Differential Gene Expression in the Lens Epithelial Cells from Selenite Injected Rats

6
Differential Gene Expression in the Lens Epithelial Cells from Selenite Injected Rats TAKESHI NAKAJIMA, EMI NAKAJIMA, CHIHO FUKIAGE, MITSUYOSHI AZUMA * AND THOMAS R. SHEARER a Senju Laboratory of Ocular Sciences, Oregon Health & Science University, West Campus, 505 N.W. 185 th Ave., Beaverton, OR 97006, U.S.A. and b Department of Oral Molecular Biology, Biochemistry and Molecular Biology and Ophthalmology, Oregon Health & Science University, Portland, OR 97201, U.S.A. (Received Rochester 24 July 2001 and accepted in revised form 28 September 2001) The mechanism causing loss of integrity of lens epithelial cells induced by an overdose of sodium selenite remains to be elucidated. The aim of the present experiment was to search for changes in gene expression in epithelial cells of lenses from rats developing selenite cataract. One day after injection of selenite into 12 day old rats, gene expression in lens epithelial cells was analysed using a commercial DNA array (Atlas Rat 1 . 2 Array). Changes were con®rmed by RT±PCR. Of 1176 genes assayed by hybridization, 91 genes showed differences in expression between normal and selenite lenses. The three genes showing the greatest changes were: cytochrome c oxidase subunit I (COX-I, decrease), gastric inhibitory polypeptide (GIP, decrease), and early growth response protein-1 (EGR-1, increase). Both COX-I and EGR-1 have been reported to be involved with apoptosis. These results suggest that changes in COX-I and EGR-1 expression in lens epithelial cells might play important roles in apoptosis and altered metabolism leading to selenite cataract. # 2002 Elsevier Science Ltd. Key words: lens epithelium; selenite; DNA array; EGR-1; COX-I; GIP. 1. Introduction Selenite-overdose cataract in young rats is one of the best-documented examples of the detrimental con- sequences of calpain over-activation. The sequential mechanism involves calcium accumulation in the nucleus, calpain-induced proteolysis of crystallins and cytoskeletal proteins, phase transition, and crystallin precipitation (Shearer et al., 1997). However, the exact mechanism causing loss of integrity of the outer layer of lens epithelium cells leading to calcium in¯ux into the underlying ®ber cells is not as well de®ned. Observations in the epithelium from selenite cataract include suppression of mitosis and decreased entry of epithelial cells into prophase, nuclear fragmentation (Anderson, Shearer and Claycomb, 1986), decreased rate of epithelial cell differentiation (Cenedella, 1987), decreased synthesis and increased damage of DNA (Huang, Hess and Bunce, 1990), and loss of calcium homeostasis (Wang, Bunce and Hess, 1993). Apop- tosis in the lens epithelium was suggested as contributing to the selenite-induced cataract (Tamada et al., 2000), as well as in atopic (Mihara et al., 2000), diabetic (Takamura et al., 2000), radiation- induced (Belkacemi et al., 2000) and UVR-induced cataracts (Michael et al., 1998). The aim of the present experiment was to broaden the search for other metabolic processes which might be altered in lens epithelium cells from selenite cataract using DNA array analysis. Interestingly, it was found that two of the three most altered genes were involved with apoptosis, indicating that apoptosis may play a major role in the early stages of selenite cataract formation. 2. Materials and Methods Animals A single subcutaneous injection of sodium selenite (Nacalai Tesque, Japan) (30 mmol kg 1 body weight) was administered to 12 day old Sprague-Dawley rats (Charles River, Japan) as previously described (Tamada et al., 2000). Eight week old rats were also used to test for changes in gene expression with age. All animals were handled in compliance with the Guiding Principles in Care and Use of Animals (DHEW Publication, NIH 86-23) and according to the tenets of the ARVO Statement for the Use of Animals in Ophthalmic and Vision Research. Identi®cation of the Differentially Expressed Genes After CO 2 inhalation, lenses were obtained by a posterior approach from 100 eyes from normal rats (13 day old) and 100 eyes from rats on day 1 after injection of selenite. Lenses were gently rolled on ®lter paper to remove any tissues adhering with the lens capsule. Lens epithelial cells with capsules were then Exp. Eye Res. (2002) 74, 231±236 doi:10.1006/exer.2001.1131, available online at http://www.idealibrary.com on 0014-4835/02/02023106 $35.00/0 # 2002 Elsevier Science Ltd. * Address correspondence to: Mitsuyoshi Azuma, Senju Labora- tory of Ocular Sciences, Oregon Health & Science University, West Campus, 505 N.W. 185th Ave., Beaverton, OR 97006, U.S.A. E-mail: [email protected]

