Estudio de oligosacaridasas en biopsia intestinal y caso clínico.

Clara Gómez González

R2 Análisis Clínicos

Digestión hidratos de carbono

Estómago

Intestino delgado

ALMIDÓN GLUCÓGENO

DISACARIDOS NATURALES: • LACTOSA • SACAROSA • MALTOSA

Maltosa Maltotriosa Dextrinas limite

Glucosa, galactosa y fructosa

oligosacaridasas

α- amilasa

Oligosacaridasas

• Sacarasa-isomaltasa (yeyuno)

• Glucoamilasa (íleon)

• β- galactosidasa (yeyuno)

Oligosacaridasas: Síntesis

• Son glicoproteínas sintetizadas en la cavidad del retículo endoplásmico.

Oligosacaridasas: Actividad

COMPLEJO ACTIVIDAD

SACARASA-ISOMALTASA

MALTASA

DEXTRINASA

SACARASA

ISOMALTASA

GLUCOAMILASA

DEXTRINASA

MALTASA

ISOMALTASA

TREHALASA

β-GALACTOSIDASA LACTASA

CELOBIASA

Oligosacaridasas: Deficiencias

PRIMARIAS SECUNDARIAS

• Deficit de lactosa • Deficit de sacarosa-isomaltosa • Deficit de trehalosa • Deficit de lactulosa • Deficit de hexitoles

• Sindrome de intestino contaminado

• Gastroenteritis vírica o bacteriana

• Celiaquía • Fibrosis quística • Malnutrición • Crohn o colitis ulcerosa • Giardiasis • Déficit inmunológico • Drogas • Cirugía y resecciones.

Oligosacaridasas: Deficiencias

Existen diferentes fenotipos del deficit enzimático:

a) Falta de producción de la enzima.

b) Producción de enzima inactiva.

c) Producción de enzima activa con fallo en la integración en el borde en cepillo.

TÉCNICAS DE LABORATORIO

Fundamento

BIOPSIA INTESTINAL

Fundamento

BIOPSIA INTESTINAL

ANATOMIA PATOLÓGICA

LABORATORIO

Fundamento

• La muestra se recogerá en tubo de cristal o plástico.

• Mantener congelada a -30ºC hasta su transporte.

• El transporte se realizará en nieve carbónica.

Fundamento

• LACTOSA Glucosa + Galactosa

• MALTOSA 2 Glucosa

• SACAROSA Glucosa +Fructosa

Fundamento

Glucosa Glucosa-6P 6-Fosfogluconato

ATP ADP

NADP NADPH

G6PDH

HEXOQUINASA

Fundamento

Proteínas + CuSO4 Complejo Proteína-Cu

Complejo Proteína-Cu + Folin C Color azul

Medio Alcalino

Actividad enzimática / gramo proteína

CASO CLÍNICO

Episodio

Niño de 2 años:

• Estancamiento ponderal desde los 6 meses.

• Episodios de diarrea desde los 3 meses de entre 5 días y 3 semanas de duración.

Antecedentes

• Parto a las 39 semanas eutócico.

• Apgar: 9/10.

• Peso y talla al nacer normales.

• Sin antecedentes familiares de interés.

Alimentación

• Lactancia materna 2 meses.

• Frutas desde los 3 meses.

• Cereales sin gluten a los 4 meses.

• Verduras a los 6 meses.

Clínica del paciente

• Desde los 3 meses, episodios de deposiciones amarillentas, ácidas, pastosas en número de 5-6 al día.

• Distensión abdominal y emisión de abundante gas.

• Afebril sin otra sintomatología asociada.

• Mejoran parcialmente con dieta astringente.

• No le gustan los alimentos azucarados, le producen dolor abdominal.

¿Qué pruebas solicitarías en primer lugar?

¿Qué pruebas solicitarías en primer lugar?

• Índice de Waterlow:

– Se observa una mayor afectación del peso, con talla y perímetro craneal normales.

FALLO DE MEDRO

Peso por debajo del p 3-5 para la edad en más de una ocasión.

Peso inferior al 80% del peso ideal para la edad.

Peso cae 2 percentiles a lo largo del tiempo.

Ganancia del peso menor de lo esperado.

¿Qué pruebas solicitarías en primer lugar?

• Exploración general: palpación abdominal, características de la piel,…

Orientación diagnóstica

COMIENZO POSIBILIDADES DIAGNÓSTICAS

Antes del nacimiento Malnutrición intrauterina

Desde el nacimiento Patología congénita

En algún momento de la lactancia Patología relacionada con la ingesta

PARÁMETRO AFECTADO POSIBILIDADES DIAGNÓSTICAS

PC, Peso y Talla Defectos hereditarios congénitos

Talla • Patología endocrina • Crecimiento y alteración de huesos largos

Peso • Inadecuada ingesta de nutrientes • Apetito alterado/incapacidad para

ingerir grandes cantidades. • Inadecuada absorción o aumento de

perdidas. • Aumento de los requerimientos

¿Qué solicitaría a continuación?

