Espermatogenesis en ausencia de SGOL2: Histología
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Espermatogenesis en ausencia de SGOL2: Espermatogenesis en ausencia de SGOL2: Histología Histología WT WT KO KO - Testículos de menor tamaño en los Sgol2 KOs - Testículos de menor tamaño en los Sgol2 KOs - Histología y estructura de los túbulos Histología y estructura de los túbulos seminiferos normal: seminiferos normal: Células de Leydig, Sertoli y Meiocitos. Células de Leydig, Sertoli y Meiocitos. - Menor número de espermatocitos Menor número de espermatocitos
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WT KO. - Testículos de menor tamaño en los Sgol2 KOs Histología y estructura de los túbulos seminiferos normal: Células de Leydig, Sertoli y Meiocitos. Menor número de espermatocitos. Espermatogenesis en ausencia de SGOL2: Histología. - PowerPoint PPT Presentation
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Espermatogenesis en ausencia de SGOL2: HistologíaEspermatogenesis en ausencia de SGOL2: Histología
WT WT
KOKO
WT WT
KOKO
- Testículos de menor tamaño en los Sgol2 KOs- Testículos de menor tamaño en los Sgol2 KOs- Histología y estructura de los túbulos seminiferos normal:Histología y estructura de los túbulos seminiferos normal:
Células de Leydig, Sertoli y Meiocitos.Células de Leydig, Sertoli y Meiocitos.-Menor número de espermatocitosMenor número de espermatocitos
- Testículos de menor tamaño en los Sgol2 KOs- Testículos de menor tamaño en los Sgol2 KOs- Histología y estructura de los túbulos seminiferos normal:Histología y estructura de los túbulos seminiferos normal:
Células de Leydig, Sertoli y Meiocitos.Células de Leydig, Sertoli y Meiocitos.-Menor número de espermatocitosMenor número de espermatocitos
Alberto M Pendás
Con el fin de caracterizar el mecanismo que subyace a la esterilidad observada llevamos a cabo el estudio histopatologico de testiculos
WT KOWT KOWT KOWT KO
Low Low
MaginifcationMaginifcation
Low Low
MaginifcationMaginifcation
Espermatogenesis en ausencia de SGOL2: Meiosis I-IIEspermatogenesis en ausencia de SGOL2: Meiosis I-II
ACA/ACA/DAPIDAPIACA/ACA/DAPIDAPI
-Acúmulo en p-Metafase II con cromátidas sueltas Acúmulo en p-Metafase II con cromátidas sueltas - Ausencia de congresión en Metaphase IIAusencia de congresión en Metaphase II- Bloqueo meiótico: no supera Anafase IIBloqueo meiótico: no supera Anafase II
-Acúmulo en p-Metafase II con cromátidas sueltas Acúmulo en p-Metafase II con cromátidas sueltas - Ausencia de congresión en Metaphase IIAusencia de congresión en Metaphase II- Bloqueo meiótico: no supera Anafase IIBloqueo meiótico: no supera Anafase II
SGOl2SGOl2//ACA/ACA/DAPIDAPISGOl2SGOl2//ACA/ACA/DAPIDAPI
Metaphase IMetaphase I
Metaphase IIMetaphase II
Alberto M Pendás
De forma mas precisa llevamos a cabo el analisis citogenético de la espermatogenesis mediante squash/inmunofluorescencia.-La primera observación mas llamativa es - acumulación de MII-Pero metafase I normal-Ausencia de Congresión en MII-Bloqueo no supera Anafase II
Metaphase IMetaphase I
Anaphase IAnaphase I
Metaphase IMetaphase I
Anaphase IAnaphase I
SYCP3SYCP3//ACA/ACA/DAPIDAPISYCP3SYCP3//ACA/ACA/DAPIDAPIWT KOWT KOWT KOWT KO
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
0,3
0,35
0,4
KO WT
Interkinetochore distance (μm)
Espermatogenesis en ausencia de SGOL2: Estadio?Espermatogenesis en ausencia de SGOL2: Estadio?
