fitokimia anting2

�� (Acalypha Indica Linn) DENGAN VARIASI PELARUT DAN UJI

TOKSISITAS MENGGUNAKAN BRINE SHRIMP (Artemia salina Leach)

SKRIPSI

Oleh :

IKA SRIWAHYUNI NIM. 06530022

JURUSAN KIMIA FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG

2010

UJI FITOKIMIA EKSTRAK TANAMAN ANTING-ANTING

(Acalypha indica Linn) DENGAN VARIASI PELARUT DAN UJI TOKSISITAS MENGGUNAKAN BRINE SHRIMP (Artemia salina Leach)

SKRIPSI

Diajukan Kepada:

Fakultas Sains dan Teknologi

Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang

Untuk Memenuhi Salah Satu Persyaratan dalam

Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S. Si)

Oleh :

IKA SRIWAHYUNI

NIM. 06530022

JURUSAN KIMIA

FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG

2010

SURAT PERNYATAAN ORISINALITAS PENELITIAN

Saya yang bertanda tangan di bawah ini :

Nama : Ika Sriwahyuni

NIM : 06530022

Fakultas / Jurusan : Sains dan Teknologi/Kimia

Judul Penelitian : Uji Fitokimia Ekstrak Tanaman Anting-Anting (Acalypha

indica Linn) dengan Variasi Pelarut dan Uji Toksisitas

Menggunakan Brine Shrimp (Artemia salina Leach)

Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa hasil penelitian saya ini

tidak terdapat unsur-unsur penjiplakan karya penelitian atau karya ilmiah yang

pernah dilakukan atau dibuat oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis dikutip

dalam naskah ini dan disebutkan dalam sumber kutipan dan daftar pustaka.

Apabila ternyata hasil penelitian ini terbukti terdapat unsur-unsur jiplakan,

maka saya bersedia untuk mempertanggungjawabkan, serta diproses sesuai

peraturan yang berlaku.

Malang, 28 Juli 2010

Yang Membuat Pernyataa

Ika Sriwahyuni

NIM. 06530022

UJI FITOKIMIA EKSTRAK TANAMAN ANTING-ANTING

(Acalypha indica Linn) DENGAN VARIASI PELARUT DAN UJI TOKSISITAS MENGGUNAKAN BRINE SHRIMP (Artemia salina Leach)

SKRIPSI

Oleh:

IKA SRIWAHYUNI

NIM.06530022

Telah disetujui oleh:

Pembimbing I

Elok Kamilah Hayati, M.Si

NIP. 19790620 200604 2 002

Pembimbing Agama

Ach. Nashihuddin, M.A

NIP. 19730705 200003 1 002

Tanggal, 24 Juli 2010

Mengetahui

Ketua Jurusan Kimia

Diana Candra Dewi, M.Si

NIP. 19770720 200312 2 001

UJI FITOKIMIA EKSTRAK TANAMAN ANTING-ANTING (Acalypha Indica Linn) DENGAN VARIASI PELARUT DAN UJI

TOKSISITAS MENGGUNAKAN BRINE SHRIMP (Artemia salina Leach) SKRIPSI

Oleh:

IKA SRIWAHYUNI

NIM. 06530022

Telah Dipertahankan di Depan Dewan Penguji Skripsi dan Dinyatakan Diterima Sebagai Salah Satu

Persyaratan untuk Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S. Si)

Tanggal 28 Juli 2010

Susunan Dewan Penguji : Tanda Tangan

1. Penguji Utama : Diana Candra Dewi, M.Si. NIP. 197 70720 200312 2 001

( ................................... )

2. Ketua Penguji : Eny Yulianti, M. Si NIP. 197 60611 200501 2 006

( ................................... )

3. Sekr. Penguji : Elok Kamilah Hayati, M. Si NIP. 197 90620 200604 2 002

( ................................... )

4. Anggota Penguji : Ach. Nashihuddin, M.A NIP. 19730705 200003 1 002

( ................................... )

Mengetahui dan Mengesahkan Ketua Jurusan Kimia

Diana Candra Dewi, M.Si. NIP. 197 70720 200312 2 001

�

��

��

��

��

��

��

��

��

�

!�""��

��"�� #�� $�� "� � ��

�� "� � ��

� �� " �� %&��'��( �)��

�

�

KATA PENGANTAR

Alhamdulillah Maha Besar Allah Swt. segala puji syukur ke hadirat Allah

Swt. yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya kepada penulis atas

terselesaikannya skripsi yang berjudul: “Uji Fitokimia Ekstrak Tanaman

Anting-Anting (Acalypha indica L.) dengan Variasi Pelarut dan Uji

Toksisitas Menggunakan Brine Srimp (Artemia salina Leach)”. Skripsi ini

merupakan salah satu syarat menyelesaikan program S1 (Strata-1) di Jurusan

Kimia Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana

Malik Ibrahim Malang.

Penulis mengucapkan terima kasih kepada semua pihak yang telah

membantu dalam menyelesaikan penulisan skripsi ini, terutama kepada:

1. Ibu Elok Kamilah Hayati, M. Si, selaku Pembimbing I.

2. Ibu Rachmawati Ningsih, M. Si, selaku Konsultan.

3. Bapak Ach. Nashihuddin, M. A, selaku Pembimbing Agama.

4. Ibu Diana Candra Dewi, M. Si, selaku Penguji Utama.

5. Ibu Eny Yulianti, M. Si, selaku Ketua Penguji.

Atas bimbingan, pengarahan, dan nasehat serta segala bantuannya kepada penulis

dalam menyelesaikan skripsi ini.

Penulisan skripsi ini tidak luput dari bantuan semua pihak, baik secara

langsung maupun tidak langsung. Oleh karena itu, penulis dengan penuh

kesungguhan dan kerendahan hati, menghaturkan terima kasih kepada:

1. Bapak Prof. Dr. H. Imam Suprayogo, selaku Rektor Universitas Islam

Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang

2. Bapak Prof. Sutiman Bambang Sumitro, SU. DSc selaku Dekan Fakultas

Sains dan Teknologi, UIN Maulana Malik Ibrahim Malang.

3. Ibu Diana Candra Dewi, M.Si selaku Ketua Jurusan Kimia, UIN Maliki

Malang yang telah memberikan arahan dan nasehat kepada penulis.

4. Para Dosen Pengajar di Jurusan Kimia yang telah memberikan bimbingan

dan membagi ilmunya kepada penulis selama berada di UIN Maliki

Malang.

5. Seluruh staf Laboratorium (mas To, Mas Abi, mbak Rika, mbak Nia n Mbak

Susi) dan Administrasi (mbak Ana) Jurusan Kimia atas seluruh bantuan dan

sumbangan pemikiran selama penyelesaian skripsi ini.

6. Kedua orang tuaku dan seluruh keluarga besar yang dengan penuh kasih

sayang dan keikhlasan telah memberikan segala kebutuhan kepada penulis,

memberi dorongan dan motivasi baik secara materiil maupun spirituil.

7. Teman-teman angkatan 2006 (Li2s, Iva, Rijal, Reny, Loppy, Ruslan, Saiyid,

Ana, Retina, Zahro, Iin, Rahman, Lina, Ganda, Micin, Iqbal, Ni2k, Lutfi,

Vina, Dewie, Risman, Sod n Hesy). yang telah berbagi kebersamaannya

selama ini dalam senang maupun susah sehingga tetap terjaga persaudaraan

kita.

8. Kakak-kakak dan adik-adik keluarga besar kimia tetap semangat dan terus

semangat, tidak ada kesulitan yang tak dapat diatasi. Semoga ilmu kita dapat

bermanfaat untuk masyarakat.

9. Saudara-saudaraku di UKM KSR-PMI Unit UIN Maliki Malang yang telah

memberikan banyak pengalaman dan membagi kebersamaan sehingga

terasa persaudaraan kita selamanya. Semoga tetap menjadi volunteer

dimanapun berada. “Khairunnas angfauhumlinnas”

10. Semua rekan-rekan dan semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu

persatu atas segala bantuannya kepada penulis.

Penulis menyadari adanya kekurangan dan keterbatasan dalam skripsi ini.

Oleh karena itu, dengan segala kerendahan hati penulis mengharapkan kritik dan

saran yang bersifat membangun dari semua pihak demi penyempurnaan skripsi

ini. Akhir kata, penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi kita

semua.

Malang, 15 Juli 2010

Penulis

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ............................................................................................... i SURAT PERNYATAAN ORISINALITAS ........................................................... ii LEMBAR PERSETUJUAN .................................................................................. iii LEMBAR PENGESAHAN ................................................................................... iv KATA PENGANTAR ............................................................................................ v DAFTAR ISI ......................................................................................................... vii DAFTAR TABEL .................................................................................................. ix DAFTAR GAMBAR .............................................................................................. x DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xii ABSTRAK ........................................................................................................... xiii BAB I PENDAHULUAN ..................................................................................... 1 1.1 Latar Belakang .................................................................................................. 1 1.2 Rumusan Masalah ............................................................................................. 7 1.3 Tujuan Penelitian .............................................................................................. 8 1.4 Batasan Masalah .............................................................................................. 8 1.5 Manfaat Penelitian ............................................................................................ 8 . BAB II TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................... 10 2.1 Pemanfaatan Tanaman dalam Perspektif Agama Islam .................................. 10 2.2 Tanaman Anting-anting (Acalypha Indica Linn ) dalam Perspektif

Ilmu Pengetahuan ............................................................................................ 13 2.3 Ekstraksi Senyawa Aktif ................................................................................. 15 2.4 Uji Fitokimia Senyawa Aktif Tanaman Anting-Anting ................................. 19 2.4.1 Flavonoid ................................................................................................. 19 2.4.2 Tanin ......................................................................................................... 20 2.4.3 Alkaloid .................................................................................................... 21 2.4.4 Triterpenoid ............................................................................................... 22 2.4.5 Steroid ....................................................................................................... 23 2.4.6 Saponin ..................................................................................................... 25 2.5 Identifikasi Senyawa Aktif dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ............ 25 2.6 Uji Toksisitas Terhadap Larva Udang Artemia salina L. ............................... 27 2.6.1 Larva Udang Artemia salina L.................................................................. 31 BAB III METODOLOGI PENELITIAN ............................................................. 35 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian ........................................................................ 35 3.2 Alat dan Bahan Penelitian .............................................................................. 35 3.2.1 Alat .............................................................................................................. 35 3.2.2 Bahan ........................................................................................................... 35 3.3 Tahapan-Tahapan Penelitian .......................................................................... 36 3.4 Pelaksanaan Penelitian .................................................................................. 36 3.5.1 Analisa kadar air ....................................................................................... 36 3.5.2 Preparasi Sampel ....................................................................................... 37 3.5.3 Ekstraksi Senyawa aktif ............................................................................ 37

3.4.3.1 Ekstraksi Senyawa aktif dengan Metode Maserasi ................................... 37 3.5.4 Uji Fitokimia dengan Uji Reagen ............................................................. 38 3.5.4.1 Uji Alkaloid .............................................................................................. 39 3.5.4.2 Uji Flavonoid ............................................................................................ 39 3.5.4.3 Uji Tanin ................................................................................................... 39 3.5.4.3.1 Uji dengan FeCl3 ................................................................................... 39 3.5.4.3.2 Uji dengan Larutan Gelatin .................................................................... 40 3.5.4.4 Uji Saponin ............................................................................................... 40 3.5.4.5 Uji Triterpenoid dan Steroid ..................................................................... 40 3.5.5 Uji Fitokimia dengan KLT ........................................................................... 40 3.5.6 Uji Toksisitas dengan Larva Udang Artemia salina Leach ........................ 42 3.5.6.1 Penetasan Telur ......................................................................................... 42 3.5.6.2 Uji Toksisitas ............................................................................................ 42 3.5 Analisis Data .................................................................................................. 43 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 44 4.1 Analisa Kadar Air ......................................................................................... 44 4.2 Preparasi Sampel ........................................................................................... 47 4.3 Ekstraksi Komponen Aktif ............................................................................ 48 4.4 Uji Fitokimia dengan Reagen ........................................................................ 52 4.5 Uji Fitokimia dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ................................ 61 4.6 Uji Toksisitas Menggunakan Brine Srimp ..................................................... 78 4.7 Pemanfaatan Hasil Penelitian Tanaman Obat dalam Perspektif Agama Islam ............................................................................................................... 87 BAB V PENUTUP ............................................................................................... 93 5.1 Kesimpulan ................................................................................................... 93 5.2 Saran .............................................................................................................. 94 DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 95 LAMPIRAN ........................................................................................................ 102

�

�

�

�

�

DAFTAR TABEL

Tabel 4.1 Kadar Air yang Terkandung dalam Tanaman Anting-anting (Acalypha indica Linn.) ................................................................... 46 Tabel 4.2 Hasil Maserasi Serbuk Tanaman Anting-anting .............................. 51 Tabel 4.3 Hasil Pengamatan Uji Fitokimia ...................................................... 59 Tabel 4.4 Hasil KLT Senyawa Tanin pada Ekstrak Etil Asetat dengan Eluen

Butanol : Asam Asetat : Air (14:1:5) ............................................. 63 Tabel 4.5 Hasil KLT Senyawa Tanin pada Ekstrak Etil Asetat dengan Eluen Asam Asetat Glasial :Air : HCl pekat (30:10:3) .............................. 63 Tabel 4.6 Hasil KLT Senyawa Alkaloid pada Ekstrak Etil Asetat dengan Eluen Kloroform : Metanol (9:1) ..................................................... 65 Tabel 4.7 Hasil KLT Senyawa Alkaloid pada Ekstrak Etil Asetat dengan Eluen Kloroform : Metanol (9,5:0,5) .............................................. 66 Tabel 4.8 Hasil KLT Senyawa Triterpenoid pada Ekstrak Diklorometana dengan Eluen Benzene : Kloroform (3:7) ........................................ 68 Tabel 4.9 Hasil KLT Senyawa Triterpenoid pada Ekstrak Diklorometana dengan Eluen n- Heksana : Etil Asetat (1:1) .................................. 69 Tabel 4.10 Hasil KLT Senyawa Steroid pada Ekstrak Etil Asetat dengan n-heksana : Etil Asetat (7:3) ............................................................ 71 Tabel 4.11 Hasil KLT Senyawa Steroid pada Ekstrak Petroleum Eter dengan n-Heksana : Etil Asetat (7:3) ........................................................... 72 Tabel 4.12 Hasil KLT Senyawa Steroid pada Ekstrak Etil Asetat dengan

Sikloheksana : Etil Asetat (1:1) ....................................................... 74 ��

��

� �� !��" #��$%�

�

�

�

�

�

� � DAFTAR GAMBAR Gambar 2.1 Tanaman Anting-anting (Acalypha indica Linn.) ...................... 14 Gambar 2.2 Struktur Inti Senyawa Flavonoid ................................................. 19 Gambar 2.3 Contoh Struktur Senyawa Golongan Tanin ................................. 20 Gambar 2.4 Contoh Struktur Senyawa Golongan Alkaloid ............................ 21 Gambar 2.5 Contoh Struktur Senyawa Triterpenoid ....................................... 23 Gambar 2.6 Struktur Inti Senyawa Steroid ..................................................... 24 Gambar 2.7 Struktur Inti Senyawa Saponin .................................................... 25 Gambar 2.8 Tahap Penetasan Artemia salina L .............................................. 29 Gambar 2.9 Morfologi Naupilus A. salina ...................................................... 30 Gambar 2.10 Larva Udang Artemia Salina Leach ............................................ 32 Gambar 4.1 Reaksi Dugaan Flavonoid dengan Serbuk Mg dan HCl Pekat ... 53 Gambar 4.2 Reaksi Dugaan Antara Senyawaan Tanin dengan FeCl3............. 54 Gambar 4.3 Reaksi Dugaan Antara Tanin dan Gelatin ................................... 55 Gambar 4.4 Reaksi Dugaan Antara Alkaloid dengan Pereaksi Dragendorff .. 57 Gambar 4.5 Reaksi Dugaan Antara Alkaloid dengan Pereaksi Mayer ........... 57 Gambar 4.6 Hasil KLT Senyawa Tanin pada Ekstrak Etil Asetat dengan

Eluen Butanol : Asam Asetat : Air (14:1:5) setelah Disemprot FeCl3 ............................................................................................ 62

Gambar 4.7 Hasil KLT Senyawa Tanin pada Ekstrak Etil Asetat dengan

Eluen Asam Asetat Glasial: air: HCl pekat (30:10:3) setelah Disemprot FeCl3 .......................................................................... 63

Gambar 4.8 Hasil KLT Senyawa Alkaloid pada Ekstrak Etil Asetat dengan

Eluen Kloroform, Metanol (9:1) setelah Disemprot Reagen Dragendroft ................................................................................. 65

Gambar 4.9 Hasil KLT Senyawa Alkaloid pada Ekstrak Etil Asetat dengan Eluen Kloroform : Metanol (9,5:0,5) setelah Disemprot Reagen Dragendroft ................................................................................. 66

Gambar 4.10 Hasil KLT Senyawa Triterpenoid pada Ekstrak Diklorometana

dengan Eluen Benzene : kloroform (3:7) setelah Disemprot Reagen Lieberman-Burchard ...................................................... 68

Gambar 4.11 Hasil KLT Senyawa Triterpenoid pada Ekstrak Diklorometana

dengan Eluen Heksana : Etil Asetat (1:1) setelah Disemprot Lieberman-Burchard ................................................................... 69

Gambar 4.12 Hasil KLT Senyawa Steroid pada Ekstrak Etil Asetat dengan

Eluen n-Heksana : Etil Asetat (7:3) setelah Disemprot Reagen Lieberman-Burchard ................................................................... 71

Gambar 4.13 Hasil KLT Senyawa Steroid pada Ekstrak Petroleum Eter dengan

Eluen n-Heksana dan Etil Asetat (7:3) setelah Disemprot Reagen Lieberman-Burchard ................................................................... 72

Gambar 4.14 Hasil KLT Senyawa Steroid pada Ekstrak Etil Asetat dengan Eluen Sikloheksana : Etil Asetat (1:1) ........................................ 74 Gambar 4.15 Hasil KLT Senyawa Steroid pada Ekstrak Petroleum Eter dengan Eluen Sikloheksana : Etil Asetat (1:1) setelah Disemprot Reagen Lieberman-Burchard ................................................................... 75 Gambar 4.16 Tahap Penetasan Artemia salina L. ............................................. 80 Gambar 4.17 Morfologi Nauplius A.salina ....................................................... 81 Gambar 4.18 Kurva Mortalitas Larva Udang Artemia salina Leach pada Ekstrak Etil Asetat ....................................................................... 83 Gambar 4.19 Kurva Mortalitas Larva Udang Artemia salina Leach pada Ekstrak Diklorometana ................................................................ 83 Gambar 4.20 Kurva Mortalitas Larva Udang Artemia salina Leach pada Ekstrak Petroleum Eter ................................................................ 84 �

�

�

�

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Diagram Alir Penelitian.............................................................................. 102

Lampiran 2. Skema Kerja ............................................................................................... 103

Lampiran 3. Pembuatan Reagen dan Larutan ................................................................. 109

Lampiran 4. Data Pengukuran Kadar Air Sampel Tanaman Anting-anting ................... 115

Lampiran 5. Perhitungan Rendemen............................................................................... 121

Lampiran 6. Dokumentasi ............................................................................................... 123

Lampiran 7. Data Kematian Larva dan Perhitungan LC50 Uji Toksisitas Masing-

masing Ekstrak......................................................................................... 127

�

�

�

�

�

�

ABSTRAK

Sriwahyuni, I. 2010. Uji Fitokimia Ekstrak Tanaman Anting-Anting (Acalypha indica Linn.) dengan Variasi Pelarut dan Uji Toksisitas Menggunakan Brine Shrimp (Artemia salina Leach) Pembimbing I: Elok Kamilah Hayati, M. Si; Pembimbing Agama: Ach. Nashihuddin, M.A; Konsultan: Rachmawati Ningsih, M.Si.

Kata Kunci: Anting-anting (Acalypha indica Linn.), uji fitokimia, uji toksisitas Artemia salina Leach

Telah dilakukan penelitian tentang uji fitokimia dan uji toksisitas ekstrak tanaman Anting-anting (Acalypha indica Linn.) terhadap larva udang Artemia salina Leach. Al Quran surat an Nahl ayat 11 menjelaskan Allah menumbuhkan berbagai jenis tanaman sebagai tanda kekuasaan Allah sebagai bahan untuk berfikir sehingga dapat dimanfaatkan, salah satunya untuk pengobatan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kandungan senyawa aktif yang terdapat pada tanaman anting-anting dan untuk mengetahui tingkat toksisitas masing-masing ekstrak tanaman anting-anting terhadap larva udang Artemia salina Leach.

Penelitian ini meliputi ekstraksi tanaman anting-anting menggunakan metode ekstraksi maserasi selama 24 jam dengan variasi pelarut yaitu etil asetat, diklorometana, dan petroleum eter. Pengadukkan dibantu dengan shaker selama 3 jam. Ekstrak pekat diuji fitokimia didukung Kromatografi Lapis Tipis serta pengujian toksisitas terhadap larva udang Artemia salina Leach. Data kematian Artemia salina Leach dianalisis dengan analisis probit untuk mengetahui nilai LC50 pada masing-masing ekstrak.

Hasil penelitian menunjukkan adanya senyawa aktif tanin, alkaloid dan steroid pada ekstrak etil asetat, triterpenoid pada ekstrak diklorometana, dan steroid pada ekstrak petroleum eter. Ketiga ekstrak mempunyai potensi aktif, ditunjukkan dari tingkat toksisitas ekstrak petroleum eter, ekstrak diklorometana, dan etil asetat berturut-turut yaitu dengan nilai LC50 11, 8547 ppm, 17,6495 ppm dan 21,6005 ppm. Hal ini menunjukkan adanya manfaat tanaman yang telah disebutkan dalam al Quran, sehingga dapat digunakan sebagai acuan bahwa tanaman anting-anting berpotensi sebagai tanaman obat.

ABSTRACT

Sriwahyuni, I. 2010. Phytochemical Test Extract of Anting-Anting (Acalypha indica Linn.) with Variation Solvents and Toxicity Test Using Brine Shrimp (Artemia salina Leach). Supervisor: Elok Kamilah Hayati, M.Si, supervisor of religion: Ach. Nashihuddin M.A, Rachmawati Ningsih M.Si.

Key Words: Anting-anting (Acalypha indica Linn.), phytochemical test, toxicity test, Artemia salina Leach

The research had been done about Phytochemical test and Brine Shrimp lethality test using Artemia salina Leach of anting-anting (Acalypha indica Linn.) plant extracts. Al Quran surah an-Nahl verse 11 shows that Allah growed plants as symbol of His power and as materials thinking to human about benefit it, such as to medicine. The aim of this research is to find out toxicity level of each anting-anting extract using Artemia salina Leach and the compound in extracts which has a bioactivity potency using Artemia salina Leach.

The research consist of extraction of Anting-anting plant was done with extraction maseration method until 24 hours and shakered until 3 hours. Variation of solvents are ethyl acetate, dichloromethane and petroleum ether. Each solvent extract were examined with Brine Shrimp lethality test and its compound with reagent and separated by Thin Layer Chromatography. The mortality of Artemia salina analyzed by probity analyst.

The phytochemical compounds in each solvent extract are tannin, alkaloid and steroid in ethyl acetate extract, triterpenoid in dichloromethane extract and steroid in petroleum ether extract. The result of toxicity using Artemia salina in anting-anting extracts of petroleum ether, dichloromethane and ethyl acetate solvent, showed respectively are LC50 11, 8547 ppm, 17,6495 ppm dan 21,6005. Each extract has a bioactivity potency using Artemia salina Leach. That statement show the advantage of plant called in al Quran, to basic of anting-anting plant has a potency as medicinal plant.

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Akhir-akhir ini banyak penyakit yang berkembang di Indonesia, ada

penyakit yang disebabkan oleh virus, bakteri maupun hewan. Tentunya hal ini

meresahkan masyarakat, apalagi dengan keadaan perekonomian yang kurang baik

seperti saat ini. Mahalnya harga obat sintetik dan efek samping yang ditimbulkan

dari obat tersebut menjadi permasalahan yang utama di kalangan masyarakat, oleh

karena itu perlu adanya pemecahan dari permasalahan yang terjadi, salah satunya

adalah dengan memanfatkan obat-obatan dari tanaman (herbal).

Indonesia memiliki banyak tanaman yang berpotensi sebagai tanaman

obat, hal ini tidak bisa dilepas dari sumber daya alam Indonesia. Indonesia yang

secara geografis terletak di garis khatulistiwa memiliki beberapa keunggulan,

diantaranya terdapatnya matahari di sepanjang tahun dan tersedianya air. Dua hal

inilah yang menyebabkan proses fotosintesis dapat berlangsung pada tanaman.

Allah menciptakan semua yang ada di dunia ini tidaklah sia-sia. Makhluk hidup

(hewan, tumbuhan dan lain-lain) semuanya dapat dimanfaatkan oleh manusia jika

manusia itu berfikir. Allah menjaga semua yang telah Ia ciptakan agar tetap hidup.

Allah membuktikannya dengan diturunkan oleh-Nya hujan sebagai sumber

kehidupan, dan agar manusia dapat mensyukuri nikmat yang telah Allah berikan

kepadanya. Allah telah menjelaskannya dalam surat an Nahl 11:

� �� ! ��"��

�� # ��$$��

“Dia menumbuhkan bagi kamu dengan air hujan itu tanam-tanaman; zaitun, korma, anggur dan segala macam buah-buahan. Sesungguhnya pada yang demikian itu benar-benar ada tanda (kekuasaan Allah) bagi kaum yang memikirkan.”

Ayat ini menyebutkan beberapa tanaman yang ditumbuhkan Allah dari

yang paling cepat layu, yang paling panjang usianya dan paling banyak

manfaatnya seperti zaitun, kurma dan anggur (Shihab, 2002: 195). Kaum yang

memikirkan akan tanda-tanda kekuasaan-Nya tentu akan dapat mengambil

pelajaran dan manfaat terhadap segala ciptaan-Nya. Sebagaimana memanfaatkan

tanaman Anting-anting sebagai tanaman obat.

Berdasarkan firman Allah tersebut, jelas bahwa Allah menciptakan bumi

yang di dalamnya banyak terdapat tumbuhan yang baik, yang dapat dimanfaatkan

oleh makhluk hidup, diantaranya adalah tanaman anting-anting. Tanaman anting-

anting ini dapat dimanfaatkan sebagai tanaman obat, seperti halnya sabda Nabi

Muhammad saw dalam HR. Ibnu Majah berikut (Farooqi, 2005: 173):

" Allah tidak menciptakan suatu penyakit tanpa menciptakan pula obat untuknya-

Barang siapa mengerti hal ini, ia mengetahuinya dan barang siapa tidak mengerti

hal ini, ia tidak mengetahuinya kecuali kematian ." (HR. Ibnu Majah)

Hadits di atas menunjukkan bahwa Allah Maha Adil yang menciptakan

suatu penyakit beserta obatnya, hal itu akan diketahui manusia dengan adanya

ilmu. Ilmu pengetahuanlah yang akan menuntun manusia untuk menemukan obat-

obatan dari suatu penyakit. Jika manusia tidak mengembangkan ilmu pengetahuan

maka tidak akan pernah tahu bahwa Allah telah menciptakan berbagai macam

tumbuhan yang dapat dimanfaatkan sebagai obat. Ada berbagai obat yang telah

tersedia di alam dan seringkali disebut tanaman (herbal).

Tanaman anting-anting (Acalypha indica L.) dikenal sebagai salah satu

tanaman obat yang dapat tumbuh di pinggir jalan, lapangan rumput, lereng

gunung, kebun. Masyarakat sering menggunakan tanaman anting-anting sebagai

tanaman untuk menyembuhkan penyakit disentri basiler dan disentri amuba, diare,

malnutrisi, mimisan, muntah darah, buang air besar berdarah, buang air berdarah,

malaria (Arisandi dkk., 2008). Masyarakat tradisional telah lama menggunakan/

memanfaatkan tanaman anting-anting untuk pengobatan penyakit disentri, diare,

perdarahan pada rahim, mimisan, melena (berak darah), hematuria (kencing

darah), radang kulit, dan enzema (Wei-Feng et al, 1994).

