Elecsys T PlGF - roche.de · preeclampsia.Circulation. 2012 Feb 21;125(7):911-9. doi: 10.1161...
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Biotinylierter monoklonaler Antikörper gegen PlGF PlGF in der Probe Ruthenylierter monoklonaler Antikörper gegen PlGF Streptavidin- beschichteter Mikropartikel 9 min 9 min Messung Ru Ru Ru Testprinzip: einstufiger Sandwich-Assay Elecsys T PlGF Testbeschreibung Elektrochemilumineszenz-Immunoassay (ECLIA) zur quantitativen In-vitro-Bestimmung des humanen PlGF (plazentarem Wachstumsfaktors) in Humanserum. Indikation • Präeklampsie ist eine ernstzunehmende Erkrankung, die durch eine Hypertonie sowie durch eine Proteinurie ab der 20. Schwangerschaftswoche angezeigt wird und bei 3 – 5 % der Schwangeren auftritt. • Präeklampsie ist eine der Hauptursachen für fetale und maternale Morbidität und Mortalität. • Die Ursache für Präeklampsie scheint eine Funktionsstörung des Endothels zu sein, die in Folge einer Freisetzung von Angiogenesefaktoren in der Plazenta auftritt. Der pro-angiogene Faktor PlGF, steigt bei gesunden Frauen während der ersten beiden Trimester einer Schwangerschaft an und fällt im letzten Trimester der Schwangerschaft ab. Antizyklisch dazu bleibt der anti-angiogene Faktor sFlt-1 während des frühen und mittleren Stadiums der Schwangerschaft gleich und zeigt zum Ende hin einen Anstieg. Charakteristisch für die Erkrankung ist eine niedrigere PlGF-Konzentration sowie eine erhöhte sFlt-1-Konzentration im Blut der betroffenen Patientin. • Eine Kombination aus dem Elecsys PlGF und dem Elecsys sFlt-1-Test kann deshalb zur Bestimmung des sFLT-1/PlGF Quo- tienten verwendet werden. Der Quotient zeigt an, ob eine Präeklampsie vorliegt und ermöglicht eine zuverlässige Abgren- zung einer Präeklampsie von anderen hypertensiven Erkrankungen, erlaubt eine Prognose über den Krankheitsverlauf nach Präeklampsie Diagnose sowie eine Vorhersage und Diagnose bei Vorhandensein partieller klinischer Symptome. • Der sFlt-1/PlGF Quotient erwies sich als besserer Prädikator für Präeklampsie als die jeweilige Bestimmung für sich alleine. Schritt 1 (9 Minuten): Die Probe wird mit einem biotinylierten, mono- klonalen Antikörper gegen PlGF und einem mit Ruthenium-Komplex markierten monoklonalen PlGF-spezifischen Antikörper inkubiert. Es bildet sich ein Komplex aus PlGF gebunden an je einen biotinylierten und einen ruthenylierten Antikörper. Schritt 2 (9 Minuten): Der Komplex aus PlGF gebunden an den biotinylierten und ruthe- nylierten Antikörper wird dann mit Streptavidin-beschichteten Mikro- partikeln inkubiert, sodass der Komplex über Biotin-Streptavidin- Interaktionen an die Festphase bindet. Schritt 3 (Messung): Das Reaktionsgemisch wird in die Messzelle überführt, wo die Mikropartikel auf der Ober- fläche der Elektrode magnetisch fixiert werden. Anschließend werden die ungebundenen Sub- stanzen entfernt. Durch Anlegen einer Spannung wird die Lumineszenzreaktion erzeugt. Dabei wird Licht emittiert und über einen Photomultiplier gemessen. Die Signalstärke verhält sich propor- tional zur Analytkonzentration in der Probe.
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Biotinylierter monoklonaler
Antikörper gegen PlGF
PlGFin der Probe
Ruthenylierter monoklonaler
Antikörper gegen PlGF
Streptavidin- beschichteter Mikropartikel
9 min9 min
Messung
RuRuRu
Testprinzip: einstufiger Sandwich-Assay
ElecsysT PlGFTestbeschreibungElektrochemilumineszenz-Immunoassay (ECLIA) zur quantitativen In-vitro-Bestimmung des humanen PlGF (plazentarem Wachstumsfaktors) in Humanserum.
Indikation• PräeklampsieisteineernstzunehmendeErkrankung,diedurcheineHypertoniesowiedurcheineProteinurieabder 20.Schwangerschaftswocheangezeigtwirdundbei3–5%derSchwangerenauftritt.
