Esterilizacao desinfeccao veterinaria
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Esterilização e Desinfecção
Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias de Jaboticabal – Departamento de Microbiologia –
UNESP
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MSc Ana Cláudia de Oliveira
Introdução
• 10 referência de desinfetante : A Odisséia onde Homero cita o uso do enxofre (800 a.C.)Ainda hoje utilizado para conservar frutas secas, sucos e vinhos.
• Cidade de Veneza: pioneira em controle sanitário.
• Holandês Anton Van Leeuwnhoek (1676): foi um marco na história da microbiologia e desinfecção.
• Louis Pasteur (1822-1895): desenvolveu o método físico denominado pasteurização.
• Em hospitais estão associadas a uma inadequada desinfecção de ambientes e artigos médicos.
• De acordo com a OMS, as doenças parasitária, virais e bacterianas são as principais causas de morte prematura, 1 cada 3.
• A OMS aponta as principais razões pelas quais algumas doenças infecciosas não são controladas/erradicadas:
• Disseminação da pobreza• Crescimento populacional desordenado• Aumento das concentrações urbanas• Movimentos grandes de refugiados• Degradação ambiental• Globalização das economias• Aumento das viagens internacionais• Resistência a antibióticos
� Nas últimas duas décadas, trinta novas e emergentes infecções tem sido alvo de grande preocupação: do HIV ao Ebola.
� No Brasil calcula-se que 80% dos hospitais não fazem controle de infecção hospitalar.
� As bactérias são os agentes principais das infecções emergentes de pacientes hospitalares.
� Microrganismos podem ser transmitidos de pessoa-pessoa por qualquer equipamento de uso comum.
� Medidas preventivas: lavagem de mãos entre os pacientes e descontaminação do material e área utilizados.
� Contaminação cruzada: fenômeno de contaminação de uma pessoa para outra ou de uma pessoa por um objeto inanimado contaminado.
Controle de microrganismos
• Em laboratórios• No lar• Nos hospitais• Na indústria
Métodos antigos de controle microbiano: Secagem Salinização de alimentosCozimento
Esterilização e desinfecção:
• Termos empregados:
• Descontaminação: Conjunto de operações de limpeza, de desinfecção e/ou esterilização de superfícies contaminadas por agentes potencialmente patogênicos.
• Limpeza: Procedimento usado para remover materiais estranhos: pó, materia orgânica, materia inorgânica e grande número de microrganismos.
• Desinfecção: Destruição dos microrganismos por meios físicos e químicos, na forma vegetativa, sem a destruição de esporos.
• Esterilização: Processos físicos ou químicos utilizados para eliminar as formas vegetativas e esporuladas de instrumentos e outros materiais.
Modos de ação dos germicidas:
• Desidratação e coagulação
• Alquilação
• Desnaturação protéica
• Permeabilidade da parede celular
• Oxidação
Desinfecção
• Definição:
• Conjunto de operações de natureza física ou química com o objetivo de reduzir o nível de contaminação por microrganismos nos itens inanimados.
• Visa a eliminação de microrganismos na forma vegetativa, excetuando-se os esporos bacterianos ou suas endotoxinas.
Desinfecção:• Classificação:
• Alto nível: destrói todos os microrganismos na forma vegetativa com exceção de esporos bacterianos. Requer enxague do material com água estéril e manipulação com técnica asseptica.
• Médio nível ou nível intermediário: os agente aplicados são eficientes para destruir as bactérias vegetativas (incluindo micobactérias da tuberculose), a maioria dos vírus e fungos.
• Baixo nível: os agente utilizados apresentam atividade antibacteriana sobre a maioria das bactéias, alguns vírus e fungos, porém não inativam microrganismos mais resistentes (micobactéria e esporos bacterianos.
NÍVEL DE DESINFECÇÃO:
ALTO INTERM BAIXO cél.vegetat + + + bacilo tub + + - esporos + + - - fungos + + + - vírus lipídicos + + - + vírus não lipídicos
+ + - + -
• Anti-sepsia: procedimento através do qual microrganismos presentes em tecidos são destruídos após a aplicação de agentes antimicrobianos.
Características de um bom anti-séptico: �Atividade germicida sobre a flora cutânea, sem causar
irritação à pele ou mucosas.� Não provocar reações alérgicas ou queimaduras.� Possuir baixo teor de toxicidade.
