FAVV BESTUUR LABORATORIA / AFSCA ADMINISTRATION DES … · 2014-07-24 · FAVV – BESTUUR...

FAVV – BESTUUR LABORATORIA / AFSCA – ADMINISTRATION DES LABORATOIRE

LABO: FLVVT SECTIE - SECTION: Toevoegingsmiddelen

LAB 00 P 180 F 002 Template validatieplan – Modèle plan de validation v.01 2012-03-15 1/15

VALIDATIEPLAN – PLAN DE VALIDATION

Analysemethode

Méthode d’analyse

I-MET-FLVVT-023

Screening van diergeneesmiddelen in dierenvoeders (Chemische toevoegingsmiddelen)

Screening pour médicaments dans les aliments pour animaux (Détection d'additifs

chimiques)

Techniek

Technique

UPLC

UPLC

Matrix / matrixgroep

Matrice / Groupe de

matrices

Dierenvoeders

Aliments pour animaux

Type validatie

Type de validation

Totaal – Totale

Secundair – Secondaire

Mini-validatie – validation minimale

Verantwoordelijke

(Naam en functie)

Responsable

(Nom et fonction)

Mieke Vanbrabant

Verantwoordelijke sectie toevoegingsmiddelen

Responsable section additifs

Opgesteld door

Rédaction par

Naam – Nom: Mieke Vanbrabant

Functie - Fonction: Verantwoordelijke sectie

toevoegingsmiddelen

Datum - Date: Nvt

Handtekeningen – Signatures:

(get.)

Methode goedgekeurd en

geschikt bevonden door

Méthode approuvée et jugé

convenable pour la routine

par

Naam – Nom: Mandy Lekens

Functie - Fonction: Labomanager

Datum - Date: 2009-04

Handtekeningen - Signatures:

(get.)



LAB 00 P 180 F 002 Template validatieplan – Modèle plan de validation v.01 2012-03-15 2/15

Stap – Phase 1: Bepaling van het toepassingsgebied – Déterminer le champs d’application De methode moet geschikt zijn voor de kwalitatieve screening van diergeneesmiddelen (carbadox,

olaquindox, dimetridazol, ronidazol, ipronidazol, sulfadimidine, metichloorpindol en arprinocid) in

dierenvoeders (aanvullende diervoeders, volledige diervoeders en voormengsels). De detectiegrens wordt

zo laag mogelijk gekozen.

Stap – Phase 2: Doel en statuut van de analysemethode – Le but et status de la méthode d’analyse

Kwalitatieve screeningsmethode, interne (in-house) methode.

Stap – Phase 3: Keuze validatieparameters – Choisir les paramètres à valider

Voor deze methode dienen minimaal de volgende prestatiekenmerken te worden bepaald: specificiteit /

selectiviteit, toepasbaarheid/robuustheid/stabiliteit en detectievermogen CCβ.

Stap – Phase 4: Externe eisen voor validatieparameters – Des exigences externes pour les paramètres à valider

Nvt.

Stap – Phase 5: Keuze van de monsters – Le choix d’échantillons

De geschiktheid van de methode zal getest worden op (gedopeerde) routinemonsters die een grote

gelijkenis met de meest voorkomende praktijkmonsters vertonen.



LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport – Modèle rapport de validation v.01 2012-03-15 3/15

VALIDATIERAPPORT – RAPPORT DE VALIDATION

Analysemethode


I-MET-FLVVT-023



chimiques)

Techniek

Technique

UPLC

UPLC


Matrice / Groupe de

matrices

Dierenvoeders


Datum laatste

aanpassing / Date de

la dernière adaption

2013/11/29




Overzicht van de prestatiekenmerken:

o Zie paragraaf 3

De validatie voldoet aan procedure LAB 00 P180

De laboratoria die deze methode willen overnemen, moeten aantonen dat de criteria hieronder aangegeven voldaan zijn:

o Zie paragraaf 3 (CCβ maximaal 3 mg/kg, met spectrumidentificatie en intralaboratorium-

reproduceerbaarheid bij 3 mg/kg < 15%)

