DISSERTAÇÃO_Conservação Pós-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilização de...

download DISSERTAÇÃO_Conservação Pós-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilização de Antioxidantes e Sanificante

of 64

Transcript of DISSERTAÇÃO_Conservação Pós-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilização de...

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    1/64

    CONSERVAO PS-COLHEITA DOCOGUMELOAgaricus blazeiCOM A

    UTILIZAO DE ANTIOXIDANTES ESANIFICANTE

    VALDENINA JEANMONOD LUZ

    2006

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    2/64

    VALDENINA JEANMONOD LUZ

    CONSERVAO PS-COLHEITA DO COGUMELOAgaricus blazeiCOM A UTILIZAO DE ANTIOXIDANTES E

    SANIFICANTE

    Dissertao apresentada Universidade Federalde Lavras como parte das exigncias doPrograma de Ps-Graduao em MicrobiologiaAgrcola, para a obteno do ttulo de Mestre.

    Orientador

    Prof. Dr. Eustquio Souza Dias

    LAVRASMINAS GERAIS-BRASIL

    2006

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    3/64

    Ficha Catalogrfica Preparada pela Diviso de Processos Tcnicos da

    Biblioteca central da UFLALuz, Valdenina Jeanmonod

    Conservao ps-colheita do cogumeloAgaricus blazeicom a utilizao de antioxidantes e sanificante/ ValdeninaJeanmonod Luz. Lavras: UFLA, 2006.

    50 p. : il.

    Orientador: Eustquio Souza Dias.Dissertao (Mestrado) UFLA.Bibliografia.

    1. Cogumelo. 2.Agaricus blazei. 3. Antioxidantes. 4.Sanificante. I. Universidade Federal de Lavras. II. Ttulo.

    CDD-635.8

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    4/64

    VALDENINA JEANMONOD LUZ

    CONSERVAO PS-COLHEITA DO COGUMELOAgaricusblazeiCOM A UTILIZAO DE ANTIOXIDANTES E

    SANIFICANTE

    Dissertao apresentada Universidade Federalde Lavras, como parte das exigncias doPrograma de Ps-Graduao em MicrobiologiaAgrcola, para a obteno do ttulo de Mestre.

    APROVADA em 30 de junho de 2006

    Profa Dra Roberta Hilsdorf Piccoli UFLA

    Prof. Dr. Eduardo Valrio de Barros Vilas Boas UFLA

    Prof. Dr. Eustquio Souza DiasUFLA

    (Orientador)

    LAVRASMINAS GERAIS-BRASIL

    2006

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    5/64

    AGRADECIMENTOS

    A Deus, pela sua infinita misericrdia.

    A Deus, pela sua infinita misericrdia.

    Aos meus pais Valdemar e Penina (in memoriam) pelos ensinamentos e pelo

    exemplo de vida.

    Aos meus irmos: Virgilina, Vandencolk, Valvitz, Vildes, Veimar, Penina Filha,

    Vileide (in memorian), Vanias (in memoriam), Venilton (in memoriam),

    Valdira, Villiam, Vanderite, Varnilson, Velma, Vera Vanda, Vilani, Valdson,Valnei e Valdemar Jnior, pela infncia gostosa, pelo amor e pela convivncia

    harmoniosa.

    A minha filha Jssica Ananda, pela fora, pelo carinho, pelo amor, pela

    compreenso e pela palavra amiga.

    Aos meus sobrinhos: Glenda, Elkiaer, Luiza, Kiria, Iracema Dbora. Rebeca,

    Jnior (Valvitz Filho), gor, Sandra, Thiago, Klber, Kleide e aos demais ,meu

    granda abrao.

    Aos meus cunhadas e cunhadas, bom t-los conosco. Igreja Crist Maranata de Alegre e de Lavras, pelas oraes incessantes pra

    que eu pudesse estar aqui hoje como vencedora.

    Ao professor Eustquio, pela brilhante maneira como me orientou.

    A Cidinha, pela pacincia e compreenso.

    Escola Agrotcnica Federal de Alegre, na pessoa do professor e ex diretor

    Edson Fosse Filho.

    professora Rosane, pela palavra amiga, principalmente pela compreenso.

    Ao professor Romildo, pelo jeito tranqilo de ver as coisas.Ao professor Eduardo, pela franqueza e objetividade.

    professora Roberta, pela pacincia e carinho em responder s minhas

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    6/64

    constantes perguntas.

    Ao professor Lus, pelas constantes discusses com fungos. professora Patrcia, pela amizade e determinao.

    Ao professor Paulo Clemente e a Cida, pelas aulas de conservas acidificadas.

    Ao pessoal da Biblioteca, pela gentileza, compreenso e amizade.

    Ao pessoal do Laboratrio de Microbiologia de Alimentos e Ps-colheita, o meu

    grande abrao e carinho a todos.

    Aos colegas e ex-colegas de ps-graduao: Flix, Patrcia, Mrcia, Mrcio,

    Sandra, Thas, Gisele, Joo, Dbora, Rmulo e Luciana, Euziclei Jonas, Evnia,

    Helson, Jane, Carla, Halan, Aramlia e Sheila.Ao pessoal dos laboratrios de Microbiologia: Ivani, Ana Paula, Caio, Joo,

    Emerson, Clenderson, Whasley, Dani e aos alunos novos do Mestrado.

    Aos funcionrios: Fbio, Magda, Soraya, Lamartine, Zlia, Rafaela, Elaine, Sol,

    Thiago, Irondina, Renata, Carla, Rosngela, Creuza e Mirlene.

    Aos funcionrios e alunos do laboratrio de Cincia dos Alimentos, Eliane,

    Camila, Danilo , Mara, Simone, Victor, Nlio, Cleber, Isabel, Sueli, Antnia e

    Piano, Danila, Talita e Guiliana, muito obrigada.

    Ao pessoal da ps-colheita, Mrcia, Elisngela, Andria, Luisinho, Helen, Tina,Sandra, Meyre, Miguel, Creuza e aos outros, grata por tudo.

    Aos funcionrios da Biblioteca, Eli, Fbio, Mrcia, Vnia, Narro, Coelho, Cida,

    Mrcio, Jos Maria, Miguel, Ana, Sebastio, Valdecir, Rosngela e aos demais,

    muito obrigada.

    A Nilba e Anicete, deixando Rondnia h 14 anos e nos encontrando aqui.

    Ao Rogrio, pelo apoio tcnico e estatstico.

    Valeu pessoal. Foi muito bom t-los como colegas de trabalho. Quando forem

    Bahia, ponto de frias: Itamaraju (Rua 5 de Outubro 709, centro)Fone: (xx73) 2941875. Prado, Alcobaa, Caravelas, Porto Seguro e tantos outros

    lugares esperando por vocs. Teremos o imenso prazer em receb-los.

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    7/64

    SUMRIO

    RESUMO..............................................................................................................i

    ABSTRACT....................................................................................................... iii

    1 INTRODUO................................................................................................1

    2 REFERENCIAL TERICO ..........................................................................3

    2.1 O uso de cogumelos na alimentao e na sade ............................................. 32.3 O escurecimento no enzimtico .................................................................. 102.4 O Escurecimento enzimtico ........................................................................102.5 Inibidores da polifenoloxidase......................................................................112.5.1. Sulfito e metabissulfito de sdio...............................................................11

    2.5.2 cido ctrico ..............................................................................................132.5.3 cido ascrbico .........................................................................................142.5.4 Cistena ...................................................................................................... 142.6. Sanificao...................................................................................................152.6.1 Dicloroisocianurato de Sdio.....................................................................172.7 CogumeloAgaricus blazei em conserva.......................................................18

    3 MATERIAL E MTODOS ..........................................................................20

    3.1 Procedncia, colheita e manuseio dos cogumelos ........................................203.2 Experimento I: Tratamento de basidiocarpos deAgaricus blazei comantioxidantes.......................................................................................................20 3.2.1 Avaliao da cor dos basidiocarpos desidratados tratados comantioxidantes.......................................................................................................21 3.2.2 Quantificao e identificao de fungos filamentosos e leveduriformes dosbasidiocarpos desidratados tratados com antioxidantes......................................213.3 Experimento II: Tratamento dos basidiocarpos deAgaricus blazeicom osanificante dicloroisocianurato de sdio (DCIS) ................................................ 223.3.1 Anlises microbiolgicas...........................................................................223.3.1.1 Contagem total de microrganismos aerbios mesfilos ......................... 223.3.1.2 Coliformes ..............................................................................................233.3.1.3 Pesquisa de Salmonella sp ......................................................................24 3.4 Experimento III: Conserva lquida de cogumelos frescos deA. blazei........243.4.1 Conserva lquida do cogumeloA. blazeiutilizando tcnica de conservadescrita para o champignon (Puzle & Puzle, 1998) ........................................243.4.1.1 Lavagem e resfriamento..........................................................................243.4.1.2 Branqueamento.......................................................................................253.4.1.3 Envaze.....................................................................................................253.6.1.4 Esterilizao............................................................................................25

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    8/64

    3.4.1.5 Armazenagem.........................................................................................253.4.3 Conserva do cogumeloAgaricus blazeiutilizando a tcnica descrita porSiqueira (2004) ................................................................................................... 263.4.4 Conserva do cogumelo A. blazeiem cido ctrico 1% e NaCl 5%utilizando a tcnica de apertizao ..................................................................... 273.4.5 Conserva do cogumelo A. blazeiem cido ctrico 1% e NaCl 10%utilizando a tcnica de apertizao ..................................................................... 273.4.7 Anlise sensorial e de cor ..........................................................................28

    4 RESULTADOS E DISCUSSO...................................................................29

    4.1 Experimento I: tratamento de basidiocarpos deAgaricus blazeicomantioxidantes.......................................................................................................29 4.1.1 Identificao de fungos filamentosos.........................................................304.2 Experimento II: tratamento dos basidiocarpos de A. blazei com sanificantedicloroisocianurato de sdio (DCIS) .................................................................. 314.2.1 Contagem total de microrganismos aerbios mesfilos nos basidiocarposdesidratados deA. blazei.....................................................................................31 4.2.2 Quantificao de coliformes termotolerantes ............................................ 324.3 Experimento III: conserva lquida de cogumelos frescos deA. blazei .........334.3.1 Conserva tradicional utilizada para o champignon ................................ 344.3.2 Anlise das conservas lquidas segundo o mtodo de apertizao ............ 35

    5 CONCLUSES..............................................................................................37

    REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS............................................................38

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    9/64

    i

    RESUMO

    LUZ, Valdenina Jeanmonod. Conservao ps-colheita do cogumelocomestvel e medicinal Agaricus blazei, com a utilizao de antioxidantes esanificante. 2006. Dissertao (Mestrado em Microbiologia Agrcola) Universidade Federal de Lavras, Lavras, MG.*

