Glucose, fructose and sucrose content in broccoli, white cabbage and Portuguese cabbage grown in...

5
Glucose, fructose and sucrose content in broccoli, white cabbage and Portuguese cabbage grown in early and late seasons Eduardo Rosa, 1 * Manuela David 2 and Maria H Gomes 1 1 Horticulture Section, Universidade de Tra ´s-os-Montes e Alto Douro, Apt 202, P-5001-911 Vila Real Codex, Portugal 2 Plant Physiology Laboratory, CDCTPV, Universidade do Algarve, Campus de Gambelas, P-8000-117 Faro, Portugal Abstract: Consumption of Portuguese cabbage and white cabbage is very high in Portugal, but diets including broccoli have been highly recommended owing to recognition of the health-protective effects of secondary plant metabolites. Broccoli production is generally concentrated in the summer/winter season, but the demand for a fresh product throughout the year requires production in other seasons. Sugars might affect ¯avour and the acceptance of broccoli by consumers. This study reports the free fructose, glucose and sucrose content in primary and secondary in¯orescences of 11 cultivars of broccoli, one white cabbage and four Portuguese cabbages grown in early March±July) and late August±January) seasons in the northern region of Portugal. On average the results show that the total free sugar content in the broccoli cultivars, except for cv Marathon, is signi®cantly P < 0.05) lower than in the other cabbages. Fructose was the major sugar in the three types of Brassica, representing between 48.8 and 56.9% of the total sugar content in broccoli cvs Marathon and Senshi respectively and between 48.7% cv Mirandela) and 53.8% cv Murciana) in the other cabbages. Glucose was the second major sugar, while sucrose represented a maximum of 20.5% in broccoli cv Shogun and 11.1% in cv Murciana. The growing season in¯uenced the free sugar content, with generally higher levels in the spring/summer than in the summer/winter season in broccoli, while an opposite tendency was noted in the other Brassica species. In broccoli the sugar levels in the primary in¯orescences were generally lower than in the secondary in¯orescences, except for sucrose. # 2001 Society of Chemical Industry Keywords: sucrose; fructose; glucose; free sugars; broccoli; white cabbage; Portuguese cabbage; growing season INTRODUCTION Brassicaceous plants represent one of the major vegetable crops grown worldwide. Portuguese cabbage Brassica oleracea L var tronchuda Bailey syn var costata de Candolle) and white cabbage B oleracea L var capitata L) are the major cabbages consumed in Portugal, 1 but broccoli B oleracea L var italica Plenck) consumption has been increasing owing to its potential to protect against several types of cancer. 2 The quality of these and other vegetables might be in¯uenced by the climatic conditions, which affect the synthesis of primary and secondary plant compounds. 3 Broccoli is usually grown in the summer/winter season, but the demand for a fresh product throughout the year requires the crop to be grown in other seasons such as spring/summer, in which above-optimum tempera- tures for growth are likely to affect composition. Soluble sugars are the primary compounds of metabolism which are transported or stored tempora- rily, providing energy and the C skeletons for the synthesis of other compounds. They play an important role in the postharvest senescence of broccoli, being translocated from other plant parts to help maintain the ¯oral sugar pool and support the high respiratory demand of the active growing in¯orescences. 4 Supply and demand for assimilates within the plant source± sink system in¯uence partioning, which results from co-ordinate responses and processes dependent on the balance between production and consumption rates of the tissues and organs and their relative dimension, which are modulated by the genotype, development stage and environmental factors. 5 Total and relative amounts of sugars are likely to vary with the growing season, since they may accumulate as a response either to water de®cits, 6 contributing to osmoregulation, 7 or to chilling temperatures, as they have cryoprotective characteristics. 8 The type and concentration of free sugars might in¯uence the ¯avour of Brassica products, but no information is available on their levels in most of the recent broccoli cultivars used for either fresh market or industry, and particularly in the secondary in¯ores- (Received 12 December 2000; revised version received 5 March 2001; accepted 25 April 2001) * Correspondence to: Eduardo Rosa, Horticulture Section, Universidade de Tra ´s-os-Montes e Alto Douro, Apt 202, P-5001-911 Vila Real Codex, Portugal E-mail: [email protected] Contract/grant sponsor: Australian Centre for International Agricultural Research; contract/grant number: ACIAR 9433 # 2001 Society of Chemical Industry. J Sci Food Agric 0022±5142/2001/$30.00 1145 Journal of the Science of Food and Agriculture J Sci Food Agric 81:1145±1149 online: 2001) DOI: 10.1002/jsfa.919

Transcript of Glucose, fructose and sucrose content in broccoli, white cabbage and Portuguese cabbage grown in...