Historiek validatie

Versie Herziening door/datum Reden van herziening Wijzigingen

01 04/2009, M. Lekens Opsteller initiële versie Volledige tekst

01 11/2010, M. Vanbrabant Detecteerbaarheid lager dan 3

mg/kg nagaan

Toevoeging validatiegegevens

01 10/2011, M. Vanbrabant Validatie houdbaarheid

standaarden (interne audit

2011/13)

Toevoeging validatiegegevens

02 11/2013, M. Vanbrabant Voorbereiding publicatie Toevoeging validatieplan en

overzicht validatierapport +

historiek




VALIDATIERAPPORT – RAPPORT DE VALIDATION

Analysemethode


I-MET-FLVVT-023



chimiques)

Techniek

Technique

UPLC

UPLC


Matrice / Groupe de

matrices

Dierenvoeders


Type validatie

Type de validation

Totaal – Totale

Secundair – Secondaire

Mini-validatie – validation minimale

Verantwoordelijke

(Naam en functie)

Responsable

(Nom et fonction)

Mieke Vanbrabant

Verantwoordelijke sectie toevoegingsmiddelen

Responsable section additifs

Opgesteld door

Rédaction par

Naam – Nom: Mieke Vanbrabant

Functie - Fonction: Verantwoordelijke sectie

toevoegingsmiddelen

Datum - Date: 2013-11-29

Handtekeningen – Signatures:

(get.)

Medewerkers

(Naam en functie)

Collaborateurs

(Nom et fonction)

Raymond Van Sandt: laborant

Martine Bral: laborant

Annemie Voets: laborant

Periode van validatie

Période de validation

Start - Début: 2009-04-01

Einde - Fin: 2011-10-30

Methode goedgekeurd en

geschikt bevonden door

Méthode approuvée et jugé

convenable pour la routine

par

Naam – Nom: Mandy Lekens

Functie - Fonction: Labomanager

Datum - Date: 2013-12-06

Handtekeningen - Signatures:

(get.)

Hierna volgt een beschrijving van de resultaten van het validatieonderzoek zoals aangegeven in stap 8 van de procedure

LAB 00 P 180.

Ce qui suit est une description des résultats de l'étude de validation comme indiqué dans l'étape 8 de la procédure LAB

P 00 180.




SAMENVATTING VALIDATIEGEGEVENS – RÉSUMÉ DES DONNÉES DE VALIDATION........................ 7

1 DOEL EN TOEPASSINGSGEBIED ........................................................................................................... 7

2 ANALYSEMETHODE EN ANALISTEN.................................................................................................... 7

3 PRESTATIEKENMERKEN ....................................................................................................................... 7

3.1 SELECTIVITEIT / SPECIFICITEIT ................................................................................................................. 7

3.1.1 Selectiviteit / specificiteit op matrixniveau ........................................................................................ 8

3.1.1.1 Bepaling “match angle” .............................................................................................................................. 9

3.1.2 Selectiviteit / specificiteit op analytniveau ....................................................................................... 10

3.1.2.1 Criteria voor door de methode opgespoorde componenten ............................................................................ 10

3.1.2.2 Mogelijk interfererende analyten ............................................................................................................... 11

3.2 TOEPASBAARHEID / ROBUUSTHEID / STABILITEIT ..................................................................................... 11

3.2.1 Houdbaarheid standaarden (2011)................................................................................................. 11

3.3 DETECTIEVERMOGEN CC .................................................................................................................... 12

3.3.1 Niveau 3 mg/kg (2009) .................................................................................................................. 12

3.3.2 Niveau lager dan 3 mg/kg (2010) ................................................................................................... 13

3.4 PRECISIE .............................................................................................................................................. 13

3.4.1 Intralaboratoriumreproduceerbaarheid (niveau 3 mg/kg) ................................................................ 13

Tabel 1. Overzicht van de geanalyseerde matrices .................................................................................................. 8

