Dokumen.tips Validasi

8/15/2019 Dokumen.tips Validasi

1/20

VALIDASI METODA ANALISIS

A. PENGERTIAN

Validasi metoda analisis adalah suatu tindakan penilaian terhadap

parameter tertentu, berdasarkan percobaan laboratorium, untuk membuktikan

bahwa parameter tersebut memenuhi persyaratan untuk penggunaannya.

Validasi metode analisis bertujuan untuk memastikan dan mengkonfirmasi

bahwa metode analisis tersebut sudah sesuai untuk peruntukannya. Validasi

biasanya diperuntukkan untuk metode analisa yang baru dibuat dan

dikembangkan. Sedangkan untuk metode yang memang telah tersedia dan baku

(misal dari AOAC, AS!, dan lainnya", namun metode tersebut baru pertama

kali akan digunakan di laboratorium tertentu, biasanya tidak perlu dilakukan

#alidasi, namun hanya #erifikasi. ahapan #erifikasi mirip dengan #alidasi hanya

saja parameter yang dilakukan tidak selengkap #alidasi.

$erikut adalah beberapa alasan diperlukannya #alidasi %

&. Agar dihasilkan data yang akurat, ajeg dan terpercaya,

'. !emenuhi persyaratan

• !)

• *) (ood *aboratory )ractices"

• C) (ood Clinical )ractices"

• +SO

• -A (ood and -rug Administration"

• )A (n#ironmental )rotectionagency"

Aktifitas /uality Control (/C" dalam suatu metode #alidasi sangatlah

penting, karena digunakan untuk melakukan jaminan terhadap suatu tes

kesesuaian perlakuan. -alam industri obat, aktifitas /uality Control (/C" dapat

dilakukan dengan tahapan sebagai berikut%

&. Sampling, pemilihan sample agar dapat mewakili material yang

akan dianalisis

'. )ersiapan sampel, memberikan perlakuan awal terhadap hasil

sampling agar mudah dianalisis

0. !elakukan analisis terhadap sampel, meliputi %


2/20

)elarutan sample

)engubahan bentuk molekul analit (1at yang

diuji" menjadi bentuk yang sesuai dengan metode yang

digunakan

)engukuran

2. )erhitungan dan interpretasi data.

B. METODE SAMPLING

!etode sampling bertujuan untuk memperoleh sampel yangrepresentatif, artinya hasil analisis dari sampel tersebut bisa mewakili untuk

populasinya.

!etode sampling dalam praktek kefarmasiaan, dibagi dalam dua cara,

yaitu %

&. metode sampling dengan akar 3,

'. metode sampling dengan tabel standar dari militer.

B. 1. Metode sampling dengan aka N

Contoh penggunaan akar 3 pada penerimaan satu partai bahan awal obat

ataupun jamu diindustri farmasi, sebagai berikut %

Contoh &

-iterima '4 kaleng ampisillin masing5masing 'kg, bagaimana cara sampling

6 Sampling unit ⇒ 3 7 '4

6 )eriksa '4 kaleng homogen (no. $atch sama"

6 )eriksa bahwa kristal ampisilin seragam (atas, tengah dan bawah"

6 8umlah kaleng ampisilin yang diperiksa untuk analisis penuh⇒ akar 3

n 7 √ 3 ⇒ disebut 9n plan:

n 7 √ '4

n 7 4

6 8umlah kaleng yang harus diperiksa untuk analisis kualitatif adalah %

) 7 ;,2√

3⇒

disebut 9p plan:


3/20

p 7 ;,2 √'4

p 7 'Contoh '

-iterima '; karung jahe &

n 7 √ 3 >&

$ila 37'4, maka n 7 ?

Value of

n, p or r

Values of N

n plan p plan r plan

2 Up to 4 Up to 25 Up to 2

3 5-9 26-56 3-4

4 10-16 57-100 5-7

5 17-25 101-156 8-11

6 26-36 157-225 12-16

7 37-49 17-22

8 50-64 23-28

9 65-81 29-36

10 82-100 37-44


4/20

B. !. Metode Sampling dengan ta"el standa dai milite

#Milita$ Standad 1%&D ta"le'(

)enggunaannya dikembangkan oleh angkatan bersenjata AS sejak perang

-unia ++ (mulai &@2'".

