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ESTUDIO Y CLASIFICACIÓN DE MUTACIONES PATOGÉNICAS EN BRCA1 Y BRCA2: SÍNDROME DE CÁNCER DE MAMA Y OVARIO

HEREDITARIO (CMOH)

Marina Fernández Villares(1), David Gómez-Sánchez(2),

Montserrat De Miguel Reyes (2)

(1)Hospital Universitario Puerta del Mar (2)Hospital Universitario 12 de Octubre

Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

CÁNCER DE MAMA

Neoplasia más frecuente

Incidencia

Detección precoz

¿QUÉ PROPORCIÓN DE

CÁNCER ES HEREDITARIO?

REDUCCIÓN RIESGO


GENES DE SUSCEPTIBILIDAD DESCRITOS

BRCA 1 (17q21)

5592 NT24 exones 1863 aa

BRCA 2 (13q12)

1385 NT 27 exones 3418 aa


Mutaciones somáticas versus mutaciones en línea germinal

Mutaciones somáticas

En las células

tumorales de un

determinado tejido

(p.ej. mama)

En tejidos no germinales

No heredable

Propio del cáncer esporádico

Presente

en todas

las células

de los

hijos

En todas células del cuerpo

Transmisible a la descendencia

Origina Sdme. Cáncer

Hereditario

Descendiente

En línea germinal

Mutación

en el

gameto

Progenitor


MATERIAL Y MÉTODOS

Estudio retrospectivo de

983 pacientes con neoplasia sugestiva

de corresponder a CMOH

IDENTIFICACIÓN DE VARIANTES PATOGÉNICAS

OBJETIVO

Analizar los resultados de 983 estudios completos

de los genes BRCA1 y BRCA2, y detectar las

mutaciones más frecuentemente encontradas.


MATERIAL Y MÉTODOS

Extracción DNA

Sangre total Análisis exones y regiones

intrónicas adyacentes

BRCA1 BRCA2


MATERIAL Y MÉTODOS

Secuenciación masiva (Ion Torrent, Illumina) MLPA(Multiplex Ligation-dependent Probe

Amplification) HRM (High Resolution Melting)

Secuenciación Sanger

Bases de datos específicas de locus: -BRCA Mutation Database (University of UTAH) -UMD Share -BRCA Exchange (incluye Bic, ClinVar, ESP, ExAC, ENIGMA, LOVD, exLOVD, 1000 Genomes)

Clasificación de las variantes patogénicas en base a los transcritos de referencia: NM_007294 (BRCA1) NM_000059 (BRCA2)


RESULTADOS

43 variantes patogénicas diferentes

33 aparecen en 1 solo paciente

10 aparecen en varios pacientes (29)

5 aparecen en varios pacientes

(27)

22 aparecen en 1 solo paciente

27 variantes patogénicas diferentes


Gráfico 4. Leyenda de dominios de proteínas BRCA1 y BRCA2 en lollipop plot.

BRCA1 BRCA2

Gráficos 2 y 3. Dominios funcionales de las proteínas BRCA1 y BRCA2,respectivamente, y posición de las diferentes mutaciones.

RESULTADOS Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

RESULTADOS: BRCA1

Gráfico 2. Dominios funcionales de la proteína BRCA1 y posición de las diferentes mutaciones.

Mutaciones en BRCA1 presentes en (n) pacientes

n=2 c.1687C>T p.(Gln563fs) Q563* c.181T>G p.(Cys61Gly) C61G c.211A>G p.(Arg71Gly) R71G c.5153-1G>A IVS18-1G>A c.5095C>T p.(Arg1699Trp) R1699W c.5266dupC p.(Gln1756Profs*74) Q1756Pfs*74 c.3331_3334delCAAG p.(Gln1111Asnfs*5) Q1111Nfs*5

n=3 c.68_69delAG p.(Glu23Valfs*17) E23Vfs*17

n=4 c.302-1G>A

n=8 c.5123C>A p.(Ala1708Glu) A1708E


RESULTADOS: BRCA2

Gráfico 3. Dominios funcionales de la proteína BRCA2 y posición de las diferentes mutaciones.

Mutaciones en BRCA2 presentes en (n) pacientes

n=2 c.9382C>T p.(Arg3128*) R3128*

n=5 c.3922G>T p.(Glu1308*) E1308*

c.9026_9030delATCAT p.(Tyr3009Serfs*7) Y3009Sfs*7

n=6 c.6275_6276delTT p.(Leu2092Profs*7) L2092Pfs*7

n=9 c.2808_2811delACAA p.(Ala938Profs*21) A938Pfs*21


RESULTADOS

Gráfico 5. Distribución de variantes patogénicas en función del fenotipo expresado

0

5

10

15

20

25

30

Cáncer

Mama (CM)

Cáncer

Ovario (CO)

CM bilateral CO bilateral Cáncer mama

y ovario

(CMO)

CM bilateral

y CO

Otras

neoplasias

CM y

Endometrio

Portadores

sanos

Fenotipo en pacientes con mutaciones en BRCA1 (n=62) y BRCA2 (n=49)

BRCA1

BRCA2


CONCLUSIONES 1. El 11,3% de los estudios completos realizados (111 pacientes)

presentaron alguna variante patogénica (clase 5).

2. Se encontró un mayor número de mutaciones en BRCA1

respecto a BRCA2: 62 pacientes (55,85%) con mutaciones en

BRCA1 y 49 pacientes (44,15%) con mutaciones en en BRCA2.

3. Se detectaron 43 variantes patogénicas diferentes en BRCA1,

y 27 en BRCA2; apareciendo la mayoría en un único paciente.

Entre las que se repetían en varios pacientes, las más

frecuentes fueron: c.5123C>A p.(Ala1708Glu) en BRCA1, en 8

pacientes; y c.2808_2811delACAA p.(Ala938Profs*21) en

BRCA2, en 9 pacientes.

4. El fenotipo más expresado fue cáncer de mama unilateral

(47,7% de todos los casos).


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