Tabel 2. Overzicht monsters ter bepaling “match angle” ......................................................................................... 9

Tabel 3. Overzicht van de geanalyseerde sulfonamiden ......................................................................................... 11

Tabel 4. Houdbaarheid standaardoplossingen ...................................................................................................... 12

Tabel 5. Intralaboratoriumreproduceerbaarheid (3 mg/kg) .................................................................................... 14




Samenvatting validatiegegevens – Résumé des données de validation

1 Doel en toepassingsgebied

Kwalitatieve screening van de volgende diergeneesmiddelen in dierenvoeders (aanvullende diervoeders,

volledige diervoeders en voormengsels):

Carbadox (CAR) Ipronidazol (IPRO)

Olaquindox (OLA) Sulfadimidine (SULFA)

Dimetridazol (DIM) Metichloorpindol (CLOP)

Ronidazol (RON) Arprinocid (ARPR)

2 Analysemethode en analisten

I-MET-FLVVT-023, versie 01, 02 en 03.

Het validatieonderzoek werd uitgevoerd onder toezicht van sectieverantwoordelijken Mandy Lekens (2009)

en Mieke Vanbrabant (2010-2011) door de volgende analisten:

Martine Bral (MB)

Raymond Van Sandt (RVS)

Annemie Voets (AV)

3 Prestatiekenmerken

Ruwe gegevens: Zie bijlage.

3.1 Selectiviteit / specificiteit

Voor de gebruikte analysemethode moet worden nagegaan of onder de gegeven proefomstandigheden

eventuele matrixcomponenten de bepaling kunnen beïnvloeden en of er een onderscheid kan worden

gemaakt tussen de analyt en mogelijk interfererende stoffen. De specificiteit/selectiviteit moet bijgevolg

worden bepaald worden op matrixniveau en op analytniveau.

Voor de bepaling van de selectiviteit/specificiteit werden ten minste 20 blanco voedermonsters geanalyseerd

en vervolgens na dopering op het betrokken concentratieniveau (3 mg/kg) opnieuw geanalyseerd.




3.1.1 Selectiviteit / specificiteit op matrixniveau

De matrix dierenvoeder is een zeer complexe en gevarieerde matrix, waarvan de samenstelling (en dus in

analytisch opzicht ook de mogelijk voorkomende interferentie) verschilt naargelang het toepassingsgebied

van het dierenvoeder. Hierom werd voor de validatie getracht om zoveel mogelijk variaties aan te brengen in

de matrix door gebruik te maken van zowel volledige als aanvullende dierenvoeders, en van dierenvoeders

bestemd voor varkens, pluimvee, schapen, runderen en paarden.

De 24 monsters werden in eerste instantie geanalyseerd als blanco monsters, waarna ze werden gedopeerd

op 3 mg/kg en opnieuw werden geanalyseerd. De analyse werd uitgevoerd door Martine Bral (MB) of

Raymond Van Sandt (RVS).

Tabel 1. Overzicht van de geanalyseerde matrices

Monster Datum uitvoering Uitvoerder Matrix Soort

09140627 14/04/2009 MB Volledig dierenvoeder Niet herkauwers Varkens Biggen

09140821 14/04/2009 MB Volledig dierenvoeder Niet herkauwers Pluimvee Mestkippen

09141023 14/04/2009 MB Volledig dierenvoeder Niet herkauwers Pluimvee Poeljen bestemd voor de leg


09141015 14/04/2009 MB Aanvullend dierenvoeder Herkauwers Schapen Schapen

09150017 14/04/2009 MB Volledig dierenvoeder Niet herkauwers Pluimvee Legkippen


09150072 14/04/2009 MB Volledig dierenvoeder Niet herkauwers Pluimvee Poeljen bestemd voor de leg

09130189 15/04/2009 RVS Aanvullend dierenvoeder Herkauwers Runderen Melkkoeien

09130665 15/04/2009 RVS Volledig dierenvoeder Herkauwers Runderen Melkkoeien

09130702 15/04/2009 RVS Volledig dierenvoeder Niet herkauwers Varkens Vleesvarkens

