Dexact-f snabb striptest”pusselbit”

Grund teorin och de senaste forskningsresultat

Diarré har många orsaker men bara en liten del av dessa skall isoleras (rödmarkerad oval). Även övriga isoleras idag.

Diarré

akut< 2 veckor(akutmottagning, vårdcentral)

kronisk > 2 veckor (vårdcentral)

InfektionVirusBakteriToxinParasit

Tarm fokus Andra sjukdomar

Ulceros kolitIschemiPerforationSepsisSIRS

PneumonikolecystitinfektionshärdUrinvägsinfektion.leversjukdomÖkad tarm motilitetBi-effekt medicinAllergi

Tarm fokus Andra sjukdomar

InfektionVirusToxinsParasit(Protozoa)

MedicinAbscessBrist sjukdomarHyperthyroscirros

ulceroskolitCrohnDivertikulitColon CancerGluten allergiMjölk allergi

pH<8.0 pH>8.0

pH <7.0

pH<8.0

pH <7.0

pH <7.0

pH<5.0

Dexact-f backgrund forskning

Hepatocyte growth factor (HGF)

•Vid akut inflammation och infektion produceras HGF med hög affinitet till komponenter av extracellular miljö (färgomslag)•Vid kroniska inflammationer produceras HGF som inte binder sig till extracellular rummet och är biologiskt inaktiv. Ref:

– High hepatocyte growth factor levels in faeces during acute infectious gastroenteritis; Scand J Infect Dis 35:858-862, 2003. – Hepatocyte growth factor (HGF) in fecal samples: rapid detection by surface plasmon resonance; BMC gastroenterology 2005

The impact of determination of faeces- pH

•”Förändringar I feces pH är kopplad till tarm translokation, bakteriemi, (sepsis, SIRS) och hög mortalitet.

•”Bestämning av feces pH kan användas som markör av tarminflammation och kliniskt status.

Ref:– Prognosis impact of fecal pH in critically ill patients; Critical care. 2012– Altered gut flora and environment in patients with severe SIRS; J Trauma. 2006

Kåre 061215

Fallbeskrivning: 48 årig kvinna med ulceros kolit som var inlagd pga blodiga diarre. Det växte klostridium deficile I fecesodling och pos toxin. Behandling med Metronidazol hade ingen effekt. Koloskopi och vävnadsprov visade två helt separata delar I tarmen, en med akut inflammation över 25 cm från anus och en med kronisk inflammation distalt.

Chronic inflammation

infection

HGF expression25 cm

• Dexact-f positive

HGF presence in faces verified even by• Western blot• Surface plasmon resonance method• ELISA

HGF

Patient i fallbeskrivning kontroll av HGF och Calprotectin i samma vävnadsprov

HGF

conc

entr

atio

n (n

g/m

l)hea

lthy

C.difficil

eIBD

colon ca

ncer

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0***

*****

*

dext

ran

bin

ding

(RU

)hea

lthy

C.difficil

eIB

D

colon ca

ncer

0

20

40

60

80

100 ***

**

****

***

MN

bin

ding

(RU

)

health

y

C.difficil

eIBD

colon ca

ncer

0

50

100

150

200

250

SPR

sig

nal (

RU

)

dextra

n MN

-10

0

10

20

30 ** **

A

DB

C

Figure . Ligand binding affintity and concentration of HGF in feces and serum. The binding affinity to dextran and monoclonal anti-HGF ab (MN) was analysed by surface plasmon resonance (SPR), in feces samples of patients with infectious gastroenteritis patients caused by Clostridium difficile, IBD and colon cancer (A and B), and in serum of patients with IBD (black column) (C), and healthy controls (white column). The feces concentration (ng/ml) of HGF was measured by ELISA (D). For statistical analysis Kruskal-Wallis and Mann-Whitney U-test was used and the medians are presented. ****P<0.0001, ***P<0.001, **P<0.01, *P<0.05

Grund teorin

Both alfa and beta chain of HGF are involved in interaction of HGF and DS

snabb analys – vård i rätt tid

Bortsett från akut infektiös gastroenterit, är diarré ett symptom på flera andra allvarliga systemiska infektioner, samt inflammatoriska sjukdomar som kan kräva omedelbara åtgärder.