    Agaricus blazei um cogumelo nativo do Brasil que vem despertando aateno de vrios pesquisadores em todo o mundo, devido ao seu valornutricional e potencial teraputico. Este trabalho teve como objetivos: i) avaliaro efeito do cido ascrbico e da cistena, como antioxidantes, sobre oescurecimento dos basidiocarpos durante o processo de desidratao; ii) avaliar

    o efeito do sanificante dicloroisocianurato de sdio (DCIS) sobre a populao debactrias nos basidiocarpos desidratados; iii) estabelecer condies timas para aconserva lquida do cogumelo A. blazei. Para a utilizao dos antioxidantes,foram utilizadas solues de 0,5% de cistena, 1% de cido ctrico, 0,5% decistena + 1,0% de cido ctrico, com um tempo de imerso em cada tratamentode 2 minutos. Para o tratamento com DCIS, foi utilizada a concentrao de200ppm, tambm com o tempo de imerso de 2 minutos, antes da desidratao.Para a conserva lquida doAgaricus blazei, os tratamentos foram: a) conserva doA. blazei segundo procedimento utilizado para o champignon utilizando obissulfito de sdio; b) conserva do A. blazei segundo procedimento utilizadopara o champignon, sem o bissulfito de sdio; c) conserva caseira do A. blazeiutilizando suco de limo, acar e sal, segundo tcnica de apertizao; d)

    conserva doA. blazei

    em cido ctrico 1% e cloreto de sdio 5%, segundotcnica de apertizao; e) conserva do A. blazei em vinagre branco 70% ecloreto de sdio 5%, segundo tcnica de apertizao. No se verificou efeito dautilizao dos antioxidantes cido ascrbico e cistena sobre a colorao finaldos basidiocarpos desidratados de A. blazei. Os resultados mostraram que asboas prticas de colheita e lavagem dos cogumelos so suficientes para aobteno de cogumelos com colorao amarelo-dourado-clara, desejada para oproduto. A utilizao do DCIS 200ppm favoreceu a reduo da populaobacteriana nos basidiocarpos desidratados, mas no houve eliminao da mesma.Para a conserva lquida do A. blazei, os melhores resultados foram obtidosquando se utilizou a metodologia convencional para a conserva dochampignon. Quando o bissulfito de sdio foi excludo da conserva, oscogumelos apresentaram escurecimento excessivo aps a autoclavagem. Nasconservas obtidas segundo o processo de apertizao, os melhores resultados,____________________*Comit Orientador: Eustquio Souza Dias UFLA (Co-orientador), EduardoValrio Vilas Boas UFLA

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    10/64

    ii

    em termos de colorao, foram obtidos com a utilizao de vinagre, porm, osmesmo apresentaram-se extremamente cidos ao paladar, inviabilizando a suautilizao. A conserva com cido ctrico 1% e cloreto de sdio 5% apresentou-secom colorao clara e sabor agradvel, porm, aps 2 meses, metade dos frascosapresentou produo de bolhas de gs e estufamento das tampas, indicandocontaminao bacteriana. Esses resultados indicam a necessidade de maiorconcentrao de NaCl na conserva. Todos os demais tratamentos comapertizao apresentaram produo de gs e estufamento das tampas.

    *Comit Orientador: Eustquio Souza Dias UFLA (Co-orientador), EduardoValrio Vilas Boas UFLA

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    11/64

    iii

    ABSTRACT

    LUZ, Valdenina Jeanmonod. Conservation of the edible and medicinalmushroom Agaricus blazei, post harvest with the use of antioxidants andsanitizer. 2006. Dissertao (Mestrado em Microbiologia Agrcola) Universidade Federal de Lavras, Lavras, MG.*

    Agaricus blazei, is a Brazilian native mushroom which has called theattention of several researchers all over the world due to its nutritional andpharmacological properties. This work aimed to: i- assess the effects of thecitric acid andcysteine, as antioxidant, on the basidiocarps browning during thedehydration process; ii- assess the effect of the sodium dichloroisocyanurate

    disinfectant (SDCI) over the bacterial population on the dehydratedbasidiocarps; iii- establish optimal conditions to liquid conservation of themushroom A. blazei. For the utilization of the antioxidants, solutions of 0,5%cysteine; 1% ascorbic acid; 0,5% cysteine + 1,0% ascorbic acid were used, withan immersion time of 2 minutes for each treatment. For the treatment withSDCI, a concentration of 200ppm was used, also with an immersion time of 2minutes, before the dehydration. For liquid conservation of Agaricus blazei, thetreatments were as follow: a- conservation of A. blazei according to theprocedure used for the champignon utilizing sodium bisulphite; b-conservation ofA. blazei according to the procedure used for the champignon,without sodium bisulphite; c- home maid conservation of A. blazeiusing lemonjuice, sugar and salt, according to the a technique of appertization; d-

    conservation ofA. blazeiin citric acid 1% and sodium chloride at 5%, accordingto the appertization; e- conservation of A. blazei in white vinegar 70% andsodium chlorite 5%, according to the technique of appertization. It was notverified any effect of the utilization of antioxidants citric acid and cysteine onthe final coloration of dehydrated basidiocarps of A. blazei. The results haveshown that the good practice of harvesting and washing the mushrooms aresufficient for obtaining mushrooms with a light golden yellowish coloration,wanted for the product. The utilization of the SDCI 200ppm favored thereduction of the bacterial population in the dehydrated basidiocarps, but therewas no elimination of it. For the liquid conservation ofA. blazei, the best results

    *Guidance Comitee: Eustquio Souza Dias UFLA (Advisor), Eduardo V. B.Vilas Boas UFLA (Co-advisor)

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    12/64

    iv

    were obtained when it was used the conventional methodology for theconservation of the champignon. When the sodiumbisulphite was excludedfrom the conservation, the mushrooms showed an excessive browning after theautoclaving. In the conserves obtained according to the process of appertization,better results in terms of coloration were obtained with the use of vinegar;however they became extremely acid to the taste, making them impossible foruse. The conservation with citric acid at 1% and sodium chloride at 5% showeda light coloration and a pleasant taste, although after 2 months, half of the jugspresented gas bubbles and cover over stuffing, indicating bacterialcontamination. These results indicate a need of a higher NaCl concentration in

    the conservation. All the other treatments with appertization have shown gasproduction and cover over stuffing.

    *Guidance Comitee: Eustquio Souza Dias UFLA (Advisor), Eduardo V.B. Vilas Boas UFLA (Co-advisor)

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    13/64

    1

    1 INTRODUO

    O escurecimento ps-colheita um fenmeno comum, principalmente

    nos cogumelos do gnero Agaricus, que pode reduzir o seu valor comercial. A

    perda da colorao original durante o armazenamento particularmente

    importante na industrializao do cogumelo Agaricus bisporus, conhecido no

    Brasil como champignon. As reaes de escurecimento so desencadeadas

    pelo manuseio brusco, pela senescncia do corpo da frutificao e por infeco

    bacteriana, especialmente por Pseudomonas tolaasii.

    O cogumelo Agaricus blazei, conhecido por suas propriedades

    medicinais, um produto direcionado, principalmente, para exportao, devido

    ao ainda baixo consumo interno. Ao contrrio do champignon, esse cogumelo,

    conhecido como Cogumelo do Solou cogumelo medicinal comercializado na

    forma desidratada. No entanto, os basidiocarpos dessa espcie passam por

    processo de escurecimento semelhante ao observado no champignon aps a

    lavagem, o qual intensificado durante a desidratao dos mesmos. Este

    processo de escurecimento muito importante pois pode determinar a obteno

    de um produto final fora dos padres exigidos pelo mercado. Considerando que

    um dos parmetros para a definio do preo a cor, o uso de substncias

    antioxidantes para eliminar ou amenizar este processo extremamente

    importante.

    Alm disso, uma das grandes preocupaes que se deve ter com

    respeito qualidade microbiolgica do cogumelo desidratado. Estudos

    anteriores mostraram que a terra utilizada para a induo da frutificao contm

    ampla populao de bactrias, inclusive potencialmente patognicas, mesmo

    aps tratamentos de desinfestao ou pasteurizao. Diante disso, o uso de

    sanificantes, durante e aps a lavagem dos basidiocarpos, pode ser uma

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    14/64

    2

    importante ferramenta para garantir a obteno de cogumelos desidratados com

    uma qualidade microbiolgica dentro dos padres estabelecidos como aceitveispelos rgos pblicos e privados.

    Portanto, este trabalho teve como objetivo avaliar o uso de antioxidantes

    (cistena, cido ascrbico) aps a lavagem dos basidiocarpos deAgaricus blazei

    e o seu efeito sobre a colorao final dos cogumelos desidratados. Alm disso,

    foi testado tambm o efeito do sanificante dicloroisocianurato de sdio aps a

    lavagem dos basidiocarpos sobre a populao microbiana presente nos

    cogumelos desidratados.

    Outro aspecto abordado neste trabalho foi o estudo de diferentescondies de conserva dos basidiocarpos frescos de A. blazei, com o objetivos

    de desenvolver ou adaptar uma tcnica de conserva apropriada para este

    cogumelo, o que poderia proporcionar aos seus produtores outra possibilidade de

    comercializao. Com este objetivo foi testada a tcnica de conserva utilizada

    para o champignon, com algumas variaes, e tambm a tcnica de

    apertizao.

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    15/64

    3

    2 REFERENCIAL TERICO

    2.1 O uso de cogumelos na alimentao e na sade

    A utilizao dos cogumelos pelo ser humano uma prtica bastante

    antiga, no s como uma parte da dieta normal, mas tambm como uma

    delicatesse devido ao seu gosto e aroma desejveis (Eira e Minhoni, 1997). O

    consumo de cogumelos comestveis um hbito milenar em pases da sia e

    Europa, nos quais os cogumelos tm sido coletados e apreciados como

    guloseimas h mais de 2.000 anos (Manzi et al., 1999).

    Os cogumelos comestveis sempre foram apreciados por seu valor

    gastronmico, nutricional e medicinal. Mesmo assim, o consumo per capita

    ainda baixo, havendo um mercado inexplorado para as ilimitadas opes de

    espcies que podem ser cultivadas e utilizadas na alimentao e como

    nutracuticos (Eira, 2003).

    Cogumelos comestveis contm importantes propriedades funcionais,

    em particular -glucanos (homo e hetero-glucanos com ligaes glicosdicas

    (1-3), (1-4) e (1-6), com efeito antitumoral, fortalecendo o sistema

    imunolgico, inibindo a reproduo de clulas cancergenas, alm de outros

    efeitos (Kawagishi et al., 1988; Kawagishi et al., 1989; Osaki et al., 1994; Itoh et

    al., 1994; Higaki et al., 1997; Ito et al., 1997).