09131019 15/04/2009 RVS Aanvullend dierenvoeder Niet herkauwers Pluimvee Poeljen bestemd voor de leg

09131114 15/04/2009 RVS Volledig dierenvoeder Niet herkauwers Pluimvee Poeljen bestemd voor de leg

09131597 15/04/2009 RVS Volledig dierenvoeder Niet herkauwers Varkens Zeugen

09140299 15/04/2009 RVS Volledig dierenvoeder Niet herkauwers Pluimvee Poeljen bestemd voor de leg

09140461 15/04/2009 RVS Volledig dierenvoeder Niet herkauwers Varkens Biggen


09150770 16/04/2009 MB Volledig dierenvoeder Niet herkauwers Varkens Biggen

09150857 16/04/2009 MB Volledig dierenvoeder Niet herkauwers Kalveren


09151081 16/04/2009 MB Volledig dierenvoeder Niet herkauwers Pluimvee Legkippen

09151502 16/04/2009 MB Aanvullend dierenvoeder Niet herkauwers Kalveren


09151664 16/04/2009 MB Aanvullend dierenvoeder Niet herkauwers Paarden Paarden

Voor elk van de monsters vermeld in tabel 1 kon de conformiteit van de blanco monsters aangetoond

worden ten opzichte van de gedopeerde monsters aan de hand van de criteria zoals beschreven in 3.1.2.




3.1.1.1 Bepaling “match angle”

Gezien bij de resultaatverwerking gebruik gemaakt wordt van een softwarematige “library searching” en

gezien de absorptiespectra van de analyten mogelijk beïnvloed kunnen worden door de samenstelling van

de matrix, werd voor een aantal verschillende matrices de “match angle” van de verschillende componenten

bij 264 nm bekeken. Deze matchfactor is een maat voor het verschil in spectrumvorm tussen een onbekend

spectrum en het standaardspectrum van de bibliotheek en wordt door de software uitgedrukt als een “match

angle”. Deze “match angle” kan een waarde aannemen tussen 0 graden (perfecte match) en 90 graden

(totaal verschillende spectra), dus hoe lager de “match angle”, hoe beter de “match”.

Tabel 2. Overzicht monsters ter bepaling “match angle”

Monster Datum

uitvoering Matrix Soort

Match Angle

OLA CLOP RON DIM CAR SULFA IPRO ARPR

09140627 14/04/2009 Volledig

dierenvoeder

Niet

herkauwers Varkens Biggen

5,492 1,668 0,258 0,697 0,715 0,667 1,636 2,054

09140821 14/04/2009 Volledig

dierenvoeder

Niet

herkauwers Pluimvee Mestkippen

4,046 1,730 0,328 1,391 0,608 0,469 1,196 2,768

09141023 14/04/2009 Volledig

dierenvoeder

Niet

herkauwers Pluimvee Poeljen (leg)

3,233 1,119 0,264 0,471 0,771 0,560 1,452 1,417

09141015 14/04/2009 Aanvullend

dierenvoeder Herkauwers Schapen Schapen

4,161 1,004 0,617 1,261 0,767 0,63 1,398 1,377

09150017 14/04/2009 Volledig

dierenvoeder

Niet

herkauwers Pluimvee Legkippen

3,508 0,962 0,239 0,559 0,724 0,656 1,395 1,869

09130189 15/04/2009 Aanvullend

dierenvoeder Herkauwers Runderen Melkkoeien

2,937 2,287 0,223 0,554 0,501 1,242 0,989 1,052

09130665 15/04/2009 Volledig

dierenvoeder Herkauwers Runderen Melkkoeien

2,070 1,493 0,337 0,752 1,020 1,096 0,926 1,510

09130702 15/04/2009 Volledig

dierenvoeder

Niet

herkauwers Varkens Vleesvarkens

3,328 2,979 0,244 0,855 0,477 0,544 0,836 4,520

09131019 15/04/2009 Aanvullend

dierenvoeder

Niet

herkauwers Pluimvee Poeljen (leg)