Obat-obatan modern dengan bahan kimia sintetik memiliki dampak yang

kurang baik dalam mengobati penyakit dibandingkan dengan obat-obatan herbal

yang berasal dari bahan alam, karena memiliki efek samping yang berbahaya bagi

tubuh. Hal ini mendorong dilakukan penelitian ilmiah di bidang pengobatan

herbal yang berasal dari bahan alam. Salah satunya adalah tanaman anting-anting.

Selain itu ada sebagian masyarakat yang masih mengenal tanaman anting-anting

sebagai tanaman liar yang mengganggu. Oleh karena itu perlu adanya penelitian

yang lebih banyak tentang potensi sebagai obat yang berasal dari tanaman anting-

anting.

Penelitian yang telah dilakukan berkaitan dengan tanaman anting-anting

antara lain penelitian Halimah (2010) menunjukkan tingkat toksisitas ekstrak n-

heksana lebih besar daripada ekstrak etanol dan ekstrak kloroform yaitu dengan

nilai LC50 57,0933 ppm, 73,4575 ppm dan 149,374 ppm. Serta kandungan

senyawa yang menunjukkan adanya potensi bioaktivitas dalam ekstrak

berdasarkan uji fitokimia dan uji reagen didukung dengan KLT yaitu adanya

senyawa golongan flavonoid dalam ekstrak etanol, steroid dalam ekstrak

kloroform, dan triterpenoid dalam ekstrak etanol dan n-heksana. Hasil penelitian

uji in vivo ekstrak terhadap aktivitas parasit malaria Plasmodium berghei dalam

mencit yang telah dilakukan oleh Hayati (2009) menunjukkan bahwa untuk

ekstrak n-heksana menunjukkan potensi aktif sebagai antimalaria dengan

menurunkan jumlah parasit plasmodium. Bertambahnya konsentrasi ekstrak

semakin besar menurunkan parasit plasmodium, ekstrak terkecil yaitu 0,015

mg/mL tidak menunjukkan hasil yang positif dalam menekan jumlah parasit

plasmodium. Untuk ekstrak etanol, tidak menunjukkan hasil yang signifikan

dalam menekan pertumbuhan parasit plasmodium.

Kussuryani (2010) mengisolasi dan menguji sifat antibakteri senyawa

kimia akar tanaman anting-anting menggunakan pelarut petroleum eter dan

metanol menunjukkan bahwa pada tanaman anting- anting dapat bersifat sebagai

antibakteri. Hasil peneltiannya menunjukkan ekstrak memiliki konsentrasi daya

hambat sebesar 6,25 mg/mL. Govindarajan (2008) melakukan uji anti bakteri

tanaman anting- anting menggunakan pelarut heksana, kloroform, etil asetat dan

metanol menunjukkan bahwa ekstrak etil asetat berpotensi sebagai anti bakteri

hasil penelitiannya menunjukkan semua ekstrak memiliki konsentrasi daya

hambat minimum pada bakteri gram positif antara 0,156-2,5 mg/mL. Pissuthanan

(2004) melakukan uji toksisitas tanaman Azedirachta indica menggunakan pelarut

metanol dan dipartisi menggunakan air dan diklorometana menunjukkan nilai Lc50

pada ekstrak kasar sebesar 158,18 ppm. Berdasarkan penelitian yang

menggunakan pelarut etil asetat, diklorometana dan petroleum eter tersebut maka

diduga pada tanaman anting-anting memiliki sifat toksik karena tanaman anting-

anting berpotensi sebagai antibakteri dan penelitian lain pada tanaman yang

sejenis tanaman anting-anting dengan menggunakan pelarut diklorometana

memiliki sifat toksik. Sehingga perlu dilakukan penelitian menggunakan pelarut

etil asetat, diklorometana dan petroleum eter.

Halimah (2010) menggunakan variasi pelarut untuk mengekstrak senyawa

aktif pada tanaman anting-anting yang menunjukkan adanya perbedaan golongan

senyawa aktif dan potensi bioaktivitas yang terdapat pada masing-masing ekstrak.

Cara ekstraksi dengan maserasi menggunakan pelarut yang memiliki perbedaan

kepolaran dapat mengekstrak golongan senyawa aktif pada masing-masing pelarut

sesuai dengan kepolarannya. Adanya variasi pelarut dapat digunakan untuk

mengetahui tingkat toksisitas pada masing-masing ekstrak yang sesuai dengan

kelarutannya sehingga dapat digunakan sebagai rujukan untuk mengetahui potensi

bioaktivitas suatu senyawa. Penelitian ini merupakan skrining awal sehingga perlu

dilakukan dengan menggunakan variasi pelarut yang berbeda dari peneliti

sebelumnya untuk mengetahui kandungan golongan senyawa aktif dan potensi

bioaktivitasnya pada masing-masing ekstrak, karena dimungkinkan pada pelarut

yang berbeda senyawa aktif dan potensi bioaktivitas yang terkandung di

dalamnya berbeda pula.

Salah satu organisme yang sesuai untuk mengetahui bioaktivitas senyawa

melalui uji toksisitas adalah brine shrimp (udang laut) dari jenis Artemia salina.

Keistimewaan Artemia sebagai plankton adalah memiliki toleransi (kemampuan

beradaptasi dan mempertahankan diri) pada kisaran kadar garam yang sangat luas.

Artemia mampu mentolerir pada kadar garam yang tinggi dimana tidak ada

satupun organisme lain yang mampu bertahan hidup. Artemia salina Leach dapat

dimanfaatkan sebagai hewan uji dalam penentuan ketoksikan suatu sari atau

senyawa yang diwujudkan sebagai racun, metode ini dikenal dengan BST (Brine

Shrimp Test). Penelitian dengan Artemia salina Leach sebelumnya telah

digunakan dalam berbagai uji hayati (Meyer et al, 1982).

Uji toksisitas dengan menggunakan larva udang Artemia salina Leach atau

Brine Shrimp Test (BST) dapat digunakan sebagai uji pendahuluan pada

penelitian yang mengarah pada uji sitotoksik. Kaitan antara uji toksisitas akut ini

dengan uji sitotoksik adalah jika harga LC50 < 1000 µg/mL. Parameter yang

ditunjukkan untuk menunjukkan adanya aktivitas biologi pada suatu senyawa

pada Artemia salina Leach adalah kematiannya (Meyer et al, 1982).

Toksisitas tanaman sangat dipengaruhi oleh kandungan senyawa kimia

yang terdapat di dalamnya, sedangkan untuk mendapatkan senyawa kimia yang

bersifat aktif tersebut dipengaruhi oleh metode pemisahan meliputi cara ekstraksi

dan pelarut yang digunakan. Perbedaan kandungan senyawa kimia yang ada

menunjukkan perbedaan aktivitas farmakologis dari tanaman yang bersangkutan.

Metode yang digunakan untuk melakukan uji bioaktivitas juga memegang

peranan penting dalam memberikan hasil yang ingin diketahui dari aktivitas

tanaman tersebut selain dipengaruhi oleh jenis senyawa kimia (Lisdawati, 2002).

Penelitian ini menggunakan sampel kering dari seluruh tanaman anting-

anting. Pemisahan senyawa aktif dilakukan dengan metode ekstraksi maserasi

menggunakan pelarut etil asetat, diklorometana, dan petroleum eter yang memiliki

perbedaan kepolaran. Kemudian dilakukan pengujian fitokimia dengan uji reagen

dan kromatografi lapis tipis (KLT) pada masing-masing ekstrak tersebut untuk

mengetahui potensi toksisitas ekstrak dilakukan dengan uji toksisitas terhadap

larva udang Artemia salina (metode Brine Shrimp Lethality Total). Hasil

penelitian ini diharapkan dapat mengetahui golongan senyawa aktif dan tingkat

toksisitas pada tanaman anting-anting untuk dapat dilakukan pengujian

bioaktivitas lebih lanjut.

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang di atas, maka rumusan masalah dari penelitian

ini adalah:

a. Golongan senyawa apakah yang terdapat dalam masing-masing ekstrak

tanaman anting-anting (Acalypha indica L.) dalam tiap fraksi berikut: etil

asetat, diklorometana dan petroleum eter?

b. Bagaimana tingkat toksisitas masing-masing ekstrak tanaman anting-anting

(Acalypha indica L.) dalam tiap fraksi etil asetat, diklorometana dan

petroleum eter terhadap tingkat mortalitas larva udang Artemia salina Leach?

1.3 Tujuan Penelitian

Berdasarkan rumusan masalah di atas, maka tujuan penelitian ini adalah:

a. Untuk mengetahui golongan senyawa yang terdapat dalam ekstrak tanaman

anting-anting (Acalypha indica L.) dalam tiap fraksi etil asetat, diklorometana

dan petroleum eter.

b. Untuk mengetahui tingkat toksisitas masing-masing ekstrak tanaman anting-

anting (Acalypha indica L.) dalam tiap fraksi etil asetat, diklorometana dan

petroleum eter terhadap tingkat mortalitas larva udang Artemia salina Leach.

1.4 Batasan Masalah

Batasan masalah dalam penelitian ini adalah:

a. Sampel yang digunakan adalah tanaman anting-anting (Acalypha indica L.)

yang diperoleh dari daerah sekitar kampus UIN Maulana Malik Ibrahim

Malang, Jawa Timur.

b. Hewan uji untuk uji toksisitas adalah Larva udang (Artemia salina Leach)

yang diperoleh dari Balai Budidaya Air Payau Situbondo.

1.5 Manfaat Penelitian

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah kepada

masyarakat mengenai pemanfaatan tanaman anting-anting bagi kesehatan dan

memberikan informasi ilmiah kepada masyarakat mengenai efek toksik ekstrak

tanaman anting-anting (Acalypha indica L.) terhadap larva udang (Artemia salina

Leach) serta golongan senyawa yang terkandung di dalamnya yang memiliki

potensi bioaktivitas, sehingga dapat digunakan sebagai perbandingan dari

penelitian sebelumnya dan rujukan pada penelitian tahap selanjutnya untuk

mendapatkan pelarut dan ekstrak gabungan.

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Pemanfaatan Tanaman dalam Perspektif Agama Islam

Alqur’an banyak menyebutkan tentang tumbuh-tumbuhan untuk

dimanfaatkan oleh manusia. Sebagaimana Firman Allah dalam QS. Thaha : 53

% �� &�� ' �( ��) ��* �� +�� +�� ! ��,�� "�#� �� - !$%��./��

��

“Yang telah menjadikan bagimu bumi sebagai hamparan dan yang Telah menjadikan bagimu di bumi itu jalan-ja]an, dan menurunkan dari langit air hujan. Maka kami tumbuhkan dengan air hujan itu berjenis-jenis dari tumbuh-tumbuhan yang bermacam-macam (QS. Thaha : 53).

Menurut Shihab (2002: 318) dalam tafsir Al-Mishbah bahwa aneka

tumbuhan dengan bermacam-macam jenis bentuk dan rasanya itu merupakan hal-

hal yang sungguh menakjubkan lagi membuktikan betapa agung penciptanya.

setiap macam tumbuhan diciptakan Allah untuk kemaslahatan umat manusia,

diantaranya sebagai salah satu sumber pangan bagi manusia dan dapat dipetik

hasilnya untuk memenuhi kebutuhan manusia. Manfaat tumbuhan ini salah

satunya digunakan sebagai tanaman obat.

Pengobatan dari Nabi Muhammad saw memang berbeda dengan ilmu

medis para dokter pada umumnya. Rasulullah saw pernah menyebutkan bahwa

tumbuhan herbal baik untuk digunakan sebagai obat. Tumbuhan herbal

merupakan tumbuhan obat yang memang sangat berguna untuk membuang lemak

dan racun-racun dalam tubuh manusia. Produk tumbuhan herbal banyak

digunakan oleh kedokteran untuk mengurangi lemak berlebih penyebab obesitas

dan menyembuhkan berbagai penyakit (Barazing, 2007).

Beberapa tumbuhan herba yang sering digunakan oleh Rasulullah saw

untuk menyembuhkan beberapa penyakit antara lain jintan hitam, kurma, delima,

bawang putih dan berbagai jenis makanan lainnya.

a) Kurma (tamr, ruthb, ajwah, bahl, dan nakhl)

Buah Kurma yang manis dan lezat diketahui banyak mengandung nutrisi

diet. Kurma mengandung 60 % pengganti gula, berikut sejumlah kecil sukrosa di

samping protein, pektin, tannin, sellulosa dan lemak dalam proporsi yang

berbeda-beda. Vitamin-vitamin yang terkandung di dalamnya yaitu A, B, dan C.

Kandungan mineralnya antara lain zat besi, sodium, kalsium, sulfur, khlorin, dan

fosfor. Karena nilai nutrisi yang lengkap ini, kurma adalah yang sangat sehat dan

amat bermanfaat. Nabi Muhammad saw bersabda (Farooqi, 2005: 72):

“Barang siapa mengkonsumsi tujuh butir kurma ajwah pada pagi hari, tidak ada sihir ataupun racun yang akan membahayakan pada hari itu,”(HR Bukhari).

b) Jinten Hitam (Al-habbat as Sauda’, syuniz dan habb al barkah)

Nabi Muhammad saw bersabda (Farooqi, 2005: 2):

“jinten hitam adalah obat dari segala penyakit kecuali sam dan sam adalah kematian,” (HR Bukhari, Muslim, Ibnu Majah dan Ahmad).

Jinten hitam digunakan sebagai bumbu dalam makanan. Sebagai obat

peluruh kentut, peluruh kencing, penghilang zat-zat gangguan menstruasi dan

kelainan ASI, secara eksternal ia juga dapat digunakan untuk merawat kulit. Biji-

bijian ini mengandung minyak essens yang bermanfaat untuk mengobati batuk

dan asma. Biji-bijian ini mempunyai aktivitas antibakteri (Farooqi, 2005: 3).

c) Delima (Rumman)

Delima adalah tanaman asli Asia Barat Daya dan dibudidayakan di

beberapa daerah. Jus buah delima adalah sangat menyegarkan dan mendinginkan

karena mengandung gula, vitamin C, dan zat besi. Delima memperkuat jantung

dan menambah selera makan. Kulit buahnya bermanfaat mengobati diare dan

disentri. Kulit buahnya mengandung tannin, sehngga ia efektif untuk dipakai

sebagai bahan penyamak kulit binatang. Kulit pohonnya mengandung alkaloid

pelletierine. Kulit akarnya bersifat astringent dan anthelmintic, sangat efektif

untuk mengobati cacing pita. Bunganya sangat bermanfaat untuk obat bronchitis.

yang manis amat baik untuk lambung, mengobati sakit tenggorokan, batuk, dada

dan paru-paru. Nabi Muhammad saw bersabda (Farooqi, 2005: 82). “buah delima

dan kulitnya memperkuat pencernaan pada perut.”(HR Abu Nu’aim dan Al-

Jauzi).

d) Lidah buaya (allawa, sabir dan musabbar)

Nabi Muhammad saw bersabda kepada orang yang mengeluhkan kondisi

matanya ketika melaksanakan ibadah haji, “Tutupi dengan lidah buaya,” (HR As

Suyuthi)

Lidah buaya adalah tanaman berair yang lezat rasanya, ditemukan di

daerah tropis dan Afrika Selatan, Malgazy, dan Arab. Beberapa spesiesnya telah

dikenal di beberapa Negara sebagai obat. Sebagai obat, lidah buaya berfungsi

untuk obat pencahar, obat kuat, peningkat gairah seks, pembunuh cacing parasit,

alexiteric, sakit mata, tumor pembengkakan limpa, keluhan liver, muntah-muntah,

luka bakar, dan lain-lain. Campuran glukosa yang disebut alloin terdapat dalam

lidah buaya (Farooqi, 2005: 20).

Rasulullah telah mengajarkan kita mengenai beberapa obat dari tanaman

lainnya untuk mengobati penyakit, sehingga kita bisa meneladani apa yang telah

Rasulullah ajarkan pada kita yaitu dengan memanfaatkan tanaman obat untuk

mengobati suatu penyakit.

2.2 Tanaman Anting-Anting (Acalypha indica L.) dalam Perspektif Ilmu

Pengetahuan

Tanaman anting-anting (Acalypha indica L.) merupakan gulma yang sangat

umum ditemukan tumbuh liar di pinggir jalan, lapangan berumput maupun di

lereng gunung (Muslimah, 2008). Berikut ini akan dijelaskan morfologi tanaman

anting-anting dari akar, batang, daun dan bunga. Batang: tegak, tinggi 30-50cm,

bercabang, berambut halus. Daun: tunggal, tangkai panjang, letak tersebar, bentuk

bulat telur sampai lanset, tipis, ujung dan pangkal runcing, tepi bergerigi, panjang

2,5-8 cm, lebar 1,5-3,5 cm, berwarna hijau. Bunga: majemuk, berkelamin satu,

keluar dari ketiak daun, kecil-kecil, dalam rangkaian berbentuk bulir/malai. Buah:

kotak, bulat, hitam. Biji: berbentuk bulat panjang, berwarna coklat. Akar:

tunggang, berwarna putih kotor (Dalimartha, 2003 dalam Muslimah, 2008).

Gambar 2.1 Anting-anting (Acalypha indica Linn.)

Klasifikasi tanaman anting-anting adalah sebagai berikut (Kartesz, 2000):

Kerajaan : Plantae Subkerajaan : Tracheobionta Divisi : Magnoliophyta Kelas : Magnoliopsyda Sub Kelas : Rosidae Bangsa : Euphorbiales Suku : Euphorbiaceae Marga : Acalipha Jenis : Acalypha indica Linn

Tanaman anting-anting di beberapa daerah dikenal dengan sebutan berikut

di Sumatera: ceka mas (Melayu), lelatang (Jakarta), rumput kokosongan (Sunda),

rumput bolong-bolong (Jawa) (Muslimah, 2008). Kucing galak dan rumput lis-lis

(Malaysia) dan tam ye tuapa dan tam ye meao (Siam) ( Ridley, 1924 dalam

Azmahani, dkk, 2002). Nama asing tanaman ini adalah Tie xian (Cina),

copperleaf herb (Inggris).

Kandungan kimia tanaman anting-anting adalah acalypine, glikosida,

inositol metileneter, triacetomamine dan minyak atsiri (Azmahani, dkk, 2002).

Kartika (2004) menyebutkan bahwa daun tanaman anting-anting (Acalypha indica

L.) mengandung saponin, tannin, flavonoid, acalyphine, dan minyak atsiri. Wei-

Feng et al (1994) menyebutkan adanya senyawa alkaloid, amida, glukosida dan

sterol.

2.3 Ekstraksi Senyawa Aktif

Ekstraksi merupakan proses pemisahan senyawa campuran dengan

menggunakan pelarut yang sesuai. Ekstraksi digunakan untuk mengisolasi produk

alam dari jaringan asli kering tumbuh-tumbuhan. Produk alam volatil diisolasi

dengan cara distilasi uap, sedangkan produk non volatil diisolasi dengan cara

perendaman atau maserasi dalam satu pelarut (Vogel, 1989 dalam Kusnaeni

2008). Secara umum ekstraksi senyawa metabolit sekunder menggunakan metode

maserasi dengan pelarut polar atau metanol. Pada prinsipnya metode maserasi

adalah terdapat waktu kontak yang cukup antara pelarut dengan bahan yang

diekstrak, namun jarang sekali mencapai pemisahan yang sempurna karena

senyawa yang sama bisa terdapat dalam beberapa fraksi. Hasil maserasi maksimal

biasanya dilakukan dengan maserasi menggunakan sederetan pelarut atau metode

Charauxs- Paris yaitu metode ekstraksi dengan menggunakan pelarut yang

berbeda kepolaran, dimana ekstrak pekat pelarut polar diekstraksi kembali dengan

pelarut semipolar dan pelarut non polar (Kusnaeni, 2008).

Maserasi merupakan cara penyarian yang sederhana, dilakukan dengan

cara merendam bahan simplisia dalam cairan penyari. Cairan penyari akan

menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat

aktif, zat aktif akan larut dan karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan

zat aktif di dalam sel dengan yang di luar sel, maka larutan yang terpekat didesak

keluar. Peristiwa tersebut berulang sehingga terjadi keseimbangan konsentrasi

antara larutan di luar sel dan di dalam sel (Octavia, 2009).

Persyaratan untuk mengekstraksi bahan kandungan tumbuhan adalah

tingkat kehalusan yang cocok dari material awal, dengan meningkatnya tingkat

kehalusan, maka luas permukaan yang terkena cairan ekstraksi akan semakin

besar. Serbuk dengan penghalusan yang tinggi kemungkinan sel-sel yang rusak

juga semakin besar, sehingga memudahkan pengambilan bahan kandungan

langsung oleh bahan pelarut (Octavia, 2009).

Penguapan pada rotary evaporator vakum dilakukan pada tekanan rendah

atau dengan kenaikan temperatur dan kecepatan terbesar pada tiik didih larutan.

Cairan organik yang memiliki titik didih rendah, tekanan permukaan akan rendah.

Labu evaporator dipanaskan pada temperatur tertentu di atas waterbath dan

diputar selama evaporasi, sehingga terjadi pencampuran yang sempurna,

mencegah bumping, dan juga akan memilki permukaan yang relatif lebih kuat.

Pelarut menguap dari campuran kemudian terkondensasi oleh erlenmeyer dan

jatuh pada labu penampung (Vogel, 1978).

Kepolaran suatu pelarut menunjukkan tingkat kelarutan pelarut air ataupun

pelarut organik terhadap suatu bahan. Kepolaran ini timbul dari perbedaan dua

kutub (pole) kelarutan. Kecenderungan suatu bahan yang lebih larut dalam air

disebut memiliki sifat yang polar dan sebaliknya yang cenderung lebih larut

dalam pelarut organik disebut nonpolar. Secara fisika, tingkat polaritas ini dapat

ditunjukkan dengan lebih pasti melalui pengukuran konstanta dielektrikum (D)

suatu pelarut. Semakin besar konstanta dielektrikum suatu pelarut disebut semakin

polar (Sudarmadji dkk., 2003). Larutan pengekstraksi yang digunakan disesuaikan

dengan kepolaran senyawa- senyawa yang diinginkan.

Etil asetat adalah suatu zat cair tak berwarna dengan bau buah yang

semerbak, bertitik didih 77 °C dan densitas 0,9 g/mL (Arsyad, 2001). Konstanta

dielektrikum etil asetat adalah 6,02 (Burdick dan Jackson, 2010). Etil asetat

dengan rumus molekul CH3COOC2H5 merupakan senyawa yang tidak berwarna,

berbau semerbak, larut dalam kloroform, alkohol, dan larut dalam air (Sax, 1987).

Etil asetat didapat dengan cara destilasi lambat campuran etil alkohol, asam asetat

dan asam sulfat, merupakan cairan tidak berwarna, seperti aseton dan mudah

terbakar. Etil asetat dapat bercampur dengan minyak atsiri dan digunakan secara

luas dalam industri sebagai pelarut (Wilson and Gisvold, 1982 dalam Farihah,

2008).

Diklorometana atau metilen klorida memilki rumus molekul CH2Cl2.

Merupakan senyawa yang tidak berwarna, larutan yang mudah menguap, larut

dalam alkohol dan eter, memiliki titik didih 40,1 °C, titik lebur -97 °C (Sax,

1987). Diklorometana memiliki konstanta dielektrikum 8,93 (Burdick dan

Jackson, 2010).

Petroleum eter adalah pelarut non polar yang merupakan campuran dari

hidrokarbon cair yang mudah menguap. Petroleum eter akan melarutkan senyawa-

senyawa yang bersifat kurang polar pada selubung sel dan dinding sel seperti

lemak-lemak, terpenoid, klorofil dan steroid (Octavia, 2009). Petroleum eter

merupakan campuran hidrokarbon (bukan eter sebenarnya) yang atsiri dan mudah

terbakar, tidak berwarna, terutama terdiri dari pentana dan heksana. Petroleum

eter memiliki titik didih dalam rentang 20-75 °C, titik lebur -73 °C (Anonim,

2009). Petroleum eter memiliki konstanta dielektrikum 2,0-2,2 (Anonim, 2009)

Bahan simplisia yang secara umum terpotong-potong atau berupa serbuk

kasar disatukan dengan bahan pengekstraksi. Selanjutnya rendaman tersebut

disimpan terlindung dari cahaya langsung (mencegah reaksi yang dikatalis cahaya

atau perubahan warna) dan dikocok kembali. Waktu maserasi pada umumnya 5

hari. Setelah waktu tersebut, artinya keseimbangan antara bahan yang diekstraksi

pada bagian dalam sel dengan yang masuk kedalam cairan telah tercapai. Dengan

pengocokan diharapkan keseimbangan konsentrasi bahan ekstraksi lebih cepat

dalam cairan. Keadaan diam selama maserasi menyebabkan turunnya perpindahan

bahan aktif. Keuntungan maserasi adalah cara kerja dan peralatan yang digunakan

relatif sederhana (Octavia, 2009).

Wulandari, dkk. (2006) melakukan penelitian skrining fitokimia ekstrak

biji kecubung wulung (D.metel) dengan menggunakan etil asetat, hasil penelitian

menunjukkan fraksi etil asetat ekstrak kasar biji D. metel mengandung sterol-

triterpen, alkaloid, kumarin, dan tannin-fenolik dengan LC50 sebesar 986,7 ppm.

Purwatiningsih (2003) melakukan penelitian terhadap tanaman Fagraea racemosa

jacc ex wall menggunakan ekstraksi bertahap dengan pelarut petroleum eter,

kloroform, dan metanol. Hasil uji fitokimia menunjukkan adanya senyawa

alkaloid, flavonoid, saponin, sterol-terpenoid dan tanin. Soemiarti (2009)

melakukan isolasi akar tanaman garcinia menggunakan pelarut diklorometana,

hasil uji fitokimia menunjukkan adanya senyawa triterpenoid

2.4 Uji Fitokimia Senyawa Aktif Tanaman Anting-Anting

Uji fitokimia merupakan pengujian kandungan senyawa-senyawa di dalam

tumbuhan. Tumbuhan umumnya mengandung senyawa aktif dalam bentuk

metabolit sekunder seperti flavonoid, tanin, alkaloid, triterpenoid, steroid,

saponin, dan lain-lain. Senyawa metabolit sekunder merupakan senyawa kimia

yang umumnya mempunyai kemampuan bioaktivitas dan berfungsi sebagai

pelindung tumbuhan tersebut dari gangguan hama penyakit untuk tumbuhan itu

sendiri atau lingkungannya (Lenny, 2006).

2.4.1 Flavonoid

Flavonoid merupakan senyawa polifenol yang tersebar luas di alam.

Golongan flavonoid dapat digambarkan sebagai deretan senyawa C6-C3-C6 yang

artinya kerangka karbonnya terdiri atas dua gugus C6 (cincin benzen tersubstitusi)

disambungkan oleh rantai alifatik tiga-karbon. Pengelompokan flavonoid

dibedakan berdasarkan cincin heterosiklik-oksigen tambahan dan gugus hidroksil

yang tersebar menurut pola yang berlainan pada rantai C3, sesuai struktur

kimianya yang termasuk flavonoid yaitu flavonol, flavon, flavanon, katekin,

antosianidin dan kalkon (Robinson, 1995).

Gambar 2.2 Struktur Inti Senyawa Flavonoid (Robinson, 1995)

Flavonoid termasuk dalam golongan senyawa fenol yang memiliki banyak

gugus –OH dengan adanya perbedaan keelektronegatifan yang tinggi, sehingga

sifatnya polar. Golongan senyawa ini mudah terekstrak dalam pelarut etanol yang

memiliki sifat polar karena adanya gugus hidroksil, sehingga dapat terbentuk

ikatan hidrogen. Purwaningsih (2003) mengisolasi senyawa flavonoid dari biji

kacang tunggak dengan pelarut metanol menghasilkan ekstrak berwarna kuning.

Praptiwi, dkk. (2007) dalam penelitiannya tentang antimalaria ekstrak ki pahit

menunjukkan adanya senyawa flavonoid dari fraksi diklorometana.

