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Este trabajo estudia la posibilidad de aumentar el potencial productivo de los sustratos específicos para cultivo de Pleurotus ostrea tus mediante la adición de suplementos proteicos en la fase de inoculación del sustrato. I INDUSTRIA HORTICOLA Efecto de la suplementación del sustrato sobre la cosecha de setas F.J. GEA, A. MARTÍNEZ-CARRASCO Y M.J. NAVARRO Centro de Investigación, Experimentación y Servicios del Champiñón (CIES) Cuenca. [email protected] Aspecto de una piña de Pleurotus ostreatus en un estadio inicial de su desarrollo. Durante los últimos 30 años se ha desarrollado ampliamente el cultivo de Pleurotus, llegando a ser uno de los hongos comestibles más cultivados. El rápido incre- mento de la producción mundial de este hongo se puede explicar por sus sencillas características de cultivo y porque tiene una exce- lente capacidad saprofítica, con un potente sistema enzimático capaz de realizar una eficiente degrada- ción de materiales lignocelulósi- cos y de convertir eficazmente ma- teria orgánica en cuerpos fructífe- ros (Zadrazil et al., 2004). El principal país productor de Pleurotus es China, con una pro- ducción anual superior a las 800.000 toneladas al año. En Eu- ropa, Italia es el principal produc- tor con 25.000 t'año (Zadrazil et al., 2004). En España, la producción to- tal durante la campaña 2006-2007 ha sido de 19.972 toneladas, de las cuales 6.600 t se cosecharon en La Rioja (33,05%) y 13.372 t en Cas- tilla-La Mancha (66,95%) (Gea, en prensa). Con el fin de conseguir una cosecha de setas más elevada, se suelen añadir al sustrato dife- rentes suplementos ricos en proteí- nas, vitaminas, minerales y ele- mentos traza, tales corno harina de soja, alfalfa y otras fuentes de pro- teína (Zadrazil, 1980). Estos su- plementos se liberan gradualmen- te, siendo absorbidos por el mice- lio del hongo, favoreciendo así su propio crecimiento y la formación de cuerpos fructíferos. HORTICULTURA INTERNACIONAL

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Este trabajo estudia la posibilidad deaumentar el potencial productivo de los

sustratos específicos para cultivo dePleurotus ostrea tus mediante la adiciónde suplementos proteicos en la fase de

inoculación del sustrato.

I INDUSTRIA HORTICOLA

Efecto de lasuplementacióndel sustrato sobrela cosecha de setas

F.J. GEA, A. MARTÍNEZ-CARRASCO YM.J. NAVARROCentro de Investigación, Experimentación y Serviciosdel Champiñón (CIES) [email protected]

Aspecto de unapiña de Pleurotusostreatus en unestadio inicial desu desarrollo.

Durante los últimos 30 añosse ha desarrollado ampliamente elcultivo de Pleurotus, llegando aser uno de los hongos comestiblesmás cultivados. El rápido incre-mento de la producción mundialde este hongo se puede explicarpor sus sencillas características decultivo y porque tiene una exce-lente capacidad saprofítica, con unpotente sistema enzimático capazde realizar una eficiente degrada-ción de materiales lignocelulósi-cos y de convertir eficazmente ma-

teria orgánica en cuerpos fructífe-ros (Zadrazil et al., 2004).

El principal país productor dePleurotus es China, con una pro-ducción anual superior a las800.000 toneladas al año. En Eu-ropa, Italia es el principal produc-tor con 25.000 t'año (Zadrazil etal., 2004).

En España, la producción to-tal durante la campaña 2006-2007ha sido de 19.972 toneladas, de lascuales 6.600 t se cosecharon en LaRioja (33,05%) y 13.372 t en Cas-

tilla-La Mancha (66,95%) (Gea,en prensa). Con el fin de conseguiruna cosecha de setas más elevada,se suelen añadir al sustrato dife-rentes suplementos ricos en proteí-nas, vitaminas, minerales y ele-mentos traza, tales corno harina desoja, alfalfa y otras fuentes de pro-teína (Zadrazil, 1980). Estos su-plementos se liberan gradualmen-te, siendo absorbidos por el mice-lio del hongo, favoreciendo así supropio crecimiento y la formaciónde cuerpos fructíferos.

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Tabla 1:Características químicas y biológicas de los sustratosde Pleurotus utilizados.

