プラスミドDNA精製ガイド NucleoBond® Xtra … ： NucleoSpin Plasmid EasyPure 10 5 0 05 10...
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ウェブサイト http://www.takara-bio.co.jp 本パンフレットに掲載した製品はMACHEREY-NAGEL（マッハライ・ナーゲル）社の製品です。 高純度、高収量、高速のプラスミドDNA大量調製 （陰イオン交換カラム） ◆ トランスフェクショングレードのプラスミド調製 NucleoBond ® Xtra Midi / Maxi ◆ エンドトキシンフリーのプラスミド調製 NucleoBond ® Xtra Midi / Maxi EF ◆ 大型ベクターの調製 NucleoBond ® Xtra BAC MN プラスミドDNA精製ガイド 高純度、高収率、迅速精製のNucleoBond ® カラム 迅速、確実なNucleoSpin ® カラム Si spacer NH CH 3 OH O CH2 O P O O O anion-exchanger group MAE DNA backbone binding 2 3 O CH O P O O O elution of DNA anion-exchanger group MAE DNA backbone pH shift Si spacer N CH OH 結合 pH変化 溶出 Si silica membrane DNA/ RNA backbone O H H O H H O O O O O Si O Si O Si O O Si O O H H O H H O CH2 O P O O O O P O O O O H H H O H H low-salt or water elution of DNA/ RNA silica membrane DNA/ RNA backbone O H H O H H O H H O H H O H H O H H chaotropic salt O P O O O O CH2 O P O O O binding binding O O O O Si OH Si OH Si OH Si OH O Si OH 結合 低塩濃度 溶出 簡便、迅速なプラスミドミニプレップ （シリカメンブレン） ◆ 迅速かつ高収量のプラスミドミニプレップキット NucleoSpin ® Plasmid EasyPure
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2014年9月作成22K
取扱店
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本パンフレットに掲載した製品はMACHEREY-NAGEL（マッハライ・ナーゲル）社の製品です。
高純度、高収量、高速のプラスミドDNA大量調製 （陰イオン交換カラム）
◆ トランスフェクショングレードのプラスミド調製 NucleoBond® Xtra Midi / Maxi
◆ エンドトキシンフリーのプラスミド調製 NucleoBond® Xtra Midi / Maxi EF
◆ 大型ベクターの調製 NucleoBond® Xtra BAC
MN
プラスミドDNA精製ガイド
高純度、高収率、迅速精製のNucleoBond®カラム迅速、確実なNucleoSpin®カラム
Si spacer NH
CH3
OHO
CH2
O
P
O
O
O
anion-exchangergroup MAE
DNA backbone
binding
2
3
O
CH
O
P
O
O
O
elution of DNA
anion-exchangergroup MAE
DNA backbone
pH shift
Si spacer N
CH
OH
結合pH変化
溶出
Si
silica membrane DNA / RNA backbone
O
HH
O
HH
O
O
O
O
O
Si O
Si O
Si O
O
Si O
OH
H
OH
H
O
CH2
O
P
O
O
O
O
P
OO
OO
H
H
OH
H
OH
H
low-salt or waterelution of DNA / RNA
silica membrane DNA / RNA backbone
O
H HOH
H
OH
H
OH
H
O
HH
OH
Hchaotropicsalt
O
P
O
O
O
O
CH2
O
P
O
O
O
binding
binding
O
O
O
O
Si OH
Si OH
Si OH
Si OH
O
Si OH
結合低塩濃度
溶出
簡便、迅速なプラスミドミニプレップ （シリカメンブレン）
◆ 迅速かつ高収量のプラスミドミニプレップキット NucleoSpin® Plasmid EasyPure
BAC・コスミド・フォスミドなど大型ベクター精製はお任せください！
◆ 300 kbまでの大型ベクター調製にP1ファージ、BAC、PAC等の大型ベクタ－DNAを高純度に精製します。
◆ 陰イオン交換法でトランスフェクショングレードに精製自然落下カラムでDNAの断片化を防止します。
◆ 独自のデブリス除去フィルターを使用カラムフィルターによりライセートの清澄化とローディングがワンステップで完了します。
◆ Lysis BufferにLyseControl pH指示薬を添加アルカリ融解、中和反応が可視化され、確実な操作が可能になりました。
◆ 約75分で精製完了最適化されたシリカメンブレン、Bufferにより75分で大型ベクターを精製できます。
■製品仕様陰イオン交換クロマトグラフィー法
自然落下型カラム
250～750 ml
～300 kb
10～100 μg
1.80～1.95
遠心分離
75分
150 μg
原理
形状
精製可能な大腸菌培養液量
対応プラスミドDNAサイズ
標準的な回収量
A260/280
イソプロパノール沈殿時の回収方法
精製時間
結合容量
■製品リスト製 品 名 容 量 製品コード 価格（税別）
NucleoBond® Xtra BAC10回
25回
740436.10
740436.25
¥38,000
¥83,000
【関連製品】NucleoBond Xtraシリーズに共通に使用できる便利なRackです。Midiカラムなら6本、Xtra BACなどMaxiサイズのカラムなら4本を立てて精製に使用できます。
製 品 名 容 量 製品コード 価格（税別）