• Em microbiologia, o critério de morte de um microrganismo é baseado em uma única propriedade: a capacidade de se reproduzir.
• Avaliação de um agente microbicida: cultiva-se uma amostra do material tratado → número de sobreviventes.
• Uma cél. microbiana é considerada viva:Origina uma colônia visível em ágarProduz crescimento (turvação) em meio líquidoMultiplica-se em hospedeiro animal ou vegetal
Morte exponencial: os microrganismos morrem em uma relação constante, em um dado período de tempo.
Ex.: 1milhão de bactérias O agente microbicida elimina 90% /min.
Padrão:10 min: 100.00020 min: 10.000 30 min: 1.00040 min: 10050 min:10 60 min: 1
� O tempo necessário para destruir as últimas 9 bactérias é o mesmo que destruiu as primeiras 900.000.
Sítios de ação dos agentes antimicrobianos
Principais fatores interferentes e determinantes
����Tamanho da população microbiana
O sucesso da desinfecção depende de uma rígida limpeza prévia.
����Intensidade ou concentração do agente microbicida
����Tempo de exposição
����Temperatura
����Valor de pH
•Dependente do tipo de desinfetante/microrganismo/artigo submetido.
• pH 7 : sensibilizam células vegetativas e favorecem a difusão do agente.
• Peróxido de hidrogênio: independe do valor de pH.
• Compostos quaternários de amônio e clorexidina são mais efetivos pH >7.
• Glutaraldeído: ativo em temperatura ambiente (pH 7,5-8,5), a medida que a temperatura se aproxima de 700 C a dependência em relação ao pH diminui.
���� Dureza da águaOs íons cálcio e magnésio presentes na água interagem com
detergentes e outros compostos orgânicos � precipitados insolúveis.
Compostos quaternários de amônio são marcadamente afetados.
���� Umidade relativa
Afeta diretamente a atividade de compostos na forma gasosa Óxido de etileno
Peróxido de hidrogênioFormaldeído
Características do microrganismo:
De maneira genérica, a ordem de resistência ao agente antimicrobiano é:
Esporos bacterianos > Cél. Bacterianas > Fungos > Leveduras > Vírus
DESINFECÇÃO:
CALOR CALOR ÚÚMIDOMIDOää FERVURA, VAPOR 75FERVURA, VAPOR 7500,PASTEURIZA,PASTEURIZAÇÃÇÃO O
757500a30M. a30M.
CALOR SECO CALOR SECO ää PASSAR FERROPASSAR FERRO
LLÍÍQUIDOS QUQUIDOS QUÍÍMICOS MICOS ää ALDEALDEÍÍDOS, FENDOS, FENÓÓLICOS,CLORADOS,PERLICOS,CLORADOS,PERÓÓXIDO XIDO
HH22
GASES QUGASES QUÍÍMICOSMICOSää FORMALDEFORMALDEÍÍDO DO
ää OUTROSOUTROS-- RADIARADIAÇÃÇÃO ULTRAVIOLETA O ULTRAVIOLETA
CARACTERÍSTICAS DE UM DESINFETANTE IDEAL
• AÇÃO RÁPIDA
• AMPLO ESPECTRO
• ATIVO EM PRESENÇA DE MATÉRIA ORGÂNICA
• ATÓXICO
• COMPATÍVEL COM DIVERSOS TIPOS DE
MATERIAIS
• EFEITO RESIDUAL NA SUPERFÍCIE
CARACTERÍSTICAS DE UM DESINFETANTE IDEAL
• INODORO OU DE ODOR AGRADÁVEL
• ECONÔMICO
• SOLÚVEL EM ÁGUA
• NÃO POLUENTE
• SER COMPATÍVEL COM SABÕES,
DETERGENTES E OUTROS PRODUTOS
QUÍMICOS
Danifica metais30 minutosALTOÁcido peracético + peroxido de hidrogênio
Não há30 minutosBAIXOQuaternário de Amonia
Danifica acrílico e borracha
30 segundosMÉDIOÁlcool a 70%
Danifica metais e mármore
30 minutosMÉDIOHipoclorito de sódio a
1%
Materiais porosos retem o produto
45 minutosALTOGlutaraldeído a 2%
RESTRIÇÕES DE USO
TEMPO DE EXPOSIÇÃO
NÍVEL DE DESINFECÇÃO
PRODUTO
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FORMALDEFORMALDEÍÍDO E VAPOR DE DO E VAPOR DE FORMALDEFORMALDEÍÍDODO
ä Monoaldeído que é um gás solúvel em água. ä Desvantagens principais - menor rapidez de ação
e carcinogenicidade (altas doses de exposição) ä Ação: ativo apenas na presença de umidade para
formação do grupo metanol ä Exposição máxima no ambiente: 0,1 a 0,5 ppm. ä Biodegradabilidade: 1 a dois dias. ä Tóxico
KRAMER A KRAMER A etet allall. . HygHyg MedMed. 1996; 21: 536. 1996; 21: 536--557. 557. MC DONENNELL & RUSSEL D. MC DONENNELL & RUSSEL D. ClinClin MicrobiolMicrobiol Rev. 1999; 12: 147Rev. 1999; 12: 147--179. 179.
