirkungen von verschiedenenProbenarten zu untersuchen, wurde Blutvon 20 Freiwilligen in Röhrchen ohneAdditiva, in Heparin-, EDTA- und BectonDickinson SST® Vacutainer-Rörchengesammelt. Gleiche Volumina derjeweiligen Proben wurden mitverschiedenen Konzentrationen an hGH


(humanes wachstumshormon) versetzt,um Werte im gesamtenKalibrationsbereich zu erhalten, und dieProben anschließend mit dem IMMULITE2000 Assay für Wachstumshormongemessen.(Heparin) = 0,99 (Serum) + 0,07 ng/mlr = 0.997

(EDTA) = 1,0 (Serum) – 0,01 ng/mlr = 0.997

(SST) = 0,98 (einfachen Röhrchen) + 0,02 ng/mlr = 0.999

Means:4,15 ng/ml (Heparin)4,12 ng/ml (EDTA)4,14 ng/ml (Serum)4,09 ng/ml (SST)

Methodenvergleich: Der Assay wurdeauf der Basis von 206 Patientenprobenmit dem IMMULITE hGH (humanesWachstumshormon) Assay der DPCverglichen. (Konzentrationsbereich: ca.0,01 bis 40 ng/ml). Siehe Grafik.) Durchlineare Regression:(IML 2000) = 0,98 (IML) + 0,41 ng/mlr = 0,991

Mittelwert:8,6 ng/ml (IMMULITE 2000)8,4 ng/ml (IMMULITE)

AnwendungsberatungBei Rückfragen wenden Sie sich bitte anIhre DPC Niederlassung.Hergestellt von Euro/DPC Ltd. unter demQualitätssystem ISO 13485:2003.

Español

Hormona de CrecimientoUtilidad del análisis: Para el diagnósticoin vitro usado con el AnalizadorIMMULITE 2000, para la medicióncuantativa de hormona de crecimiento(hGH) en suero, como ayuda en elseguimiento del paciente.

Números de Catálogo:L2KGH2 (200 tests)Código del Test: GH Color: Gris claro

Resumen y Explicacióndel TestLa hormona del crecimiento humana(hGH, somatotropina) es un polipéptidoque se origina en la pituitaria anterior.Tiene 191 aminoácidos de longitud y unpeso molecular de aproximadamente22.000 daltons. Sus efectos metabólicosson principalmente anabólicos. Activa laconservación de las proteínas y participaen una amplia variedad de mecanismosde síntesis de proteínas. También mejorael transporte de glucosa y facilita laacumulación de almacenes de glucógeno.Otra familia de hormonas peptídicas, lassomatomedinas, median en su cascadade acciones de activación delcrecimiento.1

La medida de hGH es de primordialinterés en el diagnóstico y tratamiento dediversas formas de secreción inadecuadade la hormona del crecimiento. Entre lostrastornos clínicos de hiposecreción seincluyen el enanismo y el potencial decrecimiento no alcanzado. Lahipersecreción se asocia con gigantismo yacromegalia.La interpretación clínica de los niveles dehormona del crecimiento debe hacersecon precaución. Estos niveles varían a lolargo del día, lo que hace difícil definir unintervalo de referencia o juzgar el estadode un individuo sobre la base de una soladeterminación. Se sabe que hay muchosfactores que influyen en la tasa desecreción de hormona del crecimiento,entre las que se incluyen los periodos desueño y vigilia, el ejercicio, el estrés, lahipoglucemia, estrógenos,corticosteroides, L-dopa y otros.1 Debido asu similitud con la prolactina y ellactógeno de la placenta, anterioresinmunoensayos de la hormona delcrecimiento arrojaban a menudo valoreserróneamente altos en mujeres gestantesy en periodo de lactancia.Puesto que no todos los individuosacromegálicos tienen niveles de baseelevados, los análisis de supresiónbasados en la sobrecarga de glucosaresultan valiosos en este contexto. Apesar de la hiperglucemia inducida, en laacromegalia raramente se produce undescenso de los niveles de base.2

Los individuos con déficit de hormona delcrecimiento tienen niveles, en ayunas y


descanso, similares a los de los individuossanos. Se han ideado varios análisis decarga para diferenciar estos grupos. Así,al iniciarse el sueño profundo o biendespués de 15 a 20 minutos de ejerciciovigoroso, los niveles de hormona delcrecimiento suelen mostrar un aumento.Otros análisis de sensibilidad a hormonadel crecimiento se basan en laadministración de L-dopa, arginina einsulina. Para acentuar la respuesta seadministra a veces propanolol o estrógenojunto con el estímulo primario.4,5

Se han documentado algunos casos deenanismo en los que tanto el nivel basalcomo la respuesta a análisis de cargaeran normales. En tales casos suele darseuna insensibilidad tisular a la hormona delcrecimiento o a las somatomedinas, obien la presencia de anticuerpos o dehormona del crecimiento inmunorreactivapero biológicamente inactiva.4

Principio del análisisIMMULITE 2000 Hormona de Crecimientoes un ensayo inmunométricoquimioluminiscente de dos sitios de uniónen fase sólida.

La fase sólida (bola) se encuentrarecubierta con anticuerpo monoclonal deratón anti hGH. El reactivo contienefosfatasa alcalina (de intestino de ternera)conjugados con un anticuerpo policlonalde conejo anti-hGH. El reactivo y la hGHde la muestra son incubados junto conuna bola recubierta con anticuerpomonoclonal de ratón anti-hGH para formarun complejo de anticuerpos tipo sandwich.El conjugado con enzima no unido esentonces eliminado mediante lavado ycentrifugación. Finalmente, es añadido elsustrato quimioluminiscente a la bola y laseñal es generada de maneraproporcional a la cantidad de enzimaunida.Ciclos de incubación: 1 × 30 minutos.

Recogida de la muestraEl paciente debe estar descansado y enayunas 30 minutos antes de la toma de lamuestra.6,7

Se recomienda el uso de unaultracentrífuga para aclarar las muestraslipémicas.

Las muestras hemolizadas podrían indicaruna mala manipulación de la muestraantes de ser recibida por el laboratorio; eneste caso, los resultados debeninterpretarse con precaución.

La centrifugación de las muestras desuero antes de que se forme el coágulopuede ocasionar la presencia de fibrina.Para evitar resultados erróneos debidos ala presencia de fibrina, asegurarse que seha formado el coágulo completamenteantes de centrifugar las muestras.Algunas muestras, particularmenteaquellas de pacientes sometidos a terapiaanticoagulante, pueden requerir mayortiempo de coagulación.

Los tubos para recoger sangre dedistintos fabricantes pueden producirvalores diferentes, dependiendo delmaterial del tubo y de los aditivos,incluyendo barreras de gel o barrerasfísicas, activadores de la coagulación y/oanticoagulantes. El Hormona deCrecimiento IMMULITE 2000 no ha sidoanalizado con todos los distintos tipos detubos. Para obtener detalles sobre lostipos tubos que se han analizado,consulte la sección de Tipos de MuestrasAlternativos.Volumen Requerido: 25 µl de suero.

Conservación: Refrigerarinmediatamente. Estable a 2–8°C durante8 horas,6,7 o hasta 2 meses (alicuotados)a –20°C. Evite las congelaciones ydescongelaciones repetidas.

Advertencias y PrecaucionesPara uso diagnóstico in vitro.Reactivos: Mantener a 2–8°C. Desecharde acuerdo con las normas aplicables.Siga las precauciones universales ymanipule todos los componentes como sifueran capaces de transmitir agentesinfecciosos. Los materiales derivados desangre humana han sido analizados y sonnegativos para sífilis; para anticuerposfrente al HIV 1 y 2; para el antígeno desuperficie de hepatitis B y para losanticuerpos de hepatitis C.

Se ha usado Azida sódica, enconcentraciones menores de 0,1 g/dl,como conservante. Para su eliminación,lavar con grandes cantidades de aguapara evitar la formación de residuos deazidas metálicas, potencialmente


explosivas, en las cañerías de cobre yplomo.

Substrato quimioluminiscente: Evitar lacontaminación y exposición a la luzdirecta del sol. (Ver el protocolo).Agua: Usar agua destilada o desionizada.

Materiales SuministradosLos componentes presentan un juegocompleto. Las etiquetas incluidas en lacaja son necesarias para el ensayo.

Cartucho de bolas de GH (L2GH12)Con códigos de barras. 200 bolas,recubiertas de anticuerpos monoclonalesmurinos anti-hGH. Estable a 2–8°C hastala fecha de caducidad.L2KGH2: 1 cartucho.