¿Qué solicitaría a continuación?

• Encuesta dietética: 1807 kcal/día

• Fórmula de Schofield: 847 kcal/día

19% PROTEÍNAS (10%) 37% GRASAS (30%)

44% HIDRATOS DE CARBONO

(60%)

¿Cuál es la causa más probable de malnutrición?

• Inadecuada ingesta de nutrientes. • Apetito alterado/ incapacidad para ingerir

grandes cantidades. • Inadecuada absorción o aumento de

pérdidas. • Aumento de los requerimientos.

Resumen

DIARREA (5 y 3 semanas de duración) Y ESTANCAMIENTO PONDERAL

FALLO DE MEDRO CON AFECTACIÓN DE PESO

INADECUADA ABSORCIÓN O AUMENTO DE PERDIDAS

Posibilidades

DIARREA CRÓNICA Diarrea funcional.

Causas infecciosas.

Parásitos.

Inmunodeficiencias

Respuesta inmune inadecuada.

Maldigestión de grasas.

Pérdida digestiva de proteínas.

Enterocolitis necrotizante, síndrome de intestino corto

Obstrucción/dismotilidad intestinal.

Diarreas congénitas (secretoras/osmóticas).

Tumores neuroendocrinos.

Diarrea facticia. Intolerancia a la lactosa, fibrosis quística, enfermedad celiaca, cardiopatía, enfermedad inflamatoria intestinal, alergia a proteínas de la leche de vaca.

Posibilidades

CARACTERÍSTICAS HECES

SUGIERE…

Voluminosas, fétidas, brillantes

MALABSORCIÓN DE GRASAS

Ácidas, explosivas con emisión de gas y eritema perianal.

MALABSORCIÓN DE HIDRATOS DE CARBONO

Moco y sangre CAUSAS INFECCIOSAS

Carácter cambiante, restos sin digerir

DIARREA FUNCIONAL

¿Qué pruebas complementarias solicitarías?

ESTUDIO DE HECES

pH = 6

Sustancias reductoras: negativas

NORMAL

¿Qué pruebas complementarias solicitaría?

• Pérdida de proteínas

• Función pancreática

• Calprotectina/lactoferrina

• Hemograma, bioquímica, coagulación, reactantes de fase aguda, inmunoglobulinas.

• Enfermedad celiaca

• Iones en sudor

• Examen de heces:

– Estudio macro/micro

– Coprocultivo/parásitos

– Hemorragia oculta

– Cuantificación de grasa fecal.

Ac. Enfermedad celiaca: NEGATIVOS Iones en sudor: NEGATIVO Coprocultivo/Parásitos: NEGATIVO Heces: hemorragia oculta negativa, grasa fecal normal Elastasa pancreática: NORMAL

¿Qué pruebas complementarias solicitaría?

NADA ANORMAL

En resumen…

• Niño de 2 años con diarrea crónica/malnutrición aguda.

• Restricción de azúcares en la dieta: pH y cribado de azúcares en heces normales

• Pruebas complementarias: NORMALES

¿Qué hacemos?

¿Qué hacemos?

a) Alta y paciencia, ya engordará

b) Endoscopia digestiva alta con toma de muestras para enzimas de pared

c) Test de H2 espirado para lactosa

Biopsia y enzimas de pared

• Lactasa: 12,3 µg/g (32 - 52) • Sacarasa: 21,7 µg/g (104 - 132) • Maltasa: 38,5 µg/g (204 – 327)

1)Resultados del laboratorio

Biopsia y enzimas de pared

2) Resultados de anatomía patológica

Mucosa de intestino delgado con relación vellosidad/cripta de 2.5, con incremento del número de linfocitos intraepiteliales (LIES – CD3+). No se observan criptas hipertróficas.

LESIÓN TIPO 1 DE MARSH. ENTERITIS LINFOCÍTICA

Histocompatibilidad para enfermedad celiaca

• DQA1 * 0501

• DQA1 * 0201

• DQB1 * 0201

• DQB1 * 02BC

¿Diagnóstico?

¡¡DEFICIT SACARASA-ISOMALTASA!!

¿Qué ha ocurrido?

SACAROSA

¿Qué ha ocurrido?

DIARREA: Heces ácidas, explosivas con emisión de gas y eritema perianal.

¿Qué ha ocurrido?

SACAROSA

pH = 6

Sustancias reductoras: negativas