NucleoBond® Xtra Combi Rack 1個 740415 ¥14,500
NucleoBond® Xtra BACNucleoBond® Xtra BAC
![Page 2: プラスミドDNA精製ガイド NucleoBond® Xtra … ： NucleoSpin Plasmid EasyPure 10 5 0 05 10 15 Preparation time for six samples[min] 20 25 30 I Q S F MN P 30 23 22 20 14 12](https://reader040.fdocuments.net/reader040/viewer/2022020214/5ac1c2767f8b9a4e7c8d7411/html5/page/2.jpg)
－2－ プラスミドDNA精製ガイド プラスミドDNA精製ガイド －3－
14分で30 μgまでのプラスミドDNAを精製、迅速性と高収量を兼ね備えたキット
◆ 精製時間14分
■製品仕様シリカメンブレン法
ミニスピンカラム
2～10 ml
＜15 kb
15～30 μg
1.80～1.85
50 μl
14分
35 μg
原理
形状
精製可能な大腸菌培養液量
対応プラスミドDNAサイズ
標準的な回収量
A260/280
溶出液量
精製時間
結合容量
独自の処理を行ったシリカメンブレンを用いており、洗浄と乾燥を同時に行うことができます。これまで3ステップを要した洗浄・乾燥の操作が1ステップになりました。
◆ LyseControlによる確実な操作Lysis Buffer A2にはpH指示薬 LyseControlが添加されており、粘性が高いためミスが起こりがちな大腸菌のアルカリ融解～中和工程を、目で見て確認しながら確実に操作できます。
◆ RNaseを溶液で添付キットに付属するRNaseが溶液で添付されているため、溶解の手間をかけずにすぐ実験に使用できます。
◆ 30 μgまでの高収量結合容量の大きなシリカメンブレンを使用し、最大30 μgまでのプラスミドDNA精製が可能です。
■製品リスト
■各種プラスミド精製キットの比較
製 品 名 容 量 製品コード 価格（税別）
NucleoSpin® Plasmid EasyPure10回
50回
250回
740727.10
740727.50
740727.250
¥4,200
¥10,500
¥35,700
MACHEREY-NAGEL社 プラスミドDNA精製キット選択ガイド
目的は？ 重視するのは？
必要量は？
お勧めはこれ！
高収量
ミニプレップ
Transfectionに使いたい！
Transfection（Endotoxin free）
に使いたい！
BAC, PAC, P1, cosmid
を取りたい！
シリカメンブレン
陰イオン交換カラム
NucleoSpin® Plasmid
NucleoBond® PC 20
NucleoSpin® 8/96 Plasmid
シリンジを用いて「ろ過」と「溶出」を行うだけの簡単操作でイソプロ沈殿操作を簡略化
High Yield
迅速Ultra Fast
迅速、高収量
3～20 μg
NucleoBond® PC 100
NucleoBond® PC 2000
NucleoBond® PC 10000
NucleoBond® PC 2000 EF
20～100 μg
～500 μg
～1,000 μg
～2,000 μg
5,000～9,000 μg
多検体
（収量 ： ～40 μg）
NucleoSpin® PlasmidQuickPure
（精製時間 ： 11分）
NucleoSpin® PlasmidEasyPure
（精製時間 ： 14分、収量 ： ～30 μg ）→3ページ参照
NucleoBond® XtraMidi / Midi Plus
NucleoBond® XtraMaxi / Maxi Plus
【操作フローの比較】
溶菌
NS Plasmid EasyPure
結合
洗浄/乾燥
溶出
溶菌
他社同タイプキット
結合
1回目洗浄
2回目洗浄
乾燥
溶出
NucleoSpin® Plasmid EasyPureNucleoSpin® Plasmid EasyPure
CloningTransformationSequencing
に使いたい！
→4～5ページ参照
～500 μg
～1,000 μg
～2,000 μg
NucleoBond® PC 10000 EF
NucleoBond® Finalizer
5,000～9,000 μg
多検体
NucleoBond® XtraMidi EF / Midi Plus EF
NucleoBond® XtraMaxi EF / Maxi Plus EF
NucleoBond® 96 Xtra EF
NucleoBond® Xtra BAC
→6～7ページ参照
→7ページ参照
→8ページ参照
NucleoSpin Plasmid EasyPureおよび他社プラスミドDNA精製キット（Q、S、I、F、P）を用いて、大腸菌DH5α培養液1 ml～4 mlからプラスミド（pcDNA3.1）を精製し、収量の確認を行った。 （マッハライ・ナーゲル社取得データ）A：各3連で精製実験を行い、中央値をプロットした。B：各精製キットの作業時間を比較した。
30A25
20
15
μg DNA
Culture volume1 mL 2 mL 3 mL 4 mL
ー MNー Qー Sー Iー Fー P
MN ： NucleoSpin Plasmid EasyPure
10
5
0
A
0 5 10 15Preparation time for six samples［min］
20 25 30
I
Q
S
F
MN
P
30
23
22
20
14
12B
Ultra Fast, High Yield
![Page 3: プラスミドDNA精製ガイド NucleoBond® Xtra … ： NucleoSpin Plasmid EasyPure 10 5 0 05 10 15 Preparation time for six samples[min] 20 25 30 I Q S F MN P 30 23 22 20 14 12](https://reader040.fdocuments.net/reader040/viewer/2022020214/5ac1c2767f8b9a4e7c8d7411/html5/page/3.jpg)
－2－ プラスミドDNA精製ガイド プラスミドDNA精製ガイド －3－
