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UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE CIENCIAS PARA EL DESARROLLO

CARRERA DE INGENIERIA AGROPECUARIA

Proyecto de investigación

Previo a la obtención del Título de:

Ingeniero Agropecuario

Tema:

Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatógeno

(Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno

Autor:

Ramón David Piguave Bustamante

Tutor:

Dra. Consuelo Díaz Díaz

Vinces Los Ríos Ecuador

2016

I

UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE CIENCIAS PARA EL DESARROLLO

CARRERA DE INGENIERIA AGROPECUARIA

Proyecto de investigación

Previo a la obtención del Título de:

Ingeniero Agropecuario

Tema:

Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno

(Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno

TRIBUNAL DE SUSTENTACION

APROBADO POR:

-------------------------------------Dr. Rafael Aspiazu Pimentel.

PRESIDENTE

-------------------------- -----------------------------------Dr. Omar Reyes Echeverría MSc Abel Mora Montes MSc

Primer VOCAL Segundo VOCAL

II

…………………………………………….. Ramón David Piguave Bustamante

I

La responsabilidad de los contenidos del

presente trabajo de titulación corresponde

exclusivamente a Ramón David Piguave

Bustamante el patrimonio intelectual del

mismo, a la Facultad de Ciencias para el

Desarrollo de la Universidad de Guayaquil.

DEDICATORIA

A mi madre, por todo el esfuerzo que ha hecho para llevarme adelante. A mi hermano,

por su compañía en todos momentos. Y a toda mi familia, a mis amigos, por su apoyo y

amistad durante estos años.

II

AGRADECIMIENTO

En especial a Dios por mantenerme con vida y a mi madrecita Sara Bustamante por

apoyarme en todo momento y darme todos mis estudios y por estar en las buenas y en

las malas y a toda mi familia.

Le agradezco en especial a mi tutora Dra. Consuelo Díaz Díaz por guiarme en este

trabajo de investigación que se pudo dar a cabo.

Agradezco al Ing. Milton León, Dr. Abel Mora por la ayuda durante el trabajo de campo

dando sus sabios consejos, al Dr. Omar Reyes por la ayuda en cada consejo y amistad,

Dr. Emilio Wong gracias por su amistad y por la enseñanza de cómo defenderme en el

campo laboral, Ing. Malavé por la ayuda en el laboratorio, Ing. Lauro Díaz por la ayuda

en el proceso de redacción y sobre todo por la enseñanza brindada y a todas esas

personas que me ayudaron a despejar algunas dudas del trabajo de investigación y

corroborar la información obtenida en el proyecto de titulación mil gracias a todas estas

personas.

Les agradezco a todos mis amigos(as) en especial Giannina Sánchez y Adriana Guerrero

por estar ahí en todos lados, a mi compadre Moisés Morales, a mis amigos casi

hermanos Juan José, José Nieves y hermanas Caballero.

III

Índice General

RESUMEN.........................................................................................................................1

SUMMARY........................................................................................................................2

I. INTRODUCCIÓN......................................................................................................3

1.1 Antecedentes.................................................................................................................4

1.2 Justificación..................................................................................................................4

1.3 Situación problematizadora...........................................................................................5

1.3.1 Descripción del problema....................................................................................5

1.3.2 Problema..............................................................................................................6

1.3.3 Preguntas de la investigación..............................................................................6

1.3.4 Delimitación del problema..................................................................................6

1.4 Objetivos:.......................................................................................................................7

1.4.1 General................................................................................................................7

1.4.2 Específicos...........................................................................................................7

II. MARCO TEORICO.....................................................................................................8

2.1 Garrapatas...............................................................................................................................8

2.2 Clasificación taxonómica de las garrapatas.............................................................................9

2.2.1 Morfología:..........................................................................................................9

2.2.2 La garrapata amblyomma cajennense................................................................................10

2.2.3 La garrapata Boophilus microplus.....................................................................10

2.3 Ciclo biológico........................................................................................................................11

2.4 Condiciones ambientales para el desarrollo de la garrapata.................................................11

2.5 Importancia de la garrapata a nivel mundial.........................................................................12

2.6 Perdidas económicas.............................................................................................................12

2.7 Efecto de la garrapata sobre los animales.............................................................................13

2.8 Acción patógena de la garrapata...........................................................................................13

2.8.1 Acción patógena expoliatriz..............................................................................13

2.8.2 Acción patógena traumática..............................................................................13

2.9 Principales métodos de control de la garrapata en los sistemas...........................................13

2.9.1 Control químico y resistencia............................................................................14

2.9.2 Control biológico...............................................................................................14

2.10. Hongos entomopatógenos.................................................................................................14

2.11 Modo de acción...................................................................................................................15

2.12 Toxinas de hongos entomopatógenos.................................................................................16

I

2.13 Efecto entomopatógenos....................................................................................................16

2.14 Experiencias investigativas..................................................................................................17

III. MARCO METODOLÓGICO.................................................................................19

3.1 Localización del experimento......................................................................................19

3.2 Factor en estudio..........................................................................................................19

3.3 Tamaño de la muestra..................................................................................................19

3.4 Materiales y equipos....................................................................................................20

3.4.1 Materiales e insumos de laboratorio..................................................................20

3.4.2 Materiales de campo..........................................................................................20

3.4.3 Equipos..............................................................................................................20

3.4.4 Biológico...........................................................................................................20

3.5 Diseño experimental y análisis estadístico..................................................................21

3.6 Manejo del ensayo.......................................................................................................21

3.6.1. Identificación de animales................................................................................21

3.6.2 Peso de las dosis del entomopatogeno...............................................................21

3.6.3 Evaluación de las regiones de los bovinos en estudio antes y después de aplicación de hongo entomopatogeno...............................................................22

3.6.4 Manejo del ensayo para el laboratorio...............................................................22

3.7 Datos evaluados....................................................................................................................23

3.7.1 Bioensayo en bovinos experimentalmente infestados con el hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii para determinar la mortalidad in vitro de las garrapatas expuestas a la acción del bioacaricida...................................23

3.7.2 Hongo entomopatógeno L. lecanii tiempo de acción acaricida en la garrapata in vitro...............................................................................................................24

IV RESULTADOS...........................................................................................................25

4.1 Determinación de la dosis optima del hongo entomopatogeno Lecanicillium lecanii para controlar garrapatas en el ganado vacuno..................................................................................25

4.2 Determinación de las especies de garrapatas existente en la zona de estudio.....................25

4.3 Elaboración de una propuesta de control biológico para el control de garrapatas en ganado bovino.............................................................................................................................25

4.3.1 Cantidad de garrapatas encontradas en las regiones, orejas, tabla del cuello, ubre, testículos y cola antes de la aplicación del bioacaricida Lecanicillium lecanii y después de la misma con la dosis de 1 g/l..........................................27

4.3.2 Cantidad de garrapatas encontradas en las regiones, orejas, tabla del cuello, ubre, testículos y cola antes de la aplicación del bioacaricida Lecanicillium lecanii con la dosis de 1,5 g/l............................................................................28

II

4.3.3 Cantidad de garrapatas encontradas en las regiones, orejas, tabla del cuello, ubre, testículos y cola antes de la aplicación del bioacaricida Lecanicillium lecanii de 2 g/l...................................................................................................29

4.3.4 Cantidad de garrapatas encontradas en las regiones, orejas, tabla del cuello, ubre, testículos y cola antes de la aplicación del bioacaricida Lecanicillium lecanii la dosis de 2.5 g/L..................................................................................30

4.4 Trabajo de laboratorio..................................................................................................31

4.4.1 Resultados de laboratorio comprobación de la hipótesis Ji cuadrado...............31

V. DISCUSIÓN...............................................................................................................37

VI. CONCLUSIONES.....................................................................................................39

VII.RECOMENDACIONES..........................................................................................40

VIII. BIBLIOGRAFÍA...............................................................................................41

ANEXOS...........................................................................................................................45

GRAFICOS......................................................................................................................49

FIGURAS.........................................................................................................................56

PROPUESTA ALTERNATIVA DE CONTROL BIOLOGICO................................57

III

Cuadro 1. Dosis de polvo donde estuvo disuelto el hongo entomopatogeno L. lecanii g/litro de agua, Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno...................19

Cuadro 2..........................................................................................................................22

Cuadro 3..........................................................................................................................22

Cuadro 4 Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno antes de la aplicación del bioacaricida con la dosis de 1 g/......................................................................................24

Cuadro 5 En la Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno antes de la aplicación del bioacaricida, con la dosis de 1,5 g/l.........................................................25

Cuadro 6 En la Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno antes de la aplicación del bioacaricida y después de tres y seis días, con la dosis de 2 g/l...............26

Cuadro 7 En la Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno antes de la aplicación del bioacaricida, con la dosis de 2,5 g/l.........................................................27

Cuadro 8 Comprobación de la hipótesis Ji cuadrado (Ji²) 48/horas, en la Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (L. lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno........................................................................................................28

Cuadro 9 Comprobación de la hipótesis Ji cuadrado (Ji²) 72/horas en la evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno.......................................................................................30

Cuadro 10 Comprobación de la hipótesis Ji cuadrado (Ji²) ji 96/horas en la evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatógeno (L. lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno.......................................................................................32

IV

Cuadro 11 Resultados en porcentages a nivel de campo.................................................50

Cuadro 12 Resultados en porcentages a nivel de laboratorio..........................................50

Cuadro 13 Total de garrapatas vivas y muertas observadas en las diferentes horas de estudios en el laboratorio.................................................................................................50

Cuadro 14. Total de garrapatas vivas y muertas observadas en las diferentes horas de estudios en el laboratorio.................................................................................................51



V

RESUMEN

El presente trabajo de investigación fue desarrollada en la parroquia Puerto Pechiche

cantón Puebloviejo en la finca de la familia Manobanda Rumiguano y en el laboratorio

en la Facultad de Ciencia para el Desarrollo; el objetivo de esta investigación fue

determinar la acción del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii como control

biológico en garrapatas del ganado bovino, Las dosis que se utilizaron para determinar

la acción del entomopatogeno fueron de T1(1g/L) -T2(1,5g/L) - T3(2g/L) -T4(2,5g/L);

utilizándose para ello animales bovinos infestados con garrapatas a los cuales se les

aplico el bioacaricida L. lecanii; a las 24 horas fueron desprendidas los ácaros de los

bovinos para ser llevadas al laboratorio y observar la acción del mismo en periodos de

48-72-96 horas. Se puede concluir que tuvo mayor efecto el T4 con 2,5 g del hongo/litro

de agua; donde se obtuvo el 81 % de mortalidad a las 96 horas. Se aplicó la estadística

no paramétrica Ji cuadrado (Ji²) siendo el valor calculado a las 96 horas de observación

de las garrapatas 9,02 valor de la tabla 7,82.