Eftersom terapeutiska strategier skiljer sig avsevärt mellan olika sjukdomar är det av stort värde att fastställa korrekt diagnos snabbt.

Hepatocyte growth factor (HGF)

• Vid skada i tarmen en tillväxtfaktor (HGF) som är viktig för läkningen

• Infektion skadar tarmen och Dexact-f detekterar alla former av infektioner i tarmen (virus, bakterier och parasiter)

• Kronisk inflammation – HGF binder ej in till stickan

Funktion - Dexact-f

pH

• Normalt f-pH = 5-6

• Alkaliskt pH - tarminflammation

• f-pH 9-11 kan tyda på allvarlig kolit, SIRS och sepsis eller organsvikt

• Lågt f-pH – malabsorbtion eller vissa bakterieinfektioner

• pH-värdet kan avspegla graden av inflammation i tarmen och förutsäga prognosen vid allvarliga tillstånd

• Både positiva och negativa färgresultat har betydelse vid tolkningen av patientens symtom

• Testremsan är ett semikvantitativt påvisande av HGF i feces samt pH-värdet

Test result

Infectious diarrheaTotal subgroups

Non-infectious diarrheaTotal subgroups

Total

Verified Infectious Highly suspected infectious

Other causes  

healthy IBD

bacteria

virus parasites

Dexact-f +

124 30 4 33 191 12 0 1 13 204

Dexact-f −

9 6 0 1 16 123 27 36 186 202

Total 133 36 4 34 207 135 27 37 199 406ValideringSensitivity: 92,3 % (de som rätt identifieras med inf.)

Specificity: 93,5 % (de som korrekt identiferas ej ha inf.)

Pos. Predicitive value: 93,6 %Neg. Predictive value: 92,1 % (hur man kan lita på neg res. ej inf. - ej isoleras i onödan)

Accuracy: 92,9 %

Dexact-f har validerats på 536 patienter, totalt 1500 inklusive version 1.0. Utfördes blint innan odling/PCR svaren blivit färdiga (i tabell –enbart verifierade test med konventionella metoder inkluderade)

Dexact-f clinical use in establishment of diagnosis prior to reference test methods

Case report 3• 75 years old woma with poly neuropathia and parkinsonism• Admitted March 2012 for diarrhea in 2 weeks. • Dexact-f 28th March neg, low pH < 5.0• Negative faeces cultures and high faeces Calprotectin.• Coloscopy 18th April shows diverikulosis• Biopsies reveal microscopic colitis June 2012• Diarrhea continues

Case report 1• 75 years old man with microscopic colitis.• Whipple tumour operation 2009• Recurrent diarrhea and stomach pain• Septicamia in May 2012• Admitted for diarhhea, fever, shivering.• CT scan stomach and echocardiography ok• Dexakt-f high pos at admittance with very high pH

resembling generalised inflammatory response, SIRS, Sepsis.

• Neg F-Calprotectin, Neg FHb, Neg faeces cultures• Blood cultures yielded growth of E Coli, Klebsiella, Enterococcus

faecalis and Enterobacter • Presence of 4 different bacteria in blood indicates penetration of

bacterial flora from bowel to circulation in spite of normal CT scan.

Case report 2

• 60 years old woman• Levaxin-subs hypothyroid• Heredidity for heart diseases• Back pain, deodonal ulcer since several years ago.• CT scan ok• Admitted 28 th March for diarrhea in 3 weeks, painfull tenesmus• Rectoscopy shows severe infalmmation and ulcers. • Dexact-f negative 2nd April• Feces cultures negative• Coloscopy and biopsy verifies ulcerous proctocolitis 16 June

Case report 4• Healthy 43 years old man• Dirrhea 20 times/day, fever, pain in stomach since 2 days.• CRP 188, PKINR spontaneously 1.6• Normal liver enzyme tests• Received one dose cefotaxim iv at emergency Department• Dexact-f pos pH 7.0-8.0 at admittnce 26th June• Antibiotic theray disrupted, iv rehydration.• CRP decreases spontanously and PKINR normalised• Faeces cultures 30th June reveals Campylobacter jejuni.

