Presentacin de PowerPoint

UNIVERSIDAD TECNICA DE MANABI FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD - ESCUELA LAB. CLINICOAutores: ZAMORA ARONZAMBRANO JONATHANALVIA HENRYGUADALUPE CALDERONMURILLO OSCARBARREIRO HILLARY

CATEDRATICA: Dra. MAYRA PARRAGA

1SECUENCIACIN DE ADNEXPRESIN DE GENES CLONADOSDETECCION DE ACIDOS NUCLEICOS Y PROTENASAmplificacin de ADN con la reaccin en cadena de la polimerasa.

PALABRAS CALVESADNADN pPlimerasaClonacinGenPCRGLOSARIOSecuenciacin: accin de secuenciarPCR: reaccin en cadena de la polimerasa. Tcnica que amplifica segmentos especficos de ADN en un laboratorio.ADNc: (ADN complementario). es una hebra deADNde doble cadena una de las cuales constituye una secuencia totalmente complementaria del ARN mensajero a partir del cual se ha sintetizado.SECUENCIACION DE ADNLa clonacin molecular de un fragmento individual de ADN permite es aislamiento de las grandes cantidades de material gentico necesarias para su estudio detallado.

EXPRESIN DE GENES CLONADOSADEMS DE PERMITIR LA DETERMINACION DE LA SECUENCIA DE NUCLETIDOS DE LOS GENES, Y POR TANTO DE LA SECUENCIA DE AMINOCIDOS DE LAS PROTENAS CODIFICADAS, LA CLONACIN MOLECULAR HA PROPORCIONADO NUEVAS POSIBILIDADES EN LA OBTENCIN DE GRANDES CANTIDADES DE PROTENAS PARA SU CARACTERIZACIN ESTRUCTURAL Y FUNDIONAL.MUCHAS PROTENAS DE INTERS ESTN PRESENTES A MUY BAJA CONCENTRACIN EN CLULAS EUCARIOTICAS Y POR TANTO NO PUEDEN PURIFICARSE EN CANRIDADES SIGNIFICATUICAS POR TCNICAS BIOQUMICAS CONVENCIONALES.

DETECCIN DE CIDOS NUCLEICOS Y PROTENASEl advenimiento de la clonacin molecular ha permitido el aislamiento y caracterizacin de genes individuales procedentes de clulas eucariotas. La compresin del papel de los genes en el interior celular, sin embargo, requiere del anlisis de la organizacin intracelular y de la expresin de los genes individuales y de las protenas que codifican. En esta seccin, los procedimientos bsicos empleados para la deteccin de cidos nucleicos y protenas especficos son analizados. Estas tcnicas son importantes para un amplia variedad de estudios, incluyendo el mapeo de genes a cromosomas, el anlisis de la expresin gnica, la localizacin de protenas en rganos subcelulares.AMPLIFICACIN DE ADN CON LA REACCIN EN CADENA DE POLIMERASA (PCR)La clonacin molecular permite producir y aislar grandes cantidades de ADN. Ya que gracias al PCR que es una tcnica de biologa molecular se puede conseguir una gran amplificacin de fragmentos del ADN, multiplicarlo varias veces y obtener un resultado.

El material de partida puede ser un fragmento de ADN clonado o una mezcla de molculas de ADN.

A partir de esta mezcla es posible simplificar una regin especfica de ADN, siempre que se conozca la secuencia de nucletidos de dicha regin, para poder disear los cebadores que comiencen la sntesis de ADN.

La reaccion empieza calentando el ADN diana a altas temperaturas lo cual separa las hebras. Se desciende la temperatura para que los cebadores se emparejen con la secuencia complementaria de ADN.

La ADN polimerasa utiliza los cebadores para sintetizar. Una nueva hebra complementaria.PROCESO DE AMPLIFICACIN DEL ADN POR PCR

Si se conoce suficientemente una secuencia de un gen de modo que puedan especificarse cebadores, la amplificacin por PCR proporciona un mtodo muy poderoso de deteccin de pequeas cantidades de molculas especificas de ADN o de ARN en una mezcla compleja de otras molculas.Esta sensibilidad tan extraordinaria ha hecho de la PCR una tcnica importante para una diversidad de aplicaciones incluyendo el anlisis de la expresin gnica en clulas y tejidos