    No Brasil, o cultivo do cogumelo champignon teve incio em escala

    comercial em 1952, introduzido pelo italiano Oscar Molena (Informativo

    Coopercitrus, 1991). Atualmente ainda o cogumelo mais produzido no Brasil,

    representando 90% do total produzido no pas (Eira, 2002). Posteriormente,

    outras espcies de cogumelos foram introduzidas no Brasil, das quais destacam-

    seLentinula edodes(shiitake) e Pleurotus ostreatus(shimeji e hiratake),

    os quais so produzidos e consumidos principalmente no estado de So Paulo

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    16/64

    4

    (Bononi & Trufem.,1986).

    O consumo de cogumelos comestveis vem crescendo significativamentedevido ao reconhecimento do seu alto valor nutritivo e ao aumento da oferta,

    tornando o produto mais popular e acessvel. As maiores barreiras encontradas

    na comercializao de cogumelos no Brasil esto ligadas crena popular

    quanto sua natureza venenosa, preo, hbito alimentar e ao cultivo com baixa

    produtividade (Brennan et al, 2000; Chang & Buswell, 1996). A melhor

    compreenso da natureza biolgica e o desenvolvimento de tcnicas de cultivo

    avanadas tm contribudo para a diminuio do preo e aumento da

    produtividade. Alm disso, aplicando-se as novas tcnicas de melhoramentogentico pode-se produzir cogumelos de forma uniforme, com qualidade, em

    diversos substratos e ambientes (Elliott, 1987).

    Um dos principais fatores que tem contribudo para o aumento do

    consumo de cogumelos no Brasil a maior procura por alimentos naturais,

    sem defensivos agrcolas, com menor ndice de gordura e maior teor de

    protenas, alm de propriedades teraputicas preventivas e/ou curativas (Chang,

    1998). Os cogumelos tm um grande potencial, tanto para o consumo domstico

    quanto para exportao, se mantidos os padres de qualidade exigidos nomercado internacional (Amazonas & Siqueira, 2004).

    A partir da dcada de 1990, surgiu no cenrio brasileiro uma nova

    espcie de cogumelo, porm, ao contrrio das demais, tratava-se de uma espcie

    nativa do Brasil que foi a princpio identificada como Agaricus blazeiMurril.

    Essa espcie passou a ser cultivada no Brasil em funo de um estmulo de

    empresas importadoras, que vendem o cogumelo desidratado no mercado

    japons (Dias et al., 2004), o qual foi despertado por resultados de pesquisa que

    apontam as suas propriedades medicinais.A partir da vrias empresas brasileiras passaram a ter interesse na

    exportao desse cogumelo para o Japo, o que levou expanso do seu cultivo

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    17/64

    5

    do estado de So Paulo, onde o cogumelo foi originalmente encontrado, para

    vrios estados do pas. Diante desse interesse, a produo do cogumeloA. blazeipassou a ser uma tima alternativa de renda para pequenos produtores rurais e

    outros profissionais, porque o cogumelo desidratado podia ser vendido por at

    R$ 200,00 dependendo da sua qualidade final (Chang & Buswell, 1996). No

    entanto, nos ltimos anos, muitos produtores vm enfrentando srias

    dificuldades com respeito ao preo pago pelas empresas exportadoras. A

    primeira grande causa tem sido o fato de outros pases, principalmente a China,

    terem entrado nessa atividade, elevando a oferta do produto e oferecendo preos

    muito baixos. Outro problema tem sido a alegao de muitas empresas de que aqualidade do cogumelo baixa, em funo principalmente da colorao do

    cogumelo desidratado. Diante dessa nova realidade, os produtores brasileiros

    precisam buscar solues a curto, mdio e longo prazo visando a reduo de

    custos e a eliminao de problemas responsveis pela queda de qualidade do

    produto. A reduo de custos passa necessariamente pelo aumento da

    produtividade, com a utilizao de tecnologia mais apropriada, com a obteno

    de linhagens mais produtivas e tambm com a obteno do composto de cultivo

    a preo mais competitivo. Por outro lado, para garantir a melhor qualidade docogumelo desidratado, o produtor precisa usar boas prticas de colheita, lavagem

    e secagem do cogumelo (Eira, 2003).

    2.2 Desidratao dos cogumelos

    O cogumelo Agaricus blazei vendido tradicionalmente na forma

    desidratada. Com isso, aps a colheita, necessrio que os cogumelos sejam

    lavados e desidratados, sendo que, ao final do processo, os mesmos devemapresentar colorao amarelo-palha, alm de possuir tamanho superior a 5 cm,

    segundo exigncias do mercado. No entanto, tem sido muito comum o

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    18/64

    6

    escurecimento excessivo dos basidiocarpos, com conseqente queda na

    qualidade final (Eira, 2003). Em funo disso, muitos produtores enfrentamsrios problemas no momento de vender o seu produto e, infelizmente, o fator

    colorao utilizado muitas vezes para se impor um baixo preo ao produtor do

    cogumelo. Considerando que a colorao dos cogumelos desidratados ainda

    determinada de uma maneira muito subjetiva, Del (2003) props a utilizao de

    uma tcnica de anlise de cor por meio de um colormetro, que seria um

    equipamento apropriado para se estabelecer padres definidos de cor.

    No h registros na literatura sobre as causas do escurecimento dos

    basidiocarpos do A. blazei durante a desidratao, porm, acredita-se queestejam envolvidos os mesmos fatores e mecanismos descritos para o A.

    bisporus.

    Um dos aspectos mais importantes na colorao final do cogumelo pode

    ser o estado fisiolgico do mesmo no momento da colheita. A fisiologia ps-

    colheita refletida pela composio qumica e atividade metablica dos

    cogumelos frescos. Deste modo deve-se considerar o teor de gua, a firmeza dos

    frutos, a taxa respiratria, o grau de escurecimento, a atividade de proteases e

    aminocidos livres e o desenvolvimento de aroma posterior colheita (Bano eRajarathnam, 1988).

    Sabe-se que o corpo de frutificao doA. blazei fresco contm 85 a 90%

    de gua, e aproximadamente 0,74% de cinzas, 5,74% de protena, 0,59% de

    lipdeos, 0,81% de fibras e 5,57% de acares (Zhanxi, 2001). Contm alto teor

    de cido flico. Quando seco estes percentuais passam para 40 a 45% de

    protenas, 38,30% de carboidratos, 6,8% de fibras, 3 a 4% de lipdeos, com

    predominncia do cido linolico (70% a 80%) e apresenta tambm as vitaminas

    B1, B2, vitamina C, vitamina D e niacina, alm de grande quantidade depotssio e outros minerais como P, Mg, Ca, Na, Zn, F, Mn e Mo (Crisan &

    Sands, 1978; Quimio et al., 1990; Mizuno, 1995; Morais et al. 2000, Urben,

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    19/64

    7

    2004).

    Considerando o A. bisporus, os cogumelos so altamente perecveis etendem a perder rapidamente seus atributos de qualidade, tais como, a cor branca

    sem manchas e botes fechados de textura crespa, aps a colheita. Outros

    indicadores de qualidade incluem: frescura, limpeza, uniformidade e sabor.

    Mtodos mais eficientes de armazenagem de cogumelos so muitos importantes

    para a indstria, uma vez que, cogumelos frescos so produtos altamente

    perecveis. O perodo de aceitabilidade, em estado fresco, aps a colheita,

    estende-se at cerca de cinco a seis dias (Qomanowsky et al., 1970).

    A perda de qualidade aps a colheita determinada por processosfisiolgicos como senescncia do corpo de frutificao e deteriorao

    microbiana (Pseudomonas toloasi), escurecimento enzimtico e no enzimtico

    como o manuseio brusco (Olivier et al., 1978; Wesche-Ebeling, 1990; Rainey,

    Brodey & Johnstone, 1992; Kuiper et al., 1993; Arajo, 1995; Moquet, Mamoun

    & Olivier, 1996).

    Devido alta perecibilidade, a distribuio e oferta de cogumelos

    frescos bastante limitada, necessitando, portanto, de tcnicas de conservao

    (Bartholomai, 1974). A desidratao um dos mtodos mais antigos depreservao de alimentos e tem a vantagem de facilitar a colocao na

    embalagem, o transporte e o armazenamento. Como conseqncia natural da

    desidratao, ocorre a reduo de volume e de massa, que contribui para maior

    aproveitamento do espao destinado armazenagem e para maior eficincia do

    transporte em relao ao produto com elevado teor de umidade (Gava 1983). A

    desidratao, alm de considerar os aspectos supramencionados, deve ser

    conduzida para preservar o valor nutricional e o sabor do produto.

    Existem dois padres comerciais estabelecidos pelo mercadoimportador, determinados pelas industrias e pelos consumidores. As exigncias

    da indstria so menos rigorosas em termo de cor e tamanho, buscando somente

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    20/64

    8

    a extrao especfica de substncias. J a venda direta do produto ao consumidor

    estabelece que o mesmo tenha tamanho homogneo, com colorao amarelatendendo ao dourado, aps o processo de desidratao (Braga et al. 1998; Eira,

    2003). A classificao do produto desidratado segue as exigncias do mercado

    importador, principalmente o japons, que estabelece parmetros de qualidade

    em funo da aparncia.

    Aps a desidratao os cogumelos so classificados em funo do

    tamanho e colorao: os tipos A+ e A so destinados exportao. Os

    basidiocarpos desidratados do tipo A+ devem apresentar colorao clara,

    amarelo-dourada, com 7 a 8 centmetros de comprimento, sem danificaesfsicas ou manchas e os dos tipos A devem apresentar as mesmas caractersticas

    do A+, diferindo apenas no tamanho de 5 a 7cm. Os do tipo B so vendidos no

    mercado interno como cogumelos que no atingiram o tamanho ideal para

    exportao e/ou apresentam colorao mais escura, ocasionada por problema da

    desidratao. Os do tipo C geralmente so aqueles que se quebram durante o

    processamento e so destinados moagem para comercializao em p no

    mercado interno (Bononi & Trufem, 1986). A comercializao do cogumelo A.

    blazei feita aps o produto ter sido desidratado e acondicionado em sacolasplsticas de polipropileno ou ento sob a forma de cpsulas.

    A colorao um dos atributos mais importantes exigidos pelos

    consumidores e, no caso especfico de A.blazei, essa valorizao visual

    atributo de qualidade, estando relacionada ao estdio de maturao, colheita e

    prticas de ps-processamento (Nardim, 1999).