2,396 3,311 0,251 0,335 0,565 0,722 0,877 6,256

09131597 15/04/2009 Volledig

dierenvoeder

Niet

herkauwers Varkens Zeugen

3,107 2,040 0,203 0,271 0,541 0,606 0,920 3,216

09150857 16/04/2009 Volledig

dierenvoeder

Niet

herkauwers Kalveren

3,347 3,568 1,037 0,270 0,539 0,865 1,045 3,987

09151502 16/04/2009 Aanvullend

dierenvoeder

Niet

herkauwers Kalveren

5,089 8,146 0,382 0,528 0,621 2.774 1,116 3,638

09151664 16/04/2009 Aanvullend

dierenvoeder

Niet

herkauwers Paarden Paarden

3,430 5,101 0,238 0,300 0,532 0,669 0,725 3,013

Maximale matchfactor 5,492 8,146 1,037 1,391 1,020 1,242 1,636 6,256




Voor de verschillende monsters weergegeven in tabel 2 werden per component verschillende “match angles”

waargenomen. Een overzicht van de grootst waargenomen “match angle” wordt voor elke analyt hieronder

weergegeven:

Maximale “match angle” voor elke analyt uit tabel 2

OLA CLOP RON DIM CAR SULFA IPRO ARPR

5,492 8,146 1,037 1,391 1,020 1,242 1,636 6,256

Als “worst case” wordt in de methode een kritieke “match angle” van 10 vermeld.

3.1.2 Selectiviteit / specificiteit op analytniveau

De selectiviteit en/of specificiteit op analytniveau wordt bewezen aan de hand van de conformiteit van de

blanco monsters ten opzichte van de overeenkomstige gedopeerde blanco monsters.

3.1.2.1 Criteria voor door de methode opgespoorde componenten

Voor een kwalitatieve bevestigingsmethode moeten de analyten teruggevonden en geïdentificeerd worden

volgens de volgende criteria:

1. Hun retentietijd mag maximaal 5% afwijken van die van de overeenkomstige standaarden

2. De absorptiemaxima in het spectrum van de analyt mogen maximaal 2 nm (dus range van 4 nm)

afwijken van de absorptiemaxima van de overeenkomstige standaard.

Deze gegevens werden ingesteld in de verwerkingsmethode van de software zodanig dat enkel pieken die

voldoen aan deze criteria door de software worden geïdentificeerd.

Bijkomend is de analysemethode zo opgesteld dat er 2 soorten datagegevens geregistreerd en door de

software geïnterpreteerd worden:

1. Maximumplot in de range van 225-400 nm

2. Specifieke metingen bij 264 nm, 310 nm en 375 nm

Deze PDA gegevens laten toe om bij een gegeven retentietijd het volledige spectrum van de piek te bekijken

en daarnaast de karakteristieke verhoudingen van de signalen bij de verschillende golflengten te

controleren, wat kan dienen als bijkomend criterium voor identificatie.




3.1.2.2 Mogelijk interfererende analyten

In de analysemethode wordt er in eerste instantie gezocht naar zeer specifieke diergeneesmiddelen,

waardoor enkel zeer gelijkaardige componenten eventueel interferenties zouden kunnen veroorzaken.

Gezien er maar één component van de groep sulfonamiden wordt toegevoegd aan het controlemonster, is

dit de meest waarschijnlijke bron van mogelijke fouten.

Om dit verder te onderzoeken werd aan een representatief blanco mengmonster een mengsel van

sulfonamiden toegevoegd, waarna zowel retentietijd (RT) als spectrum werden bekeken. Op basis van deze

gegevens werd een aparte bibliotheek opgesteld die bij twijfel kan geraadpleegd worden.

De analyse werd uitgevoerd door Martine Bral op 17/04/2009.

