Elektroforesis

download Elektroforesis

If you can't read please download the document

Transcript of Elektroforesis

Elektroforesis Elektroforesis, metode partikel bermuatan bergerak melalui media dengan menggunakanmedan listrik Electrophoresis Capillary Electrophoresis Gel Elektrophoresis; DNA electrophoresis Protein electrophoresis Two-dimensional gel electrophoresis Capillary Electrophoresis Efisiensi tinggi teknik pemisahan yang menggunakan sempit menanggung leburan silikakapiler memisahkan molekul besar dan kecil. Pemisahan molekul berdasarkan perbedaan muatan dan ukuran tinggi kekuatan medan listrik.Keuntungan dari CEKecepatan analisis Tinggi efisiensi pemisahan Sedikit atau tidak ada sampel pra-perawatan yang diperlukan Kecil volume sampel (jumlah sampel nL mungkin) Biaya rendah (untuk tenaga kerja, volume pelarut, pembuangan limbah, fase stasioner, dll) Mudah dibersihkan dan diganti kapilerKeterbatasan CE dan mempertimbangkan untuk alternatif teknik pemisahan Sangat volatile dan stabil pada suhu tinggi analit? Berapa banyak analit harus dipisahkan? Analit larut dalam pelarut polar?Tergantung pada jenis kapiler dan elektrolit yang digunakan, teknologi CE dapat dibagi ke dalam beberapa teknik pemisahan Zona kapiler Elektroforesis (CZE) atau free-solusi yang CE (FSCE) Fokus isoelektrik kapiler (CIEF) Kromatografi misel kapiler elektrokinetik (MEKC ATAU MEKC) Gel Elektroforesis kapiler (CGE) CapillaryMenyatu-silika (SiO2 amorf) 10 - 100 cm 25 - 10 pM i.d. Permukaan luar: Polimida Pelapisan dinamis kapiler Permukaan kapiler bisa dilapisi secara dinamis oleh aditif mempekerjakan, sepertisurfaktan, garam zwitterionic atau polimer linier hidrofilik ke buffer sistem. Pelapisan permanen kapiler Permukaan kapiler dapat dilapisi oleh ikatan kimia polimerPelapisan dinamis kapilerPB-PVS (polybrene dan poli (vinil sulfonat)) untuk analisis protein dan peptida DDAB (N, N-didodecyl-N, N-dimethylammonium bromida) untuk pemisahan protein dasar PHEA (Poli-N-hydroxyethylacrylamide) untuk aplikasi dalam pemisahan DNA dan protein Poli (HEMA) (poli (hidroksietil metakrilat)), poli (DEGMA) (poli (monomethacrylate dietilena glikol)), poli (TEGMA) (poli (monomethacrylate glikol trietilen)) untuk analisis protein Triton X-100, Brij 35, Tween 20, bab (3 - [(3-cholamidopropyl)dimethylammonio]-1propanesulfonate) sebagai surfaktan yang diselidiki dalam mencegahprotein yang mengikat ke permukaan leburan silika HPMC (hidroksipropilmetilselulosa), HEC (hydroxyethylcellulose), PVA (poli (vinil alkohol)) dan poli (DMAA) (poli (dimethylacrylamide)) untuk menghambat adsorpsi protein ke dinding silica Sample injection Hidrodinamik injeksi: Penurunan tekanan harus diterapkan sepanjang kapiler baik dengan tekanan yang tinggi pada sisi injeksi, vakum di sisi detektor, atau tekanan hidrostatik dengan memanfaatkangravitasi Jika introduksi sampel dilakukan dengan injeksi gravitasi: elektrokinetik Injeksi Kapiler dan elektroda terbenam ke dalam larutan sampel dan tegangan tinggi diterapkan. Pada prinsipnya, tegangan menyebabkan gerakan elektroforesis dan electroosmotic. Jumlah spesies i diperkenalkan ke dalam kapiler selama injeksi elektrokinetik terkait dengan berbagai Mobilitas Electroosmotic Electroosmotic adalah pergerakan aliran sebagian besar cairan melalui kapiler relatif ke permukaan biaya yang disebabkan oleh medan listrik. Faktor proporsionalitas kecepatan migrasi ke kekuatan medan listrik dinyatakan sebagaimobilitas elektroforesis mutlak