Control Suplemento A Suplemento CpH (1:5, p/v) 7,95 7,56 7,37Humedad (%) 75,4 74,7 74,1Nitrógeno total (%, s.m.s.) 0,68 1,02 1,28Cenizas (/o, s.m.s.) 7,03 7,97 7,45Materia orgánica (%, s.m.s.) 92,97 92,03 92,55C/N 79,3 52,3 41,9Nematodos Ausencia Ausencia AusenciaÁcaros Ausencia Ausencia AusenciaTrichoderma spp. Ausencia Ausencia Ausencia

TECNOLOGÍA DE PRODUCCIÓN I

Local de cultivode Pleurotusostreatus en plenaproducción.

En este trabajo se ha estudia-do la posibilidad de aumentar elpotencial productivo de los sustra-tos específicos para cultivo dePleurotus ostreatus mediante laadición de suplementos proteicosen la fase de inoculación del sus-trato. Para ello, se ha valorado elrendimiento de sustratos de P. os-treatus suplementados frente asustratos no suplementados. Se harealizado el cálculo de una seriede parámetros, tales como: pesode la cosecha total, peso de la co-secha por lloradas, peso unitariode los cuerpos fructíferos, eficien-cia biológica del sustrato, precoci-dad en la producción, etc.

Materiales y métodosEl ciclo de cultivo se ha lleva-

do a cabo en un invernadero tipotúnel ubicado en el Centro de In-vestigación. Experimentación yServicios del champiñón (CIES,Quintanar del Rey. Cuenca), el cualcubre una superficie total de 104m' (nave de 6,5 x 16 m, con una al-tura al cenit de 2,5 m). Este inver-nadero está equipado con sistemasde humidificación, calefacción/re-

frigeración y recirculación/ventila-ción exterior, lo que permite el con-trol automático de la temperatura,la humedad relativa y la concentra-ción de dióxido de carbono (Exa-fan, S.A., Zaragoza).

Para llevar a cabo este ensayose usaron 120 paquetes de sustratopara cultivo de setas (P. ostreatus).El método utilizado en la elabora-ción del sustrato fue el conocidocomo fermentación aerobia (Muezy Pardo, 2002), y el micelio corres-pondió a la variedad comercial Fun-

gisem K-6 (Micelios FungisemS.A., Autol, La Rioja), aplicandouna tasa de inoculación del 2% so-bre el peso fresco del sustrato.

Se han utilizado dos suple-mentos, añadidos en la fase de ino-culación del sustrato, en una pro-porción del 1% sobre el peso frescodel sustrato:

- Suplemento A. el cual con-tiene proteínas seleccionadas y tra-tadas, aminoácidos específicos yenzimas celulolíticas.

- Suplemento C, elaborado a

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Tabla 2:Eficiencia biológica (valor medio ± desviaciónestándar) de los sustratos ensayados.

Sustrato n Eficiencia biológicaSuplemento A 40 77,10 ± 13,81 c*Control 40 58,04 ± 8,41 aSuplemento C 40 70,58 ± 9,10 bTotal 120 68,58 ± 13,27

p = 0,0000*Letras distintas indican diferencias significativas entre los lotes (p= 0,05).

I INDUSTRIA HORTÍCOLA -7

En esta imagen sepueden apreciarlas diferentesetapas decrecimiento delos primordiosde P. ostreatussurgiendo por unode los orificios defructificación.

base de harina de soja desnaturali-zada y otras fuentes de proteínaorgánica.

La distribución de los paque-tes de sustrato en el interior delinvernadero se realizó según undiseño de bloques al azar, consi-derando únicamente el factor su-plementación, con tres niveles enfunción del tipo de suplemento y40 repeticiones por nivel. Por tan-to, los 120 paquetes se distribuye-ron en tres lotes de 40 paquetescada uno:

- Suplemento A- Control: sustrato de setas

sin suplementos.- Suplemento CLos paquetes de sustrato se

suministraron recubiertos porplástico microperforado (polietile-no), de forma paralelepipédica,con siete orificios de 25 mm dediámetro cada uno. Estos paquetesse pesaron individualmente antesde su entrada en la explotación.

Para la caracterización de lossustratos se realizaron las siguien-tes determinaciones: humedad(MAPA, 1994), pH (Ansorena.

el paquete. Posteriormente, duran-te la fase de fructificación, se co-locaron sobre el lado más largo yancho. A lo largo de todo el ciclose registraron las condicionesmedioambientales del local de cul-tivo mediante los sistemas de con-trol automático de temperatura,humedad relativa y concentraciónde dióxido de carbono. Se efectuóun seguimiento de la temperaturadel sustrato de cultivo en tres pa-quetes de cada lote mediante lainstalación de registradores de da-tos. Por último, se tomó nota decualquier anomalía observada du-rante el ciclo de cultivo, bien debi-da a problemas de incubación delsustrato, o bien a la posible apari-ción de plagas y enfermedades.