Tabel 3. Overzicht van de geanalyseerde sulfonamiden

Component Afkorting RT max

Sulfadiazine SDZ 1,850 266,2

Sulfathiazole STZ 2,348 284,7

Sulfamerazine SMZ 2,814 265,0

Sulfadimidine SDM 4,228 264,4

Sulfamethoxypyridazine SMPZ 4,943 263,2

Sulfaquinoxaline SQ 9,154 248,5

Uit de analyseresultaten blijkt dat de RT van dimetridazol vergelijkbaar is met die van sulfathiazole, maar dat

er een onderscheid tussen de twee componenten kan gemaakt worden op basis van hun spectrum ( max

STZ = 284,7 en max DIM = 319,2).

3.2 Toepasbaarheid / robuustheid / stabiliteit

3.2.1 Houdbaarheid standaarden (2011)

De houdbaarheid van de standaard stockoplossingen (W0400 t.e.m W0407) werd vastgesteld op 1 jaar en

deze van de standaard werkoplossing (W0411) werd vastgesteld op 3 maand, beide bewaard in de koelkast

bij een temperatuur van 4±4°C. Hiertoe werd de standaardwerkoplossing gedurende 1 jaar 4 maal

aangemaakt uit dezelfde standaard stockoplossingen en werd de bekomen piekoppervlakte voor

sulfadimidine genoteerd (zie tabel 4). De bekomen resultaten tonen aan dat er geen significante verschillen

bestaan tussen de gemeten waarden gedurende 3 maanden en tussen de 4 werkoplossingen aangemaakt

uit dezelfde standaardoplossingen en alle resultaten voldeden aan de recovery-aanvaardingscriteria (70% -

110%) (13/10/2011, M. Vanbrabant).




Tabel 4. Houdbaarheid standaardoplossingen

Datum Opp. STD2

(SDM) Datum Opp. STD2



(SDM)

09/06/2010 46772 13/09/2010 49025 03/12/2010 50215 02/03/2011 51057

10/06/2010 44665 14/09/2010 49030 06/12/2010 52107 08/03/2011 53954

16/06/2010 51095 23/09/2010 51165 13/12/2010 54859 16/03/2011 50997

21/06/2010 51077 29/09/2010 52408 23/12/2010 51147 21/03/2011 51829

25/06/2010 49038 04/10/2010 52235 11/01/2011 51475 29/03/2011 48195

05/07/2010 54023 07/10/2010 51718 17/01/2011 53656 04/04/2011 53500

08/07/2010 55170 12/10/2010 52776 21/01/2011 54213 14/04/2011 50113

16/07/2010 52074 14/10/2010 48798 31/01/2011 55940 19/04/2011 53427

26/07/2010 51259 22/10/2010 52492 07/02/2011 55466 29/04/2011 50981

29/07/2010 50895 27/10/2010 55193 11/02/2011 53785 04/05/2011 48642

04/08/2010 53599 03/11/2010 52009 17/02/2011 55501 09/05/2011 53616

05/08/2010 52570 05/11/2010 52438 21/02/2011 57651 12/05/2011 49298

09/08/2010 52906 16/11/2010 54708 24/02/2011 48935 19/05/2011 50220

19/08/2010 52740 17/11/2010 51917

30/05/2011 51355

26/08/2010 52505 19/11/2010 52301

31/08/2010 53639 22/11/2010 52699

26/11/2010 50768

Gemiddelde 51502 Gemiddelde 51864 Gemiddelde 53458 Gemiddelde 51227

STDEV 2717 STDEV 1755 STDEV 2528 STDEV 1871

RSD (%) 5,28 RSD (%) 3,38 RSD (%) 4,73 RSD (%) 3,65

3.3 Detectievermogen CC

CCβ is de kleinste hoeveelheid van de stof die met een foutkans van β in een monster kan worden

aangetoond en geïdentificeerd en is gelijk aan de laagste concentratie waarbij een methode met een

statistische zekerheid van 95 % kan aantonen dat een monster werkelijk verontreinigd is (in geval van niet

toegelaten stoffen).