14分で30 μgまでのプラスミドDNAを精製、迅速性と高収量を兼ね備えたキット
◆ 精製時間14分
■製品仕様シリカメンブレン法
ミニスピンカラム
2～10 ml
＜15 kb
15～30 μg
1.80～1.85
50 μl
14分
35 μg
原理
形状
精製可能な大腸菌培養液量
対応プラスミドDNAサイズ
標準的な回収量
A260/280
溶出液量
精製時間
結合容量
独自の処理を行ったシリカメンブレンを用いており、洗浄と乾燥を同時に行うことができます。これまで3ステップを要した洗浄・乾燥の操作が1ステップになりました。
◆ LyseControlによる確実な操作Lysis Buffer A2にはpH指示薬 LyseControlが添加されており、粘性が高いためミスが起こりがちな大腸菌のアルカリ融解～中和工程を、目で見て確認しながら確実に操作できます。
◆ RNaseを溶液で添付キットに付属するRNaseが溶液で添付されているため、溶解の手間をかけずにすぐ実験に使用できます。
◆ 30 μgまでの高収量結合容量の大きなシリカメンブレンを使用し、最大30 μgまでのプラスミドDNA精製が可能です。
■製品リスト
■各種プラスミド精製キットの比較
製 品 名 容 量 製品コード 価格（税別）
NucleoSpin® Plasmid EasyPure10回
50回
250回
740727.10
740727.50
740727.250
¥4,200
¥10,500
¥35,700
MACHEREY-NAGEL社 プラスミドDNA精製キット選択ガイド
目的は？ 重視するのは？
必要量は？
お勧めはこれ！
高収量
ミニプレップ
Transfectionに使いたい！
Transfection（Endotoxin free）
に使いたい！
BAC, PAC, P1, cosmid
を取りたい！
シリカメンブレン
陰イオン交換カラム
NucleoSpin® Plasmid
NucleoBond® PC 20
NucleoSpin® 8/96 Plasmid
シリンジを用いて「ろ過」と「溶出」を行うだけの簡単操作でイソプロ沈殿操作を簡略化
High Yield
迅速Ultra Fast
迅速、高収量
3～20 μg
NucleoBond® PC 100
NucleoBond® PC 2000
NucleoBond® PC 10000
NucleoBond® PC 2000 EF
20～100 μg
～500 μg
～1,000 μg
～2,000 μg
5,000～9,000 μg
多検体
（収量 ： ～40 μg）
NucleoSpin® PlasmidQuickPure
（精製時間 ： 11分）
NucleoSpin® PlasmidEasyPure
（精製時間 ： 14分、収量 ： ～30 μg ）→3ページ参照
NucleoBond® XtraMidi / Midi Plus
NucleoBond® XtraMaxi / Maxi Plus
【操作フローの比較】
溶菌
NS Plasmid EasyPure
結合
洗浄/乾燥
溶出
溶菌
他社同タイプキット
結合
1回目洗浄
2回目洗浄
乾燥
溶出
NucleoSpin® Plasmid EasyPureNucleoSpin® Plasmid EasyPure
CloningTransformationSequencing
に使いたい！
→4～5ページ参照
～500 μg
～1,000 μg
～2,000 μg
NucleoBond® PC 10000 EF
NucleoBond® Finalizer
5,000～9,000 μg
多検体
NucleoBond® XtraMidi EF / Midi Plus EF
NucleoBond® XtraMaxi EF / Maxi Plus EF
NucleoBond® 96 Xtra EF
NucleoBond® Xtra BAC
→6～7ページ参照
→7ページ参照
→8ページ参照
NucleoSpin Plasmid EasyPureおよび他社プラスミドDNA精製キット（Q、S、I、F、P）を用いて、大腸菌DH5α培養液1 ml～4 mlからプラスミド（pcDNA3.1）を精製し、収量の確認を行った。 （マッハライ・ナーゲル社取得データ）A：各3連で精製実験を行い、中央値をプロットした。B：各精製キットの作業時間を比較した。
30A25
20
15
μg DNA
Culture volume1 mL 2 mL 3 mL 4 mL
ー MNー Qー Sー Iー Fー P
MN ： NucleoSpin Plasmid EasyPure
10
5
0
A
0 5 10 15Preparation time for six samples［min］
20 25 30
I
Q
S
F
MN
P
30
23
22
20
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12B
Ultra Fast, High Yield
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－4－ プラスミドDNA精製ガイド プラスミドDNA精製ガイド －5－
「もっと短時間で高純度プラスミドを精製したい」…そんなご要望に応えました！
NucleoBond® Xtra Midi / Maxiは陰イオン交換法を用いた新世代のカラムです。
■NucleoBond® Xtra Maxiおよび他社キットで得られたプラスミドを用いてトランスフェクション効率を比較
■他社陰イオン交換法キットとの作業時間および収量の比較
◆ 作業時間が60%も短縮・新規カラムフィルターの採用により、複数サンプルの同時操作性がアップ ➡ ❶・新規カラムフィルターは表面加工により、詰まりを抑え高流速性を実現 ➡ ❶・大きなカラム直径とシリカ樹脂量の最適化で高流速性を実現 ➡ ❸・NucleoBond® Xtra PlusキットにはDNA濃縮を短時間で行うためのNucleoBond® Finalizerを添付しています。
◆ 収量が2倍にアップ・シリカ樹脂担体の改良によりDNA結合量を大幅にアップ ➡ ❷・バッファー組成を最適化
◆ Lysis BufferにLyseControl pH指示薬を添加・アルカリ融解、中和反応が可視化され、確実な操作が可能になりました。
◆ 高純度・トランスフェクショングレードに精製・回収したDNAはそのまま様々な反応に利用可能です。・マッハライ・ナーゲル社の陰イオン交換法は特許取得済みであり、高品質を保証します。