• PräeklampsieisteinederHauptursachenfürfetaleundmaternaleMorbiditätundMortalität.• DieUrsachefürPräeklampsiescheinteineFunktionsstörungdesEndothelszusein,dieinFolgeeinerFreisetzungvonAngiogenesefaktoreninderPlazentaauftritt.Derpro-angiogeneFaktorPlGF,steigtbeigesundenFrauenwährenddererstenbeidenTrimestereinerSchwangerschaftanundfälltimletztenTrimesterderSchwangerschaftab.Antizyklischdazubleibtderanti-angiogeneFaktorsFlt-1währenddesfrühenundmittlerenStadiumsderSchwangerschaftgleichundzeigtzumEndehineinenAnstieg.CharakteristischfürdieErkrankungisteineniedrigerePlGF-KonzentrationsowieeineerhöhtesFlt-1-KonzentrationimBlutderbetroffenenPatientin.
• EineKombinationausdemElecsysPlGFunddemElecsyssFlt-1-TestkanndeshalbzurBestimmungdessFLT-1/PlGFQuo-tientenverwendetwerden.DerQuotientzeigtan,obeinePräeklampsievorliegtundermöglichteinezuverlässigeAbgren-zungeinerPräeklampsievonanderenhypertensivenErkrankungen,erlaubteinePrognoseüberdenKrankheitsverlaufnachPräeklampsieDiagnosesowieeineVorhersageundDiagnosebeiVorhandenseinpartiellerklinischerSymptome.
• DersFlt-1/PlGFQuotienterwiessichalsbessererPrädikatorfürPräeklampsiealsdiejeweiligeBestimmungfürsichalleine.
Schritt 1(9Minuten):DieProbewirdmiteinembiotinylierten,mono-klonalenAntikörpergegenPlGFundeinemmitRuthenium-KomplexmarkiertenmonoklonalenPlGF-spezifischenAntikörperinkubiert.EsbildetsicheinKomplexausPlGFgebundenanjeeinenbiotinyliertenundeinenruthenyliertenAntikörper.
Schritt 2(9Minuten):DerKomplexausPlGFgebundenandenbiotinyliertenundruthe-nyliertenAntikörperwirddannmitStreptavidin-beschichtetenMikro-partikelninkubiert,sodassderKomplexüberBiotin-Streptavidin-Interaktionen an die Festphase bindet.
Schritt 3(Messung):DasReaktionsgemischwirdindieMesszelleüberführt,wodieMikropartikelaufderOber-flächederElektrodemagnetischfixiertwerden.AnschließendwerdendieungebundenenSub-stanzenentfernt.DurchAnlegeneinerSpannungwirddieLumineszenzreaktionerzeugt.DabeiwirdLichtemittiertundübereinenPhotomultipliergemessen.DieSignalstärkeverhältsichpropor-tionalzurAnalytkonzentrationinderProbe.
BestellinformationenProdukt Inhalt BestellnummerElecsysT PlGF 100Tests 05144671190PlGF Cal Set 4×1mL 05144701190PreciControlMultimarker Je3×2mL 05341787190
ElecsysT PlGF Test-CharakteristikaTestdauer 18MinutenTestprinzip einstufigerSandwich-AssayKalibration 2-PunktProbenmaterial SerumProbenvolumen 50μlProbenstabilität gekühlt(2-8°C):48StundenhaltbarNachweisgrenzeLoD <3pg/mLMessbereich 3–10000pg/mLRückführbarkeit DieseMethodewurdemittelseineshandelsüblichenPlGFTestesstandardisiert.Zwischenpräzision(CLSI) (Reproduzierbarkeit)
MODULAR ANALYTICS E170, cobas e601/cobas e602Modul: 2,4–4,6%(97,4–4255pg/mL)cobas e411Analyzer: 3,6–4,1%(4,55–342pg/mL)
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07913460990➀1215
Referenzwerte Versuchsgruppe:NormotoneFrauenmitEin-Kind-Schwangerschaften(N=877)Schwangerschafts-woche
N 5. Perzentil
PlGF (pg/mL)
5. PerzentilsFlt-1
(pg/mL)
5. PerzentilsFlt-1/PlGF
50. Perzentil
PlGF (pg/mL)
50. PerzentilsFlt-1
(pg/mL)
50. PerzentilsFlt-1/PlGF
95. Perzentil
PlGF (pg/mL)
