Estudio de laboratorio de la

Hemostasia

Nombres: Jose Marquez

Miguel Montaner

Estudio de LAB. De la Hemostasia

La Hemostasia es el conjunto de mecanismos fisiológicos que controlan la perdida de sangre.

Su función principal es la de parar el sangrado cuando se produce una lesión.

Los componentes de la Hemostasia son:

Sistema VascularSistema Vascular

Sistema de PlaquetarSistema de Plaquetar

Sistema Coagulativo (y anticoagulativo) Sistema Coagulativo (y anticoagulativo)

y Fibrinolítico.y Fibrinolítico.

Estudio de LAB. De la HemostasiaEl sistema Vascular:

A los pocos segundos de producirse una lesión (ej. rotura por una herida) del vaso sanguíneo, se produce una contracción, esta contracción es producida por factores adrenergicos, Además los extremos abiertos de los vasos se pliegan hacia adentro.Reduce drásticamente el sangrado.Aquí actúa un neurotransmisor (serotonina) y el tromboxano A2, que son potentes vasoconstrictores.

Estudio de LAB. De la HemostasiaPosteriormente esta el proceso de la activación plaquetaria, que

se divide en tres procesos, adhesión, agregación y desgranulacion.

Después de esto, esta la fase Plasmática en la cual se ven involucradas dos vías una intrínseca que es mas eficiente y una vía extrínseca, dentro de estas vías tenemos el tronco común.

El ultimo proceso que se produce en la hemostasia es el de la ruptura del coagulo, proceso llamado fibrinolisis.

Estudio de LAB. De la HemostasiaDe la adhesión plaquetaria es importante señalar su estructura.

Sección transversal Sección longitudinal

Estudio de LAB. De la HemostasiaLas plaquetas están compuestas de: Gránulos de Glucogeno Cuerpos Densos Sistema Tubular Denso Seudo vacuolas Anillos de microtubulos Vacuolas Mitocondrias Gránulos Alfa

Estudio de LAB. De la HemostasiaESTUDIO DE LA HEMOSTASIA

1.- Dirigidos a la evaluación de las patologías con tendencias a los fenómenos hemorragíparos.

2- Orientados a las patologías con tendencias trombóticas.

3- evaluación de la hemostasia primaria.

Las plaquetas tienen la función:

- De taponar rápidamente el endotelio vascular dañado.

- La activación del mecanismo de la coagulación liberando trombina.

- Activar la fibrinólisis.

Estudio de LAB. De la HemostasiaAnte cualquier sospecha de alteración en la función plaquetaría

ya sea cualitativa o cuantitativa, se debe realizar:- Recuento plaquetario.- Examen morfológico de las plaquetas.- Tiempo de sangría de Ivy.

Hay exámenes mas especializados que van mas dirigidos a la función plaquetaria como: adhesión plaquetaria y agregación plaquetaria.

Un punto importante es que el paciente no debe ingerir fármacos antes de diez días de realizarse el examen esto es por la intervención en el resultado y el tiempo de espera(10 días) es por la vida media de las plaquetas.

Estudio de LAB. De la HemostasiaExámenes

Recuento de Plaquetas

El recuento de plaquetas es un examen que se refiere al análisis cuantitativo de las plaquetas, teniendo en cuenta que el numero de estas va desde 150.000 hasta 400.000mm.

Se puede realizar de 2 formas, una es con cámara de Neubauer y el otro directamente al porta objeto en el microscopio.

En el frotis se cuentan 20 campos y se multiplican por 1000 y hay se obtiene el numero de plaquetas.

El recuento por cámara de Neubauer es independiente de la técnica utilizada. esta técnica se realiza por el método de Breeker y Cronkite, usando como diluyente Oxalato de Amonio.

Los materiales son Pipeta cuenta glóbulos rojos, Cámara de Neubauer y diluyente.

La muestra pude ser sangre capilar ò sangre venosa con EDTA.