【方法】6 kbの高コピープラスミドとDH5αを使用。精製は各プロトコールに従い、培養液量は推奨範囲の最大量を用いた。 ・NucleoBond Xtra Maxi … 収量 ： 1,222 μg 純度 ： A260/280 ： 1.84 ・Q社キット（Maxi prep) … 収量 ： 557 μg 純度 ： A260/280 ： 1.8612穴プレートに2.5 × 104 cells/wellで接種したHEK293細胞に、ウェルあたり0.1～0.25 μgのプラスミドDNAと1.5 μlの市販のトランスフェクション試薬を用いて遺伝子導入を行った。48時間後に、Gephyrinが融合したEGFPをレポーターとしてHEK293細胞での発現を観察した。（Gephyrin ： 後シナプス膜の受容体複合体と結合し、後シナプス膜形成に重要な役割を果たすポリペプチド）【結果】NucleoBond Xtra Maxiで精製したプラスミドは、Q社キットで精製したものに比べ高い遺伝子導入効率を示した。
各製品のプロトコールに従い、高コピー数のプラスミドDNAを推奨範囲で最大の培養液量を用いて精製した。プラスミドDNAの収量（□）はカラム溶出後（濃縮操作前）の溶液で測定した。 （マッハライ・ナーゲル社取得データ）A ： DNA濃縮用ツールを含むキットの場合＊ B ： DNA濃縮用ツールを含まないキットの場合（遠心法を利用）
＊DNA濃縮用ツールを用いた結果、いずれのキットでも90%程度までのDNAが回収できた。
■製品仕様NucleoBond® Xtra Midi NucleoBond® Xtra Maxi
陰イオン交換クロマトグラフィー法
自然落下型カラム
～200 ml（high copy）～400 ml（low copy）
～600 ml（high copy）～1,200 ml（low copy）
～300 kb
1.8～1.95
～500 μg ～1,000 μg
Xtra Midi遠心分離
70分
Xtra Midi PlusFinalizer
30分
Xtra Maxi遠心分離
80分
Xtra Maxi PlusFinalizer
35分
原理
形状
精製可能な大腸菌培養液量
対応プラスミドDNAサイズ
標準的な回収量
A260/280
イソプロパノール沈殿時の回収方法
精製時間
NucleoBond® Xtra Maxi Ｑ社キット
NucleoBond® Xtra Midi / MaxiNucleoBond® Xtra Midi / MaxiNucleoBond® Xtra Midi / MaxiNucleoBond® Xtra Midi / Maxi
Preparation time [min]0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200
260 µg competitor Q-2
125 µg competitor I
580 µg NucleoBond
Xtra Midi
520 µg NucleoBond
Xtra Midi Plus（Finalizer）
A
B
335 µg competitor Q-1
(HiSpeed)溶解・変性
中和
不溶物除去
カラム吸着・溶出
アルコール沈殿・濃縮
プラスミド収量
新規カラムフィルター
➡短時間調製が可能！簡単操作でデブリス除去
シリカ樹脂担体の改良
➡収量が大幅アップ！高いDNA結合容量
カラム直径が大きい
➡短時間調製が可能！流速が飛躍的に向上
❶
❸
❷
■製品リスト製 品 名 容 量 製品コード 価格（税別）
NucleoBond® Xtra Midi
NucleoBond® Xtra Midi Plus （Finalizer付き）
NucleoBond® Xtra Maxi
NucleoBond® Xtra Maxi Plus （Finalizer付き）
10回
50回
100回
10回
50回
10回
50回
100回
10回
50回
740410.10
740410.50
740410.100
740412.10
740412.50
740414.10
740414.50
740414.100
740416.10
740416.50
¥13,700
¥60,000
¥110,000
¥16,800
¥75,000
¥30,000
¥139,000
¥263,000
¥34,700
¥163,000
［注］低コピープラスミドを精製する際にはバッファーの使用量を増やす必要があるため、追加バッファー（NucleoBond® Xtra Buffer Set I ; 製品コード 740417）が必要です。詳しくはウェブカタログをご覧ください。
Data kindly provided Prof. Guenter Schwarz, Institute of Biochemistry, University of Cologne, Germany
![Page 5: プラスミドDNA精製ガイド NucleoBond® Xtra … ： NucleoSpin Plasmid EasyPure 10 5 0 05 10 15 Preparation time for six samples[min] 20 25 30 I Q S F MN P 30 23 22 20 14 12](https://reader040.fdocuments.net/reader040/viewer/2022020214/5ac1c2767f8b9a4e7c8d7411/html5/page/5.jpg)
－4－ プラスミドDNA精製ガイド プラスミドDNA精製ガイド －5－
「もっと短時間で高純度プラスミドを精製したい」…そんなご要望に応えました！
NucleoBond® Xtra Midi / Maxiは陰イオン交換法を用いた新世代のカラムです。
■NucleoBond® Xtra Maxiおよび他社キットで得られたプラスミドを用いてトランスフェクション効率を比較
■他社陰イオン交換法キットとの作業時間および収量の比較
◆ 作業時間が60%も短縮・新規カラムフィルターの採用により、複数サンプルの同時操作性がアップ ➡ ❶・新規カラムフィルターは表面加工により、詰まりを抑え高流速性を実現 ➡ ❶・大きなカラム直径とシリカ樹脂量の最適化で高流速性を実現 ➡ ❸・NucleoBond® Xtra PlusキットにはDNA濃縮を短時間で行うためのNucleoBond® Finalizerを添付しています。