�� ���� �� � ����� �� ���� ��� ����� � � � ��� ���� ����� 1#4 *,+ *5 �������4 "11 �6724 1� 11"'�����5 5

Glucose, fructose and sucrose content inbroccoli, white cabbage and Portuguesecabbage grown in early and late seasonsEduardo Rosa,1� Manuela David2 and Maria H Gomes1

1Horticulture Section, Universidade de Tras-os-Montes e Alto Douro, Apt 202, P-5001-911 Vila Real Codex, Portugal2Plant Physiology Laboratory, CDCTPV, Universidade do Algarve, Campus de Gambelas, P-8000-117 Faro, Portugal

(Rec

� CoCodeE-maCont

� "

��������� ��� ���� � ��������� ������� ��� ����� ������� �� ���� ���� �� �������� ��� �����

��������� ������ ���� ���� ������ ��� ����� ���� � ��������� � ��� ���������������� �������

� �������� ����� ���������� ������ �������� �� ��������� ����������� �� ��� �� ���������

������ ��� ��� �� ��� �� � ����� ������ �������� ��� ���� �������� �������� �� ���� �������

����� ���� ������ !���� ��� ��� ���������� � ������ �� ���� ���� "��� ����� ������ ��� ����

�������� ������ ��� ������ ������ �� ��� ��� ��� �������� ��!��������� � ## ��������� �

������� �� ����� ������� ��� ��� ��������� �������� ���� �� ����� $%����&'���( ��� ����

$������&'������( ������ �� ��� ������� ����� � �������� )� ������� ��� ������� ��� ���� ��� ����

���� ����� ������ �� ��� ������ ���������� �*���� �� �� %������� �� �����+������ $��,�,-( �������� �� ��� ���� ��������� .������ ��� ��� �/� ����� �� ��� ����� ����� � ��������� ������������

������� 01�1 ��� -2�34 � ��� ���� ����� ������ �� ������ ��� %������ ��� ����� ������������ ���

������� 01�54 $�� %��������( ��� -6�14 $�� %�������( �� ��� ���� ��������� 7����� ��� ��� �����

�/� ������ ����� ������ ����������� � �*� � � 8,�-4 �� ������ �� ���� ��� ##�#4 �� ��

%�������� "�� ������ ����� ��!������ ��� ���� ����� ������� ���� ��������� ������ ������ �� ���

��������� �� ���� �� ��� �� ��������� ����� �� ������� ����� �� ������ �������� ��� ���� ��

��� ���� �������� �������� 9� ������ ��� ����� ������ �� ��� ��� ��� ��!��������� ���� ���������

���� ���� �� ��� �������� ��!���������� �*���� �� �������

� 8,,# ����� � �� ���� 9�������

:������� �������� �������� ������� ���� ������ �������� ���� �� ��� �������� �� ��� ����� ������

INTRODUCTION������������� ����� �������� ��� �� �� �����

���� �� ����� ���� ���������� �������� �� ��

��������� ������ � ��� ����� �� ������ ��� ��� ������� ��������� ��� ���� �� �� �� ������ � ���

������ �� ��� �� ����� �� ��� �������� ��

������� � ������� �� ������ � ��� ������ �����!����������� ��� ��� ��������� ���� � �� �������

� ����� ����� ������� ���� �� �������" #�� $�����

�� ���� ��� ���� ���� ��� ��� � ��%������ �

�� ������� ���������� ����� ����� �� �������� ��

������� ��� ��������� ���� ����������& �������� ��

������� ���� �� �� ������'����� ������� � ��

������ ��� � ����� ������ ������� �� ����

��$����� �� ���� � � ���� �� ���� ������� ����

�� �����'������� �� ����� � ���(������ ������(

���� ��� ���� ��� ��!��� � ����� �����������

)��� �� ����� ��� �� ������� ��������� ��

��� ����� ����� ��� ��������� �� ����� ������(

����� �������� ����� ��� �� � �!������ ��� ��

�������� �� ���� ���������� #��� ���� �� �������

eived 12 December 2000; revised version received 5 March 2001; ac

rrespondence to: Eduardo Rosa, Horticulture Section, Universidadex, Portugalil: [email protected]/grant sponsor: Australian Centre for International Agricultural Re

