ERRADICACIÓN CON MICROONDAS COMERCIALES DE

Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2

ERRADICACIÓN CON MICROONDAS COMERCIALES DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2

I.-JUSTIFICACIÓN

II.-ANTECEDENTES

III.-OBJETIVOS

IV.-MATERIALES Y MÉTODOS

V.-RESULTADOS Y DISCUSIÓN

VI.-CONCLUSIONES

VII.-BIBLIOGRAFÍA

ELMELÓN

Cucumis melo L.

(Fuente: Zapata, M., et al, 1989)

PRINCIPALES PAÍSES EUROPEOS CON SUPERFICIESDEDICADAS AL CULTIVO DEL MELÓN: ESPAÑA;

ITALIA; FRANCIA; GRECIA; PORTUGALY LOS PAÍSES BAJOS.

ESPAÑA ES LA PRINCIPAL PRODUCTORA, EXPORTADORA Y CONSUMIDORA DE MELÓN

EN TODA EUROPA.

EL MELÓN ES UNA FRUTA MUY IMPORTANTE EN TODO EL MUNDO.

Fuente: www.siea.sagarpa.gob.mx/InfOMer/analisis/anmelon.

Fuente: www.larural.com y Soriano-Martín, M. L. et al, 2001

CASTILLA LA MANCHA ES LA COMUNIDADAUTÓNOMA QUE MÁS MELONES

DE TIPO ESPAÑOL PRODUCE

CASTILLA LA MANCHA ES UNA DE LASMAYORES ÁREAS DE CULTIVO DE

MELÓN AL AIRE LIBRE DEL MUNDO

FUSARIOSIS VASCULAR

AMARILLAMIENTO(YELLOWS)

YMARCHITAMIENTO

(WITLS)

Fusarium oxysporum f. sp. melonis

MÉTODOS CULTURALESMÉTODOS BIOLÓGICOSMÉTODOS QUÍMICOSMÉTODOS FÍSICOS

SEVERIDAD DE LA FUSARIOSIS VASCULAR

GRAN SENSIBILIDAD DEL MELÓNA LA ENFERMEDAD.

DISMINUCIÓN DE LAPRODUCCIÓN HASTA EN UN 90 %.

RAPIDEZ DE PROPAGACIÓN.

DIFICULTAD DE CONTROL DE Fom.

DIFÍCIL ESTERILIZACIÓN DEL MATERIALUTILIZADO EN LA OBTENCIÓN DE PLÁNTULAS.

ESTRUCTURAS DE RESISTENCIA PERSISTENTES.

REUTILIZACIÓN DE BANDEJAS DE ALVÉOLOS.

DIFÍCIL APLICACIÓN DE MÉTODOS DE CONTROL

TRATAMIENTO FÍSICO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis

REDUCCIÓN DE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO

REDUCCIÓN DE LA PATOGENICIDAD

ERRADICACIÓN DEL PATÓGENO

INFLUENCIA DE LAS MICROONDAS SOBRE UNA SUSPENSIÓN DE Fom EN LAVIABILIDAD Y PATOGENICIDAD

DEL PATÓGENO

INFLUENCIA DE LAS MICROONDASSOBRE UN SUBSTRATO INFESTADO

CON Fom EN LA VIABILIDAD DEL INÓCULO

TRATAMIENTO CON MICROONDAS DE SUSPENSIONES DE CONIDIASDE Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2

MEDIOS DE CULTIVO

ESTERILIZACIÓN DEL MATERIAL

PRODUCCIÓN DE INÓCULO

TRATAMIENTO TÉRMICO CON MICROONDAS

VIABILIDAD DEL INÓCULO

C R

PDA

CPD

AGAR-JUGOV8

AGAR-AGUA1 ‰

MEDIOS DECULTIVO

AGUADESTILADA

ESTÉRIL

S

P

L

PDA

VERTIDO DEL PDA EN PLACAS PETRI

CPD

MATRACES CON CPD PREPARADOSPARA EL REPICADO DEL HONGO

AGAR-JUGO V8

AGAR-AGUA AL 1 ‰

AGAR-AGUA UTILIZADO PARA LAS DILUCIONES

AGUA DESTILADA ESTÉRIL

AGUA UTILIZADA PARAREALIZAR LAS SUSPENSIONES L

S P

ESTERILIZACIÓN DEL MATERIAL

AUTOCLAVE USADO PARA ESTERILIZAR.MATERIAL PROTEGIDO CON PAPEL DE ALUMINIO. S L

P

1.-REPICADOEN PDA

2.-REPICADOEN CPD

3.-FILTRADODEL

HONGO

4.-DENSIDADDE INÓCULO

PRODUCCIÓNDE

INÓCULO

5.-AJUSTEDE LA

CONCENTRACIÓN

S L

P

REPICADO DEL HONGO EN PDA

DESARROLLO DEL HONGO EN PDA.ESTUFA DONDE SE MANTIENEN LAS PLACAS PETRI.