neg. Dexact-f – Debute of chronic inflammatory bowel disease

neg. Dexact-f, low faeces pH – Debute chronic inflammatory bowel disease

pos. Dexact-f, high faeces pH – bacterial infection

pos. Dexact-f, High f- pH – 4 bacterail stams in blood, - Susp SIRS

VC/akutklin handläggningPatientflöde utan Dexact-f strip

Diarré Utredning isolering

Labtest1-3 dagar

I bästa fall hemma efter 3-4 dagar

Idag på Universitetssjukhus om metoden är uppsatt- Faeces odling 1 – 3 d- Cyst och mask ägg < 1d- PCR (Viral/Bacterial) 1 – 2 d- Faeces Hb < 1 d- Calprotectin (Inflammation) 1 d- LAMP (Clostridium Rapid Test) 1 d- Clostridium Toxin Test 1 d

Läkare kan i många fall bedöma vård i hemmet samma dag

Diarré

Testtiden = 1 minut

Läka

re be

dömer

utre

dning

Patientflöde med Dexact-f stripVC/akutklin handläggning

Test combination

N/female IBD Colon Cancer

IBS Lactose intolerance/celiaki

Colitis Resolved symptom

High Calprotectin / neg Dexact-f

24/17 10 3 8 0/1 0 2

High Calprotectin / pos Dexact-f

4/3 1 0 0 0 3 0

Low Calprotectin / neg Dexact-f

51/27 0 1 16 2/3 0 29

Low Calprotectin / pos Dexact-f

6/5 0 0 0 0 0 6

total 85 11 4 24 6 3 37

Fecesprov samlades may 2011 från patienter som sökte till vårdcentral pga tarmbesvär. Sedan följdes patienterna och i august 2012 registerades diagnoser. Som visat kombination av pos Calprotectin och negativ HGF kunde förutsäga en seriös tarm sjukdom I tidigt skede (14/19; IBD = 11, Colon cancer = 4 and Celiaki = 4).

Dexact-f och feces calprotectin tillsammans kunde forutsäga svåra tarmsjukdomar

pH och mortalitet – resultat Dexact-f

Jämför med Ref: Prognosis impact of fecal pH in critically ill patients; Critical care. 2012 ”Once normal flora is altered, decreases the number of beneficial bacteria. This causes fecal pH to increase, which could

then allow harmful bacteria to proliferate because of the alkaline environment. Harmful bacteria may then produce lactic and succinic acids, which lower the fecal pH and injure the intestinal epithelium. Finally, the injured intestine does not absorb lactose, which causes the fecal pH to be severely acidic.”

Fördelar/brister med Dexact-f• Snabbt test – svar direkt

• Välkänd metodform – enkel att använda

• Stabil i rumstemperatur

• Minskar antibiotikaförskrivning

• Diskriminerar mellan fall som behöver isoleras eller inte

Torra feacesprov, mycket högt eller lågt pH samt mycket låg koncentration av HGF kan påverka resultatet. - Anledningen är att fecesprov har många olika alternativ i konsistens, färg och innehåll. Mängden

av HGF skiljer sig mycket i olika prov. Feces-pH skiljer sig mycket i olika prov.

Det finns idag ingen annan test som kan svara på samma frågor som Dexact-f och därför finns ingen golden standard.  

Pat till vårdcentraltidigare friskdiarré, stabil

Om Dexact-f är positiv

Om Dexact-f är negativ

Odling utförs på personer som arbetar med livsmedel om smittskyddet betalar

telefontid

1 5 st fallbeskrivningar

Pat till vårdcentral känd med tidigare sjukdomar

diarre, stabil, feberfri

återbesök

Känd antibiotika diarré

2

Bieffekt medicin

Om Dexact-f är positiv

Om Dexact-f är negativ

Vårdcentral känd med tidigare sjukdomar

diarre, stabil, FEBER

3

Känd antibiotika diarréOm Dexact-f är positiv

Om Dexact-f är negativ

Pat till akutmottagningTidigare frisk, diarré, feber

ont i magen

4

Om Dexact-f är positiv

Om Dexact-f är negativ

Pat till akutmottagningKänd med tidigare sjukdomar, diarré, feber, ont i

magen

empirisk

Intravenös antibiotika

5

Om Dexact-f är positiv

Om Dexact-f är negativ

Linköping • SwedenWWW.PEASINSTITUT.SE

Söderleden 1. 587 23 Linköping. Tel: +4613-15 40 30