    Aps a colheita os cogumelos so submetidos a uma srie de etapas

    compreendendo: pr-lavagem, lavagem, escovao, seleo, corte, secagem e

    embalagem (Braga et al. 1998). Regras de higiene e limpeza devem sercriteriosamente seguidas, pois se trata, sobretudo, de um alimento vulnervel s

    ms condies de manipulao e armazenamento, podendo sofrer alteraes

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    21/64

    9

    devido aos fatores intrnsecos (atividade de gua, acidez, potencial de

    oxirreduo, composio qumica, etc.) e extrnsecos (umidade, temperatura,ambiente e composio qumica da atmosfera que envolve o alimento).

    A etapa de desidratao merece especial cuidado, pois os cogumelos

    aps serem cuidadosamente lavados e seccionados ao meio, so transferidos

    para secadores de bandejas horizontais, temperatura de 45 C a 55C (Eira,

    2003). Esse processo de secagem requer cuidados e/ou aperfeioamento para

    assegurar maior rapidez e evitar a proliferao de microrganismos durante o

    perodo de desidratao do produto.

    Pelo fato doA. blazeiser utilizado na forma desidratada para o preparode chs, o mesmo deve oferecer no apenas aspecto agradvel, mas tambm

    fornecer ao consumidor garantias de um alimento seguro. A Agncia Nacional

    de Vigilncia Sanitria (ANVISA), por meio da Resoluo RDC n 12, de 2 de

    janeiro de 2001, estabeleceu padres microbiolgicos para alimentos

    desidratados, incluindo cogumelos.

    Braga et al. (1998) avaliaram diferentes tipos de embalagens plsticas

    para o armazenamento do cogumelo desidratado em ambiente com alta umidade

    relativa do ar. Os autores observaram que em ambiente com 80% de umidaderelativa, a embalagem de polipropileno biorientado metalizado duplo

    proporcionou menores variaes de reabsoro de umidade e de atividade de

    gua. Consequentemente, nessa embalagem, no se observou escurecimento dos

    cogumelos, garantindo reteno de cor aos mesmo durante o perodo de

    armazenamento. Por outro lado, apesar das embalagens de polipropileno (60

    m) e polietileno de baixa densidade (50 m) terem permitido o escurecimento

    dos cogumelos em funo da reabsoro de umidade dos mesmos, no se

    verificou aumento da incidncia de fungos nos cogumelos desidratados duranteo armazenamento. Portanto, o maior problema do armazenamento foi o

    escurecimento dos basidiocarpos em funo da reabsoro de umidade e no de

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    22/64

    10

    deteriorao dos mesmos. Esses resultados nos mostram que necessrio

    cuidado com o tipo de embalagem, uma vez que a grande maioria dos produtoresutiliza embalagens de polipropileno. Deve-se ressaltar, porm, que os autores

    utilizaram para o armazenamento, um ambiente com 80% de umidade relativa

    do ar, ou seja condies extremas de armazenamento, ainda que a temperatura

    fosse de 25oC, quando na verdade se recomenda que os cogumelos desidratados

    seja armazenados em ambientes frescos e secos.

    2.3 O escurecimento no enzimtico

    As reaes de escurecimento no-enzimtico em alimentos esto

    associadas com o aquecimento e o armazenamento, e so o resultado da

    descolorao provocada pela reao entre a carbonila e os grupos amina livre,

    com formao do pigmento denominado meloidina. So reaes indesejveis do

    ponto de vista nutricional e esttico. Estas reaes provocam significantes

    perdas de certos aminocidos (lisina, arginina histidina e triptofano), diminuio

    da digestibilidade da protena e, portanto, reduo do valor nutritivo, formaode alguns inibidores e compostos txicos(Arajo, 2000).

    2.4 O Escurecimento enzimtico

    O escurecimento enzimtico requer os seguintes componentes: oxignio,

    enzimas, cobre e substrato. A enzima mais importante em frutos e hortalias

    minimamente processadas a polifenoloxidase e os fatores que influenciam este

    processo so: concentrao de polifenoloxidase, componentes fenlicospresentes, pH, temperatura, disponibilidade de oxignio nos tecidos (Laurila et

    al.,1998).

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    23/64

    11

    O escurecimento de frutos em resposta a injrias do processamento

    mnimo devido a oxidao de compostos fenlicos. O colapso celular causa adescompartimentalizao, que promove o contato dos compostos fenlicos

    presentes com enzimas associadas ao escurecimento como a polifenoloxidase

    (Vilas Boas, 1999).

    As enzimas polifenoloxidases catalisam a oxidao dos compostos

    fenlicos para quinonas, formando complexos pigmentos de colorao marrom,

    denominados melaninas. As enzimas tirosinase e catecolase atuam sobre

    substratos especficos e so responsveis pelo processo de escurecimento

    enzimtico nos cogumelos. Aps a colheita, os cogumelos perdem sua coloraooriginal, apresentando uma crescente colorao marrom que o escurecimento

    enzimtico. Esta alterao na cor causa deteriorao na qualidade, como

    resultado da oxidao de polifenis (Robb, 1984). Para evitar este processo de

    escurecimento enzimtico, necessrio prevenir a ruptura dos tecidos ou

    inativar essas enzimas por calor, sulfitao, ou reduo do pH por meio de

    cidos. A supresso do cobre, que faz parte da estrutura da tirosinase, foi

    sugerida como meio efetivo de melhorar a qualidade dos cogumelos aumentando

    sua vida til. A coenzima da tirosinase, responsvel pela degradao da tirosina, um complexo cprico-protico e desta forma, qualquer substncia que

    seqestre o cobre reduzir a formao enzimtica normal da melanina,

    diminuindo o escurecimento dos cogumelos (Yaropolov et al., 1994; McMllin &

    Eglestone, 1997).

    2.5 Inibidores da polifenoloxidase

    2.5.1. Sulfito e metabissulfito de sdio

    O mtodo mais comum empregado para o controle do escurecimento

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    24/64

    12

    enzimtico em cogumelos champignon o tratamento com metabissulfito de

    sdio. Entretanto, a segurana do uso de sulfitos em alimentos bastantequestionvel (Lambrecht, 1995). Os sulfitos tm sido associados a uma srie de

    danos sade humana, tais como asma em pacientes asmticos sulfito-

    sensitivos, urticria e diarria. Tendo em vista sua toxidez, encontrar substitutos

    aos sulfitos no controle da atividade da PFO torna-se uma necessidade eminente,

    visando a obteno de um alimento seguro e saudvel. Dentre as substncias

    qumicas redutoras de uso mais freqente na indstria de alimentos, o sulfito o

    mais utilizado. Os agentes redutores (sulfito e cido ctrico) promovem a

    reduo qumica dos precursores do pigmento. Tal efeito temporrio, graas oxidao irreversvel desses agentes na reao, os quais, no sendo especficos,

    podem provocar mudanas na colorao e no sabor. Envolve diferentes tipos de

    aes: Inibio direta sobre a enzima e interao direta com intermedirios

    formados durante a ao enzimtica, impedindo sua participao na reao de

    formao do pigmento escuro. Por exemplo, o sulfito pode combinar com a

    quinona, bloqueando sua participao em oxidao e condensao adicionais.

    De forma alternativa, o sulfito pode atuar simplesmente como agente redutor,

    retornando a quinona para a forma de fenol reduzido.O sulfito evita a oxidaodo ascorbato pela ascorbato oxidase e outras enzimas.Os nveis de ascorbato

    diminuem rapidamente aps a macerao do tecido vegetal graas ao da

    ascorbato oxidase (Mau et al.,2002). A adio de sulfito, conseqentemente,

    previne a destruio do ascorbato. A lipoxigenase pode ser tambm inibida pela

    ao do sulfito, evitando a formao de sabores desagradveis durante o

    armazenamento de vegetais. Em alguns produtos, o sulfito atua como

    antioxidante, muito embora no seja utilizado com este propsito. Em cerveja,

    inibe o desenvolvimento do sabor oxidado durante o armazenamento. Por outrolado, sua utilizao pode resultar em sabor desagradvel, degradao da cor

    natural do alimento, destruio da vitamina B1 e corroso da embalagem (lata),

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    25/64

    13

    sendo txico se usado em nveis elevados (Java, 1983).

    2.5.2 cido ctrico

    um dos aditivos mais utilizados na indstria de alimentos por ser

    relativamente barato e por tratar-se de um cido forte. O cido ctrico

    produzido comercialmente por fermentao a partir do melao de cana-de-

    acar atravs da ao do fungo Aspergillus niger. um slido branco,

    cristalino e sem odor, facilmente decomposto em temperaturas acima de 150C.

    Sua solubilidade da ordem de 181 g/100 mL de gua, 50 g/100mL de etanol e

    praticamente insolvel em leos (0,005 g/100mL) (Barufaldi et al., 1998).Ocido ctrico bloqueia a atividade da enzima tirosinase atravs de sua ao

    quelante sobre os ons cpricos constituintes da enzima. A atividade da

    tirosinase tambm pode ser diminuda atravs da reduo do pH, de maneira que

    o cido ctrico exerce um duplo efeito inibitrio sobre a enzima, alm de ser

    sensorialmente aceito pela maioria dos consumidores. No existem limites

    quanto concentrao do cido ctrico na legislao brasileira, de forma que,

    avaliaes sensoriais, qumicas e fsicas determinam o sucesso de uma

    metodologia na conservao do produto fresco ou em conserva. De acordo como Codex Alimentarius (1993), podem ser utilizados como aditivos em

    cogumelos os cidos actico, ltico, ctrico e ctrico, sem limites na

    concentrao, com exceo do cido actico para cogumelos em conserva,

    permitido na dosagem mxima de 20g/kg e para os cidos ltico e ctrico em

    cogumelos esterilizados, permitidos na dosagem mxima de 5g/kg,

    separadamente ou em associao.

    McCord & Kilara (1983) estudaram o efeito do cido ctrico (0,1M)

    sobre a atividade da polifenoloxidase do cogumelo Agaricus bisporus e

    concluram que o uso dessa substncia como acidulante durante o processo de

    branqueamento pode apresentar um efeito duplo, inibindo tanto o escurecimento

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    26/64

    14

    enzimtico como o no enzimtico, e com isso contribuindo positivamente para

    a colorao final dos mesmos, impedindo ou amenizando o seu escurecimento.

    2.5.3 cido ascrbico

    uma substncia cristalina, de cor branca ou amarelada, sem odor e de

    sabor cido. um potente agente redutor, interagindo com oxignio e metais

    pesados, podendo reduzir os produtos de oxidao. usado para controlar a

    deteriorao oxidativa do sabor e da cor dos cogumelos, algumas frutas e

    hortalias (100-200 ppm), pois atua sobre a polifenoloxidase. empregado em

    diversos alimentos como cerveja, refrigerantes, derivados de carne, sucos defrutas e outros (Barufaldi & Oliveira, 1998).

