Diagnosi Genetica preimpianto delle patologie mitocondriali

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  • 30/05/2016

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    Diagnosi Genetica Preimpianto

    delle Patologie Mitocondriali

    D. Zuccarello

    Daniela.zuccarello@unipd.it

    Roma, 28 maggio 2016

    Universit degli Studi - Azienda Ospedaliera Padova

    UOC di GENETICA CLINICA ED EPIDEMIOLOGICA

    La diagnosi genetica pre-impianto (PGD) la forma

    pi precoce di diagnosi pre-natale

    Consente di conoscere la costituzione genetica Consente di conoscere la costituzione genetica

    degli embrioni PRIMA del loro trasferimento in degli embrioni PRIMA del loro trasferimento in

    uteroutero

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    Opzioni riproduttive per coppie a rischio genetico

    - Roulette riproduttiva

    - Diagnosi prenatale

    e aborto terapeutico

    - Eterologa

    - Adozione

    - No figli

    - SOLUZIONE: PGD

    Diagnosi Genetica Pre-impianto:

    APPLICABILITAAPPLICABILITA

    La diagnosi pre-impianto puo essere applicata a coppie infertili portatrici di :

    Malattie monogeniche a trasmissione:

    autosomica recessiva (Fibrosi Cistica, Beta Talassemia, SMA, etc.)

    legata al cromosoma X (Sindrome X-Fragile, Distrofia Muscolare, etc..)

    autosomica dominante (CMT, Distrofia Miotonica, etc..)

    Traslocazioni cromosomiche bilanciate:

    Reciproche

    Robertsoniane

    Altre indicazioni:

    Et materna superiore a 38 anni

    Ripetuti falliti impianti / poliabortivit

    Fattore maschile grave

    PGS

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    Diagnosi Genetica Pre-impianto:

    APPLICABILITAAPPLICABILITA

    Indicazioni possibili ma controverse :

    Malattie mitocondriali (mtDNA)

    HLA matching

    Patologie a insorgenza tardiva

    Suscettibilit oncologica

    MALATTIE MITOCONDRIALI MALATTIE MITOCONDRIALI

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    ETEROPLASMIAETEROPLASMIA

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    DEFECT OF DEFECT OF mtDNAmtDNA MAINTENANCEMAINTENANCE

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    COPPIA INFERTILE CON MALATTIA GENETICA

    CICLO DI PMA CON FECONDAZIONE E SVILUPPO IN VITRO FINO AL 5 GIORNO

    PRELIEVO CELLULE TROFOBLASTO e CONGELAMENTO EMBRIONI

    ANALISI GENETICA

    COMUNICAZIONE DEI RISULTATI E TRASFERT DEGLI EMBRIONI

    CONSULENZA GENETICA, GINECOLOGICA E ANDROLOGICAP

    GD

    Ginecologia Embriologia

    Genetica

    Multidisciplinareit della PGD

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    Tecniche di PGDTecniche di PGD

    1^ Polar Body1^ Polar Body

    Cleavage Stage Embryos (day 3)Cleavage Stage Embryos (day 3)

    Blastocyst (day 5)Blastocyst (day 5)

    PCGDPCGD

    PGDPGD

    PGDPGD GOLD STANDARD

    Day3Day5

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    Day 5

    Analisi del solo trofoblasto!!

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    The mutation load determined in blastomeres accurately reflects the mutation load in the embryo

    and the mutation levels in a blastomere reliably predict the mutant load of the future child

    9 pz at day-3

    - Malattie a insorgenza tardiva: bambino sano alla nascita

    - Biopsia a day-3: diminuzione potenziale impianto

    - Livello safe di eteroplasia: 5% ?

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    Nuclear genome transfer

    To avoid any possible confusion with the process of cloning, it is important to stress

    that all products of meiosis (pronuclei and polar bodies) are genetically unique.