95. PerzentilsFlt-1
(pg/mL)
95. PerzentilsFlt-1/PlGF
10+0–14+6 246 28,8 652 9,27 52,6 1328 24,8 122 2501 54,6
15+0–19+6 157 66,2 708 3,51 135 1355 10,5 289 2807 25,7
20+0–23+6 217 119 572 1,82 264 1299 4,92 605 2997 14,6
24+0–28+6 246 169 618 0,945 465 1355 3,06 1117 3205 10,0
29+0–33+6 319 114 773 0,941 471 1742 3,75 1297 5165 33,9
34+0–36+6 224 78,0 992 1,23 284 2552 9,03 984 7363 66,4
37+0–Niederkunft 176 54,4 1533 2,18 191 3485 19,6 862 9184 112
Literatur1VerlohrenSetal.AnautomatedmethodforthedeterminationofthesFlt-1/PlGFrationintheassessmentofPre-eclampsia.AmJObstetGynecol2010;202:(161).e1-11
2Maynardetal.Excessplacentalsolublefms-liketyrosinekinase1(sFlt1)maycontributetoendothelialdysfunction,hypertension,andproteinuriainpreeclampsia.JClinInvest.2003Mar;111(5):649-58
3VerlohrenSetal.ThesFlt-1/PlGFratioindifferenttypesofhypertensivepregnancydisordersand its prognostic potential in preeclamptic patients AmJObstetGynecol.2012Jan;206(1):58.e1-8.doi:10.1016/j.ajog.2011.07.037.
4Ranaetal.Angiogenicfactorsandtheriskofadverseoutcomesinwomenwithsuspected preeclampsia.Circulation.2012Feb21;125(7):911-9.doi:10.1161CIRCULATIONAHA.111.054361
5Verlohrenetal.Newgestationalphase-specificcutoffvaluesfortheuseofthesolublefms-liketyrosinekinase-1/placentalgrowthfactorratioasadiagnostictestforpreeclampsia.Hyperten-sion.2014Feb;63(2):346-52.doi:10.1161/HYPERTENSIONAHA.113.01787
Spezifität und Sensitivität
20 34
110
3838
85
sFlT/PlGF
FrüheGestationsphase (early-onset-Präeklampsie)
SpäteGestationsphase (late-onset-Präeklampsie)
sFlT/PlGF
SSW
Einschluss (Rule in)Spezifität:99,5%;Sensitivität:88,0%DieMutterhathöchstwahrscheinlicheinePräeklampsi
Einschluss (Rule in)Spezifität:95,5%;Sensitivität:58,2%DieMutterhathöchstwahrscheinlicheinePräeklampsie
Vorhersage Einschluss (Rule in) fürdienächstenvierWochen;38,6 % PPV:dieMutterhateinhohesRisikoeinePräeklampsieindennächstenvierWochenzuentwickeln
Vorhersage Einschluss (Rule in) fürdienächstenvier Wochen;38,6 % PPV:dieMutterhateinhohesRisikoeinePräeklampsieindennächstenvierWochenzuentwickeln
Vorhersage Ausschluss (Rule out) fürdienächsteWoche 99,1 % PPV:dieMutterwirdmitgroßerWahrscheinlichkeitkeinePräeklampsieindernächstenWochezuentwickeln
Vorhersage Ausschluss (Rule out) fürdienächsteWoche 99,1 % NPV:dieMutterwirdmitgroßerWahrscheinlichkeitkeinePräeklampsieindernächstenWochezuentwickeln
ElecsysT sFlt-1/PlGF Quotient: Neue Cutoffs
![Amino acid transporter LAT1 in tumor-associated vascular ...patients with bevacizumab, an anti-VEGF antibody, increased the PlGF in plasma [3]. FGF-2 and PlGF were increased in glioblastoma](https://static.fdocuments.net/doc/165x107/609eaca54cba15523b358952/amino-acid-transporter-lat1-in-tumor-associated-vascular-patients-with-bevacizumab.jpg)
![Ausgabe 55 • 03/2018 Diagnostik im Dialog - roche.de · 16 [Produkte & Services] Mehr Tumorzellen im Dissektat – AVENIO Millisect System präzisiert die Mutationsanalyse 18 [Produkte](https://static.fdocuments.net/doc/165x107/5d5bd67088c9934c0a8bcf01/ausgabe-55-032018-diagnostik-im-dialog-rochede-16-produkte-services.jpg)