Palabras claves: entomopatogeno lecanicillium lecanii, bioacaricida

SUMMARY

This research was carried out in the Puerto Pechiche parish of Puebloviejo on the

Manobanda Rumiguano family farm and in the laboratory at the Faculty of Science for

Development; The objective of this research was to determine the action of the

entomopathogenic fungus lecanicillium lecanii as biological control in cattle ticks. The

doses used to determine the action of the entomopathogen were T1(1g / L) -T2(1.5g / L)

- T3(2g / L) -T4(2.5g / L); Using for this purpose cattle infected with ticks to which the

bioacaricide L. lecanii was applied; At 24 hours the mites were removed from the cattle

to be taken to the laboratory and observe the action of the same in periods of 48-72-96

hours. It can be concluded that T4 had a greater effect with 2.5 g of the fungus / liter of

water; Where 81% of mortality was obtained at 96 hours. The non-parametric statistic Ji

square (Ji²) was applied and the value was calculated at 96 hours of observation of the

ticks 9.02 value of table 7.82.

Key words: entomopatogeno lecanicillium lecanii, bioacaricide

2

I. INTRODUCCIÓN

El incremento de la producción de leche y carne en los bovinos ha sido siempre uno de

los objetivos de los programas de desarrollo agropecuario del país. En áreas tropicales

como la nuestra; el control de las garrapatas, se ha constituido en unas de las principales

prioridades de manejo sanitario de los hatos ganaderos a fin de evitar la anaplasmosis y

babesiosis que son enfermedades hematozoarias trasmitidas por estos ácaros.

El impacto económico que generan las enfermedades provocadas por las garrapatas

es trascendental, pues, su existencia en la industria ganadera provocan una alta

morbilidad, mortalidad, aborto pérdida en la producción de carne y leche

(J. Mosqueda, Ramírez, & Cantó, 2012).

Entre las estrategias utilizadas para el tratamiento de animales infestados con

garrapatas, ha sido la aplicación de acaricidas órganos fosforados, amidinas, piretroides

e ivermectinas, sin embargo el uso indiscriminado de estos productos acaricidas han

creado resistencia adquirida por las garrapatas, siendo este motivo para buscar

alternativas biológicas de manejo dentro de este grupo podemos mencionar el uso de

hongos entomopatogeno (Morales, 2011). El control biológico de diferentes plagas no

es una práctica nueva, cabe indicar que ha sido una medida efectiva, que ha permitido

mantener un umbral aceptable dentro de parámetros económicos y zoosanitarios

establecidos (Hogsette, 1999).

Díaz et al, (2011) indican que los hongos entomopatogeno tienen un gran potencial

como agentes controladores, señalan la existencia de alrededor de 750 especies, por lo

tanto, es importante reconocer el uso del hongo entomopatogeno Lecanicillium lecanii,

como un organismo de valor ecológico al desempeñar funciones de control sobre los

artrópodos, insectos, etc. Convirtiéndolo en una opción viable para la elaboración de

bioplaguicida, pues, al ser usado como garrapaticida permitirá el control de las

garrapatas sin contaminar y deteriorar el ambiente.

3

1.1 Antecedentes

Los hongos Entomopatógenos se conocen desde hace milenios, cuando los chinos

identificaron especies de Cordyceps e Isaria de especímenes del gusano de seda

especie de Cicadoidea (chicharra o cigarra). Agostino Bassi en 1836 relata un tratado

sobre la enfermedad del gusano de seda, el muscardino, como agente causal es

Beauveria bassiana. Este hecho marca el inicio de la patología de insectos. El

desarrollo y aplicabilidad de la patología de insectos inicia el 1879 con Hagen quien

estudia el posible uso de hongos para el control de insectos (Vivas Herrera, 2007)

En el mundo se estima una población de 1 200 millones de bovinos, de los cuales

aproximadamente la mitad están expuestos a babesiosis y anaplasmosis, donde

Boophilus microplus y Amblyomma cajennense es el principal vector (Tene, 2002). Las

infecciones transmitidas por garrapatas aparecen por todo el mundo y son bien

conocidas desde hace más de 100 años. Mientras que otras son extremadamente raras,

la anaplasmosis granulocítica humana fue rebautizada en 2003 a partir de la ehrliquiosis

granulocítica humana. (Ingomar Mutz , 2009).

Los hongos son únicos y sobresalientes entre los microorganismos

entomopatógeno porque infectan a los hospedantes a través del tubo germinativo que

tiene la capacidad de penetrar y ramificarse dentro del acaro y provocar su muerte

debido a las toxinas secretadas (Quesada, 2009).

1.2 Justificación

Los hongos entomopatógeno ejercen un control natural sobre un amplio rango de

artrópodos plagas en diversos cultivos y en muchas partes del mundo. También están

involucrados en la regulación de las poblaciones en ecosistemas no agrícolas y pueden

ayudar a mantener el balance ecológico, particularmente en los bosques tropicales.

(Evans 1982).

4

En la zona de Vinces hay un gran potencial de explotación para el ganado vacuno se

estima un numero de 17 000 reses promedio en el cantón, ocupando un lugar importante

dentro de sus rubros de producción pecuaria, lamentablemente esta actividad se halla

amenazada por la alta incidencia de Anaplasmosis, enfermedad causada por distintos

géneros de artrópodos en este caso las garrapatas. Las garrapatas poseen gran

importancia tanto en medicina veterinaria como humana, ya que son vectores de

hemoparasitos para sus hospederos tanto por acción directa, hematofagia, parálisis

(Guillén Zapata & Muñoz Corrales, 2013).

(Vera Quiñonez, 2014). ´´Estima que los bovinos contribuyen con un consumo per cápita

de 9 kg de carne/año para hombres, mujeres y niños de todo el Ecuador. ´´ de aquí la

importancia por proteger sanitariamente a esta especie de animales ya que son los que

proporcionan proteína animal a través de la carne y leche.

1.3 Situación problematizadora.

1.3.1 Descripción del problema.Las garrapatas provocan daños directos a sus hospedadores y son la vía de

transmisión de patógenos que causan graves enfermedades hematozoarias a las personas

y los animales, en algunos casos fatales; además el uso incorrecto de productos

garrapaticidas químicos ha permitido que adquieran resistencia a estos. Se considera

potencialmente importante el uso de agentes biocaricidas entomopatogeno como el

lecanicillium lecanii como alternativas amigables para el ambiente, en el control de las

garrapatas para el ganado bovino, para la generación de productos inocuos como leche y

carne bovina sin trazas de contaminantes (Quesada, 2009).

Las garrapatas causan serios problemas en las ganaderías bovinas, existiendo en

mayor porcentaje Boophilus microplus, que produce anaplasmosis, enfermedad

conocida como ranilla blanca o huequera que degenera en anemia, ocasionando la

muerte del animal. La piroplasma, llamada también babesiosis, fiebre de garrapatas o

ranilla roja, produciendo un 90 % de mortalidad (INIAP, 2008).

5

1.3.2 Problema.

La presencia de ectoparásitos como las garrapatas causan enfermedades y merma en la

producción bovina (carne, leche), lo que trae disminución de ingresos al productor

ganadero, a lo que se suma el costo de los tratamientos y además que pueden ocasionar

la muerte de los semovientes.

1.3.3 Preguntas de la investigación.

¿Cuál fue la dosis óptima para el uso del hongo entomopatogeno lecanicillium

lecanii en el control de garrapatas?

¿Cuál fue el género de garrapatas encontrado en la zona de investigación?

¿Con el uso del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii se controlarán las

garrapatas?

1.3.4 Delimitación del problema.

1.3.4.1 Temporal.

Louis Pasteur es considerado como el primer científico en proponer el uso de los hongos

entomopatógenos para el control de los artrópodos plagas, pero fue E. Metchnikoff, a

comienzos de 1870, quien llevó a cabo la primera evaluación práctica. Los registros

indican que el muscardino verde (Metarhizium anisopliae (Metch.) Sorokin) fue

producida masivamente y aplicada en el campo para el control de varios coleópteros

plagas en los cultivos anuales como papa, remolacha azucarera y trigo. (Evans, 1982).

Como (Petch, 1925) lo comenta, éstos hongos se conocen desde el comienzo de la

micología como ciencia en Europa en el siglo XIX. La difusión e importancia ecológica

de estos llegó a ser más ampliamente apreciada como un avance en micología en las

regiones tropicales los cuales define como hongos con la habilidad de invadir y matar

sus huéspedes.

6

1.3.4.2 Espacial.El trabajo se desarrolló en el hato bovino de la familia Manobanda Rumiguano ubicada

en la parroquia Pto. Pechiche del cantón Puebloviejo como trabajo de campo y como

complemento se lo realizo en el laboratorio de la Facultad de Ciencias para el

Desarrollo.

1.4 Objetivos:1.4.1 General.

Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (lecanicillium lecanii) en el

control de las garrapatas en el ganado vacuno.

1.4.2 Específicos.

Determinar la dosis optima de hongos entomopatogenos para controlar garrapatas

en el ganado vacuno.

Identificar las especies de garrapatas existentes en la zona de investigación.

Elaborar una propuesta de control biológico de garrapatas para los ganaderos de la

zona de Vinces.

7

II. MARCO TEORICO

2.1 Garrapatas

Las garrapatas del ganado vacuno (Boophilus micro plus y Amblyomma cajennense) son

un grupo de parásitos artrópodos hematófagos causantes de enfermedades parasitarias

que afectan a los bovinos, causándoles anemia que incide en la producción de leche y

carne (Reyes, 2007).

Para controlar la presencia de las garrapatas en el ganado bovino, los ganaderos han

empleado perennemente acaricidas, sin percatarse de los inconvenientes ambientales

que trae su uso, así como también la posibilidad de traer problemas de salud a los

consumidores al adquirir productos como son leche y carne proveniente de animales

tratados con esto insumos acaricidas (García, 2006).

Se corre el riesgo cuando no se hace rotación de productos garrapaticidas Además,

las garrapatas crean resistencia a las sustancias químicas con el tiempo, lo que conlleva

un problema mayor (Gutiérrez Osorio, 2006). Las pérdidas económicas reportadas son

cuantiosas, se estima que el costo de producción ganadera por el daño que producen las

garrapatas alcanza entre $ 100-150 millones por año a nivel mundial (García, 2006).