Vial de reactivo de hGH (L2GHA2)Con códigos de barras. 11,5 ml defosfatasa alcalina (de intestino de ternera)conjugada con anticuerpo policlonal deconejo anti-hGH, en solución tampón.Estable a 2–8°C hasta la fecha decaducidad.L2KGH2: 1 vial.

Antes de usar, cortar la parte superior dela etiqueta en la perforación, sin dañar elcódigo de barras. Quitar el precinto delorificio del vial; encajar la cubiertadeslizante en las rampas de la tapa delreactivo.

Ajustadores de hGH (LGHL, LGHH)Dos viales (bajo y alto) de hormona decrecimiento hGH liofilizada en suero nohumano, con conservante. Reconstituyacada vial con 3,0 ml de agua destilada odesionizada. Mezcle por agitación oinversión suave hasta que se hayadisuelto completamente el materialliofilizado. Estable a 2–8°C durante30 días después de la reconstitución, ohasta 6 meses (alicuotados) a –20°C.L2KGH2: 1 juego.

Antes de hacer un ajuste, colocar lasetiquetas a las alícuotas apropiadas(suministradas con el kit) sobre tubos deensayo, de forma tal que los códigos debarras puedan ser leídos por el lector.

Materiales Necesarios y NoSuministrados

Multidiluyente 2 (L2M2Z L2M2Z4)Para la dilución en el equipo de lasmuestras de pacientes. Un vial de unconcentrado listo para su uso de una matrizproteica no humana con conservantes.Conservación: 30 días (después de suapetura) a 2–8°C o 6 meses (alicuotado) a–20°C.L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml

Se suministran etiquetas con códigos debarras para usarse con este diluyente.Antes de uso, colocar la etiqueta con elcódigo de barras en un tubo de ensayo de16 × 100 mm, así los códigos de barraspueden ser identificados por el lector delinstrumento.L2M2Z: 3 etiquetas L2M2Z4: 5 etiquetas

L2SUBM: Substrato quimioluminiscenteL2PWSM: Lavado de sondaL2KPM: Kit de limpieza de sondaLRXT: Tubos de reacción (desechables)L2ZT: 250 Tubos De Prueba DelDiluyente De la Muestra (16 × 100 mm)L2ZC: 250 Casquillos Del Tubo DelDiluyente De la MuestraCON6: control multiconstituyente de tresnivelesTambién necesariosAgua destilada o desionizada; tubos deensayo; controles.

EnsayoAviso: para obtener el funcionamientoóptimo, es importante realizar todos losprocedimientos del mantenimiento generalsegún lo definido en el manual deloperador de IMMULITE 2000.Consulte el Manual del operador deIMMULITE 2000 para: la preparación,instalación, ajuste, ensayo yprocedimientos de control de calidad.Intervalo de ajuste recomendado:2 semanas.Muestras de Control de Calidad: Utilizarcontroles o pooles de sueros con almenos dos niveles diferentes de hormonade crecimiento (bajo y alto).

Valores EsperadosUn estudio realizado en un laboratoriogrande de referencia en el occidente de


los Estados Unidos en 59 hombresadultos sanos y 60 mujeres adultas sanasrindio los siguientes intervalos dereferencia:

Hombres: hasta 1 ng/mlMujeres: hasta 10 ng/ml

La secreción de hormona del crecimientopor parte de la glándula pituitaria esepisódica y pulsátil, y se han observadoniveles transitorios de hasta 40 ng/ml ensujetos sanos. Dado que en los individuossanos los niveles en suero son bastantebajos entre pulsos, son necesariosinmunoensayos con sensibilidadsuficiente para distinguir entre pacientescon niveles anormalmente bajos ypaciente cuyos niveles caen en elintervalo de bajo a normal. Por lo tanto,los niveles basales o aleatorios de hGHofrecen poca información de diagnóstico.En algunos individuos, la secreciónespontánea de hormona del crecimientose controla mejor por medio de unabomba de extracción continua, o bienextrayendo muestras para el ensayo hGHcada 20 a 30 minutos, durante un periodode 12 a 24 horas. También se utilizan unaserie de análisis de activación, diseñadospara estimular o suprimir la producción, enla valoración de la secreción de hormonade crecimiento; la definición de lasrespuestas anormales varía con ellaboratorio.1

Estos límites han de considerarse sólocomo una guía. Cada Laboratorio deberáestablecer sus propios rangos dereferencia.

LimitacionesLos pacientes que se encuentran bajotratamiento con hGH pueden desarrollaranticuerpos anti-hGH que interferirán en elensayo y causarán valores falsamentebajos.Los anticuerpos heterofílicos en el suerohumano pueden reaccionar con lasinmunoglobulinas de los componentes delensayo provocando interferencias con losinmunoanálisis in vitro. [Ver Boscato LM,Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Las muestras de lospacientes que frecuentemente estánexpuestos a animales o a productosséricos animales pueden presentar estetipo de interferencia que potencialmente

ocasione un resultado anómalo. Estosreactivos han sido formulados paraminimizar el riesgo de interferencia, noobstante, pueden darse interaccionesanómalas entre sueros conflictivos y loscomponentes del ensayo. Con fines dediagnóstico, los resultados obtenidos coneste ensayo siempre deben ser usados encombinación con el examen clínico, lahistoria médica del paciente y cualquierotro dato clínico relevante.

Características AnalíticasPara ver resultados representativos de lascualidades del ensayo ver las tablas y losgráficos. Los resultados se expresan enng/ml. (A no ser que se indique locontrario, todos los resultados fuerongenerados en muestras de suerorecogidas en tubos sin geles oactivadores de la coagulación).

A partir del lote de kit 206, las UnidadesAlternativas 1 codificadas en el código debarras del kit aparecen en términos del 2ºIS (Estándar Internacional) de la OMSNIBSC 98/574. Dichas UnidadesAlternativas codificadas en el código debarras del kit de los lotes anterioresaparecían en términos del 1er IS de laOMS NIBSC 80/505. Este cambiorequiere información de lotes de kitprevios para ser borrado de la base dedatos del kit de Immulite 2000.Por favor, observe que una vez que loslotes de kit 206 o superiores seanescaneados, TODOS los resultadosimpresos que usen las UnidadesAlternativas 1, con independencia dellote de kit usado en la generación detales resultados, se expresarán entérminos del 2º IS de la OMS NIBSC98/574 para Hormona del Crecimiento r-DNA.Factor de conversión:ng/ml × 2.4 → mIU/l2º IS de la OMS NIBSC 98/574(Para lotes de kit 206 y superiores)

ng/ml × 2.6 → mIU/l1er IS de la OMS NIBSC 80/505(Para lotes de kit 205 e inferiores)

Rango de Calibración: Hasta 40 ng/ml(96 mIU/l) 2º IS de la OMS NIBSC 98/574(104 mIU/l) 1er IS de la OMS NIBSC 80/505

Sensibilidad: 0,01 ng/ml.


Efecto gancho a altas dosis:Ninguno hasta 17 000 ng/ml.

Precisión: Las muestras fueronanalizadas por duplicado durante 20 días,en dos tandas de trabajo por día, para untotal de 40 tandas y 80 replicados. (Ver latabla de “Precision”.)Linealidad: Las muestras fueronanalizadas en varias diluciones. (Ver latabla de “Linearity” para resultadosrepresentativos.)Recuperación: Se analizaron muestrassobrecargadas 1 en 19 con tressoluciones de hGH (120, 240 y480 ng/ml). (Ver la tabla de “Recovery”para resultados representativos.)Especificidad: El ensayo es altamenteespecífico para hormona de crecimiento(Ver la tabla de “Specificity”).