REPICADO DEL HONGO EN CPD

FILTRADO DEL HONGO

CUANTIFICACIÓN DE LA DENSIDAD DE INÓCULO

CUANTIFICACIÓN DE LA DENSIDAD DE INÓCULO

AJUSTE DE LA CONCENTRACIÓN DE INÓCULO

V · C = V’ · C’[Siendo: V→Volumen; C→Concentración]

L

S P

TRATAMIENTO TÉRMICO CON MICROONDAS

LP

VIABILIDAD DEL INÓCULO

10 ml DE INÓCULO

1 ml(DILUCIÓN 10-1)

1 ml(DILUCIÓN 10-4)

1 ml(DILUCIÓN 10-2)

1 ml(DILUCIÓN 10-3)

0.1 ml 0.1 ml 0.1 ml0.1 ml

0.1 ml 0.1 ml

DILUCIONES

L

VIABILIDAD DEL INÓCULO

CONTEO DE LAS UFC

R L

TRATAMIENTO CON MICROONDAS DE SUBSTRATO INFESTADOCON Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2

MEDIOS DE CULTIVO

ESTERILIZACIÓN DEL MATERIAL

PRODUCCIÓN DE INÓCULO

INFESTACIÓN DEL SUBSTRATO YTRATAMIENTO TÉRMICO CON MICROONDAS

VIABILIDAD DEL INÓCULO

SUBSTRATO Y MINIBANDEJAS

C R

ESTERILIZACIÓN DE SUBSTRATO Y MINIBANDEJAS

S

S

INFESTACIÓN DE SUBSTRATO YTRATAMIENTO TÉRMICO CON MICROONDAS

VIABILIDAD DEL INÓCULO

1 ml(DILUCIÓN 10-1)

1 ml(DILUCIÓN 10-4)

1 ml(DILUCIÓN 10-2)

1 ml(DILUCIÓN 10-3)

0.1 ml 0.1 ml 0.1 ml0.1 ml

0.1 ml 0.1 ml

DILUCIONES

9 ml DE INÓCULO

S

R S

VIABILIDAD DEL INÓCULO

CONTEO DE LAS UFC

EFECTO DE LA IRRADIACIÓN CON MICROONDAS EN LA INCIDENCIADE LA FUSARIOSIS VASCULAR. (PRUEBAS DE PATOGENICIDAD).

MEDIOS DE CULTIVO

ESTERILIZACIÓN DEL MATERIAL

PRODUCCIÓN DE INÓCULO

GERMINACIÓN Y SIEMBRADE SEMILLAS DE MELÓN

SUBSTRATO, VERMICULITA Y PAPEL SECANTE

TRATAMIENTO TÉRMICOCON MICROONDAS

INOCULACIÓN Y TRANSPLANTE

EVALUACIÓN DE LA INCIDENCIA Y SEVERIDADC R

ESTERILIZACIÓN DE SUBSTRATO,VERMICULITA Y PAPEL SECANTE

P

GERMINACIÓN Y SIEMBRA DE SEMILLAS DE MELÓN

P

P

INOCULACIÓN Y TRANSPLANTE

P

INCIDENCIA Y SEVERIDAD DE LA ENFERMEDAD

R

0"10"

30"60"

180"

1000W

500W

100W

246,7

233,3

218,3

178,3

103,3

246,7

198,3

145

00

246,7

151,7

00

0

0

50

100

150

200

250

UFC

Tiempo (s)

Potencia (W)

Media de unidades formadoras de colonias (UFC) por mililitro en suspensiones de conidias de Fom raza 1.2 tratadas térmicamente con energía microondas a diferentes

potencias y tiempos de exposición para la dilución de 10-4.

1000W

500W

100W

TRATAMIENTO CON MICROONDAS DE SUSPENSIONESDE CONIDIAS DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2

S L

ENERGÍA(Julios)

POTENCIA x TIEMPO APLICADO

(Vatios x segundos)

UFC reales/ml

(en la dilución de 10-2)

UFC reales/ml

(en la dilución de 10-4) (1)

0 Potencia x 0s Incontables 2467000 a1000 100W x 10s Incontables 2333000 a3000 100W x 30s Incontables 2183000 ab5000 500W x 10s Incontables 1983000 abc6000 100W x 60s Incontables 1783000 bcd10000 1000W x 10s Incontables 1517000 cde15000 500W x 30s Incontables 1450000 de18000 100W x 180s Incontables 1033000 e

30000 a 500W x 60s 0 030000 b 1000W x 30s 0 060000 1000W x 60s 0 090000 500W x 180s 0 0

180000 1000W x 180s 0 0

Media de unidades formadoras de colonias (UFC) reales por mililitro en suspensiones de conidias de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2, tratadas térmicamente con el

microondas a diferentes energías.

(1) Valores en columnas seguidos de letras diferentes indican diferencias significativas al nivel 95% (p ≤ 0.05).