- Profase I Normal (Lepto-Diacinesis): Profase I Normal (Lepto-Diacinesis): SYCP3 SYCP3 - Aumento de la distancia Intercinetocórica en Metaphase IAumento de la distancia Intercinetocórica en Metaphase I-Alteración molecular responsable de laAlteración molecular responsable de la falta de cohesión en MI: falta de cohesión en MI: liberación prematura de REC8 entre Metafase I y Anafase Iliberación prematura de REC8 entre Metafase I y Anafase I
- Profase I Normal (Lepto-Diacinesis): Profase I Normal (Lepto-Diacinesis): SYCP3 SYCP3 - Aumento de la distancia Intercinetocórica en Metaphase IAumento de la distancia Intercinetocórica en Metaphase I-Alteración molecular responsable de laAlteración molecular responsable de la falta de cohesión en MI: falta de cohesión en MI: liberación prematura de REC8 entre Metafase I y Anafase Iliberación prematura de REC8 entre Metafase I y Anafase I
Metaphase IMetaphase I
Anaphase IAnaphase I
Metaphase IMetaphase I
Anaphase IAnaphase I
REC8REC8//ACA/ACA/DAPIDAPIREC8REC8//ACA/ACA/DAPIDAPI
Alberto M Pendás
Para diseccionar el estadio en el cual se comienzan a producir las anomalías que dan lugar a este bloqueo en MII.....Estudiamos de forma mas detallada la División I (profase a MI con SYCP3)....- Se comprobo que la pérdida de cohesión en las cromatidas se manifiesta tempranamente en un aumento de la distancia interkinetocorica en Anafase Finalmente comprobamos que la alteración molecular responsable al defecto en cohesión es debida a una liberación prematura de REC8
KOKOKOKO
WTWTWTWT
Pro-metaphase II Metaphase IIPro-metaphase II Metaphase IIPro-metaphase II Metaphase IIPro-metaphase II Metaphase II
Ausencia de SGOL2 provoca Ausencia de SGOL2 provoca Activación del Activación del checkpoint de checkpoint de huso mitóticohuso mitótico en metafase II en metafase II
Ausencia de SGOL2 provoca Ausencia de SGOL2 provoca Activación del Activación del checkpoint de checkpoint de huso mitóticohuso mitótico en metafase II en metafase II
Prometaphase I Metaphase I Metaphase I Anaphase I Metaphase IIMetaphase II
La ausencia de SGOL2 provoca la activación del La ausencia de SGOL2 provoca la activación del checkpoint de huso mitóticocheckpoint de huso mitótico en metafase IIen metafase II La ausencia de SGOL2 provoca la activación del La ausencia de SGOL2 provoca la activación del checkpoint de huso mitóticocheckpoint de huso mitótico en metafase IIen metafase II
Alberto M Pendás
La ausencia de SGOL2 provoca la activación del checkpoint de huso mitótico en metafase II
La deficiencia en SGOL2 La deficiencia en SGOL2 provoca la formación de provoca la formación de espermátidas aberrantes:espermátidas aberrantes:
EsterilidadEsterilidad
La deficiencia en SGOL2 La deficiencia en SGOL2 provoca la formación de provoca la formación de espermátidas aberrantes:espermátidas aberrantes:
EsterilidadEsterilidad
KOKOKOKO
Espermatogenesis en ausencia de SGOL2Espermatogenesis en ausencia de SGOL2
Alberto M Pendás
La ausencia de segregacíón como consecuencia de la deficiencia en SGOL2 provoca la formación de espermatidas aberrantes
WTWTWTWT
KOKOKOKO
- Los ratones mutantes Sgol2 Los ratones mutantes Sgol2
ovulan normalmenteovulan normalmente
- Los ratones mutantes Sgol2 Los ratones mutantes Sgol2
ovulan normalmenteovulan normalmente
Presentan un defecto en la Presentan un defecto en la
cohesión centroméricacohesión centromérica
Presentan un defecto en la Presentan un defecto en la
cohesión centroméricacohesión centromérica
Oogenesis en ausencia de SGOL2Oogenesis en ausencia de SGOL2