La recolección de las setas serealizó de forma individual paracada uno de los 120 paquetes, unavez que se encontraban en el esta-do comercial óptimo, anotandodiariamente el peso total y el nú-mero de piñas cosechadas por pa-quete, considerando una piñacomo el conjunto de setas quefructifican simultáneamente por unmismo orificio del paquete. Tam-bién se registró el peso y númerototal de cuerpos fructíferos, unavez cortados.

Resultados y discusiónSeguimiento del ciclo de cultivo

El ciclo de cultivo tuvo unaduración de 80 días, en el que lascondiciones medioambientales:temperatura ambiente (aire), tem-peratura del sustrato (compost) yhumedad relativa (HR) quedaronregistradas, a lo largo de todo el

1994), nitrógeno total (MAPA,1994; Tecator, 1987), materia orgá-nica y cenizas (Ansorena, 1994;MAPA, 1994), relación C/N (MSC,1985), prospección de nematodos(Nombella y Bello, 1983), ácaros(Navarro et al., 2004) y Trichoder-ma spp. (Tello et al., 1991: Gea etal., 2003). Sus principales caracte-rísticas químicas y biológicas sepresentan en la tabla 1.

Durante la fase de incubacióndel sustrato, los paquetes se colo-caron sobre el lado más estrecho ylargo del paralelepípedo que forma

• A la vista de las temperaturas registradas,la suplementación favorece una rápidaincubación del sustrato, lo que tieneun efecto beneficioso para la proteccióndel micelio de P. ostreatus, ya que dificultala instalación de otros organismos patógenosen el sustrato de cultivo

•, HORTICULTURA INTERNACIONAL

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HORTICULTURA INTERNACIONAL 67-ENERO 2009 •

TECNOLOGÍA DE PRODUCCIÓN I

Tabla 3:Rendimiento medio (valor medio ± desviación estándar), antes y después del corte (kg/paquete).

F1 TotalSustrato n Antes del corte Después del corte Antes del corte Después del corteSuplemento A 40 2,26 ± 0,63 1,70 ± 0,42 b 3,43 ± 0,62 b 2,63 ± 0,42 b

Control 40 1,86± 0,54 a 1,43 ± 0,43 a 2,70± 0,49 a 2,11 ± 0,40 aSuplemento C 40 2,17 ± 0,46 b 1,65 ± 0,36 b 3,44 ± 0,43 b 2,66 ± 0,33 bTotal 120 2,10 ± 0,57 1,59 ± 0,42 3,19 ± 0,63 2,47 ± 0,46

p = 0,0049 p = 0,0080 p = 0,0000 p = 0,0000

"Letras distintas indican diferencias significativas entre los lotes (p .� 0,05).

Tabla 4:Número de piñas y setas por paquete (valor medio ± desviación estándar) en los diferentes sustratosensayados.

N 2 piñas/paquete N2 setas/paqueteSustrato N Fi Total F1 TotalSuplemento A 40 5,17 ± 1,30 10,67 ±2,71 b* 135,92 ± 42,59 c 220,75± 62,11 bControl 40 4,70 ± 1,34 8,50 ± 2,26 a 88,02 ± 29,56 a 148,87 ± 30,88 aSuplemento C 40 4,65 ± 2,03 10,97 ± 3,17 b 108,95 ± 31,86 b 199,85 ± 43,76 bTotal 120 4,84 ± 1,60 10,05 ± 2,93 110,97 ± 40,01 189,82 ± 55,89

p = 0,02626 p = 0,0001 p = 0,0000 p = 0,0000

*Letras distintas indican diferencias significativas entre los lotes (p 0,05).

proceso, por el sistema de climati-zación del interior del local decultivo, tal y como se puede ver enla Figura 1, que especifica las con-diciones medioambientales (tem-peratura y humedad relativa) en elinterior del invernadero durantetodo el proceso.

La etapa de germinación tuvouna duración aproximada de 2 se-manas. En este periodo, la hume-dad relativa en el interior del localde cultivo osciló entre el 80 y el95%, mientras que la temperaturadel sustrato aumentó paulatina-

mente hasta los 29 °C aproximada-mente. La temperatura ambienteosciló entre 18 y 23 °C para ayudara controlar la temperatura del com-post.