Se aspira la sangre hasta 0.5, se completa a 101 con el diluyente, se agita y se carga la cámara en los dos retículos.

FASE VASCULAR.Prueba del lazo ò Rumpel Leede

Esta prueba consiste en tomar la presión arterial del paciente, posteriormente se saca la presión arterial media, y se mantiene esa presión por 5 minutos, después de eso se deja en reposo el brazo y antebrazo por otros 5 minutos y se observa la presencia de petequias.

Menor A 5 petequias la prueba es negativa.

Sobre 5 petequias la prueba es positiva.

Con esta prueba lo que se busca es ver la elasticidad de los vasos sanguíneos es decir la vasoconstricción.

FASE PLAQUETARIA.Tiempo de sangría:

Es el periodo de tiempo que transcurre después de hecha una incisión en un lugar determinado del cuerpo (antebrazo ò lóbulo de la oreja) y el momento en que el sangrado cesa, para esto hay dos exámenes.

Método de Duke: Valor normal hasta 4 minutos.Método de Ivy: Valor normal hasta 7 minutos.El objetivo de realizar estos exámenes es evaluar la hemostasia

primaria en general es decir la pared vascular, el numero de plaquetas, la adhesión y la agregación al endotelio que esta dañado.

Si los valores del tiempo de sangría están prolongados puede haber, alteración en la pared vascular, trombocitopenias, defectos en la adhesión, alteración en la agregación, ingestión de fármacos que alteran la función plaquetaria como ASPIRINA.

Tiempo de sangría (ivy)

FASE PLASMATICA.TIEMPO DE COAGULACION.

Se utiliza como examen pre operatorio para evaluar en general la hemostasia del paciente.

Es el periodo de tiempo que transcurre entre que se extrae la sangre y se forma un coagulo solidó.

Se realiza una inspección del coagulo cada 30 segundos, y esto permite la evaluación de sus propiedades físicas ( tamaño, aspecto y consistencia mecánica) su estabilidad y la velocidad è importancia de su retracción.

Retracción del coagulo método de Quick: Se utilizan los mismos tubos del tiempo de

coagulación.

Es el tiempo en cual se contrae el coagulo.

defecto adquirido en la función de las plaquetas

defectos congénitos en la función de las plaquetas

FASE PLASMATICA.

Preparación de la muestra:- Incubar a 37°C después de haberse coagulado la sangre por dos horas.

- Observar a los 60 minutos y luego a los 120 minutos , si el coágulo se ha retraído sin soltarse de los bordes del tubo liberando suero en su entorno.

- Si el suero no se visualiza, centrífugar los tubos a 2.000 rpm x 5 imn., antes de informar la retracción alterada.

Valores normales: Entre 50 y 100% de la retracción del coágulo se inicia en 1 ó 2 horas,

siendo total a las 24 horas.

Significado de los resultados anormales:

La disminución en el tiempo de retracción del coágulo puede indicar, entre otras causas:

- Número deficiente de plaquetas.- Enfermedad de Glanzmann.- Enfermedad de von Willebrand.

FASE PLASMATICA.

TTPA (tiempo parcial de tromboplastina activado).

Es un examen que mide el tiempo de coagulación en el plasma (la porción líquida de la sangre), al añadir sustancias cargadas negativamente, para así ser activado el factor XII.

Evalúa la vía intrínseca de la coagulación.

Preparación de la muestra: En un tubo limpio poner una parte de citrato de sodio al 3.8% , añadir nueve

partes de muestra. Centrifugar a 2500 rpm por 15’ y separar el plasma. Poner en baño de hielo

hasta el momento de realizar la prueba. Calentar a 37oC un volumen suficiente de CaCl2 0.025 M. Por 10’.