-iindustri farmasi, tabel ini diunakan untuk sampling pada penerimaan

bahan kemas primer, antara lain cangkang kapsul, botol sirup, tube salep, dll

). *AL+*AL SEBEL,M MELA-,-AN VALIDASI

al5hal terkait sebelum melakukan #alidasi metode %

&. +nstrumen, meliputi kualifikasi dan kalibrasi

'. $ahan5 bahan, meliputi ketersediaan reference standards, reagents,

blanko Bplasebo

0. Analis berupa kualifikasi (pendidikan, pelatihan dan pengalaman"

2. -okumen berupa dukungan pustaka tentang prosedur analisis, sifat fisika

kimia, protokol #alidasi dll

). 1. -ali/ikasi Instmen0E,IPMENT ,ALI2I)ATION

ualifikasi instrumen adalah semua proses yang menjamin bahwa suatu

alat B instrumen sesuai dengan pemakaian yang diinginkan. / meliputi %

&. -esign /ualification (-/", dilakukan produsen dalam pengembangan dan

software suatu peralatan atau instrumen.

'. +nstallation /ualification (+/", untuk pelaksanaan dan dokumentasi suatu

pemasangan instrumen ditempat yang tepat.

0. Operational /ualification (O/", untuk pengujian instrumen dan untuk

menjamin bahwa instrument tersebut memenuhi persyaratan dan

spesifikasi yang ditentukan terlebih dahulu.

2. )erformance /ualification ()/", untuk pengujian bahwa sistem secara

konsisten bekerja sesuai aplikasi yang diinginkan.


5/20

D. VERI2I-ASI

Verifikasi dan #alidasi adalah proses pengujian produk yang mempunyai

spesifikasi dan hal tersebut ditujukan untuk tujuan tertentu. Ada beberapa

komponen dalam sistem manajemen Duality kontrol seperti +SO @;;;.

Ada dua metode #erifikasi yaitu %

&. !etode compendial

)rosedur analitiknya diatur dalam ES)B 3

'. !etode non5compendial

Alternatif prosedur analitiknya ditujukan sebagai pengganti aturan

prosedur analitik.

E. TA*APAN DAN PARAMETER VALIDASI

Gam"a 1. Skema ta3apan podksi

$erdasarkan skema diatas kita bisa melihat bahwa ada beberapa tahapan

yang dilakukan sebelum melakukan #alidasi suatu produksi. Sebelum

mem#alidasi suatu produksi tahapan awal yang harus kita lakukan adalah

melakukan pengembangan (de#elopment". $iasanya dalam tahapan produksi

farmasi, pengembangan disini yang dimaksud adalah melakukan pengembangan

formulasi obat. Setelah pengembangan formulasi selesai, maka perlu dilakukan

DEVELOPMENT

RE-VALIDATION

OPTIMIZATION

VALIDATION

IMPLEMENTATION


6/20

optimasi produksi, jika tahapan ini telah selesai barulah kita melakukan proses

#alidasi. -alam proses #alidasi ada beberapa parameter yang harus diperhatikan

dan parameter ini mutlak untuk dipenuhi, jika tidak maka produk tersebut tidak

dapat dinyatakan #alid dan produk yang telah dirancang tidak dapat diproduksi.

)arameter5parameter #alidasi tersebut adalah sebagai berikut %

&. ecermatan (Accuracy"

'. Selekti#itas (Spesifitas"

0. )resisi

2. *inieritas dan Fentang

4. $atas -eteksi (*O-"

?. $atas uantitasi (*O/"=. etangguhan !etode (Fuggedness"

G. ekuatan (Fobutsness"

-e4ematan #A44a4$'

ecermatan (Accuracy" adalah ukuran yang menunjukkan derajat

kedekatan hasil analis dengan kadar analit yang sebenarnya. ecermatan

dinyatakan sebagai persen perolehan kembali (recovery" analit yang

ditambahkan. ecermatan hasil analis sangat tergantung kepada sebaran galat

sistematik di dalam keseluruhan tahapan analisis. Oleh karena itu untuk

mencapai kecermatan yang tinggi hanya dapat dilakukan dengan cara

mengurangi galat sistematik tersebut seperti menggunakan peralatan yang telah

dikalibrasi, menggunakan pereaksi dan pelarut yang baik, pengontrolan suhu,

dan pelaksanaannya yang cermat, taat asas sesuai prosedur.

