Evaluación del uso de enterofagos y colifagos para detectar contaminación fecal en aguas...
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Evaluación del uso de enterofagos y colifagos para detectar contaminación fecal en aguas superficiales tropicales
Nicolle E. LebrónDr. Javier Arce Nazario17 de mayo de 2013
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Objetivos principales
Analizar aguas superficiales mediante el uso de enterofagos y colifagos como indicadores de contaminación fecal
Comparar la efectividad del método de Enterofago / Colifago con el método de Colilert / Enterolert
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Calidad de agua
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ENTEROFAGOS:Un grupo de bacteriófagos que infectan específicamente a Enterococcus faecalis
COLIFAGOS:Un grupo de bacteriófagos que infectan a Escherichia coli
¿Qué son enterofagos y colifagos?
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Metodología
PREPARACIÓN DE LOS MEDIOS
PREPARACIÓN DE LOS HOSPEDEROS
RECOGER MUESTRAS DE AGUA
PROCEDIMIENTO ENTEROFAGO/COLIFAGO
MÉTODO DE ENTEROLERT/COLILERT
VER RESULTADOS
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Crecimiento del hospedero• Azide Dextrose• TSB
Preparación de los medios
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Inoculación de bacterias
Preparación de los hospederos
Azide Dextrose → E. faecalis
TSB → E. coli
Incubadora(24 horas / 37°C)
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Procedimiento Enterofago/Colifago• ENTEROFAGO → E. faecalis• COLIFAGO → E. coli
Preparación de los medios
Agar + TSB
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Un control negativo y muestras frescas• Control negativo (-): se recoge de un punto
de muestreo y se autoclavea
Recoger muestras de agua
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Materiales para analizar las muestras de agua:
• Muestras de agua (100mL cada una)
• Medios preparados de Enterofago y Colifago (50mL cada uno)
• Hospederos: E. faecalis (10mL cada uno) y E. coli (1mL cada uno)
Procedimiento Enterofago/Colifago
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Contaminación de las bacterias• Hablando• Condensación en las placas• Otros factores externos
Temperatura Utilizar material viejo No añadir el hospedero al medio
Errores que pueden afectar los resultados
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Método de Enterolert/Colilert
35°C
41°C
Quanti-Tray
Colilert
Enterolert
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RESULTADOS PRELIMINARES
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Lugar de la muestra
Enterofago (PFU/50mL)
Colifago (PFU/50mL)
Entrada al Sector Los Cedros
0 127
Quebrada de Culebra Alto
0 0
Borde entre Guayama y Cayey
0 1
Sector Los Cedros 0 52
Procedimiento de Enterofago/ Colifago (sábado, 4 de mayo de 2013)
Lugar de la muestra
MPN (Total coli) MPN (E. coli) MPN
(Enterococci)
Entrada al Sector Los Cedros
>2,419.6 >2,419.6 1,046.2
Quebrada de Culebra Alto
>2,419.6 7.4 410.6
Borde entre Guayama y Cayey
>2,419.6 26.2 90.8
Sector Los Cedros >2,419.6 51.2 579.4
Método de Colilert y Enterolert (sábado, 4 de mayo de 2013)
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Lugar de la muestra
Río La Plata (Puente 171)
Quebrada detrás de la universidad
UPR-Cayey (origen)
Río al lado de la plaza de Cayey
UPR-Cayey (bambús)
UPR-Cayey (detrás de la biblioteca)
UPR-Cayey (al lado de la cafetería)
Jueves, 9 de mayo de 2013
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Lugar de la muestra Enterofago (PFU/50mL)
Colifago (PFU/50mL)
Río La Plata (Puente 171) 122 N/A
Quebrada detrás de la universidad N/A 13
UPR-Cayey (origen) N/A 42
Río al lado de la plaza de Cayey 1 35
UPR-Cayey (bambús) 15 30
UPR-Cayey (detrás de la biblioteca) 90 42
UPR-Cayey (al lado de la cafetería) 11 15
Procedimiento de Enterofago/ Colifago (viernes, 10 de mayo de 2013)
Lugar de la muestra MPN (Total Coli)
MPN (E. coli)
MPN (Enterococ
ci)
Río La Plata (Puente 171) >2,419.6 >2,419.6 >2,419.6
Quebrada detrás de la universidad
>2,419.6 >2,419.6 >2,419.6
UPR-Cayey (origen) >2,419.6 >2,419.6 2,419.6
Método de Colilert y Enterolert (viernes, 10 de mayo de 2013)
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Reducir lo más posible los errores de procedimiento
Recoger más muestras de ríos en áreas urbanas y rurales
Incorporar pruebas químicas a la metodología
Pasos a seguir
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Agradecimientos
NIH BRIC Grant # XXXXXNSF CAREER Grant # XXXXDepartamento de Biología y el Insituto de Investigaciones Interdisciplinarias de Puerto Rico