◆ 収量が2倍にアップ・シリカ樹脂担体の改良によりDNA結合量を大幅にアップ ➡ ❷・バッファー組成を最適化
◆ Lysis BufferにLyseControl pH指示薬を添加・アルカリ融解、中和反応が可視化され、確実な操作が可能になりました。
◆ 高純度・トランスフェクショングレードに精製・回収したDNAはそのまま様々な反応に利用可能です。・マッハライ・ナーゲル社の陰イオン交換法は特許取得済みであり、高品質を保証します。
【方法】6 kbの高コピープラスミドとDH5αを使用。精製は各プロトコールに従い、培養液量は推奨範囲の最大量を用いた。 ・NucleoBond Xtra Maxi … 収量 ： 1,222 μg 純度 ： A260/280 ： 1.84 ・Q社キット（Maxi prep) … 収量 ： 557 μg 純度 ： A260/280 ： 1.8612穴プレートに2.5 × 104 cells/wellで接種したHEK293細胞に、ウェルあたり0.1～0.25 μgのプラスミドDNAと1.5 μlの市販のトランスフェクション試薬を用いて遺伝子導入を行った。48時間後に、Gephyrinが融合したEGFPをレポーターとしてHEK293細胞での発現を観察した。（Gephyrin ： 後シナプス膜の受容体複合体と結合し、後シナプス膜形成に重要な役割を果たすポリペプチド）【結果】NucleoBond Xtra Maxiで精製したプラスミドは、Q社キットで精製したものに比べ高い遺伝子導入効率を示した。
各製品のプロトコールに従い、高コピー数のプラスミドDNAを推奨範囲で最大の培養液量を用いて精製した。プラスミドDNAの収量（□）はカラム溶出後（濃縮操作前）の溶液で測定した。 （マッハライ・ナーゲル社取得データ）A ： DNA濃縮用ツールを含むキットの場合＊ B ： DNA濃縮用ツールを含まないキットの場合（遠心法を利用）
＊DNA濃縮用ツールを用いた結果、いずれのキットでも90%程度までのDNAが回収できた。
■製品仕様NucleoBond® Xtra Midi NucleoBond® Xtra Maxi
陰イオン交換クロマトグラフィー法
自然落下型カラム
～200 ml（high copy）～400 ml（low copy）
～600 ml（high copy）～1,200 ml（low copy）
～300 kb
1.8～1.95
～500 μg ～1,000 μg
Xtra Midi遠心分離
70分
Xtra Midi PlusFinalizer
30分
Xtra Maxi遠心分離
80分
Xtra Maxi PlusFinalizer
35分
原理
形状
精製可能な大腸菌培養液量
対応プラスミドDNAサイズ
標準的な回収量
A260/280
イソプロパノール沈殿時の回収方法
精製時間
NucleoBond® Xtra Maxi Ｑ社キット
NucleoBond® Xtra Midi / MaxiNucleoBond® Xtra Midi / MaxiNucleoBond® Xtra Midi / MaxiNucleoBond® Xtra Midi / Maxi
Preparation time [min]0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200
260 µg competitor Q-2
125 µg competitor I
580 µg NucleoBond
Xtra Midi
520 µg NucleoBond
Xtra Midi Plus（Finalizer）
A
B
335 µg competitor Q-1
(HiSpeed)溶解・変性
中和
不溶物除去
カラム吸着・溶出
アルコール沈殿・濃縮
プラスミド収量
新規カラムフィルター
➡短時間調製が可能！簡単操作でデブリス除去
シリカ樹脂担体の改良
➡収量が大幅アップ！高いDNA結合容量
カラム直径が大きい
➡短時間調製が可能！流速が飛躍的に向上
❶
❸
❷
■製品リスト製 品 名 容 量 製品コード 価格（税別）
NucleoBond® Xtra Midi
NucleoBond® Xtra Midi Plus （Finalizer付き）
NucleoBond® Xtra Maxi
NucleoBond® Xtra Maxi Plus （Finalizer付き）
10回
50回
100回
10回
50回
10回
50回
100回
10回
50回
740410.10
740410.50
740410.100
740412.10
740412.50
740414.10
740414.50
740414.100
740416.10
740416.50
¥13,700
¥60,000
¥110,000
¥16,800
¥75,000
¥30,000
¥139,000
¥263,000
¥34,700
¥163,000
［注］低コピープラスミドを精製する際にはバッファーの使用量を増やす必要があるため、追加バッファー（NucleoBond® Xtra Buffer Set I ; 製品コード 740417）が必要です。詳しくはウェブカタログをご覧ください。
Data kindly provided Prof. Guenter Schwarz, Institute of Biochemistry, University of Cologne, Germany
![Page 6: プラスミドDNA精製ガイド NucleoBond® Xtra … ： NucleoSpin Plasmid EasyPure 10 5 0 05 10 15 Preparation time for six samples[min] 20 25 30 I Q S F MN P 30 23 22 20 14 12](https://reader040.fdocuments.net/reader040/viewer/2022020214/5ac1c2767f8b9a4e7c8d7411/html5/page/6.jpg)
－6－ プラスミドDNA精製ガイド プラスミドDNA精製ガイド －7－
簡単迅速にエンドトキシンフリーのプラスミドを精製
NucleoBond® Xtra Midi / Maxiにニューテクノロジーを融合させたキットでエンドトキシンフリープラスミドDNAを調製！
■本製品で精製したプラスミドDNAによるラット海馬由来初代培養神経細胞への遺伝子導入
◆ 高いエンドトキシン除去効果エンドトキシンレベルは、0.05 EU/μg未満エンドトキシンに感受性の高い細胞のトランスフェクションに最適です。