)enentuan suatu kecermatanB akurasi suatu sampel produksi dapat

dilakukan dengan dua cara berikut %

a. !etode simulasi (spiked5placebo reco#ery"-alam metode simulasi, sejumlah analit bahan murni (senyawa pembanding

kimia CF! atau SF!" ditambahkan ke dalam campuran bahan pembawa

sediaan farmasi (plasebo" lalu campuran tersebut dianalisis dan hasilnya

dibandingkan dengan kadar analit yang ditambahkan (kadar yang

sebenarnya".

b. !etode penambahan baku (standart addition"


7/20

-alam metode penambahan baku, sampel dianalisis lalu sejumlah tertentu

analit yang diperiksa ditambahkan ke dalam sampel dicampur dan dianalisis

lagi. Selisih kedua hasil dibandingkan dengan kadar yang sebenarnya (hasil

yang diharapkan".

-alam kedua metode tersebut, persen peroleh kembali dinyatakan sebagai rasio

antara hasil yang diperoleh dengan hasil yang sebenarnya, berikut rumus secara

matematiknya %

dimana %

C 7 konsentrasi total sampel yang diperoleh dari pengukuran

CA 7 konsentrasi sampel sebenarnya

CHA 7 konsentrasi analit yang ditambahkan

)ersen perolehan kembali dapat ditentukan dengan cara membuat sampel

plasebo (eksepien obat, cairan biologis" kemudian ditambah analit dengan

konsentrasi tertentu (biasanya G;I sampai &';I dari kadar analit yang

diperkirakan", kemudian dianalisis dengan metode yang akan di#alidasi. etapi

bila tidak memungkinkan membuat sampel plasebo karena matriksnya tidak

diketahui seperti obat5obatan paten, atau karena analitnya berupa suatu senyawa

endogen misalnya metabolit sekunder pada kultur kalus, maka dapat dipakai

metode adisi.

!etode adisi dapat dilakukan dengan menambahkan sejumlah analit

dengan konsentrasi tertentu pada sampel yang diperiksa, lalu dianalisis dengan

metode tersebut. )ersen perolehan kembali ditentukan dengan menentukan

berapa persen analit yang ditambahkan tadi dapat ditemukan.

riteria kecermatan sangat tergantung kepada konsentrasi analit dalam

matriks sampel dan pada keseksamaan metode (FS-". Vanderwielen, dkk

menyatakan bahwa selisih kadar pada berbagai penentuan (5d" harus 4I atau

kurang pada setiap konsentrasi analit pada mana prosedur dilakukan. arga rata5

% Perolehan kembali = (CF –CA) X 100

CHA


8/20

rata selisih secara statistik harus &,4I atau kurang. riteria tersebut dinyatakan

secara matematik sebagai berikut %

5d . 1%% 6 & 7

5%

5d . 1%% ++ #S # %89& n : I ' ' 6 18& 7

5% n

Jd 7 J& K J;

dimana %

J& 7 hasil analisis

J; 7 hasil yang sebenarnya

+ 7 nilai t pada tabel tL student pada atas @4I

S 7 simpangan baku relatif dari semua pengujian

n 7 jumlah sampel yang dianalisis

adar analit dalam metode penambahan baku dapat dihitung sebagai berikut%

) ; R 1

) < S R !

) ; S R 1

R ! : R 1

C 7 kadar analit dalam sampel

S 7 kadar analit yang ditambahkan pada sampel

F & 7 respon yang diberikan sampel

F ' 7 respon yang diberikan campuran sampel dengan tambahan analit

)ada metode penambahan baku, pengukuran blanko tidak diperlukanlagi. !etode ini tidak dapat digunakan jika penambahan analit dapat

mengganggu pengukuran, misalnya analit yang ditambahkan menyebabkan

kekurangan pereaksi, mengubah p atau kapasitas dapar, dll. riteria

kecermatan dilakukan sama seperti pada metode simulasi.