11 )����� �� �������� 2������� � ��� ���� ����� 11""+, *"'"

���� �� �� ��������� ���������� �� �������� ���

���������� ���� ���� ���� ���� � ���� �������

�� %���� ���� ���� ��� ������ �� ��� ����������

������ �� �� ����� ����� ��%�����������* )�����

��� ������ ��� ���������� ����� �� ���� ������+

���! ����� ��%����� ��������� ����� ������ ����

��(������� ��������� ��� ��������� �������� �� ��

������ ����� ��������� ��� ���������� ���� ��

�� ������ ��� ����� ��� ���� ������� ����������

����� ��� �������� � �� ������� ����������

��� ��� ������������ �������, #��� ��� �������

������ �� ����� ��� ��!��� � ���� ��� �� �����

������� ����� ��� ��� ��������� �� � �������� �����

� ���� ��-����. ����� ��� � �������������/ ��

� ������� ����������� �� ��� ���� ������������

��������������0

#�� ��� ��� ����������� �� ���� ����� ���

��%����� �� %����� �� �������� �������� � ��

���������� �� ������ �� �� ���� ������ �� ��� �� ��

����� ������� �������� ���� ��� ����� ����� ���!� ��

�������� ��� ����������� �� �� ��������� ��%����(

cepted 25 April 2001�

de Tras-os-Montes e Alto Douro, Apt 202, P-5001-911 Vila Real

search; contract/grant number: ACIAR 9433

11 '3&1�11 *,

� ����� � ������ �� ����

������� #���� ��� ������ � ��� ���!� ���� �� ������

�� ������� ��%���������� �� �� �������� �� �� ������

� �� �� �� �� ���� ��� ��� �������� &18 �� ��

��� ����� �9��� :� ���� ��������

#��� ���� ���� � ������� �� ��%����� �� ��

���� ������ �� �� ���� ������� ������� ���

������� ������ �� �� ������� ��� ���������

��%���������� �� ������� �������� ��� �������

��� ��� �� ������ �� ��� ���� �� �� ��� ����

�������� �� ����

MATERIALS AND METHODSPlant materials:����� ������� �������� ������ �������� 6������

;���� <������ ������ =������ ����������� � ��

.18 �� �� ��� ������� ����� �� �� 2 �����

����������� )������ )����� )>&� )>* ��� #�!��(

������ ��� ���� �� �� ������� �6����� ��� ����

�������� �� �� �������� �=��������� =��������

��?��� ��� <��������� ���� ������� #�� �@�������

��� �� �� � ���������� ���! ����� ��� ����

��������� �� " ����� ���� �� �� -���� �� ��

A����������� �� #��?�(��(=���� � B�� 6����� � ��

������ �� *,&�� * ° /�C ��� /°**�D� )���� ����

���� B���� 55/ ��� �� �����'������ �))� ������

��� * B��� 55/ ��� �� ������'����� �)D�

������� ���� ������� ��� �������� � ����������

������ ���� ����� �������� �� �� �����'������

������ ����� 0 ��� 55 ���� ���� ����� ��� ��

������� ��%���������� ��� ����� 5& ��� & ����

��� �� ��������� ��%����������� 2� �� ������'