Transcript of Differential Gene Expression in the Lens Epithelial Cells from Selenite Injected Rats

Page 1: Differential Gene Expression in the Lens Epithelial Cells from Selenite Injected Rats

���� ��� ��� "�44�$ ��� �>�'�>*��-�4��44*C������44����>�� ��� �� � �� �� �� ����-CC������� ��������� ��

����������� ��� �� ������� �� ��� ���� � ������ ��� ���� ��������������� ����

������� ������� �� ������� ���� �������� ����� ��� �������� �� �� �� �������

������ ������ ����� ��������� ���� ������ � ������� ���������� ���� ������� ��� !�! "#���

$��!� %������� �& '(��)� �!�!$! ��* �+�������� ��� ,������ %����� %��������� ��*,������ %���� ��* ������������ ���� ������ � ������� ���������� -����*� �& '(.�"� �!�!$!

�������������� �

44�D0D<>

� !�������� �� ���%����� E420�� - ��

�&������* &������ ./ 0��� .��" ��* �������* �� �����* � .# �������� .��"�

��� ������� ����� � �� ������� �� �� ����� � �� ������ �� �� ������� �� ���� � ��������� �� �� � �������� ��� �� �� ��� ������ ��������� �� �� ����� ��� ������ � ���� �������� ����� � �� �� ��� ���� ��� ���� ���� � ���� ��������� ��� ��� ����� ������� �� � ���� ����� ��� � � ���� ���� ������� � �� ����� � �� �� ��� ��� ��� � �������� � ! ����� "!� �#�� ��� !����$� %����� ���� ���&���� �� #�'(%#� �� ��)* ���� ����� �� �����+����� ,� ��������� ��������� � ������� ������� ����� ��� � ���� ���� ��� ����� ���� ����� ���������� ������ ����- ���������� � ����� ����� . "%�/0.� �������$� ����� ������� �� �������"1.(� �������$� ��� ��� � ������ ������ ������0� "21#0�� ������$� 3��� %�/0. ��� 21#0� ���� ������������ �� �� ��� ��� ��� ������� ���� ��� � ����� ���� ������ � %�/0. ��� 21#0� �������� �� ����� � �� ���� � �� �������� �� � � ������ ��� � ����� ������ � ����� �� � ����

��������� � �44� 2 ���� 5����� 6������ ���� �� ����� ��7 � ����7 � ! �����7 21#0�7 %�/0.7 1.(�

������� ������� ���� ������ ��� � �� � �����

��� ����� �� ��� !#A� 5�������� ��� ��� @� ��

�� ����������

5� ����0������� �������� � ����� ��� ��� �� ������0���������� ����� � �� ��� ��������� ���0�8����� �� �� ��� ����0��������� ��� �8����� ������� ��� �� �� ��� ������ ���� � ������ ��� �� ���0������ ������ � �� ����� � �������9� ��� ������� ���� �������� ��� ����� ����������� "5������ �� � �� �,,)$� :������� �������� ������� ����� � �� ������� �� ��� ����� ���� �� �� ����� �� �� ����� �� �� ��� �;����� ��� ����� ��� &��� �� ��� � �� ��&������������� � ��� ����� �� ���� � ���� ���������� ��� ������� �� ��� ��� �������� ����� ������� � �� ��� �������� ��� ��� ������������"!������� 5������ ��� % ������� �,<*$� ������������ �� ����� � �� ������������ "%����� �� �,<)$��������� ����� ��� ������� ������ �� � !":����� :� ��� 3����� �,,4$� ��� � �� �� ���������� "=���� 3���� ��� :�� �,,>$� !���0�� � ��� �� ����� �� �� ������� ����������� �� ��� � ����0������ �������� "�������� � �� �444$� � �� � � ����� "?���� �� � ���444$� ������ "��9����� �� � �� �444$� �������0������ "3� 9���� �� � �� �444$ ��� @A#0������

"?���� �� � �� �,,<$� ��� �� �� ����������� �� �� ������� ��� ����� ���

EC4�C4�4�>��4* F>E�44C4

������������� ��- ?����� !+���� 5���� 6�����0 �� 5������ ������ :�� �� G 5����� @������� =��E �=� �<E�� !���� 3��������� �# ,)44*� @�5�!�����0�+���H����������

����� ������ � ������ ���� ���� �� � ����� � �� ����� �� �� ���� � ���� �������� ��� � !����� ��� �� .�������� �� � �� ����� ���� ��� ����� ����� ��� � ����� ���� ���� ��� ��� ���

�� � � ��� ��� � ���� �� � ���� �������� ���������

�� �������� ��� ������

�� ���

! �� � ���������� ������� �� ���� � ����" ��� � ��8��� B����$ ">4 ��� 9��� ���� �����$�� ��������� �� �� ��� � � 5������0��� �� ���"%��� � #���� B����$ � ������ � �������"������ �� � �� �444$� 2��� ���9 � � ��� ���� � ���� �� ��� ��� ������ � ���� ������� ��� ����! ���� ���� ���� �� � ���� ���� ��� ���1���� (���� � � %��� ��� @� �� !��� "�:2= (�� ������ .: <*0�>$ ��� �������� ��

!��� � ������ �� ��� A�� #�������

����� ���� �� �� ��� � ������� ���� ������� ����

!���� %�� ��� ����� ��� ���� ������� �� �������� �������� ���� �44 ��� ���� ����� ���"�> ��� � �$ ��� �44 ��� ���� ��� �� ��� � ������������ �� � ����� 6��� ���� ���� � �� �� �� & ���

����� �� ������ ��� ��� ������� ��� ��� ������ �� 6�� ����� � �� ��� ���� � ���� ����

� �44� 2 ���� 5����� 6���

Page 2: Differential Gene Expression in the Lens Epithelial Cells from Selenite Injected Rats

������ � �������� ���� �� &��� �� ��� ����+������� ���������� �� � ������ ��� �� � ������0����� ���� ��� ����� ��� �� &���� 1��� ��������� ��� ��� ��� ��� !� � #�� ��� !���� "% �������(� � ! ��� %!� @�5�!�$� ! � �� ���� ����� �� ��������� ��������� ��� 1��3��9 ������ ������� ��� �� � �� ����-CC����� ����������C�� �C���� �C�������� � ���� # ! ���� ���������� ������� ��� ��� ������ ���������� ��� I�0>>(J �!�(0 ��� ������ ��� ��� �� ! ����� ���� ���&�� �� ��� �� ��5�� 2�������� �� ���� 6��� �� ����� ���������+�� �������� �� *<�% �� ��� ��������� !���������� ���������� �� �������� ��� ����� ������ ����� 8����&�� ��� ��������� ��� ���9������� ���� +���� ������� ��� ��� �����+���� �����0

���

���� �� ���� �� ��� ���� ��������� ����� ������ ���������

K.1� �� ��������� ���� ������� � �� ����� � �� �� ������ " ���$ ��� ���� � ���� ������� ��� "����$ ���� �������� �!� � #�� ��� !�����

�!362

� ������� ���� ������� ���� ����

1���6������ � ���!� � ��������

.������� ����21#0� 24*��������� ����1.( "� ����0����������� ������� �� �������$

24*�

%�/0. %4>�%����� ����:(#� 1�E1!(�: 1�)

