Focused Support for Scientists

Working for a Cancer-Free World

発光ルシフェラーゼ検出テクノロジー

がん免疫研究に最適 !…細胞毒性・傷害性試験への新しいアプローチ… ………（2）

細胞死からの回避 vs制御…細胞死メカニズムの解析…………………………………（4）

がん細胞・免疫細胞の代謝変化を追え !…

細胞内代謝変化をプレートリーダーで測定………………（6）

タンパク質安定化および転写活性を定量化…

がんと低酸素応答…………………………………………（8）

タンパク質ケミカルノックダウン…

標的タンパク質を分解… ………………………………（10）

シグナルの変調①…GPCRによるシグナルの異常…………………………（12）

シグナルの変調②…キナーゼの無秩序なシグナル…………………………（14）

エピジェネティック制御の変調…

最新エピジェネティクス研究ツール……………………（16）

核酸精製&増幅テクノロジーバイオマーカー探索…分子マーカー探索………………………………………（20）

遺伝子検査・コンパニオン診断…

ゲノム不安定性と核酸精製… …………………………（22）

その細胞株、大丈夫ですか?…

細胞認証試験……………………………………………（24）

プロメガ テクノロジー による 最新 がん研究実験法

2019 ノーベル賞 関連

ノーベル賞 関連分野

2019年 ノーベル生理学・医学賞

細胞の低酸素応答 !8ページ　低酸素応答研究ツールもご覧ください。

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従来法の問題点

通常の細胞増殖試験： 中心部への試薬到達が困難 （MTT、レサズリン、 ルシフェラーゼ［ATP 測定］など）

3 次元培養細胞の内部状態

増殖

増殖休止

ネクローシス顕微鏡観察： 生細胞数の測定不能 （中心部の死細胞）

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スフェロイドを用いた 各細胞生存試験の 感度の違い

約 1 hr静置

試薬添加 発光測定

1219

3MA

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1,000

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CellTiter-Glo® 3D alamarBlue® MTT

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細胞生存性試験

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CellTiter-Glo® 2.0 AssayG9242 100 mL 60,000 48,000G9243 500 mL 230,000 184,000

CellTiter-Glo® 3D Cell Viability Assay （3D培養用）

G9682 10 x 10 mL 75,000 60,000G9683 100 mL 63,000 50,400

アポトーシスアッセイ

製品名 カタログ 番号 サイズ 通常価格

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Caspase-Glo® 3/7 Assay

G8091 10 mL 77,000 61,600G8092 100 mL 376,000 300,800G8093 10 x 10 mL 490,000 392,000

1,000

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100

10

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Number of Cells

Caspase-Glo® 3/7Fluorescent Substrate

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Ratio

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蛍光法と Caspase-Glo®の感度とダイナミックレンジの比較蛍光法とCaspase-Glo®の感度とダイナミックレンジの比較

“ 最新がん研究実験法ガイド ”

発刊記念！！

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2. Culture 2–3 days 3. Treat 4. Dual-Luciferase ® Assay

レポーターベクター

トランスフェクション試薬

アッセイ試薬レポーターアッセイの定番 Dual-Luciferase® Assay。長時間発光（グロータイプ）の Dual-Glo® は多検体アッセイに最適です。

pGL4 ベクターに応答配列が導入されたホタルルシフェラーゼ レポーターベクターで安定発現株作成のためのハイグロマイシン耐性遺伝子を含みます。

非リポソームタイプのトランスフェクション試薬で、細胞毒性は低く抑えられています。血清や培地を除く必要はなく、試薬 /DNA複合体を添加した後に洗浄や培地交換は不要です。

デュアルレポーターアッセイ（ホタル & ウミシイタケ）

製品名 カタログ 番号 サイズ 通常価格

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Dual-Luciferase® Reporter Assay System

E1980 1,000 回分 236,000 188,800E1960 10 X 100 回分 255,000 204,000

Dual-Glo® Luciferase Assay System E2940 100 mL 300,000 240,000

応答配列導入 レポーターべクター（ホタル）シグナル経路 / 活性化因子 転写因子 製品名 カタログ

番号

　　　cAMP/PKA CREBpGL4.29 [luc2P/CRE/Hygro] Vector

E8471

　　　カルシウム / 　　　カルシニューリン NFAT

pGL4.30 [luc2P/NFAT-RE/Hygro] Vector

E8481

　　　NF- κB NF- κBpGL4.32 [luc2P/NF-κB-RE/Hygro] Vector

E8491

MAP/ERK Elk-1/SRF pGL4.33 [luc2P/SRE/Hygro] Vector E1340

RhoA SRFpGL4.34 [luc2P/SRF-RE/Hygro] Vector

E1350

多様（ GAL4-DNA 結合ドメインによる結合と活性化を要する )

