En el ao 1996 Laboratorios Beta cre un rea de Investigacin y Desarrollo en Biotecnologa a travs de un Convenio de Transferencia de Tecnologa con el Instituto de Biologa y Medicina Experimental (IBYME-CONICET) y nuestra Compaa. Este proyecto tuvo como objetivo central la creacin de una plataforma biotecnolgica adecuada para la formacin de recursos humanos altamente calificados y la elaboracin de productos biotecnolgicos farmacuticos para ser utilizados en teraputica humana.El desafo inicial consisti en desarrollar insulina humana recombinante mediante un procedimiento novedoso y competitivo. Actualmente el sector de I&D en Biotecnolgico esta conformado por los laboratorios de biologa molecular y cultivo de clulas; fermentacin microbiolgica y purificacin de protenas. En el ao 2005 fue construida una planta piloto de bioprocesos para llevar a cabo el escalado de los procesos de produccin. En la actualidad se encuentran en una etapa muy avanzada del desarrollo, otros productos relacionados a diabetes y enfermedades osteoarticulares.

A. Nuestras actividades en el Laboratorio de Biologa Molecular

Expresin de protenas recombinantes

El laboratorio de Biologa Molecular esta dedicado al desarrollo de microorganismos y clulas de mamferos modificados genticamente con el objetivo de obtener una alta productividad de protenas recombinantes

A.1 Las Levaduras como sistema de expresin de protenas

Para maximizar la productividad de diversas protenas de inters, Laboratorios Beta utiliza a las Levaduras Metilotrficas como sistema de expresin. Esta lnea de trabajo le ha permitido a la compaa desarrollar la siguiente plataforma tecnolgica:

Expresin de Protenas en levaduras metilotrficas

Clonado de genes de inters en diversos vectores de expresin para transformar levaduras;

Seleccin de las cepas de mayor expresin entre las levaduras recombinants;

Regulacin de la expresin de los genes heterlogos a travs de promotores altamente inducibles o secuencias regulables metabolicamente o una combinacin de ambos;

Modificacin gentica de levaduras con chaperones (PDI) para mejorar el plegamiento y la secrecin de protenasheterlogas;

Creacin de bancos de clulas maestros y de trabajo.

A.2 Fermentacin de Levaduras

La optimizacin del proceso fermentativo a escala de laboratorio para lograr procesos de alto rendimiento incluye entre otras las siguientes actividades

Induccin de clones en cultivo de Erlenmeyers para seleccionar aquellos con altos niveles de expresin del pptido de inters

Fermentacin de los clones seleccionados en biorecatores de 2 litros para establecer las condiciones ptimas de cultivo para cada recombinante entre las que podemos mencionar, medio de cultivo, pH., temperatura, contenido de oxigeno, velocidad de crecimiento, etc.)

Escalado del proceso a un bioreactor de 20 litros.

El producto obtenido, as como las impurezas que lo acompaanson caracterizados y cuantificados por by SDS-PAGE, Western Blot, yHPLC.

A.3Expresin de protenas en clulas de mamferos

Aquellas protenas que poseen residuos de hidratos de carbono complejos en sus estructuras deben ser expresadas en clulas de mamferos. En nuestro Laboratorio se ha optimizado la expresin de glicoprotenas recombinantes en clulas CHO/dhfr-. En el Laboratorio de Biologa Molecular y Cultivo de Clulas se desarrolla y se optimiza la expresinde glicoprotenas para uso teraputico humano mediante la transfeccin de manera estable de clulas CHO.

A.4 Procesos de Purificacin

Las siguientes etapas son llevadas a cabo en el Laboratorio de Desarrollos Downstream de nuestra unidad de I&D:

Captura del principio activo, purificacin intermedia y polishing.

Seleccin del relleno cromatogrfico mas apropiado para la separacin de impurezas asociadas al proceso y contaminantes industriales,

tratamientos qumicos o enzimticos de los pptidos,

cristalizacin,

*Caracterizacin y anlisis fisicoqumico del principio activo y de las impurezas obtenidas,

* El control de calidad del principio activo incluye los siguientes ensayos

A.5Control de Productos Biotecnolgicos

Contaminantes del Husped

cidos Nucleicos y Protenas del Husped por PCR, y ELISA, respectivamente.

Ensayos Biolgicos

Ensayos de viabilidad celular

Medicin de actividad biolgica utilizando una amplia diversidad de lneas celulares.

B. Nuestra actividad en la Planta Piloto

Escalado de los procesos Upstream y Downstream

Los procesos biotecnolgicos pueden sufrir complicaciones como consecuencia de los cambio de volumen, especialmente cuando se pasa de la escala laboratorio a una productiva. Uno de los objetivos primordiales de laplanta piloto de bioprocesoses comprobar la consistencia de los procesos desarrollados y la reproducibilidad de las distintas etapas de la manufactura. Adicionalmente es posible determinar con bastante precisin los rendimientos de cada una de las etapas y los costos asociados al proceso. El producto obtenido en la planta piloto es suficiente para llevar a cabo una completa caracterizacin fisicoqumica y biolgica del producto de inters, as como los ensayos de estabilidad tanto del principio activo como del producto terminado

En la planta piloto de bioprocesos de Laboratorios Beta es posible llevar a cabo las siguientes actividades

B.1. Upsteam:

escalado de la fermentacin hasta 300-litros,

estudio comparativo de las principales variables entre las distintas escalas de trabajo,

estandarizacin del proceso de fermentacin y de los procedimientos decontrol,

separacin de clulas mediante centrifugacin y filtracin tangencial,

rendimiento final del proceso,

evaluacin de la calidad del producto y rendimiento del proceso.

B.2. Downstream:

escalado de la purificacin a columnas industriales,

control del proceso de purificacin,

control de calidad del principio activo,

evaluacin de los rendimientos.

C. Lnea de Productos Biotecnolgicos en desarrollo

Insulina y anlogos de insulina para el tratamiento de la diabetes mellitus,

Insulina y factores de crecimiento para cultivo de clulas,

Factores de crecimiento para el tratamiento de heridas,

Antagonistas del TNF,

Proteasas

D. Patentes otorgadas

Expression of a human insulin precursor in Pichia pastoris USP 7,091,032

Cepa de Levaduras Metilotrficas Recombinantes Productoras de un Precursor de Insulina Humana, Construcciones de ADN y Mtodos para Obtener La Cepa. AR025646B1;IMP 267651.

Procedimientos para Incrementar el Rendimiento de Protenas Recombinantes Producidas en Levaduras Metilotrficas. AR040162B1.

Patentes pendientes de aprobacin

Cepa de Levaduras Metilotrficas Recombinantes productoras del Homodmero BB de PDGF Humano, Construcciones de ADN y Mtodo para obtener dicha cepa. P 0101105599.

Un mtodo Para Producir un Precursor Anlogo de Insulina Humana y Cepa de Levadura Metilotrfica que lo Produce. AR 041517 A1.

Cepa de Levadura Transformada productora de Insulina Humana y Anlogos de Insulina Humana, vectores y Mtodos para la Produccin de Heterodmeros y Mtodos para la Obtencin de Insulina Humana o sus Anlogos. P 040101283

Un procedimiento para obtener insulina asprtica que utiliza una cepa de levaduras de Pichia pastoris P-090102686