.������ �� �� ���� ��� !� � ����� ���� ��������� ������� �� ��� ������ ���� ��� ����� ��� ��� ���� �� ����������� ����� ����

�������� �� �� ��� � ������� ���� ������� ����

��������� ������� �� ��� ���� � ����� �������+���� �� ��� ����� �� ���&���� �� #�'(%#�� �� ! ���� � ���� ������� ��� ��� ��� ������������ ���� 6�� ����� � ���� ��� �� ���� �4 ������� ����� ��� ��� �4 ��� ���� � ���� ����������� ���� # !�� ��������� ���� �� ����� � �� ��� �#.+� #������ "6�� ������ ���� %�� ���� %!�@�5�!�$� ��� ���� ������� ��� � �� . "6�� ������ 0���$ �� ������ ������ � !� ��� �� ���� # !�� ������ ��������� ��� 5����5���� .. ���������������� "6�� ������ ���$ ��� E4 �� �� D��%�� ��"��$0����� �� ! "�4 � $ �� � ���� ���*4 � �� � � �2� (%# �� ��������� ��� #����0

�� ������ �� ���

��01� (%# ���� "!������ (������� 3����� .����(�������� B� @�5�!�$ ��� 4�� �? ���� �����

� ����� ������� �� � ����� �# ! ���� ��� �� ���������� �����+���� �� >>(0 ��� �� �� ! �� ��)* ���� �� ���

.

��� ��� ����� ��� � !"��

5��� ������"������ � � ����$

K� � ������"������ #�'(%#$

D� �* �*�E� �E�*

>>� * �E�E� ���>

�D)<� >4> �D�,� ���<

D��� >DD ����� ���4E>�� D>) ����� ����

��� !� �.���� ��� � �������� K� � ������ ��� ���� �� #�'(%# "K�� �$ ��� � ���� ������� ��� ��� ���

Page 3: Differential Gene Expression in the Lens Epithelial Cells from Selenite Injected Rats

����� 1!(�: ��� :(#�� ����� �� ��������� ��

����

"��� � ..$ ��� � � �� �� ! � ����� ��� ��� ��������� ���� ,E�% ��� ��E ��� �� ���� �� ,E�%��� >4 ��� ����� �� ����������� "��� � ..$ ���>4 �� ��� )��% ��� � ��� ��� )��% ��� * ������ (%# ������� ���� ��� ����� ����� ��� ����0����� ���� �� ��� ��� &����� ������ 2��� (%#������� ������ �� +�0�������� �� � ������������ ��<L ������ �� "6�� ������ ���$� 1� ��������� ��� ������ ������ ��� ������ �� 1� ��� �444 "3�0#��� :���� �� %!� @�5�!�$� .: .����������� ����� ��*� �� ��� �� ����� ��� ����

������������ ���� �������� � �� ��� ���� �

��� �� ������ ��� ���� ������ ����� ����� �� ��� � ! ����� �� #�'(%# ��� ��

���� ����������� �� (%# ��������

#��� � ��� �����

5������ ��� � �� ���� �� ��������� �� ���

5������M �0����

�� ������

� ������� ���� ������� ���� �� ��� �����

�� ��)* ���� ������� �� � ! ����� ��� ������������ � ,� ���� ����� ��������� � ��������� �� �����+���� ������� ����� � ��������� ��� � ���� ��� "K�� �$� ����� �������� ����� �������� �# ! �������� �� � ���������� �� ED ���� �� �������� .� ������ ������������� � ����� ����� . "%�/0.$� ��� � ������������ ������0� "21#0�$� ��� ����� ��������� ������� "1.($ ����� ������� ���9�� �������21#0� �# ! ������� �� ������ *�E0�� � �� ���� ����� ������� �� � ���� "��� � .$� .� �������� %�/0.��� 1.( �# ! ������� ���� �������� D�,0 ���E�E0�� ��

%��&������ ��� 8����&����� �� ��� ����� ����0

����� � ������� ���� ���� ��������� �� (%# �

�!362

"� ��� �'$���� $�� ��� ��

1���

6������ ���� !� ��������� 5�8����� "

.������� ����21#0� 24*� ��� �1%!11%!%!1%%��

���0��� 111!%�11�!11�������� ����%�/0. %4>� ��� !�1�!1!%!%%%1!1

���0��� %1!!1%!!1%�!1.( 24*� ��� !!1!11��1!1��%%

���0��� 1!��1�%%�1%%!%����� ����:(#� 1�E ��� 1%1%�1!!�!1!!!�

���0��� 1�1%�%!��!�!11!(�: 1�) ��� �%!!1!!11�11�1!

���0��� 11�%%!%%!%%%

��� ��������� ����� #�'(%# ��� � ������� ���� ! ��� �� ! ������ ��� ����� �� ���������� %�/0. ��� 1.( �# ! �������� ��<0 �����>0�� � �� ��� � ����� ������� �� � ����� �� � 21#0� �������� ������� E�*0�� � "K�� � ��� ��� � .$� ��� ���� ��� #�'(%# ��� � � � ���&���������� � ��� ������� �� ���� ��� ��� � � �� �������� ���� ������� � � ! ��� �� :������� ��������� ���� ������ �� ��� ����� ��� ���9�� �������� ���� ������� ������ .������ ������

���� ���

"�������� ������ � ��� ���� ����� �� �$� ��#���� �� �������� %����� �� ��� �$� �������� &�� �� ��

����� ���� ���� ��� ��� � �� ����� � �� ����� � "������ ��� ��� ��������$ ��� > "��� �����������$ ����� � ���� ������� ��� � < ���9 � ���� � ��� "K�� >$� 2������ �� %�/0. �� ����������<0�� � �� ��� � ��� �D�D0�� � �� ��� > ����� � ����������� �������� �� ����� ��� ������� ����2������ �� 1.( �� � � �������� >��0�� � �� ���� ��� ��>0�� � �� ��� >� .� �������� 21#0� ��������� *��0�� � �� ��� � ��� �E�D0�� � �� ��� >����� � ���� �������� ���� ����� ���& � �� �# !������� ���� � �� �� ��� � ��� > ����� � ������������ :������� ��� ��������� ���� ��������K�� ����� �� %�/0. �# ! �� ������� �������� ����� > ���� �� ��� � ����� � ���� �������� 5��� � !������������ �� � � �������� � �� ����� � �� �� ��� � ��� > ����� � ���� ������� "������ �� � ���444$� ���� ��� � ����� ���� �� %�/0. ��� ������� � �� ���� �� ������ � ��� �� ����� ���

2������ �� ��� ����� ���� �� ��� ������� ���

�� ��������� �� < ���9 "K�� >� ��� E$�

..

������� ��� � ����� ��

E�0>�$!���� ��

����������� "�%$ %�� � ������

1%!1�!%%% EE �)�1��!��!!1!1%%

%%�!%���! EE ���1!�11%1!!�!1!�%%%!�1% *> >)1%�%%!!!1%%

!1�1!�!11�%% ** �,�%!!111%!�!�%%!1%!11% EE �>�1��1%�1�!

Page 4: Differential Gene Expression in the Lens Epithelial Cells from Selenite Injected Rats

K.1� �� #����������� ������ ������0����� �� ���� #�'(%# ��� � " ���$ ��� ���������� ���� ��� � �� �� "����$ �� ��� �� ����� � �� �� ��� � ����� � ���� ������� ��� ��� ������� ������ � 2��� �� �� ��� ����� 5��� "� � D