)ada percobaan penetapan kecermatan, sedikitnya lima sampel yang

mengandung analit dan plaseo yang harus disiapkan dengan kadar antara 4;I

sampai &4;I dari kandungan yang diharapkan. )ersen perolehan kembali


9/20

seharusnya tidak melebihi nilai presisi FS-. Fentang kesalahan yang diijinkan

pada setiap konsentrasi analit pada matriks dapat dilihat pada tabel di bawah ini%

Analit pada matriks sampel, I Fata5rata yang diperoleh, I

&;;

M &;

M &

M ;,&

;,;&

;,;;&

;,;;;.& (& ppm"

;,;;;.;& (&;; ppb"

;,;;;.;;& (&; ppb"

;,;;;.;;;.& (& ppb"

@G5&;'

@G5&;'

@=5&;0

@45&;4

@;5&;=

@;5&;=

G;5&&;

G;5&&;

?;5&&4

2;5&';

Contoh perhitungan%

Peole3an kem"ali Analit

-ianggap bobot tiap tablet &=4 mg.)enimbangan '; tablet % '; N &=4 mg 7 04;; mg.

-omposisi ta"let tdd (

at aktif % '; N =,4 mg 7 &4; mg

$erat 1at tambahan % 04;; mg K &4; mg 7 004; mg

)enimbangan serbuk plasebo% 0.0?2,=@& mg ditambahkan dengan

!eloksikam% &4&,;20 mg 7 0.4&4,G02 mg

!eloksikam yg ditambahkan% &4&,;20 N @@,02I 7 1&%8%=> mg

Peole3an kem"ali ?%8 1%% dan 1!% 7

)erbandingan yang digunakan untuk spike placebo % baku yang ditambahkan

7 =;%0;

)erolehan kembali G;I 7 G;I N 2 mg 7 0,' mg

erdiri dari serbuk plasebo 7 =;B&;; N 0,' mg 7 ','2 mg

I )enimbangan setara ','2 mg serbuk plasebo 7 ','2B&4;,;4 N 04&4,G0 mg

7 4',2@ mg

I $aku 7 0;B&;; N 0,' mg 7 ;,@?mg


10/20

)enimbangan baku % @,??2 mg N @@,02 I 7 ;,@? mg, larutkan dalam metanol

'; ml. )ipet ' ml untuk sekali penambahan sebagai baku.

Fec &;;I 7 &;;I N 2 mg 7 2 mg

erdiri dari serbuk plasebo 7 =;B&;; N 2 mg 7 ',G; mg

I )enimbangan setara ',G mg serbuk plasebo 7 ',G; B&4;,;4 N 04&4,G0 mg

7 ?4,?;G mg

I $aku 7 0;B&;; N 2 mg 7 &,' mg

)enimbangan baku % '2,0&4 mg N @@,02 I 7 '2,&424 mg, larutkan dalam

metanol &;; ml metanol. )ipet 4 ml untuk sekali penambahan sebagai baku.

Fec &';I 7 &';I N 2 mg 7 2,G mg

erdiri dari serbuk plasebo 7 =;B&;; N 2,G mg 7 0,0? mg

I )enimbangan setara 0,0? mg serbuk plasebo 7 0,0? B&4;,;4 N 04&4,G0 mg

7 =G,=0 mg

I $aku 7 0;B&;; N 2,G mg 7 &,22 mg

)enimbangan baku % 0;,&'G mg N @@,02 I 7 '@,@'@ mg, larutkan dalam metanol

&;; ml metanol. )ipet 4 ml untuk sekali penambahan sebagai baku.

)onto3 pe3itngan 7 Peole3an kem"ali

Fata5rata area %

&=&'G=4'> &=&G&&4 7 &=&42@4

8umlah meloksikam total %

&=&42@4 > 0'G',@02= N 4; ; @8!@= mg #)2'

?4?@,@4'& &;;;

)enimbangan serbuk plasebo % 40,'&4 mg

$aku yang ditambahkan % ;,@? mg (CHA"

-alam 40,'&4 mg serbuk plasebo terdapat meloksikam sebanyak %

40,'&4 B 04&4,G02 N &4;,;2? mg 7 ','=& mg (CA"

I )erolehan kembali 7 (C 5 CA" N &;;

CHA

I )erolehan kembali 7 0 , ' 0 2; ,K@ ?';,'=& N &;; I 7 &;;,0& mg

Metode Spiked Pla4e"o Re4oe$


11/20

)enimbangan baku meloksikam % =@,?&4 mg (@@,02I" meloksikam dimasukkan

dalam labu ukur ';;ml, larutkan dalam metanol. Eltrasonik selama 0; menit.

)ipet ', 2, ?, &; dan &4 ml larutan masukkan dalam labu ukur 4; ml dan

tambahkan ' ml larutan baku dalam. ambahkan fase gerak sBd tanda. *arutan

baku dalam % G&,'&' mg labu ukur &;; ml dilarutkan dalam metanol.