    Golan-Goldhirsh & Whitaker (1984) testaram o efeito do cido ctrico,

    bissulfito de sdio, glutationa reduzida e ditiotreitol sobre a polifenoloxidase do

    Agaricus bisporus e verificaram que o cido ctrico foi mais efetivo na

    inativao da polifenoloxidase. Por outro lado, os mesmo autores observaram

    tambm que o bissulfito de sdio, glutationa reduzida e ditiotreitol foram mais

    efetivos na preveno do escurecimento, provavelmente em funo da

    capacidade das quinonas se complexarem com o bissulfito e com o grupamentotiol presente na glutationa e ditiotreitol.

    2.5.4 Cistena

    A cistena apontada na literatura como um efetivo inibidor do

    escurecimento enzimtico de frutas e hortalias como pera(Montgomery, 1983);

    ma (Walker & Reddish, 1964) e palmito (Robert et al., 1996). Diante desse

    reconhecido efeito, Kermasha et al., (1993) avaliaram o efeito da cistena sobre a

    tirosinase obtida do cogumelo Agaricus bisporus. Os autores confirmaram que

    esse aminocido apresenta um efeito inibidor sobre a tirosinase, no entanto,

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    27/64

    15

    todos os ensaios foram conduzidos in vitro, ou seja, no foi avaliado o efeito

    do aminocido sobre o processo de escurecimento dos cogumelos. Por outrolado, Molnar-Perl & Friedman (1990b) verificaram que, alm da cistena, outros

    aminocidos sulfurados podem apresentar tambm um efeito inibidor sobre o

    escurecimento enzimtico. Em trabalho com ma e batata, os autores

    observaram que N-acetil-L-cistena e glutationa reduzida apresentaram maior

    efeito inibitrio sobre o escurecimento enzimtico do que a cistena e similar ao

    efeito observado para o bissulfito de sdio. A concentrao de 10 mM de

    qualquer uma dessas substncias foi suficiente para uma inibio de mais de

    90% do escurecimento enzimtico.

    2.6. Sanificao

    Sanificao o conjunto de procedimentos usados na indstria de

    produtos alimentares e que visam a manuteno das condies de higiene

    indispensveis obteno de materiais de primeira qualidade.

    Rosa et al. (1999)estudaram a contaminao bacteriana de cogumelos

    desidratados de Agaricus blazei e concluram que so necessrios cuidados

    especiais durante o processamento dos mesmos para se minimizar os problemas

    de contaminao. Segundo os autores, a utilizao de hipoclorito a 5 mg L-1

    diminuiu sensivelmente a contaminao dos cogumelos desidratados.

    O cogumelo Agaricus blazei cultivado em um composto, o qual,

    mesmo aps a sua pasteurizao, possui alta populao bacteriana. Alm disso,

    para a induo da frutificao, o composto colonizado coberto com uma

    camada de terra pasteurizada ou tratada com formol. Mesmo com esses

    procedimentos, a camada de cobertura possui ainda um nmero elevado da

    bactrias, dentre as quais destacam-se algumas espcies patognicas, como

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    28/64

    16

    Salmonela enteritidis, Shigella dysenteriae,Yersinia enterocolitica, etc (Silva,

    2003).Portanto, natural que os cogumelos produzidos neste ambiente sejamcontaminados durante o ciclo de produo, por mais cuidado que se tenha na

    pasteurizao do composto e da terra de cobertura, uma vez que a esterilizao

    desses materiais invivel para o processo produtivo.

    Diante disso, interessante que os produtores utilizem sanificantes

    durante a lavagem dos cogumelos visando a eliminao de microrganismos

    indesejveis. De modo geral, considera-se que podem ser utilizados sanificantes

    fsicos como o calor, na forma de vapor, gua ou ar quente, a radiao

    ultravioleta, como tambm sanificantes qumicos, como os compostos clorados,iodforos, composto quartenrio de amnia, entre outros (Andrade & Macedo,

    1996; Rocha et al., 1999).

    A sanificao dos cogumelos in natura tem importante papel na

    diminuio da deteriorao, na manuteno da qualidade e no aumento da vida

    de prateleira. Por isto, a escolha e o mtodo de aplicao do sanificante qumico

    adequado ao cogumelo so fundamentais para o sucesso do procedimento. Deve

    ser utilizado aquele sanificante que no afete negativamente as caractersticas

    sensoriais e que ao mesmo tempo garanta a segurana microbiolgica doproduto (Sapers & Simmons, 1998).

    O principal objetivo da sanificao a eliminao ou reduo de

    bactrias indesejveis do ponto de vista da sade, principalmente. Os coliformes

    termotolerantes constituem um subgrupo de bactrias do grupo coliformes totais

    que normalmente habitam o trato digestivo de animais de sangue quente,

    incluindo o homem, o qual excreta cerca de dois bilhes dessas bactrias por dia

    por pessoa. Por isso, esse subgrupo utilizado como indicador da contaminao

    fecal da gua e alimentos, revelando o potencial destes de carrear doenas. Apopulao de coliformes termotolerantes constituda na sua maior parte pela

    bactria Escherichia coli, que tem seu habitat exclusivo no trato intestinal do

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    29/64

    17

    homem e de outros animais.

    2.6.1 Dicloroisocianurato de Sdio

    Os derivados clorados do cido cianrico (sais de sdio ou de potssio

    do cido dicloroisocianrico e cido tricloroisocianrico) so compostos

    clorados de origem orgnica que podem ser empregados na indstria de

    alimentos como agentes sanificantes (Block, 1991). O dicloroisocianurato de

    sdio (DCIS) tornou-se uma alternativa vivel para a desinfeco de gua e

    alimentos, por ser menos reativo com substncias hmicas, o que resulta em

    baixos nveis de formao de triclorometanos (TCM), (Macedo 2000). Portanto,

    o DCIS apresenta caractersticas fsico-qumicas superiores em relao a

    quaisquer outros produtos clorados, tais como, o hipoclorito de sdio, o

    hipoclorito de clcio e o cido tricloro isocianrico. O DCIS o sal de sdio do

    1,3-dicloro-1, 3,5-triazina-2, 4,6(1H, 3H, 5H)-triona, sendo representado

    empiricamente pela frmula C3Cl2N3NaO3. Ao diluir-se em gua, o cido

    hipocloroso (composto ativo) e o cianurato de sdio (composto atxico) so

    liberados (Genco Industrial, 1998). A ANVISA (Agncia de Vigilncia

    Sanitria), conforme a Resoluo n 150, de maio de 1999, autoriza a incluso

    do cido dicloroisocianrico e seus sais de sdio e potssio, como princpio

    ativo para uso em formulaes de produtos destinado desinfeco de gua e

    outros alimentos para o consumo humano (Brasil, 1999b), podendo ser

    empregado na desinfeco de frutas, hortalias, cogumelos, artigos e superfcies

    que entram em contato com os alimentos (Hidrosan, 2003).

    No comrcio, os derivados clorados de origem orgnica so encontrados

    na forma de p ou comprimidos efervescentes e apresenta uma maior

    estabilidade no armazenamento do que os compostos clorados inorgnicos. O

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    30/64

    18

    DCIS pode ser encontrado em diferentes concentraes, facilitando o preparo da

    soluo sanificante em funo do volume e do teor de cloro residual livredesejado.

    2.7 CogumeloAgaricus blazeiem conserva

    Tradicionalmente, encontra-se no mercado o cogumelo Agaricus

    bisporus (champignon) em soluo de conserva, ao qual o consumidor

    brasileiro est mais familiarizado. No entanto, pode ser uma boa alternativa a

    venda do cogumelo A. blazeitambm na forma de conserva, o qual poderia ser

    utilizado na confeco de pratos finos da mesma forma que o champignon.

    Amazonas & Siqueira (2003)propuseram o nome de Champignon do Brasil

    para o A. blazei em conserva. Siqueira (2004) relatou o lanamento do

    Champignon do Brasil em conserva na IV Feira Estadual Sabores do Paran.

    Segundo o autor, a conserva base de suco de limo, acar e sal, teve uma

    aceitao surpreendente e despertou o interesse de um representante de uma

    grande rede de supermercados, quando o produto estiver sendo produzido em

    escala comercial.

    No entanto, a conserva tradicional do Champignon de Paris passa por

    um processo de esterilizao em autoclave, o que garante um tempo de prateleira

    no supermercado de pelo menos 6 meses (Siqueira 2004). Porm, em testes

    preliminares, verificou-se que o processo de autoclavagem provoca um

    escurecimento excessivo dos cogumelos A. blazei, a menos que seja utilizado o

    bissulfito de sdio. Apesar dessa substncia ser utilizada normalmente na

    conserva do Champignon de Paris, seria muito interessante que a mesma no

    fosse necessria na conserva do Champignon do Brasil, uma vez que esse

    cogumelo possui um grande apelo quanto as suas propriedades benficas para a

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    31/64

    19

    sade humana, enquanto que o bissulfito de sdio, alm de ser apontado como

    um agente mutagnico, relatado tambm como potencial causador de reaesalrgicas em pessoas asmticas. Uma alternativa ao processo de autoclavagem

    a utilizao da conserva cida associada ao processo de apertizao, no qual os

    cogumelos so cozidos na soluo de conserva por 20 minutos, transferidos para

    os frascos, cobertos com nova soluo de conserva e colocados em banho-maria

    por mais 20 minutos. Apesar desse processo ser largamente utilizado em

    conservas caseiras, necessrio avaliar o tempo em que essas conservas so

    mantidas em boas condies de preservao, principalmente no que diz respeito

    aos aspectos microbiolgicos.

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    32/64

    20

    3 MATERIAL E MTODOS

    3.1 Procedncia, colheita e manuseio dos cogumelos

    A matria prima foi obtida junto ao setor de produo de cogumelos

    comestveis do Departamento de Biologia da Universidade Federal de Lavras.

    Os basidiocarpos foram colhidos antes que ocorresse a abertura do pleo,

    quando suas bordas ainda estavam voltadas para baixo, sendo lavados em gua

    corrente com o auxlio de uma escova e esponja macia, para remoo de toda

    terra aderida aos basidiocarpos.

    3.2 Experimento I: Tratamento de basidiocarpos deAgaricus blazei com

    antioxidantes.

    Foram testados como antioxidantes a cistena 0,5% e o cido ascrbico

    1%, nos seguintes tratamentos: cistena 0,5%; cido ascrbico 1%; cistena 0,5%

    + cido ascrbico 1%. Foram utilizados dois controles: C1- basidiocarposlavados em gua; C2- basidiocarpos lavados e mergulhados em gua pura por 2

    minutos . Para todos os tratamentos, as metades dos basidiocarpos lavados foram

    mergulhados na soluo tratamento por 2 minutos. Para cada tratamento uma

    metade foi mergulhada na soluo do antioxidante e a outra metade

    correspondente foi mergulhada em gua (C2). Para todos os tratamentos foram

    utilizadas 5 repeties, sendo cada repetio constituda de 10 basidiocarpos.