����� ������ �� ������ ��� ����� 5. ��� "&

���� ���� ����� ��� �� ������� ��%���������� ���

����� *. ��� .1 ���� ��� �� ��������� ��%��(

��������� E�� �� ���� �� ��� �� ������ ���

����� 0/ ��� 5 ���� ���� ����� �� �����'������

��� 0" ���� ���� ����� �� ������'������ 2�%��(

�������� � �������� ��� ������ ��� ���� �� -�� �����

���� ���� �������� ���� ��������� ������ � �� ����

��� �� �� ��� � ����� ������� ��%������ B �� ����

�� �� ���� ������� �� ���� �������� ��� ����������

���� ���F�� �� ��$��� ������ ��� ����� �� � ������

��� � ���������� �� ������ ��� ����F�(����� ���

������ ��������� #�� ���� ���� ��� ����� �� � ������(

��� ���� � .1°� ���� ������ ����� � ��������

�� ��� ���� �6D��

Soluble sugars#�� ������ �� ���(������������� ���� �� �����

�������� ������� ��� �������� ���� ��F���������

��������� �������� �5 �� ����� ������ �� �

G���� ��� 1 ����%�� �� ������ �� ���� ����� ����

������� �� � ������� ��@��� ������� � �� ��������

�� CB6�� ���� �� ��$������ ������� �� �����-�

��F����� #�� CB6�H ������ ��� �������������

�������� ����� ������ �� � ��� ���� � &*1��

��������� ��������� ����� *11�� ����������

���������� ��� � ��� ��( ���'����(��������

�������������� �A<(&111� )�����F�� >����

*.

G������ �� ����������� �� �� �������� ��� ��@����

��� ������� ��� 4 ��� "4 ������������

E���F�(����� ������� ���� ������ ��� �� ��

� �� ����� ��� 018 ��'�� ������ ��� �@������ ��

� ���� �� � 01°� ��� "1+&1���� 2� �� ������ ��

�� �@������ �� ������� ���� ������ �� � <���@

��� ���� �*.� ������� C��� B��� �����������

�,���� *111��� �� ���$�� �� �� ��������� ���

������� ��� � ����� ��@��� �������� 11�=

2����F�� ��H .�5�� �,�= =��"� 1�,�= CB6��

� �= B#� ��� 1�,A �� ��@�!����� �:� "�/� � �

��������� =�������� =�������� ;�������� E���

������ ��� ��������� ��� �� ������� �� A ��

������ .(�������� ������������ �:� � � �*5�

���������� =��������� ���� ������� ��� ���������

��� �� ������� �� �"A �� ������������� ������(

��� �:� ,�&� 5� ��������� =��������� ��� �������

��� ��������� �� ��@���� ����������� �������� �

&1A �� �������� �:� &�"� �".� )��� ����� )

������ =7� A)B��

6�� ���� �������� � BC7<B ���� � )����B����

���!�� �� � � B ���� �������� 2����

RESULTS AND DISCUSSIONE������ ���� �� ������� �� ����� ���� �� �� ����

���� �� �� �� �#� ��� ��� "�� �������� �

������� 2� �������� ������� ���������� �����

*0�08 �� �� ��� ����� ����� �� �� =������ ���

,.�58 �� �� )������ ��� ��������� ��� �� ��������

�� ��� � ����� *0�/8 �� �� =�������� ��� ,&�08

�� �� =��������� ����� �� ���� �� �� �� 6���� �

���������� *5�&8� ;������ ���������� �����

"5�.8 �� �� )���� ��� &,�,8 �� �� ����� �����

������� ���������� � ��@���� �� "1�,8 �� ��

)���� ��� 0�,8 �� �� ������ 2� �� ���� �� ���

�� �������� �� ������ ��� ��������� �����

� ����� &,� 8 �� �� =������� ��� *.�&8 �� ��

=���������� ����� ������� ��� �� ���� �� � 8 ���

=�������� �� �� ��� ���� ������ >�� ���

=�����* ���� ����� ������� ��� ������ �� �� �����

���� �� ����� �� �� ������� ��%���������� ��

�������� � �� �� ������� ����� �� �������� #���

���� ����� ����� �� -����� �� ���� � ��� ������

������ �� �� ��������� ��%���������� �� �� �����'

������ ������� �� ������ ������� ��� ��� �����

������� ������� ���!���� �� �� ��������� �������(

����� ������ �������'������ �#� �� �� 2� ��

���� �� �� ����� ������ ���� � � ����� ���

������� ���� �� �� �����'������ ������ �#� �� "��

)������� ��� �� ���� ���� �� ���������� �����

�� ����� ����� �� ��� ������ �� ���!�� )������ ��� �

���������� � �������� ���������� �� ����� ���� ��

�������� ������ ��� �������� ��$���� �����������(

��� � ��@�!������ ��� ������ ��� ���������

)������ ��� ���� � ������� � ������� �������� ��

����� ���� ���� �� ������� ����� ���� � ����(

��������� ��� �� A6�(;������ ������ ��� �

���� ������� ����� #�� ������� ��������� �� ����(

������ ���� ��@���� ��� � ����� ����� ���'��

� ��� ���� ����� ��� *,+ *5 �������4 "11 �

Table 1. Glucose, fructose, sucrose andtotal free sugar levels (mgg�1 DW) inprimary (P) and secondary (S)inflorescences of broccoli cultivars inspring/summer (SS) and summer/winter(SW) seasons