8

2.2 Clasificación taxonómica de las garrapatas.

El grupo de los artrópodos incluye cerca de 825 especies divididas en tres familias: la

Argasidae (garrapatas blandas), la Ixodidae (garrapatas duras), Nuttalliella que vive en

áfrica. (Klompen, Black, Keirans, & Norris, 2000).

Clasificación taxonómica

Nivel Ubicación

Reino Animal

Phylum Arthropoda

Subphylum Chelicerata

Clase Arachnida

Orden Parasitiformes

Grupo Ixodoidea

Suborden Ixodidae

Familia Argasidae, Nuttalliellidae

Genero Bophylus, Artricola

Fuente: (Tene, 2002).

Las garrapatas son artrópodos de importancia veterinaria, por su capacidad de

transmisión de agentes patógenos. Las infestaciones de estas en el ganado vacuno

dependen de la intensidad de la población de animales y la región, sistema de

explotación, razas, estado nutricional y fisiología de los bovinos

(Corpoica & Fao, 2007).

2.2.1 Morfología:

Las garrapatas son ácaros macroscópicos caracterizados por poseer cuatro pares de

patas y un cuerpo globoso, aplanado dorso-ventralmente y no segmentado, que las

diferencias de otros arácnidos, cuyo cuerpo está dividido en dos partes (el cefalotórax y

el abdomen). Las garrapatas son ectoparásitos obligados que se alimentan de la sangre

de sus hospederos (hematófagos). (Martínez, 2016).

2.2.2 La garrapata amblyomma cajennense.

La garrapata amblyomma cajennense es un ectoparásito que disminuye la producción de

carne y leche, además de actuar como transmisor de enfermedades. Esta garrapata es

9

considerada una peste del ganado silvestre, doméstico, es una garrapata cazadora

agresiva que frecuentemente ataca en grupos. Esta especie prefiere biomas tropicales o

subtropicales, porque carece de resistencia al frío, aunque tolera ambientes semiáridos.

Estas características limitan su distribución geográfica, que va desde el sur de Estados

Unidos hasta el norte de Argentina. En toda esta región se observa una abundancia

relativa de adultos en los meses más cálidos del año (aquellos de la época lluviosa), y de

larvas y ninfas durante los meses fríos.(Rodriguez, Manrrique, & Hdez, 2010).

2.2.3 La garrapata Boophilus microplusEl género Boophilus es conocido como la "garrapata común del ganado vacuno" o

"garrapata común con ojos". B. microplus es conocida como "garrapata tropical del

ganado vacuno". La garrapata Boophilus microplus se alimenta del animal por un

período de tres semanas, pasa por los estadios de larva, ninfa y adulto.

En las últimas 24 horas aumenta su tamaño más de cinco veces, se llena de sangre, se

desprende y cae al suelo, donde busca un sitio adecuado para desovar. Su ciclo

biológico está compuesto por cuatro estadíos: huevo, larva, ninfa y adulto. Las hembras

se alimentan siempre de sangre mientras que los machos raramente lo hacen.

En la superficie cutánea se produce el acoplamiento del macho con la hembra que

necesita succionar sangre para la buena maduración de los huevos. Los factores

climatológicos afectan especialmente a los delicados huevos y a las fases no parásitas de

la garrapata.

Los huevos son muy sensibles a sequías. Las larvas que salen de ellos también evitan

los ambientes secos y las altas temperaturas, ya que estos factores les perjudican. Las

ninfas y especialmente las garrapatas adultas son mucho más resistentes a estos factores

climatológicos. (Rodriguez, Manrrique, & Hdez, 2010).

2.3 Ciclo biológico.

Su ciclo biológico está compuesto por cuatro estadíos: huevo, larva, ninfa y adulto. Las

hembras se alimentan siempre de sangre mientras que los machos raramente lo hacen.

En la superficie cutánea se produce el acoplamiento del macho con la hembra que

necesita succionar sangre para la buena maduración de los huevos.

10

El tiempo promedio que ocurre desde la caída de las hembras repletas o teleogina

hasta la eclosión de las larvas es de aproximadamente 30 días, disponen cantidades

determinadas de huevos (Boophilus spp. entre 2 000-3 000; Amblyomma spp. Hasta

5 000). Es por esto que las condiciones de vegetación, temperatura y humedad relativa

del microclima del suelo son importantes para la supervivencia de la especie Los

factores climatológicos afectan a los huevos ya que son sensibles a las sequias y altas

temperaturas lo mismo sucede con la fase no parásita de la garrapata como son las

larvas. Las ninfas y las garrapatas adultas son mucho más resistentes a estos factores

climatológicos (Senasa, 2006).

Una vez que las larvas están en el ambiente, comienza lo que se denomina

maduración de la larva que no es más que la obtención del estado fisiológico óptimo

para parasitar al hospedador y que lo alcanza en unos 4-7 días después de la eclosión.

Las larvas comienzan a trepar las hojas de los pastos para esperar allí al hospedador.

Esta operación la hacen especialmente en horas de la mañana cuando aún la temperatura

está fresca y en menor grado por la tarde. Durante las horas de calor las larvas

descienden a lugares del pasto protegidos de la luz solar y con suficiente humedad. Las

larvas pueden permanecer en el medio ambiente esperando un hospedador durante un

tiempo promedio de 60-70 días (Calox, 2011).

2.4 Condiciones ambientales para el desarrollo de la garrapata

En las zonas tropicales, la presencia de lluvias regulares, alta humedad y clima cálido,

dan las condiciones óptimas para el desarrollo de varias generaciones de garrapatas. En

regiones subtropicales, caracterizadas por temporadas de lluvias y sequías, la intensidad

de la plaga es fluctuante. Hay un máximo de infestaciones cada temporada calurosa y

húmeda, en donde se produce una invasión masiva de larvas y ninfas de garrapatas.

Cuando el acaro no puede desarrollarse se dan casos de hipobiosis, (la interrupción

temporal del desarrollo de un parásito) de modo que el ciclo evolutivo completo puede

durar de 1-2 años. (Guajardo Cota, 2014).

11

2.5 Importancia de la garrapata a nivel mundial

Alrededor del 80 % del ganado bovino a nivel mundial está infestado con garrapatas,

por lo cual, se consideran como la ectoparasitosis del ganado de mayor repercusión

económica, las garrapatas más importantes desde este punto de vista pertenecen a los

siguientes géneros: Amblyomma, Dermacentor, Ixodes y Rhipicephalus, incluyendo en

este último el recientemente renombrado subgénero Boophilus.

Las garrapatas son consideradas como ectoparásitos que se alimentan

exclusivamente de sangre (hematófagos) ocasionando daños directos e indirectos de

grandes perjuicios a los bovinos. Los daños directos ejercen una acción traumática,

toxica, infecciosa en los animales, mientras que los indirectos, están representados por

las afecciones que ocasionan en la piel, disminución en la producción de carne,

producción de leche, atraso en el crecimiento, dificultan en la adaptación de razas

seleccionada y predisposición a contraer enfermedades (Guajardo Cota, 2014).

2.6 Perdidas económicas

Se indica que las garrapatas al estar en contacto con el hospedero provocan extracción

de 0,5-2,0 ml de sangre, y dado que una res puede estar parasitada por varios miles de

garrapatas, ésta sufrirá una pérdida considerable de sangre (Camacho, 2010).

El ataque de Boophilus microplus es uno de los principales problemas con

mayor impacto económico, se indica que a partir de 20 garrapatas/animal el daño

empieza a tener efectos negativos por merma del peso o baja producción de leche,

además efectos sobre la fertilidad (Junquera, 2015).

12

2.7 Efecto de la garrapata sobre los animales.

Las picaduras de garrapata provocan daños directos a sus hospedadores y sobre todo es

la vía de transmisión de importantes patógeno como babesia y anaplasma que causan

graves enfermedades en los animales vacunos como son la babesiosis y anaplasmosis,

siendo en algunos casos fatales.

En la actualidad hay muy pocos biológicos anti-garrapata para los animales, por lo

que resulta necesario desarrollar vacunas, de ser posible de amplio espectro, para

controlar sus poblaciones y evitar problemas de salud animal y por ende en el hombre

(Manzano, Díaz, & Pérez, 2012).

2.8 Acción patógena de la garrapata.

2.8.1 Acción patógena expoliatriz.

Todas las garrapatas son hematófagas desde su estado larval hasta su estado de imago,

por lo cual la anemia y las consecuencias de las mismas constituyen un síntoma casi

constante. (Barrera & Duarte, 2006).

2.8.2 Acción patógena traumática.

Esta acción patógena también es originada por todas las garrapatas con su órgano de

fijación y sus uñas. Al abandonar al hospedero los ixodidos, dejan una lesión en la piel

la cual se cicatriza posteriormente dando lugar a una merma en el valor de los cueros

que puedan llegar a una depreciación de los mismos hasta de un 50 %.

(Barrera & Duarte, 2006).

2.9 Principales métodos de control de la garrapata en los sistemas

Mucho han sido los métodos de control que el hombre ha implementado para erradicar

esta problemática. Primero fueron los aceites y extractos de plantas, más tarde el

petróleo crudo y las soluciones arsenicales hasta llegar a las sustancias química

(FAO, 2003).

13

2.9.1 Control químico y resistencia.El método más eficiente para el control de garrapatas, es la utilización de productos

químicos a una frecuencia de tratamientos variables dependiendo del nivel de

infestación de los animales. Los productos químicos se agrupan en familias que

presentan similitud en su estructura química y sitio de acción.

El método químico es utilizado como herramienta de control, se puede aplicar

considerando varias estrategias de aplicación y formulación del producto, la selección

depende de la tecnología de manejo aplicada por los productores, recursos disponibles y

el impacto económico del sistema productivo (Rodriguez et al., 2006).

Campuzano y Almeida (2008) indican que el uso de productos químicos es el

método más empleado en distintos países del mundo, por la facilidad de aplicación y la

evolución de las sustancias utilizadas. Actualmente, existe una gran cantidad de

compuestos con características acaricidas; dentro de los cuales se encuentran los

organofosforados, los piretroides sintéticos, el amitraz, los inhibidores de quitina, el

fipronil y nuevos compuestos como el spinosad. Aplicándose en forma sistémica

(inyectables o pour on) o tópica externa (inmersión y aspersión).

2.9.2 Control biológico.

Campuzano y Almeida (2008) afirman que se emplean hongos entomopatogeno para

regular naturalmente poblaciones de artrópodos e insectos; entre ellos Metarhizium

anisoplae, Beauveria bassiana y lecanicillium lecanii han mostrado tener potencial en el

control de garrapatas con una efectividad superior al 70 %, aunque, la desventaja de este

tipo de control, es que los hongos mencionados pierden actividad al estar expuestos a

las condiciones climáticas y a la luz solar.