    Aps os tratamentos, os basidiocarpos foram colocados sobre papel toalha para

    remoo do excesso de umidade e, em seguida, transferidos para desidratadora temperatura de 55oC a 60oC por 18 a 24 horas (at os cogumelos apresentarem-

    se crocantes). As amostras desidratadas foram embaladas por lotes, segundo o

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    33/64

    21

    tratamento utilizado e acondicionadas em refrigerador a 4o C, para posterior

    avaliao (padro de cores e anlises microbiolgicas).

    3.2.1 Avaliao da cor dos basidiocarpos desidratados tratados com

    antioxidantes

    As amostras dos experimentos com cisteina, cido ctrico e cisteina +

    cido ctrico foram submetidas avaliao de cor (pleo e estipe) e fotografados

    para se obter um registro visual das cores nas diversas fases de amostragem nodecorrer do experimento. Para a avaliao de cor foi utilizado um colormetro

    (MINOLTA CR400).

    3.2.2 Quantificao e identificao de fungos filamentosos e leveduriformes

    dos basidiocarpos desidratados tratados com antioxidantes

    Foram pesados 25g da amostra dos cogumelos desidratados para cada

    tratamento e homogeneizados em 225mL de gua peptonada 0,1% e realizadas

    as diluies decimais seriadas. Alquotas de 0,1mL de cada diluio foram

    plaqueadas em triplicata no meio DG18 (Dichloran glycerol 18%) utilizando a

    tcnica de plaqueamento por espalhamento. Aps a homogeneizao as placas

    foram incubadas em incubadora BOD a 25C por 7 dias. Os resultados foram

    expressos em unidades formadoras de colnia por grama do cogumelo

    desidratado (UFC/g). Aps as contagens, as colnias de fungos filamentosos

    foram inoculadas em meio MA (Malt Agar)e incubadas por mais sete dias a

    28oC. Aps esse tempo, foi retirada, com a ponta de palito de dente esterilizado,

    uma alquota do fungo desenvolvido no meio MA e transferida para o meio

    CYA (Czapeck yeast extract agar), sendo incubado a 25o C e 37C e o meio

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    34/64

    22

    MEA (Malt extract agar),sendo incubado a 25 C para posterior identificao do

    gnero.

    3.3 Experimento II: Tratamento dos basidiocarpos deAgaricus blazeicom o

    sanificante dicloroisocianurato de sdio (DCIS)

    Com o objetivo de se avaliar o efeito do sanificante dicloroisocianurato

    de sdio sobre a qualidade microbiolgica dos cogumelos desidratados de

    Agaricus blazei, foram utilizadas as concentraes de 50, 100, 150 e 200 ppm.

    Para isto, os cogumelos foram lavados em gua corrente, partidos ao meio e

    depois submersos na soluo tratamento por dois minutos. Para o preparo das

    solues foi utilizado o DCIS em p, o qual foi dissolvido em gua de torneira

    tratada. Para cada tratamento, uma metade do cogumelo foi submersa na soluo

    tratamento e a outra no controle (apenas gua). Aps os tratamentos, os

    cogumelos foram desidratados conforme descrito no item 3.2.

    3.3.1 Anlises microbiolgicas

    As anlises microbiolgicas foram realizadas no Laboratrio de

    Microbiologia de Alimentos do Departamento de Cincia dos Alimentos da

    UFLA, segundo as metodologias propostas por ICMSF (1982) e Silva et al.

    (1997).

    3.3.1.1 Contagem total de microrganismos aerbios mesfilos

    Para cada anlise, foram utilizados 25g de cogumelo A. blazei

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    35/64

    23

    desidratado, os quais foram transferidos para frasco com 225mL de gua

    peptonada 0,1 % (p/v) e homogeneizados em homoigeneizador tipo Stomackerpor 2 minutos com 290 golpes por minuto, constituindo a diluio 10-1. A partir

    da diluio 10-1foram feitas diluies seriadas para a inoculao nos diferentes

    meios de cultura utilizados. Para a contagem total de microrganismos aerbios

    mesfilos presentes nos cogumelos desidratados, foi utilizado o meio PCA

    (gar para Contagem Padro).

    3.3.1.2 Coliformes

    Para a quantificao de coliformes a 35C foi empregada a Tcnica do

    Nmero Mais Provvel (NMP) e as amostras foram preparadas segundo descrito

    no item anterior. O teste presuntivo foi realizado com a inoculao de alquotas

    de 1 ml da amostra em quatro sries de trs tubos, contendo tubos de Durhan

    invertidos e Caldo Lauril Sulfato Triptose (LST), e incubados a 35 por 24-48

    horas. Foram considerados tubos positivos para coliformes a 35C aqueles que

    apresentaram turvao e formao de gs. No teste confirmativo para coliformes

    totais, repetiu-se o mesmo procedimento descrito acima, diferindo no meio de

    cultura, sendo utilizado caldo bile verde-brilhante (VB) incubado a 35C/24-48

    horas. Foram considerados tubos positivos aqueles que apresentaram turvao e

    formao de gs. Os resultados foram expressos em NMP/g. Os coliformes a

    45C foram quantificados tambm pela Tcnica do Nmero Mais Provvel

    (NMP). Alquotas foram transferidas dos tubos positivos contendo LST, com

    auxlio de uma ala de repicagem, para tubos contendo Caldo Escherichia coli

    (EC) com tubos de Durhan invertidos. Os tubos foram incubados em banho-

    maria a 45C por 24 horas. Foram considerados tubos positivos para coliformesa 45C aqueles que apresentaram turvao e formao de gs. Os resultados

    foram expressos em NMP/g.

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    36/64

    24

    3.3.1.3 Pesquisa de Salmonella sp

    Foram utilizados 25g da amostra do A. blazei desidratado e

    homogeneizados em 225mL de gua peptonada tamponada. Aps a

    homogeneizao as amostras foram incubadas a 35-37C por 18 horas, sendo

    esta a fase de pr-enriquecimento. Aps 18 horas, alquotas de 1mL foram

    transferidas para tubos com 9mL de caldo Rappaport e caldo Tetrationato,

    incubados a 35-37oC/24 horas, sendo essa etapa o enriquecimento seletivo. Do

    enriquecimento seletivo foram feitas estrias em meios slidos gar entrico de

    Hecktoen e incubadas a 35-37C/24 horas.

    3.4 Experimento III: Conserva lquida de cogumelos frescos deA. blazei

    Para os experimentos de conserva tomou-se como referncia o processo

    utilizado para o cogumelo champignon, conforme descrito abaixo. A partir

    deste processo, foram testadas diferentes condies, nas quais tentou-se

    substituir o bissulfito de sdio como agente branqueador, bem como mtodos

    alternativos de conserva sem o uso de autoclave, os quais poderiam ser mais

    acessveis ao produtor.

    3.4.1 Conserva lquida do cogumeloA. blazeiutilizando tcnica de conservadescrita para o champignon (Puzle & Puzle, 1998)

    3.4.1.1 Lavagem e resfriamento

    A lavagem foi feita em recipientes de plstico a temperatura de 2 a 4oC

    utilizando uma soluo de cido ctrico (1g/L) e bissulfito de sdio (4g/L).

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    37/64

    25

    3.4.1.2 Branqueamento

    O branqueamento foi conduzido em panela esmaltada, mergulhando-se

    os cogumelos por 6-8 minutos na soluo de branqueamento (Tabela 1) na

    temperatura de fervura (~95oC).

    3.4.1.3 Envaze

    Foram utilizados vidros do tipo conserva. Os cogumelos foram

    colocados at ocupar do volume e adicionou-se a soluo conserva, cobrindo-

    os completamente.

    TABELA 1Aditivos e concentraes utilizados para as solues de lavagem,branqueamento e conserva dos cogumelos doA. blazei.

    Quantidade (g/L) para cada tipo de soluo

    Aditivo Lavagem Branqueamento Conserva

    cido ctrico 1 5 1

    Bissulfito de sdio 4 1 0

    NaCl 0 10 15

    3.6.1.4 EsterilizaoA esterilizao dos frascos cheios foi feita em autoclave a 121oC por 15

    minutos, tomando-se o cuidado de no fechar hermeticamente as tampas dos

    frascos. Aps a esterilizao, com os frascos ainda quentes (no mnimo a 70oC),

    as tampas foram bem apertadas.

    3.4.1.5 Armazenagem

    Os vidros de conserva do A.blazei permaneceram em temperatura

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    38/64

    26

    ambiente por trs meses, sendo posteriormente levados para o Laboratrio de

    Microbiologia do Departamento de Cincia dos Alimentos para anlise dopadro de cores e anlises microbiolgicas.

    3.4.2 Conserva lquida do cogumeloA. blazeiutilizando tcnica de conservadescrita para o champignon sem o uso de bissulfito de sdio

    Foi utilizada a mesma metodologia descrita anteriormente, com a nicadiferena de no se utilizar bissulfito de sdio em nenhum dos tratamentos.

    3.4.3 Conserva do cogumeloAgaricus blazeiutilizando a tcnica descrita porSiqueira (2004)

    Para este trabalho, foi utilizada uma soluo conserva proposta por

    Siqueira (2004), conforme descrito na tabela 2. Os cogumelos foram lavados em

    gua corrente e transferidos para panela com a soluo conserva em temperatura

    de fervura. Aps ferver por 20 minutos os cogumelos foram transferidos para

    vidros de conserva e cobertos com o caldo de fervura at cobrir completamente

    os cogumelos. Os vidros foram colocados com as tampas semifechadas numapanela, contendo gua suficiente para atingir a metade da altura dos vidros, e

    submetidos a fervura por 20 minutos. Aps esfriar um pouco, os vidros foram

    retirados da panela e fechados.

    TABELA 2 Composio da soluo para conserva de cogumelos A. blazei(suficiente para 1,5 kg de cogumelos frescos).

    Ingredientes Quantidadegua 2 litrosLimo 3 unidades

    Sacarose 15 gNaCl 8g

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    39/64

    27

    3.4.4 Conserva do cogumelo A. blazei em cido ctrico 1% e NaCl 5%

    utilizando a tcnica de apertizaoAps a lavagem, os cogumelos foram colocados para ferver em gua por

    15 minutos e logo aps foram transferidos para uma bandeja com gelo para o

    choque trmico. Aps isso, os cogumelos foram acondicionados em frascos

    esterilizados por fervura (30 minutos) e cobertos com a soluo de conserva

    aquecida a 95oC. Depois os frascos foram colocados em panela com gua at a

    metade da altura dos frascos, os quais foram fervidos por 15 minutos, com as

    tampas semi-fechadas. Os frascos foram ento bem fechados e guardados em

    temperatura ambiente.