Bilirrubina: La presencia de bilirrubinaconjugada y libre en concentracioneshasta 200 mg/l no tiene efecto en elensayo, en lo concerniente a la precisióndel ensayo.Hemolisis: La presencia de hemoglobina,en concentraciones hasta 512 mg/dl, notiene ningún efecto sobre los resultadosen términos de precisión.Lipemia: La presencia de triglicéridos, enconcentraciones hasta 3.000 mg/dl, notiene ningún efecto sobre los resultadosen términos de precisión.Tipo de Muestra Alternativa: paraevaluar el efecto de los diferentes tipos demuestras alternativos, se recogió sangrede 20 voluntarios en tubos normales,tubos con Heparina, tubos con EDTA ytubos vacutainer SST® de BectonDickinson. Volúmenes iguales de lasdiferentes muestras fueron sobrecargadascon diferentes concentraciones de hGH,con la finalidad de cubrir todo el rango decalibración del ensayo, y procesadas conel procedimiento Hormona de CrecimientoIMMULITE 2000.(Heparina) = 0,99 (Suero) + 0,07 ng/mlr = 0.997

(EDTA) = 1,0 (Suero) – 0,01 ng/mlr = 0.997

(SST) = 0,98 (tubos simples) + 0,02 ng/mlr = 0,999

Medias:4,15 ng/ml (Heparina)4,12 ng/ml (EDTA)

4,14 ng/ml (Suero)4,09 ng/ml (SST)

Comparación del Método: El ensayo fuecomparado con el IMMULITE Hormona deCrecimiento de DPC en 206 muestras depacientes. (Rango de Concentración:aproximadamente 0,01 a 40 ng/ml. Ver elgráfico.) Por regresión linear:(IML 2000) = 0,98 (IML) + 0,41 ng/mlr = 0,991

Medias:8,6 ng/ml (IMMULITE 2000)8,4 ng/ml (IMMULITE)

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IMMULITE 2000 hGHDomaine d'utilisation : Dosagequantitatif de l'hormone de croissancehumaine (hGH) dans le sérum. Réservé àun usage diagnostique in vitro avecl'analyseur IMMULITE 2000, ce testconstitue une aide au suivi du patient.Référence catalogue :L2KGH2 (200 tests)Code produit : GH.Code couleur : gris clair.

IntroductionL'hormone de croissance humaine (hGH)est un polypeptide produit parl'antéhypophyse. Elle compte 191 acidesaminés pour une masse moléculaire de22 000 daltons environ. Ses effetsmétaboliques sont essentiellementanabolisants. Elle favorise la conservationdes protéines et stimule un vasteensemble de mécanismes de labiosynthèse des protéines. Elle stimuleégalement le transport du glucose etfacilite l'accumulation de réserves deglycogène. Une autre famille d'hormonespeptidiques, les somatomédines, médie lacascade des actions stimulant lacroissance.1

Le dosage de l'hGH présente surtout unintérêt pour le diagnostic et le traitement


de différentes formes de sécrétionpathologiques de l'hormone decroissance. Les manifestations cliniquesd'hyposécrétion comprennent le nanismeet un développement incomplet.L'hypersécrétion est associée augigantisme et à l'acromégalie.L'interprétation clinique des tauxd'hormone de croissance est délicate. Eneffet, ils présentent une variation diurnequi rend difficile la définition d'un intervallede référence ou l'appréciation du statutd'un individu à partir de dosages uniques.De nombreux facteurs sont connus pourinfluencer le rythme de sécrétion del'hormone de croissance, parmi lesquelsles périodes de sommeil et d'éveil,l'activité physique, le stress,l'hypoglycémie, les œstrogènes, lescorticostéroïdes, la L-dopa et d'autresencore.1 En raison de sa similitude avec laprolactine et l'hormone lactogèneplacentaire, les premiers immunodosagesde l'hGH étaient souvent entachés devaleurs faussement élevées pour lesfemmes enceintes ou les femmes quiallaitaient.Etant donné que les individusacromégales n'ont pas tous des taux debase élevés, une épreuve de freinagebasée sur une charge de glucose est utiledans ce contexte. En dépit de cettehyperglycémie provoquée, on noterarement une diminution des taux de baseinitiaux dans l'acromégalie.2

Les individus qui présentent uneinsuffisance en hormone de croissanceont des taux à jeun/ au repos similaires àceux des individus en bonne santé. Desépreuves de confrontation variées ont étémises au point pour différencier cesgroupes. Ainsi, avec la venue du sommeilprofond ou après 15 à 20 minutesd'exercice physique vigoureux, les tauxd'hormone de croissance enregistrentnormalement une élévation. D'autres testsde la réactivité à l'hormone de croissancesont basés sur l'administration de L-dopa,d'arginine ou d'insuline. Le propanolol oul'œstrogène sont parfois administrés enassociation avec le stimulus principal pouraccentuer la réponse.4,5

On a recensé un petit nombre de cas denanisme pour lesquels les niveaux debase, comme la réponse aux épreuves destimulation étaient normaux. De tels cas

peuvent venir soit d'une insensibilitétissulaire à l'hormone de croissance ouaux somatomédines, soit de la présenced'anticorps ou d'hormone de croissanceimmunoréactive mais biologiquementinactive.4

Principe du testIMMULITE 2000 Hormone de Croissanceest un dosage chimiluminescentimmunométrique, en deux étapes, enphase solide.La phase solide (bille) est revêtued’anticorps monoclonal murin anti-hGH.Le réactif contient un anticorps polyclonalde lapin anti-hGH conjugué à laphosphatase alcaline (intestins de veau).Le réactif et l’hGH contenue dansl’échantillon du patient sont incubésensemble avec une bille revêtued’anticorps monoclonaux murins anti-hGHpour former un complexe anticorps-sandwich. Le conjugué enzymatique nonlié est ensuite éliminé par un lavage aveccentrifugation axiale. Enfin, le substratchimiluminescent est ajouté à la bille et lesignal généré est proportionnel à l’enzymeliée.Cycles d'incubation : 1 × 30 minutes.

Recueil des échantillonsLe patient doit être à jeun et au reposcomplet pendant 30 minutes avant leprélèvement sanguin.6,7

Il est recommandé de clarifier leséchantillons hyperlipémiques parultracentrifugation.Des échantillons hémolysés peuvent êtrerévélateurs d'une préparation inadéquatedu prélèvement avant son envoi aulaboratoire ; il faudra donc interpréter lesrésultats avec prudence.La centrifugation des échantillonssériques avant la formation complète ducaillot peut entraîner la présence defibrine. Pour éviter les résultats erronésdûs à la présence de fibrine, s'assurer dela formation complète du caillot avant decentrifuger les échantillons. Certainséchantillons, en particulier ceux provenantde patients sous anti-coagulants, peuventnécessiter un temps plus long pour laformation du caillot.


Des tubes pour prélèvements sanguinsprovenant de fabricants différents peuventdonner des résultats différents, selon lesmatériaux et additifs utilisés, y comprisgels ou barrières physiques, activateursde la coagulation et/ou anticoagulants. Lecoffret IMMULITE 2000 Hormone deCroissance n'a pas été testé sur tous lestypes de tubes possibles. Veuillezconsulter le chapitre intitulé Autres Typesd'Échantillons pour plus derenseignements sur les tubes qui ont étéévalués.Volume nécessaire : 25 µl de sérum.Conditions de conservation : Réfrigérerle plus rapidement possible. Stable à +2/+8°C pendant 8 heures,6,7 ou 2 mois(aliquoté) à –20°C. Éviter de multiplier lescycles de congélation/ décongélation.

Précautions d'emploiRéservé à un usage diagnostique in vitro.Réactifs : conserver les réactifs à +2/+8 °C. Eliminer les déchets conformémentà la réglementation en vigueur.Respecter les précautions d'emploi etmanipuler tous les composants du coffretcomme des produits potentiellementinfectieux. Les réactifs dérivés de produitshumains et utilisés dans ce coffret ont subiun test sérologique pour la Syphilis et destests de dépistage pour les anticorps anti-VIH1 et 2, anti-VHC et pour l'antigène desurface de l'hépatite B, qui se sont tousavérés négatifs.De l'azide de sodium à des concentrationsinférieures à 0,1 g/dl a été ajouté commeconservateur ; lors de l'élimination,l'évacuer avec de grandes quantités d'eaupour éviter une accumulation d'azidesmétalliques explosifs dans lescanalisations.

Substrat chimiluminescent : éviter toutecontamination et l'exposition directe à lalumière solaire (voir la fiche technique).Eau : utiliser de l'eau distillée oudésionisée.

Matériel fourniLes composants de la trousse ne peuventêtre utilisés que conjointement. Lesétiquettes à l'intérieur du coffret sontnécessaires au dosage.

Cartouche de billes GH (L2GH12)Avec code-barres. 200 billes revêtuesd'anticorps monoclonal murin anti-hGH.Stable à +2C/+8°C jusqu'à la date depéremption.L2KGH2 : 1 cartouche.

Cartouche à réactif GH (L2GHA2)Avec code-barres. 11,5 ml d'un réactifcomposé d'anticorps polyclonal de lapinanti-hGH conjugué à la phosphatasealcaline (intestins de veau) dans untampon. Stable à +2°C/+8°C jusqu'à ladate de péremption.L2KGH2 : 1 cartouche.Avant l'emploi, retirer la partie supérieurede l'étiquette au niveau des perforationsen ayant soin de ne pas endommager lecode-barres. Retirer le film protecteursitué sur la partie supérieure de lacartouche-réactif ; insérer le couverclecoulissant entre les glissières sur ledessus de la cartouche-réactif.