2.10. Hongos entomopatógenos

Los hongos entomopatogenos han demostrado tener potencialidad para el control de

plagas agrícolas, los mismos que pueden utilizarse en la agricultura orgánica y

convencional. Una de estas alternativas, es el uso de hongos como Metarhizium

14

anisopliae (Hypocreales: Clavicipitaceae) el cual ha demostrado ser eficiente, tanto en

estudios in vitro como in vivo, para el control de las diferentes fases evolutivas de la

garrapata R. microplus por que causa disminución en la tasa de ovoposición, incrementa

el período de incubación y de eclosión.

Además produce la muerte de larvas y garrapatas adultas con porcentajes de

eficiencia del 100 %, Lecanicillium spp, pertenecientes a la clase Zygomycetes e

Ascomicetes, son organismos heterótrofos (falta de fotosíntesis), que poseen células

quitinizadas, (Ojeda, Rodríguez, Galindo, Lezama, & Cruz, 2011).

El inicio de la infección, se realiza por germinación de las esporas del hongo sobre

el tegumento del hospedador. Los individuos enfermos no se alimentan, presentan

debilidad y desorientación y cambian de color, presentando manchas oscuras sobre el

tegumento, que se corresponden con las esporas germinadas del hongo.

Normalmente, los hongos suelen comercializarse en preparados a base de esporas

hidratadas, para su utilización, debe prepáraselo en solución con agua 24 horas antes de

su utilización, después de su aplicación generalmente tardan una semana como mínimo

en eliminar a la víctima o al menos en que esta deje de alimentarse (Giraldo, 2012).

2.11 Modo de acción

Los hongos entomopatógeno actúan principalmente por contacto, cuando el hongo es

capaz de penetrar el insecto e invadirlo, provocándole la muerte por micosis. La

mayoría de los autores abordan ampliamente el ciclo infectivo de estos hongos

dividiéndolo en dos fases: una parasítica y otra saprofítica.

La fase parasítica incluye la adhesión del conidio a la cutícula del insecto, la

germinación (estimulada por los lípidos cuticulares del hospedante), penetración

(complejos multienzimáticos con enzimas secretadas como lipasas, quitinasas y

proteasas activadas secuencialmente) y multiplicación del hongo (por blastosporas

fundamentalmente) (Bastidas, Constante , Cuellar, Monroy, & Perpiñán , 2013).

15

La fase saprofítica se caracteriza por una colonización total con melanización y

momificación del individuo, emergencia del hongo y su esporulación, cuando la

humedad relativa micro ambiental es alta. Estos conidios pueden diseminarse mediante

el viento, el agua, otros organismos y el hombre, para así iniciar un nuevo ciclo

infectivo (Bastidas, et al 2013).

2.12 Toxinas de hongos entomopatógenos

Las toxinas producidas por este hongo entomopatogeno son sustancias muy toxicas para

artrópodos, por lo que pueden causar su muerte debido a sus propiedades acaricidas;

además actúan como inhibidores de las reacciones de defensa del insecto. La

producción de toxinas, es una característica de todos los hongos y cepas. Las toxinas

producidas pueden ser de dos tipos:

a) Toxinas macromoléculas proteicas

b) Toxinas de bajo peso molecular.

Las primeras son enzimas secretadas en cantidades significativas tanto en medios

de cultivo como en el cuerpo del insecto como son la serilproteasa y la sulfidrilproteasa,

que han sido aisladas de metarhizium; otras enzimas encontradas son lipasas,

glucogenasas, amilasas y quitinasas. El segundo tipo corresponde a metabolitos

secundarios, cuya producción es una propiedad genética de los hongos, pero que puede

ser afectada por factores como nutrientes, pH, temperatura, etc. Las toxinas más

comunes de este tipo son principalmente las destruxinas, demetildextruxina y

protodextruxina (Monzon, 2003).

2.13 Efecto entomopatógenos

(Maribel, et al. 2011) Mencionan que la penetración del hongo en los órganos ocurre al

quinto día pos infección invadiendo también, los órganos reproductivo y digestivo, esta

se debe a las micotoxinas, cambios patológicos en el hemocele, acción histolítica y

bloqueo mecánico del aparato digestivo, secundario al crecimiento de las hifas.

16

La unidad infectiva es la espora (reproducción sexual) o el conidio (reproducción

asexual). La invasión al hospedero, se produce con la adherencia del conidio a la

cutícula del insecto, posteriormente este produce un tubo germinativo y un apresorio

(modificación de las hifas), como producto de la dilatación de la hifa. En la penetración

están presentes dos procesos principales: el físico, debido a la presión de la hifa, la cual

rompe las áreas membranosas esclerosadas y el químico, resultante de la acción

enzimática (proteasas, lipasas y quitinasas), lo cual facilita la penetración mecánica

(Giraldo, 2012)

En el área de la pro cutícula alrededor de la penetración, aparecen síntomas de

histólisis (descomposición del tejido par acción enzimática). A partir de la penetración

se inicia el proceso de colonización, en el cual la hifa sufre un engrosamiento y se

ramifica en la cavidad general del cuerpo. A partir de ese momento se forman pequeñas

colonias del hongo y otros cuerpos hifales (blastosporos), sin embargo no ocurre gran

crecimiento hifal antes de la muerte del insecto (Giraldo, 2012).

La cutícula está formada aproximadamente en un 70 % de proteínas, lo que explica

que sean las proteasas más importantes que las quitinasas. Después de la muerte del

insecto, el hongo crece dentro del cadáver y todos 1os tejidos internos son penetrados

por hifas filamentosas. La colonización del hongo en los órganos del artrópodo se

produce en la siguiente secuencia: cuerpos grasosos, sistema digestivo, sistema urinario,

hipodermis, sistema nervioso, músculo, sistema respiratorio. Después de la muerte del

insecto y cuando las condiciones de humedad relativa son adecuadas. La emergencia del

micelio se realiza a través del tegumento, éste crece en la superficie y espórtula después

de 48-60 h de la muerte del hospedero (Giraldo, 2012).

2.14 Experiencias investigativas

Según (Azate, Gutierrez, & Saldarriaga, 2008) en el trabajo de investigación

Patogenicidad de Lecanicillium lecanii (Fungi) sobre la garrapata Boophilus microplus

(Acari: Ixodidae) en laboratorio determinó la patogenicidad del hongo Lecanicillium

17

lecanii sobre la garrapata del ganado Boophilus micro plus obteniendo como resultados

de un 95 % de efectividad a los 12 días.

Según (Serrano, 2009) En el estudio realizado en México el hongo Verticillium lecanii

tuvo acción ovicida, elimino el 100 % de las larvas del parásito y además fue efectivo

contra el 40 % de los parásitos adultos tratados.

Según (Intriago Alcivar, 2014). Cuyo trabajo de investigación es Beneficios

ambientales generados con la utilización de hongos entomopatógenos para el control de

garrapata, en ganado vacuno. Año 2012. Indica que uno de los estudios biológico

realizado en los últimos años con resultados promisorios son los hongos

entomopatógeno como L. lecanii, que ha demostrado ser patogénicos para varias

especies de garrapatas una de las mejores dosis de las cepas L. lecanii para el control de

garrapata Amblyomma cajennense son: 1 mg/100 ml logrando controlar entre el 80 y 89

% de ácaros.

Se ha visto que las cepas de V. lecanii para el control de garrapatas alcanzan

efectividades técnicas entre 75-80 % en condiciones de campo. El costo de producción

es bajo, siendo atractivo para los productores (Intriago Alcivar, 2014).

Mientras que (Rijo Camacho, 2015). Cuyo trabajo de investigación es control de

garrapata del ganado, boophilus microplus (canestrini) con hongos entomopatógenos.

Afirma que las cepas de V. lecanii para el control de garrapatas alcanzan efectividades

técnicas entre 75-80 % en condiciones de campo.

18

III. MARCO METODOLÓGICO

3.1 Localización del experimento.

El trabajo experimental se lo desarrolló en el hato bovino de la familia Manobanda

Rumiguano ubicada en la Parroquia Puerto Pechiche del cantón Puebloviejo, cuyas

condiciones meteorológicas son temperatura promedio 25,5 ºC, Humedad relativa 80 %

- 90 %, Precipitación 1 492 mm/año, Longitud 1̊ 31′ 5″ S, Latitud 79 ̊ 32′ 30″ Altitud

41msnm,1 y en laboratorio de la Facultad de Ciencias para el Desarrollo en el cantón

Vinces.

3.2 Factor en estudio

El hongo Lecanicillium lecanii como bioacaricida en el control de garrapatas en ganado

bovino en la zona de Puebloviejo, y observación de genero predominante en la zona de

estudio.

3.3 Tamaño de la muestraPara el trabajo de campo se utilizaron 25 bovinos de raza mestizos (Brown Swiss con

Holstein), del hato ganadero de la familia Manobanda Rumiguano de la parroquia

Puerto Pechiche del cantón Puebloviejo y el trabajo de laboratorio se realizó en la

Facultad de Ciencias para el Desarrollo en Vinces.

1 http://www.serviciometeorologico.gob.ec/ (INAMHI)

19

http://www.serviciometeorologico.gob.ec/

3.4 Materiales y equipos

Los materiales y equipo que se utilizaron en el presente estudio de investigación

fueron los siguientes:

3.4.1 Materiales e insumos de laboratorio Probeta

Agua y jabón

Mascarilla

Mandil

Guantes

Vasos de precipitación de 500cc

Alcohol

Porta objetos

Papel toalla

mascarillas

Marcadores

Cinta adhesiva

Ficha de registro de animales.

3.4.2 Materiales de campo

Bomba de mochila cp3

Esferos

Botas

Soga

3.4.3 Equipos Agitador

Computador

Cámara fotográfica

Balanza

Estereoscopio

3.4.4 Biológico Bovinos

Hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii (polvo mojable –

lecaniceb10WP).

20

3.5 Diseño experimental y análisis estadístico

Para nivel de campo se utilizó el estadígrafo de desviación estándar, coeficiente de

variación y para establecer el nivel de significancia se aplicará la prueba de t (Student).

Para nivel de laboratorio se utilizó estadística no paramétrica donde los resultados se

muestran en tablas y prueba de Ji cuadro (Ji²) para la comprobación de hipótesis

planteadas.

3.6 Manejo del ensayo

3.6.1. Identificación de animales.En el presente ensayo se lo efectuó en el hato bovino de la familia Manobanda

Rumiguano en la parroquia Puerto Pechiche del cantón Puebloviejo, donde se

seleccionaron 25 animales con la respectiva identificación.