�����

��� �� ������ �� ���

�� ��������

! ������ ������ �� ��� ������ ����� ������� �� ����� � �� ���� ��� ������� ��� � �������� � ����������� ��� ������ �� �� ��� �������� � �� �������� ����� "������ �� � ���444$� :������� ��� � ������ �� ����� �������������� � ������ � ���� ���� ���������� � ������� � �� ����� � ����0������ ��������� � ������� ���� ��� � ������� � ������ � ��� ���������� �� ������ ��� � �� ������� ����� �� � ������� ���� ��� ������ �� ��� ���������� �� �� ����� � ��� ������ �� ���� �� ���� �������� ��� ������ � � ��� �� ����� � �� ���� ������� ��� � ����� .� �� ����� ���� � ��������� ������� � %�/0. ��� 1.( �# !� ���������� 21#0� �# ! ��� �%�/ ������� ��� ��� �������� �� ���0

������� ��� ��� ������ ��+��� �� ��� � �������������� ����� ��� � ������ ����� ���������� ��

��� �� �4 �� ����� � ����$� (���� ��� ����� �� ���

��� ��� ������� ��� � � ��� ���� ������ �������� ���� ��� ������ � �������� "3��9� ���

(������� �,,<$� .� ������ ��� %�/0. ���� ��� ���� ����� ����� ���� ��� %�/0. ��� %�/0A..� ������&���� � ����0���� ���� � �� ��� �� ����(���)����� $� �$)���$�� ������� � ��� "#������ � �� �,,<$� �� ������� � %�/0. ��� %�/0A..�������� �� �������� �� �@ 26 ������ .� �������� ��� �� �# ! ��� %�/0. �������� � ��������� %!� ������ ����� � ������� ����� ������� ��� � ��������� �� ) ��� "!�� �� � �� �,,<$�?�������� 5���� �� � � "�444$ ������ � �������� ���� ���� � ����� 0����� 0 0����� ���� ������ �0��� "�� ���� �� ���0�� ���� ���� �� �����������$���&�� � ������ ���������� ������

21#0� �� �������0��� � ����� ���� ��0���� ���� �� ������� ��� ����� ��� ������������� ���� ��+����� �+���� ��� ������������� ��� "1�� �� ��� 5�9������ �,,E$�21#0� � ��� ��� ������ ���� ������ ����� +��&���� ���� �� %�:� ������ ���� ��� �� � 1%0���

��� ��� #�'(%# ��� ���� � ��� � ..�

������ � ! �8����� �1%1"�C�$"1C!$11"%C�C�$1"1C�$ "����� ������� ����� ������ ��� ��

Page 5: Differential Gene Expression in the Lens Epithelial Cells from Selenite Injected Rats

����� �� �� ��������� ��� �������� �� 9���9 ���

K.1� >� #����������� ������ ������0����� �� ���� #�'(%# ��� � ��� ���������� ���� ��� � �� �� � ������� � �� ���� ��� �� ��� � ��� > ����� � ���� �������� ��� ������� ����� ���� ��� < ���9 � � ����� ���� #������� �� �� ���� �������� �� �> ��� � � ����� ���� 2��� �� �� ��� ����� 5��� "� � > ��� �� �4 �� ����� � ����$� 6����- �> ��� � � ���� ��� �- ��� � ����� ������� �� � ���� "�> ��� �� ���$� ��� >- �E ��� � � ���� ��� D- ��� > ����� ��������� � ���� "�E ��� �� ���$� ��� E- < ���9 � � ���� ��� ����9 ������ ��� ������ ��������� �� "� 4�4E�

������������ ���� �������� � �� ��� ���� ��������� ��

�� ���� � ���� ����� ��&���$ �� �� � "�%%$� �����21#0� ����� ��� ������ ������ �� ����0����� ��� ��+�� ������� "=� �� �,,�$� ��������� �� ������ ���� ����+���� 21#0� 9���90��� ��� ��� �������� ������� �� ������������ �� ��+�� ������� "�� �� � �� �44�$� .�������� �� ��� ��+�� �������� ������ ����� @A�������� �� ������ �� ��� ������� 21#0�":��� �� � �� �,,<$� ?�������� 21#0� ������� ���� �� ����� �� "=�9��� �� � �� �,,<$� ��� 21#0� � � ������� ����� @A ���������

1.( �����+�� ��� �� ���� ���� ��� ����������� ������ ������� ��������� �� ��� � ����������� �� ��� "N� ��� =� ��� �444$� :������� ����� ���� ���� � �� ����� �� � ������ �� �� ���� ������� ����� ��� � ��� ����� ������ ���� � �� ��� ��� ������ ! �� � ��� 1.( � ��������� ��9����� ��� ����� ��� �� ������ �� ���������� �� 1.( � ��� ���� ������� �����������������

���� 21#0� ��� %�/0. ���� ���� �� ���� ��������� ��� �� � �� ���� ���� � ������ ��

������ ��� ������ � �� �� ��� ����� �� ���0����� �� �� ���� �� ������� �������� ��

������ ������- 21#0� ����� � ������ ��� ����0������ �� ����C����� ��� ����� �� %���0!�(�� � "52#%!�$ ���� 9���� �� ���������� ��� �� ����� � ���� ��� ����� ��� �������� ��� ����� �� ��� ������ ������ � ���� ��� ��� � ������� "!�� �� � �� �444$�52#%!��� � �� ������ �� 52#%!�� ������� ������ ��� ��� �� ����� � �� "6� �� � �� �,,,$�!+��� �� ������ �� ���������� � ����� "��� �������+���$� � � ������� ������ � �� �� ��� ����������� �� ��� � ������� "%���� 3��� �� ��� 6����,,<$� ���� ���� ��� ������� ��� ��� ����������� ������� 21#0� ��� �������� %�/0. ����������� ��� �� ��� ��� ������ � � ���� �����0���� :������� �� �� ���� � ��� � ���� ��� ������ ������ ��� ��� � �� ��� ������������� ����������� ���� � ����� ��� ����� � ������� �� ���������� �� ��� ���� � �� ����� � �� ��� ��

����

���������������

�� ���9 �� �������� � ���� �� .: ����� 2N4>*44 ���#5� %E�

Page 6: Differential Gene Expression in the Lens Epithelial Cells from Selenite Injected Rats

���������

!��� O�� O������� B�� !�9� ?�� O������ O� ��� .������� N�"�,,<$� 5��� ������ ������� ����� ���� ���������� (��� ��$��) ��� ��� )4,'�,�

!������� #� 5�� 5������� �� #� ��� % ������� %� O� "�,<*$�5� ����0������ ����� � ������ ��� ������ �����0���� �$��� ��� ��� �� E>'*��

!��� ?�� N������ !�� ��9+���� ��� N�9������ ��� O����� ���O��������� ?� ��� ���� #� "�444$� ?������ �����������0������ ������ �� ����� ��� �����0 �� %�"��$0!�(�� ���� ����������� � ��� ��� � �<'�D�

3� 9����� N�� (� � 1�� #��� (�� B� �� K�� ������ � 2��:����� ?� ��� =������ B� ?� "�444$� .��+���������0������ ����� � ����� �� ����� � �� -������� ��� �;����� �� �������� ��� ����� ����*� ������ !"� �><'DD�

3��9�� (� !� ��� (������ #� �� "�,,<$� 5��������C������� ��������0���� ���� ����� � ���������� � ������*� ���� + ��� �"�� ��*>')E�

%����� �� #� B� "�,<)$� ����� ������ ���������� ��� ! ����� ��� ��� ���� �� ������������ �� ��� ������� � �� � ���- ��� �� �� ��� � ���� ������������� ��� ��� ��� *))',4�

%���� 5� B�� 3��� ��� ?� 2� ��� 6��� �� %� "�,,<$� %����� ������ ������ ������ �� �� ����� ������� ��������� �������- ���� ���� �� �� ���0���� ����������� ��� ������ 9���� (��� ���� + ������ �����D�',�

��� !�� %���� � ��� ���� 5�� ?������� ?�� ?������� ?��? ������� B�� #�����9��� A� ?� ��� !����� ?� ?�"�44�$� .��+�� ������� ����0���� ��� �E> ������� ������ 2��0�0C0 ���� �������� &���� �� �� ����� �������� ������� �� ������� *� + ��� ������� � >�),'<*�

1�� ��� !� ��� 5�9������ A� (� "�,,E$� 2�� � ������������ ������ � "2��0�$- ��������� �� � +��0&������� � �� ���������� ������� "���� �$��� � �� � ���(��� + ��� �"� �,�'��D�

:����� 6� 6�� :�� B� 6� ��� 3����� 1� 2� "�,,4$� � !������� ������ ��� ��� ����� � � ����0�������������� � ��� ��� �$��� ��� ��� !� �4D�'E4�

:����� #� (�� K��� N�� ��3� �� .�� � P�� ?������� =� ���!������ 2� �� "�,,<$� 2��0� ���� ������ �������� @A ������- ����� ���� �� �� ����� ��� 2��0��������� ����� ���� ����� � ����� �� ,*'�4*�

��!

6�� 6�� 3��� 6�� 3�������� �� ��� (������� %� !� "�,,,$�2������ �� ����C����� ��� ����� �� %�"��$0!�(��

� ����� �� ����� � �� ��� �� ����� ����� ������� � 30> �� � �$��� ��� ��� �!� ><,',D�

?���� � #�� A������ 1� K�� ��� ?�� �� B�� 1��� 6� ���5��������� (� 1� "�,,<$� !����� � ��� ��� �� ������ ��� ������ � ��� � ����� �� ��������� ��,���-���������� . � #� � �!� �*<�')�

?����� 2�� ?����� :�� ������ ?� ��� ������ 2� "�444$�6�� ����� � �� ������ ��� ������ � �������������� :������� ���� ��� �������������� ����� *��� *� -���������� ��� *,E'*�

#����� 5�� 2�����01����� .�� 3�� ��� #� ��� %� ���� ?� B�"�,,<$� #��� ���� �� ���������� ���� ������� ��(���)����� $� �$)���$�� - ����0���� ���� �� ���0������� ���������� � ������ ������� ���$�� �>,E�'<�

5������� �� #�� ?�� :�� K�9���� %� ��� !+���� ?� "�,,)$�5� ���� ��� ��� ��������- ����� �� ��� ���� � (��� . ��� <�

5����� ?�� #���� %�� 1���� %�� =��+� � !�� B����� �� ?��2��� (�� O���9� �� 6��� ?� ��� #������ %� "�444$�!��0�� ���� ���� �� ������������ ��� ������ ���0������ 0����� 0 0����� ���� ������ ���� ������������������ ������ ���� ���������� ��� ����������� � ����� �� ����� ������ ����� � �� �*� + ��� ����� ���� >,*�E'>4�

��9������ N�� 5������� N�� O���� 2�� ��9����� N� ���!9��� N� "�444$� .�������������� ���� �������� �� �� ����� � �� � ����� ��� ��������� ��������� *��� *� -���������� ��� E*,')4�

�������N�� K�9���� %�� �9������N�� !+����?�� O��N�:���� 5������� �� #� "�444$� 2������ ��� ������ � ���� ���� ��� ���� �� ��������� + ������ + ����� �������$�� ���� >44'*�

=���� P�� 3����� 1� 2� ��� :�� B� 6� "�,,>$� 5� ���� ���%��� ������� � ��� ��� ��- ������ �� %�0!�(����� ���� %��� ��������� �$��� ��� ��� ��� ��>'<�

=�9���� :�� P���� O�� 1������ !�� B���� ?�� P��������� ?���� 1 ������ K� "�,,,$� ��������� ������� �� �����0�������� ������� ��� �� ����� � ��� �� ����� ���� � ����� �� �������� �� ��� ��� ���� +�� *�-���������� ��� ��E'>4�

=� �� !� :� "�,,�$� !����� ��� ��� ���� ���� �� �� ������ � ����� ��� ���� ��� ���- �� �������������� (����� ��,� ��� ,E'�4>�

�� ������ �� ���

N�� #� 1� ��� =� ��� ?� ?� "�444$� 1.( �� ��� ��� ��������� �� & �� #� � � ,�'�4>