Ajusteurs GH (LGHL, LGHH)2 flacons d'ajusteurs (« bas » et « haut »)contenant de l'hGH lyophilisée dans dusérum non-humain, avec conservateur.Reconstituer chaque flacon avec 3,0 mld'eau distillée ou désionisée. Mélanger enimprimant un léger mouvement circulaireou en retournant délicatement jusqu'àcomplète dissolution de la substancelyophilisée. Stable à +2°/ +8 °C pendant30 jours après reconstitution, ou 6 mois(aliquoté) à –20 °C.L2KGH2 : 1 jeu.Avant de procéder à un ajustement, placerles étiquettes correspondant à l'aliquot(fournies avec le coffret) sur des tubes enverre de sorte que les code-barres soientlisibles par le lecteur.

Composants du coffret fournisséparément

Multi-diluant 2 (L2M2Z, L2M2Z4)Pour la dilution à bord des échantillons deconcentration élevée. Un flacon contenantune matrice concentrée de tampon /protéines non-humaines avecconservateur (prêt à l'emploi). Stockage:30 jours après ouverture à +2°C/+8°C ou 6mois (aliquoté) à –20°C.L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml


Les étiquettes code-barres sont fourniesavec le Diluant. Avant utilisation, placerl'étiquette appropriée sur un tube de16 × 100 mm de façon que le code-barrepuisse être lu par le lecteur de l'appareil.L2M2Z : 3 étiquettesL2M2Z4 : 5 étiquettesL2SUBM : Substrat chimiluminescentL2PWSM : Solution de lavageL2KPM : Coffret de décontamination del'aiguille de prélèvementLRXT : Godets réactionnels (jetables)L2ZT : 250 Tubes À essai De Diluantéchantillon (16 × 100 mm)L2ZC : 250 Bouchons pour tubes dediluants

CON6 : Contrôle multiparamétrique à troisniveauxEgalement requisEau distillée ou désionisée ; tubes ;contrôles

Protocole de dosageNoter que pour des performancesoptimales, il est important de réalisertoutes les procédures de maintenance deroutine selon les instructions du Manueld'Utilisation IMMULITE 2000.Se reporter au manuel d'utilisation del'IMMULITE 2000 pour : la préparation, ledémarrage du système, les ajustements,le dosage et les procédures de contrôlede qualité.Intervalle d'ajustement recommandé :2 semaines.

Echantillons pour le contrôle de qualité :Utiliser des contrôles ou des pools desérums avec au moins deux niveaux deconcentration (faible ou élevé) d'hGH.

Valeurs de référenceUne étude réalisée dans un grandlaboratoire de référence de l'ouest desEtats Unis sur 59 hommes et 60 femmesadultes en bonne santé apparente adonné les intervalles de référence ci-après:

Hommes: jusqu'à 1 ng/mlFemmes: jusqu'à 10 ng/ml

La sécrétion d'hormone de croissance parl'hypophyse est pulsatile et des tauxtransitoires allant jusqu'à 40 ng/ml ont étéobservés chez des individus sains.Comme les taux sont bas entre les pics

sécrétoires chez les individus sains, lesdosages in vitro doivent avoir unesensibilité suffisante pour permettre dedistinguer les patients avec des tauxanormalement bas des sujets en bonnesanté dont les valeurs peuvent chuterdans la zone subnormale. C'est pourquoiun taux de base d'hGH ou un dosageréalisé aléatoirement ne fournit que peud'information diagnostique. Chez certainspatients, la sécrétion spontanéed'hormone de croissance est mieux suivieà l'aide d'un système de prélèvement encontinu ou en prélevant des échantillonspour le dosage de l'hGH toutes les 20 à30 minutes, sur une période de 12 à 24 h.Certaines épreuves de provocationdestinées à stimuler ou à supprimer lalibération d'hormone sont égalementemployées pour évaluer la sécrétiond'hormone de croissance ; la définition dece qui constitue une réponse anormalevariant selon les laboratoires.1

Utiliser ces valeurs à titre indicatifuniquement. Chaque laboratoire devraitétablir ses propres valeurs de référence.

LimitesLes patients sous traitement par hormonede croissance peuvent développer desanticorps qui interféreront dans le dosageentraînant des résultats faussementabaissés.Les anticorps hétérophiles du sérumhumain peuvent réagir avec lesimmunoglobulines faisant partie descomposants du coffret et interférer avecles immunodosages in vitro. [Voir BoscatoLM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Les échantillonsprovenant de patients fréquemmentexposés aux animaux ou aux produitssériques d'origine animale peuventprésenter ce type d'interférence pouvantpotentiellement donner un résultatanormal. Ces réactifs ont été mis au pointafin de minimiser le risque d'interférence,cependant des interactions potentiellesentre des sérums rares et les composantsdu test peuvent se produire. Dans un butdiagnostique, les résultats obtenus avecce dosage doivent toujours être utilisés enassociation avec un examen clinique,l'histoire médicale du patient et d'autresrésultats.


Performances du testConsulter les tableaux et graphiques pourobtenir les données représentatives desperformances du test. Les résultats sontdonnés en ng/ml. (En l'absence deprécision supplémentaire, tous lesrésultats ont été obtenus sur deséchantillons sériques prélevés sur tubessans gel, ni activateur de la coagulation).

Merci de bien vouloir noter qu'à partir ducoffret lot 206, l'unité alternative 1,encodée dans le code barre du coffret, seréfère au 2ème Standard International del'OMS NIBSC IS 98/574.

Pour les lots de coffrets antérieurs, l'unitéalternative 1, encodée dans le code-barredu coffret, se réfère au 1er StandardInternational de l'OMS NIBSC IS 80/505.Cette modification nécessite d'effacerles informations relatives aux coffretsprécédents dans la base de donnéesImmulite 2000.Merci de noter qu'une fois les coffretslots 206 ou supérieurs scannés, TOUSles résultats imprimés en utilisantl'unité alternative 1, indépendammentdu numéro de lot de coffret utilisé pourobtenir ces résultats, seront expriméspar rapport au 2ème StandardInternational de l'OMS NIBSC IS 98/574pour la GH recombinanteFacteur de conversion:ng/ml × 2,4 → mUI/lWHO NIBSC 2ème IS 98/574(pour les coffrets lots 206 et supérieurs)

ng/ml × 2,6 → mUI/lWHO NIBSC 1er IS 80/505(pour les coffrets lots 205 et inférieurs)

Domaine de calibration: jusqu'à 40 ng/ml(96 mUI/l) WHO NIBSC 2ème IS 98/574(104 mUI/l) WHO NIBSC 1er IS 80/505

Sensibilité analytique : 0,01 ng/mlEffet-crochet : aucun jusqu'à17 000 ng/ml

Précision : les valeurs ont été établies àpartir de doublets dosés dans deux sériesdifférentes chaque jour pendant 20 jourssoit au total 40 séries et 80 résultats. (Voirle tableau “ Precision ”.)

Linéarité : les échantillons ont été testésavec des taux de dilution variés. (Voir letableau “ Linearity ” pour des donnéesreprésentatives.)

Récupération: les échantillons testés ontété chargés dans un rapport de 1 à 19avec trois solutions d'hGH (120, 240 et480 ng/ml). (Voir le tableau “ Recovery ”pour des données représentatives.)

