Ficha Patricia Patiño Guinand

7/22/2019 Ficha Patricia Patio Guinand

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UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELAINSTITUTO DE BIOMEDICINA

SERVICIO DE DERMATOLOGAFICHA BIBLIOGRFICA

Dra. Patricia Patio Guinand

EL RECEPTOR DE

GLUCOCORTICOIDES SE LOCALIZA ENLOS LIGANDOS ADHERENTES EN LA

MEMBRANA PLASMTICA DE LOS

QUERATINOCITOSOlivera Stojadinovic, Andrew Sawaya, Irena Pastar, Marjana Tomic-Canichttp://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0063453

30 de abril de 2013
http://www.plosone.org/article/info:doi/10.1371/journal.pone.0063453http://www.plosone.org/article/info:doi/10.1371/journal.pone.0063453http://www.plosone.org/article/info:doi/10.1371/journal.pone.0063453


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INTRODUCCIN

Glucocorticoides son considerados como la piedra angulardel tratamiento dermatolgico

Sus efectos estn mediados por una familia de receptores

de glucocorticoides (GR) que actan con un factor detranscripcin

GR presente en el citoplasma unido a la protena Hsp90

Unin del receptor con el glucocorticoide ocasionaactivacin del receptor y liberacin de Hsp90 contranslocacin al ncleo para regular transcripcin


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INTRODUCCIN

Se estudiaron los mecanismos a travs de los cuales GR regulala transcripcin de genes importantes para la fisiopatologa delas enfermedades de la piel y su tratamiento

Este artculo explica los efectos no genmicos del GR: sonefectos ms rpidos y no incluyen la transcripcin gentica

Se ha pensado que los efectos no genmicos de GR estnmediados por interacciones entre receptores acoplados a la

protena G y GR de la membrana

La localizacin de GR y el mecanismo exacto del efecto nogenmico en la piel es desconocido


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INTRODUCCIN

En el siguiente artculo se investig si el GR est localizadoen la membrana plasmtica y si las protenas acopladas ala membrana estn asociadas

Se encontr que GR se localizan en la membranaplasmtica de los queratinocitos. Tambin interactan concatenina, formando parte de los ligandos adherentes

Es la primera observacin de GR de membrana asociadosa ligando adherentes y catenina


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LIGANDOS ADHERENTES

Complejo de protenas que seencarga de la unin entre clulas


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Protena de unin entre las cadherinas y los filamentos de actina delcitoesqueleto.

CATENINA


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OBJETIVO

DETERMINAR LA LOCALIZACIN DE LOSRECEPTORES DE GLUCOCORTICOIDES (GR)

EN QUERATINOCITOS HUMANOS.


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MATERIALES Y MTODOS

La piel se obtuvo de tejidos que se descartaronde procedimientos quirrgicos

Cumpli con aprobaciones institucionales en laUniversidad de Miami. Human subject researchoffice

No se requiri consentimiento informado.


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MATERIALES Y MTODOS

INMUNOCITOQUMICA

Se obtuvieron las imgenes, por cmaras ymicroscopios especializados


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MATERIALES Y MTODOS

WESTERN BLOTS E INMUNOPRECIPITADOS


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MATERIALES Y MTODOS


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RESULTADOS

PRIMER PASOdeterminar la localizacin de GR en losqueratinocitos Se trataron con DEX y AClocalizacin celular

A travs de la inmunohistoqumica AC especial -cateninmarcar la membrana plasmtica

Se encontr GR en el citoplasma y en el ncleo de losqueratinocitos (pequea fraccin en la membranaplasmtica)

Se encontr una localizacin conjunta con -catenin

SUGIERE GR estn asociados con ligandos adherentes(AJ)


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Figure 1. Co-localization of the GR and -catenin to the plasma membrane of

keratinocytes.

Inmunofluorescenciaen los queratinocitos:muestra la lozalizacinconjunta de GR y -

catenin en lamembrana plasmtica.Verde: GRRojo: -cateninAmarillo: fusin


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RESULTADOS

SEGUNDO PASO se realiz fraccionamiento celular yWestern Blot: se descubri la presencia de GR en varioscompartimientos celulares

Se comprob la pureza de las fracciones: H3 se encontr slo en el ncleo

IkBA se encontr slo en el citoplasma (NFkB)

Se encontr GR en los tres compartimientos


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RESULTADOS

TERCER PASOinmunoprecipitacin CONJUNTA: Para probar las interacciones GR y AJ (-catenin)

Se utilizaron AC especficos GR Para destruir las comunicaciones entre protenas de GR y la

fraccin membranosa

Se consigui GR adherido a -catenin


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RESULTADOS

CONCLUSION INICIAL RECEPTORES DE LOS GLUCOCORTICOIDES

LOCALIZADOS EN LA MEMBRANA PLASMTICA DE LOS

QUERTINOCITOS (COMO UN ELEMENTO DE LOSLIGANDOS ADHERENTES) ESTAN ASOCIACIADOS CON -CATENIN


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DISCUSIN

Primera evidencia de localizacin de GR en lamembrana plasmtica de los queratinocitos Descubrir nuevas vas de sealizacin de los

glucocorticoides en la piel

Importante para comprender los rpidos efectos delos glucocorticoides

Esta revisin concuerda con estudios previosdonde los GR se encontraban en el citoplasma y elncleo


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DISCUSIN

En la ausencia de glucocorticoides hay sntesis decortisol en los queratinocitos

En ausencia de terapia esteroidea persisten fraccionesdel receptor en el ncleo y membrana plasmtica loque media efecto GENMICO Y NO GENMICOrespectivamente


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DISCUSIN

La presencia de GR en la membrana plasmtica asociadaa -catenin se mantiene gracias a los ligandos

Tratamiento esteroideos aumentan la asociacin con -

catenin en la membrana plasmtica indicando que laterapia, cambia el complejo GR--catenin

INTERROGANTE son iguales los GR en la membrana

que en el citoplasma y ncleo

IMPORTANTE paraterapias esteroideas prximas y sus efectos secundarias


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DISCUSIN

Existe otro componente catenin otro componente de AJ

Acta como corepresor de GR mediando regulacin delos queratinocitos, en la curacin de las heridas

Se ha mostrado recientemente que la sntesis decolesterol participa en las sealizaciones mediadas porglucocorticoides en la epidermis, revirtiendo la inhibicinde la curacin de las heridas

PRXIMAS INVESTIGACIONES Identificar el rol de los efectos NO GENMICOS de los GR

en condiciones dermatolgicas como psoriasis y heridascrnicas


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CONCLUSIN

LA LOCALIZACIN DE GR EN LA MEMBRANA PLASMTICA

ES UNA NOVEDAD Y TIENE IMPLICACIONESSIGNIFICANTIVAS EN EL ENTENDIMIENTO DE LOSMECANISMOS POR LOS CUALES EJERCE SUS EFECTOSNO GENMICOS EN LA PIEL Y EL POTENCIAL DETRATAMIENTO PARA VARIAS PATOLOGAS

DERMATOLGICAS


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