Tras estas dos semanas degerminación se procedió a inducirla fructificación, modificando lascondiciones medioambientales delinvernadero, con el consiguientedescenso de temperaturas (ambien-te, de 23 a 16 °C; sustrato, de 29 a20 °C). regulación del nivel deCO2 (límite máximo en 1.000ppm), y de la humedad relativa.

Los niveles de dióxido de carbonorecogidos durante todo el procesoquedan reflejados en la figura 2,que muestra los niveles de dióxidode carbono registrados en el inte-rior del invernadero durante todoel ciclo de cultivo.

En esta etapa de induccióntambién se puso en marcha la ilu-minación.

El seguimiento individualiza-do de la temperatura del sustratoen tres paquetes de cada uno delos lotes mostró ligeras diferenciasentre los mismos, con un incre-

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Figura 1:Condiciones medioambientales (temperatura yhumedad relativa) en el interior del invernaderodurante todo el proceso.

Figura 2:Niveles de dióxido de carbono registrados en elinterior del invernadero durante el ciclo de cultivo.

Primordios deP. ostreatussurgiendo por unode los orificios defructificación.

Aspecto de unapiña joven desetas.

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15iligetill414-1144111114-111+1.1

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5T. aire T. compost H.R.

7000

6000

5000

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3000oo

2000

1000

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INDUSTRIA HORTÍCOLA

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mento de temperatura más elevadoy más precoz en los paquetes co-rrespondientes a los lotes suple-mentados. La figura 3 muestra losdatos correspondientes al lote consuplemento A, en el que se obser-va como la temperatura del sus-trato alcanza los 30 °C a los pocosdías (entre 4 y 7) de iniciada la in-cubación.

Por otra parte, los valores co-rrespondientes al lote Control (fi-gura 4) muestran como la subidade temperatura en el interior de es-tos paquetes fue más lenta (entre 8y 11 días), y los niveles alcanzadosfueron, en general, inferiores.

Por último, los valores regis-trados en el lote con suplemento C(figura 5) muestran un incrementotambién rápido de la temperatura,

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al igual que el otro lote suplemen-tado, pero con niveles más eleva-dos, que llegan a superar, en uncaso, los 35 °C. En líneas genera-les, se recomienda que la tempera-tura del centro del paquete de sus-trato, lo que supone alrededor del45% de la masa del sustrato, nosupere los 33 °C, ya que la tempe-

ratura óptima de crecimiento delmicelio de P. ostreatus se sitúa al-rededor de 30 °C (Zadrazil, 1976;Kurtzman y Zadrazil. 1989). Portanto, a la vista de las temperatu-ras registradas, la suplementaciónfavorece una rápida incubación delsustrato, lo que tiene un efecto be-neficioso para la protección delmicelio de P. ostreatus, ya que di-ficulta la instalación de otros orga-nismos patógenos en el sustrato decultivo.

Las diferencias de temperatu-ra entre los lotes prácticamentedesaparecieron a partir de la etapade inducción de la fructificación.En ese momento, aproximadamen-te el 70% de los orificios presenta-ban cuerpos fructíferos. Esta etapade inducción duró aproximada-mente doce días, tras los cuales sevolvió a bajar la temperatura am-

• Se recomienda que la temperaturadel centro del paquete de sustrato,no supere los 33 "C, ya que la temperaturaóptima de crecimiento del micelio de P.ostreatus se sitúa alrededor de 30 "C

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Tabla 5:Peso unitario (valor medio ± desviación estándar)para cada uno de los sustratos ensayados(g/carpóforo).

Sustrato n FI TotalSuplemento A 40 13,11 ± 3,46 a* 12,41 ± 2,32 aControl 40 17,00 ± 5,52 b 14,51 ± 3,08 bSuplemento C 40 15,98 ± 4,53 b 13,75 ± 2,60 bTotal 120 15,36 ± 4,84 13,56 ± 2,80

p = 0,0004 p = 0,0025

*Letras distintas indican diferencias significativas entre los lotes (p �. 0,05).

Figura 3:Temperaturas registradas en el interior de trespaquetes de sustrato (Al, A2 y A3) correspondientesal lote con suplemento A.

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Aspecto de unapiña de Pleurotusostreatus en plenodesarrollo.

biente hasta los 14-15 °C, y semantuvo así durante la cosecha,hasta el final del ensayo.