TRATAMIENTO CON MICROONDAS DE SUSPENSIONESDE CONIDIAS DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2

S

L

0"10"

30"60"

180"

1000W

500W

100W

80

66

47,6

27,2

16,4

80

43

21,2

0

0

80

24,2

0

00

0

10

20

30

40

50

60

70

80

UFC

Tiempo (s)

Potencia (W)

Media de UFC por gramo de substrato seco infestado con suspensiones de conidias de Fom raza 1.2 tratadas térmicamente con energía microondas a diferentes potencias y tiempos de

exposición para la dilución de 10-4.

1000W

500W

100W

TRATAMIENTO CON MICROONDAS DE SUBSTRATOINFESTADO CON Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2

P S

TRATAMIENTO CON MICROONDAS DE SUBSTRATOINFESTADO CON Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2

ENERGÍA(Julios)

POTENCIA x TIEMPO APLICADO

(Vatios x segundos)

UFC reales/ml

(en la dilución de 10-2)

UFC reales/ml

(en la dilución de 10-4) (1)

0 Potencia x 0s Incontables 800000 a1000 100W x 10s Incontables 660000 b3000 100W x 30s Incontables 476000 c5000 500W x 10s Incontables 430000 c6000 100W x 60s Incontables 272000 d

10000 1000W x 10s Incontables 242000 d15000 500W x 30s Incontables 212000 de18000 100W x 180s Incontables 164000 e

30000 a 500W x 60s 0 030000 b 1000W x 30s 0 060000 1000W x 60s 0 090000 500W x 180s 0 0180000 1000W x 180s 0 0

Media de unidades formadoras de colonias (UFC) reales por gramo de substrato seco infestado con Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2, tratadas térmicamente con

el microondas a diferentes energías.

(1) Valores en columnas seguidos de letras diferentes indican diferencias significativas al nivel 95% (p ≤ 0.05).

P

S

EFECTO DE LA IRRADIACIÓN CON MICROONDAS EN LA INCIDENCIADE LA FUSARIOSIS VASCULAR. (PRUEBAS DE PATOGENICIDAD).

C P

Curvas de progreso de la enfermedad tras infectar las plantas con inóculo (Valores medios)

0

20

40

60

80

100

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22DÍAS

ÍND

ICE

DE

SE

VE

RID

AD

Inóculo sin irradiar

100 W y 10 s

100 W y 30 s

100 W y 60 s

100 W y 180 s

500 W y 10 s

500 W y 30 s

500 W y 60 s

500 W y 180 s

1000 W y 10 s

1000 W y 60 s

1000 W y 180 s

0 1000 3000 5000 6000 10000 15000 18000 30000 60000 1800001255 1103,5 1055 1026,8 976 947 1164 840 775 0 01070 892,5 1097,5 1055 1230,6 1192 987,5 910 830,6 0 01110 1037,5 868 964 930 895 1042,5 768 782,5 0 01040 1047,5 1047 1042,4 913,9 991,5 910 904 737,5 0 0

Superficie bajo la curva de severidad del ataque.(∑días x índice de severidad)

ENERGÍA (Julios)

ENERGÍA(Julios)

SUPERFICIE

(u2) (1)0 1119,2 a

1000 1020,6 a3000 1021 a5000 1022,4 a6000 1012,3 a10000 1006,8 a15000 1026,2 a18000 855,2 b30000 781,5 b60000 0 c

180000 0 c

Superficie media bajo la curva de severidad del ataque.(∑días x índice de severidad)

(1) Valores en columna seguidos de letras difeferntes indican diferencias significativas al nivel 95 % (p ≤ 0,05).

EFECTO DE LA IRRADIACIÓN CON MICROONDAS EN LA INCIDENCIADE LA FUSARIOSIS VASCULAR. (PRUEBAS DE PATOGENICIDAD).

C P

TRATAMIENTO CON MICROONDAS: TÉCNICA ECOLÓGICA QUE ERRADICAA Fom DE LAS BANDEJAS DE ALVÉOLOS USADAS PARA LA PROPAGACIÓNDEL MELÓN.

SE PUEDE ESTABLECER EL TIEMPO NECESARIO PARA LA ERRADICACIÓNDEL PATÓGENO. EN ESTE CASO, SE HA ERRADICADO EL HONGO, TANTODE LAS SUSPENSIONES DE CONIDIAS COMO DEL SUBSTRATO, A PARTIRDE LA APLICACIÓN DE 30000 J.

CONCLUSIONES

A MAYOR ENERGÍA APLICADA, MENOR ES EL NÚMERO DE UFC QUE SEDESARROLLAN DESPUÉS DE LA IRRADIACIÓN.

A MAYOR ENERGÍA APLICADA, MAYOR ES EL RETRASO DE LA APARICIÓNDE LOS SÍNTOMAS DE LA ENFERMEDAD.

MUCHAS GRACIASPOR SU ATENCIÓN