◆ 作業時間が大幅に短縮（最大68％）・NucleoBond® Xtraでの工程に洗浄ステップが一つ加わっただけです。・他のエンドトキシンフリープラスミド調製キットと比べて、作業時間が大幅に短縮されました。
◆ 収量が2倍にアップ基本仕様はNucleoBond® Xtraと同等のため、他のキットと比べて2倍量のプラスミドDNAを短時間で調製できます。
◆ 96 well formatでのエンドトキシンフリープラスミド精製96 well formatで一度に多種類のプラスミドDNAを精製
◆ 陰イオン交換カラムで高純度陰イオン交換カラムによりエンドトキシンフリーのプラスミドDNAを高収量かつ迅速に精製できます（＜0.1 EU/μg DNA）。
◆ 最大50 μgの収量
◆ NucleoBond® Filter Plateでデブリスを濾過除去、 NucleoBond® Finalizer Plateにより精製時間短縮
大腸菌培養液5 mlを使用可能です。
◆ Lysis BufferにLyseControl pH指示薬を添加アルカリ融解、中和反応が可視化され、確実な操作が可能になりました。
NucleoBond® Finalizerを含むNucleoBond® Xtra Midi/Maxi Plus EFがお勧めです。
【方法】プラスミド精製：GFP融合型Neuroligin（後シナプス膜タンパク質）を含む9 kbの高コピープラスミドDNAを、NucleoBond Xtra Midi EFを用いて大腸菌株XL1-Blueから精製した。遺伝子導入実験：ラット海馬由来初代培養神経細胞を6日間培養した後、ウェルあたり1 μgのプラスミドDNAを用いて遺伝子を導入した。遺伝子導入にはリン酸カルシウム法を用い、導入48時間後に蛍光顕微鏡で観察を行った。【結果】初代培養神経細胞において一過性の発現が認められた。
NucleoBond® Xtra Midi / Maxi EFNucleoBond® Xtra Midi / Maxi EF
エンドトキシンフリーのプラスミドを96ウェルスケールでハイスループット精製
NucleoBond® 96 Xtra EFNucleoBond® 96 Xtra EF
20 µm
さらに簡単かつ短時間調製を行うには・・・
Data kindly provided by Dr. Nina Wittenmayer, Ruprecht-Karls-University Heidelberg, Institute for Anatomy and Cell Biology, Dept. of Medical Cell Biology,Heidelberg, Germany
NucleoBond® Xtra EFで調製したプラスミドDNAは、遺伝子導入が難しい初代培養神経細胞においても問題なく導入できることが確認できた。
■製品仕様NucleoBond® Xtra Midi EF NucleoBond® Xtra Maxi EF
陰イオン交換クロマトグラフィー法
自然落下型カラム
～200 ml（high copy）～400 ml（low copy）
～600 ml（high copy）～1,200 ml（low copy）
～300 kb
1.8～1.95
＜0.05 EU/μg DNA
～500 μg ～1,000 μg
Xtra Midi遠心分離
100分
Xtra Midi PlusFinalizer
45分
Xtra Maxi遠心分離
105分
Xtra Maxi PlusFinalizer
50分
原理
形状
精製可能な大腸菌培養液量
対応プラスミドDNAサイズ
標準的な回収量
A260/280
エンドトキシンレベル
イソプロパノール沈殿時の回収方法
精製時間
NucleoBond® Xtra Midi / Maxi EFNucleoBond® Xtra Midi / Maxi EF■製品リスト
製 品 名 容 量 製品コード 価格（税別）
NucleoBond® Xtra Midi EF
NucleoBond® Xtra Midi Plus EF （Finalizer付き）
NucleoBond® Xtra Maxi EF
NucleoBond® Xtra Maxi Plus EF （Finalizer付き）
10回
50回
10回
50回
10回
50回
10回
50回
740420.10
740420.50
740422.10
740422.50
740424.10
740424.50
740426.10
740426.50
¥20,900
¥92,500
¥26,300
¥116,000
¥42,500
¥208,000
¥54,000
¥247,000
［注］低コピープラスミドを精製する際にはバッファーの使用量を増やす必要があるため、追加バッファー（NucleoBond® Xtra EF Buffer Set I ; 製品コード 740427）が必要です。詳しくはウェブカタログをご覧ください。
■製品仕様陰イオン交換クロマトグラフィー法
96ウェルプレート
1～5 ml
～15 kb（Nucleobond Finalizer Plateを使用しない場合、～300 kb）
2～4 μg （96 well plate 1.5 ml培養）10～50 μg（試験管で5 ml培養）
1.80～1.95
＜0.1 EU/μg DNA
100～200 μl
120分
50 μg
原理
形状
精製可能な大腸菌培養液量
対応プラスミドDNAサイズ
標準的な回収量（高コピープラスミドの場合）
A260/280
エンドトキシンレベル
溶出液量
精製時間
結合容量
■製品リスト製 品 名 容 量 製品コード 価格（税別）
NucleoBond® 96 Xtra EF96 well × 1
96 well × 4
740430.1
740430.4
¥95,000
¥300,000
or
ライセートの清澄化
洗浄と溶出
イソプロパノールの添加
DNA結合と洗浄
DNA回収
結合
アルカリ溶解
NucleoBond Filter Plate
NucleoBond Xtra EF Plate
NucleoBond Finalizer Plate
NucleoBond Xtra EF Plate
吸引 or遠心分離
自然落下
自然落下
吸引 or遠心分離
【操作フロー】