ーpGL4.35 [luc2P/9XGal4 UAS/Hygro] Vector

E1370

アンドロゲン受容体、 グルココルチコイド 受容体を含む いくつかの核内受容体

ーpGL4.36 [luc2P/MMTV/Hygro] Vector

E1360

酸化ストレス Nrf2pGL4.37 [luc2P/ARE/Hygro] Vector

E3641

DNA 損傷 p53pGL4.38 [luc2P/p53 RE/Hygro] Vector

E3651

小胞体ストレス ATF6pGL4.39 [luc2P/ATF6 RE/Hygro] Vector

E3661

シグナル経路 / 活性化因子 転写因子 製品名 カタログ

番号

重金属ストレス MTF1 pGL4.40 [luc2P/MRE/Hygro] Vector E4131

熱ショック HSF1 pGL4.41 [luc2P/HSE/Hygro] Vector E3751

低酸素 Hif1 α pGL4.42 [luc2P/HRE/Hygro] Vector E4001

生体異物ストレス AhR pGL4.43 [luc2P/XRE/Hygro] Vector E4121

MAPK/JNK AP1pGL4.44 [luc2P/AP1 RE/Hygro] Vector

E4111

INF- α STAT1:STAT2 pGL4.45 [luc2P/ISRE/Hygro] Vector E4141

IL-6 STAT3:STAT3 pGL4.47 [luc2P/SIE/Hygro] Vector E4041

TGF- β SMAD3:SMAD4 pGL4.48 [luc2P/SBE/Hygro] Vector E3671

Wnt LEF-TCFpGL4.49 [luc2P/TCF-LEF RE/Hygro] Vector

E4611

IL-3 STAT5:STAT5pGL4.52 [luc2P/STAT5 RE/Hygro] Vector

E4651

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各ベクター容量：20 µgキャンペーン価格：¥43,800　　　　　　　　 （定価 ¥73,000）

トランスフェクション試薬製品名 カタログ番号 サイズ 通常価格（￥） 特別価格（￥）

FuGENE® HD Transfection Reagent

E2311 1 mL 65,000 52,000E2312 5 X 1 mL 255,000 204,000

FuGENE® 6 Transfection Reagent

E2691 1 mL 65,000 52,000E2692 5 X 1 mL 255,000 204,000

ViaFect™ Transfection Reagent E4982 2 x 0.75 mL 98,000

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ホタルルシフェラーゼレポーター： 細胞内シグナル解析やバイオセンサー開発などにも！レポー

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簡便、高感度な発光 in Vitro アッセイと高品質なキナーゼ酵素 なのでご自身の研究室でちょいスクリーニング & プロファイリングも可能です！

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Kinase Enzyme System　各種 10 µg 86,000 51,600内容：キナーゼ 10 µg、基質、反応バッファー※ ヘテロ三量体の AMPKのみ通常価格は￥159,000（特別価格 ￥95,400）

キナーゼ + アッセイ試薬

製品名 サイズ 通常価格 （￥）

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ADP-Glo™ + Kinase Enzyme System各種 1セット 176,000 88,000

内容：ADP-Glo™ Kinase Assay 1,000ウェル分（384プレート）、 キナーゼ 10 µg、基質、反応バッファー※ ヘテロ三量体の AMPKのみ通常価格は￥250,000（特別価格 ￥125,000）

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Lipid KinasePhosphatidylinositol (lipid)

Log10[PI3K p120γ], ng

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Tyrosine KinasePoly Glu4-Tyr1(peptide)

Log10[EGFR], ng

RLU

EC50=7.7ng

9171M

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ADP-Glo™ System の測定原理

ADP-Glo™ Kinase Assay はキナーゼ反応より産生される ADP を ATP に変換し、これをルシフェラーゼ反応で生じる発光として定量します。発光法を採用しているので、ADPへの変換効率が低い酵素や少量サンプルでも高感度に測定することができます。

様々なキナーゼ活性を検出できるユニバーサルな ADP-Glo™

各キナーゼ酵素ごとに ADP-Glo™ アッセイ用プロトコール & データシートを用意

＊同じキナーゼまたはキナーゼアッセイ試薬セットのご注文は 1個限りとさせていただきます。

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本　　　社　〒103-0011

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橋大伝馬町14-15 マツモト

ビル

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www.promega.jp

詳細についてはpromega.jp/kinase2 をご覧ください

ABL1

CDK5/p35

EGFR (d746-750 T790M) GOPC-ROS1

MET (K1244R)PKC ζ

TEC

ABL1 (E255K)CDK6/CyclinD3

EGFR (d746-750 T790

M C797S)