(lihat tabel & di bawah ini"

Ta"el 1. *asil pengkan ka kali"asi meloksikam

onsentrasi meloksikam

(PgB ml"

*uas kromatogram rata5

rata mV.det

Angka banding luas

kromatogram piroksikam

dan meloksikam)iroksikam !eloksikam

&4,G&G &44&&@0,; 22@G&@,; ;,'@;;

0&,?0? &42?0;0,4 G?G'=2,4 ;,4?&4

2=,242 &424&G4,; &0;0&4@,; ;,G202

=@,;@; &442;;4,; '&2@22&,; &,0G0'

&&G,?02 &440@04,4 0';=0'?,4 ',;?2;

eteran!an %

)ersamaan regresi % y 7 ;,;&=0 N > ;,;&=;;Q r 7 ;,@@@@

Contoh perhitungan %

Fata rata luas puncak meloksikam % ';G&20;,4

Fata rata luas puncak piroksikam % &42&G@;,4

Fatio !B) 7 &,02@@'&&

adar meloksikam 7 &,02@@'&& 5 ;,;&=;; N 4; 7 0,G4'mg

;,;&=0 &;;;

Serbuk plasebo yang ditimbang @',;40 mg mengandung

@',;40 N &4;,;2? 7 0,@'G4= mg

04&?,G0&

I )erolehan embali 7 0,G40 N &;;I 7 @G,;?I

0,@'@

Selektiitas #Spesi/itas'

Selekti#itas atau spesifisitas suatu metode adalah kemampuannya yang

hanya mengukur 1at tertentu saja secara cermat dan seksama dengan adanya


12/20

komponen lain yang mungkin ada dalam matriks sampel. Selekti#itas seringkali

dapat dinyatakan sebagai derajat penyimpangan (de!ree o" bias" metode yang

dilakukan terhadap sampel yang mengandung bahan yang ditambahkan berupa

cemaran, hasil urai, senyawa sejenis, senyawa asing lainnya, dan dibandingkan

terhadap hasil analisis sampel yang tidak mengandung bahan lain yang

ditambahkan.

Cara #enentuan$

Selekti#itas metode ditentukan dengan membandingkan hasil analisis

sampel yang mengandung cemaran, hasil urai, senyawa sejenis, senyawa asing

lainnya atau pembawa plasebo dengan hasil analisis sampel tanpa penambahan bahan5bahan tadi. )enyimpangan hasil jika ada merupakan selisih dari hasil uji

keduanya.

8ika cemaran dan hasil urai tidak dapat diidentifikasi atau tidak dapat

diperoleh, maka selekti#itas dapat ditunjukkan dengan cara menganalisis sampel

yang mengandung cemaran atau hasil uji urai dengan metode yang hendak diuji

lalu dibandingkan dengan metode lain untuk pengujian kemurnian seperti

kromatografi, analisis kelarutan fase, dan i""erential &cannin! Calorimetry.

-erajat kesesuaian kedua hasil analisis tersebut merupakan ukuran selekti#itas.

)ada metode analisis yang melibatkan kromatografi, selekti#itas ditentukan

melalui perhitungan daya resolusinya (Fs".

)aa kea (

Entuk uji selektifitas maka 1at yang akan diuji harus ditentuka dulu

panjang gelombang maksimum. -alam hal ini larutan tetrasiklin Cl

mempunyai panjang gelombang maksimum 0?; nm. Selanjutnya dibuat larutan

baku, larutan uji dan larutan blanko.

a. )embuatan larutan baku tetrasiklin Cl

5 imbang '4,; mg baku etrasiklin Cl, masukan kedalam labu ukur 4;,;

ml.

5 *arutkan dengan air sampai 4;,; ml, kocok.

5 Suntikkan '; Pl larutan uji pada )*C. Amati puncaknya pada

kromatogram )*C.

b. )embuatan larutan uji tetrasiklin Cl


13/20

5 imbang &;;,; mg serbuk obat tetrasiklin Cl, masukan ke dalam labu

ukur &;;,; ml.

5 *arutkan dengan air sampai &;;,; ml, kocok.

5 Saring dengan kertas saring -urapore membrane filter ;,24 Pm V

5Suntikan '; Pl larutan uji pada )*C. Amati puncaknya pada

kromatogram )*C.

asil kromatogram etrasiklin Cl standar dan sampel harus menunjukkan

waktu retensi yang sama dan pada daerah sekitar waktu retensi tetrasiklin

tersebut tidak boleh ada gangguan yang dapat dilihat dari kromatogram larutam

blanko.