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    Nuclear genome transfer

    Nuclear genome transfer

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    28 Centri Italiani PGD

    NomeCentro Citt Regione Tipo di centro

    HERA - U.M.R. CT Sicilia Convenzionato

    Futura Diagnostica Medica FI Toscana Convenzionato

    CENTRO DEMETRA FI Toscana Convenzionato

    Centro Florence FI Toscana Convenzionato

    HUMANITAS MI Lombardia Convenzionato

    Ospedale San Raffaele MI Lombardia Convenzionato

    Casa di Cura Citt di Udine UD Friuli VG Convenzionato

    Centro Andros PA Sicilia Privato

    9.baby FAMILY AND FERTILITY CENTER BO Emilia Romagna Privato

    Alma Res RM Lazio Privato

    ALTAMEDICA (ex artemisia) RM Lazio Privato

    ARC STER di mestre VE Veneto Privato

    C. M. R. TO Piemonte Privato

    Centro di Biologia della Riproduzione PA Sicilia Privato

    Centro HERA NA Campania Privato

    EUBIOS BZ Trentino Privato

    European Hospital RM Lazio Privato

    GATJC FERTILITY CENTER - Gioia Tauro RC Calabria Privato

    GENERA Marostica VI Veneto Privato

    GENERA Napoli NA Campania Privato

    GENERA Roma RM Lazio Privato

    GENERA Umbertide PG Umbria Privato

    LIVET TO Piemonte Privato

    MOMO' fertiLIFE BT Puglia Privato

    Poliambulatorio Privato GYNEPRO BO Emilia Romagna Privato

    SISMER BO Emilia Romagna Privato

    Fondazione Ca' Granda Ospedale Maggiore Policlinico MI Lombardia Pubblico

    Microcitemico di Cagliari CA Sardegna Pubblico

    Centro Pubblico (2)

    Centro Privato (19)

    Centro Convenzionato (7)

    28 Centri Italiani PGD

    Status Centri

    Convegno "Pre-implantation Genetic Diagnosis (PGD) e Non Invasive Prenatal Testing (NIPT): Nuove frontiere in diagnosi prenatale"

    Fonte: anno 2015

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    PGD-A >150 cicli/Y (3)

    PGD-A 30 cicli/Y (6)

    PGD

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    In sede (9)

    Service (12)

    Non dichiarato (4)

    Laboratorio in sede o service

    [3 in sede PGS/in service PGD]

    Convegno "Pre-implantation Genetic Diagnosis (PGD) e Non Invasive Prenatal Testing (NIPT): Nuove frontiere in diagnosi prenatale"

    Fonte: dati forniti dai Centri (24/28) relativi a PGS/PGD anno 2015

    CGH-array (PGS)

    [8 di cui 4 in sede]

    qPCR (PGD/PGS)

    [9 di cui 2 in sede]

    NGS (PGD/PGS)

    [8 di cui 3 in sede]

    Tecnologie utilizzate

    *Pi di una tecnica utilizzata per centro

    Convegno "Pre-implantation Genetic Diagnosis (PGD) e Non Invasive Prenatal Testing (NIPT): Nuove frontiere in diagnosi prenatale"

    SNP-array (trasl)

    [9 di cui 1 in sede]

    Karyomapping (PGD/PGS)

    [1 altro in attivazione]

    Sanger-STR (PGD)

    [2 di cui 1 in sede]

    Non dichiarato

    Fonte: dati forniti dai Centri (24/28) relativi a PGS/PGD anno 2015

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    Tavolo di Lavoro congiunto

    per la stesura delle Linee Guida Italiane

    per la Diagnosi Genetica Preimpianto

    Societ scientifche:

    SIGU

    SIFES

    CECOS

    SIERR

    SIOS

    SIAMS

    SIDR

    Avv. G. Baldini (sentenze Legge 40/2004)

    Responsabile Registro Nazionale PMA (e PGD) dell'ISS

    Legge 40/2004 e successive modifiche

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    Fecondazione

    SI - coppie eterosessuali sposate o conviventi in et fertile, infertili

    NO - omosessuali, sigle, coniuge post mortem,

    coppie oltre i limiti di fertilit, fertili

    NO - fecondazione eterologa

    TUTELA DEI DIRITTI DELLEMBRIONE

    Solo 3 ovociti fecondabili

    Obbligo di impianto (revoca fino alla fecondazione)

    Impossibilit di esecuzione diagnosi pre-impianto

    Divieto di crioconservazione embrioni (no dei gameti)

    Divieto di ricerca scientifica (sperimentale) sugli embrioni

    Legge 40/2004

    Sentenze di riferimento sulla Legge 40/2004

    - Tribunale di Cagliari Ordinanza del 09/11/2012

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    Sentenze su legge 40/2004

    Tribunale di Milano, Tribunale di Firenze, Tar del Lazio:

    Possibile effettuare la diagnosi pre-impianto in caso di malattie genetiche (Talassemia)

    Sentenza della Corte Costituzionale del 01/04/2009:

    - Illegittimo comma 2 art. 14

    - Incostituzionale comma 3 art.14

    - Possibile inseminare pi ovociti e produrre un numero di embrioni superiori a 3

    - Possibile trasferire pi di 3 embrioni, anche in impianti successivi, e dunque congelare gli embrioni

    - Possibile effettuare la diagnosi pre-impianto sullembrione e congelare gli embrioni patologici da non trasferire

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    Mai perdere di vista lobiettivo

    Grazie!