    3.4.5 Conserva do cogumelo A. blazei em cido ctrico 1% e NaCl 10%

    utilizando a tcnica de apertizao

    Seguiu-se o mesmo procedimento descrito para a conserva descrita no item

    3.4.4, com a nica diferena de se ter utilizado NaCl 10% na soluo conserva.

    3.4.6 Conserva do cogumelo A. blazeiem vinagre branco 70% e NaCl 5%

    utilizando a tcnica de apertizao

    Aps a lavagem, os cogumelos foram colocados para ferver em gua por

    15 minutos e logo aps foram transferidos para uma bandeja com gelo para o

    choque trmico. Aps isso, os cogumelos foram acondicionados em frascos

    esterilizados por fervura (30 minutos) e cobertos com a soluo de conserva

    aquecida a 95o C. Os frascos foram ento bem fechados e guardados em

    temperatura ambiente. Neste caso no se procedeu a fervura dos frascos aps aadio da soluo de conserva.

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    40/64

    28

    3.4.7 Anlise sensorial e de cor

    A avaliao sensorial foi feita atravs dos rgos dos sentidos,principalmente do gosto, olfato e tato, quando um alimento ingerido. No

    presente trabalho foi avaliada principalmente a acidez da conserva e a colorao

    final dos cogumelos, em anlise visual.

    3.4.7 Anlises microbiolgicas

    Para as conservas que apresentaram-se com colorao clara, equivalente

    conserva industrial de champignon, foi feita a anlise de coliformes,conforme descrito no item 3.3.1.2. As anlises foram feitas aps dois meses de

    armazenamento das mesmas a temperatura ambiente, em local fresco e protegido

    da luz solar.

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    41/64

    29

    4 RESULTADOS E DISCUSSO

    4.1 Experimento I: tratamento de basidiocarpos deAgaricus blazeicom

    antioxidantes

    No se observaram diferenas significativas na colorao dos

    basidiocarpos desidratados aps o tratamento com os antioxidantes propostos,

    segundo as leituras no colormetro Minolta CR400. Mesmo os cogumelos sem

    os tratamentos com os antioxidantes (controle) apresentaram-se com colorao

    amarelo-palha, os quais seriam classificados como A+, caso fosse utilizada a

    colorao como critrio de classificao. A colorao apresentou diferenas

    significativas apenas entre lotes obtidos em dias diferentes (Tabela 10), porm

    no entre os diferentes tratamentos. Porm, mesmo nas diferenas entre os lotes,

    os cogumelos apresentaram-se com colorao clara, com a leitura de L variando

    de 67,93 a 73,54, o que corresponde a cogumelos bastante claros, de

    classificao A ou A+, segundo Del (2003). Avaliando esses resultados,

    conclumos que, mais importante que o uso de antioxidantes, o manejo

    adequado dos cogumelos durante a colheita e a lavagem dos mesmos.

    Infelizmente, nas condies dos produtores, em funo do grande nmero de

    cogumelos colhidos, nem sempre, o manejo dos cogumelos adequado, o que

    leva ao seu escurecimento durante a lavagem e desidratao.

    Del (2003) props a utilizao do sistema de avaliao da colorao

    dos cogumelos desidratados do A. blazei pelo colormetro Minolta CR400, o

    qual permite uma avaliao muito mais objetiva. A adoo deste sistema seria

    extremamente importante para os produtores, uma vez que, em funo da

    subjetividade da avaliao visual, nem sempre as empresas exportadoras

    classificam o produto de forma adequada, levando o produtor a grandes

    prejuzos. Ao se analisar os dados apresentados por Del (2003), e comparando-

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    42/64

    30

    se com os dados obtidos neste trabalho, percebe-se que a leitura de L a que

    melhor reflete a colorao do cogumelo e, portanto, poderia ser utilizada comonico parmetro de avaliao da colorao desse produto.

    TABELA 10 Valores mdios de ndices L e b de cogumelos desidratados deAgaricus blazei, avaliados em diferentes dias.

    Lotes L* b*

    30/10/2005 73,54a 37,03a

    01/11/2005 67,93b 27,18b

    02/11/2005 73,12a 37,11a*Mdias seguidas de letras distintas diferem pelo Teste de Scott-Knott (P

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    43/64

    31

    o qual tem como funo impedir a reabsoro de umidade pelos cogumelos.

    Alm disso, recomenda-se a utilizao de um ambiente fresco e seco paraguardar o material durante o perodo que antecede a venda.

    Por outro lado, dos fungos presentes nos cogumelos, foram identificados

    gneros que apresentam espcies potencialmente toxignicas. A presena desses

    fungos nos cogumelos pode estar relacionada com a contaminao do ambiente

    em que os mesmos foram manipulados ou com a contaminao durante a

    realizao das anlises microbiolgicas. Braga et al. (2005), ao avaliarem

    diferentes tipos de embalagens plsticas para o armazenamento do cogumelo

    desidratado em ambiente com alta umidade relativa do ar, verificaram que, nasembalagens de polipropileno, houve maior reidratao dos cogumelos. Por outro

    lado, nas embalagens de polipropileno biorientado metalizado duplo, os

    cogumelos sofreram menor reabsoro de umidade. Portanto, pode-se concluir

    que, dependendo do ambiente de armazenamento, importante que o produtor

    utilize embalagens de melhor qualidade, mesmo que o seu custo seja maior, uma

    vez que a reidratao dos cogumelos, certamente, levar a uma maior

    deteriorao e, possivelmente, ao crescimento de fungos potencialmente

    toxignicos.

    4.2 Experimento II: tratamento dos basidiocarpos de A. blazei com

    sanificante dicloroisocianurato de sdio (DCIS)

    4.2.1 Contagem total de microrganismos aerbios mesfilos nosbasidiocarpos desidratados deA. blazei

    Para o teste de contagem total de bactrias em meio gar nutriente, foiutilizado o tratamento com DCIS a 200 ppm, tendo como controle os cogumelos

    mergulhados em gua. Nos basidiocarpos que foram mergulhados apenas em

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    44/64

    32

    gua, antes do processo de desidratao, obteve-se a contagem de 3,6 x 106

    UFC.g-1de cogumelo desidratado, ao passo que, nos basidiocarpos tratados comDCIS 200ppm antes da desidratao, obteve-se uma contagem de 9,57 x 10 4

    UFC.g-1. Os resultados mostram, claramente, um efeito do sanificante na

    reduo da populao total de bactrias nos cogumelos desidratados. No entanto,

    mesmo com a utilizao do sanificante, ainda foi possvel observar uma

    populao de bactrias acima dos padres aceitveis, do ponto de vista da

    segurana alimentar, dependendo de quais espcies de bactrias estiverem

    presentes nos cogumelos desidratados.

    4.2.2 Quantificao de coliformes termotolerantes

    No foi constatada a presena de coliformes termotolerantes em nenhum

    tratamento, evidenciando as boas condies higinico-sanitrias nas etapas do

    processamento de desidratao do cogumelo Agaricus blazei. Na anlise de

    cogumelos frescos, recm-colhidos e lavados cuidadosamente, verificou-se a

    ausncia de coliformes totais e coliformes termotolerantes, mostrando que os

    cogumelos frescos, nestas condies, so bastante seguros, do ponto de vista

    microbiolgico. Nos cogumelos desidratados tratados com o sanificante por 2

    minutos, verificou-se a presena de coliformes totais, mas no de coliformes

    termotolerantes em todos os tratamentos testados (50 a 200ppm de DCIS). Os

    basidiocarpos deA. blazeisubmetidos a diferentes tratamentos no apresentaram

    tambm contagem de coliformes totais e nem coliformes termotolerantes, nos

    diferentes perodos de avaliao.

    Rosa et al. (1999) tambm no verificaram a presena de coliformes

    termotolerantes nos testes confirmativos de bactrias isoladas de basidiocarpos

    desidratados de A. blazei. Segundos os autores, o tratamento dos cogumelos a

    50oC contribuiu tambm para reduzir sensivelmente a populao bacteriana, a

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    45/64

    33

    qual foi de < 10 UFC g-1, aps 12 horas de tratamento. Esses resultados,

    portanto, indicam que, apesar de haver uma comunidade bacteriana presente noscogumelos frescos, pode-se obter boa qualidade microbiolgica dos cogumelos

    desidratados com a utilizao de boas prticas asspticas durante a colheita, a

    lavagem e a desidratao dos mesmos, com a utilizao de gua de boa

    qualidade, ambiente adequado, equipamentos e utenslios limpos. Em funo

    dessas consideraes, o experimento foi repetido, tentando-se imitar as

    condies de um produtor sem muitos recursos. Neste caso, os cogumelos foram

    colhidos, sendo acondicionados em vasilhame de modo a permitir contato fsico

    entre a base do estipe, a qual est em contato direto com a terra e outras partesdo cogumelo. Com isso, esperava-se uma intensificao da contaminao dos

    cogumelos com a terra de cobertura e, conseqentemente, um aumento da

    populao bacteriana. Aps isso, repetiu-se o experimento com o DCIS,

    utilizando-se apenas o tratamento a 200 ppm e o controle (imerso em gua).

    Verificou-se que, nessas condies, houve contaminao com coliformes

    termotolerantes, em que T1 (DCIS 200ppm) apresentou 9,3 x 103 UFC.g-1,

    enquanto que o controle (C) apresentou 2,5 x 105UFC.g-1. Com isso, pode-se

    verificar que o tratamento com DCIS permitiu uma reduo da comunidade decoliformes termotolerantes, porm, no a sua eliminao. Conclui-se que as

    condies de higiene so fundamentais para uma boa qualidade microbiolgica

    dos cogumelos desidratados doA. blazei.

    4.3 Experimento III: conserva lquida de cogumelos frescos deA. blazei

    Uma das estratgias para o crescimento do consumo interno do

    cogumelo A. blazei o desenvolvimento de uma conserva que preserve acolorao clara do cogumelo e que favorea um sabor e aroma compatveis com

    o tradicional champignon, de forma que o consumidor brasileiro possa

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    46/64

    34

    substituir esse cogumelo pelo champignon do Brasil que oA. blazei.

    No entanto, duas dificuldades so observadas. Primeiro, logo aps alavagem do cogumelo, verifica-se um rpido escurecimento do mesmo, o que

    dificulta a obteno de um produto de colorao clara na conserva. Alm disso,

    dependendo do processo utilizado, o cogumelo apresenta um sabor normalmente

    mais acentuado que o tradicional champignon, o que torna a sua aceitao

    mais difcil pelo consumidor brasileiro.