2.4.2 Tanin

Tanin merupakan golongan senyawa fenol yang terdapat pada daun, buah

yang belum matang, merupakan golongan senyawa aktif tumbuhan yang termasuk

golongan flavonoid, mempunyai rasa sepat dan mempunyai kemampuan

menyamak kulit. Secara kimia tanin dibagi menjadi dua golongan, yaitu tanin

terkondensasi atau tanin katekin dan tanin terhidrolisis atau tanin galat (Robinson,

1995).

Gambar 2.3 Contoh Struktur Senyawa Tanin (Robinson,1995)

Deny (2007) dalam penelitiannya menjelaskan bahwa tanin dapat

diekstrak dari bagian-bagian tumbuhan tertentu dengan menggunakan pelarut.

Pelarut yang umum adalah aseton, etanol, maupun metanol dan secara komersial

tanin dapat diekstraksi dengan menggunakan pelarut air tetapi yang paling efektif

untuk mengekstrak tanin dari kulit kayu dapat digunakan larutan air dengan etanol

atau aseton dengan perbandingan 1:1.

2.4.3 Alkaloid

Alkaloid adalah suatu golongan senyawa organik yang terbanyak

ditemukan di alam. Hampir seluruh senyawa alkaloid berasal dari tumbuh-

tumbuhan dan tersebar luas dalam berbagai jenis tumbuhan. Semua alkaloid

mengandung paling sedikit satu atom nitrogen yang biasanya bersifat basa dan

dalam sebagian besar atom nitrogen ini merupakan bagian dari cincin heterosiklik

(Lenny, 2006). Penggolongan alkaloid dilakukan berdasarkan sistem cincinnya,

misalnya piridina, piperidina, indol, isokuinolina, dan tropana. Senyawa ini

biasanya terdapat dalam tumbuhan sebagai garam berbagai senyawa organik dan

sering ditangani di laboratorium sebagai garam dengan asam hidroklorida dan

asam sulfat (Robinson, 1995).

OOH OH

OH

OH

Gambar 2.4 Contoh Struktur Senyawa Alkaloid (Robinson, 1995)

Pelarut atau pereaksi alkaloid biasanya menggunakan kloroform, aseton,

amoniak dan metilena klorida. Pereaksi Mayer (kalium tetraiodomerkurat) paling

banyak untuk mendeteksi alkaloid karena pereaksi ini mengendapkan hampir

semua alkaloid. Pereaksi lain yang sering digunakan seperti pereaksi Wagner

(iodium dalam kalium iodida), asam silikotungstat 5 %, asam tanat 5 %, pereaksi

Dragendorff (kalium tetraiodobismutat), dan iodoplatinat. Kromatografi lapis tipis

merupakan salah satu cara cepat untuk pemisahan alkaloid dengan silika gel

sebagai penjerapnya. Pereaksi yang paling umum digunakan untuk menyemprot

kromatogram adalah pereaksi Dragendorff (Robinson, 1995).

Alkaloid umumnya mencakup senyawa-senyawa bersifat basa yang

mengandung satu atau lebih atom nitrogen. Alkaloid adalah suatu golongan

senyawa organik yang terbanyak ditemukan di alam. Hampir seluruh alkaloid

berasal dari tumbuh-tumbuhan dan tersebar luas dalam berbagai jenis tumbuhan

tingkat tinggi. Pada penelitian Sumaryanto (2009) alkaloid diekstraksi

menggunakan pelarut polar (etanol) dan dapat digunakan sebagai antibakteri.

NH

2.4.4 Triterpenoid

Triterpenoid merupakan komponen tumbuhan yang mempunyai bau dan

dapat diisolasi dari bahan nabati dengan penyulingan sebagai minyak atsiri.

Triterpenoid terdiri dari kerangka dengan 3 siklik 6 yang bergabung dengan siklik

5 atau berupa 4 siklik 6 yang mempunyai gugus pada siklik tertentu (Lenny,

2006). Triterpenoid adalah senyawa yang kerangka karbonnya berasal dari 6

satuan isoprena dan secara biosintesis diturunkan dari hidrokarbon C30 asiklik

yaitu skualena. Senyawa ini berstruktur siklik yang kebanyakan berupa alkohol,

aldehida, atau asam karboksilat (Harborne, 1987). Senyawa ini paling umum

ditemukan pada tumbuhan berbiji dan sebagai glikosida. Triterpenoid alkohol

monohidroksi dalam tumbuhan tidak bersamaan dengan pigmen, sedangkan

triterpenadiol berada bersama-sama dengan karotenoid dan triterpenoid asam

dengan flavonoid (Robinson, 1995).

Gambar 2.5 Contoh Struktur Senyawa Triterpenoid (Robinson, 1995)

Soemiarti (2009) melakukan isolasi akar tanaman garcinia menggunakan pelarut

diklorometana, hasil uji fitokimia menunjukkan adanya senyawa triterpenoid.

Bawa (2009) mengisolasi senyawa triterpenoid dari daging buah pare

menggunakan pelarut metanol.

2.4.5 Steroid

Steroid merupakan golongan lipid yang diturunkan dari senyawa jenuh

yang dinamakan siklopentanoperhidrofenantrena, yang memiliki inti dengan 3

cincin sikloheksana terpadu dan 1 cincin siklopentana yang tergabung pada ujung

cincin sikloheksana tersebut (Poedjiadi, 1994). Steroid tersusun dari isopren-

isopren dari rantai panjang hidrokarbon yang menyebabkan sifatnya non-polar

Beberapa senyawaan steroid mengandung gugus –OH yang sering disebut dengan

sterol, sehingga sifatnya yang cenderung lebih polar. Beberapa turunan steroid

yang penting ialah steroid alkohol atau sterol. Steroid lain antara lain asam-asam

empedu, hormon seks (androgen dan estrogen) dan hormon kortikosteroid.

Senyawa steroid terdapat dalam setiap makhluk hidup. Steroid yang ditemukan

dalam jaringan tumbuhan disebut fitosterol, sedangkan yang ditemukan dalam

jaringan hewan disebut kolesterol. Beberapa senyawa ini jika terdapat dalam

tumbuhan akan dapat berperan menjadi pelindung. Senyawa ini tidak hanya

bekerja menolak beberapa serangga tetapi juga menarik beberapa serangga lain

(Robinson, 1995).

Gambar 2.6 Struktur Inti Senyawa Steroid (Poedjiadi, 1994)

Arfianti (2008) dalam penelitiannya mengekstrak senyawa steroid dari

buah mahkota dewa dengan pelarut etanol. Purwatiningsih (2003) melakukan

penelitian terhadap tanaman Fagraea racemosa jacc ex wall menggunakan

ekstraksi bertahap dengan pelarut petroleum eter, kloroform, dan metanol. Hasil

uji fitokimia menunjukkan adanya senyawa alkaloid, flavonoid, saponin, sterol-

terpenoid dan tanin.

2.4.6 Saponin

Saponin berasal dari bahasa latin sapo yang berarti sabun, karena sifatnya

menyerupai sabun. Saponin adalah senyawa aktif permukaan yang kuat,

menimbulkan busa jika dikocok dengan air dan pada konsentrasi yang rendah

sering menyebabkan hemolisis sel darah merah. Saponin dalam larutan yang

sangat encer dapat sebagai racun ikan, selain itu saponin juga berpotensi sebagai

antimikroba, dapat digunakan sebagai bahan baku sintesis hormon steroid. Dua

jenis saponin yang dikenal yaitu glikosida triterpenoid alkohol dan glikosida

struktur steroid. Aglikonnya disebut sapogenin, diperoleh dengan hidrolisis dalam

asam atau menggunakan enzim (Robinson, 1995).

CH3

CH3

R

Gambar 2.7 Struktur Inti Senyawa Saponin (Robinson, 1995)

Lutfillah (2008) dalam penelitiannya menunjukkan adanya senyawa

saponin dari ekstrak tanaman angsret dengan pelarut etanol.

2.5 Identifikasi Senyawa Aktif dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

Kromatografi adalah suatu nama yang diberikan untuk teknik pemisahan

tertentu. Pada dasarnya semua cara kromatografi menggunakan dua fase yaitu fase

diam dan fase gerak. Pemisahan-pemisahan ini bergantung pada gerakan relatif

dari dua fase ini (Sastrohamidjojo, 2007). Prinsip dari pemisahan adalah adanya

perbedaan sifat fisik dan kimia dari senyawa yaitu kecenderungan dari molekul

untuk melarut dalam cairan (kelarutan), kecenderungan molekul untuk menguap

(keatsirian), kecenderungan molekul untuk melekat pada permukaan (adsorpsi,

penjerapan).

Salah satu cara pemisahan adalah Kromatografi Lapis Tipis. Kromatografi

Lapis Tipis (KLT) merupakan salah satu kromatografi yang berdasarkan proses

adsorpsi. Lapisan yang dipisahkn terdiri atas fase diam dan fase gerak (Vogel

1989, dalam Kusnaeni, 2008). Fase diam yang dapat digunakan adalah silika atau

alumina yang dilapiskan pada lempeng kaca atau aluminium. Jika fase diam

O

berupa silika gel maka bersifat asam, jika fase diam alumina maka bersifat basa.

Fase gerak atau larutan pengembang biasanya digunakan pelarut organik atau bisa

juga campuran pelarut organik-anorganik (Gritter, 1991)

Identifikasi dari senyawa-senyawa yang terpisah dari lapisan tipis

menggunakan harga Rf. Harga Rf didefinisikan sebagai berikut (Sastrohamidjojo,

2007):

Harga Rf = asal titik daripelarut oleh digerakkan yangJarak

asal titik dari senyawaoleh digerakkan yangJarak .....(2.1)

Harga-harga Rf untuk senyawa-senyawa murni dapat dibandingkan

dengan harga-harga standart. Harga-harga Rf yang diperoleh hanya berlaku untuk

campuran tertentu dari pelarut dan penyerap yang digunakan (Sastrohamidjojo,

2007).

Setiawati (2001) melakukan penelitian dengan pemisahan menggunakan

KLT untuk senyawa triterpen dengan eluen benzen dan kloroform (3:7)

menghasilkan 6 noda dengan Rf 0,1-0,56, untuk senyawa alkaloid dengan eluen

kloroform dan metanol (9,5: 0,5) menghasilkan 8 noda dengan Rf 0,217-0,849.

Purwaningsih (2003) menyatakan bahwa eluen untuk pemisahan flavonoid adalah

BAA atau campuran butanol-asam asetat-air (4:1:5), kemudian diperiksa di bawah

sinar UV akan berwarna biru dengan diuapi uap amoniak akan berwarna biru

kehijauan dengan noda sebanyak 8 dengan Rf antara 0,14-0,94. Kristianingsih

(2005) melakukan penelitian untuk senyawa saponin menggunakan KLT dengan

eluen kloroform, metanol dan air (20:60:10) menghasilkan 3 noda dengan Rf

antara 0,55-0,73.

2.6 Uji Toksisitas Terhadap Larva Udang Artemia salina L.

Uji toksisitas terhadap larva udang Artemia salina Leach atau Brine Shrimp

Test (BST) dapat digunakan sebagai uji pendahuluan pada penelitian yang

mengarah pada uji sitotoksik. Korelasi antara uji toksisitas akut ini dengan uji

sitotoksik adalah jika mortalitas terhadap Artemia salina Leach yang ditimbulkan

memiliki harga LC50< 1000 µg/mL. Parameter yang ditunjukkan untuk

menunjukkan adanya aktivitas biologi pada suatu senyawa pada Artemia salina

Leach adalah kematiannya (Meyer et al, 1982 dalam Farihah, 2008).

Senyawa bioaktif hampir selalu toksik pada dosis tinggi. Oleh karena itu

daya bunuh in vitro dari senyawa terhadap organisme hewan dapat digunakan

untuk menguji ekstrak tumbuhan yang mempunyai bioaktivitas dan untuk

memonitor fraksi bioaktif selama fraksinasi dan pemurnian. Salah satu organisme

yang sangat sesuai untuk hewan uji tersebut adalah brine shrimp (Lenny, 2006).

Beberapa kelebihan dari uji bioaktivitas dengan brine shrimp test (BST)

menggunakan larva udang Artemia salina adalah cepat waktu ujinya, sederhana

(tanpa teknik aseptik), murah (tidak perlu serum hewan), jumlah organisme

banyak, memenuhi kebutuhan validasi statistik dengan sedikit sampel (Meyer et

al, 1982).

Penetasan telur dilakukan dengan memasukkan telur Artemia salina Leach

ke dalam air laut sambil diaerasi untuk mengontakkan dengan udara selama 48

jam. Proses penetasan Artemia salina Leach ada beberapa tahapan yaitu tahap

hidrasi, pecahnya cangkang dan tahap payung atau tahap pengeluaran. Tahap

hidrasi terjadi penyerapan air sehingga telur yang diawetkan dalam bentuk kering

tersebut akan menjadi bulat dan aktif bermetabolisme. Tahap selanjutnya yaitu

tahap pecahnya cangkang yang disusul dengan tahap pecahnya payung yang

terjadi beberapa saat sebelum naupli (larva) keluar dari cangkang sebagaimana

pada gambar 2.8 (Isnanstyo dan Kurniastuty, 1995 dalam Farihah, 2008).

Gambar 2.8 Tahap Penetasan Artemia salina L. (Isnanstyo dan Kurniastuty, 1995 dalam Farihah, 2008)

Artemia yang baru menetas disebut dengan nauplius. Nauplius berwarna

orange, berbentuk bulat lonjong dengan panjang sekitar 400 mikron, lebar sekitar

170 mikron, dan berat 0,002 mg. Ukuran – ukuran tersebut sangat tergantung

berdasarkan strainnya. Nauplius mempunyai sepasang antenulla dan sepasang

antena. Antenulla berukuran lebih kecil dan pendek dibandingkan dengan

antenna. Selain itu, diantara antenulla terdapat bintik mata yang disebut dengan

occellus. Sepasang mandibula rudimenter terdapat dibelakang antenna. Sedangkan

labrum (semacam mulut) terdapat di bagian ventral. Morfologi nauplius di sajikan

pada Gambar 2.9.

Gambar 2.9 Morfologi Nauplius A.salina (Isnansetyo dan Kurniastuty, 1995

dalam Farihah, 2008)

Pada prosedur uji toksisitas, digunakan air laut sebagai media uji. Air laut

yang digunakan adalah air laut buatan dengan cara melarutkan garam tidak

beriodium ke dalam air. Konsentrasi yang digunakan adalah 3,8 % yaitu dengan

melarutkan 38 g garam tiap 1 L air. Prosedur uji toksisitas dengan metode brine

shrimp ini adalah sebanyak 10 ekor larva udang laut dimasukkan ke dalam tabung

uji yang berisi ekstrak dan sekitar 4 mL air laut. Ekstrak yang digunakan sebanyak

5000, 500, dan 50 �g dan diulang masing-masing sebanyak 3 kali, sehingga akan

terdapat 9 tabung uji. Ekstrak yang sukar larut dalam air laut, terlebih dahulu

ditambahkan DMSO dengan batas penggunaan 50 ml per 5 mL air laut.

Tambahkan air laut hingga volume menjadi 5 ml, sehingga konsentrasi ekstrak

yang digunakan adalah 1000, 100, dan 10 �g/mL. Larutan kontrol terdiri atas 5 ml

air laut yang berisi 10 ekor larva udang laut. Setelah 24 jam, jumlah larva udang

yang mati untuk tiap-tiap konsentrasi dihitung dan dicatat. Bila dalam larutan

kontrol ada larva udang yang mati maka jumlah udang sampel adalah jumlah

udang pada tiap-tiap konsentrasi dikurangi jumlah larva udang laut yang mati

pada larutan control (Mc Laughlin,et al., 1988 dalam Sumaryanto, 2009).

Dimetilsulfoksida (DMSO) merupakan cairan tak berwarna yang memiliki

rumus (CH3)2SO. Merupakan pelarut yang dapat melarutkan senyawa polar

maupun non polar. DMSO sering digunakan sebagai pelarut untuk reaksi kimia

yang melibatkan garam. DMSO memilki titik lebur 18,5 °C, titik didih 189 °C,

konstanta dielektrikum 46,68 (Anonim, 2010). DMSO merupakan cairan yang

tidak toksik sering digunakan dalam sintesis farmasi, pembuatan elektronik, dan

pemberian obat di dalam tubuh. Penggunaanya didukung oleh lebih dari 45 tahun

pengalaman industri dan akademik (Anonim, 2007)

2.6.1 Larva Udang Artemia salina L.

Salah satu organisme yang sangat sesuai untuk mengetahui bioaktivitas

senyawa melalui uji toksisitas adalah brine shrimp (udang laut) dari jenis Artemia

salina. Brine shrimp merupakan spesies perairan sejenis udang primitif. Pertama

ditemukan di Lymington, England pada tahun 1755. Artemia bisa ditemukan di

pedalaman danau air asin di seluruh dunia, tetapi tidak ditemukan di samudra.

Artemia yang dikenal dengan baik dan dikembangkan yaitu dari spesies Artemia

salina (Anonim, 2009).

Telur Artemia salina atau cyste berbentuk bulat berlekuk dalam keadaan

kering dan bulat penuh dalam keadaan basah. Warnanya coklat yang diselubungi

oleh cangkang yang tebal dan kuat. Cangkang ini berguna untuk melindungi

embrio terhadap pengaruh kekeringan, benturan keras, sinar ultraviolet dan

mempermudah pengapungan. Cangkang telur Artemia salina dibagi dalam dua

bagian yaitu korion (bagian luar) dan kutikula embrionik (bagian dalam). Lapisan

ketiga dinamakan selaput kutikuler luar yang terdapat di antara kedua lapisan

tersebut (Anonim, 2008).

Gambar 2.10 Larva Udang Artemia salina Leach (Anonim, 2009)

Brine shrimp memiliki klasifikasi sebagai berikut (Bougis, 1979 dalam

Farihah, 2008).

Kerajaan : Animalia Divisi : Arthropoda Subdivisi : Crustacea Kelas : Branchiopoda Bangsa : Anostraca Suku : Artemiidae Marga : Artemia L. Jenis : Artemia salina Leach

Telur Artemia dapat mengadsorbsi air, jika tersinari oleh sinar matahari

atau pada suhu sekitar 26-28 ºC maka akan menetas setelah 24-48 jam tergantung

pada kondisi lingkungan. Artemia salina yang baru menetas disebut dengan naupli

(larva) yang memiliki ukuran 0,25 mm (0,01 inci) (Anonim, 2007).

Artemia diperdagangkan dalam bentuk telur istirahat yang disebut kista.

Kista ini dilihat dengan mata telanjang berbentuk bulat-bulatan kecil berwarna

kelabu kecoklatan dengan diameter sekitar 300 mikron (Farihah, 2008)

Artemia salina mengalami pubertas selama 8-14 hari dan akan hidup

selama 4-5 minggu tergantung pada konsentrasi garam, terlalu banyak garam

maka harapan hidup akan berkurang. Hewan ini dapat tumbuh dan berkembang

pada air garam. Larutan air garam dapat dibuat dengan melarutkan 30g garam ke

dalam 1L air. Banyak orang menggunakan garam biasa untuk membuat medianya

tanpa adanya penambahan iodium dan zat kimia lainnya karena dapat

memperburuk pertumbuhannya. Air laut merupakan media pertumbuhannya yang

lebih baik. Pembiakan Artemia salina dapat dilakukan melalui perkawinan antara

Artemia salina jantan dan betina, tetapi Artemia salina juga dapat

berkembangbiak tanpa perkawinan. Artemia salina betina dapat mempunyai

keturunan sekitar 300 setiap 4 hari. Makanan Artemia salina berupa bubuk alga

ataupun ragi (Anonim, 2007).

Dalam pemeliharaan Artemia salina makanan yang diberikan adalah:

katul, padi, tepung beras, tepung terigu, tepung kedelai dan ragi Artemia hanya

dapat menelan makanan yang berukuran kecil yaitu kurang dari 50 mikron.

Apabila makanan lebih besar dari ukuran itu, makanan tidak akan tertelan karena

Artemia mengambil makanan dengan jalan menelannya bulat – bulat. Makanan

yang akan ditelan itu dikumpulkan dulu ke depan mulut dengan menggerak

gerakkan kakinya. Gerakan kaki dilakukan terus-menerus hingga makanan akan

terus bergerak masuk ke dalam mulutnya. Selain untuk mengambil makanan,

kakinya berfungsi sebagai alat untuk bergerak dan bernafas (Mudjiman, 2006

dalam Farihah, 2008).

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

3.6 Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Februari sampai dengan Mei 2010 di

Laboratorium Kimia Organik dan Laboratorium Bioteknologi Universitas Islam

Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang.

3.7 Alat dan Bahan Penelitian

3.2.1 Alat

Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah oven, blender, kaca arloji, cawan

penguap, timbangan analitik, gelas ukur 100 mL, erlenmeyer 300 mL, pengaduk

kaca, aluminium foil, penyaring Buchner, kertas saring, rotary evaporator, beaker

glass 100 mL, desikator, pipet tetes, pipet ukur, tabung reaksi, penjepit, corong

kaca, bunsen spiritus, lampu UV, labu ukur, pipet mikro.

3.2.2 Bahan

Bahan utama yang digunakan dalam penelitian ini adalah tanaman anting-anting

(Acalypha Indica), petroleum eter, diklorometana, etil asetat, asam sulfat, logam

Mg, FeCl3, gelatin, asam klorida, metanol, reagen Mayer, reagen Dragendroft,

reagen Lieberman-Burchard, amonia, kloroform, asam asetat glasial, n-heksana,

sikloheksana, benzena, plat KLT, butanol, asam asetat, kertas saring, larva udang

(Artemia salina Leach), ragi roti, DMSO dan air laut.

3.8 Tahapan-Tahapan Penelitian

Penelitian ini dilakukan dengan tahapan-tahapan sebagai berikut:

1. Uji kadar air.

2. Preparasi sampel.

3. Ekstraksi senyawa aktif dengan maserasi.

4. Uji fitokimia senyawa yang aktif dengan uji reagen

5. Pemisahan ekstrak aktif dengan Kromatografi Lapis Tipis

6. Uji toksisitas dengan larva udang Artemia salina Leach.

3.9 Pelaksanaan Penelitian

3.4.1 Analisa kadar air

Analisa kadar air dilakukan dengan metode thermografi yaitu dengan pemanasan.

Analisa ini dilakukan dalam tiga bagian yaitu batang-akar dan daun-bunga dan

seluruh tanaman yang dilakukan sebanyak 5 kali pengulangan. Cawan yang

digunakan dipanaskan dahulu dalam oven pada suhu 100-105º C sekitar 15 menit

untuk menghilangkan kadar airnya, kemudian cawan disimpan dalam desikator

sekitar 10 menit. Cawan tersebut selanjutnya ditimbang dan dilakukan perlakuan

yang sama sampai diperoleh berat cawan yang konstan. Sampel dipotong kecil-

kecil, Sampel ditimbang sebanyak 5 g dan dimasukkan ke dalam cawan yang

telah diketahui beratnya, selanjutnya dikeringkan di dalam oven pada suhu 100-

105º C selama sekitar 1 jam. Sampel kering didinginkan dalam desikator dan

ditimbang. Sampel tersebut dipanaskan kembali dalam oven ± 20 menit pada suhu

yang sama, didinginkan dalam desikator dan ditimbang kembali. Perlakuan ini

diulangi sampai tercapai berat konstan. Kadar air dalam tanaman dihitung

menggunakan rumus berikut:

Kadar air = %100)()( ×

−−

abcb

................................................................. (3.1)

Keterangan: a = berat konstan cawan kosong

b = berat cawan + sampel sebelum dikeringkan

c = berat konstan cawan + sampel setelah dikeringkan

Faktor koreksi =airkadar%100

100−

............................................................... (3.2)

% Kadar air terkoreksi = Kadar air- Faktor koreksi

3.4.2 Preparasi Sampel

Daun dan batang anting-anting yang telah dicuci, dikeringkan di udara terbuka,

dipotong kecil-kecil, kemudian dikeringkan dengan oven pada suhu 30o-37o C.

Setelah kering anting-anting diblender sampai berbentuk serbuk.

3.4.3 Ekstraksi Senyawa aktif

3.4.3.1 Ekstraksi Senyawa aktif dengan Metode Maserasi

Ekstraksi komponen aktif dilakukan dengan cara ekstraksi maserasi/ perendaman

dengan pelarut yang memiliki tingkat kepolaran yang berbeda yaitu etil asetat,

diklorometan, dan petroleum eter. Serbuk tanaman anting-anting ditimbang

sebanyak 60 g dan perlakuan dibagi menjadi dua masing-masing 30 g untuk

proses ekstraksi. Lalu diekstraksi secara maserasi masing-masing menggunakan

150 mL pelarut etil asetat selama 24 jam dengan pengocokan selama 3 jam

menggunakan Shaker, kemudian ampas yang diperoleh direndam dengan 150 mL

pelarut yang sama sampai diperoleh filtrat yang berwarna pucat. Selanjutnya

disaring dan ampasnya dikeringkan pada suhu ruang hingga terbebas dari pelarut

etil asetat.

Ampas yang telah kering dimaserasi kembali menggunakan 150 mL pelarut

diklorometana selama 24 jam dengan 3 jam pengocokan menggunakan shaker,

kemudian ampas yang diperoleh direndam dengan 150 mL pelarut yang sama

sampai diperoleh filtrat yang berwarna pucat. Ampas yang diperoleh kembali

dikeringkan pada suhu ruang sampai terbebas dari diklorometana. Selanjutnya

ampas yang telah kering dimaserasi kembali dengan 150 mL pelarut petroleum

eter selama 24 jam dengan 3 jam pengocokan menggunakan shaker, kemudian

ampas yang diperoleh direndam dengan 150 mL pelarut yang sama sampai

diperoleh filtrat yang berwarna pucat. Ketiga ekstrak yang diperoleh masing-

masing dipekatkan dengan rotary evaporator sampai diperoleh ekstrak pekat etil

asetat, diklorometana, dan petroleum eter. Ketiga ekstrak pekat yang diperoleh

selanjutnya diuji fitokimia dengan uji reagen dilajutkan dengan pemisahan dengan

KLT berdasarkan kandungan golongan senyawa yang positif dari hasil uji reagen,

lalu diuji toksisitasnya dengan mengunakan larva udang Artemia salina L.

terhadap ekstrak yang memiliki LC50< 1000 �g/mL.

3.4.4 Uji Fitokimia dengan Uji Reagen

Uji fitokimia kandungan senyawa aktif dengan uji reagen dari ekstrak pekat etil

asetat, diklorometana dan petroleum eter dari tanaman anting-anting dilarutkan

dengan sedikit masing-masing pelarutnya. Kemudian dilakukan terhadap uji

alkaloid, flavonoid, tanin, saponin, triterpenoid dan steroid.

3.4.4.1 Uji Alkaloid

Ekstrak tanaman anting-anting dimasukkan dalam tabung reaksi, ditambah 0,5 mL

HCl 2% dan larutan dibagi dalam dua tabung. Tabung I ditambahkan 2-3 tetes

reagen Dragendorff, tabung II ditambahkan 2-3 tetes reagen Mayer. Jika tabung I

terbentuk endapan jingga dan pada tabung II terbentuk endapan kekuning-

kuningan, menunjukkan adanya alkaloid.

3.4.4.2 Uji Flavonoid

Ekstrak tanaman anting-anting dimasukkan dalam tabung reaksi kemudian

dilarutkan dalam 1-2 mL metanol panas 50%. Setelah itu ditambah logam Mg dan

4-5 tetes HCl pekat. Larutan berwarna merah atau jingga yang terbentuk,

menunjukkan adanya flavonoid.

3.4.4.3 Uji Tanin

3.4.4.3.1 Uji dengan FeCl3

Ekstrak tanaman anting-anting ditambahkan dengan 2-3 tetes larutan FeCl3 1%.

Jika larutan menghasilkan warna hijau kehitaman atau biru tinta, maka bahan

tersebut mengandung tanin.

3.4.4.3.2 Uji dengan Larutan Gelatin

Ekstrak tanaman anting-anting dimasukkan dalam tabung reaksi ditambah dengan

larutan gelatin. Jika terbentuk endapan putih, menunjukkan adanya tanin.

3.4.4.4 Uji Saponin

Ekstrak tanaman anting-anting dimasukkan dalam tabung reaksi ditambah 10 mL

air sambil dikocok selama 1 menit, apabila menimbulkan busa ditambahkan 2

tetes HCl 1 N, bila busa yang terbentuk bisa tetap stabil maka ekstrak positif

mengandung saponin.