Spécificité : le test est hautementspécifique de l'hGH (Voir le tableau“ Specificity ”.)Bilirubine : La présence de bilirubine,conjuguée ou non, n'a aucun effet sur ledosage ni sur sa précision si laconcentration ne dépasse pas 200 mg/l.Hémolyse : La présence d'hémoglobinene présente aucun effet sur les résultats nisur la précision du dosage si laconcentration ne dépasse pas 512 mg/dl.Lipémie : La présence de triglycérides neprésente aucun effet sur les résultats nisur la précision du dosage si laconcentration ne dépasse pas3 000 mg/dl.Autres types d'échantillons: pourestimer l'effet de l'utilisation de différentstype d'échantillons, 20 volontaires ont étéprélevés sur tubes secs, héparinés, EDTAet sur tubes vacutainer SST® BectonDickinson. Des volumes égaux de cesdifférents échantillons ont été mélangésavec plusieurs concentrations d' hGH pourobtenir des valeurs à l'intérieur dudomaine de mesure du test puis dosésavec le protocole l'IMMULITE 2000Hormone de Croissance.(Héparine) = 0,99 (Sérum) + 0,07 ng/mlr = 0,997

(EDTA) = 1,0 (Sérum) – 0,01 ng/mlr = 0,997

(SST) = 0,98 (tubes ordinaires) + 0,02 ng/mlr = 0,999

Moyennes:4,15 ng/ml (Héparine)4,12 ng/ml (EDTA)4,14 ng/ml (Sérum)4,09 ng/ml (SST)

Comparaison de méthodes : le test a étécomparé au test IMMULITE hGH de DPCsur 206 échantillons de patients (dont lesconcentrations allaient d'environ 0,01 à40 ng/ml. Voir graphique.) Par régressionlinéaire :(IML 2000) = 0,98 (IML) + 0,41 ng/mlr = 0,991

Moyennes:8,6 ng/ml (IMMULITE 2000)8,4 ng/ml (IMMULITE)


Assistance techniqueEn France distribué par DPC France 90bd National 92257 La Garenne-Colombes.Fabriqué par EURO/DPC Ltd. dans le cadre d'unSystème Qualité enregistré sousISO 13485:2003.

Italiano

IMMULITE 2000 hGHUso: A solo uso diagnostico in vitro conl'analizzatore del sistema IMMULITE 2000nella determinazione quantitativa dell'hGH nel siero, quale ausilio nella gestionedei pazienti.Codice: L2KGH2 (200 test)Codice del Test: GH Colore: Grigio Chiaro

Riassunto e Spiegazione delTestL'ormone della crescita umana (hGH,somatotropina) è un polipeptide che haorigine nell'ipofisi anteriore. E' costituito dauna catena di 191 aminoacidi ed ha unamassa molecolare di circa 22 000 dalton.Gli effetti metabolici sono principalmenteanabolici. Favorisce la conservazionedelle proteine ed utilizza un vasto range dimeccanismi per la sintesi delle proteine.Migliora anche il trasporto del glucosio efacilita l'accumulo del glicogeno. Un'altrafamiglia di ormoni peptidici, lesomatomedine, media le azioni chefavoriscono la crescita.1

La misurazione dell'hGH è interessanteprincipalmente nella diagnosi e neltrattamento delle varie forme di secrezioneanomala dell'ormone della crescita. Idisturbi clinici legati all'iposecrezioneincludono il nanismo ed il potenziale diaccrescimento non raggiunto.L'ipersecrezione viene associata algigantismo ed all'acromegalia.Si consiglia di essere prudentinell'interpretazione dei livelli dell'ormonedella crescita. I livelli variano durante ilgiorno, rendendo difficile la definizione diun range di riferimento o lo stato delpaziente sulla base di singoledeterminazioni. E' stato riscontrato chemolti fattori influenzano il tasso di

secrezione dell'ormone della crescita,inclusi periodi di sonno e veglia, eserciziofisico, stress, iperglicemia, estrogeni,corticosteroidi, L-dopa, ed altri.1 A causadella sua somiglianza con la prolattina edil lattogeno placentare, i primiimmunodosaggi sull'ormone della crescitahanno prodotto valori erroneamenteelevati in gravidanza ed in donne inallattamento.Poichè non tutti gli individui acromegalicihanno livelli di base elevati, i test disoppressione basati sul carico di glucosiosono importanti in questo contesto.Nonostante l'iperglicemia indotta, è raronell'acromegalia che si riscontri unadiminuzione dai livelli di base.2

Individui con deficienze nell'ormone dellacrescita hanno livelli a digiuno/riposo similiai livelli riscontrati in individui sani. Perquesto motivo, sono stati sviluppati varitest per differenziare questi gruppi. Conl'inizio del sonno profondo o dopo 15 – 20minuti di esercizio fisico vigoroso, i livellidell'ormone della crescita presentano unaumento. Altri test per valutare la rispostadell'ormone della crescita sono basatisulla somministrazione di L-dopa, diarginina e di insulina. Propanololo oestrogeni vengono somministrati incombinazione allo stimolo principale peraccentuare la risposta.4,5

Sono stati documentati alcuni casi dinanismo in cui sia il livello di base che larisposta al test sono stati normali. Questicasi possono includere insensibilitàall'ormone della crescita o allesomatomedine, o la presenza di anticorpio dell'ormone della crescitaimmunoreattivo ma biologicamenteinattivo.4

Principio del DosaggioIl Dosaggio IMMULITE 2000 Ormone dellacrescita è un dosaggio immunometrico infase solida a doppio sito, inchemiluminescenscenza.La fase solida (sferetta) è coattata conanticorpo monoclonale murino anti-hGH. Ilreagente contiene fosfatasi alcalina(intestino di vitello) coniugata conanticorpo policlonale di coniglio anti-hGH.Il reagente e l’hGH sono incubati insiemecon una sferetta coattata con un anticorpomonoclonale murino anti-hGH per formareun complesso. Il coniugato enzimatico non


legato è quindi rimosso attraverso unlavaggio a centrifuga. Infine, il substratochemiluminescente viene aggiunto allasferetta e viene prodotto un segnale inproporzione all’enzima legato.Cicli d'incubazione: 1 × 30 minuti.

Raccolta del CampioneIl paziente deve essere a digiuno ecompletamente a riposo 30 minuti primadel prelievo. 6,7

Si consiglia l'utilizzo di un'ultracentrifugaper schiarire i campioni lipemici.I campioni emolizzati possono indicare untrattamento non idoneo del campioneprima dell'arrivo al laboratorio; per questomotivo, i risultati devono essereinterpretati con prudenza.

La centrifugazione dei campioni di sieroprima che la coagulazione sia completapuò produrre fibrina. Per evitare risultatierrati dovuti alla presenza di fibrina,assicurarsi che il processo dicoagulazione sia completo prima dicentrifugare i campioni. Alcuni campioni,in modo particolare quelli di pazientisottoposti a terapia con anticoagulanti,possono richiedere tempi di coagulazionepiù lunghi.Provette per il prelievo di sangue diproduttori diversi possono dare valoridifferenti, a seconda dei materiali e degliadditivi usati, incluso gel o barriere fisiche,attivatori di coaguli e/o anticoagulanti.L'IMMULITE 2000 Ormone della Crescitanon é stato verificato con tutte le possibilivariazioni di tipi di provette. Consultare lasezione riguardante i Campioni Alternativiper dettagli sulle provette testate.Volume richiesto: 25 µL di siero.

Conservazione: in frigoriferoimmediatamente dopo il prelievo. Stabile a2–8°C per 8 ore,6,7 o per 2 mesi(aliquotato) a –20°C. Evitare cicli ripetuti dicongelamento/scongelamento.

Avvertenze e PrecauzioniAd uso diagnostico in vitro.Reagenti: Conservare a 2–8°C. Eliminarein conformità alle leggi vigenti.Seguire le precauzioni universali, emanipolare tutti i componenti come sepotessero trasmettere agenti infettivi.

Sono stati dosati materiali di origineumana e sono stati trovati non reattivi perla Sifilide; per gli Anticorpi anti-HIV 1 e 2;per l'Antigene di Superficie dell'Epatite B;e per gli Anticorpi Anti-Epatite C.

E' stata aggiunta Sodio Azide aconcentrazioni inferiori a 0,1 g/dL comeconservante. Al momentodell'eliminazione, irrorare con molta acquaper evitare la formazione di azidimetalliche potenzialmente esplosive nelletubature di piombo e di rame.Substrato Chemiluminescente: Evitarela contaminazione e l'esposizione alla lucesolare diretta. (Vedi metodica.)Acqua: Utilizzare solo acqua distillata odeionizzata.

Materiali FornitiI componenti costituiscono un unico set.Le etichette all'interno della confezionesono necessarie per eseguire i dosaggi.

Contenitore di Sferette GH (L2GH12)Con codice a barre. 200 sferette coattatecon un anticorpo monoclonale murino anti-hGH. Stabile a 2–8°C fino alla data discadenza.L2KGH2: 1 confezione

Porta Reagente GH (L2GHA2)Con codice a barre. 11,5 mL di fosfatasialcalina (intestino di vitello) coniugata conun anticorpo di coniglio policlonale anti-hGH in un tampone. Stabile a 2–8°C finoalla data di scadenza.L2KGH2: 1 Porta Reagente.

Prima dell'utilizzo rimuovere la partesuperiore dell'etichetta lungo laperforazione senza danneggiare il codicea barre. Togliere il foglio protettivo dallaparte superiore del flacone. Far scattarenella corretta posizione il coperchioscorrevole lungo le guide del coperchiodel reagente.