�������� ��� � ����� �

����

������ ������� ����� �����

���� �� � ����� ����� � �� � ������

� ������ � ��� ��� �������

�� � ������ ����� ����� ������

� ���� � ���� �� � �����

������� �� � ������ ����� � ��� ������

� ���� � ����� � �� � � ���

�� � ��� � ���� � ����� �����

� � ��� ����� ����� � ���

������� �� � ��� ������ ��� � ������

� ���� ������ � � � �����

�� � ������ ������ ���� �����

� �� ��� ������ � � � ������

����� ������� �� � ������� �� �� � �� ��� � ������

� � ��� � ��� ��� � ������

�� � ��� � ���� � ��� � ��

� ���� � ���� ����� ����

����� �� � ����� � ��� ��� � � �����

� �� � ������ �� � � �����

�� � ���� ���� ����� �����

� ��� � ����� �� � �����

!����"�� �� � � ���� ����� ������ ��������

� ���� ������ ���� � � ������

�� � ���� � � ���� � ���� �����

� ����� ����� �� ��� ���

���#"� �� � ������ ������ ���� ����

� ������ ������ � �� � � ���� �

�� � ������ ������ ���� �������

� ������ ������ ��� � �����

�"���� �� � � ���� ������ ������ �����

� � �� ����� ���� � �������

�� � ������ �� ��� ���� � �������

� ���� ����� � ���� ������

�$� �� � �� ��� � ���� ������ �������

� �� ��� ���� ����� �������

�� � ������ ������ ����� �������

� ������ ����� ��� � ������

�$� �� � ����� �� �� � ���� �� ���

� ������ ������ ���� � �������

�� � ��� � ������ ������ �����

� ������ ����� ������ �����

%�&'���(� �� � ���� ������ � �� �������

� ����� ����� ���� �����

�� � ���� ����� ������ � ������

� � ��� ��� ��� � ������

Table 2. Glucose, fructose, sucrose and total freesugar levels (mgg�1 DW) in white cabbage (Duchy)and four Portuguese cabbage cultivars in spring/summer (SS) and summer/winter (SW) seasons

�����)�� ���#��

����

������ ������� ����� �����

��*"' �� ���� �� ��� �� � �����

�� � �� � �� ��� ���� � ������ �

!�������� �� ������ ���� ���� �������

�� ����� ����� ��� � �� ���

!��*���� �� ����� ������ ���� � � �����

�� �� ��� ����� ���� ��� ��

��+)�� �� ������ ����� ����� �������

�� ������ � ���� ������ �������

���"�#*�# �� ������ ������ ��� � ������

�� �� ��� ������ ����� ��������

� ��� ���� ����� ��� *,+ *5 �������4 "11 � */

�! �� �� ���"��� ����� �� �� � ���� �� �������� �����

Table 4. Average maximum and minimum air temperatures, sunlight andrainfall during spring/summer and summer/winter seasons