3.4.4.5 Uji Triterpenoid dan Steroid

Ekstrak tanaman anting-anting dimasukkan dalam tabung reaksi, dilarutkan dalam

0,5 mL kloroform lalu dipanaskan dan didinginkan. Diambil 1 mL dan

dimasukkan dalam tabung reaksi lalu diteteskan pereaksi Lieberman-burchard.

Jika hasil yang diperoleh berupa cincin kecoklatan atau violet pada perbatasan dua

pelarut menunjukkan adanya triterpenoid, sedangkan jika terbentuk warna hijau

kebiruan menunjukkan adanya steroid.

3.4.5 Uji Fitokimia dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

Uji fitokimia dengan KLT dilakukan terhadap golongan senyawa yang positif dari

hasil uji fitokimia dengan uji reagen. Identifikasi dengan KLT digunakan plat

silika gel F254. Masing-masing plat dengan ukuran 1x10 cm2. Ekstrak tanaman

anting-anting ditotolkan pada jarak ± 1 cm dari tepi bawah plat dengan pipa

kapiler kemudian dikeringkan dan dielusi dengan masing-masing fase gerak

golongan senyawanya. Setelah gerakan fase gerak sampai pada garis batas, elusi

dihentikan. Noda-noda pada permukaan plat diperiksa di bawah sinar UV pada

panjang gelombang 254 nm dan 366 nm, kemudian diamati pada masing-masing

hasil nodanya. Pengembang dan reagen penguji masing-masing golongan

senyawa adalah sebagai berikut:

1) Golongan senyawa alkaloid: digunakan pengembang campuran fase gerak

kloroform-metanol (9,5:0,5) dan (9:1) (Sumaryanto, 2009) dan pereaksi

Dragendorff untuk mendeteksi yang menunjukkan bercak coklat jingga

(Lutfillah, 2008).

2) Golongan senyawa flavonoid: digunakan pengembang kloroform: metanol

(8:2) (Aripin, 2007) dan butanol-asam asetat-air (4:1:5) dan diuapi uap

amoniak dalam akan menghasilkan warna biru kehijauan (Kusnaeni, 2008).

3) Golongan senyawa tanin: digunakan pengembang butanol-asam asetat-air

(14:1:5), dan asam asetat glasial-air-HCl pekat (30:10:3), kemudian dengan

penyemprot FeCl3 1% menghasilkan warna lembayung (Harborne,1987).

4) Golongan senyawa saponin: digunakan pengembang campuran kloroform-

metanol-air (20:60:10) dan (14:6:1) ketika ditambah H2SO4 0,1 M akan

menimbulkan warna ungu-ungu gelap (Kristianingsih, 2003).

5) Golongan senyawa triterpenoid: digunakan pengembang benzene- kloroform

(3:7) (Setiawati, 2001) dan n-heksana-etil asetat (2:8) serta dengan pereaksi

Lieberman-burchard menghasilkan warna merah ungu (violet)

6) Senyawa steroid: digunakan pengembang sikloheksana: etil asetat (1:1) dan n-

heksana-etil asetat (7:3) dengan pereaksi Lieberman-Burchard menunjukkan

warna hijau kebiruan.

3.4.6 Uji Toksisitas dengan Larva Udang Artemia salina Leach

3.4.6.1 Penetasan Telur

Telur Artemia salina Leach dimasukkan dalam air laut yang telah diaerasi dan

diberi penerangan dengan cahaya lampu. Telur akan menetas dalam waktu 24-48

jam dan disiapkan untuk digunakan sebagai target uji toksisitas.

3.4.6.2 Uji Toksisitas

Perlakuan uji toksisitas dilakukan sebanyak 3 kali ulangan pada masing-masing

ekstrak sampel. Botol disiapkan untuk pengujian, masing-masing ekstrak

membutuhkan 7 botol dan 3 botol sebagai kontrol. Ekstrak kental etil asetat,

diklorometana, dan petroleum eter, ditimbang sebanyak 10 mg dan dilarutkan

dengan menggunakan pelarutnya masing-masing sebanyak 1 mL untuk membuat

larutan stok 10.000 ppm. Dari larutan stok tersebut kemudian dipipet sesuai

dengan konsentrasinya, sehingga konsentrasinya masing-masing larutan menjadi

5, 25, 50, 100, 150, 200, dan 250 ppm. dimasukkan ke dalam botol dan pelarutnya

diuapkan selama 24 jam. Selanjutnya dimasukkan 100 �L dimetil sulfoksida

(DMSO), 2 ml air laut, 10 ekor larva udang, dan setetes larutan ragi roti.

Kemudian ditambahkan air laut sampai volumenya menjadi 10 mL.

Kontrol dibuat dengan dimasukkan 2 mL air laut, 100 �L dimetil sulfoksida, 10

ekor larva udang dan setetes larutan ragi roti ke dalam botol, kemudian

ditambahkan air laut sampai volumenya menjadi 10 mL. Pengamatan dilakukan

selama 24 jam terhadap kematian larva udang. Analisis data dilakukan untuk

mencari LC50

dengan analisis probit.

3.10 Analisis Data

Data yang diperoleh dibuat dalam bentuk tabel dan grafik, kemudian

dideskripsikan hasilnya. tingkat mortalitas larva udang Artemia salina Leach

dapat diketahui dengan melakukan uji LC50 dengan analisa probit dengan tingkat

kepercayaan 95% menggunakan program MINITAB 14.

�

�

�

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

Pada bab ini dijelaskan tentang hasil-hasil penelitian dan pembahasan

meliputi analisa kadar air, preparasi sampel, ekstraksi senyawa aktif dengan

maserasi, uji fitokimia senyawa yang aktif dengan uji reagen, pemisahan ekstrak

aktif dengan kromatografi lapis tipis dan uji toksisitas dengan larva udang

Artemia salina Leach.

4.1 Analisa Kadar Air.

Kadar air yang terdapat dalam tanaman umumnya berbeda-beda sesuai

dengan kondisi lingkungannya. Begitupula tanaman anting-anting, memiliki

susunan dalam dan bentuk luar yang berbeda dengan tumbuh-tumbuhan lain.

Tumbuh-tumbuhan dapat menyesuaikan diri dalam kondisi air yang melimpah

dengan susunan batang, daun dan akarnya memiliki organ ventilasi sangat banyak

karena digunakan untuk mendapatkan oksigen untuk pernapasan yang jumlahnya

sangat sedikit dalam air. Lain halnya dengan tumbuhan yang hidup di tanah dan

iklim kering. Tumbuhan jenis ini paling banyak mengalami penyesuaian dalam

rangka mempertahankan diri dari kekeringan, angin, dan panas yang tinggi.

Terdapat daun yang membatasi penguapan air dan mengurangi panas sinar

matahari. Daun-daun tersebut fungsinya digantikan oleh batang yang pada kondisi

tertentu dapat membesar disebabkan oleh air yang dikandungnya (Pasya, 2004).

Begitupula pada tanaman anting-anting yang menyesuaikan diri dengan kondisi

lingkungannya, kadar air yang terkandung di dalamnya berbeda pula.

Penelitian ini menggunakan sampel tanaman anting-anting di sekitar

kampus Universitas Islam Negeri Maliki Malang yang tanahnya berupa tanah

kering. Analisis kadar air yang dilakukan dengan menggunakan metode

thermografi. Analisa ini dilakukan dalam tiga bagian yaitu batang-akar dan daun-

bunga dan seluruh tanaman yang dilakukan sebanyak 5 kali pengulangan untuk

memperoleh keakuratan data. Sampel yang digunakan dipanaskan dalam oven

pada suhu 100-105º C selama 1 jam untuk menghilangkan kadar airnya kemudian

sampel disimpan dalam desikator sekitar 10 menit. Sampel tersebut selanjutnya

ditimbang dan dilakukan perlakuan yang sama sampai diperoleh berat konstan.

Hal tersebut sesuai dengan Winarno (2002) yang menyatakan bahwa penetapan

kandungan air dapat dilakukan dengan beberapa cara. Hal ini tergantung pada

sifat dan bahannya. Pada umumnya penentuan kadar air dilakukan dengan cara

mengeringkan bahan dalam oven pada suhu 105-110o C selama 3 jam atau sampai

didapat berat yang konstan. Tercapainya berat yang konstan menunjukkan air

yang terdapat dalam tanaman telah teruapkan secara maksimal.

Sampel yang digunakan sebelumnya diiris menjadi bagian-bagian yang

lebih kecil hal ini bertujuan untuk memperbanyak luas permukaan sehingga

sampel menjadi lebih cepat kering. Pengukuran kadar air dibagi menjadi 3 bagian

yaitu bunga dan daun, batang dan akar, serta keseluruhan tanaman dengan 5 kali

pengulangan untuk mendapatkan keakuratan data. Data perhitungan kadar air

sampel tanaman anting-anting ditunjukkan pada lampiran 4. Pengukuran kadar air

ini dilakukan terhadap 2 bagian karena kandungan air dalam bagian tanaman ini

berbeda, sebagaimana pada Tabel 4.1.

Tabel 4.1 Kadar air yang terkandung dalam tanaman Anting-anting (Acalypha indica Linn.)

Sampel Kadar air (%)

Daun dan bunga 70,10 Batang dan akar 61,42

Seluruh tanaman 60,01

Kandungan air pada masing-masing bagian tanaman berbeda, pada bagian

daun dan bunga lebih tinggi yang disebabkan karena pada stomata di bagian daun

merupakan pusat terjadinya proses fotosintesis yang kaya akan kandungan air,

sedangkan bagian akar dan batang digunakan sebagai transport nutrisi untuk

seluruh bagian tumbuhan. Air akan bereaksi dengan karbondioksida yang

menghasilkan energi dan oksigen yang dikeluarkan saat respirasi sebagaimana

reaksi berikut (Kimball, 1983):

Kandungan air yang cukup tinggi yaitu lebih tinggi dari 10 % dari ketiga

sampel tanaman ini menunjukkan perlu adanya pengeringan kandungan airnya

untuk proses penyimpanan agar kerusakan akibat degradasi oleh mikroorganisme

maupun penguraian oleh enzim dapat diminimalkan. Bila kadar air yang

terkandung dalam suatu bahan/sampel organik kurang dari 10 % maka kestabilan

optimum bahan akan dapat tercapai dan pertumbuhan mikroba dapat dikurangi

(Puspita, 2009). Sampel yang telah dihilangkan kadar airnya cenderung mudah

menyerap air sehingga perlu dilakukan penyimpanan dalam tempat yang kedap

6 CO2 + 6 H2O C6H12O6 + 6 O2

udara. Sampel segar awalnya berwarna hijau, setelah kering warnanya berubah

menjadi hijau kecoklatan. Hal ini terjadi akibat adanya pemanasan yang dapat

merusak klorofil pada tanaman.

4.2 Preparasi Sampel

Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah seluruh bagian tanaman

anting-anting yang segar dan kering. Tahap pertama sampel diambil, kemudian

dicuci untuk menghilangkan kotoran yang berupa tanah atau debu yang dapat

mengganggu dalam proses ekstraksi kemudian dikeringanginkan agar sisa air

hasil pencucian dapat kering. Seluruh bagian tanaman selanjutnya dipotong kecil-

kecil untuk memperbanyak luas permukaan sehingga mempercepat proses

pengeringan dan mempermudah penggilingan. Selanjutnya dikeringkan dengan

oven pada suhu 30-37 ºC sampai kering. Pengeringan dilakukan pada suhu

tersebut agar kandungan senyawa kimia yang terdapat pada tanaman tidak

mengalami kerusakan.

Pengeringan dimaksudkan untuk mengurangi kadar air, menghentikan

reaksi enzimatis, dan mencegah tumbuhnya jamur sehingga dapat disimpan lebih

lama (pengawetan) dan tidak mudah rusak sehingga komposisi kimianya tidak

mengalami perubahan. Sampel yang telah kering berwarna hijau kecoklatan ini

dihaluskan menggunakan blender sehingga diperoleh serbuk sampel yang

berwarna hijau kecoklatan. Pembuatan serbuk dapat mempermudah proses

ekstraksi. Semakin kecil bentuknya semakin besar luas permukaannya maka

interaksi zat cairan ekstraksi akan semakin besar, sehingga proses ekstraksi akan

semakin efektif. Serbuk dengan penghalusan yang tinggi kemungkinan sel-sel

yang rusak juga semakin besar, sehingga memudahkan pengambilan bahan

kandungan langsung oleh bahan pelarut (Octavia, 2009).

4.3 Ekstraksi komponen aktif

Ekstraksi merupakan proses pemisahan senyawa campuran dengan

menggunakan pelarut yang sesuai. Ekstraksi digunakan untuk mengisolasi produk

alam dari jaringan asli kering tumbuh-tumbuhan. Pada proses ini dilakukan 2 kali

ulangan, untuk memperoleh keakuratan data. Serbuk sampel ditimbang sebanyak

30 g dengan 2 kali ulangan, kemudian diekstraksi dengan variasi pelarut

berdasarkan kepolarannya agar senyawa yang terkandung dalam tanaman ini

dapat terekstrak ke dalam pelarut berdasarkan tingkat kepolarannya tersebut.

Ekstraksi yang digunakan yaitu dengan ekstraksi maserasi karena pengerjaannya

cukup sederhana. Pada prinsipnya metode maserasi adalah terdapat waktu kontak

yang cukup antara pelarut dengan bahan yang diekstrak. Hasil maserasi maksimal

biasanya dilakukan dengan maserasi menggunakan sederetan pelarut secara

berganti-ganti atau metode Charauxs- Paris yaitu metode ekstraksi dengan

menggunakan pelarut yang berbeda kepolaran, dimana ekstrak pekat pelarut polar

diekstraksi kembali dengan pelarut semipolar dan pelarut non polar (Kusnaeni,

2008).

Prinsip utama dalam maserasi sampel ini adalah mengekstrak senyawa

aktif yang dapat larut dalam pelarut berdasarkan tingkat kepolaran masing-masing

pelarutnya atau dikenal dengan istilah like dissolve like. Senyawa polar akan

terekstrak dalam pelarut etil asetat, senyawa semipolar akan terekstrak dalam

pelarut diklorometana dan senyawa non-polar akan terekstrak dalam pelarut

petroleum eter.

Maserasi dilakukan dengan cara merendam serbuk sampel selama 24 jam

ke dalam pelarutnya. Proses pengadukannya dibantu dengan shaker selama 3 jam

dengan kecepatan 120 rpm untuk mempercepat proses ekstraksinya karena

kecepatan pengadukannya dapat dilakukan secara konstan. Pelarut akan

menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung

senyawa aktif. Senyawa aktif akan larut karena adanya perbedaan konsentrasi

antara larutan senyawa aktif di dalam dan di luar sel, maka cairan hipertonis akan

masuk ke cairan yang hipotonis sehingga terjadi keseimbangan. Pengadukan

diperlukan untuk meratakan konsentrasi larutan di luar serbuk sampel sehingga

tetap terjaga adanya derajat perbedaan konsentrasi yang sekecil-kecilnya antara

larutan di dalam dan di luar sel (Baraja, 2008).

Perendaman sampel dilakukan dalam waktu 24 jam dengan pelarut etil

asetat sebanyak 150 mL, pengadukannya dibantu dengan shaker selama 3 jam

untuk mempercepat kelarutan senyawa ke dalam pelarutnya. Tahap selanjutnya

dilakukan penggantian pelarut yang sama yaitu 150 mL pada setiap harinya

sampai diperoleh filtrat yang warnanya pucat sampai 4 kali proses ekstraksi.

Perubahan filtrat yang diperoleh dari warna hijau tua pekat hingga berwarna hijau

pucat sebagaimana pada Tabel 4.2. Ampas hasil penyaringan akhir masing-

masing pelarut selanjutnya dikeringanginkan untuk menguapkan pelarut

sebelumnya agar tidak mengganggu dalam proses ekstraksi dengan pelarut yang

berbeda tingkat kepolarannya.

Ampas hasil penyaringan dimaserasi kembali dengan 150 mL pelarut

diklorometana sampai diperoleh filtrat yang warnanya pucat seperti pada proses

maserasi dengan pelarut etil asetat pada proses ini dilakukan dengan 3 kali proses

ekstraksi, begitu pula dilakukan cara yang sama untuk maserasi dengan pelarut

petroleum eter sampai diperoleh filtrat yang warnanya pucat dengan 2 kali proses

ekstraksi. Filtrat yang diperoleh hasil maserasi dengan diklorometana yaitu

berwarna hijau kecoklatan pekat hingga hijau kecoklatan pucat, sedangkan hasil

maserasi dengan petroleum eter filtratnya berwarna kuning pekat hingga kuning

pucat sebagaimana pada Tabel 4.2. Ekstraksi dihentikan sampai filtrat berwarna

pucat, diharapkan senyawa-senyawa yang memiliki kepolaran yang sesuai dengan

masing-masing pelarut ini dapat terekstrak secara maksimal pada masing-masing

pelarutnya.

Filtrat hasil dari maserasi masing-masing pelarut yang telah diperoleh

selanjutnya diuapkan pelarutnya dengan rotary evaporator vaccum untuk

mendapatkan ekstrak pekat yang akan digunakan untuk pengujian selanjutnya.

Penguapan pada rotary evaporator vakum dilakukan pada tekanan rendah atau

dengan kenaikan temperatur dan kecepatan terbesar pada titik didih larutan. Labu

evaporator dipanaskan pada temperatur tertentu di atas waterbath dan diputar

selama evaporasi, sehingga terjadi pencampuran yang sempurna, mencegah

bumping, dan juga akan memiliki permukaan yang relatif lebih kuat. Adanya

tekanan yang diberikan oleh pompa vakum pada rangkaian rotary evaporator

vaccum maka pelarut menguap dari campuran kemudian terkondensasi oleh

erlenmeyer dan jatuh pada labu penampung (Vogel, 1978). Suhu penguapan

masing-masing pelarut pada ekstrak diatur berdasarkan suhu titik didihnya.

pelarut dapat menguap lebih dahulu di bawah titik didihnya karena adanya vakum.

Untuk ekstrak etil asetat pada suhu 70-75o C, ekstrak diklorometana pada suhu

penguapan pelarut dengan rotary evaporator vaccum dihentikan sampai diperoleh

ekstrak yang cukup pekat yang ditandai dengan berhentinya penetesan pelarut

pada labu penampung. Selanjutnya pelarut yang masih ada dalam ekstrak

diuapkan dalam desikator vakum. Hasil ekstraksi ditunjukkan pada Tabel 4.2

dengan perhitungan berat ekstrak pekat pada Lampiran 5.

Tabel 4.2 Hasil maserasi serbuk tanaman Anting-anting

Pelarut Volume (mL)

Perubahan warna filtrat

Warna ekstrak pekat

Berat ekstrak pekat (g)

Etil asetat 1200 Hijau tua pekat menjadi hijau pucat

hijau tua 4,47

Diklorometana 900

Hijau kecoklatan pekat menjadi hijau kecoklatan pucat

hijau tua kecoklatan 4,00

Petroleum eter 600 kuning pekat menjadi kuning pucat

kuning kehijauan 1,90

Berdasarkan tabel tersebut dapat diketahui bahwa berat ekstrak pekat etil

asetat menunjukkan nilai yang paling besar hal ini menunjukkan bahwa

kandungan senyawa-senyawa polar dalam tanaman anting-anting lebih besar

daripada senyawa-senyawa semipolar dan non-polar. Hasil ekstrak pekat yang

diperoleh pada masing-masing pelarut digunakan untuk uji selanjutnya yaitu uji

fitokimia dengan menggunakan reagen dan Kromatografi Lapis Tipis serta uji

toksisitas menggunakan brine shrimp.

4.4 Uji Fitokimia dengan Reagen

Uji fitokimia dilakukan untuk mengetahui kandungan senyawa aktif pada

tanaman. Pada penelitian ini pengujiannya dilakukan dengan cara mengambil

sedikit sampel dari masing-masing ekstrak etil asetat, diklorometana dan

petroleum eter pada tabung reaksi, lalu ditambahkan reagen sesuai dengan

senyawa yang akan diidentifikasi. Uji fitokimia dilakukan terhadap golongan

senyawa flavonoid, tanin, alkaloid, triterpenoid/ steroid dan saponin.

4.4.1 Flavonoid

Uji flavonoid dilakukan dengan mengambil sedikit sampel, dilarutkan

dengan metanol 50% panas kemudian ditambah logam Mg dan HCl pekat

Penambahan HCl pekat dalam uji flavonoid digunakan untuk menghidrolisis

flavonoid menjadi aglikonnya, yaitu dengan menghidrolisis O-glikosil. Glikosil

akan tergantikan oleh H+ dari asam karena sifatnya yang elektrofilik. Glikosida

berupa gula yang biasa dijumpai yaitu glukosa, galaktosa dan ramnosa. Reduksi

dengan Mg dan HCl pekat ini menghasilkan senyawa kompleks yang berwarna

merah atau jingga pada flavonol, flavanon, flavanonol dan xanton (Robinson,

1985). Pada pengujian untuk masing-masing ekstrak tidak mengandung senyawa

flavonoid.

O

O

OH

O + H2O

OH

O

O

OH

HO

OH

+ serbuk Mg

OROH2C

OH

HOHO

OROH2C

OHHOHO

OHOH

Senyawaan Flavonoid

HCl

OH

O

O

OH

O

OH

O

Mg

�

Gambar 4.1 Reaksi Dugaan Flavonoid dengan Serbuk Mg dan HCl pekat (Hidayat, 2004)

4.4.2 Tanin

Uji fitokimia senyawa tanin dalam penelitian ini yaitu dengan

menambahkan ekstrak dengan larutan FeCl3 hasil positifnya akan terbentuk warna

hijau kehitaman dan yang kedua adalah dengan menggunakan gelatin jika

terbentuk endapan putih pada ekstrak maka senyawa tersebut mengandung tanin.

Uji fitokimia dengan menggunakan FeCl3 digunakan untuk menentukan apakah

suatu bahan atau sampel mengandung gugus fenol. Dugaan adanya gugus fenol

ditunjukkan dengan warna hijau kehitaman atau biru tinta, sehingga apabila uji

fitokimia dengan FeCl3 memberikan hasil positif dimungkinkan dalam suatu

sampel terdapat suatu senyawa fenol dan dimungkinkan salah satunya adalah

tanin karena tanin merupakan senyawa polifenol. Terbentuknya warna hijau

kehitaman atau biru tinta pada ekstrak setelah ditambahkan dengan FeCl3 karena

tanin akan membentuk senyawa komplek dengan FeCl3.

3+

FeCl3 + 3

Senyawaan Tanin

OOH OH

OH

OH

+ 3 Cl-

Hijau kehitaman Gambar 4.2 Reaksi dugaan antara senyawaan tanin dengan FeCl3 (Halimah, 2010)

Kecenderungan Fe dalam pembentukan senyawa kompleks dapat mengikat

6 pasang elektron bebas. Ion Fe3+ dalam pembentukan senyawa kompleks akan

terhibridisasi membentuk hibridisasi d2sp3, sehingga akan terisi oleh 6 pasang

elektron bebas atom O pada tanin. Kestabilan dapat tercapai jika tolakan antara

ligan pada 3 tanin minimal. Hal ini terjadi jika 3 tanin tersebut posisinya

dijauhkan (Effendy, 2007).

Berdasarkan uji fitokimia pada masing-masing ekstrak, pada ekstrak etil

asetat mengandung senyawa tanin yaitu terbentuknya warna hijau kehitaman

dengan penambahan FeCl3.

Uji fitokimia dengan menggunakan larutan gelatin adalah untuk

memperkuat dugaan adanya senyawa tanin dalam ekstrak suatu tanaman.

Harborne (1987) menyebutkan bahwa semua tanin menimbulkan endapan sedikit

atau banyak jika ditambahkan dengan gelatin. Gelatin merupakan protein alami

yang memberikan sifat penstabil dan pengental bagi media yang berbasiskan air,

mengandung asam amino yaitu dengan kandungan glisin (27%), prolin (16%) dan

hidroxiprolin (14%). Tanin merupakan himpunan polihidroksi fenol yang dapat

dibedakan dari fenol-fenol lain karena kemampuannya untuk mengendapkan

protein, sehingga apabila tanin direasikan dengan gelatin maka yang terbentuk

adalah endapan putih, karena gelatin merupakan salah satu jenis protein yang

mampu diendapkan oleh tanin.

Endapan putih

Gambar 4.3 Reaksi dugaan antara tanin dan gelatin (Lemmens dan Soetjipto, 1991 dalam Halimah, 2010).

O

OH

OH

OH

OH

HO+ NH

HC

CH3

C

OHN

HC

H

N

C

OHN

HC

CH2

CH2

NH

C NH2

NH2

C

OHN CH

H

C

C

O

OHN

HC

CH2

CH2

C O

O

C

O

N

C

O

HN CH

H

C

O

N

CH

O

NHHC

CH3

C

OHN

HC

H

N

C

OHN

HC

CH2

CH2

NH

C NH2

NH2

C

OHN CH

H

C

C

O

OHN

HC

CH2

CH2

C O

O

C

O

N

C

O

HN CH

H

C

O

N

CH

O

O

OHOH

OH

OH

HO

O

OHOH

OH

OH

HO

O

OHOH

OH

OH

HO

O

OHOH

OH

OH

HO

Senyawaan taninGelatin

Ikatan hidrogen pada tanin dan gelatin

Gelatin mengandung protein sehingga terbentuk senyawa komplek tanin-

protein, dikarenakan adanya ikatan hidrogen antara tanin dan protein pada gelatin

sehingga dapat terbentuk endapan putih. Ikatan hidrogen ini terbentuk dari atom H

yang berikatan dengan 2 atom yang memiliki keelektronegatifan yang tinggi

seperti atom N, O dan F. Ikatan hidrogen yang terbentuk disebabkan oleh atom H

yang terikat dengan 2 atom O ataupun yang terikat dengan atom O dan N dari

struktur tanin dan gelatin. Pada penelitian, ekstrak etil asetat terdapat sedikit

endapan putih, pada ekstrak diklorometana dan petroleum eter tidak terdapat

endapan.

4.4.3 Alkaloid

Uji adanya senyawa alkaloid dengan cara memasukkan sedikit ekstrak

sampel pada tabung reaksi, kemudian ditambahkan HCl. Tujuan penambahan HCl

adalah karena alkaloid bersifat basa sehingga biasanya diekstrak dengan pelarut

yang bersifat asam. Bukti kualitatif untuk menunjukkan adanya alkaloid dapat

diperoleh dengan menggunakan reagen Dragendorf dan Mayer. Reaksi dugaan

yang terjadi pada uji alkaloid adalah sebagaimana pada reaksi berikut:

Bi(NO3)3.5H2O + 3KI BiI3 ↓ + 3KNO3 + 5H2O

BiI3 ↓ + KI [BiI4]- + K+

Kompleks logam dengan alkaloid

(endapan jingga) Gambar 4.4 Reaksi dugaan antara alkaloid dengan pereaksi Dragendorff

(Sumaryanto, 2009) HgCl2 + 2 KI HgI2 ↓ + 2 KCl

HgI2 ↓ + 2 KI &��'�()* + 2K+

Kompleks logam dengan alkaloid

(endapan putih kekuningan) Gambar 4.5 Reaksi dugaan antara alkaloid dengan pereaksi Mayer (Sumaryanto,

2009)

Pada penelitian menunjukkan ekstrak etil asetat positif mengandung

senyawa alkaloid karena terbentuk endapan jingga ketika ditambahkan reagen

dragendorf. Endapan terbentuk karena adanya pembentukan kompleks antara ion

logam dari pereaksi yang digunakan dengan senyawa alkaloid.