![Page 7: プラスミドDNA精製ガイド NucleoBond® Xtra … ： NucleoSpin Plasmid EasyPure 10 5 0 05 10 15 Preparation time for six samples[min] 20 25 30 I Q S F MN P 30 23 22 20 14 12](https://reader040.fdocuments.net/reader040/viewer/2022020214/5ac1c2767f8b9a4e7c8d7411/html5/page/7.jpg)
－6－ プラスミドDNA精製ガイド プラスミドDNA精製ガイド －7－
簡単迅速にエンドトキシンフリーのプラスミドを精製
NucleoBond® Xtra Midi / Maxiにニューテクノロジーを融合させたキットでエンドトキシンフリープラスミドDNAを調製！
■本製品で精製したプラスミドDNAによるラット海馬由来初代培養神経細胞への遺伝子導入
◆ 高いエンドトキシン除去効果エンドトキシンレベルは、0.05 EU/μg未満エンドトキシンに感受性の高い細胞のトランスフェクションに最適です。
◆ 作業時間が大幅に短縮（最大68％）・NucleoBond® Xtraでの工程に洗浄ステップが一つ加わっただけです。・他のエンドトキシンフリープラスミド調製キットと比べて、作業時間が大幅に短縮されました。
◆ 収量が2倍にアップ基本仕様はNucleoBond® Xtraと同等のため、他のキットと比べて2倍量のプラスミドDNAを短時間で調製できます。
◆ 96 well formatでのエンドトキシンフリープラスミド精製96 well formatで一度に多種類のプラスミドDNAを精製
◆ 陰イオン交換カラムで高純度陰イオン交換カラムによりエンドトキシンフリーのプラスミドDNAを高収量かつ迅速に精製できます（＜0.1 EU/μg DNA）。
◆ 最大50 μgの収量
◆ NucleoBond® Filter Plateでデブリスを濾過除去、 NucleoBond® Finalizer Plateにより精製時間短縮
大腸菌培養液5 mlを使用可能です。
◆ Lysis BufferにLyseControl pH指示薬を添加アルカリ融解、中和反応が可視化され、確実な操作が可能になりました。
NucleoBond® Finalizerを含むNucleoBond® Xtra Midi/Maxi Plus EFがお勧めです。
【方法】プラスミド精製：GFP融合型Neuroligin（後シナプス膜タンパク質）を含む9 kbの高コピープラスミドDNAを、NucleoBond Xtra Midi EFを用いて大腸菌株XL1-Blueから精製した。遺伝子導入実験：ラット海馬由来初代培養神経細胞を6日間培養した後、ウェルあたり1 μgのプラスミドDNAを用いて遺伝子を導入した。遺伝子導入にはリン酸カルシウム法を用い、導入48時間後に蛍光顕微鏡で観察を行った。【結果】初代培養神経細胞において一過性の発現が認められた。
NucleoBond® Xtra Midi / Maxi EFNucleoBond® Xtra Midi / Maxi EF
エンドトキシンフリーのプラスミドを96ウェルスケールでハイスループット精製
NucleoBond® 96 Xtra EFNucleoBond® 96 Xtra EF
20 µm
さらに簡単かつ短時間調製を行うには・・・
Data kindly provided by Dr. Nina Wittenmayer, Ruprecht-Karls-University Heidelberg, Institute for Anatomy and Cell Biology, Dept. of Medical Cell Biology,Heidelberg, Germany
NucleoBond® Xtra EFで調製したプラスミドDNAは、遺伝子導入が難しい初代培養神経細胞においても問題なく導入できることが確認できた。
■製品仕様NucleoBond® Xtra Midi EF NucleoBond® Xtra Maxi EF
陰イオン交換クロマトグラフィー法
自然落下型カラム
～200 ml（high copy）～400 ml（low copy）
～600 ml（high copy）～1,200 ml（low copy）
～300 kb
1.8～1.95
＜0.05 EU/μg DNA
～500 μg ～1,000 μg
Xtra Midi遠心分離
100分
Xtra Midi PlusFinalizer
45分
Xtra Maxi遠心分離
105分
Xtra Maxi PlusFinalizer
50分
原理
形状
精製可能な大腸菌培養液量
対応プラスミドDNAサイズ
標準的な回収量
A260/280
エンドトキシンレベル
イソプロパノール沈殿時の回収方法
精製時間
NucleoBond® Xtra Midi / Maxi EFNucleoBond® Xtra Midi / Maxi EF■製品リスト
製 品 名 容 量 製品コード 価格（税別）
NucleoBond® Xtra Midi EF
NucleoBond® Xtra Midi Plus EF （Finalizer付き）
NucleoBond® Xtra Maxi EF
NucleoBond® Xtra Maxi Plus EF （Finalizer付き）
10回
50回
10回
50回
10回
50回
10回
50回
740420.10
740420.50
740422.10
740422.50
740424.10
740424.50
740426.10
740426.50
¥20,900
¥92,500
¥26,300
¥116,000
¥42,500
¥208,000
¥54,000
¥247,000
［注］低コピープラスミドを精製する際にはバッファーの使用量を増やす必要があるため、追加バッファー（NucleoBond® Xtra EF Buffer Set I ; 製品コード 740427）が必要です。詳しくはウェブカタログをご覧ください。
■製品仕様陰イオン交換クロマトグラフィー法
96ウェルプレート
1～5 ml
～15 kb（Nucleobond Finalizer Plateを使用しない場合、～300 kb）
2～4 μg （96 well plate 1.5 ml培養）10～50 μg（試験管で5 ml培養）
1.80～1.95
＜0.1 EU/μg DNA
100～200 μl
120分
50 μg
原理
形状
精製可能な大腸菌培養液量
対応プラスミドDNAサイズ