Calibratori GH (LGHL, LGHH)Due flaconi (Basso ed Alto), ciascuno conhGh liofilo in siero non umano, conconservanti. Ricostituire ogni flacone con3,0 mL di acqua distillata o deionizzata.Mescolare agitando delicatamente oinvertendo la miscela finchè il materialeliofilo sia completamente dissolto. Stabilea 2–8°C per 30 giorni dopo laricostituzione, o per 6 mesi (aliquotato) a


–20°C.L2KGH2: 1 set

Prima di ricalibrare collocare le etichettegiuste sulle provette delle aliquote (fornitecol kit) cosicché i codici a barre possanoessere registrati dal lettore.

Componenti del kit fornitiseparatamente

Multidiluente 2 (L2M2Z, L2M2Z4)Per la diluizione interna dei campioni deipazienti. Un flacone di tampone proteiconon umano concentrato (pronto all'uso) conconservanti. Conservazione: 30 giorni(dopo l'apertura) a 2–8°C oppure 6 mesi(in aliquote) a –20°CL2M2Z: 25 mL L2M2Z4: 55 mLVengono fornite le provette da utilizzarsicon il diluente. Prima dell'utilizzo,collocare un'etichetta appropriata su unaprovetta 16 × 100 mm cosicchè i codici abarre possano essere letti dal lettoreinternoL2M2Z: 3 etichetta L2M2Z4: 5 etichetteL2SUBM: Substrato ChemiluminescenteL2PWSM: Tampone di Lavaggio dell'AgoL2KPM: Kit di Pulizia dell'AgoLRXT: Tubi di Reazione (monouso)L2ZT: 250 Provette (16 × 100 mm) perDiluente del CampioneL2ZC: 250 Tappini per Provette perDiluente del Campione.CON6: 3 livelli, controllo multicostituito

Materiali richiestiAcqua distillata o deionizzata; provette divetro; controlli.

Procedura del DosaggioAttenzione: per prestazioni ottimali, èimportante effettuare le procedure dimanutenzione di routine cosiccomedefinite nel Manuale dell'OperatoreIMMULITE 2000.Vedi manuale dell'operatore IMMULITE2000 per: preparazione, messa a punto,calibrazione, dosaggio e procedure per ilcontrollo di qualità.Intervallo di Calibrazione Consigliato:2 settimane.

Controllo di Qualità: Utilizzare controlli opool di sieri con almeno due livelli (Alto eBasso) di hGH.

Valori AttesiUno studio effettuato presso un grossolaboratorio nell'ovest degli Stati Uniti su 59adulti maschi sani e 60 femmine adultesane ha prodotto i seguenti intervalli diriferimento:

Maschi: fino a 1 ng/mLFemmine: fino a 10 ng/mL

La secrezione dell'ormone della crescitada parte dell'ipofisi è episodica e adintermittenza e sono stati osservati livellitransittori fino a 40 ng/mL in soggetti sani.Poichè i livelli nel siero sono piuttostobassi tra un rilascio e l'altro in individuisani, sono necessari immunodosaggi consensibilità sufficiente per distinguere trapazienti con valori anormalmente bassi esoggetti sani con valori che rientrano nelrange basso – normale. Per questomotivo, livelli di base o random di hGHforniscono poche informazionidiagnostiche. In alcuni individui, lasecrezione spontanea dell'ormone dellacrescita viene controllata mediantel'utilizzo di una pompa di prelievo incontinuo, o prelevando i campioni per ildosaggio dell' hGH ogni 20 – 30 minuti inun periodo da 12 a 24 ore. Vengonoutilizzati anche alcuni dosaggi atti astimolare o a sopprimere il rilasciodell'hGH per monitorare la secrezionedell'ormone della crescita.; la definizionedelle risposte anomale varia a secondadel laboratorio.1

Detti valori dovrebbero essere consideratisolo come suggerimento. Ogni laboratoriodovrebbe stabilire i propri range diriferimento.

LimitiPazienti sottoposti a terapia con hGHpotrebbero sviluppare anticorpi anti-hGHche interferiscono con il dosaggiocausando risultati falsamente bassi.

Gli anticorpi eterofili presenti nel sieroumano possono reagire con leimmunoglobuline presenti nellecomponenti del dosaggio provocandoun'interferenza con i dosaggi in vitro. [VediBoscato LM, Stuart MC. Heterophilicantibodies: a problem for allimmunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Campioni di pazienti routinariamenteesposti agli animali o a prodotti derivati dasiero di animali possono presentare


questo tipo di interferenza causapotenziale di risultati anomali. Questireagenti sono stati formulati perminimizzare il rischio di interferenze,tuttavia, possono verificarsi interazionipotenziali tra sieri rari e componenti deltest. A scopo diagnostico, i risultati ottenuticon questo dosaggio devono sempreessere utilizzati unitamente all'esameclinico, all'anamnesi del paziente e adaltre indagini di laboratorio.

Prestazioni del DosaggioVedi tavole e grafici per datirappresentativi. I risultati sono indicati inng/mL. (Laddove non diversamentespecificato, tutti i dati sono stati generatisu campioni di siero raccolti in provettesenza gel separatore o additivi chefavoriscano la formazione di coaguli.)A partire dal lotto 206, l'Unità Alternativa 1è codificata all'interno del codice a barredel kit in termini di WHO NIBSC 2° IS98/574. l'Unità Alternativa 1 codificata nelcodice a barre di lotti di kit precedenti erain termini di WHO NIBSC1° IS 80/505.Questo cambiamento rende necessariala cancellazione dal database del kitIMMULITE 2000 delle informazioni dilotti di kit precedenti.Attenzione dopo aver passato alloscanner i lotti 206 o successivi, TUTTI irisultati stampati utilizzando l'UnitàAlternativa 1, indipendentemente dallotto usato per generare i risultati,verranno espressi in relazione al WHONIBSC 2° Standard Internazionale98/574 per r-DNA Fattore della Crescita.Fattore di Conversione:ng/mL × 2,4 → mIU/LWHO NIBSC 2° IS 98/574(Per i lotti 206 e successivi)

ng/mL × 2,6 → mIU/LWHO NIBSC 1° IS 80/505(Per i lotti 205 e precedenti)

Range di Calibrazione: fino a 40 ng/mL(96 mIU/L) WHO NIBSC 2° IS 98/574(104 mIU/L) WHO NIBSC 1° IS 80/505

Sensibilità Analitica: 0,01 ng/mLEffetto Gancio per Dosi Elevate:Nessuno fino a 17 000 ng/mL

Precisione: Sono stati dosati campioni indoppio in 20 giorni, due sedute al giorno,

per un totale di 40 sedute ed 80 replicati.(Vedi tabella “Precision”.)

Linearità: Sono stati dosati campioni invarie forme diluite. (Vedi tabella "Linearity"per dati rappresentativi.)Recupero: Sono stati dosati campioni1:19 ai quali sono state aggiunte tresoluzioni di hGH (120, 240 e 480 ng/mL.(Vedi tabella "Recovery" per datirappresentativi.)

Specificità: Il dosaggio è estremamentespecifico per l'hGH (Vedi tabella"Specificity".)Bilirubina: La presenza di bilirubinaconiugata e non coniugata inconcentrazioni fino a 200 mg/L non hanessun effetto entro il range di precisionedel dosaggio.Emolisi: La presenza di emoglobina inconcentrazioni fino a 512 mg/dL non hanessun effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.Lipemia: La presenza di trigliceridi inconcentrazioni fino a 3 000 mg/dL non hanessun effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.Tipo di Campione Alternativo: Perdeterminare l'effetto di campionialternativi, è stato prelevato del sangue da20 volontari in provette semplici,eparinizzate, EDTA e Becton Dickinsonvacutainer SST®. Ad uguali volumi dicampioni misti sono state aggiunte varieconcentrazioni di hGH per ottenere valorilungo l'intero range di calibrazione deldosaggio e quindi dosati con il kitIMMULITE 2000 Ormone della Crescita.(Eparina) = 0,99 (Siero) + 0,07 ng/mLr = 0,997

(EDTA) = 1,0 (Siero) – 0,01 ng/mLr = 0,997

(SST) = 0,98 (tubi semplici) + 0,02 ng/mLr = 0,999

Means:4,15 ng/mL (Eparina)4,12 ng/mL (EDTA)4,14 ng/mL (Siero)4,09 ng/mL (SST)

Comparazione di Metodi: Il dosaggio èstato comparato all'hGH IMMULITE dellaDPC su 206 campioni di pazienti. (Rangedi concentrazione: da 0,01 fino a40 ng/mL. Vedi grafico.) Con regressionelineare:


(IML 2000) = 0,98 (IML) + 0,41 ng/mLr = 0,991

Valore medio:8,6 ng/mL (IMMULITE 2000)8,4 ng/mL (IMMULITE)

Assistenza TecnicaAll'estero: Si prega di contattare il proprioDistributore DPC Nazionale.Prodotto dalla EURO/DPC Ltd. nell'ambito di unSistema di Qualità Certificato ISO 13485:2003.