NH

+ BiI4-

N

N

+ 3HI+ KI+K+

NBi3

NH

+ HgI42-

+2K+2

N

N

Hg + 2HI+ 2KI

4.4.4 Triterpenoid / Steroid

Uji fitokimia senyawa triterpenoid bertujuan untuk mengetahui apakah

ekstrak mengandung senyawa triterpenoid. Terbentuknya cincin kecoklatan pada

perbatasan dua pelarut merupakan hasil positif dengan penambahan reagen

Lieberman Burchard. Triterpenoid memberikan reaksi terbentuknya warna cincin

kecoklatan ketika senyawa ini ditetesi reagen Lieberman Burchard melalui

dindingnya, sedangkan steroid akan menghasilkan warna hijau kebiruan

(Robinson, 1995). Perubahan warna ini disebabkan terjadinya reaksi oksidasi pada

golongan terpenoid/steroid melalui pembentukan ikatan rangkap terkonjugasi

(senyawa pentaenilik). Ekstrak etil asetat dan petroleum eter menunjukkan adanya

senyawa steroid karena terbentuk warna hijau kebiruan pada larutannya,

sedangkan ekstrak diklorometana menunjukan adanya senyawa triterpenoid

dengan adanya cincin kecoklatan pada larutan.

4.4.5 Saponin

Pengujian saponin dilakukan dengan uji busa yaitu dengan penambahan

air ke dalam ekstrak kemudian dikocok selama 1 menit. Adanya saponin

ditunjukkan oleh timbulnya busa yang bertahan selama 10 menit. Busa yang

ditimbulkan saponin dikarenakan adanya kombinasi struktur senyawa

penyusunnya yaitu rantai sapogenin non-polar dan rantai samping polar yang larut

dalam air (Kristianingsih, 2002). Widyasari (2008) menyatakan bahwa busa yang

timbul disebabkan saponin mengandung senyawa yang sebagian larut dalam air

(hidrofilik) dan senyawa yang larut dalam pelarut nonpolar (hidrofobik) sebagai

surfaktan yang dapat menurunkan tegangan permukaan. Hasil pengujian pada

ketiga ekstrak etil asetat, diklorometana dan petroleum eter tidak menunjukkan

adanya saponin dalam ketiga ekstrak anting-anting tersebut.

4.4.6 Hasil Pengamatan Uji Fitokimia

Hasil identifikasi senyawa aktif berdasarkan uji fitokimia pada masing-

masing ekstrak ditunjukkan adanya senyawa alkaloid, tannin, triterpenoid dan

steroid. Senyawa aktif pada tanaman tergantung pada kepolaran suatu pelarut.

Tabel 4.3 Hasil pengamatan uji fitokimia Golongan senyawa

Ekstrak etil asetat

Ekstrak diklorometana

Ekstrak petroleum eter

Flavonoid - - - Tanin + - - Alkaloid + - - Triterpenoid - ++ - Steroid ++ ++ Saponin - - -

Keterangan: tanda ++ : terkandung senyawa lebih banyak/warna pekat tanda + : terkandung senyawa/warna muda tanda - : tidak terkandung senyawa/tidak terbentuk warna

Pada ekstrak etil asetat terdapat senyawa tanin, alkaloid dan steroid. Tanin

merupakan golongan senyawa fenol yang terdapat pada daun, buah yang belum

matang, batang dan kulit kayu. Pada senyawa tanin terdapat banyak gugus OH

sehingga menyebabkan sifatnya polar maka senyawa tanin dapat larut dalam

pelarut polar seperti etil asetat sehingga tannin dapat terekstrak dalam pelarut etil

asetat.

Alkaloid umumnya mencakup senyawa-senyawa bersifat basa yang

mengandung satu atau lebih atom nitrogen. Alkaloid adalah suatu golongan

senyawa organik yang terbanyak ditemukan di alam. Hampir seluruh alkaloid

berasal dari tumbuh-tumbuhan dan tersebar luas dalam berbagai jenis tumbuhan

tingkat tinggi. Pada penelitian Sumaryanto (2009) alkaloid diekstraksi

menggunakan pelarut polar (etanol) dan dapat digunakan sebagai antibakteri.

Steroid tersusun dari isopren-isopren dari rantai panjang hidrokarbon yang

menyebabkan sifatnya non-polar (Halimah, 2010), sehingga steroid larut dalam

pelarut petroleum eter. Beberapa senyawaan steroid mengandung gugus –OH

yang sering disebut dengan sterol, sehingga sifatnya cenderung lebih polar.

Sterolin atau glikosida sterol ditemukan dalam fraksi lipid yang tidak dapat

tersabunkan dan kelarutannya rendah dalam pelarut lemak. Sifat ini menyebabkan

steroid dapat terekstrak dalam pelarut etil asetat. Contoh dari steroid polar

sikloartenol dan non polar kolestanon.

Triterpenoid tersusun dari rantai panjang hidrokarbon C30 yang

menyebabkan sifatnya non-polar sehingga mudah terekstrak dalam pelarut yang

bersifat non polar. Ada beberapa senyawaan triterpenoid berstruktur siklik yang

berupa alkohol, aldehid atau asam karboksilat (Harborne, 1987). Senyawaan yang

berstruktur alkohol yang memiliki gugus –OH menyebabkan sifatnya menjadi

semi polar, sehingga dapat terekstrak dalam pelarut diklorometana.

Golongan senyawa kimia yang terdapat dalam tanaman berkaitan dengan

aktivitas biologis suatu tanaman. Penelitian sebelumnya pada tanaman Acalypha

fruticosa dan Azadirachta indica menunjukkan adanya senyawa tannin, terpenoid,

flavonoid sebagai antimalaria. Arfianti (2008) menyatakan bahwa ekstrak buah

mahkota dewa mengandung alkaloid, flavonoid, tannin, saponin dan steroid dapat

digunakan sebagai antioksidan. Hal ini menunjukkan kandungan senyawa aktif

yang terdapat dalam tanaman anting-anting dari ketiga ekstrak dapat memperkuat

potensi bioaktivitas senyawa dalam tanaman ini.

4.5 Uji Fitokimia dengan KLT

Pendugaan senyawa dalam ketiga ekstrak tanaman anting-anting telah teruji

dengan pengujian fitokimia menggunakan reagen. Pembuktian kandungan

senyawa-senyawa tersebut diperkuat dengan adanya identifikasi menggunakan

kromatografi lapis tipis (KLT). KLT merupakan metode pemisahan senyawa

kimia dengan menggunakan fase diam dan fase gerak. KLT yang digunakan

terbuat dari silika gel dengan ukuran 1 cm x 10 cm G60 F254 (Merck). Penggunaan

bahan silika karena pada umumnya silika digunakan untuk memisahkan senyawa

asam-asam amino, fenol, alkaloid, asam lemak, sterol dan terpenoid. Plat KLT

silika G60 F254 diaktifasi pada suhu 100 ºC selama 30 menit untuk menghilangkan

air yang terdapat pada plat (Sastrohamidjojo, 2007). KLT analitik ini digunakan

untuk mencari eluen terbaik dari beberapa eluen yang baik dalam pemisahan

senyawa tanin. Eluen yang baik adalah eluen yang bisa memisahkan senyawa

dalam jumlah yang banyak ditandai dengan munculnya noda. Noda yang

terbentuk tidak berekor dan jarak antara noda satu dengan yang lainnya jelas

(Harborne, 1987). Penggunaan beberapa eluen diharapkan mampu memisahkan

komponen senyawa aktif yang terdapat dalam ekstrak tanaman anting-anting

dengan baik. Noda yang dihasilkan selanjutnya dideteksi dengan pereaksi sesuai

golongan senyawanya, kemudian diamati di bawah

digunakan untuk menambah kepekaan deteksi dan menghasilkan perubahan warna

yang ada kaitannya dengan struktur senyawa yang bersangkutan

4.5.1

tanaman anting

(

Gambar

Gambar 4.6 Hasil KLT senyawa ta

Keterangan: (a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan dengan lampu UV





4.5.1 Tanin

Hasil identifikasi menggunakan KLT golongan senyawa tanin pada

tanaman anting

(14:1:5) dan asam asetat gla

Gambar 4.6 dan 4.7

Gambar 4.6 Hasil KLT senyawa ta






Tanin


tanaman anting-anting de

4:1:5) dan asam asetat gla

4.6 dan 4.7.

Gambar 4.6 Hasil KLT senyawa ta(14:1:5) setelah disemprot dengan FeCl







anting dengan menggunakan eluen

4:1:5) dan asam asetat glasial: air: HCl pekat (30:10:3) ditunjukkan pada

��

Gambar 4.6 Hasil KLT senyawa tanin pada ekstrak etil asetat dengansetelah disemprot dengan FeCl

(a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan dengan lampu UV






ngan menggunakan eluen

ial: air: HCl pekat (30:10:3) ditunjukkan pada

(a)

nin pada ekstrak etil asetat dengansetelah disemprot dengan FeCl

(a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan dengan lampu UV 366 nm


golongan senyawanya, kemudian diamati di bawah lampu UV. Pereaksi ini




ngan menggunakan eluen butanol: asam asetat: air


(b) nin pada ekstrak etil asetat dengan

setelah disemprot dengan FeCl3

(a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV 366 nm


lampu UV. Pereaksi ini


yang ada kaitannya dengan struktur senyawa yang bersangkutan.


butanol: asam asetat: air


(b) nin pada ekstrak etil asetat dengan eluen BAA

)�

�


lampu UV. Pereaksi ini



butanol: asam asetat: air


eluen BAA

Tabel 4.4 Hasil KLT senyawa tanin pada ekstrak etil asetat dengan eluen BAA (14:1:5)

No. noda

Rf tiap noda Warna noda tanpa sinar UV

Warna noda dengan sinar UV

1 0,61 Tidak berwarna Ungu 2 0,8 Hijau kekuningan Ungu kehitaman

(a) (b) Gambar 4.7 Hasil KLT senyawa tanin pada ekstrak etil asetat dengan eluen asam

asetat glasial: air: HCl pekat (30:10:3) setelah disemprot FeCl3

Keterangan: (a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV (b) hasil pengamatan dengan lampu UV 366 nm Tabel 4.5 Hasil KLT senyawa tanin pada ekstrak etil asetat dengan eluen asam

asetat glasial: air: HCl pekat (30:10:3) No.

noda Rf tiap noda Warna noda tanpa sinar UV


1 0,4 Biru muda Ungu kehitaman 2 0,489 Hijau kebiruan Ungu

Harborne menyatakan bahwa senyawa tanin jika dideteksi di bawah sinar

UV pendek menunjukkan warna lembayung, pada penelitian ini noda yang

�

)�

dihasilkan pada eluen butanol: asam asetat: air dan eluen asam asetat glasial, air

dan HCl pekat noda ke 1 menunjukkan warna ungu dan noda ke 2 menunjukkan

warna ungu kehitaman, sehingga kedua noda yang dihasilkan pada ekstrak etil

asetat diasumsikan mengandung senyawa tanin. Hal ini didukung oleh penelitian

Saadah (2010) yang menyatakan bahwa noda hasil KLT yang diduga senyawa

tanin berwarna ungu kehitaman.

Berdasarkan eluen yang digunakan eluen butanol: asam asetat: air (14:1:5)

dan keduanya bersifat polar namun eluen butanol: asam asetat: air (14:1:5) lebih

polar daripada eluen asam asetat glasial air: HCl pekat (30:10:3), sehingga

senyawa tanin lebih mudah terelusi pada eluen yang pertama dengan Rf yang

lebih tinggi yaitu 0,61 dan 0,8 dan noda yang terbentuk besar dan tidak

bertumpuk. Pada eluen asam asetat glasial air: HCl pekat (30:10:3) noda yang

terbentuk memanjang dan hampir bertumpuk dengan Rf 0,4 dan 0,489, sehingga

eluen butanol: asam asetat: air (14:1:5) diasumsikan lebih baik dari eluen asam

asetat glasial air: HCl pekat (30:10:3). Berdasarkan pemisahan yang terbentuk

diasumsikan pemisahan senyawanya sudah cukup baik akan tetapi adanya noda

yang besar pada eluen asam asetat glasial air: HCl pekat (30:10:3) dan memanjang

pada eluen eluen asam asetat glasial air: HCl pekat (30:10:3) menunjukkan masih

ada senyawa yang belum terpisahkan secara sempurna.

4.5.2

tan

(9,5:0,5)

Gambar 4.

keterangan: (a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan dengan lampu UV Tabel 4.6 Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen

4.5.2 Alkaloid

Hasil identifikasi menggunakan KLT golongan senyawa

tanaman anting

(9,5:0,5) ditunjukkan pada Gambar

Gambar 4.8

keterangan: (a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan dengan lampu UV Tabel 4.6 Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen

kloroform No.

noda Rf tiap noda

1 2 3 4

Alkaloid


aman anting-anting dengan menggunakan

ditunjukkan pada Gambar

8 Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen kloroform, metanol (9:1)

keterangan: (a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan dengan lampu UV

Tabel 4.6 Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen kloroform : metanol (9:1)

Rf tiap noda

0,56 0,64 0,71

0,8


anting dengan menggunakan

ditunjukkan pada Gambar 4.

(a)

Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen kloroform, metanol (9:1)


Tabel 4.6 Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen metanol (9:1)

Rf tiap noda Warna noda tanpa

0,56 Tidak berwarna 0,64 Tidak berwana 0,71

0,8


anting dengan menggunakan

4.8 dan 4.9.

(a)

Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen kloroform, metanol (9:1) setelah disemprot reagen Dragendroft


Tabel 4.6 Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen metanol (9:1)

Warna noda tanpa sinar UV

Tidak berwarnaTidak berwana

Hijau Oranye


anting dengan menggunakan kloroform: metanol

(b) Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen

setelah disemprot reagen Dragendroft


Tabel 4.6 Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen


Warna noda dengan sinar

Tidak berwarnaTidak berwana Merah muda keunguan

HijauOranye

Hasil identifikasi menggunakan KLT golongan senyawa alkaloid

kloroform: metanol

Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen




Ungu kecoklatan Merah muda keunguan

Jingga kecoklatan Hijau kecoklatan

��

�

)�

�

alkaloid pada

(9:1) dan

Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen setelah disemprot reagen Dragendroft



Ungu kecoklatanMerah muda keunguan

Jingga kecoklatanHijau kecoklatan

Gambar 4.

Keterangan: (a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan dengan lampu UV Tabel 4.7 Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen

methanol: kloroform antara lain penelitian Runadi (2007) noda yang dihasilkan

berwarna kunin

noda berwarna jingga setelah disemprot dengan reagen Dragendorf dan berwarna

Gambar 4.9

Keterangan: (a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan dengan lampu UV Tabel 4.7 Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen

kloroform No.

noda 1 2 3

4 5

Penelitian lain tentang senyawa alkaloid menggunakan KLT dengan eluen


berwarna kunin


9 Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen kloroform


Tabel 4.7 Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen kloroform : metanol (9,5:0,5)

No. noda Rf tiap noda

1 0,27 2 0,32 3 0,58

4 0,78 5 0,87



berwarna kuning, biru keunguan dan orany


Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen : metanol (9,5:0,5)


Tabel 4.7 Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen metanol (9,5:0,5)


0,27 Tidak berwarna 0,32 Tidak berwana

0,58 Hijau kebiruan

0,780,87 Hijau kecoklatan



g, biru keunguan dan orany


(a)

Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen metanol (9,5:0,5) setelah disemprot


Tabel 4.7 Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen metanol (9,5:0,5)


Tidak berwarnaTidak berwana

Hijau kebiruan

Kuning Hijau kecoklatan



g, biru keunguan dan oranye. Minarti (2010) menyatakan bahwa



setelah disemprot





Tidak berwarnaTidak berwana Merahmuda keunguan

Hijau kebiruan Ungu kecoklatan tengah

KuningHijau kecoklatan Jingga



e. Minarti (2010) menyatakan bahwa


(b) Hasil KLT senyawa alkaloid pada ekstrak etil asetat dengan eluen




Ungu kecoklatan Merahmuda keunguan

Ungu kecoklatan tengah hijau tua

Jingga kecoklatan Jingga kecoklatan tua





%�

��

�

)�

�


reagen Dragendroft



Ungu kecoklatanMerahmuda keunguan

Ungu kecoklatan tengah hijau tua

Jingga kecoklatankecoklatan tua





kuning oranye setelah dideteksi di bawah lampu UV 366 nm (Widodo,2007).

Pada eluen pertama terdapat 4 noda dengan Rf antara 0,56-0,8. Noda ke 3

menunjukkan warna jingga kehitaman dan pada eluen yang kedua terdapat 5 noda

dengan Rf antara 0,27-0,87. Noda ke 4 dan 5 menunjukkan warna jingga

kecoklatan dan jingga kecoklatan tua sehingga diasumsikan pada ekstrak etil

asetat terdapat senyawa alkaloid. Eluen kloroform: metanol (9:1) lebih polar

daripada eluen kloroform: metanol (9,5:0,5) dan senyawa alkaloid lebih mudah

terelusi pada eluen kloroform: metanol (9,5:0,5), hal itu ditunjukkan dengan

terbentuknya noda yang lebih banyak dan noda yang terpisah dengan baik dengan

Rf yang lebih tinggi daripada eluen yang pertama. Hal ini sesuai dengan

penelitian Lutfillah (2008) bahwa eluen kloroform: metanol (9,5:0,5) paling baik

untuk memisahkan senyawa alkaloid pada tanaman angsret. Senyawa alkaloid

yang terdapat pada ekstrak etil asetat tanaman Anting-anting merupakan senyawa

yang bersifat semi polar.

4.5.3 Triterpenoid

Hasil identifikasi menggunakan KLT golongan senyawa triterpenoid pada

tanaman Anting-anting dengan menggunakan eluen heksana dan etil asetat (1:1)

dan eluen benzene kloroform (3:7) ditunjukkan pada Gambar 4.10 dan 4.11.

��

��

(a) (b) Gambar 4.10 Hasil KLT senyawa triterpenoid pada ekstrak diklorometana dengan

eluen benzene : kloroform (3:7) setelah disemprot reagen Lieberman-Burchard

Keterangan: (a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV (b) hasil pengamatan dengan lampu UV 366 nm Tabel 4.8 Hasil KLT senyawa triterpenoid pada ekstrak diklorometana dengan

eluen benzene : kloroform (3:7) No.

noda Rf tiap noda Warna noda tanpa sinar UV


1 0,16 Hijau kecoklatan Ungu tua 2 0,5 Tidak berwana Ungu muda 3 0,6 Tidak berwarna Merah Muda 4 0,7 Hijau tua Ungu 5 0,76 Tidak berwarna Merah keunguan

)�

�

Gambar 4.11

Keterangan: (a) hasil elusi sebelum (b) hasil pengamatan dengan lampu UV

Tabel 4.9

reagen Lieberman

coklat, hijau tua sampai ungu tua (Bawa, 2009), merah ungu dan ungu (Rita

2010). Pada eluen benzene dan kloroform (3:7)

Gambar 4.11

Keterangan: (a) hasil elusi sebelum (b) hasil pengamatan dengan lampu UV

Tabel 4.9 Hasil KLT senyawa triterpenoid pada ekstrak diklorometana dengan eluen

No. noda

1 2 3 4 5 6 7

Golongan senyawa triterpenoid hasil KLT setelah disemprot dengan

reagen Lieberman



Gambar 4.11 Hasil KLT senyawa triterpenoid pada ekstrak diklorometana dengan eluen heksana Burchard


Hasil KLT senyawa triterpenoid pada ekstrak diklorometana dengan eluen n- heksana : etil asetat (1:1

Rf tiap noda

0,12 0,2 0,3

0,35 0,7

0,74 0,79


reagen Lieberman-Burchard ditunjukkan dengan terbentuknya noda berwarna



(a)

Hasil KLT senyawa triterpenoid pada ekstrak diklorometana dengan eluen heksana : etil asetat (1:1) Burchard

dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan dengan lampu UV

Hasil KLT senyawa triterpenoid pada ekstrak diklorometana dengan heksana : etil asetat (1:1

Rf tiap noda Warna noda tanpa sinar

0,120,2 Kuning muda kehijauan 0,3 Kuning muda kehijauan

0,350,7 Kuning muda kehijauan

0,74 Kuning muda kehijauan 0,79 Kuning muda


Burchard ditunjukkan dengan terbentuknya noda berwarna



Hasil KLT senyawa triterpenoid pada ekstrak diklorometana dengan etil asetat (1:1)


Hasil KLT senyawa triterpenoid pada ekstrak diklorometana dengan heksana : etil asetat (1:1)

Warna noda tanpa sinar

Tidak berwarna Kuning muda kehijauanKuning muda kehijauan

Tidak berwarna Kuning muda kehijauanKuning muda kehijauanKuning muda kehijauan





(b) Hasil KLT senyawa triterpenoid pada ekstrak diklorometana dengan

etil asetat (1:1) setelah disemprot Lieberman

dideteksi dengan lampu UV

Hasil KLT senyawa triterpenoid pada ekstrak diklorometana dengan


Warna noda dengan

Tidak berwarnaKuning muda kehijauanKuning muda kehijauan

Tidak berwarnaKuning muda kehijauan Merah muda keunguan Kuning muda kehijauan Merah muda keunguan

kehijauan Merah tua keunguan




2010). Pada eluen benzene dan kloroform (3:7) menghasilan Rf antara 0,16

$

+

%

�

)

��


setelah disemprot Lieberman


Warna noda dengan sinar UV Ungu tua Ungu tua Ungu tua

Merah muda keunguanMerah muda keunguan

Merah tua keunguan




menghasilan Rf antara 0,16

$�

+�

%�

��

�

)�

�

Hasil KLT senyawa triterpenoid pada ekstrak diklorometana dengan setelah disemprot Lieberman-


Warna noda dengan sinar UVUngu tuaUngu tuaUngu tua

Ungu Merah muda keunguanMerah muda keunguan

Merah tua keunguan




menghasilan Rf antara 0,16-0,76



dengan 5 noda. Noda ke 1 berwarna ungu tua, noda ke 2 berwarna ungu muda,

noda ke 4 ungu dan noda ke 5 berwarna merah keunguan, sedangkan pada eluen

heksana dan etil asetat (1:1) menghasilkan Rf antara 0,12-0,79 dengan 7 noda.

Noda ke 1, 2, dan 3 menunjukkan warna ungu tua, noda ke 4 menunjukkan warna

ungu, noda ke 5 dan 6 menunjukkan warna merah muda keunguan dan noda ke 7

menunjukkan warna merah tua keunguan. Berdasarkan warna noda yang

dihasilkan tersebut diasumsikan pada ekstrak diklorometana terdapat senyawa

triterpenoid.

Berdasarkan tabel dan gambar di atas pada eluen benzene : kloroform

(3:7) dihasilkan Rf antara 0,16 - 0,76 dengan 5 noda yang terpisah dengan baik.

Pada eluen heksana dan etil asetat (1:1) dihasilkan Rf antara 0,12- 0,79 dengan 7

noda yang terpisah dengan baik pada noda 1-4 dan bertumpuk pada noda ke 5-7.

Kedua eluen yang digunakan bersifat semi polar namun eluen yang pertama

bersifat lebih polar daripada eluen yang kedua. Senyawa triterpenoid pada

tanaman Anting-anting lebih mudah terpisahkan dengan eluen yang kedua. Hal ini

ditunjukkan dengan terbentuknya noda yang lebih banyak, sehingga diasumsikan

senyawa triterpenoid pada tanaman Anting-anting merupakan senyawa yang

bersifat semi polar.

4.5.4 Steroid Hasil identifikasi menggunakan KLT golongan senyawa steroid pada

tanaman anting-anting dengan menggunakan eluen heksana : etil asetat (7:3)

ditunjukkan pada Gambar 4.12 dan 4.13.

Gambar 4.1

Keterangan: (a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan Tabel 4.10

Gambar 4.12

Keterangan: (a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan Tabel 4.10 Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan n

etil asetat (7:3) No.

noda

1 2 3 4 5 6

7 8 9

2 Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan heksana : Burchard


Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan netil asetat (7:3)

Rf tiap noda

0,06 0,11 0,38 0,47 0,56 0,68

0,77 0,8

0,83

��

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan etil asetat (7:3)

(a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UVdengan lampu UV

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan netil asetat (7:3)


0,06 Hijau kebiruan 0,11 Hijau 0,380,470,560,68 Kuning kehijauan

0,77 Kuning kehijauan 0,8 Hijau kebiruan

0,83

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan etil asetat (7:3) setelah disemprot reagen Lieberman

(a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UVdengan lampu UV 366 nm

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan n


Hijau kebiruanHijau kebiruan

Kuning Kuning Kuning

Kuning kehijauan

Kuning kehijauanHijau kebiruan

Oranye

�� Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan

setelah disemprot reagen Lieberman




Warna noda dengan

Hijau kebiruankebiruan

KuningKuningKuning

Kuning kehijauan Ungu tengah biru

Kuning kehijauanHijau kebiruan

Oranye Hijau kebiruan muda

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan

setelah disemprot reagen Lieberman



Hijau kebiruan Hijau kebiruan

Merah muda Hijau

Merah muda Ungu tengah biru

kehijauan Oranye

Hijau kebiruan Hijau kebiruan muda

,�

-�

$�

+�

%�

��

)�

�

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan eluen n-setelah disemprot reagen Lieberman-

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan n-heksana :



Merah mudaHijau

Merah mudaUngu tengah biru

kehijauanOranye

Hijau kebiruanHijau kebiruan muda

Gambar 4.13

Keterangan: (a) hasil elusi sebelum (b) hasil pengamatan dengan lampu UV Tabel 4.11

senyawa steroid dengan pereaksi Lieberman

noda berwarna hijau.

UV 366 nm

Gambar 4.13

Keterangan: (a) hasil elusi sebelum (b) hasil pengamatan dengan lampu UV Tabel 4.11

heksana No.

noda 1 2 3 4 5

Penelitian sebelumnya


noda berwarna hijau.

UV 366 nm

Gambar 4.13 Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan eluen n-heksana dan etil asetat (7:3) Lieberman


Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrakheksana : etil asetat (7:3) Rf tiap

noda 0,52 0,71 0,78 0,83 0,88



noda berwarna hijau. Biru ungu sampai coklat

UV 366 nm (Syamsudin,2007). Pada ekstrak etil asetat menunjukkan Rf antara

��

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan heksana dan etil asetat (7:3)

Lieberman-Burchard


Hasil KLT senyawa steroid pada ekstraketil asetat (7:3)

Rf tiap noda


0,520,71 Tidak berwarna 0,780,83 Biru kehijauan 0,88

Penelitian sebelumnya (Handayani dkk, 2008)


Biru ungu sampai coklat

(Syamsudin,2007). Pada ekstrak etil asetat menunjukkan Rf antara

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan heksana dan etil asetat (7:3)

dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan dengan lampu UV 366 nm

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstraketil asetat (7:3)


Kuning Tidak berwarna

Kuning Biru kehijauan

Oranye

(Handayani dkk, 2008)

senyawa steroid dengan pereaksi Lieberman-Burchard menunjukkan terbentuknya

Biru ungu sampai coklat


�� Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan

heksana dan etil asetat (7:3) setelah disemprot reagen

dideteksi dengan lampu UV 366 nm

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan n


Warna noda dengan

KuningTidak berwarna

KuningBiru kehijauan

Oranye Oranye kecoklatan


Burchard menunjukkan terbentuknya

setelah dideteksi di bawah lampu


Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan

setelah disemprot reagen

petroleum eter dengan n


Merah muda

Biru kehijauan Oranye kecoklatan

(Handayani dkk, 2008) hasil KLT golongan




%�

��

�

)�

�

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan setelah disemprot reagen

petroleum eter dengan n-


Merah mudaUngu Ungu

Biru kehijauanOranye kecoklatan

hasil KLT golongan




0,06-0,82 dengan 9 noda. Noda ke 1, 2 dan 8 menunjukkan warna hijau kebiruan,

noda ke 4 menunjukkan warna hijau, noda ke 6 menunjukkan warna ungu yang

tengahnya berwarna biru kehijauan, noda ke 9 menunjukkan warna hijau kebiruan

muda. Pada ekstrak petroleum eter menunjukkan Rf antara 0,52- 0,88 dengan 5

noda. Noda ke 4 biru kehijauan, noda ke 5 menunjukkan warna oranye

kecoklatan, sehingga diasumsikan pada ekstrak etil asetat dan petroleum eter

terdapat senyawa steroid.

Golongan senyawa steroid pada ekstrak etil asetat lebih banyak daripada

ekstrak petroleum eter. Hal ini ditunjukkan dengan terdapatnya 6 noda etil asetat

dan 2 noda yang diasumsikan golongan senyawa steroid pada ekstrak petroleum

eter. Banyaknya senyawa yang terpisah pada ekstrak etil asetat menunjukkan

bahwa senyawa steroid yang terdapat pada tanaman Anting-anting lebih banyak

terekstrak pada senyawa yang bersifat polar. Semua noda yang dihasilkan terpisah

dengan baik menggunakan eluen heksana:etil asetat (7:3).