Pesisi

)resisi adalah ukuran yang menunjukkan derajat kesesuaian antara hasil

uji indi#idual, diukur melalui penyebaran hasil indi#idual dari rata5rata jika

prosedur diterapkan secara berulang pada sampel5sampel yang diambil dari

campuran yang homogen. $iasanya ditujukan sebagai standar de#iasi atau

sebagai koefisien #ariasi (standar de#iasi relatif", setelah metode lengkap

dilakukan secara berulang terhadap sampel terpisah dan identik didalam suatu

bahan yang homogen.

)resisi diukur sebagai simpangan baku atau simpangan baku relatif

(koefisien #ariasi". )resisi dapat dinyatakan sebagai repeatability (keterulangan"

atau reproducibility (ketertiruan".

riteria seksama diberikan jika metode memberikan simpangan baku

relatif (FS-" atau koefisien #ariasi (CV" 'I atau kurang. Akan tetapi kriteria inisangat fleksibel tergantung pada konsentrasi analit yang diperiksa, jumlah

sampel, dan kondisi laboratorium. -ari penelitian dijumpai bahwa koefisien

#ariasi meningkat dengan menurunnya kadar analit yang dianalisis.

-itemukan bahwa koefisien #ariasi meningkat seiring dengan menurunnya

konsentrasi analit. )ada kadar &I atau lebih, standar de#iasi relatif antara

laboratorium adalah sekitar ',4I ada pada satu per seribu adalah 4I. )ada

kadar satu per sejuta (ppm" FS-nya adalah &?I, dan pada kadar part per bilion


14/20

(ppb" adalah 0'I. )ada metode yang sangat kritis, secara umum diterima bahwa

FS- harus lebih dari 'I.

)ercobaan keseksamaan dilakukan terhadap paling sedikit enam replika

sampel yang diambil dari campuran sampel dengan matriks yang homogen.

Sebaiknya keseksamaan ditentukan terhadap sampel sebenarnya yaitu berupa

campuran dengan bahan pembawa sediaan farmasi (plasebo" untuk melihat

pengaruh matriks pembawa terhadap keseksamaan ini. -emikian juga harus

disiapkan sampel untuk menganalisis pengaruh pengotor dan hasil degradasi

terhadap keseksamaan ini.

Linieitas dan entang

*inieritas metode analisis adalah kemampuan metode analisis untuk

memberikan hasil uji yang berbanding langsung dengan konsentrasi analit dalam

sampel. Fentang metode menyatakan rentang antara konsentrasi analit terendah

dan tertinggi dalam sampel yang dapat ditetapkan menggunakan metode tersebut

dengan presisi, akurasi, dan linieritas yang dapat diterima. edua karakteristik

ini ditentukan dengan menggunakan metode analisis yang di#alidasi dan sampel

yang diuji memiliki konsentrasi analit berada pada rentang konsentrasi yang

dinyatakan untuk metode tersebut. 8ika hubungan antara respond an konsentrasi

yang tidak linier, standardisasi dapat dilakukan memakai kur#a kalibrasi

*inearitas biasanya dinyatakan dalam istilah #ariansi sekitar arah garis

regresi yang dihitung berdasarkan persamaan matematik data yang diperoleh

dari hasil uji analit dalam sampel dengan berbagai konsentrasi analit. )erlakuan

matematik dalam pengujian linearitas adalah melalui persamaan garis lurusdengan metode kuadrat terkecil antara hasil analisis terhadap konsentrasi analit.

-alam beberapa kasus, untuk memperoleh hubungan proporsional antara

hasil pengukuran dengan konsentrasi analit, data yang diperoleh diolah melalui

transformasi matematik dulu sebelum dibuat analisis regresinya.

-alam praktek, digunakan satu seri larutan yang berbeda konsentrasinya

antara 4; K &4;I kadar analit dalam sampel. -i dalam pustaka, sering


15/20

ditemukan rentang konsentrasi yang digunakan antara ; K ';;I. 8umlah sampel

yang dianalisis sekurang5kurangnya delapan buah sampel blanko.