3.6.2 Peso de las dosis del entomopatogeno.Con la ayuda de una balanza electrónica se realizó en el laboratorio entomológico de la

Facultad de Ciencias para el Desarrollo (FACDE) del cantón Vinces, el pesaje del polvo

mojable que contiene el hongo entomopatógeno L. lecanii, que comercialmente se lo

conoce como (lecaniceb 10wb 3x109 UFC) de laboratorio Equabiologica-Quito-

Ecuador. Las dosis pesadas fueron T1 (1g)- T2 (1,5g)- T3 (2g)- T4 (2,5g) del hongo

entomopatogeno lecanicillium lecanii.

Una vez obtenidas las dosis a utilizar, se disolvieron en medio litro de agua; en

recipientes de plástico y se las dejo reposar por 24 horas; para que se multipliquen los

conidios y de esta manera poder realizar la aplicación.

Para proceder a los baños de las diferentes unidades experimentales es importante

indicar que fueron utilizadas las siguientes dosis preparadas o concentraciones de

conidios/gramos/litro:

21

3.6.2.1 Estudio de la aplicación del hongo L. lecanii en bovinos infestadas por el parasito (garrapata) en campo.

Para la evaluación de la acción del hongo sobre las garrapatas se realizó la técnica de

baño del bioacaricida en los animales de acuerdo a dosis por tratamiento en estudio;

para lo cual se realizó baños de aspersión en relación de 5 litros por animal por medio

de bomba de mochila, conforme lo hacen los productores ganaderos

Cuadro 1. Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (lecanicillium

lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno, de acuerdo a

dosis de polvo hongo entomopatogeno L. lecanii g/litro de agua

Dosis (g/L)

volumen de agua para baño garrapaticida litros (L)

Cantidad en g. de L. lecanii

Conidias aplicadas en disoluciones (millones de conidias)

T1 (1g) 5 5 5 00

T2 (1,5g) 5 7,5 7 50

T3 (2g) 5 10 10 00

T4 (2,5g) 5 12,5 12 50

* fuente www.equabiologica.com

1 g= 100 millones de conidios

3.6.3 Evaluación de las regiones de los bovinos en estudio antes y después de aplicación de hongo entomopatogeno.Se llenaron hojas de registros con la observación directa y evaluación de la cantidad de

garrapatas existente en las unidades experimentales en las diferentes regiones como

fueron: ubre, oreja, testículo, cola, entre piernas y tabla del cuello. Luego se efectuó la

aplicación del hongo entomopatógeno y se volvió a tomar datos en las mismas regiones

a las 72h00 y 96h00; lo que permitió evaluar la mortalidad.

3.6.4 Manejo del ensayo para el laboratorio.3.6.4.1 Recolección de las garrapatas.

Para el manejo del ensayo de laboratorio se realizaron tres recolecciones de garrapatas a

partir de la aspersión del hongo entomopatogenos en los bovinos y de acuerdo a las

22

regiones en estudio. La primera colección se realizó a las 48 horas; la segunda

recolección de garrapatas a las 72h00 y una tercera a las 96h00. En todas se procedió a

recolectar manualmente las garrapatas de cada uno de los tratamientos, para colocarlas

en cajas petri, debidamente identificadas y rotuladas; las cuales fueron trasladadas al

laboratorio entomológico de la Facultad de Ciencias para el Desarrollo (FACDE); para

observar los cambios morfológicos de las garrapatas provocado por el entomopatogeno.

3.6.4.2 Evaluación de garrapatas expuestas al hongo entomopatogeno, en las cajas Petri.

En cada una de las recolectas de cada tratamiento se realizó las observaciones de las

garrapatas en las cajas Petri cada 24 horas, pudiendo observar la acción del bioacaricida

como iba afectando la garrapata ocasionando daños en la dermis, se observó la

esporulación del hongo entomopatogeno y se pudo verificar la muerte de la garrapata

mediante la observación de cada uno de los tratamiento y muertes de estos ácaros se

determinaba que tratamiento era el más eficiente.

3.7 Datos evaluados

Este trabajo de investigación estuvo compuesto en dos etapas una en campo y otra en

laboratorio, donde se evaluaron garrapatas desprendidas en las regiones evaluadas y

mortalidad de garrapatas en cajas Petri, a diferente tiempo.

3.7.1 Bioensayo en bovinos experimentalmente infestados con el hongo

entomopatógeno Lecanicillium lecanii para determinar la mortalidad in

vitro de las garrapatas expuestas a la acción del bioacaricida.

Se evaluó la acción acaricida de las diferentes dosis in vitro del hongo entomopatógeno

sobre las garrapatas.

a) Porcentaje de mortalidad de las garrapatas previa inspección de su presencia antes

de la aplicación del biocontrolador (hongo Lecanicillium lecanii).

b) Para determinar mortalidad se utilizó la siguiente formula:

Porcentaje de control = ((Pf – Pi) / Pi) × 100. (Tondelli, 2006).

Pf = Población final.

Pi = Población inicial.

23

c) Cuantificar el tiempo y/o etapa en la que el biocontrolador (hongo Lecanicillium

lecanii) de acuerdo a las dosis utilizadas tuvo mayor efecto sobre las garrapatas a

fin de evaluar su acción en el artrópodo.

3.7.2 Hongo entomopatógeno L. lecanii tiempo de acción acaricida en la

garrapata in vitro.

El objetivo de esta evaluación fue conocer la acción del hongo L. lecanii después de

estar expuesto a las garrapatas en diferentes periodos, se considera el tiempo de

germinación de los conidios en las garrapatas y determinar en qué tiempo el hongo

entomopatógeno comienza a desarrollarse sobre el acaro provocando mortalidad de las

garrapatas, por entero toxemia y debido a la proliferación de millones de conidias.

24

IV RESULTADOS

4.1 Determinación de la dosis optima del hongo entomopatogeno Lecanicillium

lecanii para controlar garrapatas en el ganado vacuno.

Según los resultados obtenidos, se determinó que la dosis óptima para el uso del hongo

entomopatogeno lecanicillium lecanii como bioacaricida fue el tratamiento T4 (2,5g/L)

obteniendo un 89.26 % de mortalidad en campo y 81.25 % en laboratorio.

Cuadro 2 Dosis optima del hongos entomopatogeno Lecanicillium lecanii para controlar garrapatas en el ganado vacuno.

% nivel campo % nivel laboratorio

tratamientos antes de aplicar

96 horas % # de ácaros

recolectados96

horas %

T1 1g/L 142 39 72,54 32 14 56,25T2 1,5g/L 109 25 77,06 32 15 59,37T3 2g/L 146 20 86,3 32 11 65,62

T4 2,5g/L 121 13 89,26 32 6 81,25

4.2 Determinación de las especies de garrapatas existente en la zona de estudio.

Se estableció que, de 656 garrapatas observadas, el 100% correspondía a la especie

Boophilus microplus como se lo indica en el cuadro # 3.

Cuadro 3. Identificación de la especie de garrapatas existente en la zona de investigación

Área de investigación

total de garrapatas en estudio

Amblyomma cajennense

Boophilus microplus

Campo 528 0% 100%Laboratorio 128 0% 100%total 656 0% 100%

4.3 Elaboración de una propuesta de control biológico para el control de

garrapatas en ganado bovino.

Una vez concluido este trabajo de investigación, basado en los resultados obtenidos en

campo y laboratorio se realizó una propuesta de control biológico para que se llegue a

dar a conocer la preparación y uso del entomopatogeno, recomendando como mejor

25

dosis para baños garrapaticidas el T4 (2,5 g/L), y conociendo la especie de garrapata

predominante como lo es la Boophilus microplus cuyo ciclo biológico es: ver figura (1)

(Figura 1)

Así obtener un control eficiente de esta especie de garrapata se recomienda realizar los

baños con el bioacaricida (hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii) cada 15 días

para así cortar el ciclo evolutivo de la misma, e ir disminuyendo el uso de sustancias

químicas como son los órganos fosforados e ivermectinas que se las podría utilizar para

el control de estos parásitos una vez por mes. Se realizó un plan de trabajo sobre dicha

propuesta cuyos objetivos son:

Ejecutar actividades de capacitación dirigidas a pequeños y mediados ganaderos

de la asociación Carlos Montiel del cantón Vinces.

Involucrar a organizaciones gubernamentales y no gubernamentales en la

implementación del programa de control biológico de garrapatas.

(Ver anexo pág. 54)

26

4.3.1 Cantidad de garrapatas encontradas en las regiones, orejas, tabla del

cuello, ubre, testículos y cola antes de la aplicación del bioacaricida

Lecanicillium lecanii y después de la misma con la dosis de 1 g/l.

En el cuadro a continuación podremos observar los resultados en las siguientes

regiones: orejas, pecho, ubre, testículo, y cola antes de la aplicación del bioacaricida

encontramos un promedio (ẋ) de garrapatas de 26-38-38-y 40 respectivamente. A las

96h00 de la evaluación se obtuvo un promedio de 9–8–9–y 13 ácaros. Los Coeficientes

de Variación (C.V) obtenido antes y después de las aplicaciones fueron 18,04 %– 14,87

% y 22,74 % Para la prueba de (t) se obtuvieron valores altamente significativos

después de las aplicaciones (96h00 de observación), para las siguientes regiones orejas,

pecho y ubre, y significativo para la región de la cola.

Cuadro 4 Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno antes de la aplicación del bioacaricida con la dosis de 1 g/.

27

T1 (1g)

Regiones antes 72h00 después 96h00 después

Cantidad % Cantidad % Cantidad %Oreja 26 18,31 24 16,90 9 6,34Ubre 38 26,76 34 23,94 9 6,34Cola 38 26,76 33 23,24 13 9,15

Pecho 40 28,17 30 21,13 8 5,63Total 142 121 39

cv 18,04 14,87 22,74T Student 11,09 13,44 8,79



Lecanicillium lecanii con la dosis de 1,5 g/l.

En el siguiente cuadro podremos observar los resultados de las regiones: orejas, pecho,

ubre, testículo y cola antes de la aplicación del bioacaricida encontramos un promedio (ẋ)

de garrapatas de 15–32–28–y 34 respectivamente. A las 96h00 de evaluación se obtuvo un

promedio de 5–4–8–y 8. (C.V) obteniendo antes y después de las aplicaciones fueron 31,34

%– 27,81 % y 32,98 %. Para la prueba de (t) se obtuvieron a las 96h00 de observación

valores significativos para todas las regiones en estudios.

Cuadro 5 Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno, con la dosis de 1,5 g/l.