Hasil identifikasi menggunakan KLT golongan senyawa steroid pada

tanaman anting-anting dengan menggunakan eluen sikloheksana : etil asetat (1:1)

ditunjukkan pada gambar 4.14 dan 4.15.

Gambar 4.14

Keterangan: (a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan dengan Tabel 4.12

Gambar 4.14

Keterangan: (a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan dengan Tabel 4.12

sikloheksana No.

noda 1 2 3 4 5 6 7

8

9 10 11 12

Gambar 4.14 Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan eluen sikloheksanaburchard

Keterangan: (a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan dengan

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan sikloheksana Rf tiap

noda 0,06 0,11 0,13

0,3 0,36 0,39 0,44

0,67

0,76 0,78 0,81 0,86

��

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan eluen sikloheksana : etil asetat (1:1)


Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan sikloheksana : etil asetat (1:1)

Warna noda tanpa

Hijau kebiruan Hijau

Tidak berwarna

Tidak berwarna Tidak berwarna

Tidak Hijau kebiruan

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan eluen etil asetat (1:1) setelah disemprot reagen lieberman

(a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UVlampu UV 366 nm

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan etil asetat (1:1)



Tidak berwarnaKuning Kuning

Tidak berwarnaTidak berwarna

Hijau

Kuning Tidak berwarnaHijau kebiruan

Oranye

�� Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan eluen

setelah disemprot reagen lieberman



Warna noda tanpa Warna noda dengan sinar

Ungu tengah hijau

Hijau kebiruan muda

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan eluen

setelah disemprot reagen lieberman



Hijau kebiruan Ungu kehitaman

Hijau kebiruan Merah muda

Ungu Hijau kebiruan

Merah muda Ungu tengah hijau

kebiruan Ungu

Hijau kebiruan mudaHijau kebiruan

Oranye

)��

.�,�

-�

$�

+�

%�

��

�

)�

�

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan eluen setelah disemprot reagen lieberman-

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dengan eluen


Hijau kebiruanUngu kehitaman

Hijau kebiruanMerah muda

UnguHijau kebiruan

Merah mudaUngu tengah hijau

kebiruanUngu

Hijau kebiruan mudaHijau kebiruan

Oranye

Gambar 4.15

Keterangan: (a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan dengan lampu UV Tabel 4.13

golongan senyawa steroid dengan pereaksi Lieberman

Gambar 4.15

Keterangan: (a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV(b) hasil pengamatan dengan lampu UV Tabel 4.13 Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan

No. noda

1 2 3 4 5 6 7



Gambar 4.15 Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan eluen sikloheksana : lieberman-


Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan sikloheksana Rf tiap

noda 0,06 0,12 0,47 0,67 0,76 0,79 0,84



(a)

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan sikloheksana :

-burchard


Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan sikloheksana : etil asetat (1:1)


Tidak berwarna

Hijau kebiruan muda

Penelitian sebelumnya (Handayani dkk, 2008)


Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan sikloheksana : etil asetat (1:1)


Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan etil asetat (1:1)


Kuning Kuning Kuning

Tidak berwarnaHijau

Hijau kebiruan mudaOranye



(b) Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan

etil asetat (1:1) setelah disemprot reagen

(a) hasil elusi sebelum dideteksi dengan lampu UV

366 nm




KuningKuningKuning Oranye kecoklatan

Tidak berwarnaHijau

Hijau kebiruan mudaOranye Oranye kecoklatan

(Handayani dkk, 2008) menunjukkan hasil KLT

golongan senyawa steroid dengan pereaksi Lieberman-Burchard menunjukkan


setelah disemprot reagen



Ungu muda

Oranye kecoklatanUngu muda

Merah muda Hijau kebiruan

Oranye kecoklatan

menunjukkan hasil KLT

Burchard menunjukkan

+�$�

�

)�

�

%�

��

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan setelah disemprot reagen

Hasil KLT senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter dengan eluen


UnguUngu muda

Oranye kecoklatanUngu muda

Merah mudaHijau kebiruan

Oranye kecoklatan

menunjukkan hasil KLT

Burchard menunjukkan

terbentuknya bercak noda berwarna hijau. Biru ungu sampai coklat setelah

dideteksi di bawah lampu UV 366 nm (Syamsudin,2007). Pada ekstrak etil asetat

menunjukkan Rf antara 0,06-0,86 dengan 12 noda. Noda ke 1, 3, 6, 10 dan 11

menunjukkan warna hijau kebiruan, noda ke 2 menunjukkan warna hijau

kehitaman, noda ke 8 menunjukkan warna ungu yang tengahnya berwarna hijau

kebiruan.

Pada ekstrak petroleum eter menunjukkan Rf antara 0,06-0,84 dengan 7

noda. Noda ke 6 berwarna hijau kebiruan, noda ke 3 dan 7 berwarna oranye

kecoklatan. Sehingga diasumsikan pada ekstrak etil asetat dan ekstrak petroleum

eter terdapat golongan senyawa steroid. yang terpisah dengan baik. Pada ekstrak

petroleum eter menunjukkan Rf antara 0,06-0,84 dengan 7 noda. Golongan

senyawa steroid pada ekstrak etil asetat lebih banyak daripada ekstrak petroleum

eter. Hal ini ditunjukkan dengan terdapatnya 9 noda pada ekstrak etil asetat dan 3

noda yang diasumsikan golongan senyawa steroid pada ekstrak petroleum eter.

Banyaknya senyawa yang terpisah pada ekstrak etil asetat menunjukkan bahwa

senyawa steroid yang terdapat pada tanaman Anting-anting lebih banyak

terekstrak pada senyawa bersifat polar. Semua noda yang dihasilkan terpisah

dengan baik menggunakan eluen sikloheksana:etil asetat (1:1).

Kedua eluen yang digunakan bersifat semi polar, namun eluen yang

sikloheksana:etil asetat (1:1) lebih polar daripada eluen yang heksana etil asetat

(7:3). Eluen sikloheksana:etil asetat (1:1) lebih baik daripada eluen heksana etil

asetat (7:3) karena baik pada ekstrak etil asetat maupun petroleum eter, eluen

sikloheksana:etil asetat (1:1) menunjukkan noda yang terpisah lebih banyak

daripada eluen heksana etil asetat (7:3). Hal ini menunjukkan golongan senyawa

steroid lebih mudah dipisahkan dengan eluen yang bersifat semi polar.

Pada penelitian Halimah (2010), pada ekstrak polar (etanol) menunjukkan

adanya senyawa flavonoid dan triterpenoid. Senyawa flavonoid dipisahkan

dengan KLT menggunakan eluen butanol:asam asetat:air (4:1:5) menunjukkan 4

noda yang terpisah dengan Rf antara 0,26-0,82. Sedangkan senyawa triterpenoid

dipisahkan dengan eluen n heksana:etil asetat (2:8) menunjukkan 7 noda yang

terbentuk dengan Rf antara 0,16-0,87.

Pada penelitian ini pada ekstrak polar (etil asetat) menunjukkan adanya

golongan senyawa alkaloid, tanin, dan steroid. Senyawa alkaloid dipisahkan

dengan eluen kloroform:metanol (9:1) dan (9,5:0,5). Pada eluen pertama terdapat

4 noda dengan Rf antara 0,56-0,8. Pada eluen yang kedua terdapat 5 noda dengan

Rf antara 0,27-0,87. Pada senyawa tanin dipisahkan dengan eluen butanol:asam

asetat:air (14:1:5) dan eluen asam asetat glacial:air:HCl pekat (30:10:3) yang

sama-sama terbentuk 2 noda, pada eluen pertama Rf antara 0,61-0,8 dan eluen

yang kedua Rf antara 0,4-0-489. Pada senyawa steroid dipisahkan menggunakan

eluen heksana:etil asetat (7:3) menunjukkan Rf antara 0,06-0,82 dengan 9 noda.

Eluen sikloheksana:etil asetat (1:1) menunjukkan Rf antara 0,06-0,86 dengan 12

noda.

Pada ekstrak semi polar (kloroform) Halimah (2010) menunjukkan adanya

senyawa steroid yang dipisahkan dengan KLT menggunakan eluen n heksana etil

asetat menghasilkan 6 noda dengan Rf antara 0,22-0,45. Pada penelitian ini

ekstrak semi polar (diklorometana) menunjukkan senyawa triterpenoid yang

dipisahkan dengan eluen benzene dan kloroform (3:7) menghasilkan Rf antara

0,16-0,76 dengan 5 noda dan eluen pada eluen heksana dan etil asetat (1:1)

menghasilkan Rf antara 0,12-0,79 dengan 7 noda.

Pada ekstrak non polar (n-Heksana) Halimah (2010) menunjukkan adanya

golongan senyawa triterpenoid yang dipisahkan dengan KLT menggunakan eluen

n-heksana:etil asetat (2:8) yang menunjukkan Rf antara 0,14-0,82 dengan 3 noda.

Pada penelitian ini ekstrak non polar menunjukkan adanya senyawa steroid yang

dipisahkan dengan eluen heksana:etil asetat (7:3) menunjukkan Rf antara 0,52-

0,88 dengan 5 noda dan eluen sikloheksana:etil asetat (1:1) menunjukkan Rf

antara 0,06-0,84 dengan 7 noda.

Berdasarkan perbandingan tersebut maka pada penelitian ini tiap-tiap

ekstrak baik polar, semi polar maupun non polar menunjukkan lebih banyak

senyawa yang dihasilkan daripada penelitian sebelumnya. Hal ini ditunjukkan

dengan banyaknya noda yang terpisah pada tiap-tiap ekstrak. Perbedaan tersebut

karena pelarut yang digunakan untuk tiap-tiap fraksi berbeda sehingga senyawa

yang dihasilkan juga berbeda.

4.6 Uji Toksisitas menggunakan larva udang

Uji toksisitas terhadap larva udang Artemia salina Leach atau Brine

Shrimp Test (BST) dapat digunakan sebagai uji pendahuluan pada penelitian yang

mengarah pada uji sitotoksik. Korelasi antara uji toksisitas akut ini dengan uji

sitotoksik adalah jika mortalitas terhadap Artemia salina Leach yang ditimbulkan

memiliki harga LC50< 1000 µg/mL. Parameter yang ditunjukkan untuk

menunjukkan adanya aktivitas biologi pada suatu senyawa pada Artemia salina

Leach adalah kematiannya (Meyer et al, 1982 dalam Farihah, 2008).

Senyawa bioaktif hampir selalu toksik pada dosis tinggi. Oleh karena itu

daya bunuh in vitro dari senyawa terhadap organisme hewan dapat digunakan

untuk menguji ekstrak tumbuhan yang mempunyai bioaktivitas dan untuk

memonitor fraksi bioaktif selama fraksinasi dan pemurnian. Salah satu organisme

yang sangat sesuai untuk hewan uji tersebut adalah brine shrimp (Lenny, 2006).

Beberapa kelebihan dari uji bioaktivitas dengan brine shrimp test (BST)

menggunakan larva udang Artemia salina adalah cepat waktu ujinya, sederhana

(tanpa teknik aseptik), murah (tidak perlu serum hewan), jumlah organisme

banyak, memenuhi kebutuhan validasi statistik dengan sedikit sampel (Meyer et

al, 1982)

4.6.1 Penetasan telur

Telur Artemia salina atau cyste berbentuk bulat berlekuk dalam keadaan

kering dan bulat penuh dalam keadaan basah. Warnanya coklat yang diselubungi

oleh cangkang yang tebal dan kuat. Cangkang ini berguna untuk melindungi

embrio terhadap pengaruh kekeringan, benturan keras, sinar ultraviolet dan

mempermudah pengapungan. Cangkang telur Artemia salina dibagi dalam dua

bagian yaitu korion (bagian luar) dan kutikula embrionik (bagian dalam). Lapisan

ketiga dinamakan selaput kutikuler luar yang terdapat di antara kedua lapisan

tersebut (Anonim, 2008).

Penetasan telur dilakukan dengan memasukkan telur Artemia salina Leach

ke dalam air laut sambil diaerasi untuk mengontakkan dengan udara selama 48

jam. Proses penetasan Artemia salina Leach ada beberapa tahapan yaitu tahap

hidrasi, pecahnya cangkang dan tahap payung atau tahap pengeluaran. Tahap

hidrasi terjadi penyerapan air sehingga telur yang diawetkan dalam bentuk kering

tersebut akan menjadi bulat dan aktif bermetabolisme. Tahap selanjutnya yaitu

tahap pecahnya cangkang yang disusul dengan tahap pecahnya payung yang

terjadi beberapa saat sebelum naupli (larva) keluar dari cangkang sebagaimana

pada Gambar 4.16.

Gambar 4.16 Tahap penetasan Artemia salina L. (Isnanstyo dan Kurniastuty, 1995 dalam Farihah, 2008)

Artemia yang baru menetas disebut dengan nauplius. Nauplius berwarna

orange, berbentuk bulat lonjong dengan panjang sekitar 400 mikron, lebar sekitar

170 mikron, dan berat 0,002 mg. Ukuran – ukuran tersebut sangat tergantung

berdasarkan strainnya. Nauplius mempunyai sepasang antenulla dan sepasang

antena. Antenulla berukuran lebih kecil dan pendek dibandingkan dengan

antenna. Selain itu, diantara antenulla terdapat bintik mata yang disebut dengan

occellus. Sepasang mandibula rudimenter terdapat dibelakang antenna. Sedangkan

labrum (semacam mulut) terdapat di bagian ventral. Morfologi nauplius di sajikan

pada Gambar 4.17.

Gambar 4.17 Morfologi nauplius Artemia salina L. (Isnansetyo dan Kurniastuty, 1995 dalam Farihah,2008)

Masing masing larutan ekstrak etil asetat, diklorometana dan petroleum

eter dibuat dengan konsentrasi 5 ppm, 25 ppm, 50 ppm, 100 ppm, 150 ppm, 200

ppm, dan 250 ppm serta sebagai pengontrolnya yaitu 0 ppm yaitu pelarutnya

tanpa penambahan ekstrak. Sepuluh larva udang Artemia salina Leach digunakan

sebagai hewan uji toksisitas dalam setiap konsentrasi masing-masing ekstrak.

Perlakuan uji toksisitas ini dilakukan sebanyak 3 kali pengulangan untuk

mendapatkan keakuratan data.

Larutan uji dibuat dari larutan stok 10000 ppm dengan mengambil 5 µL,

25 µL, 50 µL, 100 µL, 150 µL, 200 µL, dan 250 µL masing-masing ekstrak ke

dalam botol vial. Selanjutnya pelarut masing-masing ekstrak diuapkan sampai

kering dalam desikator agar kematian larva tidak dipengaruhi oleh pelarutnya.

Setelah pelarutnya mengering, ditambahkan dengan 100 µL DMSO (dimetil

sulfoksida) dan sedikit air laut kemudian dilarutkan sampai ekstraknya larut

seluruhnya. Pelarutan ekstrak dengan air laut sering menimbulkan masalah karena

adanya perbedaan tingkat kepolaran, ekstrak tidak mampu larut dengan air laut

sehingga digunakan DMSO untuk melarutkannya. DMSO digunakan sebagai

surfaktan karena ekstrak tidak dapat larut dalam air laut. Surfaktan merupakan

senyawa yang memiliki ujung hidrofilik dan hidrofobik sehingga dapat

melarutkan ekstrak dengan air laut.

Ekstrak yang telah larut dengan air laut selanjutnya dipindahkan dalam

labu ukur 10 mL. Larva Artemia salina Leach selanjutnya dimasukkan sebanyak

10 ekor ke dalam labu ukur yang berisi ekstrak yang telah larut dengan air laut.

Kemudian ditambah 1 tetes larutan ragi roti dan ditambahkan air laut sampai

tanda batas. Ragi roti merupakan makanan untuk artemia, dibuat dalam bentuk

larutan karena artemia hanya dapat menelan makanan yang berukuran kecil yaitu

kurang dari 50 mikron dan artemia akan menelan makanannya secara langsung.

Kontrol dibuat dengan cara yang sama yaitu dengan membuat larutan yang sama

kecuali penambahan ekstrak. Hasil uji toksisitas ketiga ekstrak dan hasil analisa

dengan program Minitab 14 dengan tingkat kepercayaan 95% dapat dilihat pada

Lampiran 7.

Meyer (1982) dalam Farihah (2008) melaporkan bahwa suatu ekstrak

menunjukkan aktivitas ketoksikan dalam BST jika ekstrak dapat menyebabkan

kematian 50% hewan uji pada konsentrasi kurang dari 1000 ppm. Pernyataan di

atas menunjukkan ketiga ekstrak tanaman anting-anting bersifat toksik terhadap

Artemia karena memiliki nilai LC50< 1000 ppm.

��

��

��

��

��

��

��

�

��

��

��

�

��

��

�

�

� ��

��

��

��

� ! ��

��

"#�� $�%��& ��

'�#& ��(�)�

Gambar 4.18 Kurva mortalitas larva udang Artemia salina Leach pada ekstrak etil

asetat

��

��

��

��

��

��

��

�

��

��

��

�

��

��

�

�

� ��

��

��

��

� ! ��

��

"#�� $�%��& ��

'�#& ��(�)�

Gambar 4.19 Kurva mortalitas larva udang Artemia salina Leach pada ekstrak

diklorometana

��

��

��

��

��

��

��

�

��

��

��

�

��

��

�

�

� ��

��

��

��

� ! ��

��

"#�� $�%��& ��

'�#& ��(�)�

Gambar 4.20 Kurva mortalitas larva udang Artemia salina Leach pada ekstrak

petroleum eter

Berdasarkan kurva mortalitas larva udang Artemia salina Leach ketiga

ekstrak etil asetat, diklorometana, dan petroleum eter, masing-masing diperoleh

nilai LC50 sebesar 21,006 ppm 17,6495 ppm dan 11,8547 ppm yang dapat dilihat

dari nilai median pada masing-masing kurva di atas. Hasil LC50 ketiga ekstrak

tersebut menunjukkan bahwa tingkat toksisitas senyawa dalam ekstrak petroleum

eter lebih besar daripada ekstrak diklorometana dan ekstrak etil asetat. Kandungan

senyawa yang berpotensi dalam ketiga ektrak tanaman ini dapat diketahui

berdasarkan hasil uji fitokimia.

Pada gambar di atas terlihat bahwa semakin besar nilai konsentrasi

masing-masing ekstrak maka mortalitas terhadap Artemia juga semakin besar.

Daerah di sebelah kanan kurva menunjukkan persentase kematian Artemia

sedangkan daerah di sebelah kiri kurva menunjukkan persentase Artemia yang

masih dapat bertahan hidup pada konsentrasi masing-masing ekstrak pelarut.

Kurva sebelah kanan menunjukkan kurva dari nilai lower, kurva tengah

menunjukkan kurva percetile dan sebelah kiri menunjukkan kurva upper dari data

pada lampiran. Persentase kemungkinan kematian Artemia yang ditimbulkan

berada pada kisaran konsentrasi di antara kurva lower dan upper. Adanya

penambahan konsentrasi pada masing-masing ekstrak menyebabkan kematian

Artemia, mengalami disorientasi gerak (gerakannya tidak teratur). Hal ini

membuktikan Artemia mati disebabkan oleh sifat toksik dari masing-masing

ekstrak anting-anting.

Meyer (1982) dalam Farihah (2008) melaporkan bahwa suatu ekstrak

menunjukkan aktivitas ketoksikan dalam BSLT jika ekstrak dapat menyebabkan

kematian 50% hewan uji pada konsentrasi kurang dari 1000 ppm. Pernyataan di

atas menunjukkan ketiga ekstrak tanaman anting-anting bersifat toksik terhadap

Artemia karena memiliki nilai LC50< 1000 ppm.

Hasil LC50 ketiga ekstrak tersebut menunjukkan bahwa tingkat toksisitas

senyawa dalam ekstrak petroleum eter lebih besar daripada ekstrak diklorometana

dan ekstrak etil asetat. Hal tersebut berkaitan dengan kandungan senyawa aktif

yang terdapat dalam ketiga ektrak tanaman berdasarkan hasil uji fitokimia. Hasil

fitokimia menunjukkan pada ekstrak etil asetat, terdapat senyawa tannin, alkaloid

dan steroid, pada ekstrak diklorometana terdapat senyawa triterpenoid dan pada

ekstrak petroleum eter terdapat senyawa steroid.

Pada penelitian sebelumnya, Halimah (2010) menunjukkan tingkat

toksisitas ekstrak n-heksana, ekstrak etanol, ekstrak kloroform yaitu dengan nilai

LC50 57,0933 ppm, 73,4575 ppm dan 149,374 ppm. Senyawa aktif yang terdapat

pada tiap-tiap fraksi antara lain fraksi polar (etanol) menunjukkan adanya

senyawa flavonoid dan triterpenoid, fraksi semi polar (kloroform) menunjukkan

adanya senyawa steroid, dan fraksi non polar (n-heksana) menunjukkan adanya

senyawa triterpenoid.

Pada penelitian ini nilai LC50 ekstrak etil asetat, diklorometana dan

petroleum eter sebesar 21,006 ppm 17,6495 ppm dan 11,8547 ppm. Senyawa aktif

yang terdapat pada fraksi polar (etil asetat) adalah senyawa tanin, alkaloid dan

steroid, pada fraksi semi polar (diklorometana) adalah senyawa triterpenoid dan

pada fraksi non polar (petroleum eter) adalah senyawa steroid. Perbandingan

tersebut menunjukkan bahwa pada penelitian ini memiliki tingkat toksisitas yang

lebih tinggi daripada penelitian sebelumnya baik ditinjau dari tingkat

kepolarannnya maupun senyawa aktif yang dihasilkan pada tiap-tiap fraksi. Hal

ini disebabkan karena pelarut yang digunakan pada tiap-tiap kepolaran berbeda

akan menghasilkan jumlah senyawa dan daya aktivitas yang berbeda pula.

Golongan senyawa kimia yang terdapat dalam tanaman berkaitan dengan

aktivitas biologis suatu tanaman. Penelitian sebelumnya pada tanaman Acalipha

fruticosa dan Azadirachta indica menunjukkan adanya senyawa tanin, terpenoid,

flavonoid sebagai antimalaria. Arfianti (2007) menyatakan bahwa ekstrak buah

mahkota dewa mengandung alkaloid, flavonoid, tannin, saponin dan steroid dapat

digunakan sebagai antioksidan. Hal ini menunjukkan kandungan senyawa aktif

yang terdapat dalam tanaman anting-anting dari ketiga ekstrak dapat memperkuat

potensi bioaktivitas senyawa dalam tanaman ini yang selama ini telah dikenal

sebagai tanaman obat.

4.7 Pemanfaatan Hasil Penelitian Tanaman Obat dalam Perspektif Islam

Allah menumbuhkan tumbuh-tumbuhan yang indah, hijau dan banyak

memberi manfaat serta kenikmatan kepada manusia. Banyak ayat Al-Qur'an yang

mengajak manusia untuk berfikir dan menyelidiki tumbuh-tumbuhan agar

mendapat manfaat yang lebih banyak. Allah berfirman dalam surat an-Nahl ayat

11:

�� ! ��" �� # � ��$$�

“Dia menumbuhkan bagi kamu dengan air hujan itu tanam-tanaman; zaitun, korma, anggur dan segala macam buah-buahan. Sesungguhnya pada yang demikian itu benar-benar ada tanda (kekuasaan Allah) bagi kaum yang memikirkan” (QS. An-Nahl: 11).

Ayat ini menyebutkan beberapa tanaman yang ditumbuhkan Allah dari

yang paling cepat layu, yang paling panjang usianya dan paling banyak

manfaatnya seperti zaitun, kurma dan anggur (Shihab, 2002: 195). Kaum yang

memikirkan akan tanda-tanda kekuasaan-Nya tentu akan dapat mengambil

pelajaran dan manfaat terhadap segala ciptaan-Nya. Sebagaimana memanfaatkan

tanaman Anting-anting sebagai tanaman obat.

Rasulullah telah memberikan petunjuk tentang cara mengobati diri beliau

sendiri, keluarganya dan para sahabat yaitu menggunakan jenis obat yang tidak

ada campuran kimia. Pengobatan Nabi menggunakan tiga jenis obat yaitu obat

alamiah, obat ilahiyah dan kombinasi obat alamiah dan ilahiyah. Pengobatannya

berdasarkan wahyu Allah tentang apa yang bermanfaat dan yang tidak berbahaya,

misalnya melakukan pengobatan dengan tumbuh-tumbuhan. Pemanfaatan

tanaman sebagai obat merupakan salah satu sarana untuk mengambil pelajaran

dan memikirkan tentang kekuasaan Allah dan meneladani cara pengobatan Nabi.

Tanaman anting-anting merupakan salah satu tanaman yang dapat

dimanfaatkan sebagai obat. Hal ini telah dibuktikan dengan hasil penelitian uji

fitokimia dan uji toksisitas ekstrak tanaman anting-anting (Acalypha indica L.)

terhadap larva udang Artemia salina Leach ini. Hasil penelitian ini menunjukkan

bahwa ekstrak tanaman anting-anting mempunyai potensi bioaktivitas sebagai

tanaman obat dengan ditunjukkan oleh nilai LC50< 1000 ppm pada masing-masing

ekstrak etil asetat, diklorometana, dan petroleum eter. Potensi bioaktivitas yang

dimiliki tanaman anting-anting ini dapat digunakan sebagai acuan bahwa tanaman

ini berpotensi di bidang farmakologi sebagai tanaman obat, sebagaimana

Rasulullah telah menggunakan tanaman-tanaman herbal sebagai tanaman obat.

Penjelasan tersebut didukung oleh firman Allah dalam surat Asy-syu’ara ayat 7:

��

"Dan apakah mereka tidak memperhatikan bumi, berapakah banyaknya Kami tumbuhkan di bumi itu berbagai macam tumbuh-tumbuhan yang baik"(QS.Asy-Syu’ara:7)

Kata ila pada awal ayat ini merupakan kata yang mengandung makna

batas akhir. Ia berfungsi memperluas arah pandangan hingga batas akhir, dengan

demikian ayat ini mengundang manusia untuk mengarahkan pandangannya

hingga batas kemampuannya, dengan aneka tanah dan tumbuhannya dan aneka

keajaiban yang terhampar pada tumbuh-tumbuhan.

Kata zauj berarti pasangan. Pasangan yang dimaksud ayat ini adalah

pasngan tumbuh-tumbuhan, karena tumbuhan muncul di celah-celah tanah yang

terhampar di bumi, dengan demikian ayat ini mengisyaratkan bahwa tumbun-

tumbuhan memiliki pasangan (benang sari dan putik) guna pertumbuhan dan

perkembangannya. Kata karim antara lain digunakan untuk menggambarkan

segala sesuatu yang baik bagi setiap objek yang disifatinya. Tumbuhan yang baik,

adalah yang subur dan bermanfaat (Shihab, 2002: 12). Berdasarkan firman Allah

tersebut, jelas bahwa Allah menciptakan bumi yang di dalamnya banyak terdapat

tumbuhan yang baik, yang dapat dimanfaatkan oleh makhluk hidup, diantara

tumbuhan tersebut salah satunya adalah tanaman anting-anting.

Pemanfaatan tanaman anting-anting sebagai obat merupakan suatu upaya

untuk mengikuti sunah Nabi. Kita dianjurkan untuk mengamalkan pengobatan,

sesuai sabda Rasulullah SAW: Dari Usamah bin Syarik berkata, "Bahwa saya

pernah berada di sisi Rasulullah, lalu datang sekelompok Arab badui. Mereka

berkata, "Wahai Rasulullah, apakah kami bisa berobat?"Nabi menjawab, “Wahai

para hamba Allah carilah obat karena sesungguhnya Allah tidak menciptakan

suatu penyakit tanpa menciptakan obatnya, selain satu penyakit saja."”Mereka

bartanya: “Penyakit apakah itu?” jawab Beliau: “Penyakit usia tua." (HR.

Ahmad) (Muhammad, 2007: 14).