De methode moet bij het betrokken concentratieniveau een percentage fout-conforme uitslagen < 5% (-

fout) hebben i.e. indien 20 blanco monsters worden belast op het betrokken concentratieniveau moeten de

analyten in minstens 19 monsters kunnen worden geïdentificeerd.

3.3.1 Niveau 3 mg/kg (2009)

De monsters vermeld in tabel 1 werden in eerste instantie geanalyseerd als blanco monsters, waarna ze

werden gedopeerd op 3 mg/kg en opnieuw werden geanalyseerd. Gezien voor alle monsters de analyten

konden worden teruggevonden wordt aangenomen dat CC < CC < 3 mg/kg.




De beslissingsgrens CC is de minimale waarde van waaraf met een foutkans kan worden besloten dat

het monster niet-conform is.

CC zal verder uitgebouwd worden door het laten meelopen van belaste monsters in de routineanalyses

(langetermijnsvalidatie) en zal worden opgevolgd worden aan de hand van een controlekaart.

3.3.2 Niveau lager dan 3 mg/kg (2010)

Een blanco monster (dierenvoeder) werd gespiked met de 8 verboden geneesmiddelen (carbadox,

olaquindox, dimetridazol, ronidazol, ipronidazol, sulfadimidine, metichloorpindol en arprinocid ) met een

gehalte van 1 mg/kg en 2 mg/kg en vervolgens geanalyseerd volgens methode I-MET-FLVVT-023. De

analyses werden uitgevoerd op 19/11/2010 door Martine Bral en Annemie Voets.

Uit de chromatogrammen en overeenkomstige DAD-spectra blijkt het volgende:

Voor de spikes van 2 mg/kg worden alle stoffen gedetecteerd, de pieken zijn duidelijk zichtbaar en

worden bevestigd op basis van retentietijd en de overeenkomstige spectra in de bibliotheek. De

kwantitatieve resultaten liggen tussen 1,857 mg/kg en 2,599 mg/kg.

Voor de spikes van 1 mg/kg worden eveneens alle stoffen gedetecteerd, de pieken zijn duidelijk

zichtbaar en worden bevestigd op basis van retentietijd en de overeenkomstige spectra in de

bibliotheek. De kwantitatieve resultaten schommelen rond 1 mg/kg. Enkel de bepaling van

ipronidazol kan een probleem vormen, maar deze stof is detecteerbaar via een specifiek spectrum

op meerdere golflengten en de aanwezigheid ervan kan op die manier bevestigd worden.

Indien er in een te analyseren dierenvoeder een hoeveelheid lager dan 3 mg/kg zou aanwezig zijn van één

van de 8 verboden geneesmiddelen, zou er wel degelijk een piek met overeenkomstig spectrum

gedetecteerd worden. Aangezien het hier een screeningsmethode betreft, zal een nauwkeurige vaststelling

van het gehalte dienen te gebeuren met een meer specifieke analysemethode voor die component.

Totdat er meer gegevens beschikbaar zijn over de detectie en identificatie op een niveau van 1 en 2 mg/kg,

wordt CCβ voor alle componenten voorlopig vastgelegd op 3 mg/kg.

3.4 Precisie

3.4.1 Intralaboratoriumreproduceerbaarheid (niveau 3 mg/kg)

Voor de bepaling van de precisie dient de intralaboratoriumreproduceerbaarheid (%RSDRw) bepaald te

worden en lager dan of gelijk zijn aan de maximaal toegelaten waarde welke volgt uit de vergelijking van

Horwitz:




max. %RSDRw= VC = 2(1-0.5logC)

Met:

VC = variatiecoëfficiënt (onder reproduceerbaarheidscondities)

C = de concentratie uitgedrukt als een macht van 10 (bijvoorbeeld 1 mg/g = 10-3

)

De reproduceerbaarheid werd bepaald op een niveau van 3 mg/kg aan de hand van gedopeerde blanco

monsters. Hiertoe werden de monsters vermeld in tabel 1 geanalyseerd en gekwantificeerd. Vervolgens

werd voor elke component de gemiddelde gemeten concentratie, de standaardafwijking en de %RSDRw

berekend. Deze %RSDRw voldeed voor alle componenten aan de maximaal toegelaten %RSDRw waarde

volgens Horwitz, welke voor dopering op 3 mg/kg 13,56% bedraagt.