T 2(1,5g)

Regionesantes 72h00 después 96h00 después

Cantidad % Cantidad % Cantidad %Oreja 15 13,76 13 11,93 8 7,34Ubre 28 25,69 26 23,85 4 3,67Cola 34 31,19 25 22,94 8 7,34

Pecho 32 29,36 21 19,27 5 4,59Total 109 85 25

cv 31,34 27,81 32,98T Student 6,38 7,19 6,06

28



Lecanicillium lecanii de 2 g/l.

Cómo se puede observar en el siguiente cuadro los resultados en las siguientes regiones:

orejas, pecho, ubre, testículo y cola antes de la aplicación del bioacaricida se encontró

un promedio (ẋ) de garrapatas de 15–29–5–y 47 respectivamente. A las 96h00 de la

evaluación se obtuvo un promedio de 1–1–8–y 3 (C.V) obteniendo antes y después de

las aplicaciones fueron 49,29 %– 57,13 % y 101,66 %. Para la prueba de (t) se

obtuvieron valores altamente significantes después de las aplicaciones (96h00 de

observación), para las regiones ubre y cola. Significativo para las demás regiones.

Cuadro 6 Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno con la dosis de 2 g/l.

T 3(2 g)Regiones antes

72h00 después 96h00 despuésCantidad % Cantidad % Cantidad %

Oreja 15 10,27 13 8,90 1 0,68Ubre 55 37,67 43 29,45 15 10,3Cola 47 32,19 25 17,12 3 2,05

Pecho 29 19,86 15 10,27 1 0,68Total 146 96 20

cv 49,29 57,13 101,66T Student 4,06 3,5 1,97

29



Lecanicillium lecanii la dosis de 2.5 g/L.

Los resultados del efecto de las aplicaciones en las regiones: orejas, pecho, ubre y cola

antes de la aplicación del bioacaricida encontramos un promedio (ẋ) de garrapatas de

22–41–38–y 20 respectivamente. A las 96h00 de la evaluación se obtuvo un promedio

de 1–2–8–1 y 2. (C.V) obtenidos antes y después de las aplicaciones fueron 35,64 %–

49,61 %– y 98,51 %. Para la prueba de (t) se obtuvieron valores altamente

significativos después de las aplicaciones (96h00 de observación) en las regiones ubre,

cola y significativo para las demás regiones.

Cuadro 7 Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno, con la dosis de 2,5 g/l.

T 4(2,5 g)Regiones antes 72h00 después 96h00 después

Cantidad % Cantidad % Cantidad %

Oreja 22 18,18 13 10,74 1 0,83Ubre 38 31,40 28 23,14 8 6,61Cola 20 16,53 9 7,44 2 1,65Pecho 41 33,88 16 13,22 2 1,65Total 121 66 13cv 35,64 49,61 98,51T Student 5,61 4,03 2,03

30

4.4 Trabajo de laboratorio

4.4.1 Resultados de laboratorio comprobación de la hipótesis Ji

cuadrado

En los muestreos regulares realizados en las garrapatas recolectadas a las 24 horas no se

obtuvo resultados con la aplicación del bioacaricida compuesto del hongo entomopatogeno

Lecanicillium lecanii.

Cuadro 8 Comprobación de la hipótesis Ji cuadrado (Ji²) 48/horas, en la Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (L. lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno.

Garrapatas vivas Garrapatas muertas

Total de garrapatas

analizadas

7 1 8

7 1 8

7 1 8

7 1 8

28 4 32

Formulación de la hipótesis alternativa

Hipótesis: H0: El hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii tiene efecto acaricida sobre

las garrapatas en el ganado bovino.

Hipótesis H1: El hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii no tiene efecto acaricida

sobre las garrapatas en el ganado bovino.

Nivel de significancia: se supone un nivel del 0,05

Distribución de muestra: grados de libertad (f-1) (e-1) = (4-1) (r-1) = (3) (1) = 3 la

distribución queda para tres grados de libertad y un nivel de significancia de 0,05 en la

tabla de x² se obtiene un valor de 7,82

Región de rechazo: la región de rechazo queda comprendida para todos los valores

mayores a 7,82

31

Cálculo matemático: para determinar matemáticamente si se acepta o rechaza la hipótesis

nos valemos de la siguiente tabla de prueba de Ji cuadro (Ji²)

Tabla ji (X²)

Grados de control al 5% =7,82 valor de la tabla a las 48h00 en la evaluación del efecto

acaricida del hongo entomopatogeno (lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas

en el ganado vacuno.

Tratamientos Garrapatasvivas muertas TOTAL o e o-e (o-e)²/e

T 1 7 1 8 7 7 0 0

T 2 7 1 8 7 7 0 0

T 3 7 1 8 7 7 0 0

T 4 7 1 8 7 7 0 0

TOTAL 28 4 32 1 1 0 0

1 1 0 0

7 1 1 1 0 0

1 1 0 0

0

Decisión: dado el valor de X² es igual (0,3333) y es menor al rango de rechazo de 7,82 la

decisión es aceptar la H0: El hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii tiene efecto

acaricida sobre las garrapatas en el ganado bovino.

32

Cuadro 9 Comprobación de la hipótesis Ji cuadrado (Ji²) 72/horas en la evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno.






Nivel de significáis: se supone un nivel del 0,05

Distribución de la muestra: grados de libertad (f-1) (e-1) = (4-1) (r-1) = (3) (1) = 3 la


tabla de X² se obtiene un valor de 7,82


mayores a 7,82


nos valemos de la siguiente tabla de prueba de Ji cuadro (Ji²).

Tabla ji X²

33

Garrapatas vivas Garrapatas

muertas

Total de garrapatas

analizadas

0 8 8

0 8 8

0 8 8

1 7 8

1 31 32

Grados de control al 5 % = 7,82 valor de la tabla a las 72h00 de observación en

la evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (L. lecanii) en el

control de las garrapatas en el ganado vacuno.

Garrapatas vivas

Garrapatas muertas

Total de garrapatas analizadas

o E o-e (o-e)² (o-e)²/e

0 8 8 0 0,25 -0,25 0,06 0,250 8 8 0 0,25 -0,25 0,06 0,250 8 8 0 0,25 -0,25 0,06 0,251 7 8 1 0,25 0,75 0,56 2,251 31 32 8 7,75 0,25 0,06 0,0081

8 7,75 0,25 0,06 0,00818 7,75 0,25 0,06 0,00817 7,75 -0,75 0,56 0,0726

3,0968



Decisión: dado que el valor de X² es igual (3,09) y es menor rango de rechazo de 7,82 la

decisión es aceptar la H0, El hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii tiene efecto

acaricida sobre las garrapatas en el ganado bovino.

34

Cuadro 10 Comprobación de la hipótesis Ji cuadrado (Ji²) ji 96/horas en la evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatógeno (L. lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno.

Garrapatas

vivas

garrapatas

muertas

total de

garrapatas

analizadas

2 6 8

0 8 8

4 4 8

0 8 8

6 26 32






Nivel de significáis: se supone un nivel del 0,05

Distribución muestral: grados de libertad (f-1) (e-1) = (4-1) (r-1) = (3) (1) = 3 la


tabla de X² se obtiene un valor de 7,82


mayores a 7,82.

35



Tabla ji X²

Grados de control al 5 % = 7,82 valor a las 96h00 de observación evaluación del efecto

acaricida del hongo entomopatógeno (L. lecanii) en el control de las garrapatas en el

ganado vacuno.

tratamientos

Garrapatas

Vivas

Garrapatas

Muertas

Total de

garrapatas

analizadas

o e o-e (o-e)² (o-e)²/e

T 1 2 6 8 2 1,5 0,5 0,25 0,166

T 2 0 8 8 0 1,5 -1,5 2,25 1,5

T 3 4 4 8 4 1,5 2,5 6,25 4,166

T 4 0 8 8 0 1,5 -1,5 2,25 1,5

total 6 26 32 6 6,5 -0,5 0,25 0,038

8 6,5 1,5 2,25 0,346

1,5 6,5 4 6,5 -2,5 6,25 0,961

8 6,5 1,5 2,25 0,346

9,025

Decisión: dado que el valor de X² es igual (9,02) y es mayor rango de aceptación de 7,82 la

decisión es rechazada la H0 El hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii tiene efecto

acaricida sobre las garrapatas en el ganado bovino y se acepta la H1.

36

V. DISCUSIÓN

De acuerdo a los resultados logrados y comparándolos con otras investigaciones

similares se llegó a lo siguiente:

A nivel de campo con la aplicación bioacaricida L. lecanii se obtuvo una

mortalidad de garrapatas del 89,2 % por lo cual el uso del bioacaricida con la dosis

2,5 g/L (T4) mantuvo su acción entomopatógena en todas las unidades

experimentales, este resultado son mayor a los obtenidos por (Intriago, 2014) quien

en su investigación menciona que la dosis empleada para el control de garrapatas

con la utilización del hongo entomopatógeno L. lecanii es de 1g/L a 1,5g/L, el

mismo que obtuvo una mortalidad entre el 75 % y el 80 %, se presume que los

resultados obtenidos por Intriago en investigación fueron mejores de acuerdo en

dosis utilizadas, aunque este autor no determina en cuantos días obtuvo esos

resultados.

Respecto al tiempo de evaluación del grado de acción del hongo entomopatógeno

en el laboratorio, los resultados obtenido de este trabajo de investigación en la

acción del bioacaricida sobre las garrapatas, siendo el tratamiento T4 (2,5g/L) el que

presentó a las 96h00 un 81.25 % de mortalidad, Los resultados obtenidos del

trabajo de investigación difieren a los mencionado por (Azate, Gutierrez, &

Saldarriaga, 2008) quien en su estudio demostró la acción de los aislamientos del

hongo entomopatógeno L. lecanii en condiciones controladas a los 15 días, obtuvo

una mortalidad del 95 %, en todos los tratamientos de estudios, lo que se

demuestra que a mayor dosis mayor efectividad.

El haber observado la acción del hongo como bioacaricida in vitro, en el presente

trabajo de investigación a las 96H00 se obtuvo un promedio de 81.25 % de

mortalidad para el T4 (2,5g/L), mientras que (Intriago, 2014) tuvo resultados

similares con una mortalidad de las garrapatas de 80 % con dosis de 1,5 g/L.

Las disminuciones logradas en los diferentes tiempos de evaluación sobre la

mortalidad in vitro de las garrapatas expuestas al hongo L. lecanii post baño en los

37

animales bovinos no difirió numéricamente con los obtenidos en el presente

estudio; se logró mortalidades de 89.26 % a las 96h00 para el tratamiento T4

(2,5g/L), los mismos que concuerda con lo mencionado por (Azate, Gutierrez, &

Saldarriaga, 2008) ya que los autores mostraron mortalidades de garrapatas

expuesta al hongo L. lecanii de 95 % en periodos de 4-12 días.