Rasulullah telah bersabda: "Sesungguhnya Allah tidak menurunkan satu

penyakit, kecuali Dia menurunkan obat penyembuhnya; obat penyakit diketahui

bagi yang mengetahuinya dan tidak diketahui bagi orang jahil." (Muhammad,

2007: 14). Hadits-hadits tersebut berlaku umum untuk semua jenis penyakit. Nabi

Muhammad saw memposisikan kedudukan antara obat dan penyakit yang saling

berlawanan. Jadi setiap penyakit memiliki lawan yaitu obat. Sehingga berdasarkan

hadits tersebut maka untuk mendapatkan obat dari suatu penyakit maka kita harus

berusaha dan berpikir dari apa yang telah diwahyukan Allah sebagai petunjuk

bagi kehidupan.

Kekuasaan Allah dalam tumbuh-tumbuhan terlihat pada modifikasi

tumbuh-tumbuhan sesuai dengan berbagai kondisi lingkungan. Semua tumbuhan

memiliki susunan dan� bentuk luar yang berbeda dengan tumbuhan lain. Setiap

tanaman yang ditumbuhkan oleh Allah tentunya memiliki kegunaan yang

berbeda-beda. Tanaman padi dapat digunakan sebagai sumber makanan pokok

dan begitu juga tanaman yang bisa dimanfaatkan sebagai tanaman obat, seperti

penggunaan tanaman anting-anting (Acalypha indica L.).

Ayat-ayat al-Qur'an diperuntukkan bagi manusia secara total baik lafazh,

makna, petunjuk dan informasinya. Allah menyuruh kita untuk terus-menerus

mempelajarinya, menelaah keterangan dan tujuan dalam firman-Nya, sehingga

kita bisa mendapatkan kejelasan ilmu pengetahuan darinya dan kita mendapat

petunjuk untuk menentukan langkah-langkah penelitian dan tujuannya.

Sebagaimana firman Allah dalam QS. Al-Hijr ayat 19:

�� &�� & �� 0 �" �� &0��- "'�� ( � � �� #+$- )�� $1��

“Dan kami Telah menghamparkan bumi dan menjadikan padanya gunung-gunung dan kami tumbuhkan padanya segala sesuatu menurut ukuran” (QS. Al-hijr :19).

Allah telah menciptakan bumi dan menjaga keseimbangannya dengan

gunung-gunung yang kokoh ditempatnya. Juga mengirimkan air hujan ke tanah.

Maka, terbukalah kehidupan tanah dengan tanaman yang seimbang secara teliti

dan tepat. Ilmu pengetahuan modern menetapkan bahwa setiap tumbuh-tumbuhan

telah terukur unsur-unsurnya dalam kadar tertentu. Suatu unsur selalu berbeda

antara satu tanaman dengan tanaman lainnya dengan cara penyerapan nutrisi dari

akar yang terhujam ditanah kemudian dibawa ke batang, dahan, daun dan bunga.

Alqur’an mengemukakan beberapa ayat seputar penciptaan dan simbol-

simbol kebesaran Allah Swt di muka bumi. Mengawali dengan bumi Alqur’an

mengatakan : “Dan kami telah menghamparkan bumi” . Istilah bahasa Arab,

madd, asalnya berarti ‘perluasan dan penyebaran’. Yang paling memungkinkan

adalah bahwa ia merujuk pada bagian-bagian bumi yang muncul dari dalam air.

“dan menjadikan padanya gunung-gunung yang kokoh”, kata rawasi yang berarti

tetap, tak bergerak , atau menunjang, yang menunjukkan bahwa bukan hanya

bersifat tetap, gunung-gunung juga berfungsi sebagai pilar penyangga kerak bumi

agar tetap kokoh sekaligus menunjang kelestarian hidup manusia. Kemudian

menunjukkan faktor yang paling penting dalam kehidupan manusia serta semua

makhluk hidup lain, seperti tanaman-tanaman, ayat suci diatas mengatakan : “dan

kami tumbuhkan di dalamnya segala sesuatu menurutukuran”.

Alangkah indah dan jelasnya penafsiran terhadap kata Arab, mauzun yang

berasal dari kata wazn (bobot). Kata ini merujuk pada kuantitas segala sesuatu.

Dikatakan dalam Mufrodat karya Imam Raghib, “Bobot adalah pengetahuan

mengenai kuantitas sesuatu”. Kata dalam ayat ini menunjukkan pada

pemeliharaan secara eksak atas perhitungan dan ukuran-ukuran yang

menakjubkan, yang terdapat pada semua bagian tumbuh-tumbuhan, seperti

batang, cabang, daun, lapisan-lapisan, biji serta buah, yang masing-masingnya

mempunyai partikel tertentu (Imani, 2005: 333-334).

Penjelasan tentang segala sesuatu akan baik jika sesuai dengan kadarnya

didukung dengan hadits nabi Muhammad saw (Farooqi, 2005: 173) “ Setiap

penyakit ada obatnya. Ketika obat yang diberikan tepat, penyakit itu

tersembuhkan dengan izin Allah yang Maha Kuasa”(HR.Muslim). �

�

BAB V

PENUTUP

5.1 Kesimpulan

1. Golongan senyawa yang terdapat dalam ekstrak tanaman anting-anting

(Acalypha indica L.) berdasarkan uji fitokimia dengan reagen menunjukkan

adanya golongan senyawa tanin, alkaloid, dan steroid (dalam ekstrak etil

asetat), triterpenoid (dalam ekstrak diklorometana) dan steroid (dalam ekstrak

petroleum eter) dan pemisahan menggunakan KLT pada ekstrak etil asetat

dengan eluen butanol: asam asetat: air (14:1:5) terdapat 2 senyawa tanin,

eluen asam asetat glasial: air: HCl pekat (30:10:3) terdapat 2 senyawa tanin,

eluen kloroform: metanol (9:1) terdapat 1 senyawa alkaloid, eluen kloroform:

metanol (9,5:0,5) terdapat 2 senyawa alkaloid, eluen n-heksana:etil asetat

(7:3) terdapat 6 senyawa steroid, eluen sikloheksana: etil asetat (1:1) terdapat

7 senyawa steroid, pada ekstrak diklorometana eluen benzene: kloroform

(3:7) terdapat 4 senyawa triterpenoid, eluen n-heksana: etil asetat (1:1)

trrdapat 7 senyawa triterpenoid, pada ekstrak petroleum eter eluen n-heksana:

etil asetat (7:3) terdapat 2 senyawa steroid, dan eluen sikloheksana: etil asetat

(1:1) terdapat 3 senyawa steroid.

2. Masing-masing ekstrak tanaman anting-anting (Acalypha indica L.) memiliki

tingkat toksisitas terhadap larva udang Artemia salina Leach, ditunjukkan

dengan nilai LC50< 1000 ppm. Tingkat toksisitas ekstrak petroleum eter lebih

besar daripada ekstrak diklorometana dan etil asetat yaitu dengan nilai LC50

sebesar 11,8547 ppm untuk ekstrak petroleum eter,17,6495 ppm untuk

ekstrak diklorometana dan 21,006 ppm untuk ekstrak etil asetat.

5.2 Saran

1. Hasil uji pendahuluan dengan metode BSLT (Brine Shrimp Lethality Test)

menunjukkan dalam ketiga variasi ekstrak pelarut tanaman anting-anting

memiliki potensi bioaktivitas, sehingga perlu dilakukan pengujian

bioaktivitas lebih lanjut terhadap tanaman ini.

2. Perlu dilakukan penelitian lanjutan untuk mengisolasi dan identifikasi

masing-masing senyawa yang terdapat dalam tanaman anting-anting.

�

�

DAFTAR PUSTAKA

Anonim. 2007. Artemia salina-Brine Shrimp-Sea Monkeys, Urzeitkrebse-Sea Monkey. Artemia Reference Center/Ghent University-Faculty of Bioscience Engineering US Geological Survey. http://www.aquaculture.ugent.be/coursmat/artbiol/arc.htm. Diakses tanggal 28 November 2009.

Anonim. 2009. Dielectric Constant. http:// www. clippercontrols. com/info/ dielectric_constants. html. Diakses Tanggal 28 November 2009.

Anonim. 2007. Dimethyl Sulfoxide Health and Safety Information. http://www.gaylordchemical.com/products/dmso.htm. Diakses Tanggal 08 Januari 2010.

Anonim. 2010. Dimethyl Sulfoxide. http:// en. wikipedia. org/wiki/ Dimethyl_ sulfoxide. Diakses Tanggal 08 Januari 2010.

Anonim. 2009. Petroleum Ether. http:// www. jtbaker. com/msds/ englishhtml/ P1696.htm. Diakses Tanggal 28 November 2009.

Arfianti, N. 2008. Aktivitas Insulinotropik Ekstrak Etanol Buah Mahkota Dewa Secara In Vitro. Bogor: Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam Institut Pertanian Bogor

Aripin, S. 2007. Identifikasi Senyawa Flavonoid dari Bunga Angsret (Spathoda campanulata Beauv) dan Uji Aktivitasnya Sebagai Antioksidan. Skripsi Tidak Diterbitkan. Malang: Jurusan Kimia FMIPA Universitas Brawijaya.

Arisandi, Y. dkk. 2008. Khasiat Tanaman Obat. Jakarta: Pustaka Buku Murah. Azmahani, dkk. 2002. In Vitro Anti Bakterial and Anti Fungal Properties of

Acalypha Indica (Kucing Galak). Proceedings of The Regional Symposium on Environment and Natural Resources. Department of Biomedical Sciences, Faculty Medicine and Health Sciences, University Putra Malaysia, 43400 UPM Serdang, Selangor Darul Ehsan. Malaysia.

Baraja, M. 2008. Uji Toksisitas Ekstrak Daun Ficus elastica Nois ex Blume

terhadap Artemia salina Leach dan Profil Kromatografi Lapis Tipis. Skripsi Diterbitkan. Surakarta: Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta

Barazing, H. 2007, Pengobatan Aman Cara Nabi: Herba Sebagai Pengobatan

Modern Alternatif, Tinjauan Medis Dan Syariat Islam. http:// hohanb. webs.com/. Diakses tanggal 09 Juli 2010.

Bawa, I, G, A, G. 2009. Isolasi dan Identifikasi Golongan Senyawa Toksik dari

Daging Buah Pare (momordica charantia l.). Jurnal Kimia. Bukit Jimbaran: Jurusan Kimia FMIPA Universitas Udayana.

Burdick and Jackson, 2010. Dielectric Constants. http:// macro. lsu. edu /howto/

solvents. Dielectric Constant.htm. Diakses Tanggal 08 Januari 2010.

Deny. 2007. Pemanfaatan Tannin Sebagai Perekat. Jurnal Penelitian. Fakultas Teknologi Pertanian Bogor.

Farihah. 2006. Uji Toksisitas Ekstrak Daun Ficus benjamina L terhadap Artemia

salina Leach dan Profil Kromatografi Lapis Tipis. Skripsi Diterbitkan. Surakarta: Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.

Farooqi, M. I. H. 2005. Terapi Herbal Cara Islam; Manfaat Tumbuhan Menurut

Al-Qur'an dan Sunah Nabi. Diterjemahkan oleh Ahmad Y. Samantho, Jakarta: Penerbit Hikmah (PT Mizan Publika).

Febriany, S. 2004. Pengaruh Beberapa Ekstrak Tunggal Bangle dan Gabungannya

yang Berpotensi Meningkatkan Aktivitas Enzim Lipase Secara In Vitro. Tesis tidak diterbitkan. Bogor: Jurusan Kimia IPB.

Govindarajan, M., Jabanesan, A., Reetha, D., Amsath, R., Pushpanathan, T., dan

Samidurai, K. 2008. Antibacterial Activity of Acalypha indica L. European Review for Medical and Pharmacological Sciences.

Gritter, R.J. 1991. Pengantar Kromatografi. edisi kedua. Diterjemahkan oleh

Kokasih Padmawinata. Bandung: Penerbit ITB. Guether, E. 1987. Minyak Atsiri. Jilid I. Diterjemahkan oleh Ketaren S. Jakarta:

Universitas Jakarta. Halimah, N. 2010. Uji Fitokimia dan Uji Toksisitas Ekstrak Tanaman Anting-

Anting (Acalypha indica Linn) Terhadap Larva Udang (Artemia salina

Leach). Skripsi Tidak Diterbitkan. Malang: Jurusan Kimia Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim.

Handayani D., N. Sayuti dan Dachriyanus. 2008. Isolasi dan Karakterisasi

Senyawa Antibakteri Epidioksi Sterol dari Spon Laut Petrosia nigrans, Asal Sumatera Barat. Prosiding Seminar Nasional Sains dan Teknologi-II 2008. Lampung: Universitas Lampung.

Harborne J.B. 1987. Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro. Bandung: Penerbit ITB.

Hayati, E.K. 2009. Senyawa Potensi Antimalaria Tanaman Anting-Anting

(Acalypha indica Linn): Ekstraksi Pemisahan dan Bioaktivitasnya Secara in Vivo. Jurnal Penelitian. Malang: Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim.

Hidayat, M. B. C. 2004. Identifikasi Senyawa Flavonoid Hasil Isolasi dari

Propolis Lebah Madu Apis mellifera dan Uji Aktivitasnya sebagai Antijamur Candida albinans. Skripsi Tidak Diterbitkan. Malang: Jurusan Kimia FMIPA Universitas Brawijaya.

Indrayani, L. dkk. 2006. Skrinning Fitokimia dan Uji Toksisitas Ekstrak Daun

Pecut Kuda (Stachytarpheta jamaicensis L. Vahl) Terhadap Larva Udang Artemia salina Leach. Jurnal. Fakultas Sains dan Matematika. Salatiga: Universitas Kristen Satya Wacana.

Imani, A.K.Q. 2005. Tafsir Nurul Quran Sebuah Tafsir Sederhana Menuju Cahaya Al-Qur'an, vol. 8. Penerjemah Salman Nano, Jakarta : Penerbit Al-Huda,

Kartesz, J. 2000. Acalypha indica. The PLANTS Database, database (version 5.1.1), National Plant Data Center, NRCS, USDA. Baton Rouge, LA 70874-4490 USA. http://plants.usda.gov. Diakses tanggal 08 Januari 2010

Kimball, J. W. 1983. Biologi Umum Jilid 1. Jakarta: Erlangga.

Kristianingsih. 2005. Isolasi dan Identifikasi Senyawa Triterpenoid dari Akar Tanaman Kedondong Laut (Polyscias fruticosa). Skripsi Tidak Diterbitkan. Malang: Jurusan Kimia FMIPA Universitas Brawijaya.

Kusnaeni, V. 2008. Isolasi dan Karakterisasi Senyawa Fraksi n-Heksana dari ekstrak kulit batang Angsret (Spathoda campanulata Beauv). Skripsi Tidak Diterbitkan. Malang: Jurusan Kimia. Fakultas MIPA. Universitas Brawijaya.

Kussuryani, Y. 2010. Isolasi dan Penentuan Struktur Molekul Senyawa Kimia dalam Akar tanaman Acalypha indica Serta Uji Aktivitas Biologinya. Abstrak Tesis Jurusan Kimia. Jakarta: Universitas Indonesia.

Lemmens, R. H. M. J. and Soetjipto, W. 1991. Dye and Tannin- Production Plants. Netherlands: Pudos Wagengen.

Lenny, S. 2006. Uji Bioaktifitas Kandungan Kimia Utama Puding Merah dengan Metode Brine Shirmp. Jurnal. Medan: USU.

Lisdawati, V. 2002. Berdasar Uji Penapsisan Farmakologi pada Buah Mahkota Dewa. Jurnal. Fakultas Kedokteran. Yogyakarta: Universitas Gajah Mada.

Lutfillah, M. 2008. Karakterisasi Senyawa Alkaloid Hasil Isolasi dari Kulit Batang Angsret (Spathoda campanulata Beauv) Serta Uji Aktivitasnya Sebagai Antibakteri Secara In Vitro. Skripsi Tidak Diterbitkan. Malang: Jurusan Kimia. Fakultas MIPA. Universitas Brawijaya.

Mbwanbo, Z.H., Moshi, M.J., Kapingu, M.C. dan Nondo, R.S.O. 2007. Antimicrobial Activity and Brine Srimph Toxicity of Extracts of Terminalia Brownii Roots and Stem. Tanzania: Institute of Traditional Medicine, Muhimbili University College of Health Sciences.

Meyer, B. N., N. R. Fergini, J. E. Putnam, L. B. Jacobsen, D. E. Nicholas dan J. L. Mc Laughin. 1982. Brine Shrimp; a Convient General Bioassay for Active Plant Constituents. Plant Medica.

Minarti, dkk. 2010. Penapisan Kimia Senyawa Alkaloid dalam Ekstrak Daun Johar (Cassia Siamea Lamk.). Prosiding Seminar Tantangan Penelitian Kimia.

Muhammad, M. H. M. 2007. Mu’jizat Kedokteran Nabi. Jakarta: Qultum Media.

Muslimah, S. 2008. Uji Sitotoksik Fraksi Protein daun dan bunga kucing-kucingan (Acalypha Indica L.) Terhadap sel Myeloma. Skripsi Diterbitkan. Surakarta: Fakultas Farmasi Universitas Muhamadiyah Surakarta.

Mustikaningtyas, D., Fachriyah, E., dan Mulyani, N.S. 2006. Isolasi, Identifikasi, dan Uji Aktifitas Antibakteri Ekstrak Etil Asetat Rimpang Lengkuas Merah (Alpinia galanga). http: // www. adln. lib. unair.ac.id /go.php2006. Diakses tanggal 09 Maret 2010.

Octavia, D,R. 2009. Uji Aktivitas Penangkap Radikal Ekstrak Petroleum Eter, Etil Asetat dan Etanol Daun Binahong (Anredera Corfolia (Tenore) Steen) dengan metode DPPH (2,2-difenil-1- pikrihidrasil.). Skripsi Diterbitkan. Surakarta: Fakultas Farmasi Universitas Muhamadiyah

Pasya, A. F. 2004. Dimensi Sains al-Qur'an Menggali Ilmu Pengetahuan dari al-Qur'an. Solo: Tiga Serangkai.

Pissuthanan, S., et al. 2004. Brine Shrimp lethality Activity of Thai Medicinal

Plants in the family Meliaceae. Naresuan University Journal;12(2): 13-18.

Poedjiadi, A. dan F. M. T. Supriyanti. 1994. Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta: UI Press.

Praptiwi, Harapini, M., dan Chairul. 2007. Uji Aktivitas Antimalaria Secara In-Vivo Ekstrak Ki Pahit (Picrasma javanica) Pada Mencit Yang Diinfeksi Plasmodium berghei. Jurnal. Bogor: Bidang Botani, Puslit Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia, 16911

Purwaningsih, Y. 2003. Isolasi dan Identivikasi senyawa flavonoid dari Biji Kacang Tunggak (Vigna unguiculata L. Walp). Skripsi Tidak Diterbitkan Malang: Jurusan Kimia. Fakultas MIPA. Universitas Brawijaya.

Purwatiningsih, S. 2003. Studi Aktivitas dan Kandungan Kimia Tanaman fagraea Racemosa Jack ex wall. Abstrak Penelitian. Surabaya: Universitas Airlangga.

Puspita, M, D, A. 2009. Pengoptimuman Fase Gerak KLT Menggunakan Desain Campuran untuk Pemisahan Komponen Ekstrak Meniran (Phylantus ninuri). Skripsi Diterbitkan. Bogor: Departemen Kimia Fakultas MIPA. IPB.

Rita, W, S. 2010. Isolasi, Identifikasi, dan Uji Aktivitas Antibakteri Senyawa Golongan Triterpenoid pada Rimpang Temu Putih (Curcuma zedoaria (Berg.) Roscoe. Jurnal Kimia FMIPA. Bukit Jimbaran: Universitas Udayana.

Robinson, T. 1995. Kandungan Senyawa Organik Tumbuhan Tinggi. Diterjemahkan oleh Prof. Dr. Kosasih Padmawinata. Bandung: ITB.

Runadi, D. 2007. Isolasi dan Identifikasi Alkaloid dari Herba komfrey (symphytum officinale l.). Karya Ilmiah. Jatinangor : Universitas Padjadjaran Fakultas Farmasi.

Saadah, L. 2010. Isolasi dan Identifikasi Senyawa Tanin dari Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.). Skripsi. Malang: Jurusan Kimia Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim.

Syamsudin., Tjokrosonto, S., Wahyuono, S dan Mustofa. 2007. Aktivitas

Antiplasmodium dari dua Fraksi Ekstrak n- Heksana Kulit Batang Asam Kandis (Garcinia parvifolia Miq). Majalah Farmasi. Yogyakarta: Universitas Gajah Mada.

Sastrohamidjojo, H. 2007. Kromatografi. Yogyakarta: UGM Press.

Sax, N.I.and Lewis, R.J. 1987. Hawley’s Condensed Chemical Dictionary. New York: Van Nostrand Reinhold Company.

Setiawati, E. 2001. Isolasi dan Karakterisasi Senyawa- Seyawa terpeniod dalam minyak Atsiri Rimpang Temu Putih (Curcuma Zedonica (Berg.) Roscoe. Skripsi Tidak Diterbitkan. Malang: Jurusan Kimia. Fakultas MIPA. Universitas Brawijaya.

Shihab, Q. 2002. Tafsir Al-Mishbah Pesan, Kesan, dan Keserasian Al-Qur'an

Vol.7,8 dan 10. Jakarta: Penerbit Lentera Hati.

Soemiati, A., Kosela, S., Hanafi, M., dan Harrison, L.J. 2010. Senyawa Triterpenoid dan Asam 3-hidroksi-isonikotinat dari Ekstrak Diklorometana Akar Garcinia picrorrhiza MIQ. Jurnal Jakarta: Jurusan Farmasi Universitas Indonesia.

Sudarmadji, S., B. Haryono dan Suhardi. 2007. Prosedur Analisa Bahan Makanan dan Pertanian. Yogyakarta: Liberty.

Sumaryanto, A. 2009. Isolasi Karakterisasi Senyawa Alkaloid Dari Kulit Batang Tanaman Angsret (Spathoda campanulata Beauv) Serta Uji Aktivitas Biologisnya Dengan Metode Uji Brine Shrimp. Skripsi Tidak Diterbitkan. Jurusan Kimia. Fakultas MIPA. Malang: Universitas Brawijaya.

Vogel. 1978. Text Book Of Practical Organic Chemistry, 4th Edition. London: Longman Group Limited.

Wagner, H and Bladt, S. 2001. Plant Drugs Analysis A Thin Layer Chromatography Atlas second edition. New York: Springer Verlag Berlin Heidenberg

Wei-Feng, D., L. Zhong-Wen and S. Han-Dong. 1994. A New Compound from Acalypha australis, Laboratory of Phytochemistry. Kunming Institute of Botany. Kunming 650204: Chiese Academy of Sciences.

Widodo, N. 2007. Isolasi dan Karakterisasi Senyawa Alkaloid yang Terkandung dalam Jamur Tiram Putih (Pleurotus Ostreatus). Skripsi diterbitkan Universitas Negeri Semarang: Jurusan Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam.

Winarno, F. G. 2002. Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama.

Widyasari, A, R. 2008. Karakterisasi dan Uji Antibakteri Senyawa Kimia Fraksi n-Heksana dari Kulit Batang Pohon Angsret (Spathoda campanulata Beauv). Skripsi tidak Diterbitkan. Malang: Jurusan Kimia Fakultas MIPA Universitas Brawijaya.

Wulandari, D.N., Soetjipto, H., Hastuti, S.P. 2006. Skrining Fitokimia dan Efek Larvasida Ekstrak Biji Kecubung Wulung (Datura Metel L.) Terhadap Larva Instar III dan IV. Abstrak Skripsi. Salatiga: Jurusan Kimia. Fakultas Sains dan Matematika.Universitas Kristen Satya Kencana

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

Lampiran 2. Skema Kerja L. 2. 1 Preparasi Sampel

L. 2. 2 Analisis Kadar Air

��

- � ��

- � /�/ ��

- � �� 0��.*$�1�

- � ��

��

��

- � �� 2�� / �*��/ ��

- � � �� /��

- � � � �� %��

- � �� 0��..*.%3�1�� 2��

- � � ��

- � � � ��

- � �� 0��4�.��

- � � ��

- � �� /��

- � � ��

�� 5� %100)()( ×

−−

abcb

�

�� a 5��/��

� � b 5��/�� 6��

� � c 5��/�� 6��

� 7�� 5airkadar%100

100−

�

��

L. 2. 3 Ekstraksi Komponen Aktif

��

- � � � ��.��

- � �� %.��

�� )��2�� 2�� /��

� ��

- � � ��%.��

�� "��

��/��#�

- � ��

�

�� !� ��

- � �� - � �� %.��

� �� )��2�� 2��

��/��

- � � ��

� ��

- � ��

�

!� ��

- � �� - � �� %.��

�� )��2�� 2��

��/��

- � � ��

� ��

- � ��

�

!� ��

*�� 0��

�� *� �� 8��

L. 2. 4 Uji Fitokimia dengan Uji Reagen

Uji fitokimia kandungan senyawa aktif dengan uji reagen dari ekstrak

pekat etil asetat, diklorometana, dan petroleum eter dari tanaman anting-anting

dilakukan untuk uji alkaloid, flavonoid, tanin, saponin, dan triterpenoid/steroid.

L. 2. 4. 1 Uji Alkaloid

L. 2. 4. 2 Uji Flavonoid

L. 2. 4. 3 Uji Tanin

L. 2. 4. 3. 1 Uji dengan FeCl3 1 %

��

- � � ��

- � �� .9%�� 1��)�: ��

- � ��

��2 ��

��'� ��''�

- � �� )*��

��;��88��

- � �� )*��

< ��

�� *��

- � � ��

- � ��*)�� %.: �

- � �� < ��*%��1��

��

< ��=2 ��

- � � ��

- � �� )*��7�1��: ��

�

� 2�� =��

��

L. 2. 4. 3. 2 Uji dengan gelatin

L. 2. 4. 4 Uji Saponin

L. 2. 4. 5 Uji Triterpenoid/Steroid

L. 2. 5 Uji Fitokimia dengan KLT

- � � ��

- � �� .�� /��

- �� )��1��> �� .�

� ��

?��

��

- � � ��

- � �� *��/��

- � ��

/ �/ ��/��=0 ��"�� #�� 2�� "�� #�

��

- � ��2��/� ��

��7)%��@.�/�)��

- � �� *� �� 8��

��)��

- � �� AB� �� 2��

�� )%�� ++��

- � �� *� �� *� ��

��)��

�

��

��

��

- � ��

��

Tabel L. 2. 1 Jenis-jenis fasa gerak dan pendeteksi untuk metabolit sekunder pada uji KLT

Golongan Senyawa

Fasa Gerak Pendeteksi Hasil Warna Noda

Alkaloid 1. metanol-kloroform (0,5:9,5)

2. kloroform- metanol (9:1)

pereaksi Dragendorff

coklat jingga

Flavonoid 1. kloroform-metanol (8:2)

2. butanol-asam asetat-air (4:1:5)

diuapi uap amonia

biru kehijauan

Tanin 1. butanol-asam asetat-air (14:1:5)

2. asam asetat glasial-air- HCl pekat (30:10:3)

FeCl3 1 % ungu lembayung

Saponin 1. kloroform-metanol-air (14:6:1)

2. kloroform-metanol-air (20: 60: 10)

H2SO4 0,1 M

ungu-ungu gelap

Triterpenoid 1. benzene-kloroform (3:7)

2. heksana-etil asetat (1:1)

pereaksi Lieberman-Burchard

merah ungu (violet)

Steroid 1. sikloheksana:etil asetat (1:1)

2. n-heksana:etil asetat (7:3)

pereaksi Lieberman-Burchard

hijau kebiruan

L. 2. 6 Uji Toksisitas dengan Larva Udang Artemia salina Leach

L. 2. 6. 1 Penetasan Telur

��0��

- � ��

- � � ��)9%�� " ��/��

- � �� 4��-�2��

�

! ��)%.��

L. 2. 6. 2 Uji Toksisitas

�

��

�

..�� 9�� 9��

- � �� .�� *� ��

- � �� *� �� .�C�9�%�C�9�)%�C�9�%.�C��

..� C�9%.� C�9� )..� C�� )%.� C��

�� .�� "��#9�%�� 9�)%�� 9�%.�� 9�..�

�� 9�%.�� 9�)..�� 9��)%.��

- � � �� 0 ��

- � ��

- � � ��..�C�� 8�� 9�� 9��)��

� ��

- � ��/��

- � � ��.��0��

- � �� 0�� 2�� .��

- � �� 0��)��2��

- �� *� ��

- � �� /�� 1%.�

�

��

Lampiran 3. Pembuatan Reagen dan Larutan

L. 3. 1 Pembuatan HCl 2 %

M1 x V1 = M2 x V2

37 % x V1 = 2 % x 10 mL

V1 = 0,5 mL

Jadi, untuk membuat larutan HCl 2 % diambil sebanyak 0,5 mL larutan HCl

pekat 37 %, dilarutkan dalam labu ukur 10 mL.

