ESTRUCTURA DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS
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ESTRUCTURA
DE LOS
ÁCIDOS NUCLEICOS
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MONÓMEROS
POLIMERIZACIÓN
ESTRUCTURA DEL ADN
ESTRUCTURA DEL ARN
PROPIEDADES
CLASES DE ACIDOS NUCLEICOS
FUNCIONES
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DESNATURALIZACIÓN
PRECIPITACIÓN
ABSORCIÓN UV
ALTERACIONES
Propiedades
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pH extremos
temperatura > 80 °C
Desnaturalización del ADN
Ruptura de puentes de H
Desapilamiento de bases
hibridización
urea
formamida
Desnaturalización
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Bioquímica 2009 A. Esteves Facultad de Ciencias
Al aumentar la temperatura las bases se desapilan y los enlaces de H se rompen
A temperaturas altas, aún las zonas ricas en GC se desaparean las
Area rica en pares de bases A/T
DNA doble
cadena
DNA parcialmente desenrollado
DNA totalmente desnaturalizado, hebras separadas
A medida que la solución baja de temperatura, las regiones complementarias de ambas cadenas se aparean
Area de nucleación
Una vez iniciada la nucleación el proceso se completa rápidamente.
Desnaturalización
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In vivo el proceso de desnaturalización y renaturalización tienen lugar durante la
Desnaturalización
TRANSCRIPCION y la REPLICACION
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•Se define la temperatura en la cual el 50% de la molécula está desnaturalizada como:
Temperatura de fusión
(Tm)
Desnaturalización
Temperatura
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Desnaturalización
Temperatura
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• Cada molécula de ADN tiene una temperatura de desnaturalización (o de fusión) característica
•¿De qué depende esta temperatura, en condiciones de pH y fuerza iónica definidas?
• ¿Cómo afecta la Tm la fuerza iónica?
Desnaturalización
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• Cada molécula de ADN tiene una temperatura de desnaturalización (o de fusión) característica
•¿De qué depende esta temperatura, en condiciones de pH y fuerza iónica definidas?
• ¿Cómo afecta la Tm la fuerza iónica?
Desnaturalización
Temperatura
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del contenido en GC (ó AT)
Desnaturalización
Temperatura
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Desnaturalización
Temperatura
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• Cada molécula de ADN tiene una temperatura de desnaturalización (o de fusión) característica
•¿De qué depende esta temperatura, en condiciones de pH y fuerza iónica definidas?
• ¿Cómo afecta la Tm la fuerza iónica?
Desnaturalización
Temperatura
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Desnaturalización
Tm- Fuerza iónica
< m < Tm > m >Tm
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Propiedades Absorción de la luz
Absorbancia 260nm = 1 equivale a 50 mg/ml ADN doble hebra
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La transición de la forma doble hebra a monohebra puede detectarse por una disminución en la viscosidad o mediante un incremento de la absorción de luz ultravioleta (260nm).
Propiedades Absorción de la luz
EFECTO HPERCRÓMICO
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PRECIPITACION
Constante diélectrica
pH
Fuerza iónica
Temperatura
Propiedades Precipitación
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desaminación C U
hidrólisis del enlace glucosídico
metilación
Propiedades Alteraciones
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¿Cómo se descifra una secuencia de ADN? ¿Qué información nos brinda?
Propiedades
Secuencia
Métodos de secuenciación (1977) • Sanger • Maxam y Gilbert
• identificar mutaciones • predicciones de potenciales enfermedades • como se regula un gen • que proteína expresa • relaciones filogenéticas
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H FABP Bos taurus
H FABP Sus scrofa
H FABP Hs
FABP Mus musculus
H FABP Gallus gallus
H FABP Xl
H FABP Dr
Rep1
M ensis CRABP
Ms CRABP
P xylostella CRABP
D plexippus CRABP
Bm CRABP
Bt CRABP1
Mus musculus CRABP1
Homo sapiens CRABP2
Daio rerio CRABP2
DrCRABP2
Xl CRABP2
MmCRABP2
Hs CRABP2
Bt CRABP2
Ss CRABP2
C.clemensi CRABP2
C rogercresseyi CRABP2
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Nucleosoma
Fibras de cromatina
Bucles de cromatina
Cromosomas
doble hebra de ADN se organiza en
El ADN en la célula eucariota El ADN en la célula eucariota
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El ADN en la célula procariota
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ARN Monohebra
Tres formas
Contienen uracilo en lugar de timina
Estructuras trimidensionales complejas
ARNr
ARNm
ARNt
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• Estructuras muy complejas • Formas helicoidales (forma A más favorecida) • Apareamientos W y C • Otros apareamientos ( G-U) • No hay estructuras regulares • Bucles y salientes formas por zonas no apareadas
Estructura de los Ácidos Nucleicos
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Estructura de los Ácidos Nucleicos
ARNm
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Asa D (Dihidrouridina)
Asa variable
Anticodón
Asa anticodón
Brazo aceptor
Asa U (pseudouridina)
Estructura del ARN ARNt
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Asa D
Asa variable
Asa anticodón
Brazo aceptor
Asa U Base
discriminadora Tallo aceptor
Tallo anticodón
Estructura del ARN
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ARNr 5.8S 160 nucleótidos
ARNr 5 S 120 nucleótidos
ARNr 28S 4700 nucleótidos
49 proteínas
ARNr 18S
33 proteínas
ARN Ribosomal Eucariota
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RESUMEN
• La molécula de ADN está formada por dos hélices antiparalelas y complementarias.
• Las moléculas de ARN están formadas por una sola hebra y existen cuatro tipos fundamentales: ARNm, ARNt, ARNr y pequeños ARNs.
• Los ácidos nucleicos absorben la luz ultravioleta a 260nm
• Presentan efecto hipercrómico
• Pueden desnaturalizarse y renaturalizarse
• La temperatura de fusión es un parámetro específico que depende del % de bases A/T o G/C
• Las modificaciones en el ADN que dan lugar a modificaciones permanentes reciben el nombre de mutaciones.