Sebagai parameter adanya hubungan linier digunakan koefisien korelasi r

pada analisis regresi linier R 7 a > bJ. ubungan linier yang r 7 >& atau K&

bergantung pada arah garis. Sedangkan nilai a menunjukkan kepekaan analisis

terutama instrumen yang digunakan. )arameter lain yang harus dihitung adalah

simpangan baku residual (Sy". -engan menggunakan kalkulator atau perangkat

lunak komputer, semua perhitungan matematik tersebut dapat diukur

Batas Deteksi

$atas deteksi adalah jumlah terkecil analit dalam sampel yang dapat

dideteksi yang masih memberikan respon signifikan dibandingkan dengan

blangko. $atas deteksi merupakan parameter uji batas. $atas kuantitasi

merupakan parameter pada analisis renik dan diartikan sebagai kuantitas terkecil

analit dalam sampel yang masih dapat memenuhi kriteria cermat dan seksama.

$ila pengukuran akhir didasarkan pada pembacaan alat, harus dilakukan

perhitungan terhadap respon dasar ( karakteristik sinyal terhadap derau dari

respon yang teramati".

)enentuan batas deteksi suatu metode berbeda5beda tergantung pada

metode analisis itu menggunakan instrumen atau tidak. )ada analisis yang tidak

menggunakan instrumen batas tersebut ditentukan dengan mendeteksi analit

dalam sampel pada pengenceran bertingkat. )ada analisis instrumen batas

deteksi dapat dihitung dengan mengukur respon blangko beberapa kali lalu

dihitung simpangan baku respon blangko dan formula di bawah ini dapat

digunakan untuk perhitungan%

/ 7 (k N Sb"BSl

-imana% / 7 *O- (batas deteksi" atau *O/ (batas kuantitasi"

k 7 0 untuk batas deteksi atau &; untuk batas kuantitasi

Sb 7 simpangan baku respon analitik dari blangko

Sl 7 arah garis linear (kepekaan arah" dari kur#a antara respon

terhadap konsentrasi 7 slope (b pada persamaan garis y 7 a>bN"


16/20

$atas deteksi dan kuantitasi dapat dihitung secara statistik melalui garis regresi

linier dari kur#a kalibrasi. 3ilai pengukuran akan sama dengan nilai b pada

persamaan garis linier y 7 a > bN, sedangkan simpangan baku blanko sama

dengan simpangan baku residual (SyBN."

a. $atas deteksi (*o-"

arena k 7 0, Simpangan baku (Sb" 7 SyBN, maka%

*o- 7 (0 SyBN"B Sl

b. $atas kuantitasi (*o/"

arena k 7 &;, Simpangan baku (Sb" 7 SyBN, maka%

*o/ 7 (&; SyBN"BSl

Cara lain untuk menentukan batas deteksi dan kuantitasi adalah melalui

penentuan rasio SB3 (signal to noise ratio". 3ilai simpangan baku blanko

ditentukan dengan cara menghitung tinggi derau pada pengukuran blanko

sebanyak '; kali pada titik analit memberikan respon. Simpangan baku blanko

juga dihitung dari tinggi derau puncak ke puncak, jika diambil dari tinggi puncak

derau atas dan bawah (3p5p" maka s; 7 3p5pB4 sedangkan kalau dari puncak

derau bawah saja (puncak negatif" maka s; 7 3pB', selanjutnya perhitungan

seperti tersebut di atas.

$atas kuantitasi adalah konsentrasi analit terendah dalam sampel yang

dapat diukur secara kuantitatif dengan akurasi dan presisi yang dapat diterima

dengan menggunakan metode yang ditentukan. $atas kuantitasi ditentukan

dengan menganalisis sampel yang mengandung analit dengan konsentrasi yang

dikurangi sebanyak tertentu dan menentukan konsentrasi analit rendah yang

dapat diukur tetapi akurasi dan presisi yang dapat diterima tetap dapat dicapai.

$ila pengukuran akhir berdasarkan pada pembacaan alat, besaran respon dasar

(rasio sinyal terhadap derau" harus dinilai dan diperhitungkan. -alam beberapa

kasus, batas kuantisasi kira 5 kira dua kali dari batas deteksi.

Rggedness

Fuggedness dalam ES) diartikan sebagai derajat reprodusibilitas dari

hasil yang diperoleh pada kondisi yang ber#ariasi, seperti laboratorium, analis,

instrumen, kondisi lingkungan, operator dan bahan yang berbeda. Fuggedness


17/20


18/20

(misalnya spektrum, profil kromatrogram, reaksi kimia, dan lain5lain" terhadap

bahan baku pembanding.