Português

Hormona de crescimentoUtilização: Doseamento quantitativo dahormona de crescimento no soro emdiágnostícos in vitro, em conjunto com oanalisador IMMULITE 2000, como auxiliarna monitorização do doente.Números de catálogo:L2KGH2 (200 testes)

Código do teste: GHCor: Cinzento claro

Sumário e explicação do testeA hormona de crescimento humano (hGH,somatrotofina) é um polipeptído originárioda pituitária anterior. Tem 191aminoácidos de comprimento e tem umamassa molecular de aproximadamente22 000 daltons. Os seus efeitosmetabólicos são principalmenteanabólicos. Promovem a conservação daproteína e envolvem uma vasta gama demecanismos para síntese de proteína.Também aumenta o transporte de glucosee facilita o armazenamento de glicogénio.Uma outra família de hormonas depeptídos, as somatomedinas sãoresponsáveis pela mediação da suasequência de acções que promovem ocrescimento.1

A medição de hGH é principalmente deinteresse no diagnóstico do tratamento devárias formas de secreção inapropriadade hormonas do crescimento. Asdesordens clínicas de hiposecreçãoincluem nanismo e crescimento potencialnão obtido. A hipersecreção é associadacom o gigantismo e a acromegalia.

Deve-se ter cuidado na interpretaçãoclínica de níveis de hormonas docrescimento. Estes variam durante todo odia, dificultando a definição duma faixa dereferência ou a avaliação do estado deum indivíduo baseado numa únicadeterminação. Muitos factores sãoconhecidos na influência da taxa desecreção da hormona do crescimento,incluindo períodos de sono e estado dealerta, exercício, stress, hipoglicémia,estrogénios, corticosteróides, L-dopa eoutros.1 Devido à sua semelhança com aprolactina e o lactogénio placental, osimunodoseamentos iniciais da hormonado crescimento estavam em geral repletosde valores falsamente altos nas mulheresem fase de lactação e grávidas.

Como nem todos os indivíduosacromegálicos possuem níveis de linhabase elevados, os testes de supressãobaseados na carga de glucose sãovaliosos neste contexto. Apesar dahiperglicémia induzida, existe raramenteuma redução dos níveis de linha base naacromegalia.2

Indivíduos com deficiência de hormona decrescimento possuem níveis dejejum/repouso semelhantes àquelesencontrados em indivíduos saudáveis.Vários testes de provocação têm sidoconcebidos para avaliar a reacçãodurante o período de sono profundo oudentro de 15 a 20 minutos após exercíciofísico enérgico, os níveis de crescimentoapresentam normalmente um aumento.Outros testes de reacção de crescimentoestão baseados na administração de L-dopa, arginina e insulina. Propanolol ouestrogénios são muitas vezesadministrados em conjunto com oestímulo primário para acentuar aresposta.4,5

Um pequeno número de casos denanismo tem sido documentado nos quaiso nível basal e a resposta ao teste deprovocação foram normais. Tais casospodem envolver não sensibilidade dotecido ou à hormona de crescimento ou asomatomedinas, ou à presença deanticorpos ou hormonas do crescimentoimunoreactivo porém inactivobiológicamente.4


Princípio do procedimentoA Hormona de crescimento IMMULITE2000 é um ensaio imunométrico em fasesólida de dois ciclos, quimioluminescente.A fase sólida (esfera ) é revestida comanticorpo monoclonal murino anti-hGH. Oreagente contem fosfatase alcalina (deintestino de vitela) conjugado a umanticorpo policlonal de coelho anti-hGH. Oreagente e a hGH na amostra sãoincubados juntamente com a esferarevestida com um anticorpo monoclonalmurino anti hGH de modo a formar umcomplexo sandwich/anticorpo. Oconjugado de enzima não ligado é entãoremovido por lavagem centrifuga.Finalmente é adicionado substratoquimioluminescente á esfera gerando umsinal proporcional á enzima ligada.Ciclos de incubação: 1 × 30 minutos.

ColheitaO doente deve estar em jejum e emrepouso 30 minutos antes da colheita dosangue.6,7

Recomenda-se o uso de uma ultracentrífuga para clarear amostraslipémicas.

Amostras hemolisadas podem indicartratamento incorrecto de uma amostraantes do envio para o laboratório; portantoos resultados devem ser interpretadoscom cuidado.A centrifugação de amostras de soroantes da formação completa do coágulopode resultar na presença de fibrina. Paraprevenir resultados errados devido àpresença de fibrina, certifique-se que aformação do coágulo foi completa antesda centrifugação das amostras. Algumasamostras, em especial as de doentes querecebem terapia anticoagulante podemrequerer um maior tempo de formação docoágulo.Os tubos para colheita sanguínea dediferentes fabricantes, podem originardiferentes valores, dependendo dosmateriais e aditivos, incluíndo gel oubarreiras fisicas, activadores do coáguloe/ou anti coagulantes. IMMULITE 2000Hormona de crescimento não foram aindatestados com todas as possiveisvariações originadas pelos tipos de tubos.Consultar a secção Tipos de Amostras

Alternativas para obter detalhes sobre ostubos que foram testados.Volume de amostra: 25 µL de soro

Estabilidade: Refrigerar imediatamente.Estável durante 8 horas a 2–8°C,6,7 ou por2 meses (aliquotado) a –20°C. Evite ciclosde congelamento/descongelamento.

PrecauçõesPara uso de diagnóstico in vitro.

Reagentes: Manter a 2–8°C. Elimine deacordo com as leis aplicáveis.Manipule com as devidas precauçõestodos os materiais capazes de transmitirdoenças infecciosas. As matérias primas,obtidas de soro humano, foram testadas,revelando resultados negativos para asífilis, para os anticorpos do vírus daimunodeficiência humana (HIV) 1 e 2;para o antigénio de superfície da hepatiteB (HBsAg) e para os anticorpos do vírusda hepatite C.

Azida de sódio foi adicionada comoconservante; para evitar acumulações deazidas metálicas explosivas emcanalizações de cobre e alumínio, osreagentes devem ser rejeitados no esgotoapenas se estiverem diluídos e foremlavados com grandes volumes de água.

Substrato quimioluminescente: Evitecontaminação e exposição à luz directa(ver bula).Água: Utilize água destilada oudesionizada.

Materiais fornecidosOs componentes formam um conjunto unoe indivisível. Os códigos de barras nointerior das caixas são necessários para oensaio.

Embalagem de pérolas de GH (L2GH12)Com código de barras. Contém 200pérolas revestidas com anticorpomonoclonal murino anti-hGH. Estável atéa data de validade a 2–8°C.L2KGH2: 1 embalagem.

Embalagem de reagentes de GH(L2GHA2)Com código de barras. Contém 11,5 mLde fosfatase alcalina (de intestino debezerro bovino) conjugada a anticorpoanti-hGH policlonal de coelho em tampão.


Estável até à data de validade a 2–8°C.L2KGH2: 1 embalagem.

Antes de utilizar, retire a etiqueta deprotecção da tampa deslizante; levante atampa,remova o remanescente daetiqueta com o cuidado de não danificar ocódigo de barras. Remova o selo dealumínio do topo da embalagem, encaixea tampa deslizante nas ranhuras everifique se a tampa desliza.

Ajustes de GH (LGHL, LGHH)Dois frascos (alto e baixo) de hGHliofilizado em soro de origem não humana,com conservante. Reconstitua cada frascocom 3,0 mL de água destilada oudesionizada. Misture por inversão oumovimentos lentos até o materialliofilizado dissolver completamente.Estável, após a reconstituição, durante30 dias a 2–8°C, ou por 6 meses(aliquotado) a –20°C.L2KGH2: 1 conjunto.Antes de realizar qualquer ajuste, coloqueas etiquetas da alíquota apropriadas(fornecidas com o "kit") em tubos deamostra de forma que os códigos debarras possam ser lidos pelo dispositivode leitura do aparelho.