Producción y cosechaLa etapa de producción tuvo

dos fases claramente definidas enel tiempo: una primera florada,con una duración aproximada dediez días, a partir de la cual sefueron formando primordios demanera constante e ininterrumpidadurante más de un mes, hasta quese dio por concluido el ensayo;por tanto, no se apreció una se-gunda floral) claramente definida.Ésta es la razón por la que, a lahora de mostrar los resultados delos diferentes parámetros, se haceuna diferenciación entre los valo-res obtenidos durante la primeraflorada (F1) y los obtenidos duran-te todo el ciclo (total).

El cálculo de la eficienciabiológica (Tabla 2), definida comoel peso (en kg) de los carpóforos

recolectados por cada 100 kg demateria seca de compost, establecediferencias significativas entre loslotes, con un valor medio muy in-ferior para el lote control. Tambiénse observan diferencias entre losdos lotes suplementados, con unvalor significativamente más ele-vado para el sustrato con suple-mento A. Por tanto, la suplementa-ción tiene un efecto positivo, yaque supone un aumento considera-

ble de la eficiencia biológica delos sustratos. La tabla 3 muestra elresultado de someter los datos deproducción, antes y después delcorte de las setas, al análisis esta-dístico. Se observa como la pro-ducción correspondiente al loteControl es significativamente infe-rior a la de los lotes suplementa-dos, tanto en la cosecha de la pri-mera florada como al considerar laproducción total del ciclo. El in-cremento de producción detectadoen los dos sustratos suplementadosfue similar, superando el 27% dela producción total obtenida en ellote Control (27,30% con el suple-mento A y 27,69% con el suple-mento C).

Los valores medios calcula-dos tras el corte muestran unamerma o destrío que supera, en lostres casos, el 20% de la produc-ción bruta obtenida; en concreto,un 21,83% para el Control, un22,73% para el sustrato con suple-mento C. y un 23,40% para el sus-trato con suplemento A.

• Las diferencias de temperatura entrelos lotes prácticamente desaparecierona partir de la etapa de inducciónde la fructificación. En ese momento,aproximadamente el 70% de los orificiospresentaban cuerpos fructíferos

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Figura 4:Temperaturas registradas en el interior de trespaquetes de sustrato (B1, B2 y B3) correspondientesal lote Control.

Figura 5:Temperaturas registradas en el interior de trespaquetes de sustrato (C1, C2 y C3) correspondientesal lote con suplemento C.

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II INDUSTRIA HORTÍCOLA -7

• Las setascorrespondientes al loteControl tienen un mayorpeso unitario, seguidaspor las producidas por ellote con suplemento C

En definitiva, se observa un

incremento de producción en los

sustratos suplementados, tanto du-

rante la cosecha de la primera flo-

rada (FI). como en la producción

total del ciclo.

En relación al número de pi-ñas desarrolladas por paquete (Ta-bla 4), la primera florada presentavalores medios similares para lostres sustratos del ensayo, aunquese obtiene un valor ligeramente su-perior en el que tiene suplementoA. Sin embargo, a lo largo del messiguiente a esta primera oleada, seobserva un ligero descenso en elnúmero de piñas formadas en ellote Control con respecto a las pi-ñas formadas en los lotes suple-mentados. Este descenso es el res-ponsable de las diferencias signifi-cativas obtenidas al considerar losdatos totales del ensayo.

El número de setas por pa-quete, una vez separadas de las pi-ñas en las que se han formado.queda también reflejado en la tabla

4. Se observa como el valor medioobtenido para el Control es clara-mente inferior durante la cosechade FI, diferencia que se mantieneen la cosecha final. Por otra parte,también se observan diferenciassignificativas entre los valores me-dios obtenidos en FI con los lotessuplementados, aunque en estecaso, ese hecho se diluye en la co-secha total.

Calculando el peso unitariopor seta, es decir: dividiendo elpeso neto por paquete (tras eldestrío) entre el número mediode setas cosechado en el mismo,se obtienen los datos mostradosen la Tabla 5.

Puede verse como, duranteFI. el sustrato con suplementoA, que presenta mayor produc-ción y mayor número de setas,muestra un peso unitario mediosignificativamente inferior conrespecto a los otros dos lotes en-sayados. Estas diferencias semantienen en la cosecha total,aunque los valores medios obte-nidos se aproximan.

En definitiva, las setas corres-pondientes al lote Control tienenun mayor peso unitario, seguidaspor las producidas por el lote consuplemento C.

Encontrará este artículo con toda subibliografía en la página web:

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Durante losúltimos 30 añosse ha desarrolladoampliamenteel cultivo dePleurotus,llegando a ser unode los hongoscomestibles máscultivados.

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