VAPOR DE FORMALDEÍDO
ä Gerado em máquina própria a partir de formol a 2%.
ä Indicação: materiais termosensíveis.ä
ä Embalagens: papel grau cirúrgico.
ä Indicador biológico: B. stearothermophillus
ää HURREL D. J HURREL D. J ScienceScience ServServ ManagManag. 1987; 41. 1987; 41--44.44.
Temperatura: 50 a 60o.C conforme o ciclo é a temperatura em que é oferecido o aparelho atualmente no país.
Tempo do ciclo: 3 horas e meia.
Exposição do pessoal: como existe uma fase, chamada fase líquida, em que o formaldeído éextraído não há exposição.
CLOREXIDINA
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PRODUTOS UTILIZADOS NA DESINFECÇÃO
NOVOS GERMICIDAS
• ORTHOPHTALALDEÍDO – desinfetante de alto nível com ação semelhante a do glutaraldeído, porém com menos odor e menor ação corrosiva.
• ÁGUA SUPER OXIDADA - desinfetante de alto nível menos tóxico e menos corrosivo, trata-se de água super oxidada por reação química obtida pela eletrólise da água (com titânio e corrente elétrica)
ESTERILIZAÇÃO
Definição:
“...CONSIDERA-SE ESTERILIZAÇÃO O PROCESSO
PELO QUAL OS MICRORGANISMOS SÃO
DESTRUÍDOS A TAL PONTO QUE A SUA
PROBABILIDADE DE SOBREVIVÊNCIA É MENOR
QUE 1 PARA 1.OOO.OOO.”
fonte: BRUNCH CW, BRUNCH MK - 2000
Esterilização:• Métodos utilizados: Depende da natureza do material e
quantidade de microrganismos a serem destruídos.
• Agentes esterilizantes:
• Calor• Filtração• Radiação• Óxido de etileno• Glutaraldeído• Formaldeído
Pré requisitos:
• Instrumental efetivamente limpo
• Abertura dos instrumentais com articulações
• Tesouras � semi abertas � protegidas com gazes
• Escolha do invólucro
ESTERILIZAÇÃO
MÉTODO EQUIPAMENTO / SOLUÇÃO
TEMPERATURA TEMPO
Gravitacional 121ºC 30 minutos Vapor sob
pressão Autoclave
Pré-vácuo 134ºC 4 minutos
170ºC 1 hora
FÍSICO
Calor seco
Estufa
160ºC 2 horas
Glutaraldeído (imersão)
ambiente 10 horas Líquido
Ácido peracético + peróxido de hidrogênio
(imersão)
ambiente 8 hora QUÍMICO
Gasoso • Óxido de etileno
• Plasma de peróxido de hidrogênio
_ _
ASPECTOS QUE INTERFEREM NA ESTERILIZAÇÃO
• Quantidade de matéria orgânica presente
• Material com estrutura diferente da original
• Artigos diferentes em tamanho e material na mesma
carga
• Desenho do material (ranhuras, dobradiças)
• Locais de difícil acesso e pontos frios
PARÂMETROS DOS PROCESSOS DE ESTERILIZAÇÃO
ä Temperatura
ä Pressão
ä Tempo
ä Grau de penetração do agente esterilizante
ä Umidade
ä Concentração
ESTERILIZAÇÃO - INVÓLUCRO
OBJETIVOS
� Permitir a esterilização do artigo.
� Garantir esterilidade do artigo até o momento do uso.