Materiais necessários masnão fornecidos

Multidiluente 2 (L2M2Z, L2M2Z4)Para a diluição no aparelho de amostraselevadas de doentes. Um frasco,concentrado (pronto a usar) constituido poruma matriz baseada em proteína nãohumana, com conservante. Estáveldurante 30 dias a 2–8°C, ou por 6 meses(aliquotado) a –20°C.L2M2Z: 25 mL. L2M2Z4: 55 mLEtiquetas de código de barras sãofornecidas para usar com o diluente.Antes de usar, colocar a etiquetaapropriada num tubo de teste(16 × 100 mm) de modo a que o códigode barras possa ser lido pelo dispositivode leitura do aparelho.L2M2Z: 3 etiquetas L2M2Z4: 5 etiquetasL2SUBM: Substrato quimioluminescenteL2PWSM: Solução de lavagemL2KPM: Kit de limpeza do pipetadorLRXT: Tubos de reacção (descartáveis)L2ZT: 250 Tubos de diluente da amostra(16 × 100 mm)

L2ZC: 250 Tampas para tubos de diluenteda amostra.

CON6: Controlo multiparamétrico de trêsníveis.Também necessário :Pipetas de transferência de amostra; águadestilada ou desionizada; controlos.

Procedimento de doseamentoTêr em atenção que para obter umdesempenho óptimo, é importanteefectuar todos os procedimentos demanutenção de rotina conforme definidono Manual de Operador do IMMULITE2000.Consulte o Manual do Operador deIMMULITE 2000 para para instruçõessobre preparação, ajuste, doseamento eprocedimentos de controlo de qualidade.Intervalo entre ajustes aconselhável:2 semanas.Amostras de controlo de qualidade:utilize controlos ou "pools" com, pelomenos, dois níveis (alto e baixo) dehormona de crescimento.

Valores de ReferênciaUm estudo executado num grandelaboratório de referência nos EstadosUnidos em 59 homens adultos saudáveise 60 mulheres adultas forneceu osseguintes resultados:

Homens: Até 1 ng/mLMulheres: Até 10 ng/mL

A secreção da hormona de crescimentopela glândula pituitária é episódica epulsátil, e níveis transitórios de até 40ng/mL foram observados em indivíduossaudáveis. Já que os níveis de soro sãobastante baixos entre as secreções emindivíduos saudáveis, são necessáriosimunodoseamentos com sensibilidadesuficiente para distinguir doentes comvalores anormalmente baixos de doentessaudáveis que possuem valores que sesituam na faixa baixa-normal. Portanto, osníveis basais ou aleatórios de hGHfornecem pouca informação diagnóstica.Em alguns indivíduos, a secreçãoexpontânea da hormona de crescimento émelhor monitorizada usando-se umabomba de extracção contínua, ouextraindo espécimes para um doseamentode hGH a cada 20 a 30 minutos durante


um período de 12 a 24 horas. Um númerode testes estimulantes projectados paraestimular ou suprimir a libertação sãotambém usados para avaliar a secreçãoda hormona de crescimento; a definiçãode respostas anormais varia com olaboratório.1

Estes valores devem ser consideradosapenas como directrizes. Cada laboratóriodeve estabelecer os seus própriosvalores.

LimitaçõesDoentes sujeitos a terapia com hGHpodem desenvolver anticorpos humanospara a hGH que podem interferir com oensaio e causar a obtenção de valoresfalsamente baixos.Os anticorpos heterófilicos no sorohumano podem reagir com asimunoglobulinas presentes no ensaio,causando interferência com osimunoensaios in vitro. [Ver Boscato LM,Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Amostras de doentesexpostas em rotina a produtos ou sorosde animais podem demonstrar este tipode interferência, potencial causador deresultados anómalos. Estes reagentesforam formulados para minimizar o riscode interferência, contudo podem ocorrerpotenciais interacções entre soros (raros)e componentes do teste. Para fins dediagnóstico, os resultados obtidos nesteensaio devem ser sempre analisados emcombinação com o exame clínico, históriade medicação do doente e outrosachados que possam correlacionar.

Características do ensaioVer tabelas e gráficos para dadosrepresentativos da performance dodoseamento. Os resultados sãoapresentados em ng/mL. Salvo referênciaem contrário, todos os dados provêm deamostras de soro colhidas em tubos semanticoagulantes, barreiras de gel ouaditivos promotores da coagulação.Com início no kit lote 206, a UnidadeAlternativa 1 incluída no código de barrasdo kit, usa como referência “WHO NIBSC2nd IS 98/574”. A Unidade Alternativa 1 emlotes anteriores, usa como referência“WHO NIBSC1st IS 80/505”. Estaalteração requer a existência de lotes

anteriores na base de dados doImmulite 2000, os quais serãoapagados.Ter em atenção que uma vez lidos oskit lotes 206 ou superiores, TODOS osresultados impressos utilizadores daUnidade Alternativa 1,independentemente do lote do kit,serão expressados relativamente à“WHO NIBSC 2nd International Standard98/574”, para a Hormona deCrescimento r-DNA.Factor de Conversão:ng/mL × 2,4 → mIU/LWHO NIBSC 2nd IS 98/574(Para kit lotes 206 e acima)

ng/mL × 2,6 → mIU/LWHO NIBSC 1st IS 80/505(Para kit lotes 205 e abaixo)

Gama de Calibração: Até 40 ng/mL(96 mIU/L) WHO NIBSC 2nd IS 98/574(104 mIU/L) WHO NIBSC 1st IS 80/505

Sensibilidade Analítica: 0,01 ng/mLEfeito Hook de Alta Dose:Nenhum até 17 000 ng/mL

Precisão: As amostras foram doseadasem duplicado durante 20 dias, 2 ensaiospor dia, perfazendo um total de 40ensaios e 80 réplicas. (Ver a tabela de"Precisão ".)Linearidade: As amostras foramdoseadas sob vários níveis de diluição.(Ver a tabela de "Linearidade" para dadosrepresentativos.)Recuperação: Às amostras foramadicionadas, na relação de 1 para 19, trêssoluções de hGH (120, 240 e 480 ng/mL)antes do doseamento. (Ver tabela de"Recuperação" para dadosrepresentativos.)

Especificidade: O doseamento éespecífico para o hormona de crescimento(Ver tabela de "Especificidade".)Bilirrubina: A presença de bilirubinaconjugada e não conjugada emconcentrações até 200 mg/L não temefeito no procedimento dentro da precisãodo ensaio.Hemolise: A presença de hemoglobinaem concentrações até 512 mg/dL não temefeito nos resultados dentro da precisãodo ensaio.


Lipémia: A presença de triglicéridos emconcentrações até 3 000 mg/dL não temefeito em resultados, dentro da precisãodo ensaio.Tipo de amostra alternativa: Paradeterminar o efeito de amostrasalternativas, foi colhido sangue de 20voluntários em tubos secos, com EDTA,heparinizados e tubos de vacum SST® daBecton Dickinson. A volumes iguais dasmesmas amostras foram adicionadasvárias concentrações de hGH para obtervalores ao longo da gama de calibraçãodo ensaio. As amostras foram doseadascom o IMMULITE 2000 Hormona decrescimento.(Heparin) = 0,99 (Soro) + 0,07 ng/mLr = 0,997

(EDTA) = 1,0 (Soro) – 0,01 ng/mLr = 0,997

(SST) = 0,98 (tubos simples) + 0,02 ng/mLr = 0,999

Médias:4,15 ng/mL (Heparin)4,12 ng/mL (EDTA)4,14 ng/mL (Soro)4,09 ng/mL (SST)

Comparação de métodos: Odoseamento foi comparado ao Kit deHormona de crescimento IMMULITE daDPC em 206 amostras de doentes. (Zonade trabalho: aproximadamente 0,01 a40 ng/mL. Ver gráfico.) Regressão linear:(IML 2000) = 0,98 (IML) + 0,41 ng/mLr = 0,991

Médias:8,6 ng/mL (IMMULITE 2000)8,4 ng/mL (IMMULITE)

Assistência TécnicaPor favor contacte o seu DistribuidorNacional.Fabricado pela EURO/DPC Ltd. de acordo como Sistema de Qualidade registado segundo anorma ISO 13485:2003.

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Diagnostic Products CorporationCorporate Offices5210 Pacific Concourse DriveLos Angeles, CA 90045-6900USA2005-05-09PIL2KGH – 14

Growth Hormone (hGH) - Diagnostic Products Corporation · 2016-04-17 · hyposecretion include...

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