Las especies de garrapatas encontradas en las zonas de estudios y que mayormente

se encontraron en la parroquia Puerto Pechiche fue la Boophilus micro plus en una

totalidad del 100 % y basado en los resultados se realizó una propuesta de control

biológico, la que permite dar a conocer a los ganaderos de dicha zona de estudios y

recintos aledaños de las bondades y beneficios de este hongo.

38

VI. CONCLUSIONES

De acuerdo a los resultados se llegó a las siguientes conclusiones:

La dosis óptima del hongo entomopatógeno para control de las garrapatas en campo fue

el tratamiento T4 (2,5 g/L) con el 89.26 % y en laboratorio un 81.25 % a las 96 horas.

La especie de garrapata encontrada en la parroquia Puerto Pechiche del cantón

Puebloviejo fue la Boophilus microplus.

El razonamiento estadístico al comparar el efecto de las dosis utilizadas sobre las

garrapatas expuestas al biocontrolador, hace que los resultados cuantitativos constatados

en los diferentes grupos de ácaros analizados nos lleven a indicar que el hongo

entomopatógeno Lecanicillium lecanii provoca la muerte de las garrapatas en el ganado

bovino.

Se realizó una propuesta de control biológico enfocada en el control de garrapatas en

bovinos, pertenecientes a las asociaciones del cantón Vinces.

En base a los resultados obtenidos se acepta la hipótesis nula: El hongo entomopatógeno

Lecanicillium lecanii tiene efecto acaricida sobre las garrapatas en el ganado bovino.

39

VII. RECOMENDACIONES

Hacer un estudio de tipificación de garrapatas existentes en la zona para tener un

conocimiento más claro de la familia y género de garrapatas que están afectando a los hatos

ganaderos de la zona, pues de esa forma se haría un control más adecuado.

Dar a conocer y aplicar la propuesta alternativa de control biológico anexada en el presente

trabajo de investigación, a los ganaderos del cantón Vinces y poner en marcha como trabajo

de campo.

Realizar los baños garrapaticidas con el hongo entomopatógeno cada 15 días y utilizar los

productos químicos por los menos una vez por mes.

Socializar las bondades obtenidas al usar el hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii

como baño garrapaticidas para el control de estos ácaros que afectan negativamente la salud

del ganado bovino.

40

VIII. BIBLIOGRAFÍA

Azate, B. C., Gutierrez, A. I., & Saldarriaga, Y. (2008). Patogenicidad de Lecanicillium lecanii (Fungi) sobre la garrapata Boophilus microplus (Acari: Ixodidae) en laboratorio. Revista Colombiana de Entomología cielo, 1.

Barrera, J. L., & Duarte, H. J. (8 de octubre de 2006). Estudio Epidemiológico de la prevalencia e identificación de garrapatas en el ganado bovino del Municipio de San Pedro de Lovago– Chontales. Obtenido de cenida.una.edu.ni/Tesis: http://cenida.una.edu.ni/Tesis/tnl73l864.pdf

Bastidas, L., Constante , J., Cuellar, E., Monroy, Y., & Perpiñán , J. (12 de Diciembre de 2013). Hongos Entomopatogenos. Obtenido de scribd.com: https://es.scribd.com/doc/186433813/HONGOS-ENTOMOPATOGENOS-libro-klyslerts

Calox. (13 de Abril de 2011). Ciclo de Vida de la garrapata. Obtenido de caloxvet.com: http://caloxvet.com/ciclo-de-vida-de-la-garrapata/

Camacho, R. E. (1 de septiembre de 2010). Control de garrapata del ganado, boophilus microplus ( canestrini ) con hongos entomopatógenos. Recuperado el 1 de septiembre de 2016, de aguascalientes: http://www.aguascalientes.gob.mx/codagea/produce/GARRAPAT.htm

Corpoica & Fao. (2 de 8 de 2007). Manejo integrado de garrapatas en sistemas sostenibles de producción ganadera. Obtenido de Sexta Conferencia Electrónica: http://www.corpoica.org.co/SitioWeb/Archivos/Conferencias/MetalternConTc.pdf

Evans, H. (1982). Uso actual y potencial de los hongos entomopatógenos para el control biológico de artrópodos plagas. Revista Palmas., Volumen 14 No. 1., 46. Obtenido de ublicaciones.fedepalma.org/index.php/palmas/article/viewFile/368/368

FAO. (2 de Abril de 2003). Resistencia a los Antiparasitarios. Obtenido de fao.org: http://www.fao.org/3/a-y4813s.pdf

García, D. R. (24 de Mayo de 2006). Control integrado contra la garrapata (B. microplus). (Monografias.com, Editor, & D. D. García, Productor) Recuperado el 17 de Diciembre de 2015, de www.monografias.com: http://www.monografias.com/trabajos33/control-garrapata/control-garrapata.shtml#top

41

Giraldo, J. (15 de octubre de 2012). Uso de hongos entomopatogenos. Obtenido de monografias.com: http://www.monografias.com/trabajos29/hongos-entomopatogenos/hongos-entomopatogenos.

Guajardo Cota, S. d. (8 de febrero de 2014). Control biológico e integrado de la garrapata hyalomma lusitanicum en explotaciones silvo-agro-cinegéticas de ecosistema mesomediterráneo. Obtenido de eprints.: http://eprints.ucm.es/29995/1/T36038.pdf

Guillén Zapata, N. X., & Muñoz Corrales, L. E. (5 de 7 de 2013). estudiotaxonómico a nivel de genero de garrapatas en ganado bovino de la parroquia alluriquín - santo domingo de los tsáchilas”. obtenido de scholar: scholar.google.com.ec/scholar?hl=es&q=estudiotaxonómico+a+nivel+de+genero+de+garrapatas+en+ganado+bovino+de+la+parroquia+alluriquín+-+santo+domingo+de+los+tsáchilas”&btng=&lr=

Gutiérrez Osorio, J. (12 de 6 de 2006). identificacion de organos blancos en la garrapata de la especie boophillus micro plus para anticuerpos antigarrapatas de bovinos inducido por el inmunogeno. Obtenido de www.javeriana.edu.co: http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis265.pdf

Hogsette, J. (25 de 1 de 1999). Management of ectoparasites with biological control organisms. Obtenido de International Journal for Parasitology: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0020751998001908

Ingomar Mutz . (4 de 6 de 2009). Las infecciones emergentes transmitidas. Obtenido de Ann Nestlé [Esp: file:///F:/04%20Las%20infecciones%20emergentes%20transmitidas%20por%20garrapatas

INIAP. (07 de Mayo de 2008). La garrapata: un enemigo de su ganaderia que se debe controlar. Boletin Divulgativo. Portoviejo, Manabi, Ecuador: INIAP.

Intriago Alcivar, F. E. (2014). BEneficios ambientales generados con la utilización de hongos entomopatógenos para el control de garrapata, en ganado vacuno. año 2012. propuesta de control biologico. Quevedo- Los Rios- Ecuador, Ecuador: UNIVERSIDAD TÉCNICA ESTATAL DE QUEVEDO.

J. Mosqueda, A. O., Ramírez, G. A., & Cantó, T. a. (20 de 11 de 2012). Current Advances in Detection and Treatment of Babesiosis. Obtenido de Current Medicinal Chemistry,: http://docserver.ingentaconnect.com/deliver/connect/ben/09298673/v19n10/s6.pdf?expires=1450210555&id=84427148&titleid=3863&accname=Guest+User&checksum=316FE2973CEF86D349BDE093D0B62500

Junquera, P. (20 de 11 de 2015). PARASITIPEDIA. Obtenido de parasitipedia.net: http://parasitipedia.net/index.php?

42

option=com_content&view=article&id=26&Itemid=471

Kim, C., Iseki, H., Herbas, M. S., Yokoyama, N., Suzuki, H., Xuan, X., & Igarashi, K. F. (15 de 12 de 2007). Development of Taqman-Based Real-Time PCR Assays for Diagnostic Detection of Babesia bovis and Babesia bigemina. Obtenido de National Research Center for Protozoan Diseases, Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine, Obihiro, Hokkaido, Japan: http://www.ajtmh.org/content/77/5/837.short

Klompen, Black, W. C., Keirans, J. E., & Norris, D. E. (01 de Marzo de 2000). Systematics and Biogeography of Hard Ticks, a Total Evidence Approach Sistemática y Biogeografía de Hard garrapatas, un enfoque total Evidencia. Obtenido de sciencedirect.com: https://translate.google.com.ec/translate?hl=es&sl=en&u=http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0748300799901263&prev=search

Manzano, R., Díaz, M. V., & Pérez, S. R. (01 de Agosto de 2012). Garrapatas: características anatómicas, epidemiológicas y ciclo vital. detalles de la influencia de las garrapatas sobre la producción y sanidad animal. Obtenido de producción Animal.com.ar: produccion-animal.com.ar/sanidad_intoxicaciones_metabolicos/parasitarias/Bovinos_garrapatas_tristeza/160-garrapatas.pdf

Meléndez, N. V. (4 de Noviembre de 2012). Evaluación de Beauveria bassiana y Metarhizium anisopliae para el control de Boophilus microplus en vacas del hato lechero de Zamorano. (ZAMORANO, Ed.) Obtenido de bdigital: http://bdigital.zamorano.edu/bitstream/11036/1055/1/T3347.pdf

Monzon, A. (18 de Abril de 2003). Producion y uso de hongos entomopatogenos. Obtenido de funica.org.ni: funica.org.ni/index/

Morales, I. C. (4 de 7 de 2011). “Prevalencia de unidades de producción con garrapatas rhipicephalus (boophilus) microplus resistentes a amidinas y factores de riesgo asociados a su presentación en la región centro del estado de veracruz. Obtenido de http://cdigital.uv.mx: http://cdigital.uv.mx/bitstream/123456789/30456/1/Schleske.pdf

Ojeda, Rodríguez, Galindo, Lezama, & Cruz. (martes de diciembre de 2011). Control de Rhipicephalus microplus (Acari: Ixodidae) mediante el uso del hongo entomopatógeno Metarhizium anisopliae (Hypocreales: Clavicipitaceae). Scielo, pp 177-192. Obtenido de wscielo.org.mx: http://www.scielo.org.mx/scielo.php?pid=S2007-11242011000200005&script=sci_arttext

43

Petch, H. E. (1925). Entomogenous fungí and their use in controlling insects. Entomogenous fungí and their use in controlling insects, 1, 40. Obtenido de http://publicaciones.fedepalma.org/index.php/palmas/article/viewFile/368/368

Propark. (28 de Mayo de 2014). Garrapatas como vectores de enfermedades. Leoben, Leoben, Austria.