L. 3. 2 Pembuatan Reagen Dragendorff

I. 0,6 g bismutsubnitrat dalam 2 mL HCl pekat dan 10 mL H2O.

II. 6 g KI dalam 10 mL H2O.

Kedua larutan tersebut dicampur dengan 7 mL HCl pekat dan 15 mL H2O

(Harborne, 1987).

L. 3. 3 Pembuatan Reagen Mayer

A. HgCl2 1,358 g

Akuades 60 mL

B. KI 5 g

Akuades 10 mL

Cara membuatnya adalah tuangkan larutan A ke dalam larutan B, encerkan

dengan akuades sampai volume larutan menjadi 100 mL.

L. 3. 4 Pembuatan metanol 50%

M1 x V1 = M2 x V2

90 % x V1 = 50 % x 10 mL

V1 = 5,6 mL

Jadi, untuk membuat larutan metanol 50 % diambil sebanyak 5,6 mL larutan

metanol 90 %, dilarutkan dalam labu ukur 10 mL.

L. 3. 5 Pembuatan FeCl3 1%

BM FeCl3 = 162,2 g/mol

Massa FeCl3 = 4,22

V %1 3 ×× FeClBM

= 4,22

L0,01 /2,162%1 ×× molg

= 0,072 g = 72 mg

Jadi, untuk membuat larutan FeCl3 1% diambil sebanyak 72 mg serbuk FeCl3,

dilarutkan dalam labu ukur 10 mL.

L. 3. 6 Pembuatan Larutan Gelatin

Cara pembuatannya adalah 2,5 g serbuk gelatin dicampur dengan 50 mL

larutan garam NaCl jenuh, kemudian dipanaskan sampai gelatin larut

seluruhnya. Setelah dingin, ditambah larutan garam NaCl jenuh dalam labu

ukur 100 mL sampai tanda batas dan dikocok hingga homogen.

L. 3. 7 Pembuatan larutan HCl 1 N

BJ HCl pekat = 1,19 g/mL = 1190 g/L

Konsentrasi = 37 %

BM HCl = 36, 42 g/mol

n = 1 (jumlah atom H)

Normalitas HCl = n x Molaritas HCl

= 1 x pekatHClBMHClBJ×%37

= molg

Lg/42,36

/1190%37 ×

= 12,09 M ∞12,09 N

N1 x V1 = N2 x V2

12,09 N x V1= 1 N x 100 mL

V1= 8,27 mL = 8,3 mL

Jadi, untuk membuat larutan HCl 1 N diambil sebanyak 8,3 mL larutan HCl

pekat 37 %, dilarutkan dalam labu ukur 100 mL.

L. 3. 8 Pembuatan reagen Lieberman-Burchard

5mL asam asetat anhidrat dan 5 mL asam sulfat konsentrate ditambahkan

secara hati-hati melalui dindingnya ke dalam 50 mL etanol absolute dalam

keadaan dingin (Wagner, 2001).

L. 3. 9 Pembuatan NH3 10%

M1 x V1 = M2 x V2

50 % x V1 = 10 % x 10 mL

V1 = 2 mL

Jadi, untuk membuat larutan NH3 10% diambil sebanyak 2 mL larutan NH3

50%, dilarutkan dalam labu ukur 10 mL.

L. 3. 10 Perhitungan Konsentrasi Larutan Ekstrak Untuk Uji Toksisitas

a. Pembuatan larutan stok 10000 ppm ekstrak tanaman anting-anting

ppm = mg/L

mg = ppm. L (jika dibuat larutan stok 1 mL = 10-3 L)

= 10000 ppm . 10-3 L = 10 mg

Jadi, larutan stok 10000 ppm pada masing-masing ekstrak dibuat dengan

dilarutkan 10 mg sampel ke dalam 1 mL masing-masing pelarutnya.

b. Pembuatan larutan ekstrak 5 ppm

V1.M1 = V2.M2

V1. 10000 ppm= 10. 10-3 L.5 ppm

V1 = 0,05 L.ppm/104 ppm

V1 = 0,05. 10-4 L = 5 µL

Jadi, larutan ekstrak 5 ppm dibuat dengan 5 µL larutan stok yang

dilarutkan dalam 10 mL air laut.

c. Pembuatan larutan ekstrak 25 ppm

V1.M1 = V2.M2

V1. 10000 ppm= 10. 10-3 L.25 ppm

V1 = 0,25 L.ppm/104 ppm

V1 = 0,25. 10-4 L = 25 µL



d. Pembuatan larutan ekstrak 50 ppm

V1.M1 = V2.M2

V1. 10000 ppm= 10. 10-3 L.50 ppm

V1 = 0,5 L.ppm/104 ppm

V1 = 0,5. 10-4 L = 50 µL



e. Pembuatan larutan ekstrak 100 ppm

V1.M1 = V2.M2

V1. 10000 ppm= 10. 10-3 L.100 ppm

V1 = 10. 10-1 L.ppm/104 ppm

V1 = 10. 10-5 L= 100 µL



f. Pembuatan larutan ekstrak 150 ppm

V1.M1 = V2.M2

V1. 10000 ppm= 10. 10-3 L.150 ppm

V1 = 1,5 L.ppm/104 ppm

V1 = 1,5. 10-4 L = 150 µL



g. Pembuatan larutan ekstrak 200 ppm

V1.M1 = V2.M2

V1. 10000 ppm= 10. 10-3 L.200 ppm

V1 = 2 L.ppm/104 ppm

V1 = 2. 10-4 L = 200 µL



h. Pembuatan larutan ekstrak 250 ppm

V1.M1 = V2.M2

V1. 10000 ppm= 10. 10-3 L.250 ppm

V1 = 2,5 L.ppm/104 ppm

V1 = 2,5. 10-4 L = 250 µL



�

�

�

Lampiran 4. Data Pengukuran Kadar Air Sampel Tanaman Anting-anting 1. Data Pengukuran Kadar Air Sampel Tanaman Anting-Anting Bagian

Daun dan Bunga Berat cawan kosong (g)

Sampel A1 A2 A3 A4 A5

Ulangan 1 3,3103 3,2630 3,3494 3,3750 3,2228 Ulangan 2 3,3103 3,2630 3,3494 3,3750 3,2228 Ulangan 3 3,3103 3,2630 3,3494 3,3750 3,2228 Ulangan 4 3,3103 3,2630 3,3494 3,3750 3,2228 Ulangan 5 3,3103 3,2630 3,3494 3,3750 3,2228 Rata-rata 3,3103 3,2630 3,3494 3,3750 3,2228

Berat cawan

kosong + sampel (g)

Sampel

A1 A2 A3 A4 A5

Sampel basah 8,3108 8,2629 8,3491 8,3752 8,2226

Ulangan 1 4,6280 4,6475 4,6441 4,9792 4,5339 Ulangan 2 4,6210 4,6266 4,6380 4,6501 4,5229 Ulangan 3 4,6166 4,6226 4,6428 4,6342 4,5189 Ulangan 4 4,6222 4,6297 4,6421 4,6349 4,5261 Ulangan 5 4,6214 4,6297 4,6369 4,6375 4,5204 Ulangan 6 4,6168 4,6174 4,6369 4,6288 4,5128 Ulangan 7 4,6129 4,6145 4,6325 4,6233 4,5025 Rata-rata 4,61895 4,62866 4,63878 4,6351 4,5207

Kadar air = %100)()( ×

−−

abcb

Keterangan: a = berat konstan cawan kosong

b = berat cawan + sampel sebelum dikeringkan

c = berat konstan cawan + sampel setelah dikeringkan

Faktor koreksi =airkadar%100

100−

% Kadar air terkoreksi = Kadar air- Faktor koreksi

1) Kadar air A1 = %100)3108,33108,8()61895,43108,8( ×

−−

= %100)00062,5(

)6985,3( × = 73,96 %

Faktor koreksi =96,73100

100−

= 3,8402

% Kadar air terkoreksi = 73,96% - 3,8402 % = 70,1198 %

2) Kadar air A2 = %100)2628,32629,8()62867,42629,8( ×

−−

= %100)0001,5()63423,3( × = 72,68 %


100−

= 3,66

% Kadar air terkoreksi = 72,68 % - 3,66 % = 69,02 %

3) Kadar air A3 = %100)34902,33491,8()63878,43491,8( ×

−−

= %100)00088,5()71032,3( × = 74,21 %


100−

= 3,88


4) Kadar air A4 = %100)37476,33752,8()6351,43752,8( ×

−−

= %100)00044,5(

)7401,3( × = 74,795 %


100−

= 3,967


5) Kadar air A5 = %100)2228,32226,8()52073,42226,8( ×

−−

= %100)9968,4()70187,3( × = 74,08 %


100−

= 3,858

% Kadar air terkoreksi = 74,08 % - 3,858 % = 70,22 % Kadar air rata-rata pada sampel daun dan bunga

= 5

%222,70%828,70%33,70%02,69%1198,70 ++++

= 70,104 %

2. Data Pengukuran Kadar Air Sampel Tanaman Anting-Anting Bagian Akar dan Batang

Berat cawan kosong (g)

Sampel B1 B2 B3 B4 B5

Ulangan 1 3,3334 3,2690 3,2922 3,2886 3,2833 Ulangan 2 3,3332 3,2683 3,2922 3,2884 3,2829 Ulangan 3 3,3333 3,2687 3,2920 3,2884 3,2832 Ulangan 4 3,3331 3,2687 3,2919 3,2887 3,2828 Ulangan 5 3,3336 3,2687 3,2922 3,2885 3,2829 Rata-rata 3,3333 3,2687 3,2921 3,2885 3,2885

Berat cawan

kosong + sampel (g)

Sampel

B1 B2 B3 B4 B5

Sampel basah 8,3345 8,2689 8,2924 8,2897 8,2829

Ulangan 1 5,2199 5,1480 5,3283 5,0348 5,6616 Ulangan 2 5,1560 5,1349 4,9594 5,0283 5,1728 Ulangan 3 5,1470 5,1321 4,9373 5,0397 5,1437 Ulangan 4 5,1614 5,1397 4,9475 5,0357 5,1565 Ulangan 5 5,1607 5,1395 4,9467 5,0449 5,1538 Ulangan 6 5,1342 5,1278 4,9366 5,0227 5,1395 Ulangan 7 5,1263 5,1265 4,9339 5,0202 5,1415 Rata-rata 5,15936 5,1503 4,9496 5,0361 5,1416

1) Kadar air B1 = %100)3332,33345,8()1534,53345,8( ×

−−

= %100)0013,5()1752,3( × = 63,49 %


100−

= 2,74


2) Kadar air B2 = %100)2687,32689,8()1303,52689,8( ×

−−

= %100)0002,5()1386,3( × = 62,77 %


100−

= 2,69


3) Kadar air B3 = %100)2921,32924,8()9496,42924,8( ×

−−

= %100)0003,5()3428,3( × = 66,85 %


100−

= 3,02

% Kadar air terkoreksi = 66,85 % - 3,02 % =63,83 %

4) Kadar air B4 = %100)2885,32889,8()0361,52889,8( ×

−−

= %100)0004,5()2528,3( × = 65,16 %


100−

= 2,87

% Kadar air terkoreksi = 65,16 % - 2,87 % = 62,29%

2) Kadar air B2 = %100)2830,32829,8()1416,52829,8( ×

−−

= %100)9999,4()1413,3( × = 62,83 %


100−

= 2,69


Kadar air rata-rata pada sampel akar dan batang

= 5

%14,60%29,62%84,63%08,60%75,60 ++++

= 61,42 %

3. Data Pengukuran Kadar Air dengan Sampel Seluruh Bagian Tanaman Anting-Anting

Berat cawan kosong (g)

Sampel C1 C2 C3 C4 C5

Ulangan 1 3,3105 3,2632 3,3496 3,3748 3,2229 Ulangan 2 3,3107 3,2631 3,3495 3,3747 3,2228 Ulangan 3 3,3107 3,2630 3,3495 3,3749 3,2231 Rata-rata 3,3106 3,2631 3,3495 3,3748 3,2229

Berat cawan

kosong + sampel (g)

Sampel

C1 C2 C3 C4 C5

Sampel basah 8,3109 8,2635 8,3497 8,3751 8,2229

Ulangan 1 5,2189 5,3204 5,1908 5,2454 5,1465 Ulangan 2 5,1621 5,2014 5,1895 5,1704 5,1275 Ulangan 3 5,1704 5,1985 5,1890 5,1706 5,1269 Ulangan 4 5,1612 5,1990 5,1889 5,1704 5,1270 Ulangan 5 5,1614 5,1986 5,1890 5,1705 5,1271 Ulangan 6 5,1613 5,1987 5,1891 5,1704 5,1270

Ulangan 7 5,1612 5,1986 5,1891 5,1704 5,1270 Rata-rata 5,1613 5,1986 5,1890 5,1705 5,1270

1) Kadar air C1 = %100)3106,33109,8()1613,53109,8( ×

−−

= %100)0003,5()1496,3( × = 62,99 %


100−

= 2,70


2) Kadar air C2 = %100)2631,32635,8()1986,52635,8( ×

−−

= %100)0004,5()0649,3( × = 61,29 %


100−

= 2,58


3) Kadar air C3 = %100)3495,33497,8()1890,53497,8( ×

−−

= %100)0002,5()1607,3( × = 63,21 %


100−

= 2,72

% Kadar air terkoreksi = 63,21 % - 2,72 % =60,49 %

4) Kadar air C4 = %100)3748,33752,8()1705,53752,8( ×

−−

= %100)0004,5()2048,3( × = 64,09 %


100−

= 2,81

% Kadar air terkoreksi = 64,09 % - 2,81 % = 61,28%

5) Kadar air C5 = %100)2229,32229,8()1270,52229,8( ×

−−

= %100)5(

)0959,3( × = 61,92 %


100−

= 2,63


Kadar air rata-rata pada sampel akar dan batang

= 5

%29,59%28,61%49,60%71,58%29,60 ++++

= 60,01 %

4. Kadar Air yang Terkandung dalam Masing-Masing Bagian Tanaman Anting-Anting (Acalypha Indica Linn.)

Sampel Kadar air (%) Daun dan bunga 70,10 Batang dan akar 61,42 Seluruh tanaman 60,01

�

�

Lampiran 5. Perhitungan Rendemen 1. Ekstrak Etil asetat 1

Berat botol kosong = 118,1012 g Berat botol kosong + ekstrak pekat = 120,1171 g Berat ekstrak pekat = (Berat botol kosong + ekstrak pekat)- Berat botol kosong = 120,1171 g – 118,1012 g

= 2,0159 g 2. Ekstrak Etil asetat 2

Berat botol kosong = 118,1022 g Berat botol kosong + ekstrak pekat = 120,5522 g Berat ekstrak pekat = (Berat botol kosong + ekstrak pekat)- Berat botol kosong = 120,5522 g – 118,1022 g = 2,45 g Berat ekstrak pekat = berat ekstrak 1 + berat ekstrak 2 = 2,0159 + 2,45 = 4,4659

Rendemen = %100×sampelberat

pekatekstrakberat= %100

604659,4

×g

g

= 7,44 % (b/b) 3. Ekstrak Diklorometana 1

Berat botol kosong = 358,3 g Berat botol kosong + ekstrak pekat = 360,2 g Berat ekstrak pekat = (Berat botol kosong + ekstrak pekat)- Berat botol kosong = 360,2 g – 358,3 g = 1,9 g

4. Ekstrak Diklorometana 2 Berat botol kosong = 358,3 g Berat botol kosong + ekstrak pekat = 360,4 g Berat ekstrak pekat = (Berat botol kosong + ekstrak pekat)- Berat botol kosong = 360,2 g – 358,3 g = 2,1 g Berat ekstrak pekat = berat ekstrak 1 + berat ekstrak 2 = 1,9 + 2,1 = 4



604

×gg

= 6,67 % (b/b)

5. Ekstrak petroleum eter 1 Berat botol kosong = 358,3 g Berat botol kosong + ekstrak pekat = 359,3 g Berat ekstrak pekat = (Berat botol kosong + ekstrak pekat)- Berat botol kosong = 359,3 g – 358,3 g = 1,0 g

6. Ekstrak petroleum eter 2 Berat botol kosong = 358,3 g Berat botol kosong + ekstrak pekat = 359,2 g Berat ekstrak pekat = (Berat botol kosong + ekstrak pekat)- Berat botol kosong = 359,2 g – 358,3 g = 0,9 g Berat ekstrak pekat = berat ekstrak 1 + berat ekstrak 2 = 1,0 + 0,9 = 1,9



609,1

×gg

= 3,167 % (b/b) �

Lampiran 6 Dokumentasi

1. Analisis kadar air

Gambar 1. Daun dan

bunga yang telah dipotong kecil-kecil

Gambar 2. Akar dan

batang yang telah dipotong kecil-kecil

Gambar 3. Sampel setelah dikeringkan

2. Preparasi sampel

Gambar 4. Tanaman

anting-anting

Gambar 5.

Pengeringan sampel dengan

oven

Gambar 6.

Penghalusan sampel dengan

blender

Gambar 7. Sampel setelah dihaluskan

3. Ekstraksi

Gambar 8.

Sampel ditimbang

Gambar 9.

Pengocokan Sampel menggunakan shaker

Gambar 10. Filtrat etil asetat

Gambar 11.

Filtrat diklorometana

Gambar 12. Filtrat petroleum

eter

Gambar 13. Rotary

Evaporator

Gambar 14.

Vortex

Gambar 15.

Sampel dalam desikator

4. Uji Fitokimia 1. Flavonoid

Gambar 16. Uji

flavonoid ekstrak etil asetat

Gambar 17. Uji

flavonoid ekstrak diklorometana

Gambar 18. Uji

flavonoid ekstrak petroleum eter

2. Tanin

Gambar 19. Uji tanin

ekstrak etil asetat dengan FeCl3 1%

Gambar 20. Uji tanin ekstrak diklorometana

dengan FeCl3 1%

Gambar 21. Uji tanin ekstrak petroleum eter

dengan FeCl3 1%


ekstrak etil asetat dengan larutan gelatin


ekstrak diklorometana dengan larutan gelatin

Gambar 24. Uji tanin ekstrak petroleum eter dengan larutan gelatin

3. Alkaloid

Gambar 25. Uji ekstrak

etil asetat dengan reagen dragendorf

Gambar 26. Uji ekstrak diklorometana dengan

reagen dragendorf

Gambar 27. Uji

ekstrak petroleum eter dengan reagen

dragendorf


etil asetat dengan reagen mayer

Gambar 29. Uji ekstrak diklorometana dengan

reagen mayer

Gambar 30. Uji

ekstrak petroleum eter dengan reagen mayer

4. Triterpenoid/ steroid


etil asetat dengan Liebermenn burchard

Gambar 32. Uji ekstrak diklorometana dengan Liebermenn burchard

Gambar 33. Uji

ekstrak petroleum eter dengan Liebermenn

burchard

5. Saponin

Gambar 34. Uji busa

ekstrak etil asetat

Gambar 35. Uji busa

ekstrak diklorometana

Gambar 36. Uji busa

ekstrak petroleum eter

Lampiran 7. Data Kematian Larva dan Perhitungan LC50 uji toksisitas masing-masing ekstrak 1. Ekstrak etil Asetat

Konsentrasi Etil Asetat (ppm) Jumlah Hewan Uji Mortalitas

0 30 0 5 30 17

25 30 21 50 30 22

100 30 22 150 30 23 200 30 24 250 30 25

Probability Plot for mortalitas

��

��

��

��

��

��

��

�

��

��

��

�

��

��

�

�

� ��

��

��

��

� ! ��

��

"#�� $�%��& ��

'�#& ��(�)�

Probit Analysis: mortalitas; jumlah hewan uji versus konsentrasi etil asetat Distribution: Normal Response Information Variable Value Count mortalitas Success 154 Failure 86 jumlah hewan uji Total 240 Estimation Method: Maximum Likelihood

Regression Table Standard Variable Coef Error Z P Constant -0,115409 0,123382 -0,94 0,350 konsentrasi etil asetat (ppm) 0,0053429 0,0010409 5,13 0,000 Natural Response 0 Log-Likelihood = -142,344 Goodness-of-Fit Tests Method Chi-Square DF P Pearson 36,1374 6 0,000 Deviance 47,7385 6 0,000 Tolerance Distribution Parameter Estimates Standard 95,0% Normal CI Parameter Estimate Error Lower Upper Mean 21,6005 20,2989 -18,1845 61,3855 StDev 187,165 36,4630 127,760 274,191 Table of Percentiles Standard 95,0% Fiducial CI Percent Percentile Error Lower Upper 1 -413,810 98,4597 -724,377 -273,433 2 -362,789 88,6695 -642,135 -236,216 3 -330,418 82,4764 -589,991 -212,567 4 -306,067 77,8297 -550,790 -194,752 5 -286,258 74,0590 -518,920 -180,244 6 -269,399 70,8571 -491,809 -167,880 7 -254,616 68,0560 -468,051 -157,026 8 -241,380 65,5539 -446,790 -147,297 9 -229,342 63,2836 -427,464 -138,437 10 -218,261 61,1988 -409,685 -130,272 20 -135,921 45,9215 -277,998 -69,1722 30 -76,5489 35,3282 -183,895 -24,2620 40 -25,8172 26,9193 -104,812 15,4366 50 21,6005 20,2989 -33,5518 55,1986 60 69,0182 16,4351 31,3784 101,291 70 119,750 17,5284 88,0766 163,374

80 179,123 24,4706 140,895 249,568 90 261,462 38,0267 205,528 377,723 91 272,543 39,9917 213,934 395,261 92 284,581 42,1478 223,022 414,358 93 297,817 44,5407 232,971 435,400 94 312,600 47,2362 244,035 458,947 95 329,460 50,3355 256,604 485,854 96 349,268 54,0047 271,314 517,521 97 373,619 58,5490 289,332 556,519 98 405,990 64,6343 313,195 608,449 99 457,011 74,3004 350,658 690,446

2. Ekstrak Diklorometana Konsentrasi Etil Asetat (ppm) Jumlah Hewan Uji Mortalitas

0 30 0 5 30 21

25 30 21 50 30 22

100 30 23 150 30 24 200 30 29 250 30 30


��

��

��

��

��

��

��

�

��

��

��

�

��

��

�

�

� ��

��

��

��

� ! ��

��

"#�� $�%��& ��

'�#& ��(�)�

Probit Analysis: mortalitas; jumlah hewan uji versus konsentrasi dikl Distribution: Normal Response Information Variable Value Count mortalitas Success 170

Failure 70 jumlah hewan uji Total 240 Estimation Method: Maximum Likelihood Regression Table Standard Variable Coef Error Z P Constant -0,167581 0,129269 -1,30 0,195 konsentrasi diklorometana (ppm) 0,0094950 0,0014585 6,51 0,000 Natural Response 0 Log-Likelihood = -114,899 Goodness-of-Fit Tests Method Chi-Square DF P Pearson 39,0201 6 0,000 Deviance 50,3096 6 0,000 Tolerance Distribution Parameter Estimates Standard 95,0% Normal CI Parameter Estimate Error Lower Upper Mean 17,6495 11,9536 -5,77909 41,0780 StDev 105,319 16,1777 77,9394 142,317 Table of Percentiles Standard 95,0% Fiducial CI Percent Percentile Error Lower Upper 1 -227,359 45,2411 -353,274 -158,692 2 -198,650 40,9529 -312,437 -136,386 3 -180,434 38,2465 -286,555 -122,205 4 -166,731 36,2198 -267,104 -111,519 5 -155,585 34,5782 -251,296 -102,813 6 -146,098 33,1864 -237,851 -95,3920 7 -137,780 31,9710 -226,073 -88,8755 8 -130,331 30,8870 -215,535 -83,0323 9 -123,558 29,9050 -205,959 -77,7105 10 -117,322 29,0047 -197,151 -72,8045 20 -70,9893 22,4639 -132,003 -36,0507 30 -37,5799 18,0207 -85,5765 -8,99800 40 -9,03282 14,5868 -46,6505 14,8610

50 17,6495 11,9536 -11,4782 38,3723 60 44,3318 10,3247 21,5124 64,0654 70 72,8789 10,2457 53,0830 95,2798 80 106,288 12,3253 85,1683 136,673 90 152,621 17,4409 124,851 198,893 91 158,857 18,2321 129,977 207,480 92 165,630 19,1090 135,511 216,844 93 173,079 20,0912 141,559 227,178 94 181,397 21,2073 148,275 238,757 95 190,884 22,5013 155,891 252,006 96 202,030 24,0454 164,792 267,620 97 215,733 25,9726 175,676 286,873 98 233,949 28,5733 190,067 312,544 99 262,658 32,7385 212,617 353,137

3. Ekstrak Petroleum Eter Konsentrasi Etil Asetat (ppm) Jumlah Hewan Uji Mortalitas

0 30 0 5 30 21

25 30 23 50 30 26

100 30 27 150 30 30 200 30 30 250 30 30


��

��

��

��

��

��

��

�

��

��

��

�

��

��

�

�

� ��

��

��

��

� ! ��

��

"#�� $�%��& ��

'�#& ��(�)�

Probit Analysis: mortalitas; jumlah hewan uji versus konsentrasi PE (ppm) Distribution: Normal Response Information Variable Value Count mortalitas Success 187 Failure 53 jumlah hewan uji Total 240 Estimation Method: Maximum Likelihood Regression Table Standard Variable Coef Error Z P Constant -0,250376 0,150354 -1,67 0,096 konsentrasi PE (ppm) 0,0211203 0,0037286 5,66 0,000 Natural Response 0 Log-Likelihood = -79,415 Goodness-of-Fit Tests Method Chi-Square DF P Pearson 37,0668 6 0,000 Deviance 46,5161 6 0,000 Tolerance Distribution Parameter Estimates Standard 95,0% Normal CI Parameter Estimate Error Lower Upper Mean 11,8547 5,98345 0,127391 23,5821 StDev 47,3478 8,35876 33,4988 66,9222 Table of Percentiles Standard 95,0% Fiducial CI Percent Percentile Error Lower Upper 1 -98,2927 22,6156 -165,386 -65,0256 2 -85,3858 20,4111 -145,796 -55,2906 3 -77,1967 19,0214 -133,385 -49,0961 4 -71,0364 17,9818 -124,060 -44,4246 5 -66,0255 17,1406 -116,484 -40,6159 6 -61,7604 16,4282 -110,043 -37,3670

7 -58,0207 15,8067 -104,401 -34,5121 8 -54,6723 15,2529 -99,3549 -31,9504 9 -51,6271 14,7518 -94,7709 -29,6156 10 -48,8239 14,2929 -90,5560 -27,4617 20 -27,9942 10,9809 -59,4345 -11,2577 30 -12,9745 8,77512 -37,3682 0,800928 40 -0,140696 7,13503 -19,0296 11,6208 50 11,8547 5,98345 -2,72538 22,5704 60 23,8502 5,44643 12,1678 34,9310 70 36,6839 5,74699 26,0366 50,2207 80 51,7036 7,07132 40,0131 70,3692 90 72,5334 9,83965 57,3490 100,359 91 75,3365 10,2559 59,5900 104,487 92 78,3818 10,7157 62,0088 108,987 93 81,7302 11,2292 64,6521 113,951 94 85,4698 11,8113 67,5866 119,513 95 89,7349 12,4847 70,9142 125,876 96 94,7459 13,2868 74,8015 133,373 97 100,906 14,2862 79,5534 142,618 98 109,095 15,6330 85,8336 154,943 99 122,002 17,7872 95,6688 174,433

fitokimia anting2

Documents

Transcript of fitokimia anting2