GRK5

MET (M1250T) PKC η (eta)

TGF βR1

ABL1 (F317I)CDK7/CyclinH1/MNAT1

EGFR (d746-750 T790M

C797S L858R) GSK3 α

MET (P991S)PKC θ

TGF βR2

ABL1 (F317L)CDK9/CyclinK

EGFR (d746-750 T790M) GSK3 β

MET (Y1230C)PKC ι

TIE2

ABL1 (H396P)CHK1

EGFR (d746-750)Haspin

MET (Y1230H)PKC μ (mu)

TIE2 (R849W)

ABL1 (Q252H)CHK2

EGFR (D770-N771

insNPG)

HCK

MINK1

PKC ν (nu)

TIE2 (R915C)

ABL1 (T315I)CK1α1

EGFR (G719C)HER2

MLCK

PKD2

TIE2 (Y897H R915C)

ABL1 (V299L)CK1α1L

EGFR (L858R)

HER2 (A775_

G776insYVMA)MLK1

PLK1

TIE2 (Y897S)

ABL1 (Y253F)CK1 γ 1

EGFR (L861Q)HER2 (G776VC)

MLK2

PLK2

TMP3-ROS1

ABL2

CK1 δ

EGFR (T790M)

HER2 (P780

Y781insGSP)

MLK4

PLK3

TNIK

ACK

CK1 ε

EGFR (T790M C797S) HER2 (V777L)

MRCK α

PLK4

TNK1

AKT1

CK1 ε (R178C)

EGFR (T790M C797S

L858R)

HER4

MRCK β

PRKG1

TOPK

AKT2

CK2α1

EGFR (T790M D770

_N771insNPG )

HGK

MSK1

PRKX

TPR-TRKA (TRK-T1)

AKT3

CK2α2

EGFR (T790M L858R)HIPK1

MSK2 ※mousePTC1 (CCDC6-RET)

TRKA

ALK (L1196M)c-KIT

EIF2AK1 (HRI)HIPK3

MSSK1

PTC3 (NCOA4-RET)TRKA (A608D)

ALK2

c-KIT (d557-558)EIF2AK2

HPK1

MST1

PYK2

TRKA (F589L)

ALK4

c-KIT (D816E)EIF2AK4

IGF1R

MYLK2

QIK

TRKA (G595R A608D)

ALK6

c-KIT (D820E)EML4-ALK

IKK α

MYO3 β

RET

TRKA (G595R)

AMPK (A1/B1/G1) c-KIT (N822K)

EPHA1

IKK β

NEK1

RET (A883F)TRKA (G667C)

AMPK (A1/B1/G2)c-KIT (T670E)

EPHA2

IKK ε

NEK2

RET (M918T)TRKA (L657M)

AMPK (A1/B1/G3)c-KIT (V559D)

EPHA3

InsR

NEK3

RET (R749T)TRKB

AMPK (A1/B2/G1)c-KIT (V559D V654A)

EPHA4

InsR (R1201Q)NEK5

RET (R813Q)TRKC

AMPK (A1/B2/G2)c-KIT (V560G)

EPHA6

IRAK1

NEK7

RET (R912P)TRKC (G623R)

AMPK (A2/B1/G1)c-KIT (V560G D816V)

EPHA7

IRAK4

NEK9

RET (S904A)TSSK1B

AMPK (A2/B1/G2)c-KIT (Y823D)

EPHB1

ITK

NIK

RET (S904F)TSSK2

AMPK (A2/B2/G1)CLK1

EPHB4

JAK1

NIM1

RET (V778I)TXK

AMPK (A2/B2/G2)CLK2

ERK1

JAK1 (R724H)NUAK1

RET (V804L)TYRO3

ASK1

CLK3

ERK2

JAK3

NUAK2

RET (Y791F)ULK1

Aurora ACLK4

ERN1 (IRE1)JNK1 ※mouse

p38 α

RIPK1 (1-327)ULK2

Aurora Bc-MER

ERN2 (IRE2)JNK2

p38 β

RIPK2

ULK3

Aurora CCSK

FAK

JNK3

p38 γ

ROCK1

VRK2

AXL1

DAPK1

FER

KDR

p38 δ

ROCK2

WNK1

BCR-RETDAPK2

FES

KHS1

p70S6K

RON

YES1

BLK

DAPK3

FGFR1

KSR1 (L639F)p70S6Kb

ROS1

YES1 (T348I)