標準的な回収量（高コピープラスミドの場合）
A260/280
エンドトキシンレベル
溶出液量
精製時間
結合容量
■製品リスト製 品 名 容 量 製品コード 価格（税別）
NucleoBond® 96 Xtra EF96 well × 1
96 well × 4
740430.1
740430.4
¥95,000
¥300,000
or
ライセートの清澄化
洗浄と溶出
イソプロパノールの添加
DNA結合と洗浄
DNA回収
結合
アルカリ溶解
NucleoBond Filter Plate
NucleoBond Xtra EF Plate
NucleoBond Finalizer Plate
NucleoBond Xtra EF Plate
吸引 or遠心分離
自然落下
自然落下
吸引 or遠心分離
【操作フロー】
![Page 8: プラスミドDNA精製ガイド NucleoBond® Xtra … ： NucleoSpin Plasmid EasyPure 10 5 0 05 10 15 Preparation time for six samples[min] 20 25 30 I Q S F MN P 30 23 22 20 14 12](https://reader040.fdocuments.net/reader040/viewer/2022020214/5ac1c2767f8b9a4e7c8d7411/html5/page/8.jpg)
2014年9月作成22K
取扱店
・本パンフレットで紹介した製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。・タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。・本パンフレットに記載された社名および製品名は、特に記載がなくても各社の商標または登録商標です。・ライセンス情報については弊社ウェブサイトにてご確認ください。・本パンフレット記載の価格は2014年9月1日現在の希望小売価格です。価格に消費税は含まれておりません。
東京支店 TEL 03-3271-8553 FAX 03-3271-7282関西支店 TEL 077-565-6969 FAX 077-565-6995
テクニカルサポートラインTEL 077-565-6999 FAX 077-565-6995Website http://www.takara-bio.co.jpFacebook http://www.facebook.com/takarabio.jp
ウェブサイト http://www.takara-bio.co.jp
本パンフレットに掲載した製品はMACHEREY-NAGEL（マッハライ・ナーゲル）社の製品です。
高純度、高収量、高速のプラスミドDNA大量調製 （陰イオン交換カラム）
◆ トランスフェクショングレードのプラスミド調製 NucleoBond® Xtra Midi / Maxi
◆ エンドトキシンフリーのプラスミド調製 NucleoBond® Xtra Midi / Maxi EF
◆ 大型ベクターの調製 NucleoBond® Xtra BAC
MN
プラスミドDNA精製ガイド
高純度、高収率、迅速精製のNucleoBond®カラム迅速、確実なNucleoSpin®カラム
Si spacer NH
CH3
OHO
CH2
O
P
O
O
O
anion-exchangergroup MAE
DNA backbone
binding
2
3
O
CH
O
P
O
O
O
elution of DNA
anion-exchangergroup MAE
DNA backbone
pH shift
Si spacer N
CH
OH
結合pH変化
溶出
Si
silica membrane DNA / RNA backbone
O
HH
O
HH
O
O
O
O
O
Si O
Si O
Si O
O
Si O
OH
H
OH
H
O
CH2
O
P
O
O
O
O
P
OO
OO
H
H
OH
H
OH
H
low-salt or waterelution of DNA / RNA
silica membrane DNA / RNA backbone
O
H HOH
H
OH
H
OH
H
O
HH
OH
Hchaotropicsalt
O
P
O
O
O
O
CH2
O
P
O
O
O
binding
binding
O
O
O
O
Si OH
Si OH
Si OH
Si OH
O
Si OH
結合低塩濃度
溶出
簡便、迅速なプラスミドミニプレップ （シリカメンブレン）
◆ 迅速かつ高収量のプラスミドミニプレップキット NucleoSpin® Plasmid EasyPure
BAC・コスミド・フォスミドなど大型ベクター精製はお任せください！
◆ 300 kbまでの大型ベクター調製にP1ファージ、BAC、PAC等の大型ベクタ－DNAを高純度に精製します。
◆ 陰イオン交換法でトランスフェクショングレードに精製自然落下カラムでDNAの断片化を防止します。
◆ 独自のデブリス除去フィルターを使用カラムフィルターによりライセートの清澄化とローディングがワンステップで完了します。
◆ Lysis BufferにLyseControl pH指示薬を添加アルカリ融解、中和反応が可視化され、確実な操作が可能になりました。
◆ 約75分で精製完了最適化されたシリカメンブレン、Bufferにより75分で大型ベクターを精製できます。
■製品仕様陰イオン交換クロマトグラフィー法
自然落下型カラム
250～750 ml
～300 kb
10～100 μg
1.80～1.95
遠心分離
75分
150 μg
原理
形状
精製可能な大腸菌培養液量
対応プラスミドDNAサイズ
標準的な回収量
A260/280
イソプロパノール沈殿時の回収方法
精製時間
結合容量
■製品リスト製 品 名 容 量 製品コード 価格（税別）
NucleoBond® Xtra BAC10回
25回
740436.10
740436.25
¥38,000
¥83,000
【関連製品】NucleoBond Xtraシリーズに共通に使用できる便利なRackです。Midiカラムなら6本、Xtra BACなどMaxiサイズのカラムなら4本を立てて精製に使用できます。
製 品 名 容 量 製品コード 価格（税別）
NucleoBond® Xtra Combi Rack 1個 740415 ¥14,500
NucleoBond® Xtra BACNucleoBond® Xtra BAC