� Facilitar a transferência do conteúdo com técnica asséptica.
ESTERILIZAÇÃO - INVÓLUCRO��������,�*��,
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ESTERILIZAÇÃO - INVÓLUCRO
_CALOR ÚMIDOÓXIDO DE ETILENOPLASMA DE PERÓXIDO DE HIDROGÊNIO
NÃO TECIDO
Alto custoCALOR ÚMIDOÓXIDO DE ETILENOPLASMA DE PERÓXIDO DE HIDROGÊNIO E RADIAÇÃO GAMA
TYVEC
Especificação técnica por meio da NBR 13386/95
CALOR ÚMIDOÓXIDO DE ETILENO
FILME TRANSPARENTE
Irregularidade e inconstância na gramatura. Pode apresentar alquiltiofeno, causa náuseas e cefaléia nos indivíduos expostos
EM DESUSOPAPEL KRAFT
Menor resistência à tração (projeto 23.001.04-008 / 98
CALOR ÚMIDOÓXIDO DE ETILENO
PAPEL CREPADO
Especificação técnica por meio da NBR 12946/93
CALOR ÚMIDOÓXIDO DE ETILENO
PAPEL GRAU CIRÚRGICO
Há dificuldade de monitorização do desgaste do tecido. NBR 13456/96
CALOR ÚMIDOTECIDO DE ALGODÃO CRU
OBSERVAÇÃOINDICAÇÃOTIPO DE INVÓLUCRO
VALIDAÇÃO DO PROCESSO DE ESTERILIZAÇÃO
INDICADOR BIOLÓGICO
Certifica a eficácia do processo de esterilização.
Primeira geração – tiras de papel impregnado com Bacillus Subtillis e Stearothermophillus, o material éencaminhado ao laboratório para incubação e o resultado sai em um período de 2 a 7 dias.
� Segunda geração – ampolas contendo esporos do Bacillus Stearothermophillus, com leitura final de 48 horas.
� Terceira geração – só disponível para o processo àvapor. A leitura é realizada no máximo em 3 horas.
OUTROS MÉTODOS
• � Radiação ultravioleta destruição dos ácido nucléicos
• � Óxido de Etileno alquila e desnatura as proteínas
• � Pasteurização, água aquecida a 65 ºC por 60 min (enterococcus faecalis, HIV)
• � Microondas (2,45 Hz) entre 60 seg e 5 min
Altas Temperaturas
• O calor úmido é muito mais eficiente que o calor seco para destruir os microrganismos.
• Calor úmido: causa a desnaturação das proteínas vitais como as enzimas.
• Calor seco: causa oxidação dos constituintes orgânicos da célula.
Medidas de susceptibilidade microbianas a altas temperaturas
• Tempo de morte térmica (TMT): é o mais curto espaço de tempo requerido para destruir todos os microrganismos de uma amostra.
• Tempo de redução decimal (valor D): é o tempo requerido para diminuir uma população microbiana de uma amostra em 90% → tempo exigido para que a curva do tempo de morte térmica passe ao longo de um ciclo logarítmico.
• Medidas extremamente importantes na indústria de alimentos, onde o tempo de processamento ótimo e a temperatura devem ser estabelecidos para vários alimentos enlatados.
ESTUFA – CALOR SECO
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ESTUFASegundo a distribuição de calor: 1 Por gravidade 2 Mecânica (mais eficiente,distribuição de calor mais uniforme)
EXEMPLOS DE TEMPERATURA E TEMPO NECESSÁRIO DE EXPOSIÇÃO:
Temperatura tempo
171o.C 60 minutos
160o.C 120 minutos
149o.C 150 minutos
141o.C 180 minutos
121o.C 12horas
Filtração
• Utilizada para materiais que não podem ser esterilizados pela autoclavação, como vitaminas e proteínas termossensíveis.
• Também é utilizada para separar diferentes tipos de microrganismos e para coletar amostras microbianas.
• Um dos primeiros indícios de que os vírus realmente existiam foi a observação de que a remoção de bactérias com um filtro não removia necessariamente a capacidade produtora de doença.
AUTOCLAVE
• Método confiável e de primeira escolha
• Modo de ação � esteriliza por termocoagulaçãoatravés do calor latente
Calor latente é a quantidade de calor que uma substancia pode absorver
AUTOCLAVE
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