BMPR2

DCAMKL1

FGFR1 (V561M)LCK

PAK1

ROS1 (G2032R)YSK4

BMX

DDR2

FGFR1OP-FGFR1LIMK1

PAK1/CDC42RSK1

ZAK

BRK

DGKA

FGFR2

LRRK2

PAK3

RSK2

ZAP70

BRSK1

DGKB

FGFR2 (N549H)LTK

PAK4

RSK2 (L608F)

BRSK2

DGKE

FGFR2 (R612T)LYN A

PAK6

RSK3

BTK

DGKQ

FGFR2 (V564F)LYN B

PAK7

RSK4

BTK (C481S)DGKZ

FGFR3

MAPKAPK2PASK

SBK1

CAMK1 γDNA-PK

FGFR3 (G697C)MAPKAPK3

PDGFR αSGK1

CAMK2 αDRAK1 (STK17A)

FGFR3 (K650E)MAPKAPK5

PDGFR α (D842V)SGK2

CAMK2 βDRAK2

FGFR3 (K650Q)MARK1

PDGFR α (T674 I)SIK

CAMK2 γDYRK1A

FGFR4

MARK2

PDGFR βSIK3

CAMK2 δDYRK1B

FGR

MARK3

PDK1

SLK

CAMK4

DYRK2

FIP1L1-PDGFR αMARK4

PHKG1

SPHK2

CAMKK1DYRK3

FLT1

MASTL

PIM1

SRC

CDC7/DBF4EGFR

FLT3

MEK1

PIM2

SRPK1

CDK1/Cyclin A1EGFR (A763_

Y764insFHEA)

FLT3 (D835Y)MEK4

PKA

SRPK2

CDK1/Cyclin A2EGFR (C775S T790M

L858R)

FLT3 (ITD-NPOS)MEK5

PKAC β

STK3

CDK2/Cyclin A1EGFR (C797S)

FLT3 (N676K)MEKK3

PKC α

STK33

CDK2/Cyclin A2EGFR (C797S L858R)

FMS

MELK

PKC β I

SYK

CDK2/Cyclin E1EGFR (d746)

FRK

MET

PKC β IITAK1-TAB1

CDK2/Cyclin E2EGFR (d746-750)

FYN A

MET (D1228H)PKC γ

TAOK1

CDK3/Cyclin E1EGFR (d746-750 C797S) GCK

MET (D1228N)PKC δ

TAOK2

CDK5/p25

EGFR (d746-750 T790M

C797S L858R) GLK

MET (F1200I)PKC ε

TBK1

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NlucNlucNluc

NanoBRET™ tracer CompoundBRET

TargetTargTar et

Nluc

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Nluc

Equilibrium Binding Non-Equilibrium Competition

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PK1911-04B

販売店

　　　　NanoBRET™ Target Engagement Intracellular Kinase Assay

プロメガ株式会社本　　　社　〒103-0011東京都中央区日本橋大伝馬町14-15 マツモトビルTel. 03-3669-7981／Fax. 03-3669-7982

大阪事務所　〒532-0011大阪市淀川区西中島6-8-8 花原第8ビル704号室Tel. 06-6390-7051／Fax. 06-6390-7052※製品の仕様、価格については2019年11月現在のものであり予告なしに変更することがあります。

細胞内で発現させた高輝度発光酵素 NanoLuc®と融合した標的キナーゼと蛍光標識されたNanoBRET ™ トレーサーにより生じる BRETへのテスト化合物の影響を調べることにより、セルフリー系に比べ真のキナーゼ：化合物結合性を調べることができます。

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ベクターについては、以下のフォームより納期 および特価についての見積りをご請求ください。

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キナーゼ創薬：細胞ベース NanoBRET™ だから実現した 真の化合物 タンパク質結合性試験化合物

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結合性測定

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キナーゼへの真の化合物結合性を明らかにする生細胞内での親和性および滞留時間の決定

NanoBRET™ TE ABL1 キナーゼアッセイと慢性骨髄性白血病（CML）を標的とした薬剤を使用した。第一世代 CML 薬イマチニブは ABL1に対して第二世代薬（ダサチニブ）や第三世代薬（ポナチニブ）よりも弱い結合性と短い滞留時間を示した。ポナチニブはダサチニブと比べて同程度の親和性を有していたが、非常に長い滞留時間を示した。