Tabel 5. Intralaboratoriumreproduceerbaarheid (3 mg/kg)

Monster Datum

uitvoering Uitv. OLA CLOP RON DIM CAR SULFA IPRO ARPR

09140627 14/04/2009 MB 3,293 2,988 2,971 2,803 3,074 2,913 2,734 2,981

09140821 14/04/2009 MB 2,792 2,929 2,941 3,273 2,876 2,936 3,042 3,026

09141023 14/04/2009 MB 2,863 3,003 2,968 2,875 2,983 2,963 2,502 3,089

09140886 14/04/2009 MB 2,488 2,981 2,898 2,951 2,991 2,968 2,214 2,919

09141015 14/04/2009 MB 2,892 3,062 3,239 3,328 3,035 2,981 3,117 3,022

09150017 14/04/2009 MB 2,792 2,984 2,998 2,871 3,001 2,953 2,993 3,043

09150063 14/04/2009 MB 2,686 2,967 3,276 3,007 3,026 2,956 2,943 3,046

09150072 14/04/2009 MB 2,686 2,953 2,995 3,269 2,975 2,963 2,250 3,058

09130189 15/04/2009 RVS 3,238 3,065 3,013 3,098 2,889 3,026 2,324 3,024

09130665 15/04/2009 RVS 2,915 2,840 3,029 3,155 3,117 2,959 2,409 3,100

09130702 15/04/2009 RVS 2,865 2,877 2,851 2,774 2,911 2,964 2,890 3,111

09131019 15/04/2009 RVS 2,547 2,969 3,098 3,283 2,964 3,018 1,969 2,697

09131114 15/04/2009 RVS 2,684 2,942 3,116 3,200 3,009 3,013 2,431 3,114

09131597 15/04/2009 RVS 2,938 2,943 3,150 3,008 2,953 2,966 2,252 3,042

09140299 15/04/2009 RVS 2,778 2,823 2,940 3,034 2,921 2,946 2,712 3,021

09140461 15/04/2009 RVS 2,531 2,797 3,105 2,542 2,918 2,947 2,400 3,002

09150596 16/04/2009 MB 1,776 2,482 2,951 2,593 2,448 2,566 2,476 2,622

09150770 16/04/2009 MB 2,691 2,643 3,013 3,075 2,501 2,618 2,137 2,598

09150857 16/04/2009 MB 2,744 2,411 2,775 2,509 2,468 2,591 2,300 2,663

09151047 16/04/2009 MB 2,791 2,575 2,654 2,693 2,657 2,693 2,356 2,741

09151502 16/04/2009 MB 2,216 2,437 2,655 2,425 2,478 2,644 2,378 2,610

09151504 16/04/2009 MB 2,199 2,280 2,067 2,517 2,495 2,578 2,278 2,594

09151664 16/04/2009 MB 2,848 2,602 2,724 2,713 2,446 2,600 2,377 2,298

Gemiddelde 2,71 2,81 2,93 2,91 2,83 2,86 2,50 2,89

STDEV 0,33 0,23 0,25 0,28 0,23 0,17 0,31 0,23

RSDRw (%) 12,01 8,30 8,49 9,60 8,29 5,95 12,59 7,95

FAVV BESTUUR LABORATORIA / AFSCA ADMINISTRATION DES … · 2014-07-24 · FAVV – BESTUUR...

Documents

Transcript of FAVV BESTUUR LABORATORIA / AFSCA ADMINISTRATION DES … · 2014-07-24 · FAVV – BESTUUR...