)engujian impuritas dapat dilakukan melalui uji kuantitatif atau uji batas

impuritas dalam sampel. edua pengujian tersebut bertujuan merefleksikan

secara tepat karakteristik kemurnian dari sampel. arakteristik #alidasi yang

berbeda diperlukan untuk uji batas impuritas.

)enetapan kadar bertujuan untuk menentukan kadar analit dalam sampel.

-alam hal ini penetapan kadar menunjukkan pengukuran komponen utama yang

terkandung dalam bahan aktif. Entuk obat, karakteristik #alidasi yang serupa

juga berlaku untuk penetapan kadar 1at aktif atau komponen tertentu.

arakteristik #alidasi yang sama juga dapat dilakukan dilakukan untuk

penetapan kadar yang berkaitan dengan metode analisis lain (misal uji disolusi".

Fencana +nduk Validasi adalah suatu dokumen yang menyajikan informasi

mengenai program kerja #alidasi perusahaan itu. -okumen ini hendaklah

memberi rincian jadwal kerja #alidasi yang harus dilaksanakan. )ertanggung

jawaban berkaitan dengan rencana hendaklah dinyatakan. Seluruh kegiatan

#alidasi hendaklah direncanakan. Ensur utama program #alidasi hendaklah

dirinci dengan jelas dan didokumentasikan di dalam Fencana +nduk Validasi

(F+V" atau Validation !aster )lan (V!)" atau dokumen sementara. F+V

hendaklah merupakan dokumen yang singkat, tepat dan jelas. +sinya mencakup %

&. )ersetujuan (sertifikasi terhadap )rogram *engkap Validasi"

'. )endahuluan

0. Cakupan, pengetahuan, pertanggungjawaban

2. -aftar isltilah

4. ambar rekayasa dan Fancang $angun Sarana

?. -eskripsi area, klasifikasi area, dan kualifikasi operacional.

=. Sarana penunjang5layanan mekanik, listrik dan air.

G. -aftar peralatan dan kualifikasi peralatan

@. )rogram kalibrasi dan )rogram )emeliharaan )encegahan

&;. Alur, tahap dan )roses #alidasi


19/20

&&. )rosedur )engujian dalam )engawasan !utu K )engawasan dalam

laboratorium

&'. )rosedur tetap

&0. -okumentasi #alidasi

&2. )elatihan personalia (pelatihan C)O$, mengenai protap dan #alidasi"

&4. )engendalian dan pengarsipan -okumen

&?. !anajemen )roses #alidasi

&=. ebutuhan Sumber -aya dan )enjadwalan

&G. daftar jadwal dan lampiran

2. Potokol Validasi

)rotocol #alidasi adalah suatu rencana tertulis mulai dari bagaimana

#alidasi akan dilaksanakan termasuk parameter pengujian, karakteristik produk,

peralatan dan batas pengambilan keputusan terhadap hasil uji yang dapat

diterima.)rotocol #alidasi tertulis hendaklah dibuat untuk merinci kualifikasi dan

#alidasi yang akan dilakukan. )rotocol hendaklah dikaji dan disetujui oleh kepala

bagian !anajemen !utu ( )emastian !utu". )rotocol #alidasi hendaklah merinci

langkah kritis dan kriteria penerimaan. +sinya meliputi %

K objekti#itas studi #alidasi dan kualifikasi

K Site of the study

K )ertanggungjawaban personel

K -eskripsi alat

K SO)s

K Standard

K kriteria untuk produk dan proses yang rele#an

G. Lapoan Validasi

endaklah dibuat laporan yang mengacu pada protokol kualifikasi

danBatau protokol #alidasi dan memuat ringkasan hhasil yang diperoleh,

tanggapan terhadap penyimpangan yang terjadi, kesimpulan dan rekomendasi

perbaikan. iap perubahan terhadap rencana yang ditetapkan dalam protokol

hendaklah didokumentsikan dengan pertimbangan yang sesuai. +sinya meliputi %


20/20

K judul

K objekti#itas studi

K sama dengan protokol

K detail bahan

K peralatan

K )rogrammes and cycles use

K -etail prosedur dan metode uji

Dokumen.tips Validasi

Documents

Transcript of Dokumen.tips Validasi