Quesada, M. E. (19 de Octubre de 2009). Importancia Agrícola y Biotecnológica Importancia Agrícola y Biotecnológica de los Hongos Entomopatógenos. Obtenido de csic.es: http://www.ias.csic.es/seminarios/pdf/Enrique_Quesada_Moraga.pdf

Reyes, U. A. (7 de 6 de 2007). dinamica de la garrapata (boophilus microplus) en el municipio de siuna, region autonoma del atlantico norte (raan). Obtenido de repositorio: http://repositorio.una.edu.ni/1360/1/tnl72g643d.pdf

Rijo Camacho, E. (12 de Diciembre de 2015). control de garrapata del ganado, boophilus microplus ( canestrini ) con hongos entomopatógenos. Obtenido de Laboratorto de Entomófagos INISAV: http://www.aguascalientes.gob.mx/codagea/produce/GARRAPAT.htm

Senasa. (09 de Mayo de 2006). Garrapata. Obtenido de produccion-animal.com.ar: http://www.produccion-animal.com.ar/sanidad_intoxicaciones_metabolicos/parasitarias/Bovinos_garrapatas_tristeza/85-garrapata.pdf

Serrano, J. (2 de Febrero de 2009). Control biológico de garrapatas. Obtenido de prosegan: http://jairoserrano.com/2009/02/control-biologico/

Tene, M. B. (6 de 10 de 2002). efecto de metarhizium anisopliae (deuteromycota: Hyphomycetes) en el control biologico de boophilus microplus canestrini(acari:ixodidae) en el ganado bovino estabulado. Obtenido de digeset: http://digeset.ucol.mx/tesis_posgrado/Pdf/Marcelino%20Bazan%20Tene.pdf

Vera Quiñonez, J. (2014). El consumo de carne de res en el ecuador. Obtenido de corpogam: http://www.corpogam.com.ec/el-consumo-de-carne-de-res-en-el-ecuador/

44

ANEXOSANEXOS

Tabla 1. Prueba de (t) Tratamiento uno antes de la aplicación del bioacaricida.

Valor del Parámetro Probado: 0Variable n Media DE T p(Bilateral)Antes de aplicación 4 35,5 6,4 11,09 0,0016

Tabla 2. Prueba de (t) Tratamiento uno tres días después de la aplicación.

Valor del Parámetro Probado: 0Variable n Media DE T p(Bilateral)

tres días después de la

aplicación 4 30,25 4,5 13,44 0,0009

Tabla 3. Prueba de (t) Tratamiento uno seis días después de la aplicación.

Valor del Parametro

Probado: 0

Variable n Media DE T p(Bilateral)

seis días después de la

aplicación 4 9,75 2,22 8,79 0,0031

Tabla 4. Prueba de (t) Tratamiento 2 antes de la aplicación del bioacaricida.

Valor del Parámetro

Probado: 0


Antes de la aplicación 4 27,25 8,54 6,38 0,007846

Tabla 5. Prueba de (t) Tratamiento (2) tres días después de la aplicación del bioacaricida


Probado: 0



aplicación 4 21,25 5,91 7,19 0,0055

Tabla 6. Prueba de (t) Tratamiento (2) seis días después de la aplicación del bioacaricida.


Probado: 0


seis días después de la

aplicación 4 6,25 2,06 6,06 0,009

Tabla 7. Prueba de (t) Tratamiento (3) antes de la aplicación del bioacaricida.


Probado: 0

Variable n Media DE T

p(Bilateral

)

Antes de la aplicación 4 36,5 17,99 4,06 0,027

Tabla 8. Prueba de (t) Tratamiento (3) tres días después de la aplicación del bioacaricida.


Probado: 0



aplicación 4 24 13,71 3,5 0,0395

48

Tabla 9. Prueba de (t) Tratamiento (3) seis días después de la aplicación del bioacaricida.

Valor del Parámetro Probado: 0Variable n Media DE T p(Bilateral)seis días después de la aplicación 4 3,25 3,3 1,97 0,1438

Tabla 10. Prueba de (t) Tratamiento (4) antes de la aplicación del bioacaricida.

Valor del

Parámetro

Probado: 0

Variable n

Medi

a DE T

p(Bilateral

)

antes 4 30,25 10,78 5,61 0,0112

Tabla 11: Prueba de (t) Tratamiento (4) tres días después de la aplicación del bioacaricida


Probado: 0



aplicación 4 16,5 8,19 4,03 0,0274

Tabla 12. Prueba de (t) Tratamiento (4) seis días después de la aplicación del

bioacaricida.

49


Probado: 0


seis días después 4 3,25 3,2 2,03 0,1353

GRAFICOS

Gráficos 1 Dosis de 1 g del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii en la regiones de las orejas, pecho, ubres, y cola en el tratamiento 1

Oreja Ubre Cola Pecho Total cv T studen

26

38 38 40

142

18.0

3696

9682

909

4

11.0

9

18.3

1

26.7

6

26.7

6

28.1

7

24

34 33 30

121

14.8

7

13.4

4

16.9

0

23.9

4

23.2

4

21.1

3

9 9 13 8

39

22.7

4

8.79

6.34

6.34 9.15

5.63

tratamiento 1(1g)

T1 (1g) antes Cantidad T1 (1g) antes %T1 (1g) tres dias despues Cantidad T1 (1g) tres dias despues %T1 (1g) seis dias despues Cantidad T1 (1g) seis dias despues %

Gráficos 2 Dosis de 2 g del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii en la regiones

de las orejas, pecho, ubres, testículos y cola en el tratamiento 2


15

28 34 32

109

31.3

4

6.3813

.76

25.6

9

31.1

9

29.3

6

13

26 25 21

85

27.8

1

7.1911

.93

23.8

5

22.9

4

19.2

7

8 4 8 5

25 32.9

8

6.06

7.34

3.67 7.34

4.59

tratamiento 2(1,5g)

Cantidad antes %Cantidad 3 dias despues %Cantidad 6 dias despues %

50

Gráficos 3 Dosis de 3 g del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii en la región de

las orejas, pecho, ubres, testículos y cola en el tratamiento 3.


15

55

47

29

146

49.2

9

4.0610

.27 37

.67

32.1

9

19.8

6

13

43

25

15

96

57.1

3

3.58.90

29.4

5

17.1

2

10.2

7

1 8 3 1

13

101.

66

1.97

0.68 5.48

2.05

0.68

tratamiento 3 (2g)

Cantidad antes de aplicar %Cantidad 3 dias despues %Cantidad 6 dias despues %

Gráficos 4 Dosis de 4 g del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii en la regiones de las orejas, pecho, ubres, testículos y cola en el tratamiento 4.


22

38

20

41

121

35.6

4

5.6118

.18

31.4

0

16.5

3

33.8

8

13

28

9 16

66

49.6

1

4.0310

.74

23.1

4

7.44 13

.22

1 8 1 2 12

98.5

1

2.03

0.83 6.61

0.83

1.65

tratamiento 4 (2,5g)

Cantidad antes de aplicación %Cantidad 3 dias despues %Cantidad 6 dias despues %

51

Grafico 5. Porcentajes de garrapatas vivas y muertas en las observaciones in vitro

t1 t2 t3 t4012345678 7 7 7

6

8 8 8 8observacion a las 48 horas

garrapatas vivasgarrapatas muertastotal

Grafico 6. Porcentajes de garrapatas vivas y muertas

t1 t2 t3 t405

101520253035

6 4 3 22 4 5 68 8 8 8

32observacion a las 72 horas


52

Grafico 7. Porcentajes de garrapatas vivas y muertas

t1 t2 t3 t40

5

10

15

20

25

30

35

42

0 04

68 88 8 8 8

32observacion a las 96 horas


53

Cuadro 11

Determinar dosis optima del hongo entomopatogeno Lecanicillium lecanii en las garrapatas a través de baños garrapaticidas a nivel de campo. El tiempo de observación 96 horas

tratamientos Total de garrapatas

Garrapatas muertas

Garrapatas vivas %

T1 1g/L 142 103 39 72,54T2 1,5g/L 109 84 25 77,06T3 2g/L 146 126 20 86,30T4 2,5g/L 121 108 13 89,26

Cuadro 12

Determinar el grado de acción por contacto que tiene el hongo entomopatogeno Lecanicillium lecanii a nivel de laboratorio

A las 96h00Tratamientos Total

garrapatasGarrapatas

vivasGarrapatas

muertas%

T1 1g/L 32 14 18 56,25T2 1,5g/L 32 15 19 59,37T3 2g/L 32 11 21 65,62T4 2,5g/L 32 6 26 81,25

Cuadro 13 Total de garrapatas vivas y muertas observadas en las diferentes horas de estudios en el laboratorio.

Aplicación del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii en regiones a 24 horas

DOSIS

Regiones garrapatas 1 g 1,5 g 2 g 2,5 gG.M G.V

orejas 8 1 0 0 1 2 6cuello 8 0 1 0 2 3 5entre piernas 8 1 2 1 1 5 3cola 8 0 1 1 2 4 4

32 2 4 2 6 14 19

54

Cuadro 14. Total de garrapatas vivas y muertas observadas en las diferentes horas de estudios en el laboratorio.

observación de la aplicación del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii 48 horas en las garrapatas

DOSIS

Regionesgarrapatas 1 g 1,5 g 2 g 2,5 g

G.M G.V


32 5 4 5 4 20 12



DOSIS

Regiones garrapatas 1 g 1,5 g 2 g 2,5 gG.M G.V


32 5 6 5 4 22 10



Regiones garrapatas 1 g 1,5 g 2 g 2,5 g G.M G.Vorejas 8 2 1 1 2 6 2cuello 8 2 2 2 1 7 1entre piernas 8 2 2 1 2 7 1cola 8 1 2 2 2 7 1

32 7 7 6 7 27 5

55

Universidad de Guayaquil

Facultad de Ciencias para el Desarrollo

Ficha de registro de bovinos

56

Identificaci

ón del

animal

Códig

o

Hor

aColor

Identificación del

animalRegiones ah evaluar

Sex

oEda

dPeso

Raz

a

Orej

as

Ubr

e

Testículo

sCola

Cuell

oM H

FIGURAS

57

PROPUESTA ALTERNATIVA DE CONTROL BIOLOGICO

59

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