Division conforme : mitose variation de la quantité d’ADN chromosomes caryotypes
Extracció d’ADN
description
Transcript of Extracció d’ADN
![Page 1: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/1.jpg)
1
Extracció d’ADN
![Page 2: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/2.jpg)
2
PRÀCTICA DE L’EXTRACCIÓ D’ADN
![Page 3: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/3.jpg)
3
OBJECTIU Mitjançant una tècnica molt senzilla
podem extraure ADN de teixit animal i comprovar la seva estructura filamentosa.
L’extracció es basa en el fet que els ions salins són atrets cap a les càrregues negatives de l’ADN permetent la seva dissolució i posterior extracció.
![Page 4: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/4.jpg)
4
MATERIAL
Tisores Homogeneïtzador (batedora o morter) Tela per filtrar (Gasa espessa) Vareta de vidre Vas de precipitats Pipeta Tub d’assaig
![Page 5: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/5.jpg)
5
PRODUCTES QUÍMICS
Detergent líquid comercial NaCl 2M Alcohol etílic de 96º Aigua destil·lada
![Page 6: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/6.jpg)
6
PRODUCTE NATURAL
20g de timus de vedella
![Page 7: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/7.jpg)
7
PROTOCOL
Passos 1r
2n
3r
4t
Triturar els 20g de timus amb 100mld’aigua a la batedora fins obtenir unamassa homogènia i semilíquida.Deixar reposar, que sedimentin les partícules més grans.Amb les gases o tela filtrar repetides vegades el sobrenadant que no quedinpartícules sòlides.
Afegir un volum igual de NaCl 2M per tal de produir un mitjà hipertònic. Afegir sabó líquid diluït 6ml i barrejar amb la vareta de vidre.
Amb la pipeta afegir lliscant per la paret del tub d’assaig 60ml d’alcohol.
![Page 8: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/8.jpg)
8
LA POSADA EN MARXA DE LA CLASSE PRÀCTICA
VEGEM-HO EN IMATGES
![Page 9: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/9.jpg)
9
VEGEM-HO EN IMATGES
![Page 10: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/10.jpg)
10
![Page 11: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/11.jpg)
11
![Page 12: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/12.jpg)
12
![Page 13: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/13.jpg)
13
![Page 14: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/14.jpg)
14
![Page 15: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/15.jpg)
15
![Page 16: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/16.jpg)
16
![Page 17: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/17.jpg)
17
![Page 18: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/18.jpg)
18
![Page 19: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/19.jpg)
19
1
En la tasca de filtratge del sobrenadant el que estem fent és retirar les partícules sòlides: fibres conjuntives, cèl·lules musculars, vasos sanguinis, etc...
QUÈ HA SUCCEÏT A CADASCUN DELS PASSOS?
![Page 20: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/20.jpg)
20
2 Amb la solució de NaCl 1M el que aconseguim és crear un medi hipertònic on farà que s’hi produeixi la ruptura dels embolcalls nuclears.
QUÈ HA SUCCEÏT A CADASCUN DELS PASSOS?
![Page 21: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/21.jpg)
21
3Amb el sabó líquid diluït alliberem el DNA de les proteïnes ja que el detergent forma un complex amb aquestes.
QUÈ HA SUCCEÏT A CADASCUN DELS PASSOS?
![Page 22: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/22.jpg)
22
Quan per les parets afegim l’alcohol fred creem dues capes i a la interfase, l’ADN es desenrotlla i precipita distingint-se un embull de fibres blanques gelatinoses.
QUÈ HA SUCCEÏT A CADASCUN DELS PASSOS?
4
![Page 23: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/23.jpg)
23
Amb la vareta dipositem alguns d’aquests filaments sobre un portaobjectes i afegim unes gotes d’orceïna acètica i es deixa 8 minuts que es tenyeixin, rentem amb aigua destil·lada, muntem amb gota de glicerina i cubre i ho portem a observar al microscòpi.
COMPLETEM LA PRÀCTICA AMB UNA PREPARACIÓ
![Page 24: Extracció d’ADN](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062517/56813c87550346895da627b6/html5/thumbnails/24.jpg)
24
REALITZACIÓ:
DEPARTAMENT DE CIÈNCIES EXPERIMENTALS
Han participat en la realització de la pràctica:
Professors: Ignacio Pujals Gemma Balasch
Alumnes: Javier Bermudez Laia Forner Saman Iqbal