Cefalina se conserva en baño de hielo. Rotular un tubo de ensayo con todos los datos y realizar la prueba por

duplicado. Dispersar 0.1ml de plasma control a su tubo correspondiente y añadir 0.1ml de

cefalina. Incubar a 37oC durante 2’. Inmediatamente después añadir 0.1ml de solución de CaCl2, simultáneamente

poner el cronómetro en marcha y determinar la formación del coagulo. Anotar el tiempo en segundos. Repetir la técnica con el plasma problema.

Valores normales: 35” a 45”

Significado de los resultados anormales:- Cirrosis - Coagulación intravascular diseminada (CID)- Deficiencia del factor XII - Hemofilia A (deficiencia del factor VIII) - Hemofilia B (deficiencia del factor IX) - Hipofibrinogenemia- Malabsorcion (inadecuada absorción de nutrientes del tracto

intestinal) - Enfermedad de von Willebrand- Anticoagulante para lupus

FASE PLASMATICA. TP (tiempo de protrombina). La coagulación del plasma se produce por la adición de factor tisular en

presencia de calcio.

Es la mejor prueba de sondeo para anormalidades de la vía extrínseca.

Mide la activación del factor X por el factor tisular y el complejo del factor VIIa, también las reacciones restantes de la vía común. Mide los factores I, II, V, VII y X.

El TP es una determinación analítica que se efectúa antes de una intervención quirúrgica para determinar problemas hemorrágicos potenciales.

Preparación de la muestra:

Obtener plasma utilizando sangre venosa citratada en proporción 9:1, centrifugándola 15 min. A 2.000 rpm.

Dejar en baño de hielo hasta el momento de usar. Reconstituir la tromboplastina según indica el proveedor. Colocar 0.1 ml. plasma en un tubo Kahn e incubarlo a 37°C por 1’. Agregar 0.2 ml. de tromboplastina y poner en marcha en forma

simultanea un cronómetro. Sin sacar el tubo del baño María. Mezclarlo suavemente y mantenerlo a 37°C por 7 a 8 segundos. Observar el cambio de consistencia de la mezcla sacando y

sumergiendo el tubo constantemente, lo más suave que pueda. Detener el cronómetro cuando observe la formación de los primeros

hilos de fibrina, o cuando la muestra no escurra por las paredes del tubo.

Valores normales:

70 A 100 %

Cálculo del porcentaje de protrombina:

La fórmula propuesta por Quick es la siguiente:

% protrombina = 330 .

tpo pcte. - (tpo ctrl. – 3.3)

Significado de los resultados anormales:- Obstrucción del conducto biliar - Cirrosis - Coagulación intravascular diseminada - Hepatitis - Malabsorción (absorción inadecuada de nutrientes desde el tracto

intestinal) - Deficiencia de vitamina K - Terapia con cumadina (warfarina) - Deficiencia del factor VII - Deficiencia del factor X - Deficiencia del factor II (protrombina) - Deficiencia del factor V - Deficiencia del factor I (fibrinógeno)

Este examen se puede realizar bajo muchas condiciones en la evaluación de una amplia variedad de trastornos.

FASE PLASMATICA. TT (tiempo de trombina).

Mide la el tiempo coagulación en cual se agrega una cantidad standard de trombina al plasma.

Evalúa la transformación del fibrinógeno en fibrina.

Preparación de la muestra:

- Se mezcla 200 ul. de un plasma pobre en plaqueta y 200 ul de trombina a 37ºC.

- Empezar a cronometrar y anotar el resultado en segundo.- Trabajar de la misma manera el TT de un control .- Todo se hace por duplicado.

Valores normales:

14 a 16”

Significado de los resultados anormales:

- Hipofibrinogenemia. - Disfibrinogenemias congénitas o adquiridas.- Coagulación intravascular diseminada. - Presencia de inhibidores de la antitrombina circulantes ( heparina u

otros).- Presencia de productos de la degradación del fibrinógeno/fibrina-

paraproteinas.- Aumento por drogas: (asparaginasa- estreptoquinasa- heparina-

uroquinasa).