���

����� ��� ��� �°��� �����

���

��� ����

������ ���

�3����8#�((��

!�' � ��� ���� � ��

9��� � � � � � �� ��

9��' ��� ��� ���� ���

��((��8:�����

��3��(2�� ��� ��� ���� �

1*��2�� ��� ��� ��� ����

.�)�(2�� �� ��� �� ���

��*�(2�� � � � � � ����

9�����' �� ��� � � �

� ����� � ������ �� ����

������������ ������� ��� �� �� ������ ���� �� ���

����� � �������� �� �� ����� ������ ��

������� ����� �� ������� ����� � ��� ��� �����

� �������� ������� �� ���������� �� � ������ �� ��

��� �� ������ �� ��@�!������ ������ �� �� �������

I���! ��� )���J���� ����� ��� ���� ������� ��

���� ��@�!������ ���� ����������� �� ���� ��-���

����� � ������ �� � �������� ��� �����!������ ����

��� ���$����� ������� � � �� ����(���� ��� �

�� ����������� �� �������� 2 ����� � ��������� �

������� ������������ ��� ���������� ������ �� �����

� ������� ������ �������� �������� ������� �@�� �

�������� ���� �� ��@�!������ ��� ������� ���������

��F���� ��� ������ ������� ������� ������ ��(

�������� ��� ��%����� ���� ������� ������ ���

��������� #���� ���� ���� �� ����� ��%������ �

����� �� �� ������� ��������� �������� �����

�����'������ ���� �� ��� ���� ������ � ������(

� �� ��������� �������

2� ������� �� ������ �� ������ ���� ����-�����

����� �# �1�11 � �� �����'������ �*"�"� �

6D� ��� �� ������'����� � "�,� � 6D�� ��

�� ����� �� ������� �� ��%������ �� ������ ��

����-����� �� �� ��� ���� ����� �#� �� &�� �����

������� ��� ����������� ������� ������ �� �������

�������� ����� ��� ���� � ������ �� �� ��������

�� ���� �@��� ��� �� <�������� �#� �� &�� 2� ��

���� �� ��� ������ ��� ������� �������� �� ����

���� �� �� �� ���� �� ���� ����� ������� ���

����-����� ����� �� �� ������'����� ��� �� ��

�����'������ ������ �#� �� &��

#�� ����� ������ ������ �� ������� �� ������'

����� ��� � ���!�� � �� ��� �� �� ��������� ��

��������� ���� ��� ������ �� ������������� �

���� �� ������������ ����� ���� ����� � � �����

�� �� ������'����� ��� �� �� �����'������

������� " 7� �� ���� ����� �� ����� ����������

�� �������� ����� �� �����'������ ������ �#� ��

Table 3. Summary of analysis of variance

���� �� ����� � ������� ������ ����� �����

���**���

���#�� ,�- .� *** .� ***�����)�� ,�- * .� *** **��� * * *** **/�0���#*��*� ,/- ** ** *** .�

�� / .� * * .�

�� / *** *** * ***���� / *** *** ** ***

1�"�� *�22���#

���#�� ,�- *** ** .� *�����)�� ,�- *** *** * ***��� ** * * *

���**��� 3��# ��"�� *�22���#

���#�� ,�- *** *** .� .�

�����)�� ,�- *** *** * **��� *** .� * .�

.�4 *4 **4 ***5 ���6#����7*���4 #����7*��� �� �� 4 �� � ��� �� �

��#3�*��)��'