    Por isso, neste trabalho foram avaliadas diferentes condies de

    conserva para este cogumelo, visando reduzir ou eliminar o problema do

    escurecimento e a obteno de um cogumelo de sabor agradvel.

    4.3.1 Conserva tradicional utilizada para o champignon

    A utilizao desse procedimento apresentou timos resultados quanto a

    colorao do Champignon do Brasil. Isso poderia significar uma indicao

    dessa metodologia, porm, a mesma conta com a utilizao do bissulfito de

    sdio, o qual apontado como uma substncia mutagnica e potencialmente

    cancergena, apesar de no haver confirmao cientfica dessa suspeita. O

    bissulfito apontado ainda como sendo responsvel por crises de asma em

    pessoas propensas e sensveis ao produto (Lambrecht, 1995). Por isso,

    desejvel a sua substituio como agente branqueador no processamento do

    cogumelo, em especial no caso do Champignon do Brasil,considerando que

    esse cogumelo possui um grande apelo quanto as suas propriedades medicinais,

    levando o consumidor a consumi-lo como um produto saudvel e natural.

    Em funo disso, testou-se neste trabalho a eliminao do bissulfito

    durante o processo de branqueamento do cogumelo, em experimento preliminar

    no Laboratrio de Cogumelos Comestveis do DBI/UFLA. Quando o teste foi

    feito com o A. bisporus, os resultados foram bastante promissores, porque os

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    47/64

    35

    cogumelos que no foram tratados com bissulfito apresentaram uma colorao

    apenas ligeiramente mais amarelada do que aqueles que foram tratados combissulfito.Esses resultados indicaram que o bissulfito poderia ser eliminado do

    processo de branqueamento doAgaricus bisporus. No entanto, quando o mesmo

    procedimento foi adotado com o Agaricus blazei, observou-se o escurecimento

    excessivo dos cogumelos, inviabilizando o processo. Diferentes concentraes

    de cido ctrico foram testadas na conserva, considerando que esta uma

    substncia antioxidante, no entanto, no houve sucesso. Verificou-se ainda que o

    maior escurecimento ocorreu exatamente durante o processo deautoclavageme

    no durante o cozimento dos cogumelos antes do processo de esterilizao. Emfuno disso, foram testadas diferentes condies de conserva utilizando-se o

    mtodo de apertizao.

    4.3.2 Anlise das conservas lquidas segundo o mtodo de apertizao

    Na tentativa de se minimizar o problema do escurecimento excessivo

    dos basidiocarpos do Agaricus blazei foram testadas diferentes condies de

    conserva utilizando-se a tcnica de apertizao, a qual utiliza apenas temperaturade fervura. As conservas feitas base de vinagre apresentaram-se com tima

    colorao (Figura 1) e no sofreram estufamento das tampas aps 2 meses do

    preparo, porm, apresentaram-se cidas ao paladar, inviabilizando a sua

    utilizao.

    As conservas com cido ctrico 1% e cloreto de sdio 5% apresentaram

    tambm tima colorao, com a vantagem dos cogumelos apresentarem tambm

    sabor agradvel, mostrando-se promissoras. Porm, aps 2 meses do preparo,

    metade das amostras apresentou formao de bolhas de gs e estufamento dastampas, indicando a presena de microrganismos. O fato de metade dos vidros

    permanecer sem alterao indica que esse tipo de conserva pode ser uma boa

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    48/64

    36

    alternativa, desde que se testem concentraes maiores de cloreto de sdio na

    soluo de conserva. Em funo disso, ainda foram conduzidos neste trabalhoexperimentos nos quais foram utilizadas as concentraes de 8 e 10% de cloreto

    de sdio na soluo conserva. Aps 1 ms do preparo nenhuma das amostras

    apresentou produo de gse a anlise bacteriolgica no revelou a presena de

    coliformes totais e nem de coliformes termotolerantes. No entanto, ser

    necessria uma avaliao por um perodo maior de tempo, uma vez que um

    tempo de prateleira mais prolongado (pelo menos 6 meses) essencial para que

    se possa colocar o produto em supermercados.

    FIGURA 1 Conservas de basidiocarpos do cogumelo Agaricus blazei. A-Conserva em soluo de cido ctrico (0,5; 1,0; 1,5 e 2,0%) e NaCl

    3%. B- Conserva em vinagre 70% e NaCl 3%.

    B

    A

    B

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    49/64

    37

    5 CONCLUSES

    No se verificou efeito da utilizao dos antioxidantes cido ascrbico e

    cistena sobre a colorao final dos basidiocarpos desidratados deA. blazei.

    A utilizao do DCIS 200ppm favoreceu a reduo da populao

    bacteriana nos basidiocarpos desidratados, porm, no houve eliminao de

    coliformes termotolerantes.

    Basidiocarpos desidratados que passaram por boas condies de higiene

    durante as etapas de colheita, lavagem e desidratao, no apresentaramcoliformes termotolerantes.

    Para a conserva lquida do A. blazei, os melhores resultados foram

    obtidos quando se utilizou a metodologia convencional para a conserva do

    champignon.

    Nas conservas obtidas segundo o processo de apertizao, os melhores

    resultados em termos de colorao, foram obtidos com a utilizao de vinagre,

    porm, os mesmos, apresentaram-se extremamente cidos ao paladar,

    inviabilizando a sua utilizao.A conserva com cido ctrico 1% e cloreto de sdio 10% apresentou-se

    com colorao clara, sabor agradvel e uma alternativa para a conserva do A.

    blazei, caso essas caractersticas mantenham-se por um perodo de pelo menos 6

    meses.

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    50/64

    38

    REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

    AGNCIA NACIONAL DE VIGILNCIA SANITRIA. Resoluo RDC n12 de 2 de janeiro de 2001. Decreto 3029 de 16/05/1999.Regulamento tcnicopara produtos de vegetais, produtos de frutas e cogumelos. Disponvel em:. Acesso em: 10jan. 2005.

    ALEXOPOULOS, C.J.; MIMS, C.W.; BLACWELL, M. Introductorymycology. New York: J.Wiley, 1996. 869p.

    AMAZONAS, M.A.L.A.; SIQUEIRA, P. Champignon do Brasil (Agaricusbrasilliensis): cincia, sade e sabor. Colombo: Embrapa Florestas, 2004. 45p.(Documentos, 85).

    AMAZONAS, M.A.L de A.Agaricus brasilliensis (= Agaricus blazeissHeinem.): ltima viso sobre a polmica questo da identidade taxonmica deum dos cogumelos mais promissores no merdado mundial. In: SIMPSIOINTERNACIONAL SOBRE COGUMELOS NO BRASIL, 2., 2004, Braslia.2004, Braslia, DF. Anais...Braslia, 2004. p.78-80. (Documentos, 116).

    ANDRADE, N.J.; MACEDO, J.A.B. Higienizao na indstria de alimentos.So Paulo: Varela, 1996. 128p.

    ANDRADE, N.J. et al. Efeito da concentrao e do pH na ao sanitizante desolues diludas de hipoclorito de sdio comercial. Revista do InstitutoLaticnios Candido Tostes,Rio de Janeiro, v.40, n.204, p.73-83, jul./ago. 1985.

    ANGLE, R.Y.; TAMHANE, D.V. Mushrooms: an exotic source of nutritiousand palatable food.Indian Food Packer, v.28, n.5, p.22-23, 1974.

    ARAJO, J.M.A. Qumica de alimentos:teoria e prtica. Viosa, MG: UFV,1995. 335p.

    ARAJO, J.M. Qumica de alimentos: teoria e prtica. Viosa, MG: UFV,2000.

    ARORA, D. Mushrooms demystified:a comprehensive guide to fleshy fungi.Berkeley: Ten Speed Process, 1986. 959.

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    51/64

    39

    BANO, Z.; RAJARATHNAM, S. Pleurotus mushrooms: Parte . Chemicalcomposition, nutritional value, post-harvest physiology, preservation, and rolean human food. Critical Reviews in Food Science and Nutrition,v.27, n. 2,p.87-158 1988

    BARTHOLOMAI, G.B. Efecto del escaldado sobre la cintica del secado y lacalidad de champinones deshidratados en corriente de aire y por liofilizacion.Agroqumica y Tecnologia de alimentos, v.14, n.3, p.429-438, 1974.

    BARUFALDI, R.; OLIVEIRA, M.N. Principais operaes e processosunitrios. In: Fundamentos de tecnologia de alimentos.So Paulo: Atheneu,1998. Cap.3, v.3, p.27-61. (Cincia, Tecnologia, Engenharia de Alimentos eNutrio).

    BETA GLUCAN RESEARCH. Review year 2003: Beta glucan ResearchPapers, Patents and Patent Applicatior. Disponvel em:. Acesso em: 23 ago. 2005.

    BLATCHLEY, III, E.R.; XIE, Y. Disinfection and antimicrobial processes.Water Environment Research, Alexandria, v.67, n. 4, p. 475-481, July/Aug.1995.

    BLOCK, S.S. Peroxygen compounds. In. ______. Disinfection, sterilizationand preservation.4.ed. London: Seymour, 1991. p.167-181.

    BONAZZI, L.C.L.; WOLFF, E. Quality of dehydrated cultivated mushrooms

    (Agaricus bisporus): a comparison between different drying and freeze-dryingprocesses. Lebensmittel-Wissenschaft und Technologie,v.25, n.4, p.334-339,1992.

    BONONI, V.L.R; TRUFEM, S.F.B. Cogumelos comestveis.So Paulo: cone,1986.

    BORGES, M.; BRANDO, S.C.C.; PINHEIRO, A.J. Efeito bactericida doperxido de hidrognio sobre Salmonella spp. em leite destinado fabricao dequeijos. Revista de Microbiologia, v.20, n.2, p.145-149, 1989.

    BRAGA, G.C. Cogumelo do sol: pesquisas apontam suas propriedades

    medicinais. Revista Tecnologia e Treinamento Agropecurio, v.2, n.6, p.7,1997.

    BRAGA, G.C. et al. Manual do cultivo de Agaricus blazei Murril.

  • 7/24/2019 DISSERTAO_Conservao Ps-colheita Do Cogumelo Agaricus Blazei Com a Utilizao de Antioxidantes e Sanific

    52/64

    40

    Cogumelo do sol. Botucatu: Fundao de Estudos e Pesquisas Agrcolas eFlorestais, 1998. 44p.

    BRASIL. Resoluo RDC n 12, de 02 de janeiro de 2001. Aprovaregulamento tcnico sobre os padres microbiolgicos para alimentos.Ministrio da Sade. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria, (ANVISA).Disponvel em: . Acessoem: 14 maio 2005.

    BRASIL. Ministrio da Sade, ANVISA. Cmara Tcnica de Alimentos.Informe Tcnico n 6, de 2003. Procedimentos sobre Cogumelos: 1) dess