*0

*� ��� ����� ��� �� ��� ����� �� �� ������� ����

������ ������� �� ������ �� �� ���� ����������

�� ���������� �� ���� ������ & #��� � �� ��!��� ��

�� ������� � ��������� ����� ����� ��� �@����� �

� ����� ����� ��� ������������ ���������� ����

�� ���� ����� ���� ���������� � �� ��%����������

� ������� �� %���� ���� ���� ��� ������ �� ���

���������� ������ �� �� ��%���������� �� ������

� >�� ��� =������*

D���� ���� �� �� ���� �������� ������� ��(

��-��� ����������� �� �� ������ �� ������ �@��� ���

������ �� ������� �#� �� &�� 7� ������� �� =���(

��� ������ �� ����� ��� ���� �����

�5.�5� � 6D�� ����� �� ����� ��� ���� �� ��

6����� �.5�/� � 6D�� H������� ���� ��� ��

��%����� �� ������ ��� ��%��������� �� ����� � ��

����-��� ���������� )�� ��� ��2 �#� �� &�

�������� � �� ���������� ������ �@������� �� #� ��

� B ������� ������� ��� ���� ��� ���� �� ��

���������� ����� �#� ��� ��� "��

2� �� ���� �� �� ���� ���� ��� ���� ��

��%����� �� ������� �#� �� &�� 7� ������ ���� ��

�������� ���� �� �� �� 6���� ������ �� �����

��� ���� ������ � 5 �0� � 6D� ��� �� =�������

�� ����� � 1�*� � 6D�� ������ ���� ��� ��

��%����� �� �� ����� ������ �� ����� � ��

����-��� )�� ��������� �#� �� &�� 2������ �� ��

������'����� ������� �� 6���� ������ �� �����

������� � �� �� �����'������ ������ �� �����

������ ���� �������� �� �� <�������� �#� �� "�� ��

=������� ������ �� ����� ������ �� �� �������

�#� �� "�� #���� � ��������� ����� �������� � ����

���������� �����

��������� �@��� ��� �� =������� ������ �����

�# �1�1,� ��� ���� ������ ��� �� ���� �� ��

����� ��� ���� ����� ��� ������� � >�� ���

=������*

2�%���������� ���� ������� ����-��� ����������� ��

���� �� �� ���� �������� ������ � �� �� �� ����

�#� �� &�� :@��� ��� �������� �� ���� ������ �� ��

��������� ��%���������� ���� ����� ��� �� ��

������� ��%���������� �#� �� �� )���� ������� �� ��

����� ���� �������� �� ��� ��������� � �� �@�����

� ��� ���� ����� ��� *,+ *5 �������4 "11 �

�! �� �� ���"��� ����� �� �� � ���� �� �������� �����

�� �� ������� ��%���������� �@����� � ������ ����

����������� �� �� =������ �� �����'������ ��� ��

)���� �� ������'����� �#� �� ��

CONCLUSIONS#��� ���� ��� ���������� �� �� ������ �� ���� ��

����� ��� �������� �� �� �� ��� ��� �������

����� ���� ���� D��� �� �� ��� ��������

�� ��� ��� ����� ��� ���� �� ����� ��� ��������

2� ������� � �� �@����� �� �� ���������� ��

�������� ����� ��%���������� ��� �����������

��� �� ������� ������ #�� ������� ������ �� ��

�������� ����� ������ ����� �� �����'������

��� �� ������'����� ������� �� ������ ������ �

����� ���� �������

REFERENCES 9��� :B)� ;������������ �� �� ��� B ���� �� ���� ��������

������� �� ����� ������� #�� $����� A#B6� <��� 9���

� 55"��

" ������� �DD� ������ ��������� ��������� �� �������� ��

�������� ������4 � ������� �� � %��� & � -34 ..)+ /1)

� 55*��

& )���� ��� E� ��� 9��� �D� #��� #�'������'� D��������

������� �B � 55 ��

* >�� ;B ��� =����� )�� :���� ������������ ������ �����

��������� ���������� �� �������� � �� ��� ��� ���

##34 111+ 11, � 55*��

� ��� ���� ����� ��� *,+ *5 �������4 "11 �

, D������ 2E� #�� ������ �� ��� �� ��������� �� ������ &"

#�'�� ##24&* +&0 � 551��

. 6����==�������6� ������ 2 ����������=G� ���� �� ������

�� ����������� ������ ��� ���� ����������� ��

������� ��� �������� ( ��� � ��) � ������ � � � #���

#�'���� 8-4"55+&1. � 550��

/ =���� 9 ��� D��� 9� ����� ���� �� ����� � ������

�������� �� ������� ��� �@������ F���� �� ���� ������

����� ������� ���� ��-��� � �� ��� ������� � � � #���

#�'���� 145&+ 1, � 50 ��

0 >����� E ��� ����� 6=� =�� ����� �� ��� �������� �� ���!�

��� �������4 ��������(������� ���������������� �� #���*

�������� �����) ��� �� #���� ��� %����� �� ��+���, ������*

������ :� � K���!� : ��� )������� BB� =����� 6�!!��� C��

L��!� �� ,/+ 0& � 55.��

5 )� =� =�������� 9� ;������ 9 ��� H��� HD� 6�������(

��� �� ��� ���� ������ �� �����-� ����� ��� �� ��������

���������� �� ���� ������� ����� ��-'��� #504, 0+,,"

� 505��

1 G���� =;>� 7���� G� DH ��� ����� 7H� :�F���� ����� ��

1�/ � 1� * ����� �� ������� �� ���� ������� #��� #�'����

2,4&/5+&0& � 5//��

I���! D� ��� )���J���� BB� )������ ��� ����� �� ������� ���

���!�� �� #����������� �����) ��� �� #���� ��� %����� �� ��+

���, ������������ :� � K���!� : ��� )������� BB� =�����

6�!!��� C�� L��!� �� ,+ ,. � 55.��

" 9��� :B) ��� 9������� B)� #��� ��� ���������� �����������

����� �� ������� �������� ���� �� ����� ��� ��� ��������

��� ��� 624,.+,5 �"11 ��

& D��� )� =����� B ��� 9����� G� :���� �� ��������� ��

��� ������� ��� ����� �� ���� ������ � �.� �� 084. 5+

.", � 55 ��

*5